Determinarea indicelui de refractie (metoda liniilor Becke)

http://www.olympusmicro.com/; http://www.microscopyu.com

Obiective
Prezentarea notiunilor referitoare la:
1. indice de refractie
2. uleiuri de imersie
3. refractometrul Abbe
4. dispersia datorat procesului de intensificare a culorilor
5. utilizarea microscopului pentru determinarea indicelui de refractie

Introducere
Mai multe fenomene pot aprea atunci cnd lumina interacioneaza asupra materiei:
-lumina se poate reflecta fara sa existe si alt tip de interactiune sau
-daca materialul este transparent pot exista interactiuni care depind de tipul materialului - de
exemplu poate avea loc o schimbare a directiei de propagare a luminii la trecerea din aer in apa.
In general, schimbarea directiei de propagare la trecerea dintr-un mediu transparent cu indice de
refractie n1 in alt mediu transparent cu indice de refratie n2 se numeste refractie. Refractia este
cauzata de viteza de propagare care este diferita in cele doua medii.

Doua marimi prin care se poate descrie fenomenul de refractie sunt (figura 1):
-unghiul de incidenta care este unghiul format de raza incidenta cu normala la suprafata de
separatie dintre cele doua medii;
-unghiul de refractie care este unghiul format de raza refractata cu normala la suprafata de
separatie dintre cele doua medii.

Diversele materiale refracta lumina diferit. Unghiul de refractie depinde de unghiul de incidenta
si indicii de refractie ai celor doua materiale.
Relatia ce guverneaza fenomenul de refractie este legea lui Snell (legea refractiei):

, (1)
in care
- nk reprezinta indicele de refractie al materialului 1 respectiv 2
-r este unghiul de refractie
-i este unghiul de incidenta

1
Figura 1 Refractia apare atunci cand lumina strabate interfata dintre doua medii cu indici de
refractie diferiti

Cand lumina se propaga dintr un mediu cu indice de refractie mai mic intr-un mediu cu indice de
refractie mai mare raza refractata va fi deviata spre normala (apropiata spre normala).
Cand lumina se propaga dintr un mediu cu indice de refractie mai mare intr-un mediu cu indice
de refractie mai mic raza refractata va fi departata de normala.
Cand cei doi indici de refractie sunt egali raza trece dintr-un mediu in altul fara refractie
(nedeveiata).

Indicele de refractie al unui mediu se defineste ca raportul dintre viteza luminii in vid si viteza
luminii in mediul respectiv:

, (2)
in care c este viteza luminii in vid si Vm viteza luminii in mediul respectiv.
Indicele de refractie al vidului este 1, al aerului este 1.0003. In general, pentru materiale
transparente optic indicele de refractie este mai mare ca 1.

In expertize criminalistice fenomenul de refrctie a luminii poate fi folosit pentru determinarea

indcelui de refractie al unor particule transparente de exemplu particule fine sau cioburi de
sticla (diversele tipuri de sticla au indici de refractie diferiti si prin urmare valoarea indicelui de
refrcatie poate proba daca doua tipuri de sticla sunt diferite).

Cand un obiect transparent, un ciob de sticla de exemplu, este imersat intrun lichid si vizualizat
la microscop, ciobul apare cu o aur care consta dintr-o zona colorata in jurul ciobului.
Aceasta aur apare din cauza reflexiilor interne create la marginea ciobului (la interfata sticla
lichid). Aceasta aura este numita linie Becke.
Intenstitatea liniilor Becke depinde de diferenta dintre indicii de refractie al sticlei si al lichidului
inconjurator. Cu cat aceasta diferenta este mai mare cu atat liniile Becke vor apare mai distinct.
Daca cei doi indici de refractie sunt egali in cazul iluminarii in lumina monocromatica liniile
Becke se estompeaza (dispar) proba devenind invizibila.

2
In practica insa, foarte rar cioburile raman invisibile datorita variatiei indicelui de refractie cu
lungimea de unda (dispersie).

