Tehnologia de Obtinere A Streptomicinei Repaired

CUPRINS
Cap. I. Memoriu tehnic...............................................................................................2
Cap. II. Tehnologia de fabricaie.. .3
II.1. Domenii de utilizare i proprietile produsului....3
II.2. Variante tehnologice ..6
II.3. Alegerea variantei optime..8
II.4. Descrierea procesului tehnologic adoptat..9
II.4.1. Elaborarea schemei tehnologice..10
II.4.2. Materii prime, intermediare i auxiliare..20
II.4.3. Mecanismul reaciilor biochimice...29
II.4.4. Cinetica proceselor de fermentaie discontinu..29
II.4.5. Aspecte termodinamice ale proceselor fermentative..34
II.4.6. Bilanuri de materiale..36
II.4.7. Consumuri specifice....45
Cap. III. Controlul fabricaiei........46
III.1. Controlul, reglarea i automatizarea procesului tehnologic.46
III.2. Controlul de calitate.54
III.2.1. Metode de analiz ale materiilor prime i intermediare....58
III.2.2. Metode de analiz a produsului finit..58
Cap. IV. Produse secundare.Deeuri de fabricaie.Epurarea apelor reziduale..............59
Cap. V. Transport.Ambalare.Depozitare............................................................62
Cap.VI. Utiliti.........................................64
Cap.VII. Norme de protecia muncii i P.S.I.................67
Bibliografie.....................................................................................................................72
1
Capitolul I. Memoriul tehnic
In acest proiect s-a prezentat tehnologia obtinerii Streptomicinei din surse de carbon, surse de
azot, minerale si vitamie pentru dezvoltarea corespunzatoare a microorganismului producator.
Cel mai important capitol este capitolul II in care sunt prezentate cele mai importante aspecte
ale obtinerii streptomicinei. In prima parte a capitolului s-au prezentat proprietatile produsului si
domeniile de utilizare a acestuia. In continuare sunt prezentate variantele tehnologice de obtinere a
acidului glutamic, precizand avantajele si dezavantajele fiecarei variante in parte, apoi se allege
varianta optima de obtinere a streptomicinei.
Dupa precizarea variantei optime se elaboreaza schema tehnologica de obtinere a

streptomicinei, descriind pe larg fiecare etapa a schemei.
In continuare sunt prezentate materiile prime, intermediare si auxiliare din STAS-uri aprobate
de legislatia in vigoare. Dupa detalierea proprietatilor fiecarei materii, este prezentat mecanismul
reactiilor biochimice care descriu procesul de obtinere a streptomicinei.
Fiecare proces, chimic sau biochimic, trebuie sa respecte niste reguli termodinamice si cinetice,
ele sunt prezentate in acest capitol in doua subcapitole. In subcapitolul de cinetica sunt prezentate
modele cinetice care descriu procesul, iar in capitolul de termodinamica este prezentat circuitul
energetic al ATP-ului.
O parte importanta a acestui capitol este bilantul de materiale in care sunt efectuate o serie de
calcule cu privire la materiile prime care intra in proces. Dupa efectuarea bilantului de materiale este
prezentat tabelul cu consumuri specifice.
Capitolul III prezinta controlul fabricatiei, mai precis controlul, reglarea si automatizarea
procesului tehnologic in care sunt descrise metodele de automatizare a bioreactorului pentru a mentine
conditiile favorabile dezvoltarii microorganimului producator.
A doua parte a capitolului se refera la controlul de calitate in care sunt prezentate metodele de
analiza a materiilor prime si intermediare dar si metode de analiza a produsului finit.
In capitolul IV sunt prezentate utilitatile care sunt folosite in procesul de obtinerii

streptomicinei.
Capitolul V descrie produsele secundare rezultate din procesul de obtinere a streptomicinei, cat
si deseurile de fabricatie. Tot in acest capitol sunt prezentate si metodele de epurare a apelor reziduale
dar si a gazelor rezultate din proces.
In ultimul capitol sunt prezentate conditiile de ambalare, depozitare si si transport ale materiilor
prime, intermediare si auxiliare dar si cele pentru produsul util.
Drept incheiere sunt prezentate norme de protectia muncii si P.S.I. care trebuie respectate
pentru buna desfasurare a procesului tehnologic de obtinere a streptomicinei.
2
Capitolul II. Tehnologia de fabricaie
Antibioticul a fost pentru prima oar izolat la data de 19 octobrie 1943 de Albert Schatz din
Rutgers UniversityThe State University of New Jersey. Totu i premiul Nobel l va primi Professor
Selman Abraham Waksman, care pretinde c aceast descoperire ar aparine lui.
Streptomicina descoperit n culturile actinomicetului Streptomyces griseus, este un antibiotic
cu spectru relativ larg de aciune, fiind foarte activ fa de bacilul Koch i bacilii gram-negativi, dnd
rezultate foarte bune n tratamentul tuberculozei, endocarditelor, bucelozei i a septomicemiilor
sensibile la acest antibiotic [1]
II.1. Domenii de utilizare i proprietile produsului

Este activ fa de M.tuberculosis, micobacterii atipice (M. kansasii, M. avium) ct i fata de
unii bacili Gram-negativ, coci Gram-pozitiv i Gram-neativ. Deoarece nu penetreaz intracelular, este
activa n principal pe micobacteriile extracelulare. Ea acioneaz bactericid prin inhibarea sintezei
proteice la nivelul subunitii ribozomale 30S. Datorit dezvoltrii rapide a rezistenei, n caz de
utilizare ca medicaie unic, se folosete totdeauna n scheme polichimioterapice. Ptrunde greu n
lihidul cefalorahidian, meningele inflamat fiind mai greu permeabil, dar realizeaz concentraii
terapeutice n llichidul pleural. Se elimin n majoritate (75%) pe cale renal. Se administreaz doar
injectabil, frecvent pe cale intramuscular, n doze de 1g/zi. Streptomicina se folosete, asociata altor
chimioterapice majore, n schemele de terapie iniial a tuberculozei i este considerat ca o alternativ
pentru etambutol n cadrul polichimioterapiei. Este indicat mai ales la bolnavii cu forme severe de
tuberculoza (meningita tuberculoas sau boala diseminat) precum i n tratamentul infeciilor
rezistente la alte tuberculoase.
Prezint un risc mare de producere a unor reacii toxice, n special n condiiile administrrii
prelungite, motiv pentru care n prezent este indicat ca medicaie de rezerv, doar n tratamentul
tuberculozei. Se tie c poate produce ototoxicitate, cu tulburri vestibulare i acustice, nefrotoxicitate,
cu risc, n special n caz de insuficien renal, fenomene alergice, cu erupii cutanate i fenomene
iritative, radiculare i medulare, dup introducerea intrarahidiana.[1]
Proprieti chimice
Streptomicina este o substan cristalin cu caracter bazic, optic activ, solubil n ap, greu
solubil n eter, acetona i cloroform, avnd urmtoarea formula structural.
3
Formula chimic: C21H39N7O12
Masa molara: 581,574 g/mol
Punct de topire : 12 C
Structur chimic a streptomicinei a fost stabilit prin reacii de degradare a studiului

produselor de hidroliza. La hidroliza acida streptomicina se descompune n dou componente bazice,
care au fost denumite streptidina i streptobiozamina.
streptidin (II) streptoz (IV)

Streptomicina (I) streptobiozamin (III) N-metil-l-glucozamin (V)
Hidroliza acid a streptomicinei se realizeaz cu acid clorhidric, la fierberea timp de 2 ore sau
cu acid sulfuric n metanol. Structura produselor de hidroliza a fost stabilit prin reacii de degradare
ale acestora sau prin sintez.
Streptidina (1,3-diguanidino-tetrahidroxi-ciclohexan) este o baz puternic ce conine dou
resturi guanidice i care prin hidroliza alcalina pierde CO 2 i amoniac transformndu-se n streptamina
care conine dou grupe aminice primare i 4 grupe alcoolice secundare.
OH OH
H2N C HN NH C NH2 H2 N NH2

KOH + 2 CO2 + 4 NH3
NH HO OH
HO OH NH
OH VI
OH
Streptobiozamina este un dizaharid amnat cu o structur neobinuit. Prin degradadea ei se
obin dou componente: o hexoz care nu conine azot numit streptoza i o alt hexoza, cu o
4
configuraie steric puin obinuit care conine un rest metil-aminic, numit N-metil-l-glucozamina.
Ambele hexoze nu se ntlnesc n natura n stare liber.[2]
OH
OH CH
CH C1 H HC2 CH3
NH
HO CH CH OH HC2 OH O
OH HC3 OH
HN CH CH OH C C3 OH C4
HO H
O
C CH C4 H
C5 H
NH NH2 OH CH3 CH2OH
II IV V
Streptoza are p catena ramificat, o grup aldehidica liber la C 3 i o grupare alcoolic teriara
aparinnd seriei levo.
n molecula streptomicinei, N-metil-l-glucozamina se leag glucozidic (prin C 1) de C2 al
streptozei, iar streptobiozamina se leag glucozidic atomul C1 al moleculei de streptoza.
Nici una din componentele streptomicinei nu are aciune antituberculoas, iar activitatea
fiziologic se datorete ntregii molecule.
Prin hidroliza streptomicinei n soluie normal de NaOH, la fierbere se obine o substan cu
proprieti slab acide numit maltol:
C
HC C OH
HC C CH3
O
VII
Maltolul se formeaz din streptoza, printr-o transpoziie molecular i eliminare de ap; acestea
reacioneaz cu clorura feric dnd un complex colorat, a crui absorbanta se msoar la 550nm.
Reacia de colorare a maltolului n prezena ionilor ferici este utilizat ca metoda de dozare a
streptomicinei , att n procesul de fabricaie ct i n produs finit.
O importan deosebit pentru activitatea antibacterian a streptomicinei o au resturile
guaninidice. Prin eliminarea lor dispare activitatea streptomicinei . Un rol important l are i gruparea
aldehidica liber, din streptoza. Prin oxidarea ei pn la grupa carboxilica se ajunge la acidul
streptomicinic, care este inactiv. Blocarea ei cu reactivi specifici aldehidelor provoac, de asemenea ,
inactivarea streptomicinei.[2]
5
Prin hidrogenarea catalitic a streptomicinei grupa aldehidica este transformat n grupare
acloolica primar (CH2-OH), obinndu-se dihidrostreptomicina , care prezint aceeai activitate ca i
streptomicina , dar are o toxicitate mult mai redus. Dihidrostreptomicina este ntrebuinata mult n
medicina n locul streptomicinei, care atac sistemul nervos central, provocnd leziuni auditive i
vestibulare.
II.2. Variante tehnologice

Biosinteza Streptomicinei
Studiile ntreprinse pentru elucidarea mecanismului de biosintez a streptomicinei au

demonstrat c inozitolul (ciclohexitolul) este unul din precursorii de baz, deoarece el intr n partea
streptidinic a moleculei, fiind totodat precursor i pentru l-glucozamin. Pe lng inozitol, la
biosinteza streptomicinei particip hotrtor glucoz, arginina i ureea.
Arginina i ureea constituie sursa de grupri amidinice pentru streptamin, iar transferul acestor
grupri se face cu transamidinaz.
Relaiile structurale dintre inozitol i streptomicina explic utilizarea n fermentaiile industriale
a mediilor de cultur cu fin de soia, extract de porumb, levuri care conin inozitol sau fitol.
Adugarea n biomas a argininei, ureei sau metioninei produce o cretere a coninutului de antibiotic
confirmndu-se rolul lor de precursori n biosintez.
Desfurarea normal a procesului de biosintez este determinat de mbinarea optim a
urmtorilor factori: temperatur, aeraie, agitare, pH i compoziia mediului de cultur.
Temperatura procesului de biosintez variaz funcie de tipul tulpinei utilizate pentru obinerea
streptomicinei, iar valorile optime sunt cuprinse ntre 24 i 31 C.
Ridicarea temperaturii peste valoarea optim produce modificarea metabolismului hidrailor de
carbon i reducerea pronunat a concentraiei antibioticului din biomas.
Acest efect este cu att mai puternic cu ct cantitatea de fosfor din mediu este mai mare. Ca
atare, temperatura, fiind un parametru ce condiioneaz n mare msur biosinteza optim a
streptomicinei, trebuie neaprat corelat cu cantitatea de fosfor din biomas.
Aeraia este specific tulpinii cu care se lucreaz. Ea constituie unul din cei mai importani
factori n fermentaia streptomicinei. Gradul de aerare pentru aceeai tulpin n condiiile aceluiai
mediu se modific n funcie de construcia fermentatorului, de tipul agitatorului, precum i de modul
de barbotare.
Pentru a putea aprecia necesarul de oxigen pentru o tulpin, trebuie cunoscut pe de o parte
gradul de solubilitate a oxigenului, iar pe de alt parte gradul de saturare a mediului cu oxigen; aceasta
deoarece este tiut c solubilitatea oxigenului depinde de compoziia mediului, temperatur, presiune
etc.
Totodat trebuie avut n vedere i faptul c procesul respirator se modific n funcie de
condiiile fermentaiei. Aa de exemplu, o densitate mare a mediului, o concentraie ridicat n hidrai
de carbon o acumulare de substane toxice impune o intensificare a aeraiei.
n procesul de fermentaie a microorganismului productor de streptomicin (Streptomyces
grizeus) aportul de oxigen are un rol esenial att n faza de cretere a biomasei ct i n faza de
elaborare a produsului. Dac cantitatea de aer n prima parte a ciclului de fermentaie este insuficient,
se constat un consum mai ridicat n glucide i o acumulare mare de acid lactic ca rezultat al
catabolismului glucidic anaerob. Acidul lactic acumulat este oxidat pe calea ciclului Krebs, ntr-o
proporie redus, datorit lipsei de oxigen, iar acest fapt atrage o scdere a productivitii n antibiotic.
6
Plecnd de la aceast constatare, literatura recomand reglarea aeraiei n procesul de fermentaie a
actinomicetului Streptomyces grizeus n funcie de acumularea de acid lactic n biomas.
Consumul maxim de oxigen n fermentaia tulpinii productoare de streptomicin se
nregistreaz dup 20-25 ore de la nsmnare. De obicei, valoarea optim a cantitii de oxigen pe
care o necesit tulpinile productoare de streptomicin, ca i n general a tuturor tulpinelor
productoare de antibiotice, este destul de mic fa de cantitatea total de aer ce o primesc
fermentatoarelor.
Pentru streptomicin, spre deosebire de alte tulpini productoare de antibiotic, este menionat
faptul c depirea cantitii optime de aer nu influeneaz defavorabil biosinteza de antibiotic, dar
afecteaz costul utilitilor.
Alturi de aeraie, ca element de baz n obinerea de randamente superioare, un rol deosebit l
joac agitarea mediului. S-a constatat c, chiar dac cantitatea de aer pe care o introducem este
suficient, randamentele n streptomicin sunt dependente de intensitatea agitrii.
Mai sus s-a artat c viteza de dizolvare a oxigenului n lichid depinde, pe lng alte condii, de
felul n care se realizez contactul ntre faza gazoas i lichid. Intensitatea agitrii este un element
determinant n realizarea unui contact intim ntre cele dou faze.
Intensificarea regimului de agitare produce o cretere a vitezei de biosintez a streptomicinei,
ca rezultat al intensificrii proceselor de transfer de mas.
Folosirea unor sisteme de barbotare care s permit o dispersie ct mai fin a aerului duce la un
consum mult mai mic de energie pentru agitare. Numrul de turaii al agitatoarelor de la
fermentatoarele de 50 t este de 115 ture pe minut. [2]
Figura2.1 . Dinamica vscozitii i a criteriului Reynolds:

R, R- aeraie programat; B, B diluie cu soluie de glucoz 3%;
C, C condiie martor; R, B, C vscozitate;
R, B, C criteriul Reynolds
Acumularea masei celulare produce o cretere mare a vscozitii mediului i o reducere a

intensitii regimului hidrodinamic (figura 2.1) , iar odat cu aceasta o scdere pronunat a vitezei de
transfer de mas al oxigenului i creterea timpului de amestecare.
Pentru a diminua efectul vscozitii asupra vitezei de transfer de mas (care este maxim ntre
60 i 80 de ore de la nsmnare) se recomand intensificarea regimului hidrodinamic prin mrirea
turaiei agitatorului i utilizarea de diluani.
7
Procesul de biosintez a streptomicinei se caracterizeaz printr-o variaie destul de mare a pH-
ului mergnd de la 6,5 - 6,6 pn la 8,0 producia n streptomicin fiind maxim la pH cuprins ntre 7
i 8 rH-ul procesului de fermentaie a actinomicetului Streptomyces grizeus variaz ntre 10 i 12 .
Dinamica rH-ului furnizeaz date asupra metabolismului primar i secundar, iar valorile mici ale rH-
ului corespund perioadei n care vscozitatea este maxim i transferul de mas al oxigenului este
redus. rH-ul reprezint deci o msur a intensitii transferului de mas i a vitezei transformrilor
biochimice.[2]
Figura 2.2. Variaia pH-ului i rH-ului n procesul de fermentaie
II.3.Alegerea variantei optime
Adoptarea unui anumit procedeu de fermentaie este condiionat de asigurarea celor mai bune
condiii de dezvoltare a microorganismelor cultivate (aerobe sau anaerobe, cultivabile n sistem septic
sau aseptic, etc).
Procedeele de fermentaie pot fi clasificate n funcie de:
1. modul de realizare a culturilor microbiene:
- culturi n suprafaa
- culturi n profunzime
2. necesarul de oxigen:
- sisteme de fermentaie aerobe
- sisteme de fermentaie anaerobe
3. modul de funcionare a instalaiei de fermentaie:
- fermentaii discontinue
- fermentaii continue
Fermentaiile n suprafaa se practic mai rar i, de obicei, pentru microorganisme anaerobe.
Fermentaiile n profunzime se utilizeaz n majoritatea proceselor de cretere a
microorganismelor. Industrial, acest tip de fermentaie poate fi realizat prin procedee de fermentaie
discontinu i procedee de fermentaie continua.
Fermentaia discontinu, ntlnita n literatura de specialitate i sub denumirea de "sistem de
cultivare batch", se caracterizeaz prin aceea c microorganismele parcurg ntr-un singur bioreactor
toate etapele de dezvoltare, dup care procesul se reia de la capt. Acest mod de operare conduce la
consumuri sporite de utiliti, deoarece de fiecare dat este necesar sterilizarea ntregii instalaii.
8
Deoarece n acest sistem de fermentaie nu se poate asigura de la nceput ntreaga cantitate de
substrat limitativ (o concentraie mare a acestuia n mediul de cultur manifesta un efect inhibitor
pentru creterea microorganismelor, fenomen cunoscut sub denumirea de inhibiie de substrat), se
impune adugarea de substrat, precum i de precursori, pe parcursul procesului fermentativ, fapt care
genereaz probleme suplimentare n meninerea sterilitii n bioreactor.
Fermentaia continua, studiat foarte mult n ultimii ani, ofer o serie de avantaje, comparativ
cu procedeul continuu:
- utilizarea bioreactoarelor de capacitate mai redus
- realizarea mai eficient a proceselor de transfer de mas, cldura, impuls
- productivitate sporit
- epuizarea mai avansat a componentelor mediului de cultur
Sistemul de fermentaie continua (sincron) se utilizeaz atunci cnd biosinteza
decurge n dou etape distincte: creterea biomasei i, apoi, biosinteza produsului activ, situaie n care
produsele elaborate pot manifesta un efect inhibant pentru dezvoltarea populaiei microbiene tinere. [4,
p.36-38]
Se alege procedeul discontinuu de fermentaie n profunzime deoarece prezint urmtoarele avantaje:
Costul de investiii reduse
Flexibilitate ridicat
Convenia substratului ridicat
Pericol de contaminare al culturii redus
Volumul bioreactorului este relative mare
Se pot obine culture omogene
Posibilitatea obinerii unor randamente ridicate
Puritatea produsului ca i activitatea sa biologic sunt ridicate.
II.4. Descrierea procesului tehnologic adoptat. Elaborarea schemei tehnologice.

Descrierea etapelor procesului tehnologic
9
Schema Bloc
Precursor Surse de N, C i energie, glucoz,

Schema Bloc
(ciclihexitol) arginin, uree
H2O Pregtirea mediului de

cultur
abur Sterilizarea mediului de

aer
cultur
Inocul Fermentaie Sterilizare aer
Filtrare biomas
Sorbie pe schimbtori de
ioni
H2SO4 Eluie soluie de sulfat de streptomicin

4%
Demineralizare
soluie de
sulfat de
streptomi Evaporare concentrat de sulfat de streptomicin
cin
Decolorare pe crbune
activ
Filtrare
Aer cald Atomizare sulfatului de streptomicin comercial
Streptomicin
sulfat
1. Pregtirea mediului de cultur

10
Factorul care afecteaz producia de streptomicin, l constituie compoziia mediului de cultur
care trebuie s asigure necesitile nutritive ale microorganismului productor, att n faza de cretere
ct i n faza de producere a antibioticului.
n mod obinuit, mediul de cultur pentru fermentaia actinomicetului Streptomyces grizeus
conine soia, glucoz, fosfai alcalini, sruri de amoniu, carbonat de calciu etc. Utilizarea soiei permite
obinerea unor concentraii bune n streptomicin, dar nu permite reproductibilitatea arjelor datorit
neuniformitii compoziiei chimice.
Pentu a obine rezultate reproductibile pe un mediu uor de controlat i ieftin, au fost propuse o
serie de medii sintetice pe baz de glucoz, sruri de amoniu, potasiu, sodiu, fier, zinc cu adaosuri de
casein, aspartat de sodiu sau citrat de amoniu. Cele mai bune medii sintetice obinute pn n prezent
sunt prezentate n tabelul 2.1.
Pentru intensificarea procesului de fermentaie i producere a streptomicinei, se recomand
utilizarea unor stimulatori de biosintez. Ca stimulator pot fi folosii acidul 5,5 dietil barbituric,
acidul indolil acetic, nicotina, amide i aminoacizi. Aciunea acestor stimulatori se manifest asupra
miceliului, oferindu-i rezisten mai mare la autoliz.[2]
Tabelul 2.1 Compoziia mediilor sintetice utilizate n tehnologia streptomocinei
Adugat n % la mediul cu:

Componentul Sruri de
Casein Aminoacizi
amoniu
Glucoz 3,0 3,0 3,0
(NH4)2O4 0,2 0,2 0,2
KH2PO4 0,04 0,04 0,04
NaCl 0,1 0,1 0,1
CaCO3 0,5 0,5 0,5
K2O4 0,6 0,6 0,6
Mg SO 7H2O
4 0,02 0,02 0,02
FeSO 7H O
4 2 0,001 0,001 0,001
ZnSO 7H O
4 2 0,005 0,005 0,005
Casein 1,0 - -
Aspartat de
- 0,5 1,0 -
sodiu
Citrat de
- - 1,0
amoniu
n ansamblu, procesul de fermentaie biochimic(Fig.2.3) cuprinde trei faze metabolice

distincte:
11
Figura 2.3 . Dinamica procesului de fermentaie a streptomicienei
n prima faz, care dureaz 48 - 50 ore, pH-ul urc de la 6,24 la 7,78, coninutul la zahr se
reduce ncet de la 17,7 1a 13,7 g/l, iar cantitatea de miceliu dup 2 zile ajunge abia la 3,4 - 3,5 g/l, fr
a se produce streptomicin.
Faza a doua, care dureaz ntre 50 i 90 - 110 ore de la nsmnare, se caracterizeaz prin
acumularea masei celulare pn la 11,5 - 12,5 g/l, creterea pH-ului de la 7,8 la 8,10 i reducerea
respiraiei, msurat n CO2 degajat, cu aproximativ 50%. n aceast faz are loc elaborarea
streptomicinei de ctre actinomicetul Streptomyces griseus i reducerea coninutului de zahr de la
13,7 la 3,9 g/1; producia streptomicinei are loc att timp ct exist zahr.
n faza a treia, glucidele fiind epuizate, producia de antibiotic nceteaz, iar pH-ul urc pn la
8,5, putnd atinge n a asea zi de la nsmnare valoarea 8,98. Creterea rapid a pH-ului se datorete
acumulrii de amoniac n biomas, ceea ce indic mbtrnirea microorganismului productor.
Practic dup 130 ore procesul de fermentaie i biosintez se consider terminat, iar biomasa
este trimis la filtrare.[2]
2. Sterilizarea mediului de cultur

Procesele de biosinteza industrial impun absena total a sporilor de microorganisme strine
(provenite din ap, aer sau materii prime), care s-ar putea dezvolta n faza de fermentaie, infectnd
cultura unic a microorganismului util. De asemenea, conservarea preparatelor farmaceutice, a
produselor alimentare i a altor materiale se poate face numai n absena sporilor capabili de
multiplicare. Aceast cerin tehnologic se poate realiza prin sterilizare sau pasteurizare.
Pasteurizarea este operaia care are drept scop distrugerea majoritii microorganismelor,
inclusiv a bacteriilor rezistente, prin nclziri repetate sub 100C.
Sterilizarea este operaia de distrugere sau ndeprtare a tuturor formelor vegetative i de
rezisten a microorganismelor patogene i apatogene din substane, preparate sau obiecte. n industria
de biosinteza, industria farmaceutic i industria alimentar, unde se cere distrugerea tuturor
microorganismelor (reducerea total a viabilitii nu distrugere n sens fizic) operaia de sterilizare este
de nenlocuit i poate fi realizat prin urmtoarele metode.
12
v Metode termice:
- sterilizare cu aer cald la 140-200C
- sterilizare cu vapori de ap sub presiune la 120-140C
- sterilizare prin nclziri repetate la 70-100C
v Metode fizice:
- filtrare prin umpluturi fibroase
- filtrare prin materiale poroase
- filtrare prin membrane
- utilizarea radiaiilor UV, IR, raze X, , etc.
v Metode chimice:
- utilizarea agenilor chimici: oxid de etilena, formaldehida, fenol, azotiperita, ozon,
etc.
v Metode de preparare pe cale aseptic.
Sterilizarea termic uscat include i sterilizarea prin flambare, folosit n faza de nsmnare
a inoculului i a prelevrii probelor. Acest gen de sterilizare consta n trecerea probelor sau a obiectelor
prin flacr, timp de cteva secunde.
n general, metoda de sterilizare se alege n funcie de proprietile fizico-chimice ale materialelor
supuse sterilizrii, astfel nct s se evite modificrile calitative ale acestora.
ntre nclzirea uscat i nclzirea umed, n procesul de sterilizare prin metoda termic, exista
o deosebire important, ultima avnd o eficient sporit. Fenomenul se explic prin aciunea
hidratant, coagulanta i hidrolizanta a apei i a aburului asupra proteinei microbiene. Comparnd
performanele sterilizrii prin nclzire uscat i umed s-a observat c sterilizarea cu aer cald necesita
temperaturi i durate mult mai mari. Din aceste motive, n tehnica se prefer sterilizarea umed, care
poate fi urmrit n funcie de punctul termic mortal i timpul termic mortal. Punctul termic mortal
este definit prin valoarea temperaturii la care sunt omorte toate celulele unei anumite specii, n timp
de 10 minute. Timpul termic mortal reprezint acea valoare a timpului de expunere la o anumit
temperatur necesar distrugerii tuturor celulelor sporulate.
Sterilizarea prin filtrare pe materiale poroase se utilizeaz frecvent n cazul preparatelor
termolabile. Procedeul este preferat i atunci cnd preul prea mare al energiei i cheltuielile pentru
aparatura exclud ndeprtarea microorganismelor prin metoda termic. n procesul de sterilizare prin
filtrare se folosesc filtre poroase Jena G5, filtre de azbest-celuloza (denumite filtre Seitz sau Filtrasic),
filtre cu membran, filtre de profunzime i filtre absolute.
Sterilizarea cu ajutorul radiaiilor, dei prezint unele neajunsuri, este aplicat din ce n ce
mai mult n industrie, att pentru sterilizarea produselor, ct i a aerului din boxele sterile.
Prepararea produselor pe cale aseptic se utilizeaz atunci cnd nu este posibil sterilizarea
lor prin procedeele prezentate anterior. Tehnologia preparrii aseptice se realizeaz n boxe sterile,
aerul din acestea fiind sterilizat prin filtrare, iradiere sau cu ageni chimici. n ultima perioad a fost
extins la scar industrial sterilizarea aerului din boxe prin curgere pelicular, controlul sterilitii
aerului fcndu-se cu ajutorul filtrelor cu membrana. [4]
Instalaia de sterilizare a mediului de cultur la 120 - 125C
Este alctuit din coloana de sterilizare (1), mentinator (2) i rcitor (3). Coloana de sterilizare
este conceput din dou evi concentrice, prin eava interioar fiind introdus aburul, mediul de cultur
circulnd prin spaial dintre cele dou evi. nclzirea mediului se face prin barbotarea aburului de 5 ata
prin intermediul fantelor practicate pe eava interioar, acesta fiind dirijat tangenial i uniform cu
13
ajutorul unui nec montat pe exteriorul evii. Mediul staioneaz n coloana 4 6 secunde, dup care
ptrunde n mentinator, unde rmne 15 20 minute pentru perfectarea procesului de sterilizare.
n final, mediul este rcit ntr-un schimbtor de cldur tip eava n eava, la 35 40C, temperatura cu
care este introdus n fermentator.
Fig.2.4 Instalaia de sterilizare a mediului de cultur la 120 125 C
Din diagram timp (fig 2.5) temperatura, se observa c, n aceast instalaie , contribuia fazei de
nclzire i rcire la performan procesului de sterilizare este de 5 6 %, astfel nct se poate
considera c sterilizarea se realizeaz aproape n totalitate n faza de meninere.
Fig.2.5 Diagrama timp temperatura pentru sterilizarea continua la 120 125 C

Sterilizarea aerului
14
Studiind procesul de sterilizare a aerului,s-au determinat speciile reprezentative de bacterii i
spori care trebuiesc ndeprtate n mod obligatoriu, pentru a putea fi asigurate condiiile unei
fermentaii aseptice.
Cu toate c sterilizarea aerului se poate realiza att prin procedee termice ct i prin filtare,
metoda cea mai utilizat n industrie este filtrarea. Pentru sterilizare prin filtrare se pot folosi
urmtoarele materiale filtrante:
- fibre de sticl cu diametru cuprins ntre 5 i 18 ;
- nitrat de celuloz, pentru filtru cu membrane;
- teflon cu o mare rezisten termic (pn la 300C) i character hidrofob, utilizat sub form de
folii de Teflon sau n amestec cu polietilen;
- poliamida (naylon), caracterizat prin rezisten termic, hidrofobicitate, elasticitate i
durabilitate.
Pentru sterilizarea aerului prin filtrare, n principiu, exista trei tipuri de filter cu aplicabilitate
practic i anume:
- filtru cu fibr de sticl;
- filtre disc cu membrane (filter absolute);
- filtre tip lumnare.
Filtrul cu fibre de sticl
Este alctuit dintr-un strat de material filtrant fixat ntre dou site, susinute de dou placi
perforate (diametrul perforaiilor este de 0,7 0,8 cm). Filtrul este prevzut cu manta de nclzire, care
permite uscarea materialului filtrant sterilizat cu abur direct. Acest tip de filtru, indicat pentru industria
de biosinteza, ofer posibilitatea sterilizrii unor debite ridicate de aer, realizarea unui grad avansat de
purificare i durata ndelungat de funcionare. Dezavantajul filtrului cu fibre sunt: operaii complicate
la schimbarea fibrelor de sticl (durata 2,5 3 ore), manipularea neplcut a fibrelor de sticl i
anularea efectului de sterilizare dup umezirea materialului fibros.[4]
Fig.2.6Filtru cu fibre de sticl pentru sterilizarea aerului
15
(1 placa perforate; 2 plasa de srm; 3 garniture de cauciuc; 4 material filtrant; 5 - rama)
4. Filtrarea biomasei
Filtru rotativ cu vid
- acest tip de filtru permite filtrarea n mod continuu i automat de cantiti mari de lichid cu
concentraii mari de particule solide
- filtru este compus dintr-un tambur compartimentat, cu circuite separate pentru aer i pentru produsul
filtrat
- permite obinerea unui filtrat fr spum
- datorit structurii, tamburul se poate verfica i cura cu uurin
- la aceast variant vidul este prezent n toat partea intern a tamburului
- lichidul de filtrat este aspirat cu ajutorul pompei direct din interiorul tamburului
Reducerea rezistentelor la filtrare, prin prelucrarea lichidelor de fermentaie, a permis utilizarea

filtrelor cu funcionare continua de tipul filtrelor rotative cu vid i cu strat adjuvant, a cror vitez de
filtrare este de 100-300 l/m2h. Dintre filtrele rotative cu vid i cu strat adjuvant, cel mai utilizat n
industria de biosinteza este filtrul cu rennoirea suprafeei de filtrare.
Deosebirea principal dintre acest filtru i filtrul Oliver consta n utilizarea unui cuit special cu
avansare micrometric, care n timpul funcionarii se deplaseaz ndeprtnd biomasa depus mpreun
cu stratul superficial de adjuvant.
Depunerea stratului de adjuvant pe materialul filtrant se realizeaz naintea operaiei de filtrare
a biomasei. n timpul depunerii stratului de adjuvant (declit de calitate medie i grosier), viteza de
filtrare se regleaz cu ajutorul vidului astfel nct n intervalul de 45 60 minute s se depun un strat
de grosimea de 200 pn la 100 mm. Ca material filtrant se folosete o sit metalic, cu dimensiunea
orificiilor de 150 200 , sau o estur sintetic. Apoi, se regleaz viteza de naintare a cuitului
micrometric, care s corespuna unei deplasri de 0,15 0,45 mm n timpul unei rotaii complete a
tamburului.[4]
Fig. 2.7 Filtru rotativ cu vid i cu strat adjuvant
(1 tambur, 2 corpul distribuitorului, 3 cuit micrometric, 4 material filtrant, 5 cuva pentru

suspensie, 6 duza apa pentru splare, 7 celule de filtrare, 8 strat depus, 9 strat de adjuvant; I
zona de filtrare, I i IV zone de uscare, III zona de splare, V zona de ndeprtare a stratului
depus).
16
n cuva filtrului se introduce lichidul de fermentaie, tratat chimic sau termic n prealabil i se filtreaz
pn cnd pe suprafaa tamburului rmne un strat de adjuvant cu grosimea de 5 8 mm. Durata
ciclului de filtrare este cuprins ntre 6 i 24 de ore.
Separarea miceliului din mediul de cultur
Procesul de filtrare a miceliului din lichidul de cultur prezint foarte multe dificulti datorit
structurii gelatinoase i cu un grad mare de dispersie. Pentru intensificarea procesului de filtrare,
mediul de cultur se prelureaz prin metode fizice i chimice, mrindu-se viteza de filtrare prin
reducerea rezistenei stratului.
n acest scop, mediul de cultur se trimite, cu ajutorul aerului comprimat, ntr-un vas colector
unde se trateaz cu formol, pentru dezinfectare i pentru a precipita substanele mucilaginoase
(albumine), dup care se aciduleaz cu acid oxalic pn la pH 2,8 - 3,2, pentru coagularea miceliului.
Dup aceast operaie, mediul de cultur se nclzete cu abur direct la 70 - 80C, se agit 30
min pentru perfectarea coagulrii, se adaug dicalit i se filtreaz pe filtre tambur cu strat adjuvant, cu
o vitez medie de filtrare de 4 - 4,2 t/or.
Soluia nativ de streptomicin, avnd o temperatur de 55 - 65C, se rcete n rcitoare tip
eav n eav pn la 20 - 30C, apoi printr-un rcitor tubular cu sol la 5-10C.
Soluia nativ rece se trateaz n vase colectoare cu soluie de NaOH 10% pn la pH 6,2 - 6,5,
pentru a evita inactivarea, apoi se depoziteaz n dou rezervoare, de unde se trimite la extracie.[2]
5. Sorbia pe schimbtori de ioni

