INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLGICAS

DEPARTAMENTO DE FISIOLOGA

Qumico Farmacutico Industrial

Fisiologa General

C. Dra. Ana Lilia Gutirrez Lozano

Prctica 4. Potencial de difusin y potencial de lesin.

Equipo 5, 4FM1
Hernndez Carlos Alejandra Monserrat
 Introduccin
La membrana plasmtica que es semipermeable puede permitir el paso de partculas
(iones) siempre a favor del gradiente de concentracin. La difusin, proceso que no
requiere de energa es frecuente como forma de intercambio celular.

El movimiento de molculas dentro de la clula se lleva a cabo mediante el transporte

celular, dicho transporte puede ser activa o pasiva. Para el inters de esta prctica
nicamente se hablara del transporte pasivo el cual hace referencia a la difusin.

El transporte pasivo es el intercambio simple de molculas de una sustancia a travs de la

membrana plasmtica, durante el cual no hay gasto de energa, debido a que los iones
difunden a favor del gradiente de concentracin o a favor de un gradiente elctrico, es
decir, de un lugar donde hay una gran concentracin a uno donde hay menor. El proceso
celular pasivo se realiza por difusin. Este es el cambio de un medio de mayor
concentracin (medio hipertnico) a otro de menor concentracin (un medio hipotnico).

Figura 1.- Ejemplos de difusin simple y difusin facilitada

En este caso se tomara en cuenta la difusin de iones a travs de la membrana, estos

iones tiene una carga por lo que le confieren la caracterstica de generar un gradiente
elctrico entre la membrana y el lquido extracelular, donde las cargas negativas estarn
en el lquido intracelular y las positivas en el lquido extracelular cuando esto se cumpla se
tendr un potencial de membrana en reposo. Tambin en las clulas excitables como
las neuronas se tendr un potencial de difusin este se presentara cuando haya una
diferencia de potencial (voltaje) en la membrana esto como una consecuencia de la
+
permeabilidad selectiva de los iones con cargas opuesta (ej. K y Cl ), para cada

ion existe un potencial de equilibrio, este se presenta cuando el gradiente electroqumico

del ion participante es igual pero en sentido contrario, esto se puede calcular con la
Ecuacin de Nernst denotada de la siguiente manera:
 RT Ce
Eion= ln
zF Ci

Figura 2.- Potenciales de equilibrio para el musculo esqueltico de mamferos (IZQ.) y para el axn gigante de
calamar (DER.).

Sin embargo como ya se mencion antes, la membrana no es solo permeable para un

ion, tambin tiene permeabilidad selectiva para otros, el potencial de difusin se genera
por varios factores 1) la polaridad de la carga elctrica de cada uno de los iones. 2) la
permeabilidad de la membrana a cada uno de los iones y 3) las concentraciones de los
respectivos iones en el interior y en el exterior de la membrana, tomando en cuenta estos
factores se puede calcular el potencial de membrana en reposo o en cualquier estado
de la membrana, este se puede calcular con la Ecuacin de Goldman-Hodkin y Katz
denotada de la siguiente manera:

RT Pk [ k ] e+ PNa [ Na ] e + PCl [ Cl ] i
Em =
F ln Pk [ k ] i+ PNa [ Na ] i+ PCl [ Cl ] e

El potencial de lesin es la diferencia de potencial entre una regin normal de la superficie

de un musculo y una regin donde se haya presentado una lesin, el valor del potencial
de lesin se aproxima al del potencial de membrana por que la superficie lesionada est
casi en el potencial del interior de la clula, siendo as la mejor manera que encontraron
los investigadores para medir el potencial de membrana de clulas excitables como las de
musculo.

Objetivos.
-Demostrar experimentalmente que la difusin de un electrolito en membrana artificial
semipermeable genera una diferencia de potencial (voltaje).
-Realizar la determinacin del potencial de lesin de msculo esqueltico de rana.
-Calcular el potencial de lesin en msculo gastrognemio de rana, utilizando la ecuacin
de Nerst con diferentes concentraciones de Potasio.
 La abertura del orificio debe ser aprox. de 3
Potencial de
Localizar cmara de aire del huevo, cm de dimetro, posteriormente desechar
difusin usando el
en ese sitio romper el cascaron. contenido (yema y clara)
cascaron de huevo.