Dispersia indicelui de refractie este o masura a gradul de variatie a indicelui de refractie cu

lungimea de unda. Masurarile indicelui de refrctie au loc de regula la lungimile de unda ale
sodiului - linia D (589 nm, galben) si hidrogenului linia C (656 nm, rosu) si F (486 nm,
albastru).

Dispersia indicelui de refractie se calculeaza:

, (3)
in care
-nD este indicele de refractie la 589 nm,
- nF este indicele de refractie la 486 nm,
- nC este indicele de refractie la 656 nm.

Dispersia indicelui de refractie este importanta pentru ca este posibil ca ciobul de sticla si
lichidul de imersie sa aiba acelasi indice de refractie la o lungime de unda dar sa aiba indici de
refrtactie diferiti la alta lungime de unda si de aceea este important sa fie analizat (reprezentat) si
grafic.
In experimentele ce urmeaza vom utiliza lumina alba care contine toate lungimile de unda si prin
urmare particulele de sticla vor putea fi aproape totdeauna vizibile.
Un alt avantaj al liniei Becke este ca nu indica numai o diferenta intre indicii de refractie ai celor
doua medii ci de asemeni poate indica care mediu are indice de refractie mai mare ceea ce face
sa fie utilizate la determinarea indicilor de refractie ai probelor transparente imersate in ulei.
Pe masura ce distanta de lucru (distanta obiectiv-obiect) creste linia Becke se va deplasa spre
mediul cu indice de refractie mai mare (sau daca distanta de lucru scade linia Becke se va
deplasa spre mediul cu indice de refractie mai mic). Aceasta ne permite sa utilizam diverse
uleiuri de imersie, cu diferite valor ale indicelui de refractie, pentru a determina indicele de
refractie al unor obiecte transparente.
In examinarile criminalistice se folosesc des uleiurile Cargille datorita faptului ca au volatilitate
scazuta, stabilitate chimica buna si acopera o plaja mare ale valorilor indicelui de refractie.
Sunt cazuri cand este util sa se amestece doua uleiuri cu indici de refractie diferiti pentru a obtine
un licid cu indice de refractie intermediar. Pentru a se determina indicele de refractie al noului
lichid obtinut se utilizaeaza un refractometru Abbe.

Deoarece densitatea unui material se schimba cand acesta este incalzit si indicele de refractie
variaza la incalzire. Daca nu este posibil controlul temperatirii in timpul analizelor se recurge la
o corectie de temperatura. Variatia indicelui pe grad este utilizat ca, coeficient de temperatura al
indicelui de refractive (dn/dT). Uleiurile Cargille comerciale au aceasta marime marcata pe
fiecare sticluta. Indicele de refractie raportat de producator este cel de la 25 C in timp ce
analizele cu imersie au loc al temepraturi de ordinul 23C.
Pentru a se efectua corectia de temperatra se aplica relatia:

3
 , (4)
in care
-n25 este indicele de refractie la 25C,
-n23 este indicele de refractie la 23C,
-dn/dT este valoarea pozitiva a coeficientului de temperature notat pe fiecare sticluta cu ulei.
Pentru a verifica rezultatul corectiei tinem cont ca indicele de refractie scade cu cresterea
temperaturii (si invers)

Materiale si aparatura
- microscop optic compus cu obiective de diverse mariri (4X, 10X, 20X, 40X, )
- refractometru Abbe
- trusa microscop
- particule de sticla cu un indice de refractie cunoscut
- particule de sticla cu un indice de refractie necunoscut
- set Cargille de uleiuri de imersie (cu indici de refractie in domeniul 1.451.80)
- 15 amestecuri de uleiuri, cu valori diferite pentru indicele de refractie, obtinute prin
amestecarea in rapoartele prezentate mai jos a doua uleiuri vegetale: ulei de masline si ulei de
cuisoare:
Amestec # 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
parti ulei de masline 100% 13 12 11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0
parti ulei de cuisoare 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 100%
- lame si lamele de miocroscop.

PARTEA I: Determinarea indicelui de refractie al probelor de sticla prin metoda liniilor

Becke

Procedeu
1. se alege o particula de sticla cu indice de refractie (IR) cunoscut care se imerseaza in ulei
Cargille:
a) cu IR mai mare
b) cu IR mai mic
(de ex daca sticla are 1.52 utilizam uleiuri cu IR 1.50 si 1.54)

2. cu obiectivul 10X focalizam marginile particulei de sticla. Se utilizaeaza filtrul orange pentru
a se obtine lumina monocromatica - pentru a masura nD.

3 se inchide condensorul la minimum. Cu particulele in ulei cu IR mai mic se observa liniile

Becke. Apoi se deplaseaza platforma in sus si in jos pentru a se determina daca sticla sau lichidul
are IR mai mare.
De tinut minte ca pe masura ce indepartam obiectivul de obiect linia Becke se va muta spre
mediul cu IR mai mare. Dac IR al sticlei este egal cu IR al uleiului particula de sticla va deveni
aproape invizibila. Care este concluzia ?

4
4. repetati pasii de mai sus pentru cazul in care particula este imersata in ulei cu IR mai mare.
Care este concluzia?

5. alegeti doua sorturi de sticla necunoscute

6. Utilizand diagrama pasilor de mai jos alegeti amestecul de ulei (de cuisoare/masline) pentru a
gasi amestecul in care ciobul de stical este cel mai greu de observat (cel mai nereliefat).

Figura 3 diagrama pasilor pentru deterinare aindicelor de refractie Incepeti cu amestecul 8. Daca
IR al sticlei este mai mare decat al lichidului treceti la solutia 12. Daca IR al sticlei este inca mai
mare incercati cu solutia 14. Daca IR al sticlei este mai mic decat cel al solutiei 14 incercati cu
solutia 13. Dupa aceste incercari se poate concluziona ca indicel de refractie are valori cuprinse
intre valorile solutiilor 13 si 14

PARTEA II: determinarea indicelui de refractie prin identificarea indicelui de refractie al

uleiului

Obesrvatie: cea mai intalnita eroare la refractoemtrul Abbe este contaminarea unui lichid cu
altul. Curatati prismele cu atentie de la o proba la alta utilzand 95% alcool etilic apoi stergeti
cu hartie pentru curatat lentile (sau hartie de filtru).

ATENIE: Prismele nu trebuie zgariate ! NU le atingeti cu degetele !

Procedeu
1. porniti refractometrul Abbe.
2. utilizand uleiul de cuisoare aplicati o picatura intre prisme (dar nu atingeti prismele) astfel
incat sa se formeze o pelicula uniforma la inchiderea prismelor.
3. priviti prin ocular-gasiti linia de demarcatie intunecat/luminos.
4. ajustati prisma de compensare pana cand linia de demarcatie nu mai prezinta franje colorate
5. aduceti linia de demarcatie in dreptul intersectiei firelor reticulare (figura 4).
6. cititi indicele de reftactie pe scala gradata. Indicele de refracti poate fi citit cu 4 zecimale
exacte.

5
7. Utilizati un termometru pentru masurarea temeparturii camerei. Corectati valorile citite
utilizand relatia (4).

Figura 4 a) Campul vizual al refractometrului Abbe (cmpul intunecat si cel luminos sunt bine
delimitate i centrate). b) Scala refractometrului (poate fi citita cu cinci cifre semnificative).

Intrebari pentru raport

1. ce este indicele de refractie?

2. definiti linia Becke
3. in ce directie se muta linia Becke cand o particula are IR 1.49 iar uleiul 1.46 ? de ce ?
4. ce sunt uleiurile Cargille ? Cum sunt utilizate in criminalistica ?
5. cum ati proceda daca ar trebui sa determinati o valoare a IR care este intermediara intre
valorile consecutive ale doua uleiuri ?
6. descrieti modul de functionare al unui refractometru Abbe
7. cum este controlata temperature refractometrului?
8. un lichid are IR 1.532 la temperature camerei. Lichidul are un coeficient al temeperaturii
dn/dT=0.0004. cate este valoarea IR la 20C?