EXTRACCION DE DNA

INTRODUCCION

El cido ribonucleico (ARN) y el cido desoxirribonucleico (ADN) son

macromolculas que intervienen en el almacenamiento y en la transferencia
de la informacin gentica. Son componentes fundamentales de la clula y
constituyen, en conjunto, entre el 5 y el 10% del peso seco.

Normalmente no se encuentran solos si no que se hallan formando

nucleoprotenas, ya que suelen unirse a determinados tipos de estas como
las histonas.

El ARN se localiza tanto en el citoplasma celular como en el ncleo,

mitocondrias y cloroplastos, mientas que el ADN se sita fundamentalmente
en el ncleo de la clula, y tambin cloroplastos y mitocondrias en
pequeas cantidades.

Poseen una importancia manifiesta por el hecho de que ellos dirigen y llevan
a cabo la sntesis de protenas y, por tanto, de los enzimas necesarios para
el funcionamiento celular.

Por otra parte, el ADB es el vehculo de la herencia, que se transmite de

padres a hijos, de generacin en generacin.

En esta prctica realizaremos la extraccin del ADN de clulas animales

poniendo de manifiesto su estructura fibrilar y el extraordinario grado de
arrollamiento, que permite el empaquetamiento en el ncleo celular de
largusimas cadenas de esta molcula.

FUNDAMENTACION

El ADN se encuentra en el interior del ncleo celular, disperso y muy

replegado, unido a protenas para formar la cromatina. Para extraerlo es
necesario homogenizar el tejido y romper las clulas para separar el ncleo,
romper este para liberar el ADN, separarlo de las protenas y precipitarlo
para extraerlo de la solucin.

Aparecer como un agregado de fibras blanquecinas que se adhieren a la

varilla de vidrio. Por ltimo, se puede situar un porta, teirlo con un
colorante bsico y observarlo al microscopio
MATERIALES Y METODOS

Tejido animal (hgado de pollo)

Trozo de tela para filtrar (gaza)
Pipeta
Alcohol 96
Varilla de vidrio
Solucin de NaCl 2M
Embudo
Probeta
Vaso de precipitados
Detergente liquido tipo lavavajillas

Trituramos el hgado mediante la licuadora para homogeneizar el tejido.

Este procedimiento tambin rompe muchas clulas liberando su contenido.
Al terminar se obtiene una mezcla ms homognea y fcil de filtrar
despus.

Filtramos varias veces el resultado en la gaza para despus dejarlo caer en

el vaso de precipitado. Este filtrado es lento y difcil, pero retendr en el
pauelo restos de tejido

Aadimos al filtrado resultante un volumen igual de solucin de NaCl 2M.

Esta disolucin tan concentrada tiene varios efectos. En primer lugar
provoca un choque osmtico que es capaz de romper algunas membranas
no afectadas por el tratamiento anterior. Adems, las cargas positivas de los
iones Na+ atraern luego las cargas negativas del ADN mantenindolo en la
disolucin.

Luego aadimos 1 ml de detergente lquido (Sapolio) y removimos

suavemente, mezclando bien pero evitando que se forme espuma.
Repetimos la mezcla varias veces. Si se forma espuma se puede retirar con
una esquina de papel de filtro. El detergente completa la rotura de las
membranas al disolver y separar los lpidos de las mismas. Tambin
interviene en la separacin de las protenas que rodean al ADN. Si es posible
volver a filtrar, se obtendr una solucin ms limpia de restos.

Por ultimo aadimos unos 50 ml de alcohol muy fro, con mucho cuidado
fue agregado dejndolo resbalar muy lentamente el alcohol por la pared de
aquel para formar una capa sobre la solucin anterior. Es muy importante
evitar que se mezclen ambas soluciones, pues ser en la interfase donde
precipitar el ADN.
RESULTADOS

El ADN fue apareciendo poco a poco en la interfase agua-alcohol en forma

de grumos blancos. Se favorece la precipitacin y recoleccin si se va
recogiendo mediante la varilla de vidrio, u otro instrumento similar,
introducindola ligeramente bajo la interfase y hacindola girar suavemente
mientras se extrae.

As se irn pegando en la varilla unas hebras blancas que corresponden a

miles de fibras de ADN.

DISCUSIONES

CONCLUSIONES
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS