EL MICROBIOMA EN ENFERMEDADES AUTOINMUNES

Por: Kevin Alexander Ortiz Barrientos

Qumico Bilogo

El ser humano ha evolucionado con una gran variedad de

microorganismos por miles de aos. A todo el conjunto de microorganismos y

virus (comensales, simbiticos y patognicos) que habitan en el cuerpo humano

en grandes proporciones con respecto a las clulas humanas se le conoce

como el microbioma humano. Tradicionalmente este trmino ha sido utilizado

para describir solamente a los microorganismos que habitan en el intestino del

ser humano; sin embargo, hoy en da se conoce que existe una gran diversidad

de microorganismos en otras regiones del cuerpo humano (Barin, Tobias, &

Peterson, 2015) y que esta riqueza en la diversidad debe de ser considerada al

hablar del microbioma humano.

Desde hace mucho tiempo se sabe que esta diversidad de

microorganismos es muy importante para la salud, pero las tcnicas

microbiolgicas convencionales no haban permitido conocer el perfil de

microorganismos que constituan esta comunidad microbiana en las distintas

poblaciones humanas y en modelos animales. Los recientes avances en

tcnicas de secuenciacin de los cidos nuclicos han permitido que en la

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investigacin se realicen importantes descubrimientos sobre la relacin del

microbioma con los estados de enfermedad y salud del ser humano.

Al momento del nacimiento el ser humano es un ser estril (sin la

presencia de microorganismos) y para la edad adulta la cantidad de

microorganismos que este posee, es mayor la cantidad de clulas somticas y

germinales que el ser humano posee. Tanto la cantidad como la diversidad de

microorganismos que componen el microbioma se ven afectados por factores

ambientales, fisiolgicos propios del ser humano y genticos. Estas

observaciones plantean un dilema en temas relacionados con la tolerancia

inmunologca y la autoinmunidad: debera considerrsele al microbioma como

propio del ser humano o como algo ajeno a l? Debera de considerrsele

como un factor ambiental (por qu responde a las condiciones que lo rodean) o

un factor epigentico (por qu es transmitido de generacin a generacin)?

Pareciera que la postura adecuada es considerar al microbioma como

algo propio del ser humano, debido a que los mecanismos de tolerancia que

posee el cuerpo humano (para evitar atacar a los tejidos) son empleados para

mantener el balance con el microbioma. La prdida de la tolerancia hacia los

tejidos y molculas propias es lo que lleva a la produccin de enfermedades

autoinmunes y la observacin de diferencias importantes en el microbioma, en

personas con enfermedades autoinmunes ha llevado a la realizacin de varias

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teoras, sobre las posibles implicaciones sobre los mecanismos de tolerancia

(Barin et al., 2015).

El microbioma juega un rol muy importante en el desarrollo y funcin del

sistema inmunolgico del ser humano. Como se mencion con anterioridad, el

ser humano es estril al momento del nacimiento, por lo que la microbiota

adquirida durante los primeros aos de vida produce en cierta manera la

educacin del sistema inmunolgico del neonato. Este primer contacto,

generalmente producido, a travs del contacto con la madre y en la lactancia

materna. La leche humana ha sido descrita como un importante modulador de

la microbiota del neonato principalmente, debido a que los microorganismos

contenidos en la leche proceden del intestino de la madre. Esto se da a travs

de la ruta enteromamaria, la cual se encarga de la transmisin de ciertos

microorganismos del intestino de la madre hasta la glndula mamaria, los

cuales a su vez son transmitidos al neonato a travs de la alimentacin con la

leche materna(Vieira, Pagovich, & Kriegel, 2015).

Desde hace bastante tiempo se conocen los beneficios de la lactancia

materna, en la proteccin contra enfermedades infecciosas y diabetes, pero

diversos estudios prospectivos, que an se estn llevado a cabo, han

identificado a la lactancia materna como un factor protector en el desarrollo de

anticuerpos autoinmunes, particularmente en el perodo en el cual se introducen

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los cereales a la dieta de los nios (4-6 meses de edad). De estos

autoanticuerpos es de especial importancia la produccin de autoanticuerpos

contra los islotes pancreticos, en los cuales la positividad de dos o ms de

estos autoanticuerpos en las edades tempranas de la vida predisponen al

desarrollo clnico de diabetes autoinmune del adulto de inicio tardo (LADA, por

sus siglas en ingls) dentro de un tiempo aproximado de quince aos. Por ello,

la prevencin secundaria para retardar la conversin un objetivo importante de

las investigaciones llevadas a cabo (Vieira et al., 2015).

