Gua # 1 de laboratorio

Materia: Remediacin de suelos

Laboratorista encargado: Hugo Nelson Espinoza Burbano
Docente encargado: MSc. Jenny Lucia Huertas Delgado

DETERMINACIN COLORIMTRICA DE LA MATERIA ORGNICA (WALKLEY

AND BLACK)

La materia orgnica comprende todos los compuestos orgnicos que se

encuentran en el suelo, todos los restos de plantas y animales, as como los
productos orgnicos de la transformacin de estos residuos, conocidos como
humus. Entre los factores que determinan su contenido en el suelo se encuentran:
las condiciones climticas, las labores de cultivo, contenido de bases, textura y
drenaje del suelo, rotacin de cultivos y tipo de vegetacin, relieve, material de
origen y reaccin del suelo.

La materia orgnica del suelo es uno de sus constituyentes esenciales. Su

influencia sobre las caractersticas qumicas, fsicas y qumico fsicas de los
suelos sobrepasa su participacin cuantitativa; la fertilidad y capacidad productiva
del suelo depende del contenido de humus y materia orgnica, ya que constituyen,
una fuente nutritiva para los organismos heterotrficos del suelo (caractersticas
biolgicas); influye de manera decisiva en propiedades fsicas tales como la
estructura, la capacidad de retencin de humedad, etc., y tambin en
caractersticas qumicas, como la capacidad de adsorcin de cationes (capacidad
de intercambio catinico), suministro de nutrientes a las plantas (tanto los cationes
adsorbidos a su superficie Ca+2, Mg+2, K+, NH4+ y microelementos) como los
liberados cuando la materia orgnica se mineraliza; N, P y S entre otros que
forman parte constituyente de la misma;; es decir, influye tanto en el rgimen de
los nutrientes como en la capacidad transformadora del suelo.

La descomposicin de los residuos orgnicos est regulada por una serie de

factores que determinan el tipo de descomposicin y de humus que se forma entre
los cuales se tienen: el tipo de residuo orgnico, la reaccin del suelo (pH), la
temperatura, la relacin suelo aire; el tipo de microorganismos presentes; la
relacin carbono/nitrgeno en los suelos, en las plantas y en los microorganismos.

El principio del mtodo se basa en el tratamiento de la muestra de suelo con un

volumen suficiente de solucin de dicromato de potasio que acta como oxidante
en un medio de cido sulfrico concentrado. El calor desprendido por la reaccin
exotrmica del cido al diluirse,, favorece la reaccin del dicromato para que oxide
la materia orgnica. Se desarrolla un color verde por el cido crmico reducido en
cual es proporcional a la materia orgnica y se puede determinar en un
colormetro a 585 nm. La reaccin qumica que se lleva a cabo es la siguiente:

2K2Cr2O7 + 8H2SO4 + 3C 2K2SO4 + 2Cr2(SO4)3 + 3CO2 + 8H2O

MATERIALES:

Pipetas volumtricas de 2 ml; pipetas graduadas de 5, 10; 25 y 50 ml; tubos de

ensayo de 50 ml; cronmetro; balones volumtricos de 100 y 1000 ml; estufa con
control de temperatura (105: 5 C), erlenmeyers de 250 ml, dispensadores de 5,
10 y 50 ml, balanza de precisin ( 0,01 g); tamiz No. 30 (0,595 mm de abertura);
espectrofotmetro Perkin Elmer Lambda 1 A; desecador; cabina de extraccin de
gases; plancha de calefaccin.

Reactivos y su preparacin:

1. Solucin de dicromato de potasio (K2Cr2O7 G.A.) 2N. Pesar 98,18 g del

reactivo previamente secado en una estufa a 105 C durante 2 horas;
disolver en 800 ml de agua destilada aplicando calor, dejar enfriar y,
completar luego el volumen a 1 L, con agua destilada. Guardar en frasco
mbar.
2. Acido sulfrico concentrado (H2SO4 G.A.)(No menor del 96 %).
3. Solucin patrn de Sacarosa. Secar 70 g de sacarosa a 105 C durante dos
horas; despus de enfriar en un desecador disolver 50 g de sacarosa
(C12H22O11) y llevar a un litro con agua destilada. Cada ml de esta solucin
contiene 50 mg de sacarosa.
 a. Soluciones de trabajo para grficas patrn. Tomar de la solucin patrn,
alcuotas de 5, 10, 15, 20, 25 y 50 ml, depositarlas en balones aforados
de 100 ml y llevar a volumen con agua destilada.
b. De cada una de las soluciones preparadas tomar 2 ml, depositarlas en
un erlenmeyer de 250 ml y secarlos a la estufa a 105 C, de manera que
cada uno contiene 5, 10, 15, 20, 25 y 50 mg de sacarosa para colorear,
siguiendo el mismo procedimiento utilizado para las muestras. Se
elabora una grfica de concentracin Vs. absorbancia. De esta forma se
verifica la linealidad del mtodo y la longitud de onda del colormetro.

Nota: al establecer la rutina solo se lleva un patrn de suelo el cual no

debe tener una desviacin mayor de 2 %. Si la desviacin es mayor,
debe repetirse o hacer una nueva grfica.

Procedimiento:

1. Pesar 0,125 g de suelo al aire y tamizado con malla No. 30 (0,595 mm de

abertura), y pasarlo a un erlenmeyer de 250 ml.
2. Aadir 5 ml de solucin de dicromato de potasio 2 N y mezclar el suelo (y los
patrones preparados) con la solucin dndole un giro al erlenmeyer, cuidando
de que la muestra quede impregnada del reactivo.
3. En una cabina de extraccin de gases, aadir 10 ml de cido sulfrico
concentrado, con dispensador y mezclar suavemente durante un minuto. Dejar
la mezcla en reposo durante media hora.
4. Simultneamente realizar un ensayo de valoracin en blanco (sin suelo) de la
misma manera indicada en los numerales 1, 2 y 3.
5. Diluir la solucin con 50 ml de agua destilada.
6. Dejar enfriar y sedimentar mnimo 2 horas.
7. Transvasar cuidadosamente el sobrenadante a tubos de ensayo de 50 ml.
8. Dejar en reposo de un da para otro.
9. Leer la absorbancia a 585 nm, cuadrando el cero con el blanco de la tanda.

Clculos y expresin de los resultados:

 El contenido de materia orgnica (M.O.) en el suelo se expresa en
porcentaje (%), calculado segn la siguiente frmula:

M.O. (%) = -0,649 + 51,233 (Abs) 16,307 (Abs) 2

El resultado sobre la muestra patrn no debe desviarse en ms de 2

%.

Informe:

La entrega del informe debe contener lo siguiente:

1. Introduccin.
2. Objetivos.
3. Justificacin.
4. Materiales y mtodos.
5. Resultados.
6. Anlisis de resultados.
7. Discusin.
8. Conclusiones.
9. Bibliografa.

BIBLIOGRAFA
Unigarro, A., & Carreo, M. (2005). Mtodos Qumicos para el anlisis de
suelos. Universidad de Nario. Pasto, Colombia.