Desprender cuidadosamente el Con aguja de diseccin

Colocar en el interior del huevo golpear levemente el
cascaron fracturado evitando
solucin 400nM de KCl y uno de cascaron de huevo en el
romper la membrana formando una
los electrodos de medicin. extremo opuesto del
ventana de 0.5 cm de dimetro.
primer orificio.
En vaso de pp de 50 mL colocar solucin de KCl 1nM,
5nM, 10nM, 2.5nM, 50nM y 100nM hasta el borde del Cortar la piel de una pata de la rana,
vaso. Coloque el cascarn de huevo en la boca del Potencial de lesin exponer el musculo gastrocnemio y
vaso de tal forma que la ventana quede en contacto separarlo cortando los tendones que lo
con el lquido del vaso e introducir por un extremo el unen al hueso
otro electrodo. Medir en el multmetro el potencial.
Introducir el tubo de vidrio en Pasar el musculo por el anillo de goma
Repetir el punto anterior con el anillo de goma con solucin hasta la mitad, cortar la mitad restante
cada una de las soluciones, LIC y sujetarlo a un soporte y jalarlo para que la parte seccionada
0.005M, 0.025M, 0.01M, 0.05M, con la pinza de 3 dedos quede dentro de este
0.1M

Introducir el musculo en un v de pp
Conectar los dos electrodos al
conteniendo solucin Ringer. Medir
multmetro y anotar la lectura
el potencial de lesin del musculo
Sustituir solucin de Ringer por
tratado, colocando un puente salino
solucin K2SO4 0.025 y leer la dif
del electrodo rojo en la solucin LIC
de potencial en el multimetro.
y el otro electrodo en la solucin
Ringer,
 Resultados Experimentales
[C ] e Voltaje [mV] Ecuacin de Voltaje [mV] Datos
ln Nernst experimentales
[ C ] i [mM]
-5.99 -0.153 -0.115
-4.38 -0.11 -0.096
-3.68 -0.09 -0.091
-2.77 -0.07 -0.076
-2.07 -0.053 -0.052
-1.38 -0.035 -0.036
0
-7 -6 -5 -4 -3 -2 -1
-0.02

-0.04

-0.06

-0.08
Ecuacion de Nerst
Voltaje [mv] Linear (Ecuacion de Nerst )
-0.1
Datos experimentales
-0.12 Linear (Datos experimentales )

-0.14

-0.16

-0.18

Relacion entre las concentraciones ionicas extracelular e intracelular ln[C]e/[C]i [mM]

+
Figura 3.- Voltaje del potencial de equilibrio para el ion K a diferentes concentraciones extracelular,
calculado con la ecuacin de Nernst y con los datos experimentales.
 [C ] e Voltaje [mV] Voltaje [mV] Voltaje [mV]
ln Ecuacin de Datos Ecuacin de
[C]i
Nernst experimentales Goldman
[mM]
-11.08 -0.28 -0.153 -0.0958
-0.082 -0.082 -0.11 -0.082
-0.064 -0.064 -0.09 -0.064
-0.04 -0.04 -0.07 -0.04
-0.023 -0.023 -0.053 -0.023
-0.0050 -0.025 -0.025

0
-12 -10 -8 -6 -4 -2 0

-0.05

-0.1

Nernts
Linear (Nernts)
Voltaje [mV] -0.15
Experimental
Linear (Experimental
Goldman
-0.2
Linear (Goldman )

-0.25

-0.3

Relacion entre las concentraciones ionicas extracelular e intracelular ln[C]e/[C]i [mM]

Figura 4.- Voltaje del potencial de lesin a diferentes concentraciones extracelular, calculado con la ecuacin de
Nernst, con los datos experimentales y con la ecuacin de Goldman.
 Discusin.
La utilizacin de huevo de gallina es debido a que solo interesa la membrana testcea
interna debido a su carcter bsico (presencia de aminocidos, hidroxiprolina e
hidroxilisina) impidiendo el flujo a travs de la membrana del ion cloruro lo que solo
permite el paso definitivo de los iones potasio, generando as un potencial de difusin.
Sabiendo esto, se utiliz KCl a diferentes concentraciones, debido a la permeabilidad que
tiene la membrana a los iones potasio y casi impermeable a los iones cloruro, basndonos
en la ecuacin de Nernts la cual se utiliza para calcular el potencial de equilibrio de un ion
a una determinada diferencia de concentracin a travs de las membranas, este potencial
(Ein) se producir a travs de la membrana de un determinado ion si este se encontrara
en equilibrio y fuera el contribuyente al potencia de la membrana ; se puede observar que
el ion potasio es el responsable de la variabilidad o dispersin de los datos en la grfica
experimental (figura 3) debido a que no est en equilibrio si no que va en contra de su
gradiente de concentracin, ya que al rellenar el huevo con KCl 400 mM intracelular, lo
cual hay una difusin hacia afuera de la membrana a causa de la elevada concentracin
dentro del interior de la membrana, dado que la carga de los iones es positiva y su
perdida crea un potencial negativo en el interior, al cabo de unos milisegundos, este
cambio de potencial adquiere la magnitud suficiente para bloquear la difusin neta del
potasio a pesar de su alto gradiente de concentracin de este ion.