Separarea streptomicinei din soluia nativ se realizeaz rentabil, prin extracie cu schimbtori
de ioni.
Procesul de extracie a streptomicinei cu rini schimbtoare de ioni cuprinde urmtoarele faze:
sorbia (trecerea ionilor de streptomicin din soluie pe schimbtor de ioni), eluia (trecerea
streptomicinei din rin n soluie) i regenerarea rinilor.
Viteza procesului de sorbie i eluie a streptomicinei este determinat de difuzia n particul,
iar viteza procesului de regenerare a rinii este determinat de difuzia n filmul de lichid de la
suprafaa particulei.
Rinile schimbtoare de ioni utilizate pentru separarea streptomicinei se prezint sub forma
unor granule dure de culoare alb, galben sau brun, avnd = 1-3 mm (granulaie uniform).
Capacitatea de schimb este condiionat de prezena grupelor funcionale: carboxilice,
sulfonice, aminice, fenolice. Capacitatea de schimb ionic se exprim n mili-echivaleni de
streptomicin reinut de un gram rin.
n industrie, pentru separarea streptomicinei se folosesc urmtoarele tipuri de rini:
1) rini schimbtoare de cationi (cationii), care conin grupe carboxilice, sulfonice, fenolice
(KB4; K.F.U. .a.) n stare liber;
2) rini schimbtoare de anioni (anionii), care conin grupe aminice (Ex EDE10, AN21).
n prezent, pe planul mondial se fabric o gam variat de schimbtori de ioni care pot fi
folosii pentru extracia streptomicinei sau n diferite alte scopuri. Schimbtoarii de ioni utilizai n
tehnologia separrii streptomicinei sunt prezentai n tabelul 2.2. [2]
17
Tipul
Denumire Capacitatea de
schimbtorilor de Grupele active
a schimb m. echiv/g
ioni
Ambertit - O3H
4,9
I.R. - O3H; - OH
Cationii de tipul 4,5
M.S.F.3 - O3H; - COOH; -
acizilor tari 6,2
K.U. - 6 OH
6
S.B.S. - 1 - O3H
K.B. 4
- COOH 10
Cationii slab acizi P2
- COOH 6,5
K.C.
A.N. 10 - NH2 12
Anionii slab bazici A.N. 21 - NH2; = NH 7
E.D.E. - 10 - NH2; = NH 7,8
R
A.B. 17 +
N R
3,8
Anionii foarte R
bazici +
P.E.K. N (R)3 6
Tabelul 2.2. Tipuri de schimbtori de ioni, denumirile i capacitatea de schimb
Pentru extracia i purificarea streptomicinei se ntrebuineaz cationii slab acizi, transformai

parial n sare de sodiu.
Reinerea (sorbia) streptomicinei din soluia nativ se bazeaz pe schimbul ionic ce are loc
ntre cationul de sodiu din rin i cationul de streptomicin din soluie.
Mecanismul de schimb ionic poate fi formulat prin urmtoarea schem:
Str NH2 + HOH Str NH3]+ OH-

Sc.cat. COO]- Na+ + Str NH3]+ OH- Sc.cat. COO- [Str NH3] + NaOH
unde: Sc.ct este restul cationitului.
Pentru extracie se folosete o baterie de coloane cilindric, ncrcat (2/3 din volum) cu
cationit KB 4 P 2 parial sub form sodic (se poate folosi i amberlitul).
Soluia nativ, cu pH-ul 6,5 - 7, este trecut prin coloanele cu schimbtori de cationi cu un
debit de 800 - 1200 l/or. Streptomicina este reinut de schimbtorul de ioni, iar toate celelalte
materiale prezente n mediu trec prin coloan fiind evacuate.
Prima coloan se consider saturat cnd activitatea soluiei la ieire scade la circa 80% din
activitatea iniial a soluiei native, iar cationitul nu mai reine streptomicina.
Filtrul sturat se scoate din circuit i se spal de sus n jos cu ap dedurizat, pn cnd apele
de splare sunt limpezi. Pentru asigurarea sterilitii filtrul se spal cu o soluie de formol, apoi din nou
cu ap dedurizat i se trece la eluie.
18
6. Eluia
Eluia streptomicinei de pe cationit se realizeaz cu ajutorul unei soluii de H 2O4 de
concentraie 3 - 4%. Soluia de H 2O4 se trimite peste cationitul din filtru cu un debit de 60 -70 l/or.
Prin eluie se obine o soluie de sulfat de streptomicin, care conine i acid sulfuric liber ( pH-ul
soluiei este 4 - 4,5). [2]
Figura 2.8 . Schema de principiu a instalaiei de separare a streptomicinei cu

schimbtor de ioni:
1 3 - coloane de sorbie a streptomicinei; 4 - coloan de reinere a acidului sulfuric n exces; 5 -
coloan de reinere a cationilor; 6 - coloan de reinere a anionilor
Pentru ndeprtarea acidului sulfuric din soluie se folosete o rin schimbtoare de anioni de
tipul EDE - 10 sau espatit.
Dup neutralizarea pe anionitul EDE - 10 se obine o soluie de sulfat de streptomicin care
conine o serie de impuriti organice (histamina, pirogene, precum i ioni de Ca, Mg, Fe).
ndeprtarea acestor impuriti se face cu ajutorul sulfocationitului SBS - 1, care reine ionii de
Ca, Mg, metale grele i substanele ce impurific soluia de sulfat de streptomicin.
7. Demineralizare
Demineralizarea soluiei de streptomicin se poate face i pe o singur coloan n care se
gsesc straturi alternative de rini schimbtoare de anioni i cationi (EDE - 10 i S.B.S. - 1).[2]
8. Evaporare
Soluia de sulfat de streptomicin obinut se supune evaporrii ntr-un aparat de distilare sub
vid, la o presiune remanent de 40 mmHg i temperatura de 35C.[2]
9. Decolorare pe crbune activ
Prin evaporare rezult un concentrat de sulfat de streptomicin cu activitatea de 180 - 200000
u.i/ml, care se prelucreaz cu crbune activ pentru decolorare (6 kg crbune de 100 l conc).[2]
10. Filtrare
Concentratul rcit la 3 - 5C este trimis cu aer comprimat la filtrarea steril. Filtrarea se face
printr-un filtru Seitz, cu 3 rame, avnd ca material filtrant plci de azbest.
19
Filtratul steril este trimis la uscare, n vederea obinerii sulfatului de streptomicin comercial.
11. Atomizare
Uscarea se efectueaz ntr-un atomizor n care ndeprtarea apei din concentrat se realizeaz cu
aer cald. Aerul necesar uscrii streptomicinei se nclzete electric la 120 - 140C, temperatur ce
asigur pentru zona de uscare valori de 80 - 90C.
Concentratul de sulfat de streptomicin este pulverizat n interiorul atomizorului, la presiunea
de 1,5 - 2 atm, cu ajutorul aerului comprimat steril.
Aerul care iese din aparat antreneaz apa din concentrat, iar pulberea de sulfat de streptomicin
uscat i steril este culeas la partea inferioar a atomizorului.
Dup fiecare eluie rina din coloane se supune unei operaii de regenerare pentru a rennoi
capacitatea de schimb ionic.
Rinile schimbtoare de cationi se trateaz cu HCl (5 - 7%) pentru ndeprtarea ionilor de Ca,
Mg, Fe, reinui de rin, apoi se spal cu apa dedurizat pn la pH 3 - 4. Regenerarea rinii se face
cu o soluie de NaOH (40%), pentru transformarea parial n form sodic, n vederea rennoirii
capacitii de schimb ionic. Rina se spal cu ap (pH = 8,5), apoi se trateaz cu o soluie de formol
(1%) pentru asigurarea sterilitii.
Regenerarea anionitului EDE - 10 se face prin splri cu soluie de HCl (5 - 7%) cu ap
desalinat, apoi cu soluie de Na 2CO3 (5%). Rina regenerat n acest fel se spal cu ap, desalinat
pn la pH = 7 - 7,5. Rinile astfel regenerate sunt utilizate ntr-un nou ciclu de separare. [2]
II.4.2. Materii prime, intermediare i auxiliare

Mediul de cultur pentru fermentaia actinomicetului Streptomyces grizeus conine soia,
glucoz, fosfai alcalini, sruri de amoniu, carbonat de calciu etc. Utilizarea soiei permite obinerea
unor concentraii bune n streptomicin. Pentu a obine rezultate reproductibile pe un mediu uor de
controlat i ieftin, au fost propuse o serie de medii sintetice pe baz de glucoz, sruri de amoniu,
potasiu, sodiu, fier, zinc cu adaosuri de casein, aspartat de sodiu sau citrat de amoniu.
Pentru intensificarea procesului de fermentaie i producere a streptomicinei, se recomand
utilizarea unor stimulatori de biosintez. Ca stimulator pot fi folosii acidul 5,5 dietil barbituric,
acidul indolil acetic, nicotina, amide i aminoacizi. Aciunea acestor stimulatori se manifest asupra
miceliului, oferindu-i rezisten mai mare la autoliz.
Maetriile prime utilizate n tehnologia obinerii streptomicinei sunt:

Glucoz
Fain de soia
Extract de porumb
Sulfat de amoniu(NH4)2O4
Fosfat monopotasic KH2PO4
Clorura de sodiu NaCl
Carbonat de Calciu-CaCO3

Sulfat de potasiu K2O4
Sulfat de magneziuMg O4 7H2O
Sulfat de fier FeSO4 7H2O
20
Sulfat de zinc ZnSO4 7H2O
Arginina
Uree
Inozitol
Glucoz, conform STAS SR9+A1 glucoza are urmtoarele caracteristici:

a) Glucoz se fabric sub form de:
glucoz solid (aromatizat, nearomatizat);
glucoz lichid.
b) Condiii tehnice de calitate proprietile organoleptice ale glucozei sunt prezentate n

tabelul nr.1
Condiii de administrare
Tip de glucoz Metod de
Caracte Lichid Solid verificare
ristici Aromatizat Nearomatizat
Aspect Lichid vscos Mas solid sub Mas solid
form de tablete
Culoar Incolor pn Crem pn la Crem pn la
e la galben galben sau specific galben
colorantului
adugat SR 13359-1
Miros Lips Characteristic Lips
aromei adugate
Gust Dulce, Dulce uros amrui
specific
Corpuri Lips
strine
Tabelul nr. 2.3. Caracteristici
Extractul de porumb
Proprietile fizice a extractului de porumb sunt:
Aspect: lichid cremos de culoare galben nchis;
Miros: caracteristic unei fermentaii lactice;
Sedimentare dup 24 de ore ntr-un cilindru de 100 ml de 100%;
21
Aspect microscopic: n frontiu colorat prezint o mas bacterian tipic bacteriilor lactice, n
proporie de peste 90%;
Substana uscat minim 50%;
pH = 3,5 4;
Coninutul n acid lactic: minim 20 de g la 100 g substan uscat;
Zahr total: maxim 2
Constituieni g/100g extract de porumb 10%

Substan uscat 46 - 49,6
Cenu 8,04 - 10,73
N total 3,33 3,67
Zahr total ( exprimat ca glucoz) 4,00 4,70
Acid lactic 0,74 4,39
Aciditate (ml soluie NaOH 0,1 11,6 19,3
N/100g)extract de porumb
Fe 0,009 0,02
P 1,5 1,9
Ca 0,02 0,7
Zn 0,05 0,012
K 2,0 - 2,5
O2 0,02
Sedimente solide 38,4 52,9
Tabelul nr. 2.4. Condiii tehnice de calitate
Sulfat de amoniu, conform STAS 931 75 prezint urmtoarele caracteristici:

se prezint sub form de cristale de culoare alb-galbuie pn la portocalie;
se livreaz n dou tipuri: tehnic i alimentar .
Tipul Tehnic Alimentar

Umiditate,%, max 0,6 0,6
Sulfat de amoniu,%, min 99,0 99,2
Acid sulfuric liber,%, max 0,03 0,03
Arsen,%, max 0,005 0,001

Fier,%, max 0,025 0,025
22
Carbonat de calciu ( STAS 1083 76 )
Prezentul standard se refer la carbonatul de calciu precipitat tehnic obinut prin tratarea
soluiei de vr cu bioxid de carbon. Produsul se prepar sub forme de pulbere microcristalin.
Formul chimic: CaCO3
Mas molecular relativ: 100,09 g/mol
Carbonatul de calciu precipitat, tehnic se livreaz n patru tipuri (tabelul 2.6):
tipul I destinat, n special, la fabricarea pastei de dini;
tipul A destinat, n special, industriei de produse cosmetice, industriei de antibiotice i

industriei electrotehnice;
tipul B destinat, n special, industriei de material plastic, i industriei cauciucului;
tipul C, pentru alte utilizri .
23
Tipul I A B C
Gred de alb, % min 97 92 92 -
Finite :-rest pe sit cu estur de 0,1 1,0 1,0 -
srm0063
STAS 1077-67 % max
-rest pe sit cu estur de srm 0,05 0,5 0,5 1
009
STAS 1009-67,% max
Densitatea n grmad n stare 0,45 0,45 0,45 0,47
tasat, g/cm3 max
Cifr de sedimentare, cm3, min 95 91 90 90
Umiditate %, max 0,4 0,4 0,6 0,6
Substane insolubile n acid 0,1 0,2 0,2 0,2
clorhidric,% max
Oxizi de fier i aluminiu 0,5 0,5 0,5 0,5
(Fe2O3+Al2O3)
Carbonat de calciu %max 99 99 98,5 97
Alcalinitate [Ca(OH)2] 0,008 0,008 0,10 0,15
%max
Limite de pH la un adaos 5,5.....6,0 - -

de1....30cm3acid clorhidric
n(capacitate de tamponare)
pH-ul suspensiei 2% n ap, max 8,5 9,5 - -

pH-ul suspensiei 10% n ap, 9 10 - -
max
Cupru(Cu) % max 0,001 0,001 0,001 -
Mangan(Mn), %max 0,003 0,003 0,003 -
Arsen - - - -
Tabelul nr. 2.6. Condiii tehnice de calitate a carbonatului de calciu
24
Fina de soia este o surs de azot natural, bogat n proteine, aminoacizi coninnd i acizi
nucleici, vitamine, oligoelemente, lipide, zaharuri, compui cu sulf i fosfor dup cum urmeaz n
tabelul nr.2.7 .
Proteine 42 %
Materii grase 3,5 %
Metionina 0,54 %
Cisteina 1,1 %
Lizina 2,4 %
Calciu 0,2 %
Sodiu 0,287 %
Potasiu 1,7 %
Magneziu 0,21 %
Sulf 0,32 %
Fosfor 0,6 %
Tabelul nr. 2.7.
Fosfat monopotasic ( STAS 10497-76)

Formul chimic: K2HPO4
Mas molecular: 136,09
Aspect i culoare Cristale albe

Umiditate, %max 0,3
Fosfat monopotasic (K2HPO4), 96
%min
Cloruri (Cl), % max 0,25
Fier (Fe), % max 0,003
Metale grele(Pb), % max 0,01
Substane insolubile n ap, % max 0,5
Tabelul nr . 2.8. Condii tehnice de calitate
Sulfatul de magneziu (STAS 9373-73)

