Introducere

Biotehnologia este o tiin nou bazat pe biologie al crei scop este utilizarea n
tehnic a microorganismelor sau a produselor derivate de la acestea, a culturilor de celule
vegetale i animale pentru producerea de substane utile n agricultur i n industria
alimentar, farmaceutic etc. n folosul activitii umane. (G. Jinescu, D.I. Nistor, 1990)
Principalul scop al biotehnologiei este obinerea de produse sau servicii utile activitii
umane, cu ajutorul organismelor vii.
Procesul de baz din tehnologia de biosintez este "procesul biologic", el aparine,
totui, domeniului ingineriei biochimice, care se ocup de studiul proceselor de fermentaie
aerob i anaerob, al reaciilor enzimatice , precum i procese specifice industriei
fermentative, cum ar fi: sterilizarea, pasteurizarea, liofolizarea, uscarea prin atomizare,
izolarea i purificarea produselor extrase din mediile biologice.
Biotehnologia este o tiin complex, ce se caracterizeaz prin utilizarea integrat a
biochimiei, microbiologiei, biologiei celulare i a ingineriei genetice. ( www.wikipedia.org)

Biotehnologia- tiin complex

 Spaiul n care se desfoar o reacie sau un proces chimic se numete "reactor
chimic". n mod asemntor, spaiul n care se desfoar un proces biologic se nume te
bioreactor.
Bioreactorul este instalaia n care transformarea materiilor prime este realizat de
sistemul enzimatic al microorganismelor vii, al celulelor animale i vegetale sau de enzimele
izolate din acestea. Reuita experimentului biotehnologic depinde n cea mai mare msur de
condiiile optime de cretere a microorganismelor create n bioreactor. Celulele se lupta
continuu cu modificrile din mediul nconjurtor, astfel nct s ob in i s- i men in
condiiile optime de cretere. ntr-un bioreactor, aceast tendin a celulelor este asistat, este
controlat n mod continuu. El trebuie s asigure aprovizionarea continuu a celulelor cu
mijloacele necesare creterii sau producerii de metabolii, asigurnd pe ct este posibil
valorile optime de pH, temperatur, concentraia substratului, concentra iile n srurile
minerale, factorii de cretere i pentru concentraia n oxigen.
n legtur cu reactorul n care trebuie s aib loc procesul biologic sau biochimic,
apar urmtoarele probleme importante:
care este cel mai bun bioreactor pentru o transformare biochimic dat;
cum se calculeaz mrimea i volumul interior util, alte elemente constructive al
bioreactorului;
care sunt condiiile optime de operare, astefel nct bioreactorul c realizeze
performanele dorite. (. Jurcoane i colab., 2009)
 1. Capitolul I

1.1. Bioreactoare

Bioreactorul este un aparat complex, format prin nsumarea unor elemente mai simple.
El este prevzut , n general, cu sisteme de agitare, cu sisteme de nclzire-rcire, conduct de
alimentare cu aer steril i barbotor ( n cazul proceselor aerobe), sprgtor de spum (n cazul
proceselor aerobe).

Schema unui bioreactor

Bioreactorul, sau fermentatorul este locul unde se desfoar procesele biochimice, de

biosintez sau de biotransformare a unui substrat cu ajutorul microorganismelor, celulelor sau
enzimelor, n produse utile ( substane medicamentoase, proteine, enzime, etc.). n interiorul
bioreactorului au loc mai multe procese complexe cum ar fi: creterea celulelor,
biotransformarea substratului, producerea metabolitului de interes. Aceste procese trebuie
riguros controlate ( meninerea cu strictee a temperaturii, presiunii, concentraiei de oxigen,
intensitii agitrii,etc.). (. Jurcoane, 2009)

1.2. Clasificare

n funcie de tipul de fermentaie, distingem:

bioreactoare aerobe- procesele biochimice se desfoar n prezen de oxigen;
bioreactoare anaerobe- se desfoar o serie de procese fermentative catalizate de
microorganisme anaerobe sau strict anaerobe, ceea ce nseamn c acestea trebuie s
fie proiectate i construite astfel nct s asigure condiii de anaerobioz.

