INTRODUCCION

Los medios de cultivo, el material de vidrio del laboratorio y los instrumentos

hospitalarios tambin suelen esterilizarse con calor. Al parecer el calor destruye a
los microorganismos mediante la desnaturalizacin de sus enzimas, es decir, los
cambios resultantes de la estructura tridimensional de estas protenas producen su
inactivacin.

La resistencia al calor vara entre los diferentes microbios; esta diferencia puede
expresarse a travs del concepto de punto de muerte trmica. El punto de muerte
trmica (PTM) es la temperatura ms baja necesaria para causar la muerte de
todas las bacterias en una suspensin lquida particular en 10 minutos.

Otro factor que se debe considera en la esterilizacin es el tiempo requerido, que

se expresa como tiempo de muerte trmica (TMT), el menor tiempo necesario
para que todas las bacterias de un cultivo lquido mueran a una temperatura
determinada. Tanto el PMT como el TMT son guas tiles que indican la intensidad
del tratamiento requerido para destruir a una poblacin dada de bacterias.

El tiempo de reduccin decimal (TRD o valor D) es un tercer concepto relacionado

con el grado de resistencia bacteriana al calor. Es el tiempo, en minutos, en el que
se destruye el 90% de la poblacin de bacterias a temperatura determinada.

Esterilizacin por calor seco.

El calor seco mata por los efectos de oxidacin. Uno de los mtodos ms sencillos
de esterilizacin por calor seco es el flameado.

Otra forma de esterilizacin por calor seco es la esterilizacin por aire caliente. Los
objetos que se van a esterilizar con este mtodo se colocan en una estufa en la
que el mantenimiento de una temperatura alrededor de 170 C durante cerca de 2
horas asegura la esterilizacin.

Esterilizacin por calor hmedo.

El calor hmedo destruye a los microorganismos sobre todo por la coagulacin de

las protenas (desnaturalizacin), que es causada por la rotura de los enlaces de
hidrogeno que mantienen la estructura tridimensional. Este proceso de
coagulacin es familiar para cualquiera que haya observado cmo se cocina la
clara del huevo.

Un tipo de esterilizacin por calor hmedo es la ebullicin, que causa la muerte de

las formas vegetativas de las bacterias patgenas, de casi todos los seres vivos y
de los hongos y sus esporas en unos 10 minutos, por lo general mucho antes.
La esterilizacin confiable con calor hmedo requiere temperaturas superiores a
las de ebullicin del agua. Estas temperaturas elevadas se alcanzan con ms
frecuencia mediante vapor bajo presin en una autoclave. La colocacin en una
autoclave es el mtodo preferido de esterilizacin, a menos que el material que se
desea esterilizar pueda ser daado por el calor o la humedad.

CUESTIONARIO

Cuestionario

1. Describir un autoclave y un horno de calor seco.

Autoclave: Es un instrumento que usa vapor de agua a presin para esterilizar

artculos tales como gasas, instrumentos quirrgicos o dentales, esterilizar
soluciones, y materiales que sern utilizados en la microbiologa. Los autoclaves
solo son utilizados para descontaminar materiales tale como especmenes con
sangre, cultivos bacterianos, o contenedores llenos de riesgos biolgicos antes de
su eliminacin.
Los autoclaves pueden variar en tamao desde muy grande a uno pequeo. Los
autoclaves grandes obtienen vapor ya sea de un generador o de una tubera
conectada para la facilitacin de la planta de vapor. Los pequeos crean su propio
vapor calentando agua.

Horno de calor seco: Permite esterilizar muy bien instrumental oxidable, material
de vidrio (cagas de Petri, etc.) que soporte el calor sin daarse, etc. que debe
envolverse con papel blanco el cual soporta las temperaturas del horno.
Al aparato se le llama horno Pasteur o Poupinel, que consiste en un recipiente
metlico de diversos tamaos, generalmente pequeos, de forma rectangular o
redonda , el cual tiene una puerta que se abre a manera de charnela, tiene una
bandeja o bien entrepaos que permiten meter materiales de diversos tamaos y
formas, que se calienta mediante resistencias elctricas.

