Bernal Mercado Alexis Uriel

6FM2

Manitol Salado Agar o Chapman

Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y diferenciacin de
estafilococos.
Es recomendado para el aislamiento de estafilococos patognicos a partir de muestras
clnicas, alimentos, productos cosmticos y otros materiales de importancia sanitaria.
Tambin, este medio puede utilizarse para el cultivo de especies halfilas de Vibrio, si no
se dispone de medios apropiados (TCBS Medio, Medio Marino, etc.), aunque algunas
especies pueden no desarrollar.

Fundamento
Se trata de un medio altamente selectivo debido a su alta concentracin salina. Los
estafilococos coagulasa positiva hidrolizan el manitol acidificando el medio; las colonias
aparecen rodeadas de una zona amarilla brillante.
Los estafilococos coagulasa negativos, presentan colonias rodeadas de una zona roja
o prpura. Las colonias sospechosas, se repicarn en un medio sin exceso de cloruro de
sodio para efectuarles, posteriormente, la prueba de la coagulasa.
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, constituyen la fuente de
carbono, nitrgeno, vitaminas y minerales.
El manitol es el hidrato de carbono fermentable, el cloruro de sodio (que se
encuentra en alta concentracin) es el agente selectivo que inhibe el desarrollo de la
flora acompaante, y el rojo fenol es el indicador de pH (7.4 0.2).
Las bacterias que crecen en un medio con alta concentracin de sal y fermentan el
manitol, producen cidos, con lo que se modifica el pH del medio y vira el indicador de pH
del color rojo al amarillo.
Los estafilococos crecen en altas concentraciones de sal, y pueden o no fermentar el
manitol.
Los estafilococos coagulasa positiva fermentan el manitol y se visualizan como colonias
amarillas rodeadas de una zona del mismo color.
Los estafilococos que no fermentan el manitol, se visualizan como colonias rojas,
rodeadas de una zona del mismo color o prpura.

Frmula (g/L)
Instrucciones
Extracto de carne 1.0
Suspender 111 g de polvo por litro de
Pluripeptona 10.0
agua destilada. Reposar 5 minutos y
d-Manitol 10.0
mezclar calentando a ebullicin durante 1
Cloruro de Sodio 75.0
o 2 minutos. Distribuir y esterilizar en
Agar 15.0
autoclave a 118-121C durante 15
0.002
Rojo de fenol minutos.
5
pH final: 7.4 0.2
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Siembra
Sembrar en superficie un inculo denso de la muestra.

Incubacin
De rutina: durante 18-24 horas a 35-37 C, en aerobiosis.
La American Public Health Association (A.P.H.A) recomienda la incubacin durante 3 das
a 32 C, en aerobiosis.

Resultados
Caractersticas de las
Microorganismos Crecimiento
colonias
Staphylococcus aureus Excelente
Staphylococcus epidermidis Bueno
Escherichia coli Inhibido
Klebsiella pneumoniae Inhibido

Caractersticas del medio

Medio preparado: rojo

Almacenamiento
Medio deshidratado: a 10-35 C.
Medio preparado: a 2-8 C.