n funcie de modul de amestecare-agitare a mediului:

bioreactoare cu amestecare mecanic- utilizeaz agitatoare mecanice;
bioreactoare cu amestecare pneumatic amestecarea se realizeaz prin barbotarea
unui gaz (aer, CO2);
bioreactoare cu amestecare hidraulic amestecarea se realizeaz prin recircularea
mediului lichid;
bioreactoare cu amestecare mixt folosit mult n procesele aerobe, n care
amestecarea- omogenizarea se realizeaz prin agitare mecanic la care se adaug
amestecarea pneumatic, realizat prin introducerea aerului prin barbotare.

n funcie de regimul de funcionare, distingem:

bioreactoare continue sunt alimentate continuu cu nutrieni i n acelai timp se
evacueaz din reactor o cantitate echivalent de mediu de cultur;
bioreactoare discontinue - sunt caracterizate prin amestecarea ideal a mediului de
cultur i prin operarea n arje: se ncarc componentele mediului, se inoculeaz, iar
dup un interval de timp determinat se descarc mediul de fermentaie coninnd
produii de biosintez;
 bioreactoare cu recirculare extern mediul de fermentaie de la ieirea din bioreactor
este supus unei operaii de separare (centrifugare, filtrare, sedimentare), iar
concentratul coninnd biomasa se recircul parial n bioreactor;
bioreactoare cu recirculare intern sunt caracterizate prin existena unui profil plan
de viteze n seciune perpendicular pe direcia de deplasare a fluidului.

n funcie de gradul de sterilizare, avem:

bioreactoare sterile;
bioreactoare nesterile;
bioreactoare convenional sterile.

Dup capacitate, ele se clasific n:

bioreactoare de laborator;
bioreactoare pilot;
bioreactoare industriale.

Dup forma i modul de construcie, avem:

bioreactoare tip cuv, rezervor sau bazin;
bioreactoare tip coloan.

Dup regimul termic, distingem:

bioreactoare izoterme;
bioreactoare adiabate;
bioreactoare neizoterme i neadiabate;
bioreactoare programate;
bioreactoare autoterme. ( www.wikipedia.org)
 2. Capitolul II

2.1. Criterii de alegere a bioreactoarelor

Alegerea bioreactorului potrivit pentru un anumit proces biotehnologic se realizeaz n

funcie de o serie de factori predeterminani cum ar fi:
natura microorganismului folosit;
proprietile mediului de cultur;
parametrii biochimici ai procesului;
amplasamentul bioreactorului.

Caracteristici determinate de natura microorganismului folosit n bioproces

Modul de operare al unui reactor depinde n mod esenial de stabilitatea tulpinii

productive. De exemplu, numai tulpinile care sunt suficient de stabile pot fi utlizate n
operarea continu. Condiiile de operare sunt afectate n mod hotrtor fiind complet diferite
dac microorganismul este aerob sau anaerob.
n creterea organismelor aerobe este necesar s existe o cantitate disponibil de
oxigen dizolvat, tot timpul n mediul de cultur.
Deoarece solubilitatea oxigenului n mediul de cultur este mic, este necesar
alimentarea continu cu oxigen. Aceasta se realizeaz, de obicei, prin dispersia aerului n
mediu. Un grad de dispersie ct mai mare n mediile cu vscozitate mare conduce la un
transfer mai bun al oxigenului i celulele sunt aprovizionate cu oxigen mai bine.

Mrimea i forma celulelor

 Acestea au, de asemenea, o influen considerabil asupra tipului de reactor necesar i
a modului de operare. Celulele sferice sunt, de obicei, mai puin sensibile la forfecare dect
microorganismele filamantoase.
Celulele sferice necesit un grad de dispersie mai mare a aerului dect organismele
filamentoase. Dimensiunile mici asigur un raport mare ntre suprafa i volum, un consum
mai mare al substratului i , de asemenea, o cretere rapid. Celulele aerobe cu vitez mare de
cretere necesit un consum al oxigenului mai mare.
Organismele filamentoase

Conduc la viteze mici de cretere i la cereri mici n oxigen. Deoarece astfel de celule
sunt, de cele mai multe ori, sensibile la forfecare, forte mari de dispersie pot cauza ruperea.
De fapt,este de dorit s se disperseze nu numai faza gazoas, ci i microorganismul nsui.
Formarea de micelii i aglomerri are un efect considerabil asupra alegerii reactorului.
Aglomerarile de celule au un raport mic ntre suprafa i volum, o vitez mic de consum a
substratului i o vitez mic de cretere.
Viteza mic de consum a oxigenului permite folosirea reactoarelor care disperseaz
aerul ntr-un grad mic sau moderat. Celulele care formeaz aglomerri sunt u or de separat
din mediile de cultura i reintroduse n reactor n scopul ridicrii densit ii celulare. n multe
reactoare, densitatea celular se diminueaz considerabil cu creterea nlimii. Cnd ieirea
mediului este plasat la capatul reactorului, numai o cantitate mic de celule sunt ndeprtate
din turn. n acest fel, timpul de staionare a celulelor n reactor poate fi extins considerabil,
fr creterea timpului de staionare n mediu. Deci, aglomerarea de celule permite operarea n
sistem continuu a reactorului de producere a metaboliilor, fr o separare special a celulelor.

Caracteristici ale reactoarelor determinate de proprietile mediului de cultur

Proprietile fizice ale substratului folosit difer:

gazos (metan, dioxid de carbon, la fotosintez);
lichid i solubil n ap (glucoz, lactoz);
lichid i insolubil n ap (parafine);
solid i insolubil n ap (amidon, celuloz).
 Fiecare stare fizic exercit o influen considerabil n alegerea bioreactorului. De
aceea, de exemplu, metanul i aerul pot forma un amestec exploziv i reactoarele cu acest
amestec nu pot fi folosite.
n cazul substraturilor volatile, se alege un reactor cu debit n contracurent, cu agitare
uoar axial sau un sistem de reactoare cu mai multe stagii pentru a mic ora pierderile de
gaz. S-a studiat, de asemenea, aeraia emulsiilor de ulei n ap. Prezen a parafinelor reduce
viteza de transfer a oxigenului. n general, reactoarele de suprafa nu sunt potrivite pentru
fermentaia emulsiilor uleioase.
O alt proprietate a mediului de cultur care influeneaz procesul de fermenta ie este
tendina de coalescen, adic formarea de bule de gaz care micoreaz transferul de oxigen n
mediul de cultur. n acest caz se introduc n bioreactor sisteme de disipare a bulelor, cu efect
local ( mijloace mecanice).
O caracteristic a mediului important, care implic alegerea unui anumit tip de
bioreactor, este spumarea n timpul cultivrii. Formarea de spum conduce de cele mai multe
ori la blocarea ieirii aerului, inundarea filtrelor de aer, scderea volumului de mediu n
bioreactor, infecia mediului de cultur i, deci, compromiterea procesului de biosintez. (.
Jurcoane, 2009)

