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Tema 19: La biotecnologa Biologa 2 Bachillerato

TEMA 19: LA BIOTECNOLOGA


1. INTRODUCCIN
2. CULTIVOS CELULARES
3. ANTICUERPOS MONOCLONALES
4. INGENIERA GENTICA
a. ADN RECOMBINANTE
b. AMPLIFICACIN DEL ADN
c. SECUENCIACIN DEL ADN
d. CLONACIN
5. APLICACIONES DE LA BIOTECNOLOGA
6. LA BIOTICA

1.- INTRODUCCIN

La BIOTECNOLOGA consiste en la utilizacin de seres vivos sencillos (bacterias y


levaduras), y clulas eucariotas en cultivo, cuyo metabolismo y capacidad de
biosntesis se utilizan para la fabricacin de sustancias especficas aprovechables
por el hombre. La biotecnologa permite, gracias a la aplicacin integrada de los
conocimientos y tcnicas de la bioqumica, la microbiologa, la ingeniera qumica, y,
sobre todo, la ingeniera gentica, aprovechar en el plano tecnolgico las
propiedades de los microorganismos y los cultivos celulares. Permiten producir a
partir de recursos renovables y disponibles en abundancia gran nmero de
sustancias y compuestos.

La biotecnologa consiste en la utilizacin de un ser vivo o parte de l para la


transformacin de una sustancia en un producto de inters.

Posee tres caractersticas bsicas:

1. Es interdisciplinar, utiliza principios de la ciencia y de la ingeniera.


2. Trabaja con seres vivos.

3. Su objetivo es conseguir un producto o un servicio tiles para el


hombre.

Desde siempre se han utilizado procedimientos biotecnolgicos para obtener


alimentos como el pan, la cerveza o el yogur aunque se desconoca que se
originaban gracias a la fermentacin provocada por diversos microorganismos. No
es hasta mediados del siglo XIX cuando la biotecnologa nace como ciencia gracias

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a los descubrimientos de Pasteur sobre las fermentaciones. Ya en el siglo XX


podemos hablar de avances importantes cuando se incorporan los conocimientos de
la base molecular de la herencia y las tcnicas de ADN recombinante.

Se pueden distinguir dos etapas en la biotecnologa:

1 Etapa: Biotecnologa tradicional, donde no se utilizan tcnicas de


manipulacin del ADN.
2 Etapa: Biotecnologa moderna, desarrollada a partir del conocimiento de
la estructura del ADN. En esta tcnica se manipula el ADN de los organismos
utilizados.

Biotecnologa tradicional

Basada en el uso de seres vivos naturales para la obtencin de productos de inters


o el aumento de la produccin.

Los individuos que se utilizan han sido escogidos mediante tcnicas de seleccin
artificial, esto quiere decir que el hombre ha potenciado el desarrollo de estos
organismos por el beneficio que le proporcionan.

Agricultura y ganadera: Se obtienen variedades de animales y vegetales


ms resistentes a enfermedades y plagas, mayor produccin de alimentos o
colores ms agradables, gracias a la seleccin artificial (cruzando individuos
con un carcter especial y seleccionando los descendientes).
Industria alimentaria: Se obtienen diversos tipos de alimentos gracias a
las fermentaciones (pan, yogur, queso, embutidos, bebidas alcohlicas)

Industria farmacutica: Utilizacin de microorganismos para la obtencin


de medicamentos (penicilina a partir de Penicillium notatum)

La biotecnologa tradicional se basa fundamentalmente en tres tcnicas:

1. Tcnicas genticas clsicas (mutacin, recombinacin y seleccin)


para seleccionar las cepas ms productivas.
2. Mejora de las condiciones fisicoqumicas de los cultivos (pH,
aireacin, temperatura) con el fin de aumentar el rendimiento.

3. Perfeccionamiento de las tcnicas de aislamiento y purificacin del


producto de inters.

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Biotecnologa moderna

Consiste en la utilizacin de tcnicas de manipulacin del ADN para la obtencin


de individuos que den lugar a productos de inters o a la mejora de la produccin.

Agricultura y ganadera: Se crean organismos modificados genticamente


(OMG) con distintos fines (resistencia a plagas y sequa, a bajas
temperaturas, a variaciones de salinidad, a herbicidas, de crecimiento
rpido, de mayor produccin, que contengan vitaminas o sustancias
beneficiosas, etc.).
Medio ambiente: Utilizacin de OGM para la biorremediacin (Recuperacin
de suelos contaminados por metales pesados, obtencin de energa
mediante la depuracin de aguas residuales, degradacin de residuos
txicos, obtencin de plsticos biodegradables)

Medicina: Diagnstico de enfermedades genticas, terapia gnica,


comparacin de muestras de ADN (pruebas de paternidad, criminologa).

Industria farmacutica: Se crean OMG con el fin de que produzcan


sustancias que no le son propias (hormonas, antibiticos, vacunas,
protenas).

La biotecnologa moderna se basa fundamentalmente en tres mbitos de


trabajo:

1. Cultivo de clulas.
2. Anticuerpos monoclonales

3. Ingeniera gentica.

2.- CULTIVOS CELULARES

El cultivo celular es el proceso mediante el que clulas procariotas o eucariotas


pueden cultivarse en condiciones controladas. En la prctica el trmino "cultivo
celular" se usa normalmente en referencia al cultivo de clulas aisladas de
eucariotas pluricelulares, especialmente clulas animales. El desarrollo histrico y
metodolgico del cultivo celular est ntimamente ligado a los cultivos de tejidos y
de rganos. El cultivo de clulas animales empez a ser utilizado durante los aos

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50, pero el concepto de mantener lneas de clulas vivas separadas del tejido de
origen fue descubierto en el siglo XIX.