Diversos estudios que utilizan modelos animales, libres de grmenes han

demostrado deficiencias en los sistemas inmunolgicos de estos. Una de las

principales deficiencias, surge de la microbiota que corresponde a una barrera

primaria de defensa, en esta se producen molculas contra agentes patgenos

y ocupan el mismo nicho, por lo que compiten por el mismo lugar con los

agentes patgenos.

El sistema inmunolgico juega un papel muy importante en la diversidad

del microbioma y de manera recproca los microorganismos asociados al ser

humano influyen de manera significante en el desarrollo y funcin de la

inmunidad innata y adaptativa. Los microorganismos comensales son

detectados por mltiples sensores del sistema inmunolgico innato. La

sealizacin del sistema inmunitario innato, a su vez, activa las respuestas del

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sistema inmunitario adaptativo. Por lo que es probable que los microorganismos

activen mecanismos de autoinmunidad adaptativa, a travs del sistema innato.

Las clulas del sistema inmunolgico innato como las clulas dendrticas,

macrfagos, polimorfonucleares neutrfilos y natural killer son necesarias para

el desarrollo de procesos autoinmunes, clulas que pueden ser influenciadas

por los microorganismos (Mathis & Benoist, 2011).

Los macrfagos aislados de ratones libres de grmenes son menos

propensos a la liberacin del factor de necrosis tumoral alfa (TNF-) y una

mayor liberacin del interleucina 10 (IL-10) cuando son expuestos a

lipopolisacridos bacterianos cuando son comparados con macrfagos aislados

de ratones libres de grmenes especficos (RLGS). Aunque no se ha observado

una disminucin de las clulas dendrticas del bazo, si se ha reportado una

disminucin en la expresin de IL-15, IL-6, TNF-, y los interferones del tipo I

(Mclean, Dieguezjr, Miller, & Young, 2014).

Lo anteriormente descrito hace pensar que el efecto de los

microorganismos sobre el sistema inmunolgico innato es favorecido por la

comunidad microbiana y no por microorganismos especficos como tales,

aunque como se describir ms adelante esta postura no es lo observado en

las poblaciones humanas.

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 En el sistema inmunolgico adaptativo los microorganismos que residen

en la mucosa gstrica pueden tener una importante influencia sobre el

surgimiento y/o la estabilizacin de subpoblaciones celulares de linfocitos T

CD4+. Por ejemplo, las bacterias filamentosas, gram positivo,

esporoformadoras, anaerbicas obligadas, relacionadas con Clostridia

promueven el desarrollo de una alta poblacin de linfocitos Th17 en la lmina

propia del intestino delgado de los ratones (mathis et al) favorece la inflamacin.

Por otro lado, especies como Bacteroides fragilis y el gnero Lactobacillus y

Bififobacterium promueven grandemente la presencia de linfocitos Treg en el

intestino. Estas bacterias favorecen la produccin de citocinas

inmunomoduladoras como la IL-10 y Foxp3, las cuales caracterizan a los

linfocitos Treg (Kamada, Seo, Chen, & Nez, 2013).

De la evidencia anteriormente presentada se puede entonces deducir

que cualquier cambio en la microbiota induce una disbiosis y un evento

patolgico. Diversos factores provocan una disbiosis en la microbiota del ser

humano, quiz el ms sencillo de explicar es el ocasionado por el uso de

antibiticos. La utilizacin indiscriminada y poco consciente de este tipo de

sustancia puede provocar una disbiosis, a manera general se conoce que los

antibiticos van a favorecer la aparicin de los linfocitos Th17 (Kamada et al.,

2013).