2.2. Utilizri ale bioreactoarelor

Un bioreactor se refer la un dispozitiv sau sistem menit s creasc celule sau esuturi,
sub form de culturi celulare. Aceste dispozitive sunt dezvoltate pentru a fi utilizate n
ingineria tisular.
Bioreactoarele cu agitare mecanic sunt cele mai utilizate n biotehnologie, fiind
folosite pentru culturi aerobe.
Bioreactoarele tip coloan cu bule se utilizeaz n industria drojdiei de bere, n
industria berii, a vinului i n tratarea apelor reziduale.
Bioreactoarele air-lift sunt preferate pentru culturi de celule vegetale sau animale
sau de celule imobilizate, pentru c nivelul forfecrii n acest tip de bioreactor este
semnificativ mai mic dect n vasele agitate. Acestea sunt preferate i pentru tratamentul
biologic al nmolurilor.
 Bioreactoarele air-lift cu serpentine de rcire sunt utilizate n biosinteza proteinelor
microbiene.
Utilizarea membranelor de dializ n reactoarele biologice i biochimice are dou
raiuni:
- membranele de dializ sunt un mijloc eficient pentru ndeprtarea continuu a
inhibitorilor sau a produselor toxice rezultate n timpul fermentaiei;
- cultura microbian poate fi alimentat cu substrat prin membran.

n acest fel, se pot obine concentraii mari de microorganisme, deoarece substratul

este separat de microorganism i nu il inhinb.
Bioreactoarele cu dializ sunt de mare importan pentru cultivarea celulelor umane,
ntruct pot fi ndeprtai produii de inhibiie, cum ar fi lactatul i se poate aproviziona
sistemul de celule umane cu soluie de nutrieni. De asemenea, sisteme de dou sau mai multe
tipuri de microorganisme pot fi cultivate n reactoare cu dializ.
Bioreactoarele pentru culturi de suprafa sunt utilizate pentru microorganisme
cultivate pe medii solide i semisolide, sau pe straturi lichide aflate n repaus. (.Jurcoane,
2009)
Bioreactoarele cu tvi sunt limitate doar la acele microorganisme care se dezvolt pe
suprafa, formnd pelicul. (S. Bela, 2012)
Bioreactoarele tip coloan cu umplutur se folosesc pentru enzime imobilizate sau
celule imobilizate. Bioreactoarele cu umplutur nu sunt potrivite pentru bioprocesele din care
rezult CO2 sau alte gaze, deoarece dac aerul este barbotat direct se produce coalescen a
bulelor, apar canale prin umplutur i distribuia nu este uniform.
Bioreactoarele n strat fluidizant sunt utilizate pentru fermentaia glucozei la etanol.
De asemenea, se mai pot utiliza cu microorganisme floculate n fabricarea berii sau oetului.
Bioreactoarele cu strat fix sunt foarte utilizate n tratamentul apelor reziduale, cu
unele modificri specifice, fiind denumite i biofiltre. (. Jurcoane, 2009)
Fermentarea produselor solide a devenit o alternativ foarte atractiv pentru
fermentaia submers, cu aplicaii specifice, datorit mbuntirilor recente ale modelelor de
bioreactoare. Se analizeaz aplicarea fermentrii produselor solide la producerea unor
metabolii importani pentru industria alimentar, precum arome, enzime (-amilaz,
fructozil, transferaz, lipaz, pectinaz), acizi organici (acid lactic i acid citric) i gum
xantan. (S. Rodriguez, A. Sanroman, 2006).
Bioreactoarele cu agitare sunt frecvent utilizate n industria de fermentaie.
 Fermentaia etanolului se face n bioreactor cu ajutorul Saccharomyces cerevisiae.
Acizi organici, precum acidul acetic i acidul butiric se obine n bioareactoare, cu
ajutorul microorganismului Eubacterium limosum. (S. Bela, 2012)
Tienamicinul este un antibiotic care se produce n bioreactor.
Glucoamilaza este produs de Aueribasidium pullulans n bioreactor.
Bioreactoarele cu membran au demonstrat fezabilitatea lor n producerea de
enantiomeri optic puri. (S. Bela, 2012)
Comparativ cu sistemele bioreactor care sunt utilizate n prezent, microalgele pot fi o
alternativ atractiv pentru producerea de produse farmaceutice, proteine recombinate i alte
produse valoroase. (N. Yan i colab., 2016)
Bioreactoarele cu membrana anaerob sunt utilizate pentru salubrizarea cartierelor
marginae, unde tehnologiile de salubrizare ajung cu greu. Aceste bioreactoare permit
reutilizarea apei, prin tratamente de nalt calitate i producia de energie la punctul de
tratament. Un sistem inovativ, ar fi capabil s recicleze apa pentru utilizare la o toalet public
i s asigure suficient energie pentru a alimenta sistemul de operare al bioreactorului. (R.
Bair i colab., 2016)
Digestia anaerob poate fi folosit pentru a degrada risipa de alimente i de a recupera
energia. Rata de ncrcare organic, temperatura, timpul, pH-ul sunt factori importani care
trebuie operai n bioreactoare pentru a crete producia de biogaz. (F. Oliveira, K. Doelle,
2015)
Bioreactoarele cu agitare mecanic pot fi utilizate pentru producerea unor particule
asemntoare virusului hepatiei C. (R. Silva i colab., 2015)
Concluzii
- principalul scop al biotehnologiei este obinerea de produse sau servicii utile activitii
umane, cu ajutorul organismelor vii;
- bioreactorul este prevzut cu sistem de agitare, cu sisteme de nclzire-rcire, conduct
de alimentare cu aer steril i barbotor ( n cazul proceselor aerobe), sprgtor de spum
(n cazul proceselor aerobe);
- bioreactoarele sunt clasificate in multe categorii, in functie de diverse criterii ( modul
de agitare, tipul de fermentatie, etc.);
- un bioreactor se refer la un dispozitiv sau sistem menit s creasc celule sau esuturi,
sub form de culturi celulare. Aceste dispozitive sunt dezvoltate pentru a fi utilizate n
ingineria tisular;
- fermentarea produselor solide a devenit o alternativ foarte atractiv pentru
fermentaia submers, cu aplicaii specifice, datorit mbuntirilor recente ale
modelelor de bioreactoare.
Bibliografie