Formul chimic: MgSO4*7H2O
Mas molecular: 246,5
Produsul se livreaz n trei caliti:
25
Calitatea I
Caliatea I
Caliatea III
Caliatatea I II III
Aspect cristalin
Culoare Alb Alb-glbuie
Sulfat de magneziu,% 99 98 97,5
min
Substane insolubile n 0,03 0,15 0,2
ap
Fier,% max 0,0015 0,015 0,015
Cloruri(Cl),% max 0,008 0,012 -
Metale grele (Pb),% 0,0010 0,0015 -
max
pH-ul soluiei 2,5% 6.....8 6....8 -
Sulfat de amoniu (STAS 931 75) prezint urmtoarele caracteristici:

se prezint sub form de cristale de culoare alb-galbuie pn la portocalie;
se livreaz n dou tipuri: tehnic i alimentar .
Tipul Tehnic Alimentar

Umiditate,%, max 0,6 0,6
Sulfat de amoniu,%, min 99,0 99,2
Acid sulfuric liber,%, max 0,03 0,03
Arsen,%, max 0,005 0,001

Fier,%, max 0,025 0,025
Sulfat de zinc (STAS 2367-80) sulfatul de zinc se livreaz n trei caliti:

calitatea I;
calitatea I;
caliatea III.
26
Calitatea I II III
Aspect Cristale mici
Culoare Alb Alb sau alb- Alb-glbuie-
glbuie cenuie
Zinc (Zn), % min 22,5 22,1 21,6
Substane insolubile 0,05 0,1 0,5
n ap, % max
Fier (Fe),% max 0,035 0,5 1,0
Cupru (Cu), % max 0,005 - -
Acid sulfuric liber, 0,1 0,5 -
% max
Arsen Lips - -
Cloruri,% max 0,2 - -
Ureea
Ureea este compusul organic cu formula molecular CH4ON2. Ureea este, de fapt, diamida
acidului carbonic, deci o amid. Se numete aa deoarece se obine din acidul carbonic (sifon), printr-o
dubl reacie a acidului cu amoniacul.
, monoamid a acidului
carbonic (acid carbanic);
Structura rezultat este instabil, deci reacia se repet la produs.
Ureea este prima substan de tip organic obinut artificial, n laborator, din substan e anorganice
(cianatul de amoniu - NH4NCO), creatorul ei fiind Friedrich Whler, n 1828. Ecuaia reaciei lui
Whler este:
27
, la temperatur i presiune nalte.
Din punct de vedere industrial, ureea se obine conform urmtoarei ecuaii:
, la o temperatur de 190 C i
presiune 200 bar.
Ureea este o substan solid, cristalizat, solubil n H2O. Chimic vorbind, ea se comport ca amidele.
Se folosete, de obicei, ca ngrmnt agricol, alturi de N, n industria medicamentelor i la obinerea
de produi macromoleculari de policondensare cu aldehida formic.
Arginina
Arginina este un aminoacid necesar pentru funcionarea n bune condiii a glandei hipofize.
mpreun cu fenilalanina, ornitina i alte substane cu aciune neurologic, arginina este indispensabil
pentru sinteza hormonului de cretere al acestei glande. Necesarul de arginin este ceva mai mare la
brbai pentru c lichidul seminal conine n cantitate de aproximativ 80% acest aminoacid, iar
deficitul poate duce la sterilitate.
Printre rolurile acestui aminoacid n organism, se pot numra: mrirea cantit ii de sperm,
mrirea imunitii naturale i ajutorul n vindecarea rnilor. De asemenea, aceasta permite
metabolizarea depozitelor de lipide din organism i tonific esutul muscular. Asigur vioiciune fizic
i mental.
S-a demonstrat c Arginina ajut la producerea hormonului de cretere (GH) de ctre glanda pituitar.
Hormonul de cretere promoveaz un anabolism natural i sntos n tot organismul, ajutnd la sinteza
proteinelor n celule. Datorit rolului reparator al esuturilor afectate, arginina ajut la repararea rnilor
i a oaselor.
28
Acest aminoacid se poate gsi n stare natural n nuci, ciocolat, floricele de porumb, dulciuri
pe baz de gelatin, orezul brun, fin de ovz, stafide, semine de susan i floarea
soarelui, pineaintegral i alte alimente bogate n proteine.
II.4.3 Mecanismul reactiilor biochimice. Tehnologia produselor de biosinteza.

Mecanismul
Este atat bacteriostatic cat si bactericid. Blocheaza ARN-m la nivelul celulei bacteriene, ducand
la erori in copierea codului genetic. Impiedica sinteza proteica la nivelul celulei bacteriene. Tulbura
permeabilitatea la nivelul membranei citoplasmatice, astfel permite iesirea din celula a unor
componente vitale.
Rezistenta la streptomicina se instaleaza brusc si este partial incrucisata cu rezistenta la celelalte

antibiotice din aceasta grupa.
Spectrul de actiune
Intens: Bacili gram negativi, pozitivi, leptospire, stafilococi, bacilul tuberculozei
Slab: pasteurella, listeria, pseudomonas, proteus
Nu este activa fata de clostridii, ricketsii, virusi.
II.4.4. Cinetica reaciilor de biosintez

Procesul de cretere a microorganismelor pe medii de cultur, cu scopul de a biosintetiza
diveri produi, poart denumirea de fermentaie.
Termenul de cretere este adecvat numai pentru microorganismele individuale.

La bacterii, prin cretere se ntelege o anumit succesiune de fenomene prin care celula
individual crete n mrime o anumit perioad, dup care se divide in doi indivizi capabili
sa reia acelasi ciclu.
Sub alt aspect, procesul de cretere a microorganismelor reprezint rezultatul interaciunii
dintre celula individual i mediul de cultur. Aplicarea legilor termodinamicii, cineticii itransferului
de mas, impuls i energie demonstreaz c mediul de cultur, prin compoziie temperatur, presiune i
concentraii de substrat limitative, afecteaz direct cretereamicroorganismelor i performan a
elaborrii produselor utile.
n practic, este foarte comod s se urmreasc ciclul de cretere prin determinarea numrului
de microorganisme sau a acumulrii acestora n timp. Dac se reprezint grafic creterea n timp a
numrului de microorganisme se obin curbele din figura 2.9. aluraacestora fiind influen at de metoda
de msurare utilizat. Curba de cretere a microorganismelor cuprinde mai multe faze corespunztoare
diferitelor viteze de cretere
din ciclu. Astfel, dupa Stell, curba de cretere cuprinde patru faze, i anume: faza de inoculare saude
adaptare la mediu (de la a la b), faza creterii logaritmice a numrului de microorganisme(de la b la c),
faza creterii ncetinite (de la c la d) i faza de descretere a numrului demicroorganisme (de la d le
e). Dupa Monod, curba de cretere cuprinde urmtoarele faze: faza lag sau faza creterii sta ionare
29
(1), faza de cretere accelerat (2), faza de cretere logaritmicsau faza exponential (3),faza de
retardare (4), faza stationar (5), faza distruciei accelerate amicroorganismelor (6) i faza distruciei
logaritmice.
Fig 2.9. Curba de cretere a microorganismelor
Studiul mecanismului reaciilor enzimatice, a proceselor metabolice i a vitezei de transformare a

substratului n produs se face prin metoda cinetic. Aceast metod este singura modalitate de studiu a
proceselor enzimatice, deoarece numrul enzimelor pure separate pn n prezent este relativ redus .
n tratarea problemelor de cinetic enzimatic, referitoare la viteza de formare a produsului
sau de cretere a biomasei, se vor utiliza definiiile date de Gaden pentru viteza de fermenta ie, viteza
volumetric i viteza specific .
Viteza de fermentaie este definit prin variaia momentan a concentra iei produsului, a
intensitii respiraiei sau a concentraiei masei celulare.
Viteza volumetric este definit prin cantitatea de produs ob inut, cantitatea de substrat
utilizat, consumul de oxigen sau cantitatea de celule obinute pe unitatea de volum de mediu de
cultur i n unitatea de timp .
Procesele metabolice ce se desfaoar n interiorul celulelor vii sunt catalizate de enzime.
Enzimele sunt macromolecule organice cu structur proteic care catalizeaz procesele
biochimice. Din punct de vedere structural, enzimele sunt compui de natur heteroproteic cu
sensibilitate deosebit la toi factorii care afecteaz proteinele. Activitatea enzimelor este influen at de
temperatur, pH, presiune osmotic, concentraia substratului, concentraia produilor rezultai n
reacie etc. Activitatea enzimatic este inhibat de anumii ageni specifici precum: sulfabidele,
narcoticele etc .
Substratul este acea substan asupra cruia se exercit ac iunea enzimelor. Prezen a enzimelor
permite transformare substratului la temperatura normal a materiei vii, oferind astfel, energia necesar
desfurrii procesului de biosintez .
Funcia esenial a enzimelor este de a accelera viteza reaciilor metabolice la temperatura
normal a oorganismelor. Avnd activitatea catalitic foaret ridicat, enzimele reduc considerabil
barierele de potenial ale reaciilor de transformare a substartului, facilitnd astfel deplasarea
echilibrului spre formarea produsului .
Mecanismul prin care enzimele transform substratul poate fi descris cu ajutorul teoriei strii de
tranziie. Aceast teorie presupune c substratul se combin cu enzima formnd un complec activat,
30
instabil, care ulterior se descompune in produs i enzim. Enzima eliberat reia ciclul de transformare
a substratului conform schemei urmtoare :
k+1 k2
E+S E - S* P+ E
k-1
n care : E = enzima eliberat

E S* = complex activat enzim substrat
S = substrat
k+1 = constanta de vitez a reaciei de formare a complexului enzim substrat
P = produs
k-1 = constanta de vitez a reaciei de formare a substratului i a enzimei din complexul
enzim substrat
k2 = constanta de viteza a reaciei de formare a produsului din complexul enzim substrat .
Se adimte ca ntre enzim i substrat, ct i ntre complexul enzim substrat exist un echilibru
descris de ecuaia:
k+1 CE -S*
KC * = k-1 = CE* CS
CE-S*= concentraia complexului enzim-substrat n stre activat.

KC* = constanta de echilibru
Viteza specific de descompunere a complexului enzim substrat este redat prin intermediul
urmtoarei expresii:
KB* T
K2 = h
KB = constanta Boltzman
h = constanata Planck
Viteza de formare a produsului este prezentat n relaia urmtoare:
KB* T
Vp = * CE -S*
h
Reformulnd se obine:
KB* T
Vp = *KC* * CE * CS
h
Constanta de echilibru a formrii complexului activat se poate exprima fun ie de energia liber
standard G*:
G* = H* - T S* = - R T lnKC*
Din aceast relaie rezult expresia constantei de echilibru :
KC = eG*/ RT
Modele cinetice pentru viteza de formare a produsului
Michaelis Menten dezvolt modelul cinetic al vitezei de formare a produsului n func ie de
concentraia substratului i a enzimei. Dup aceti autori, reacia dintre enzim i substrat se desfoar
n dou etape. n prima etapa, viteza de reac ie este dependent direct de cantitatea de substrat, iar n
etapa a doua, n care are loc formarea produsului i elibearea enzimei, care este capabil s reia ciclul
descris de sistemul de reacie, viteza depinde de concentraia complexului enzim-substrat:
31
k+1
E+S E-S
k-1
k2
E-S P+E
Viteza de formare a produsului n procesul enzimatic descris de sistem este:

dCp
Vp = = k2 * CC
dt
Pentru determinarea concentraiei complexului enzim substrat, C C , se utilizeaz expresia

vitezei de formare a acestuia, pentru cazul n care CS>>CE .
dCc
k 1 (C E Cc) Cs k 1 Cc k 2 Cc
d
n regim staionar, concentraia complexului nu variaz n timp, iar expresia devine:
k 1 (C E Cc) Cs k 1 Cc k 2 Cc 0
Prin explicitatea ecuaiei funcie de Cc, se obine:

C E Cs
Cc
k 1 k 2
Cs
k 1
dCp k Cc C E V Cs
Vp k 2 Cc 2
d k 1 k 2 k
Cs Ks 2 Cs
k 1 k 1
V viteza maxima de formare a produsului

Ks constanta de echilibru
k2
K M Ks
k 1
KM constanta Machaelis-Menten
Constanta KM este egal cu constanta de echilibru Ks numai atunci cnd k 2<< k+1. Cu ct
valoarea lui KM este mai mic, cu att este mai mare afinitatea enzimei pentru substrat. Introducnd
constanta KM se obine :
dCp V Cs
Vp
d K M Cs
Aceast ecuaie este denumit ecuaia Michaelis-Menten i descrie viteza de formare a produsului
ntr-un proces enzimatic, reprezentnd modelul ideal pentru viteza proceselor enzimatice n regim
staionar, lipsite de procese secundare de inhibiie .
32
Ecuaia Michaelis-Menten a fost stabilit n ipoteza c Cs >> C E. Creterea concentraiei enzimei
n mediul de fermentaie peste o anumit limita atrage dup sine anularea acestei ipoteze i, n
consecin, vitez reaciei enzimatice nu va mai fi direct proporional cu concentraia enzimei .
Figura nr.2.10. Curba de cretere Michaelis-Menten

Din reprezentarea grafic (Fig.2.10) a ecuaiei, se observ c K M este acea valoare a concentraiei
substratului Cs pentru care reacia pornete cu jumatate din viteza maxim, V .
Deoarece valoarea vitezei maxime de reacie este limit asimptotei la curb, ea nu poate fi
determinate cu exactitate. Pentru determinarea constantei K M i a vitezei maxime V, se utilizeaz
modele de liniarizare .
Modelul Michaelis-Menten a fost conceput ca un model ideal i descrie viteza de formare a
produselor n procese de fermentaie perfecte. ns, acest model, care abordeaz cinetica enzimatic n
regim staionar, poate fi extins i la procesele n care, alturi de transformarea enzimatic a substratului
n produs, intervin reacii de inhibiie competitive a enzimelor. Prezent inhibitorilor nu se poate evita,
deoarece ei apar ca urmare a degradarii mediului nutritiv n timpul sterilizrii, a unor reac ii secundare
i nu numai .
Principalele tipuri de inhibiie ntalnite n procesele fermentative sunt:
- inhibiie cmpetitv;
- inhibiie necompetitiv;
- inhibiie de substrat;
- inhibiie de produs.
Modele cinetice pentru viteza de cretere a masei celulare

Cinetica proceselor de biosintez poate fi studiati sub aspectul creterii masei celulare func ie
de concentraia substratului. Astfel, Monod, analiznd procesul de cretere bacterian n corela ie cu
variaia concentraiei unui singur substrat (substrat limitativ), a stabilit pentru faza de cretere
logaritmic a masei celulare urmtoarea expresie de calcul a vitezei specifice:
Cs
max
Ks Cs
viteza specific de cretere a masei celulare
max vitez maxim de cretere a masei celulare
Ks constant de saturaie
33
Dependena dintre vitez specific de cretere a masei celulare i concentra ia substratului
limitativ este radat n figura urmtoare, din care se constat c viteza specific de cretere tinde
asimptotic ctre valoarea maxim.
Figura 2.11. Dependena dintre viteza specific de cretere i concentraia substratului limitativ
Substratul limitativ poate fi sursa de carbon i energie (glucoza, alcool. N-parafine), un
aminoacid esenial (triptofan, arginina), oxigenul, fosforul sau azotul anorganic. innd seama de
faptul c vitez specific de cretere este definit prin relaia:
1 dCx

Cx d
i combinnd aceast relaie cu expresia vitezei specifice, se obine ecuaia de cretere a masei celulare
n funcie de concentraia substratului limitativ, Cs:
dCx Cs
max Cx
d Ks Cs
Relaia este cunoscut n literatura de specialitate sub denumirea de ecua ia Monod.Un alt model
mult mai extins este cel al lui Kono i Asai. Acest model este valabil pentru ntreaga de dezvoltare a
microorganimelor.
II.4.5. Termodinamica reaciilor biochimice
Din punct de vedere termodinamic procesele de fermentaie intr n categoria sistemelor

deschise, ele fiind specifice organismelor vii, deoarece acestea sunt caracterizate de schimbul de
energie i materie cu mediul nconjurator pe care organismele l trasform. Sistemele deschise nu sunt
n echilibru cu mediul. Condiia de baz a sistemelor deschise este reprezentat de faptul c
organismele vii se afl ntr-o stare staionar, n care viteza transferului de energie i materie din mediu
n sistem este compensat total de viteza transferului de energie i materie n afara lui.
Faptul c celula este un sistem deschis, care nu se afl n echilibru cu nediul su, un mecanism
care capteaz energia liber din mediu, producndu-i simultan o cretere oarecare a gradului de
dezordine, adic a entropiei, face parte din logica molecular a strii vii .
Celulele vii funcioneaz ca maini izoterme care absorb energia din mediul lor, energie pe care o
transform n energie chimic, folosit apoi pentru realizarea functiei chimice de biosintez a
componentelor celulare, a funciei osmotice, necesar transportului de materiale n celul, i a funciei
mecanice, de la contracie i locomotive, toate acestea la temperatur constant.
34
Sursa de energie a sistemelor termodinamice deschise o reprezint hidra ii de carbon, lipidele,
alcoolii, proteinele etc, care prin combustie chimic elibereaz o mare cantitate de energie. O parte din
aceast energie se elimin din sistem, iar o parte este nmagazinat de sistem n compu i organici
macroenergici, dintre care se remarc acidul adenozintrifosforic (ATP), compus care asigur, practice,
rezerva energetic a celulei. Din structura ATP-ului(fig 2.12), prezentat mai jos, rezult c legaturile
dintre gruprile fosfat adiacente din ATP i ADP (acidul adenozindifosforic), sunt legturi de tip
anhidrid, notate cu ~, n timp ce legatura dintre acidul fosforic i riboza din AMP (acid
adenozinmonofosforic) este o legatur esteric, notata cu linie dreapt.
Fig. 2.12. Structura ATP
n acest context, trebuie subliniat faptul c energia liber standard de hidroliz a legturilor de tip
anhidrid este mult mai mare comparative cu cea a legturilor esterice. Chiar dac ATP ul are dou
legturi macroergice (~), n reaciile enzimatice intervine, de obicei, numai fosfatul terminal. n plus,
ATP-ul nu are doar funcia de a nmagazina energia chimic, ci este, n primul rnd un transmiator sau
transportor de energie chimic n celule vii. Prin acest proces de transport al energiei la molecule, ATP-
ul pierde gruparea fosfat terminal, trecnd n ADP care la rndul su poate accepta energie chimic i
reface ATP-ul primind o grupare fosfat .
Prin reunirea acestor observaii asupra ATP-ului, s-a postulat c ATP-ul func ioneaz ciclic ca
transportor de energie chimic de la reaciile de ardere ce furnizeaz energia chimic, la diferite
procese celulare care necesit un consum energetic .
Figura 2.13. Ciclul ATP-ADP i modalitatea de utilizare a energiei eliberate de ATP