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 Otro factor que es de suma importancia y que ha sido objeto de intenso

estudio en los ltimos aos es la dieta consumida por la persona. Es conocido

que las dietas occidentales (ricas en grasas, protena animal y carbohidratos

simples, y bajas en fibra vegetal) provocan una reduccin en la diversidad

microbiana al compararlas con los microorganismos contenidos en poblaciones

agrcolas, lo cual lleva a la postulacin que las dietas de las poblaciones

agrcolas estar asociadas con una reducida tasa de enfermedades

inflamatorias (Vieira et al., 2015).

Las diferencias entre las poblaciones microbianas de dos poblaciones

fue comprobada en un estudio en el cual se compar una poblacin de Papua,

Nueva Guinea (poblacin agrcola) y otra de Nebraska, Estados Unidos

(poblacin occidental). En el estudio se encontr mayor diversidad de especies

nicas en la poblacin agrcola; sin embargo, la mayor parte de los

microorganismos era compartida entre ambos grupos, lo cual indica que aunque

las poblaciones poseen dietas occidentales estas an van a poseer la mayor

parte de microorganismos del microbioma humano (Vieira et al., 2015).

Lo anterior lleva a pensar que, el efecto causado del microbioma en

enfermedades autoinmunes se debe a microorganismos particulares, y no a la

identidad taxonmica de los microorganismos; las prcticas de lactancia

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materna cobran importancia debido a que el ensamblaje de las comunidades

microbianas en el ser humano se da en las primeras etapas de la vida.

Como se ha podido demostrar, el microbioma posee un importante rol en

la regulacin de la respuesta inmunitaria. Desde hace bastante tiempo se

conoce que ciertos microorganismos patognicos proveen de los ligandos

necesarios para propiciar una reactividad cruzada con antgenos propios, a lo

que se le conoce como mimetismo molecular. Esto ha llevado a plantear una

conexin entre los microorganismos comensales y la autoinmunidad.

Algunos ensayos que han utilizado pptidos tetramericos del HLA en

humanos y ratones han mostrado evidencia concreta de la presencia de

receptores de linfocito T (TCR), que presentan reactividad cruzada con

antgenos, que no han sido expuestos previamente. Estos receptores han

podido ser estimulados con pptidos sintticos derivados de bacterias. Aunque

esto prueba que la promiscuidad del receptor de linfocito T puede iniciar un

proceso autoinmune an no existe evidencia de que este suceso ocurra in vivo

(Yurkovetskiy, Pickard, & Chervonsky, 2015).

Por otro lado, es necesario que el antgeno se encuentre disponible a las

clulas dendrticas para que la presentacin antignica por el MHC se lleve a

cabo. Esto ha sido hipotetizado posible en los procesos inflamatorios y

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autoinmunes en los que la reduccin de la diversidad de microorganismos ha

creado las condiciones necesarias para que los microorganismos o sus

productos atraviesen la barrera epitelial y sean de esta manera expuestos a las

clulas dendrticas para que se lleve a cabo la expresin antignica. Sin

embargo, hace falta evidencia slida del rol de los microorganismos como

proveedores de los determinantes antignicos de los linfocitos T autoreactivos

(Yurkovetskiy et al., 2015).

Quiz uno de los modelos ms contundentes es el propuesto para las

espondiloartropatas, ha sugerido a bacterias gram negativo, como Klebsiella, el

poseer antgenos similares al HLA-B27 y que dan surgimiento a la reactividad

cruzada de anticuerpos, los cuales se unen a las clulas que expresan HLA-

B27 y causan la enfermedad. El rol especfico de los polisacridos de Klebsiella

pneumoniae continua en debate, debido a la observacin del aumento de los

niveles de anticuerpos especficos del isotipo IgA e IgG en pacientes con

espondilitis anquilosante al compararlos con personas sanas. De acuerdo con

esta postura, la espondilitis anquilosante es el resultado de episodios repetitivos

de una artritis reactiva por Klebsiella.

