REACCIN DE TRANSAMINACIN Y SU RECONOCIMIENTO POR MEDIO DE

CROMATOGAFA EN PAPEL
INTRODUCCIN
La reaccin de aminotransferasa ocurre en dos pasos:
1.- El grupo amino de un aminocido es transferido a la enzima, para generar el
cetocido correspondiente y la enzima aminada.

2.- El grupo amino es transferido al cetocido aceptor (ej. -cetoglutarato) para

formar el producto aminocido (ej. Glutamato) y regenerar la enzima.
Para transportar al grupo amino, las aminotransferasas requieren de la

participacin de una coenzima que contiene un aldehdo, el piridoxal-5-

fosfato (PLP), que es un derivado de la piridoxina (vitamina B6).

OBJETIVO
Cuantificar la actividad de la transaminasa ALAT/TGP presente en un extracto
crudo de hgado empleando, un mtodo cromatogrfico y otro espectrofotomtrico.
RESULTADOS
No se pudo realizar la curva tipo ya que el cido glutmico estaba muy diluido y al
leer en el espectrofotmetro las absorbencias eran muy bajas.
Clculos:
12.6
5 L= =0.2692
46.8
Rf

12
10 L= =0.2564
46.8
Rf
 11.4
15 L= =0.2435
46.8
Rf

11.1
20 L= =0.2371
46.8
Rf

10.9
25 L= =0.2329
46.8
Rf

10.1
problema= =0.2158
46.8
Rf

DISCUSIONES
Se parti de una preparacin cruda de transaminasa, de la cual se comprob el
efecto sobre la Alanina y el cido -cetoglutarico. Sabiendo que la transaminasa
en la alanina va a transferir su grupo -amino, al carbono de la -cetoglutarato
con la intervencin del piridoxal fosfato como coenzima, formando as el glutamato
y el -cetoalaninato.
Esto se confirmo realizando una cromatografa en papel Whatman, en la cual se
coloc el cido glutmico en diferentes cantidades, adems de colocar la muestra
problema y un testigo, una muestra de alanina, la cual se utiliz para identificar la
muestra que no reacciono con el testigo. El problema nos determin la actividad
enzimtica con los sustratos y el testigo nos ayudo a conocer la concentracin de
alanina.
Por el mtodo de espectrofotomtrico se determino la concentracin de las
muestras que se colocaron en el papel Whatman.
Estas concentraciones de cido, sirvieron para realizar la curva tipo, la cual ya
mencionada anteriormente no se pudo realizar ya que el cido glutmico estaba
muy diluido.
CONCLUSIN
La transferasa, transfiere un grupo amino de un aminocido a un -cetoacido
aceptor, dando como resultados la formacin de un nuevo cetocido.
BIBLIOGRAFA
Bioqumica, Voet D., Voet J., 3ra edicin, editorial medica panamericana,
2004, pg. 1024.
Vejar Rivera Eva Irma. Prcticas de Bioqumica descriptiva, Editorial
Unison. Impreso en Mxico 2005. 2 Edicin. Pg. 150-154