Cea mai important sursa de cldur n timpul fermenta iei o reprezint cldura degajat n urma
activittii microorganismelor sau enzimeleor(Q1). Spre deosebire de procesele anaerobe, n
fermentaiile aerobe efectul termic activitii metabolice poate determina creterea puternic a
temperaturii mediului de cultur, depind nivelul optim .
35
Efectul termic al proceselor biochimice este rezultatul acumulrii biomasei, pe de o parte, i al
elaborrii procesului, pe de alt part, ambele etape bazndu-se pe consumul substratului. Cldura
degajat poate fi msurat direct n calorimetre sau cu ajutorul unor echipamente speciale .
De asemenea, poate fi estimat cu destul precizie, prin corelaia vitezei de consum a oxigenului
de ctre microorganisme sau pe baza cldurilor de formare, ori a cldurilor de combustieale
substratului, masei celulare, produsului etc.
Calculul efectului termic total al proceselor biochimice se realizeaz prin :
Q1 = Vu * RQ
n care : Q1 = efectul termic al procesului biochimic
Vu = volumul util de lichid de fermentaie
RQ = viteza de degajare a cldurii
Exist o coleraie ntre viteza de degajare a cldurii, RQ, i viteza de consum a oxigenului, RO2.
RQ = 5*105 * RO2 [ W/m3], pentru lizin RO2 = 30 mmoli/h .
RQ = 5*105 * 8, 33 *10-6 = 4,16 moli/m3*s
II.4.6.Bilanul de materiale Streptomicin
Scopul bilanului de materiale const n determinarea cantitilor de substane utilizate n

scopul obinerii streptomicinei.
Etapele procesului tehnologic se desfoar cu urmtoarele randamente:
Filtrare = 80 %
Sorbie = 95 %
Eluie = 95 %
Demineralizare = 96%
Evaporare = 98 %
Decolarare cu C activ = 85 %
Filtrare = 90 %
Atomizare = 95 %
Calcule preliminare
Producia pe an este Pan=26 t/an
P=26000 kg Streptomicin g/an
Fondul anual de timp FAT=330 zile
Durat unei arje ts=tf+taux
ts=110-130 h
taux=10-15 h
tf=142 h
FAT
Numrul de arje se calculeaz cu relaia n= t ,arje
33024
n= 142 =56
36
P an
Producia pe arj : Ps = s ,kg/arj
26000
Ps= 56 = 464,2857 kg/arj
Ps
n fermentator se obine o producie : Pf = g , kg/arj
464,2857
=
Pf= 0,4936 940,5159kg/arj
Temperatura optim a procesului aparine intervalului (26 1 C Se alege Topt=26C.

Productivitatea microorganismului
Activitatea standard =18000UI/mg streptomicin
1mg Streptomicin......................780 U.I.
x...............................................18000 U.I.
Pm=x ,kg/m3 Streptomicin sulfat
Pm=23,076 ,kg/m3 Streptomicin sulfat
Volumul util este dat de relaia:
Pf 940,5159

Vu= P 23,076 = 32,5274 , m3
Mmdc= Vu = 997,2 37,426 =32403.8715 kg mediu/arj

C21H39N7O12 3/2H2SO4 = C21H39N7O12 + 3/2H2SO4
728 Kg Str. sulfat..581 Kg Str. baz
Pf Kg str. sulfat.x
x = Pf' = 750,6040
1.Pregtirea mediului de cultur
Se calculeaz pentru fiecare component al mediului de cultur pe baz compoziiei procentuale
Compoziia procentual a mediului de cultur
Component %
Glucoz 3
(NH4)SO4 0,2
KH2PO4 0,04
NaCl 0,1
CaCO3 0,5
K2SO4 0,6
ZnSO4.7H2O 0,005
FeSO4.7H2O 0,001
MgSO4.7H2O 0,02
Caseina 1,1
H2O 94,57
Total 100
37
Mrimi intrate % Masa Mrimi ieite % Masa kg/arj
kg/arj
Glucoz 3 972.116145 Glucoz 3 972.116145
(NH4)SO4 0,2 64.807743 (NH4)O4 0,2 64.807743
KH2PO4 0,04 12.9615486 KH2PO4 0,04 12.9615486
NaCl 0,1 32.4038715 NaCl 0,1 32.4038715
CaCO3 0,5 162.0193575 CaCO3 0,5 162.0193575
K2SO4 0,6 194.423229 K2O4 0,6 194.423229
ZnSO4.7H2O 0,005 1.620193575 ZnSO4.7H2O 0,005 1.620193575
FeSO4.7H2O 0,001 0.324038715 FeSO4.7H2O 0,001 0.324038715
MgSO4.7H2O 0,02 6.4807743 MgSO4.7H2O 0,02 6.4807743
Caseina 1,1 356.4425865 Caseina 1,1 356.4425865
H2O 94,57 30644.34128 H2O 94,57 30644.34128
Total 100 Total 100
32403.8715 32403.8715
2. Etapa de sterilizare
Se calculeaz, din bilanul termic i bilanul de mas pentru coloana de sterilizare, cantitatea de
mediu de cultur nesterilizat: de refacut calculele
G = D + G' + I
Dr = Dcpf(tf ts) = G'cpm(ts tm)
n care: G - cantitatea de mediu steril, kg;
D - cantitatea de abur folosit la sterilizare, kg;
G' - cantitatea de mediu nesteril, kg;
I - cantitatea de inocul, kg;
r - cldura latent de vaporizare a aburului, J/kg;
cpt - cldura specific a aburului la temperatura t, J/kgK;
cpm - cldura specific a mediului, J/kgK;
38
ts - temperatura de sterilizare, C;
tm - temperatura iniial a mediului, C.
Caracteristicile mediului sunt: Caracteristicile aburului sunt:

cpm cp ap125C = 4250 J/kgK pab = 5 ata
tm = 20C rab = 2117103 J/kg
ts = 125C tf = 151.1C
G = 32403.8715 kg cpf = 4311 J/kgK
Din cele dou ecuaii rezult:13014204917.42871

0.9 G c pm t s t m 0,9 32403.8715 4250 105
D 4863,7285
rab c t f t s c pm t s t m
f
p 2117 10 3 4311 26,1 4250 105
4863,7285
D= kg abur
Dr 4863.7285 2117 10 3
G' 23073.41901
c pm t s t m 4250 105
23073.41901
G' = kg mediu nesteril
4863,7285
2. Pentru etapa de sterilizare se adaug abur (D = kg) i se majoreaz cu 10% cantitatea de
glucoz i casein.
Sterilizarea este o operaie ce are loc cu degradarea unor componente ale mediului de cultur,
dup cum se observ din bilanul operaiei de sterilizare:
39
Mrimi intrate % Masa Mrimi ieite % Masa kg/arj
kg/arj
Glucoz 3.3 1069.32776 Glucoz 3 972.116145
(NH4)SO4 0,2 64.807743 (NH4)O4 0,2 64.807743
KH2PO4 0,04 12.9615486 KH2PO4 0,04 12.9615486
NaCl 0,1 32.4038715 NaCl 0,1 32.4038715
CaCO3 0,5 162.0193575 CaCO3 0,5 162.0193575
K2SO4 0,6 194.423229 K2O4 0,6 194.423229
ZnSO4.7H2O 0,005 1.620193575 ZnSO4.7H2O 0,005 1.620193575
FeSO4.7H2O 0,001 0.324038715 FeSO4.7H2O 0,001 0.324038715
MgSO4.7H2O 0,02 6.4807743 MgSO4.7H2O 0,02 6.4807743
Caseina 1,21 392.0868452 Caseina 1,1 356.4425865
H2O 93.66 30349.46605 H2O 94,57
30644.34128
Abur 4863.7285 4863.7285
Total 100 37311.67 Total 100 37311.67
3.Fermentatia
Se calculeaz:
- necesarul de aer
- necesarul de biomas
- ap evaporat
3.1 Se consider necesarul de aer: 1 litru aer pentru 1 litru mediu de cultur min
1 L = 10-3 m3 aer.10-3 mediu de cultur
Vaer.Vu, m3
Vaer = 32,5274 m3
40
1 minut Vaer, m3 aer
tfVaer, m3 aer
Vaer = 130 * 60 * 32,5274 = 253713.72 m3 aer
Necesarul de aer este: 1 l aer/1 l m.c.min
P = 1.2 atm T = 273 + 26 = 299 0 = 1.29 kg/m3

P0 = 1 atm T = 273 tf = 130 ore
T0 P 273 1.2
aer
26
0 aer
26
0 1.41kg / m 3
T P0 299 1
n care: 0 densitatea aerului n condiii normale

T- temperatur de lucru(fermentaie)
T0- temperature normal
p0- presiunea normal
p- presiunea de lucru din fermentator
Maer = aer * Vaer, kg aer/arj
Maer = 1.41 * 253713.72 = 357736.3452 kg aer/arj
3.2 Biomas :
Pentru calculul biomasei se d concentraia biomasei n g s.u./l:
Cx = 20 g s.u./l mediu de cultur (celulele vii conin: 20 % s.u. i 80 % ap)
20000 g s.u. ............................................1 m3 m.c.
x g s.u. .................................. 32,5274 m3 m.c.
x=650.548
mapa din biomasa

( 650,548
20 ) *80=2602,192
10-3 m3......................100 g celule (biomas)

Vu m3.........................Mbiomas, g biomas = z kg biomas/arj
Mbiomas = 32,5274 * 100 = 3252,74 kg biomas/arj
3.3 Ap evaporat :
1 kg aer pres.0,01 kg H2O

357736.3452 kg aer....................z kg H2O evaporat
41
z = 3577,363452 kg H2O evaporat
mapa evaporata=3577,363452 kg
Lichidul de fermentaie:
Mldf = Mmdc + Minocul MH2O evaporat Mbiomas, kg lichid de fermentaie/arj
Minocul = 10 % Mmdc = 0,1 * 32403.8715 = 3240.38715
Mmdc = 90 % Mmdc = 0,9 * 32403.8715 = 29163.48435 kg
M ldf = 29163.48435+ 3240.38715- 3577,363452 - 3252,74 = 25573,76804
Mldf = 25573,76804kg lichid de fermentaie/arj
global = 1 *0,96 * 1 = 0.96
Mrimi intrate Kg/arj Mrimi ieite Kg/arj

Mmdc 29163.48435 Lichid de fermentaie 25573.76804
Inocul 3240.38715 Biomas 3252.74
Aer 357736.3452 Aer 357736.3452
H2O evaporat 3577.363452
Total 390140.22 Total 390140.22
4.Filtrarea
= 80 %
Precipitatul reine 20% din lichidul de fermentaie.
Mpp=Mbiomasa+MH2O din precipitat =
Mpp=Mbiomasa+0,2Mpp =
Mbiomasa 3252,74
Mpp= 0,8 ,kg/arj= 0,8 =4065.925 ,kg/arj
Mfiltrat=Mlichid de fermentaie - 0,2 Mprecipitat, kg /arj

Mfiltrat=25573,76804 -0.2 . 4065.925 =24760.58304 ,kg/arj
Mrimi intrate Kg/arj Mrimi ieite kg/arj
Lichid de fermentaie 25573.76804 Precipitat 4065.925
Biomas 3252.74 Filtrat 24760.58304
Total 28826.50804 Produs util str. a=(0,8*Pf)=600,4832
Total 28826.50804
5. Sorbie pe S.I. = 95 %
Str. reinut = 0.95*Str. din etapa 4 = 0,95 *600,4832=570.45904
Str. pierdut = 0.05 * Str. din etapa =0,05 * 600,4832= 30.02416

Soluia epuizat = filtrat Str. reinut +Str. pierdut
Soluia epuizat =24760.58304 - 600,4832+30.02416=24190.124
Filtrat Str. baz 24760.58304 Str. reinut(Str.baz) 570.45904
42
(600,4832)
Soluia epuizat 24190.124
Total 24760.58304 Total 24760.58304
6. Eluia = 95 %
Sc-COOH3
+N-STR + 3/2H2SO4 Str-NH23/2H2SO4 + Sc-COOH
581 ................3/2 98 (147) ...........................................728
570.45904............. x .........................................................y
x=144.33301
y=714,79205
y'=y*0,95=679.05244
x = cantit. de acid sulfuric de conc. 100%
100 kg sol. H2SO4 5% ............................5 kg H2SO4.................................95 kg H2O

z .................................................................. x .............................................. w
z=2886,6602
w=2742.32719
Str. reinut/pierdut = 0,05*a =28.522952
Eluat (sol. acid) = Str. sulfat (y') + acid sulfuric nereactionat (0,05*x) + ap din sol. de ac.
sulfuric (w) = q
Eluat(sol.acid) = 679.05244+7,21665+ 2742.32719= 3428.59628

Str reinut(Str. baz) 570.45904 Eluat.(Str. Sulfat) Q=3428.59628
(y'=679.05244=f)
Sol. H2SO4 2886.6602 Str 28.522952
pierdut/reinut(Str.
baz)
Total 3457,119 Total 3457,119
7. Demineralizare = 96 %
Str. sulfat pierdut = 0,04*f =0,04*679.05244=27,1620976

Str. sulfat ieit = 0,96*f =0,96*679.05244=651.890342
Sol. acid demineralizat = Sol. acid Str. pierdut - H 2SO4 nereactionat =3428.59628-27,1620976-
7,21665=3394.217533

Eluat(sol acid cu Str. 3428.59628 Eluat demineralizat 3394.217533
43
sulfat (679.05244) (Str. sulfat) (651.890342=k)
Str. pierdut + H2SO4 34.3787476
nereactionat
Total 3428.59628 Total 3428.59628
8. Evaporare = 98 %
m str. sulfat pierdut = 0,02*k = 13,0378

m ap = eluat k = 2742.32719
m ap evaporat = map*50/100 = 1371.163595
m sol. evaporate = m Str. pierdut + m ap evaporat = 1384,201395
m sol. Str. sulfat conc. = m sol. demineralizat m sol. evaporate = 2010.016138

Eluat demineralizat 3394.217533 Sol. conc. de Str. sulfat 2010.016138
(Str. sulfat) (651.890342=k) (str.sulfat) (638,852542=c)
Sol evaporat 1384,201395
Total 3394.217533 Total 3394.217533
9. Decolarare cu C activ = 85 %
m C activ = 2% * m Str. sulfat = 40.2003227

m Str. pierdut = c*0,15 = 95.8278813
m Str. rmas = c*0,85= 543.02466
m sol. str. purificat = h - m str. pierdut =j=2010.016138 -95.8278813= 1914.1882567

Sol. conc. de Str. 2010.016138 Sol. purificat de Str. 1914.1882567
sulfat(str. sulfat) (638,852542=c) sulfat(str. sulfat) (543,02466)
Crbune activ 40.2003227 C activ 40.2003227
Str. pierdut 95.8278813
Total 2050,2164 Total 2050,2164
44
10. Filtrare steril = 90 %
mpp = m C activ + umiditate (0,2*mpp) = m C activ/0,8 = 50,250403
Filtrat = m sol. conc. m str. pierdut 0,2 mpp = 2010.016138 -95.8278813 -0,2*
50,250403=1904.13817
m str. ieire = m str. intrat*0,9=1722,7694
m str. pierdut = m str. intrat*0.1=191.41882
Sol. purificat de Str. 1914.1882567 Filtrat (str. sulfat) 1904.13817
sulfat (str. sulfat) (543,02466)
Crbune activ 40.2003227 C activ Precipitat 50.250403
Str. pierdut 191.41882 Str. pierdut 191.41882
Total 2145,8073994 Total 2145,8073994
11. Atomizare = 95 %
m ap evaporat = filtrat m str.sulfat intrat= 1248,43365
Filtrat (str. sulfat) 1904.13817 Ap evaporat 1248,43365