Otros microorganismos propuestos en la patognesis e iniciacin de la

enfermedad son los virus. Diversos estudios de esclerosis mltiple han sugerido

que la enfermedad puede ser iniciada o exacerbada por infecciones con

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patgenos como Chlamydia pneumoniae, el virus del herpes humano 6 y

Epstein-Barr (Anaya et al). El Parvovirus B19 es considerado como un factor

desencadenante para la artritis reumatoide, esto debido a que se ha encontrado

presente en el 75 % de las biopsias de pacientes con artritis reumatoide en

comparacin con el 17 % de las membranas sinoviales de pacientes con

osteoartritis y otras artritis (Anaya et al., 2016).

El virus del Epstein-Barr tambin ha sido asociado a artritis reumatoide,

encontrndose en el 34 % de los pacientes con HLA-DR4 comparado con el 10

% de individuos sanos. Esta enfermedad en particular se han realizado avances

en la dilucidacin de los mecanismos moleculares empleados por los

microorganismos comensales para la produccin de la enfermedad. El modelo

empleado animal que ha permitido estos avances el empleo de ratones

transgnicos con el receptor de clulas T K/BxN. En este modelo la fase de

iniciacin es predominantemente a travs del sistema inmunolgico adaptativo,

en el cual se da la acumulacin de los complejos autoantgeno/autoanticuerpo

en depsitos en la membrana sinovial y la subsecuente activacin de los

mecanismos de inmunidad innata que dan como consecuencia una artritis

erosiva (Yurkovetskiy et al., 2015).

Es importante notar la dualidad del microbioma en la respuesta

inmunolgica. En los modelos libres de microorganismos de K/BxN se ha

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observado una atenuada artritis autoinmune, as como una disminucin en los

autoanticuerpos, centros germinales, y Th-17 del bazo. Este fenotipo tambin

se caracteriz por la prdida de Th-17 en la lmina propia del intestino. Al

momento de someterlos a bacterias filamentosas gram positivo

esporoformadoras (SBF, por sus siglas en ingls) se demostr un aumento de

los linfocitos Th-17, autoanticuerpos y artritis en el modelo K/BxN, lo cual apoya

el rol de estas bacterias comensales en el desarrollo de poliartritis erosiva, la

cual se asemeja histolgicamente a la artritis reumatoide del ser humano

(Yurkovetskiy et al., 2015).

En el modelo K/BxN, la enfermedad autoinmune se ve disminuida por la

ausencia de grmenes, en otros modelos animales la enfermedad autoinmune

se ve exacerbada, sugiere un mecanismo diferente. Consistente con la

hiptesis de la higiene, la incidencia de diabetes tipo I es mayor en pases con

prcticas de higiene ms estrictas; esta incidencia es tambin mayor en las

colonias de ratones no-obesos diabticos (NOD, por sus siglas en ingls) en

las que se ha resguardado de manera ms estricta la higiene. El rol protector

del microbioma en la diabetes tipo I este modelo es explicado por los estudios

realizados en los ratones NOD MyD88-knockout. El MyD88 es un gen del

sistema inmunolgico innato que acta como sealizador del receptor tipo Toll

like (TLR) y el receptor de interleucina 18(IL-18). La deleccin del gen en los

ratones NOD produce una alteracin en la composicin del microbioma del

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intestino y previene el desarrollo de diabetes tipo I bajo condiciones normales

de crianza. En este caso, el factor protector es atribuible a los microorganismos

comensales debido a que tanto los ratones con el gen MyD88 como los que no

lo posean tenan la misma predisposicin para padecer de diabetes cuando

eran criados en condiciones aspticas (Yurkovetskiy et al., 2015).

En este modelo experimental las bacterias SBF al ser introducidas en a

la sexta semana de la crianza de los ratones provean de un factor protector

contra la diabetes. Como se describi con anterioridad, en otros modelos induce

el desarrollo de esclerosis mltiple y artritis inflamatoria. An queda la

interrogante sobre la forma de actuar del SBF lo har junto a otros

comensales, o actuar de manera individual? Aunque an no se posea una

respuesta a esta interrogante, los modelos anteriormente descritos evidencian

la dualidad presentada por algunos microorganismos comensales, los cuales

actan como protectores o inductores de los procesos autoinmunes.