1. . Jurcoane, E. Ssrman, A. Rou, A. Banu, I. Lupescu, R, Berehoiu Tamba, F. Rdoi

Tratat de biotehnologie, vol. 1, Ed. Tehnic, Bucureti, 2009;
2. Sevella Bela - Biomrnki mveletek s folyamatok , Ed. Typotex Kft., Budapesta,
2012;
3. S. Rodrguez Coutoa, M. . Sanromn (2006) - Application of solid-state fermentation
to food industryA review - Journal of Food Engineering , vol. 76;
4. R. Silva, J. Clemente, R. Castro, L. Savary, M. Millipore Alex Xenopoulos, M.
Cristina Peixoto, M. Carrondo, P. Alves (2015) - Evaluation of single-use bioreactors
for the production of a Hepatitis C vaccine candidate - SINGLE-USE
TECHNOLOGIES: BRIDGING POLYMER SCIENCE TO BIOTECHNOLOGY
APPLICATIONS;
5. Na Yan, Chengming Fan , Yuhong Chen and Zanmin Hu (2016) - The Potential for
Microalgae as Bioreactors to Produce Pharmaceuticals;
6. R. A. Bair, O. O. Ozcan, Jorge L. Calabria, George H. Dick, Daniel H. Yeh (2015) -
Feasibility of anaerobic membrane bioreactors (AnMBR) for onsite sanitation and
resource recovery (nutrients, energy and water) in urban slums Water Science&
Technology, vol.72;
7. Oliveira F. and Doelle K. (2015) - Anaerobic Digestion of Food Waste to Produce
Biogas: A Comparison of Bioreactors to Increase Methane Content A Review- Journal
of Food Processing & Technology
8. A. Ashok, K. Doriya, D. Ram Mohan Rao, D. S. Kumar (2016)- Design of solid state
bioreactor for industrial applications: An overview to conventional bioreactors,
Biocatalysis and Agricultural Biotechnology, vol.9
9. https://ro.wikipedia.org
10. http://www.sciencedirect.com/
11. http://www.watt.ro/
12. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27881063
13. http://link.springer.com/chapter/10.1007/978-3-319-14565-5_16#page-1