Str. sulfat pierdut 191.41882
Str. sulfat 464.2857
Total 1904.13817 Total 1904.13817
Consumuri specifice
Glucoz 2.093789
(NH4)O4 0.139586
KH2PO4 0.027917
NaCl 0.069793
CaCO3 0.348965
K2O4 0.418758
ZnSO4.7H2O 0.00349
FeSO4.7H2O 0.000698
MgSO4.7H2O 0.013959
Caseina 0.844495
H2O 66.0032
45
Cap. III. Controlul fabricaiei
III.1. Controlul, reglarea i automatizarea procesului tehnologic
Pentru bioreactorul de obinere a Streptomicinei este necesar automatizarea n vederea

controlului automat.Obiectivul conducerii automate a unui bioreactor reprezint realizarea i
meninerea condiiilor favorabile pentru via i reproducerea microorganismelor.
Automatizarea bioreactorului implic controlul i reglarea urmtorilor parametric:
- temperatur;
- presiunea;
- pH-ul;
- concentraia reactanilor;
- debitul;
- nivelul lichidului;
- nivelul spumei;
- concentraia oxigenului.
Reglarea automat a temperaturii
Reglarea temperaturii este o problem important deoarece, cu ajutorul acestui parametru, se

stabilesc valori ale constantelor de vitez sau ale echilibrului termodinamic. n conducerea unui proces
intereseaz nu numai aspectul calitativ, ci i cel economic, fapt pentru care trebuie realizat reglarea cu
precizie a temperaturii.
Pentru reglarea temperaturii se manevreaz, n cele mai multe cazuri, debitul de agent termic
sau de combustibil. Utilizarea unei bucle simple realizeaz o reglare aproximativ a temperaturii, n
jurul valorii prescrise, n timp ce un SRA evoluat va conduce la o reglare precis.
Reglarea automat a presiunii
n legtur cu reglarea acestui parametru se disting dou cazuri: a) reglarea presiunii n vase i
pe conducte; b) reglarea presiunii n vase nchise.
a) Reglarea presiunii n vase cu circulaie se realizeaz modificnd debitul de intrare, fie pe cel de
ieire din vas. Soluia adoptat depinde de procesul tehnologic n care este integrat vasul i de
funcia sa n proces. De regul, dac principala aciune perturbatoare se exercit pe debitul de
ieire, variabil manipulat este debitul de intrare i invers.
46
Reglarea presiunii pe conducte se face utiliznd o baterie de ventile, msurarea
presiunii fcndu-se n aval fa de aciunea regulatorului.
b) Pentru reglarea presiunii n vase nchise (reactoare chimice, coloane de distilare) se pot utiliza
diverse scheme: se acioneaz asupra unor debite gazoase de evacuare (purjare n atmosfer,
recirculare cu condensare) sau care coreleaz reglarea presiunii cu regimul termic.
Pentru cazurile enumerate sunt prezentate exemple n figur a. (reglarea presiunii ntr-un reactor n
care se desfoar o reacie n faza gazoas i din care se evacueaz n atmosfer un flux gazos), b. (un
reactor cu reacie n faz lichid din care rezult un component gazos ce este condensat i adus din nou
n vas) i c. (reglarea presiunii la partea superioar a unei coloane de distilare prin corelarea acesteia cu
debitul de agent de racier al condensatorului de reflux)
47
Reglarea automat a debitului
Reglarea automat a debitului nu prezint dificulti deoarece obiectele reglate poiuni de

conduct au fie comportare de element neinerial, n cazul lichidelor, fie comportare de element
aperiodic stabil, cu timp mort nul sau foarte redus, n cazul gazelor sau vaporilor.
Deoarece debitul este funcie de cderea de presiune ntre extremitile conductei i de
rezistenele hidraulice de pe traseu, rezult c reglarea debitului se poate realiza introducnd o
rezisten variabil (un ventil) pe conduct. Nu are importan dac msurarea se face nainte sau dup
ventil.
Se msoar debitul pe conduct n punctul (1) i se compar aceast valoare cu referin fixat
n regulator. n concordan cu eroarea obinut, regulatorul de debit, F.C., acioneaz ventilul de pe
conduct.
Se utilizeaz, de obicei, o baterie de ventile, astfel nct reglarea s se poat face automat sau
manual.
n cazul reglrii automate, regulatorul acioneaz ventilul 1, ventilele 2 i 3 sunt deschise, iar 4
este nchis. Trecerea pe reglare manual presupune nchiderea ventilelor 2 i 3 izolnd astfel ventilul 1,
procesul fiind condus manual prin manevrarea ventilului 4.
48
Reglarea automat a nivelului
Reglarea nivelului este o problem frecvena n industria chimic. Se cere fie reglarea nivelului
la o valoare de referin, deci o reglare precis, sau reglarea nivelului funcie de repere (minim i
maxim), deci o reglare cu performane mai slabe.
ntr-un reactor chimicin care reacia se desfoar n faz lichid, nivelul este o variabil
important a procesului. Meninnd nivelul la o valoare de referin, se menine constant timpul de
staionare n reactor ceea ce asigur o condiie de lucru la conversie constant.
Se face, de asemenea, distincie ntre reglarea nivelului n vase deschise sau n vase nchise sub
presiune.
n primul caz, cel al vaselor deschise, reglarea nivelului presupune acionarea unui ventil plasat
pe alimentare sau pe evacuare, funcie de sarcin tehnologic a vasului.
Un caz deosebit l reprezint reglarea nivelului n rezervoare nchise sub presiune cnd se
recomand o schem de reglare n cascad. Cascad are regulator subordonat de nivel i regulator
subordonat de debit. Dac presiunea n vas crete, prima consecin este creterea debitului de
evacuare. Stabilizandu-se debitul cu bucl subordonat (ce nltura efectul perturbaiei principale
creterea presiunii) se stabilizeaz indirect nivelul. Dac variaia nivelului este efectul modificrii
alimentrii, presiunea nu variaz, dar crete nivelul. Regulatorul de nivel modific valoarea prescris
pentru bucl de reglare a debitului aa fel c evacuarea s coincide cu intrarea, meninndu-se astfel
nivelul constant.
49
Reglarea automat a compoziiei
Reglarea compoziiei prezint o serie de dificulti legate de caracterul specific al analizoarelor

(construite pentru determinarea concentraiei unui singur component dintr-un amestec), de ntrzierile
de transport datorate distanelor mari ntre punctul de luare a probelor ic el de analiz, de
neliniaritile introduse n bucl de reglare sau de faptul c multe analizoare nu sunt sufficient de
robuste sau de sigure n exploatare.
De multe ori, n locul reglrii directe a compoziiei, se procedeaz la o reglare infereniala,
respectiv se msoar un parametru corelat biunivoc cu compoziia (presiune, temperatur).
Reglarea compoziiei unui amestec lichid se aduc ntr-un vas dou lichide A i B. Pe
recirculare analizorul M msoar compoziia produsului i informeaz regulatorul de compoziie AC,
care acioneaz asupra debitului B. Este preferabil s se stabilizeze debitul A, nlturnd astfel o
posibil perturbaie.
50
Reglarea automat a pH-ului
Reglarea automat a pH-ului implic proble deosebite din dou motive considerate principale:
a) caracteristic neliniar a pH-ului duce la un ciclu limit, de oscilaii, n bucl de reglare; b)
domeniul larg de variaie a debitelor crora li se regleaz pH-ul determin o reglare nesatisfctoare
dac exist un singur element de execuie deoarece aceast trebuie s acopere o plaj mare de variaie a
debitului de neutralizare.
ntr-un reactor cu amestecare, pH-ul se poate regal printr-o cascad pHc pHc.
Dac se folosesc dou fluxuri de reactani de neutralizare, se apeleaz la o schem de reglarecu

dou robinete. Mrimea de comand a regulatorului de pH este divizat pe cele dou ventile (reglare
split range). Se procedeaz similar n cazul n caredebitul de reactant de neutralizare variaz n limte
largi. Un ventil se plaseaz pe fluxul reactorului de neutralizare, iar cel de-al doilea, pe o conduct de
recirculare a aceluiai reactant.
51
Sisteme de control al nivelului spumei
n present toate operaiile de control i reglare sunt efectuate automat i continuu pe toat
durata procesului biochimic respectiv. Aceast problem este rezolvat relativ simplu prin cuplarea
controlului analitic al formrii spumei, cu ntroducerea n bioreactor a agenilor de antispumare cu o
vitez care trebuie s depind de nivelul spumei.
Senzorii sau electrozii de contact reprezint cea mai simpl soluie pentru controlul formrii
spumei. Aceste sisteme sunt constituite din dou fire metalice fixate ntr-un corp izolant, a cror capete
sunt plasate la o foarte mic distan unul de altul. Acest ip de sensor se plaseaz la o anumit nlime
deasupra mediului lichid din interiorul bioreactorului. Prin ajungerea spumei la extremitile mapetelor
neizolate ale firelor metalice, se realizeaz parctic un contact electric cu apariia unui semnal analitic,
care dup o prealabil amplificare poate declana un sistem de avertizare optic (un bec luminos) sau
acustic (o sonerie sau siren) sau ambele. Simultan, semnalul dat poate aciona sprgtorul mecanic de
spum, sau dup un anumit interval de timp sistemul de adugare a agentului de antispumare.
Sensor de contact: 1 nivelul lichidului, 2 spum, 3 corpul senzorului, 4 surs electric, 5

avertizor optic, 6 avertizor acustic
52
Reprezentare schematic a unui sistem automat de contro i reglare a nivelului spumei:
1 sensor, 2 spum, 3 lichid, 4 sistem de amplificare, 5- electrovalv, 6 rezervor cu lichid
antispumant, 7 sistem de egalizare a presiunii
Sisteme de control-reglare a concentraiei O2
Senzorul Clark, a crui reprezentare schematic este dat n figur, este realizat dintr-un catod
de platin sub form unui disc plat i o incint cu electrolit (soluie KCl), n care se gsete imersat
anodul de argint. Membran,din teflon cu o grosime de 25m, se ntinde de la partea inferioar a
senzorului prin intermediul unui inel de cauciuc, un film de electrolit furnizat din rezervorul cu
electrolit al senzorului.
Senzor de tip Clark: 1 catod, 2 anod, 3 electrolit, 4 membran, 5 corpul senzorului, 6

inel din cauciuc
Prin utilizarea corect a unui sensor de tip Clark, cu membran din teflon cu o grosime de 25
m, aproximativ 95% din semnalul analitic n regim staionar, se obine n 15 20 secunde.
53
III.2. Controlul de calitate
III.2.1 Metode de analiz ale materiilor prime i intermediare
Glucoz
Verificarea calitii glucozei se face prin:
- verificri de lot;
- verificri periodice.
Prin lot se nelege cantitatea de produs rezultat dintr-o arj sau cantitatea de produs obinut
n 24 de ore, n cazul procesului de producie continuu.
La fiecare lot se verific:
- ambalarea i marcarea;
- masa net;
- proprietile organoleptice;
- proprietile fizice i chimice, cu excepia determinrii cenuii conductometrice, care se
verific periodic (ori de cte ori se consider necesar).
Pe baza rezultatelor obinute la verificrile periodice, productorul garanteaz calitatea fiecrui
lot.
Eantionul pentru laborator se ntroduce ntr-un ambalaj nchis etan, la care se ataeaz, prin
sigilare, o etichet cu urmtoarele meniuni:
- denumire i marca productorului;
- numrul lotului i data fabricaiei;
- data eantionrii;
54
- numele i semntura persoanelor care au efectuat eantionarea.
Extractul de porumb
Metoda de analiz a aminoacizilor

aminoacizii, n prezena ninhidrinei, formeaz un compus albastru violet, care prezint un
maxim de absorbie la 570 nm sau prin descompunere enzimatic ionii de amoniu formai pot fi dozai
spectrofotometric, permind dozarea direct a azotului din aminoacizi (metode spectrofotometrice).
Cromatografia cu gradient de pH sta la baza funcionarii unor analizoare automate pentru
aminoacizi (figura53.).
Figur53.Principiul constructiv al unui analizor de aminoacizi cu eluie n gradient de pH

1 coloana cromatografic termostata;
2 rezervor cu soluie tampon de pH;
3 soluie cu reactiv de culoare pentru determinarea spectrofotometric a aminoacizilor
(ninhidrina);
4 camera de amestecare;
5 serpentina pentru rcire;
6 spectrofotometru ;
7 nregistrator;
8 pompe;
9 proba de analizat.
Aceste analizoare folosesc n general separarea pe o coloan cromatografic termostatata (1)
umplut cu schimbtori de ioni, iar eluarea se face cu soluie tampon (2), cu diferite valori ale pH
ului, dup un program prestabilit obinerea unui gradient de pH cu rezoluie maxim, ntr-un timp
minim.
Detecia se efectueaz spectrofotometric, pe baza reaciei de culoare pe care o dau aminoacizii
eluati de pe coloana, cu ninhidrina.
55
Absortia optic a compusului dorit se msoar la 440 i 570 nm cu un spectrofotometru cu
dublu fascicul (6), iar semnalul analitic obinut care e direct proporional cu concentraiile diferiilor
aminoacizi din proba de analizat, se nregistreaz grafic cu ajutorul unui nregistrator.
Acid sulfuric tehnic

Calitatea acidului sulfuric tehnic se verifica prin:
- verificri de lot;
- verificri periodice.
Verificri de lot: mrimea unui lot este de maximum 3000 t produs de acelai tip, sau
corespunztoare capacitaii unei cisterne.
Verificrile de lot constau n:
- verificarea aspectului;
- verificarea culorii;
- determinarea coninutului de acid sulfuric monohidrat.
Verificrile periodice se execut lunar, pe unul din loturile supuse verificrilor de lot n
perioada respective i constau n:
- determinarea densitii;
- determinarea coninutului de O2;
- determinarea coninutului de fier;
- determinarea coninutului de arsen;
- determinarea reziduului de calcinare.
Crbune activ
Verificarea calitii crbunelui activ vegetal praf se face pe loturi. Mrimea unui lot este de max
800 kg produs de acelai tip.
n fiecare lot se verifica toate condiiile tehnice de calitate. La verificare produsul trebuie s
corespund tuturor condiiilor tehnice de calitate.
Pentru verificarea calitii se iau probe elementare de cte 20 50 g produs, din 50% din
numrul ambalajelor care constituie lotul, dar nu din mai puin de 2 ambalaje, cu ajutorul unei sonde
metalice care se introduce pn la fundul ambalajului.
Probele elementare se unesc, se omogenizeaz i se reduc prin metoda sferturilor la o cantitate
de 250 g, care se mparte n dou pri aproximativ egale n dou porcine, cutii sau pungi de
polietilena, curate, uscate i care se inched etan.
Borcanele, cutiile sau pungile cu proba, nchis etan, se sigileaz i se prevd cu etichete avnd
urmtoarele specificaii:
- marca de fabric a ntreprinderii productoare;
- denumirea produsului, tipul, STAS 3682-80;
- numrul lotului;
- data lurii probelor;
- numele i semntura persoanelor care au luat probele.
56
Una din cele dou probe se trimite laboratorului pentru analiza, iar a doua se pstreaz de ctre
ntreprinderea productoare timp de dou luni.
Metode de analiza
Determinarea culorii se determina conform STAS 9010-71. determinarea densitii relative se
realizeaz conform STAS 35-73.
Determinarea intervalului de distilare
Intervalul de distilare se determina conform STAS 9161-72, cu urmtoarele meniuni:
- corecia care se aplic temperaturilor specificate funcie de presiunea barometric este de
0,041C, pentru fiecare mm Hg;
- se citete volumul de dstilat din cilindrul collector, cnd termometru indica temperaturile
specificate n tabelul de condiii tehnice.
Diferena dintre volumele de distilat citite reprezint volumul n procente care distila n intervalul de
temperatur specificat, la presiunea de 760 mm Hg.
Determinarea coninutului de fier
Coninutul de fier din uree tehnic se determina prin complexare cu 2,2-dipiridil la pH=4,5
6. Fierul este redus n prealabil la fier (I) cu clorhidrat de hidroxilamina.
Complexul colorat, astfel obinut, se msoar fotometric la lumgimea de unda de 522 nm.
Mod de lucru ntr-un creuzet de porelan se cntresc 10 g proba. Se nclzete creuzetul la
flacra mic, pn cnd se obine o mas solid cenuie, apoi se introduce ntr-un cuptor electric la
circa 300C.
Se ridica treptat temperatura pn la 800C i se menine creuzetul la aceast temperatur, pn
la completa calcinare a reziduului.
Se scoate creuzetul din cuptor, se lasa s se rceasc se adaug 1 0,01 g bisulfat de K, se
nclzete la flacra, pn la topire. Se continua nclzirea nc 10 minute meninndu-se proba n stare
topit, apoi se lasa s se rceasc.
Se dizolva topitura n 2 cm3 acid clorhidric d=1,19, se adaug 10 ml apa, se nclzete uor
pn la dizolvare complet a reziduului i se transvazeaz cantitativ ntr-un balon cotat de 100 ml. Se
adauga succesiv 2 ml acid clorhidric N, 2 ml soluie clorhidrat de hidroxilamina, iar dup 5 min 20 ml
soluie de acetate de amoniu i 1 ml soluie de 2,2 disponibil. Se adduce la semn cu apa, se agit
pentru omogenizare i se lasa s stea 10 min.
n parallel se efectueaz o prob martor, n aceleai condiii dar fr proba de uree.
Se msoar absorbanta la lungimea de unda 522 nm sau cu un film verde n cuve cu grosimea
stratului de 1 cm folosind ca soluie de referin proba martor.
Se citete pe curba de etalonare, cantitatea de fier corespunztoare absorbantei obinute.
Coninutul de fier se exprim n procente i se calculeaz cu formula:
m1 m2
Fier 100
m 106
m1 cantitatea de fier din proba de analizat
m2 cantitatea de fier din proba martor
m masa probei de uree luat n analiz
57
Determinarea coninutului de substane insolubile n ap.
Proba se dizolv n ap, se filtreaz, se usuc la 105 2C i contintul de substane insolubile
se determina gravimetric.
Mod de lucru ntr-un pahar cilindric de 300 ml se introduce circa 50 g proba uscat n etuva
la 105C i cntrit cu precizie de 0,01 g i se dizolv n 150 200 ml apa.
Soluia se filtreaz printr-un creuzet filtrant tip G4, n prealabil adus la masa constanta la
105C.
Reziduul din creuzetul filtrant se spala cu apa nclzit la circa 80C, pn cnd apa de splare
numai conine uree.
Pentru verificarea absentei ureei n apele de splare, 2 sau 3 ml apa de spala se evapora la sec
ntr-o capsul de porelan. Se adaug 2 sau 3 picturi de acid sulfuric, se nclzete apoi se introduce 2
sau 3 picturi de soluie NaOH i 2 sau 3 picturi de sulfat de Cu. Ureea este absena dac nu apare
nici o coloraie roie violet.
Creuzetul cu reziduul se usuc la etuva la 105C. coninutul de substane insolubile n apa se
exprim n procente i se calculeaz cu formula:
Subst insolubile n H2O=(m1 m2/m)100
m masa probei de analizat, g
m1 masa creuzetului filtrant cu reziduu, g
m2 masa creuzetului filtrant gol, g.
58
Cap. IV. Produse secundare.Deeuri de fabricaie.Epurarea apelor reziduale
Din tehnologia obinerii streptomicinei prin fermentaie discontinu, pe lng produsul
principal apar n diferite etape produse secundare i deeuri de fabricaie.
Epurarea apelor, provenite din tehnlogia obinerii streptomicinei pot fi epurate prin:
- procese fizice;
- procese chimice;
- procese biologice.
Procese fizice
n categoria proceselor fizice intra:
- sedimentarea se realizeaz prin utilizarea unor bazine denumite decantoare care sunt
proiectate astfel nct s asigure o vitez de circulaie a apei ct mai mic, n scopul
sedimentarii particulelor grosiere n numr ct mai mare;
- centrifugare astfel se obin viteze de sedimentare mai ridicate care se traduc prin
productiviti mai mari ale instalaiilor i obinerea unor concentrate mai compacte;
- filtrare la rndul ei filtrarea se poate face prin membrane sau prin alte materiale filtrante;
- flotaie reprezint un procedeu avantajos pentru separarea metalelor grele din soluii apoase
diluate, deoarece consumul energetic este redus i n plus constituie o operaie rapid
comparativ cu sedimentarea.
Procese chimice
Procesele chimice de epurare sunt acelea n care poluanii sunt transformai n alte substane
mai uor de separate, cu nocivitate mai sczut.
Aici intr:
59
- oxidarea se utilizeaz reactivi cum ar fi clorul, ozonul, dioxidul de clor, permanganatul de
potasiu, deoarece, deoarece utilizarea lor se bazeaz pe reacia de oxidare a crei finalitate este
att dezinfectarea apei, ct i trecerea unor compui din soluie n precipitat;
- schimbul ionic epurarea apelor reziduale prin schimb ionic se bazeaz pe reaciile ce au loc
ntre ionii din apa mineralizat i schimbtorii de ioni formnd o nou substana care va
diminua astfel concentraia acestora n apa supus tratrii.
Procese biologice
Substanele organice pot fi ndeprtate din apa de ctre microorganismele care le utilizeaz ca
hrana, respectiv c sursa de carbon.
Epurarea se desfoar prin reacii de descompunere i de sintez, mijlocite de enzime,

catalizatori biologici generate de celulele vii.
Se disting dou tipuri de procese biologice:
- procese aerobe
- procese anaerobe
O alt surs de poluare n industria biochimic o constituie eliminarea n atmosfera de gaze i

vapori. De cele mai multe ori acestea sunt amestecate cu particule solide sau lichide. Prin interaciunea
acestor substane din aer cu diverse forme fizice ale apei rezulta de obicei substane foarte toxice cum
ar fi oxizi ai sulfului, ai azotului i ai carbonului.
Metode de tratare a gazelor
O metod folosit la nivel mondial este evacuarea gazelor poluante la nlime mare. Astfel sau
construit couri nalte, care astzi ajung pn la 200-300 m nlime, prin care acestea sunt evacuate.
Astfel s-au perfectinat vi ventilatoarele care mping gazelle la co care asigura o vitez de uraga de 30-
50 m/s.
Pn de fum se formeaz la ieirea gazelor din couri se caracterizeaz prin urmtorii

parametric:
- natura emisiei;
- temperatura gazelor de emisie;
- viteza de ieire.
Procesul de epurare const n ndeprtarea din apele uzate a substanelor toxice, a

microorganismelor, etc., n scopul proteciei mediului nconjurtor; o epurare corespunztoare trebuie
s asigure condiii favorabile dezvoltrii n continuare a tuturor folosinelor (alimentare cu ap,
piscicultur, agricultur, etc.).
Evacuarea apelor reziduale neepurate n mod corespunztor poate prejudicia, printre altele, n
primul rnd sntatea public.
60
Ca optim msur, STAS 1481-76 prevede ca apele uzate s fie evacuate ntotdeauna n aval de
punctele de folosin. De asemenea, STAS 4706-74 stabilete o serie de condiii tehnice de calitate care
trebuie s le ndeplineasc amestecul dintre ap uzat i a emisarului n aval de punctul de evacuare a
apelor uzate, astfel nct folosinele n aval s nu fie afectate.
Epurarea apelor reziduale se realizeaz n staii de epurare, acestea fcnd parte integrant din
canalizarea oraului sau a industriei. Apele uzate industriale sunt admise n reeaua de canalizare a
oraului numai dac ndeplinesc anumite condiii, stabilite de "Normativul privind condiiile de
descrcare a apelor uzate n reelele de canalizare a centrelor populate" N-2-70(C-90-70). Acest
normativ interzice evacuarea n reelele de canalizare oreneti a apelor reziduale industriale care
conin:
- suspensii sau alte materiale care se pot depune;
- pcur, uleiuri, grsimi care pot genera aderen pe pereii colectorului;
- substane care provoac fenomene de coagulare;
- substane cu agresivitate chimic asupra materialului de construcie a colectorului i staiei de

epurare;
- substane ca: benzen, eter, cloroform, acetilen, sulfur de carbo,, etc., care prin evaporare pot
provoca amestecuri detonante;
- substane nocive care pot pune n pericol personalul de deservire a staiilor de epurare;
- ape calde cu temperaturi peste 50C.
61
Cap. V. Transport.Ambalare.Depozitare
Transportul
n industria chimic problema transporturilor are o importan deosebit prin cantitile i

varietatea materialelor de transportat. Problema transportului trebuie studiat de la aducerea
materialului n fabric la transportul ntre secii i pn la expedierea produselor finite. La proiectarea
fabricii, s-a inut seama de aducerea din afar a materiilor prime, n fabric, i c expedierea produselor
finite, din fabric dpre centrele consumatoare, se face n cele mai bune condiii. De aceea se va studia
aici doar transportul n interiorul fabricii.
Costul micrilor materialelor reprezint partea principal a salariilor neproductive. Rezolvarea

raional a problemei transportului reduce simitor preul de cost al produselor. Mijloacele de transport
pot duce ns i la o mbuntire a modului de fabricaie, prin faptul c asigur alimentarea locului de
lucru cu material n momentul n care este necesar, evitndu-se astfel pierderile de timp. Se vor evita,
n general, transportul inutil prin fabric, ridicarea i transportul manual al greutilor mai mari dect
50 kg i utilizarea unui mare numr de oameni pentru transportul fr dispozitive de protecie i de
uurare a muncii.
n general se evit transportul materialului n sens invers fluxului normal de fabricaie, precum
i folosirea unor sisteme de transport nvechite. Circulaia materialelor determin aezarea i orientarea
seciilor, i direciile de dezvolare viitoare n funcie de succesiunea operaiilor, precum i de
repartizarea aparatelor.
Mijloacele de transport adoptate nu condiioneaz numai dispoziia cldirilor, dar i gradul de

soliditate al construciei seciilor. n general se utilizeaz aparate de transport numai acolo unde ele
sunt absolut necesare, preferndu-se pe ct este posibil transportul pe sol. Principial, soluiile cele mai
simple sunt i cele mai bune i de aceea se recurge la aparate speciale numai n cazuri excepionale.
62
La alegerea utilajului pentru manipularea materialelor se ine seama de obiectivul reducerii
preului de cost a reducerii consumului de munc uman i de materiale, al uurrii i al proteciei
muncii a evitrii degradrii utilajului i a prevenirii incendiilor.[13, p.104]
Depozitare
Materialele primite de o uzin chimic sufer o serie de transformri n cadrul procesului

tehnologic i trebuie depozitate sub form de semifabricate sau de produse finite la diferite etape.
nmagazinarea se face n depozite universale sau speciale, care se clasific astfel:
1) depozite de materii prime i auxiliare;
2) depozite de combustibil;
3) depozite de semifabricate;
4) depozite de scule;
5) depozite de produse finite;
6) depozite pentru deeuri utilizabile.
Aezarea depozitelor este n funcie de modul n care a fost rezolvat problema transporturilor
deoarece acestea se construiesc lng ci ferate sau drumuri.
La proiectarea depozitelor se pleac de la normativele de stocuri de materii prime i auxiliare

necesare procesului tehnologic, de la planul de producie i de la consumurile specifice.
Magaziile acoperite pot fi cu etaj sau fr etaj i au nlimea n funcie de grosimea de stivuire
admis pentru materialul respectiv i n funcie de gradul de mecanizare a operaiei de stivuire. Se
construiesc magazii cu mai multe etaje, cnd terenul este mic i este nevoie de suprafee mari de
depozitare. Magaziile cu mai multe etaje se echipeaz cu ascensoare pentru transport vertical instalate
n apropierea porii, pentru c de pe ramp, cruciorul s intre direct n cabin.
Dac n magazie urmeaz s se efectueze operaii de sortare, mpachetare, recepie sau eliberare
de materiale se va prevedea o iluminare mai mare dect 30 luci. Se prevede i iluminarea artificial a
magaziei care s asigure distribuirea uniform a luminii.
Locurile de recepie se proiecteaz lng ramp de descrcare, iar posturile de eliberare lng
ramp de ncrcare.
Suprafaa necesar de depozitare se va stabili n funcie de felul materialelor i de normele de

stocare consemnate ntr-o planificare a magaziei.[13, p.161]
Ambalare
Pentru a scade costul manoperei pe unitate, pentru a scurta timpul de ncrcare i de descrcare,
pentru a reduce degradarea prin ncrcri i descrcri i pentru a uura i a accelera circulaia, s-a
impus s se manipuleze mai multe buci de material deodat.
63
Cea mai practic form de ambalaj a unei ncrcturi normale trebuie s aib baz cu
dimensiuni de 200 x 600 mm, 300 x 400 mm sau 600 x 1200 mm. Adoptnd un ambalaj raional,
cheltuielile de manipulare vor fi reduse, posibilitile de degradare vor fi mai mici i se va obine o
organizare uoar a magaziilor, cu sau fr boxe, i un control rapid al magaziilor.
Ambalajul trebuie s asigure o utilizare raional a spaiului magaziilor tiind c lungimea i

limea magaziei ajut manipulrilor, dar c factorul nlime este cel care determin o bun exploatare
a spaiului.
Ambalajul trebuie s aib un aspect plcut, s asigure o pstrare igienic i s fie nsoit de
instructajul de manipulare.[13, p.171]
Cap.VI. Utiliti
Aburul, apa aerul comprimat, gezele inerte, solele de rcire i energia electric folosite n
industria chimic sunt uzual nglobate n denumirea de utiliti.
Toate utilitile sunt considerate ca fcnd parte din sfera problemelor energetice ale unei
ntreprinderi.
VI.1. Apa
n funcie de utilizarea care se d apei se deosebesc mai multe categorii: ap tehnologic, ap

de rcire, ap potabil, ap de incendiu, ap de nclzire.
Apa de rcire poate proveni din fntni de adncime, temperatura ei se menine ntre 10-15C
tot timpul anului, sau ap de la turnutile de rcire, cnd se recircul, avnd temperatura n timpul verii
25-30C. Pentru evitarea formrii crustei, temperatura apei la ieire din aparate nu trebuie s
depeasc 50C. Rcirile cu ap industrial se pot realiza pn la 35-40C
Apa ca agent de nclzire poate fi:
- ap cald cu temperatura pn la 90C;
- ap fierbinte, sub presiune, pn la temperatura de 130-150C.
Apa este un agent termic cu capacitate caloric mare, uor de procurat. Pentru nclzire, se
prefer apa dedurizat n scopul evitrii depunerilor de piatr.
64
VI.2. Aburul
Aburul este cel mai utilizat agent de nclzire i poate fi: abur umed, abur sturat, abur
supranclzit.
Aburul umed conine picturi de ap i rezult de la turbinele cu contrapresiune sau din

operaiile de evaporare, ca produs secundar. Este cunoscut sub denumirea de abur mort.
Aburul sturat este frecvent folosit ca agent de nclzire, avnd cldur latent de condensare
mare i coeficieni individuali de transfer de cldur mari. Temperatura aburului sturat poate fi uor
reglat prin modificarea presiunii. nclzirea cu abur se poate realiza direct, prin barbotare, sau
indirect, prin intermediul unei suprafee ce separ cele dou fluide.
Aburul supranclzit cedeaz, n prima faz, cldur sensibil de rcire, pn la atingerea

temperaturii de saturaie, cnd coeficientul individual de transfer de cldur este mic i apoi cldur
latent prin condensare.
VI.3. Energia electric
Aceasta reprezint una din formele de energie cele mai folosite n industria chimic datorit
uurinei de transport la distane mari i la punctele de consum i randamentelor mari cu care poate fi
transformat n energie mecanic, termic sau luminoas.
Energia electric transformat n energie mecanic este utilizat la acionarea electromotoarelor

cu care sunt dotate diversele utilaje din industria chimic (pompe, ventilatoare, reactoare cu agitare
mecanic)
Energia electric este folosit i la nclzire, prin transformare n cldur, folosind mai multe
tehnici:
- trecerea curentului prin rezistene electrice;
- transformarea energiei electrice n radiaii infraroii;
- folosirea curenilor de nalt frecven, medie i mic;
65
- folosirea pierderilor dielectrice;
- nclzirea prin arc electric.
Avantajul nclzirii electrice const n reglarea uoar a temperaturii, posibilitatea generrii

cldurii ntr-un punct, introducerea unei cantiti mari de cldur ntr-un volum mic, realizarea unei
nclziri directe, fr impurificarea mediului i la orice presiune.
Dezavantajul utilizrii energiei electrice l constituie costul ridicat i impunerea unor msuri
speciale de protecia muncii.
VI.4. Aerul comprimat
n industria chimic, aerul comprimat poate fi utilizat n urmtoarele scopuri:
- ca purttor de energie (pentru acionarea aparatelor de msur i de reglare, n atelierul

mecanic etc.);
- pentru amestecare pneumatic;
- ca materie prim tehnologic;
- ca fluid inert pentru manipulri de produse, suflri, necesitnd o presiune de 4-5 at;
- pentru diferite scopuri (curirea utilajelor, uscare etc.).
66
Cap.VII. Norme de protecia muncii i P.S.I
Norme de protecia muncii
Tehnica securitii i igiena muncii
Protecia muncii cuprinde totalitatea msurilor luate pentru a se asigura tuturor oamenilor
muncii condiii bune de munc, pentru a-i feri de accidente i boli profesionale. Protec ia muncii face
parte integrant din procesul de munc.
n industria chimic problema proteciei muncii este deosebit de important deoarece pe lng
factorii de periculozitate comuni cu alte ramuri industriale elemente mobile(periculoase) ale
utilajelor, aciunea curentului electric, degajri importante de cldur, zgomote i trepidaii intervin i
numeroi factori specifici industriei chimice, cum ar fi:
-degajri de substane toxice
-prezena frecvent a unor substane inflamabile
-posibilitatea exploziilor cauzate de amestecuri explozive
-operaii cu lichide agresive care pot provoca arsuri chimice
-temperaturi ridicate.
Protecia muncii are urmtoarele trei aspecte:
-protecia juridic a muncii reprezentat de legislaia referitoare la protec ia muncii, legisla ie