Diferentes estudios han demostrado que el microbioma es un ecosistema

cambiante que posee varios factores en el modelo. Muchos de estos estudios

determinan cules son estos microorganismos y cmo varan en el tiempo. Sin

embargo, las limitaciones metodolgicas de muchos de ellos representan un

reto, debido a que se basan en identificacin de los microorganismos, por su

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cultivo y mucho de los microorganismos comensales no son aislables en las

condiciones del laboratorio.

Los estudios recientes implican la identificacin de DNA en las muestras

han cobrado importancia. Es debido a los ms resientes estudios de

metagenomica que el anlisis del microbioma se est enfocando en el anlisis

de las omicas. Esto debido a que el involucramiento real del microbioma no

esta solamente limitado a la mera presencia o ausencia de los

microorganismos. Muchos de los metabolitos producidos por el microbioma

interacta con el ser humano en diferentes niveles. De ah que surja la

importancia de estudiar la expresin gentica (metatranscrptmica), las

protenas (metaprotemica) y los metabolitos (metametabolmica) del

microbioma. Estos anlisis, incluyen las posibles interacciones dentro del ser

humano y bajo ciertas condiciones proveen la informacin suficiente sobre los

mecanismos empleados por microorganismos especficos que interacten con

el sistema inmunolgico.

Las tcnicas ms recientes de anlisis del microbioma incluyen la

secuenciacin del gen 16S rRNA. Dentro de las principales razones para la

utilizacin de este gen se puede encontrar que el gen se encuentra presente en

todos los miembros de la poblacin, debido a que es un gen que juega un rol

importante en la traslacin de los procariotas. Tambin es importante notar que

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las variaciones dentro del gen solamente se van a producir con individuos de

genomas diferentes. Y por ltimo, cabe la pena mencionar que es un importante

marcador de evolucin por su extremadamente importante funcin, esto debido

a que cualquier cambio en su secuencia puede ser potencialmente letal.

En los ltimos aos se ha estudiado mucho los factores genticos que

predisponen a una persona para padecer alguna enfermedad autoinmune. Sin

embargo, esos estudios no han tomado en consideracin el DNA, RNA y las

protenas provenientes del microbioma, en la mayor parte de los estudios son

consideradas como contaminantes de los anlisis, menoscabando de esta

manera las posibles interacciones que se observan entre infecciones y el

desarrollo de enfermedades autoinmunes.

Y por ltimo, se debe estudiar a las familias con autoinmunidad, porque

no solamente permitira conocer los factores genticos transmisibles sino

tambin permitira identificar factores ambientales de exposicin para los grupos

familiares y que en alguna manera pudieran encontrarse asociados a cambios

en el microbioma y en el desarrollo de alguna enfermedad autoinmune

particular.

En conclusin, existe una gran cantidad de evidencia cientfica que

identifica al microbioma como un importante modulador de la respuesta

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inmunolgica, sin embargo, an quedan muchas dudas sobre la modulacin

ejercida por el microbioma. Estas dudas surgen principalmente porque los

mecanismos exactos, que producen estos efectos an se desconocen. La vasta

diversidad de microorganismos presentes en el microbioma no facilita esta

bsqueda, si aadimos las micas los anlisis necesarios para llevar a cabo

estas relaciones se vuelven extremadamente costosos, muy difciles y

complicados de realizar.

A pesar que se han desarrollado modelos animales que buscan en cierta

manera explicar la importancia del microbioma en el desarrollo de las

enfermedades autoinmunes, se ha obtenido cierta evidencia cientfica,

pareciera que los modelos en animales son contrarios a lo observado en los

ensayos clnicos. Posiblemente se deba a que bajo las condiciones de

laboratorio, muchos factores ambientales, nutricionales y hormonales se

encuentran debidamente controlados; mientras que en los ensayos clnicos

muchos de estos factores no son manipulados por el investigador. Otro posible

factor que impide dilucidar la importancia del microbioma en el desarrollo de las

enfermedades autoinmunes es la falta de los anlisis integrales que en cierta

manera se integran los factores genticos predisponentes con la gran

diversidad de microorganismos que se encuentren en el ser humano.

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 REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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