2. Qu tipo de material se puede esterilizar en el horno de calor seco y en el

autoclave? Dar ejemplos.

Autoclave: Permite esterilizar artculos tales como gasas, instrumentos quirrgicos

o dentales, esterilizar soluciones, y materiales que sern utilizados en la
microbiologa, material no oxidable, material de cristalera, material contaminado
(textil, cajas de Petri sembrada, cristalera, etc.), medios de cultivo.
Esta tcnica de esterilizacin es til para destruir los microorganismos resistentes,
principalmente bacterias que forman esporas.
Horno de calor seco: Permite esterilizar muy bien instrumental oxidable, material
de vidrio (cagas de Petri, etc.) que soporte el calor sin daarse, etc. que debe
envolverse con papel blanco el cual soporta las temperaturas del horno.
 3. Cul es la temperatura y el tiempo que se requieren para lograr la
esterilizacin en el horno de calor seco?

Las condiciones de esterilizacin son:

Dos horas a 160 C o una hora a 180 C. Es un procedimiento muy usado en
laboratorios, clnicas, consultorios y hospitales.

4. Por qu es necesario ajustar el tiempo y la temperatura para lograr la

esterilizacin?

Son factores que influyen en la esterilizacin ya que todos los microorganismos

son susceptibles en distinto grado a la accin del calor. El calor provoca
desnaturalizacin de las protenas, fusin y desorganizacin de las membranas
y/o procesos oxidativos irreversibles en los microorganismos.
Conforme aumenta la temperatura por encima de la temperatura mxima de
crecimiento, se producen efectos letales en los microorganismos.

5. En qu consisten los mtodos de arnoldizacin y pasteurizacin?

Arnoldizacin: Consiste esencialmente en exponer el material que queremos

esterilizar, no en agua hirviendo, sino a los vapores del agua hirviendo. Este
proceso se puede llevar a cabo en el autoclave solo dejando las vlvulas de
escape abiertas. Este proceso puede ser continuo, o bien intermitente en vario
das consecutivos, o en esterilizador de Arnold.
Esta tcnica es aplicable a medios bacteriolgicos y sustancias qumicas que no
pueden calentarse a ms de 100 C sin que resulten daados; sin embargo, estos
materiales pueden resistir esa misma temperatura del vapor solo y as es posible
esterilizarlos por medio de esterilizacin fraccionada o tindalizacin y hubiera
esporas resistentes y germinaran en la siguiente exposicin son destruidas y si
persisten se siguen exponiendo por periodos de incubacin y exposicin al calor.
Pasteurizacin: La leche, nata y ciertas bebidas alcohlicas (cerveza y vino) se
someten a tratamientos de calor controlado que slo matan a ciertos tipos de
microorganismos pero no a todos. La leche pasteurizada no es estril. La
temperatura seleccionada para la pasteurizacin se basa en el tiempo trmico
mortal de microorganismos patgenos (es el tiempo ms corto necesario para
matar una suspensin de bacterias a una temperatura determinada).
Mycobacterium tuberculosis es de los microorganismos patgenos ms resistentes
al calor que puede transmitirse por la leche cruda y se destruye en 15 minutos a
60 C. Posteriormente se descubri que Coxiella burnetti, agente causal de la
fiebre Q, se encuentra a veces en la leche y es ms resistente al calor que
Mycobacterium tuberculosis por lo que la pasteurizacin de la leche se realiza a
62,8 C durante 30 minutos o a una temperatura ligeramente superior, 71,7 C
durante 15 segundos (Flash-Pasteurizacin).

Referencias

Mora. L, Gonzlez. R, Manual de bioindicadores y otras tcnicas de control en la

esterilidad por calor seco y hmedo. Mxico

Estridge B, Reynolds. A, Walters. N, Basic Medical Laboratory Techniques (4 ed.)

United States of America: Delmar

Stainer. R, Ingraham. J, Wheelis. M, Painter. P, (1992) Microbiologa (2 ed.)

Espaa: Revert

Tortora, G. Funk, B., Case, C. (2007). Introduccin a la Microbiologa (9 ed.)

Argentina: Mdica Panamericana.