constituit n principal din:
-Codul muncii
67
-Legea nr. 5/1965 cu privire la protecia muncii
-HCM nr. 2896/1966 cu privire la accidentele de munc
-Legea nr. 1/1970 privind organizarea i disciplina muncii
-Decretul 400/1981
-Alte HMC uri, Decrete elaborate de Consiliul de Stat, instruciuni i ordine elaborate de
ministere.
-protecia sanitar a muncii cuprinde msurile pentru crearea unor condiii fiziologice normale de
muncp i de suprimare a riscului mbolnvirilor profesionale.
-protecia tehnic a muncii const n msuri tehnice i organizatorice pentru uurarea muncii i
prevenirea accidentelor de munc.
Msurile de tehnica securitii muncii se pot clasifica n msuri generale, care se refer n principal la
alegerea amplasamentului ntreprinderii la planul general al acesteia i la protecia muncii n cldirile
industriale, msuri speciale, care se refer la particularitile
tehnice ale proceselor i msuri de protecie individual a muncitorului care se refer la folosirea
echipamentului i materialelor de protecie individual prevzute de norme.
Normele de tehnica securitii muncii elaborate de M.I. Ch. sunt grupate n 6 capitole:
1.Tehnica securitii muncii la instalaii, aparate i maini
2.Tehnica securitii muncii la ntreinere, reparaii i intervenii
3.Tehnica securitii muncii pentru procese fizice i chimice
4.Tehnica securitii muncii la depozitare
5.Tehnica securitii la manipulare, asamblare i transport
6.Tehnica securitii n laboratoare
n continuare se vor prezenta n linii generale problemele tratate n fiecare din capitolele menionate.
1. Acest capitol trateaz problemele de securitatea muncii la organele de maini n micare, la

echipamentul de transmitere i dispozitivele de acionare a utilajelor, la conducte i armturi, aparate
de msur i control, vase de reacie, utilaje sub presiune, aparate pentru operaii unitare(centrifuge,
extractoare, usctoare, filtre, malaxoare, etc.) precum i la principalele utilaje din industria celulozei i
hrtiei.
n preambulul la acest grup de norme se precizeaz c proiectantul este obligat s acorde tot atta
importan realizrii condiiilor de securitate ct acord i parametrilor tehnici i economici ai
aparatului i instalaiei proiectate.
2. n acest capitol se dau norme cu caracter organizatoric i tehnic. Pentru orice interven ie sau
reparaie se ntocmete un plan de aciune cu sarcini defalcate pe angajai, plan care cuprinde toate
msurile de protecia muncii. Pentru locurile de munc unde exist pericol de incendiu i explozie se
ntocmete de ctre eful seciei permisul de lucru cu foc, aprobat de inginerul ef. Pentru lucrrile la
68
instalaii sub presiune, intrarea n vase de reacie, rezervoare, instalaii n care se prelucreaz substan e
foarte agresive este necesar n plus permisul de lucru, ntocmit de eful seciei. Este strict interzis
nceperea oricrei lucrri de reparaie sau intervenie far a se face n prealabil tuturor celor ce execut
operaia respectiv instructajul de protecie a muncii.
3. Dup un capitol introductiv n care se precizeaz c absorbia noxelor de orice gen se face la
locul unde se produc ele, fiind cotraindicat absorbia lor prin ventilaie general i c alimentarea
utilajelor cu substane toxice, corozive, iritante, inflamabile i cele care degaj praf se va face
mecanizat i etan, se trateaz:
tehnica securitii muncii la efectuarea unor peocese chimice unitare(halogenri, sulfonri,

esterificri, polimerizri, etc.)
tehnica securitii muncii la efecturea unor operaii fizice unitare(extrac ie, decantare,
centrifugare, filtrare, absorbie, distilare i rectificare, uscare, etc.)
tehnica securitii muncii la operaii cu substane toxice, inflamabile, explozive, corozive,

caustice.
4. Se dau norme referitoare la amplasarea i depozitarea substanelor toxice, inflamabile i

explozive. Este interzis depozitarea n aceeai ncpere a substanelor toxice, inflamabile i explozive
cu diverse materiale. De asemenea, substanele chimice care ar putea reaciona unele cu altele
degajnd substane periculoase trebuiesc depozitate la distan unele de altele n ncperi separate.
5. Deoarece statisticile arat c 35% din accidentele de munc se nregistreaz la operaiile de

manipulare, aceast problem prezint o deosebit importan. Normele prevd ca aceste opera ii s se
execute numai sub supravegherea unui conductor al procesului de munc instruit special n acest
scop. Lucrul tinerilor sub 16 ani la operaiile manuale de ncrcare, descrcare i transport este interzis.
6. Din ansamblul normelor referitoare la aceast problem, norme care se refer la ventilaie,
manipulare a sticlriei, a dispozitivelor de nclzire, a utilajelor sub presiune, a substanelor toxice,
inflamabile, etc., trebuie reinut obligaia general, pentru munca de cercetarea, de a se aplica i
respecta n toate fazele metodologice de lucru adecvat privind protecia muncii.
Msuri P.S.I
Incendiile i exploziile se produc numai atunci cnd sunt prezente n cantiti suficiente trei
elemente: substana combustibil, oxigenul i cldura.
Cauzele principale ale incendilor i exploziilor se datoresc, pe de o parte aprinderii

siautoaprinderii, iar pe de alt parte nerespectrii parametrilor procesului tehnologic,
lipsei deinstructaj, de atenie de curenie, etc.
69
Explozile pot fi provocate de depirea instantanee a limitei de rezisten a
pereilor vaselor produs de presiunea gazelor sau vaporilor. Explozile produse de gaze
combustibile,vapori sau praf n amestec cu aerul su oxigenul au loc numai la anumite
concentraii, carevariaza cu presiunea i temperatura amestecului.Incendiul izbucnete ca urmare a
depozitarii n secii a unor substane uor inflamabilesau explozive, care depesc cantitile admise,
precurn i a depozitarii lor necorespunzatoarei n a m b a l a j e d e t e r i o r a t e , l n g s u r s e d e
c l d u r i l i p s a d e s u p r a v e g h e r e a l o r.
C e a m a i frecvent cauza de aprindere este flacra direct produs de diferite surse.Cldura

degajat n cursul unor reacii chimice exoterme, poate constitui de
asemenea,o s u r s a d e a p r i n d e r e p r o v o c n d i n c e n d i u l .
D e o s e b i t d e p e r i c u l o s e s t e c o n t a c t u l a c i z i l o r concentrai cu substanele combustibile.n

timpul desfurrii proceselor tehnologice sunt cazuri cnd incendiile sau exploziilesa produc
datorit aprinderii substanelor combustibile, fie de la o scnteie electric,
fie prinincalzirea exagerat a conductorilor electrici i aprinderea materialului izolant.
Incendile mai pot fi provocate, de asemenea, din cauza electricitii statice
i a descarcarilor atmosferice.
Msurile generale prevenirii incendiilor sau exploziilor sunt n principal:
- evitarea sau reducerea substanei combustibile;
- evitarea sau reducerea sursei de cldur;
- -evitarea sau reducerea oxigenului, aerului sau a substanelor cu coninut mare

deoxigen;
- -inpedicarea contactului substanei combustibile cu sursa de cldur;
- -controlul permanent al surselor de cldur i cunoaterea caracteristicilor periculoaseale

substanelor combustibile;
- msuri de sigurana pentru ecranarea sursei de cldura i oprirea

a c c e s u l u i substantelor combustibile n eventuala zona de ardere;
- - controlul automat al concentrailor de oxigen n zona de pericol.
Materialele folosite pentru stingerea incendiilor
Materialele stingtoare sunt acele materiale care folosite ntr-un anumit mod n
zonade ardere, acioneaz defavorabil asupra conditilor necesare arderii, oprind arderea. Materialele
stigatoare, se foloses fie n stare gazoas, lichida sau solid, fie sub forma
unor a m e s t e c u r i d e l i c h i d e c u g a z e s a u l i c h i d e c u s u b s t a n e s o l i d e n s p r o c e s u l
i r a p i d i t a t e a aplicarii sunt factorii horatatori ai stingerii incendiilor. Cele mai importante substane
stingtoare sunt: apa, aburul, solutile apoase de sruri,CCl3, dioxidul de carbon, spuma chimic i
mecanic, prafurile stingtoare.
Folosirea apei la stingerea incendilor se bazeaz pe proprietile ei de rcire i

izolare termic. Proprietile de rcire a apei s datoresc capacitii de absorbie
70
a cldurii i cldurii latente de vaporizare, care au o valoare importanta. Rcirea suprafeelor aprinse
va fi cu att mai mare cu ct cantitatea de ap transformat n vapori va fi mai mare.
D e i a p a p o s e d a a s t f e l d e c a l i t i p e n t r u s t i n g e r e a i n c e n d i i l o r, t o t u i d o m
e n i u l ei de utilizare este limitat. Produsele petroliere i dizolvanii organici nemiscibili cu apa plutesc
la suprafaa apei i ard n continuare. Apa folosit la stingerea incendilor conine sruri, deci este o
bun conductoare de electricitate, din acest motiv folosirea ei la stingerea incendiilor
produse n instalaii de nalt tensiune trebuie s se fac utilizndu-se dispozitive speciale. Unele
substane reacioneaz violent cu apa, producnd o degajare mare de cldur i de gaze, care pot da
natere incendiilor i exploziilor.
Aburul Stingerea incendiilor cu ajutorul aburului se bazeaz pe r

e d u c e r e a concentratiei de oxigen din zonele de ardere. Folosirea aburului pentru stingerea
substanelor gazoase, lichide i solide se face n locurile unde exist instalaii de cazane i i steme fixe
detingere.
n afar de reducerea concentraiei de oxigen din zona de ardere, la sti
n g e r e a incendiilor contribuie i efectul mecanic al jetului. Acest procedeu se folosete
la stingerea incendiului la coloanele de rectificare, la conducte, etc.
Soluii apoase de saruri n scopul mbunatirii calitii apei se folosesc

adaosuri:CaCl, Na2SO4,etc. Prin evaporarea apei aceaste soluii formeaz la suprafaa metalului
aprins u n s t r a t d e s a r e c a r e s e t o p e t e , i a r n u n e l e c a z u r i s e d e z a g r e a g a .
S o l u i i l e d e s r u r i s e folosesc la stingtoarele manuale.
CCl4 Ar e p r o p r i e t a t e a d e a s t i n g e f o c u l , n s n n c p e r i n c h i s e p o a t e d a
n a t e r e fosgenului, gaz foarte toxic. CC14 se folosete la stingerea incendiului la instalatile
electrice de nalt tensiune, la motoarele cu ardere intern, la substanele lichide i solide pe o
suprafatamica, etc.
CO2 Nu arde i este un slab conductor de electricitate, cea ce permite folosirea lui la stingerea
incendiilor izbucnite n instalaiile electrice. Introdus n zonele de ardere, C0 2 dilueaz
atmosfera, reducnd concentraia de oxigen i a substanei combustibile, micsorandsau oprind arderea.
Spumele stingtoare Spuma este format din bule de gaz nconjurate de

u n s t r a t subtire de lichid. n prezent se folosesc dou tipuri de spume: chimice i
mecanice. Spuma chimic este rezultatul unei reacii chimice i se compune din bule de
gaz care au un invelisdin soluii apoase de sruri. Spumele mecanice se realizeaz prin
amestecarea mecanic a soluiei. Densitatea spumelor este mica permind plutirea la
suprafaa produselor petroliereseparand flacr de substan combustibil.
Prafuri stingtoare n compoziia acestor prafuri intra diferite sruri i

substantec a r e c o n t r i b u i e l a t o p i r e a l o r. P r a f u r i l e s t i n g t o a r e m p i e d i c a d e z v o l t a
r e a a r d e r i i p r i n acoperirea suprafeelor solide aprinse cu un strat izolator care prin topirea
sarii.contribuie.mai.act i v l a s t i n g e r e a i n c e n d i u l u i . D e g a j a r e a u n o r s r u r i , p r o d u c e g a
z e n e c o m b u s t i b i l e c a r e contribuie la stingerea incendiului.
71
Bibliografie:
1. www.wikipedia.com
2. C. Oniscu, Tehnologia produselor de biosintez, Editura Tehnic, Bucureti, 1978
3. Anca-Irina Galaction, D. Cacaval, Metabolii secundari i bioreactoare, Ed. BIT,
Iai, 2004
4. D. Cacaval, C. Oniscu, Anca-Irina Galaction, Inginerie biochimic i biotehnologie,
vol III, Ed. Performantica, Iai, 2004
5. C. Descu, Chimia i tehnologia medicamentelor, Ed. Didactic i Pedagogic,
Bucureti, 1994
6. C. Oniscu, Chimia i tehnologia medicamentelor, Ed. Tehnic, Bucureti, 1988
7. C. Oniscu, D. Cacaval, Inginerie biochimic i biotehnologie, vol. I, Editura
InterGlobal, Iai, 2002
8. t. Bonta Microbiologie industrial, Litografia UTI, Iai, 1984
9. Silvia Curteanu, t. Ungureanu, Automatizarea proceselor din industria
chimic, Editura Tehnic "Gh. Asachi", Iai, 2000;
72
73

Tehnologia de Obtinere A Streptomicinei Repaired

Încărcat de

Informații document

Titlu original

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

Tehnologia de Obtinere A Streptomicinei Repaired

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

CUPRINS

Cap. I. Memoriu tehnic...............................................................................................2

Cap. II. Tehnologia de fabricaie.. .3

II.1. Domenii de utilizare i proprietile produsului....3

II.2. Variante tehnologice ..6

II.3. Alegerea variantei optime..8

II.4. Descrierea procesului tehnologic adoptat..9

II.4.1. Elaborarea schemei tehnologice..10

II.4.2. Materii prime, intermediare i auxiliare..20

II.4.3. Mecanismul reaciilor biochimice...29

II.4.4. Cinetica proceselor de fermentaie discontinu..29

II.4.5. Aspecte termodinamice ale proceselor fermentative..34

II.4.6. Bilanuri de materiale..36

II.4.7. Consumuri specifice....45

Cap. III. Controlul fabricaiei........46

III.1. Controlul, reglarea i automatizarea procesului tehnologic.46

III.2. Controlul de calitate.54

III.2.1. Metode de analiz ale materiilor prime i intermediare....58

III.2.2. Metode de analiz a produsului finit..58

Cap. IV. Produse secundare.Deeuri de fabricaie.Epurarea apelor reziduale..............59

Cap.VII. Norme de protecia muncii i P.S.I.................67

Dupa precizarea variantei optime se elaboreaza schema tehnologica de obtinere a

In capitolul IV sunt prezentate utilitatile care sunt folosite in procesul de obtinerii

II.1. Domenii de utilizare i proprietile produsului

Structur chimic a streptomicinei a fost stabilit prin reacii de degradare a studiului

streptidin (II) streptoz (IV)

H2N C HN NH C NH2 H2 N NH2

II.2. Variante tehnologice

Studiile ntreprinse pentru elucidarea mecanismului de biosintez a streptomicinei au

Figura2.1 . Dinamica vscozitii i a criteriului Reynolds:

Acumularea masei celulare produce o cretere mare a vscozitii mediului i o reducere a

Figura 2.2. Variaia pH-ului i rH-ului n procesul de fermentaie

II.3.Alegerea variantei optime

II.4. Descrierea procesului tehnologic adoptat. Elaborarea schemei tehnologice.

Precursor Surse de N, C i energie, glucoz,

H2O Pregtirea mediului de

abur Sterilizarea mediului de

Inocul Fermentaie Sterilizare aer

H2SO4 Eluie soluie de sulfat de streptomicin

Aer cald Atomizare sulfatului de streptomicin comercial

1. Pregtirea mediului de cultur

Tabelul 2.1 Compoziia mediilor sintetice utilizate n tehnologia streptomocinei

Adugat n % la mediul cu:

n ansamblu, procesul de fermentaie biochimic(Fig.2.3) cuprinde trei faze metabolice

2. Sterilizarea mediului de cultur

Fig.2.4 Instalaia de sterilizare a mediului de cultur la 120 125 C

Fig.2.5 Diagrama timp temperatura pentru sterilizarea continua la 120 125 C

Filtrul cu fibre de sticl

Fig.2.6Filtru cu fibre de sticl pentru sterilizarea aerului

Reducerea rezistentelor la filtrare, prin prelucrarea lichidelor de fermentaie, a permis utilizarea

Fig. 2.7 Filtru rotativ cu vid i cu strat adjuvant

(1 tambur, 2 corpul distribuitorului, 3 cuit micrometric, 4 material filtrant, 5 cuva pentru

Separarea miceliului din mediul de cultur

5. Sorbia pe schimbtori de ioni

Tabelul 2.2. Tipuri de schimbtori de ioni, denumirile i capacitatea de schimb

Pentru extracia i purificarea streptomicinei se ntrebuineaz cationii slab acizi, transformai

Str NH2 + HOH Str NH3]+ OH-

Figura 2.8 . Schema de principiu a instalaiei de separare a streptomicinei cu

II.4.2. Materii prime, intermediare i auxiliare

Maetriile prime utilizate n tehnologia obinerii streptomicinei sunt:

Glucoz, conform STAS SR9+A1 glucoza are urmtoarele caracteristici:

b) Condiii tehnice de calitate proprietile organoleptice ale glucozei sunt prezentate n

Miros: caracteristic unei fermentaii lactice;

Str. sulfat pierdut = 0,04f =0,04679.05244=27,1620976