La utilizacin del msculo gastrocnemio de rana, es porque este animal es ectotermo y el

msculo an despus de ser extrado funciona como si estuviera funcionando dentro de la
rana, tambin se utiliza este msculo debido a su fcil extraccin, porque su orientacin
anatmica es superficial y las fibras musculares estn ordenadas de manera paralela, de
esta manera al poner un electrodo dentro del msculo el potencial que genera cada fibra
muscular es sumado con el de las dems y el multmetro puede registrar el potencial del
msculo. El sistema para medir el potencial de lesin cuenta con un puente salino en el
cual se encuentra una sal que al ser un electrolito fuerte esta disociado completamente, lo
que permite que los iones (aniones y cationes) viajen a travs de este puente para
estabilizar las cargas que se generan mediante la medicin del potencial.
En el potencial de lesin se utiliz soluciones extracelulares de K2SO4 y el ion SO42- que
es un anin prcticamente impermeable, solo se considera la concentracin del K
extracelular, sin embargo, al utilizar la solucin de Ringer (LEC) la cual contiene iones K,
Na y Cl el potencial puede considerarse solo al ion K+ porque en el reposo la
permeabilidad al Na+ es baja y al K+ alta pero no infinita, adems en las clulas
musculares de rana, la constante de permeabilidad del sodio es, aproximadamente 1/100
de la del K, al obtenerse por la ecuacin de Nernst, se descarta que pueden contribuir al
establecimiento de la diferencia de potencial a travs de esta los otros iones.
El comportamiento en la grfica de la membrana del huevo (figura 3) no presenta cambios
significativos en los valores prcticos respecto a los tericos cuando difunde un ion (K+),
debido al voltaje de la membrana se deduce que la permeabilidad de la misma no posee
una cantidad suficiente de canales dependientes de voltaje, si no que en la difusin de
iones del LIC al LEC guardan siempre una semejanza entre el equilibrio que se ve
reflejado en los datos por la ecuacin de Nernst.
El comportamiento en la grfica del potencial de lesin en msculo de rana (figura 4), al
igual que en la membrana del huevo, demuestra un aumento en el voltaje con la ecuacin
de Nernst al someterse a diferentes concentraciones que van ligadas con el cociente de
las concentraciones del ion que difunde, pues cuanto mayor es este cociente, mayor es la
tendencia del ion a difundir en una direccin y, por tanto, mayor ser el potencial de
Nernst necesario para impedir la difusin neta adicional. El comportamiento entre los
datos tericos y los prcticos difieren de manera significativa, que se puede explicar por la
clula muscular, al hacer el corte, se pierde una porcin representativa de la
concentracin intracelular de K+, alterando los resultados.
Cuando los gradientes de concentracin son ms grandes tiene a ser el potencial ms
negativo, conforme estos gradientes disminuyen el potencial de membrana tiende a cero,
mas no llega al valor de cero ya que tiene un valor distinto en pendiente y ordenada el
origen; algunos de los factores que hayan afectado en la diferencia entre los datos
tericos y prcticos son:
La permeabilidad hacia el ion Cl- a pesar de ser casi impermeable no ponemos asegurar
que haya difundido algn In Cl- hacia el lado externo de la membrana, as como tambin
la permeabilidad del K+ no es infinita.
El valor de la ordenada al origen prctico tiene influencia, por el contenido interno-proteico
de la membrana del huevo, porque no se lav correctamente y probablemente quedaron
residuos peptdicos y de AA, dentro de la membrana, los cuales poseen cargas que
hayan dado lectura de voltaje.

Conclusin.
En la membrana de msculo esqueltico, gastrognemio de rana al aumentar el gradiente
de concentracin, el potencial adquiere mayor negatividad elctrica.
Las membranas del huevo de gallina, funciona como una barrera selectiva, para regular la
entrada y salida de molculas vitales a las clulas.
Tanto el gradiente qumico como el elctrico son responsables del equilibrio de los iones a
travs de la membrana.
La difusin de un electrlito a travs de una membrana cuya permeabilidad es selectiva
genera un potencial de difusin.
Al aumentar la concentracin de LEC, aumenta el potencial, debido a la diferencia de
potencial externo e interno de la membrana celular.
 Bibliografa
Dr.Edgar Segarra E. 2006.Fisiologa de los aparatos y sistemas. Universidad de
Cuenca, Facultad de Ciencias Mdicas. Pag.23-30.

Fernando Bergillos. 2000. Toxicologa clnica. Lesiones por picaduras y

mordeduras de animales, Volumen 1. Ed.Bubok Publishing S.L. Barcelona.
Pag.49-52.

Tresguerres, J.A.F. (1993). "Fisiologa humana". Interamericana-McGraw-hill.

Madrid.