Como ejemplo de reas de investigacin fuertemente dependientes de las tcnicas


de cultivo celular son:

- Virologa: establecimiento de condiciones de cultivo de virus animales y de


plantas, produccin de vacunas antivirales,...

- Investigacin del cncer

- Inmunologa

- Ingeniera de protenas. Por la produccin de protenas en lneas celulares:


interfern, insulina, hormona de crecimiento.

- Estudios de interaccin y sealizacin celular, en la diferenciacin y en el


desarrollo.

- Aplicaciones diagnsticas. Por ejemplo en medicina y farmacologa destacan el


anlisis cromosmico de clulas crecidas a partir de muestras de amniocentesis,
deteccin de infecciones virales, ensayos de toxicidad,...

- Aplicaciones mdicas: mantenimiento y produccin de tejido para transplantes.

- Aplicaciones industriales y agronmicas: produccin por reproduccin "in vitro" de


clones de plantas de inters comercial.

La lnea celular HeLa

Las clulas HeLa constituyen una lnea de clulas epiteliales humanas procedentes
de un carcinoma cervical, y las primeras clulas humanas de las cuales se
estableci una lnea celular permanente. En 1951 se practic una operacin
quirrgica a la paciente Henrietta Lacks (de ah el nombre), una mujer
afroamericana de 31 aos, en la cual se extrajeron clulas de un carcinoma en el
tero con la intencin de evaluar su malignidad. La paciente falleci 8 meses
despus a causa de su tumor.

Las clulas extradas fueron invadidas por el virus del papiloma humano,
transformndose en clulas tumorales.

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Aquellas clulas se dejaban cultivar tan bien, y proliferaban tan fcilmente en


cultivos celulares, que desde entonces comenzaron a ser empleadas a gran escala
en la investigacin. Es tal la magnitud del cultivo de clulas HeLa por parte de
laboratorios de todo el mundo, que la masa total de clulas HeLa supera
ampliamente la masa total que en su da tuvo el cuerpo de Henrietta Lacks.

3.- ANTICUERPOS MONOCLONALES

Un anticuerpo monoclonal (AcMo o Mab, del ingls monoclonal antibody) es un


anticuerpo homogneo producido por una clula hbrida (hibridoma) producto de
la fusin de un clon de linfocitos B descendiente de una sola y nica clula madre y
una clula plasmtica tumoral.

En 1975, N. Jerne, G. Khler y C. Miltein desarrollaron la tcnica de los hibridomas


para obtener anticuerpos monoclonales (Nobel de Medicina en 1984). Para producir
anticuerpos monoclonales, primero se extraen clulas B del bazo de un animal
que ha sido expuesto al antgeno. Estas clulas B son fusionadas con clulas
tumorales de mieloma mltiple (tumor linfocitario) que pueden crecer
indefinidamente en cultivo celular. Estas clulas fusionadas hbridas, llamadas
hibridomas pueden multiplicarse rpida e indefinidamente, puesto que son clulas
tumorales despus de todo y pueden producir gran cantidad de anticuerpos

Los anticuerpos monoclonales son anticuerpos idnticos porque son producidos por
un solo tipo de linfocito B. Es posible producir anticuerpos monoclonales que se
unan especficamente con cualquier molcula con carcter antignico. Este
fenmeno es de gran utilidad en bioqumica, biologa molecular y medicina.

Aplicaciones de los AcMo

Determinar la presencia de drogas, hormonas, vitaminas, citocinas,


protenas asociadas a determinados tipos de cnceres, alrgenos,
indicadores vricos, en sangre u orina.

Determinar los grupos sanguneos.

Uso teraputico para enfermedades infecciosas, autoinmunes, cncer,


alergias o en trasplantes para evitar el rechazo.

4.- INGENIERA GENTICA

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La INGENIERA GENTICA es una parte de la biotecnologa que se basa en la


manipulacin de genes para obtener esas sustancias especficas aprovechables por
el hombre: se trata de aislar el gen que produce la sustancia, e introducirlo en otro
ser vivo que sea ms sencillo -y barato- de manipular; lo que se consigue es
modificar las caractersticas hereditarias de un organismo de una forma dirigida por
el hombre, alterando su material gentico.

La ingeniera gentica permite:

Quitar uno o ms genes.


Aadir uno o ms genes.

Aumentar el nmero de molculas de ADN.

Clonar clulas.

Clonar individuos.

Crear organismos genticamente modificados (OGM).

Las enzimas de restriccin (tijeras biolgicas)

Se descubrieron en 1970. Son enzimas capaces de cortar el ADN en secuencias


especficas originando, en muchos casos, extremos escalonados denominados
cohesivos o pegajosos. Estos extremos son capaces de unirse espontneamente a
otros generados por la misma enzima. En el caso de que quisiramos insertar un
gen en un plsmido. usando esta propiedad, requeriramos para completar la tarea
la actuacin de una ligasa que formara lo enlaces fosfato.

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El Premio Nobel de Medicina de 1978 fue concedido a los microbilogos Werner


Arber, Daniel Nathans y Hamilton Smith por el descubrimiento de las endonucleasas
de restriccin lo que condujo al desarrollo de la tecnologa de ADN recombinante. El
primer uso prctico de su trabajo fue la manipulacin de la bacteria E. coli para
producir insulina humana para los diabticos.

CONSTRUCCIN DE ADN RECOMBINANTE

El ADN recombinante es un fragmento de ADN construido artificialmente a partir de


segmentos no homlogos de organismos diferentes. Suele contener un vector y el
gen o los genes de inters.

Vectores: Fragmentos de ADN que permiten transferir genes de un


organismo a otro. Los ms utilizados son los plsmidos y los virus.
Gen o genes de inters: Se obtienen a partir de genotecas creadas a
partir de ARNm aislados de las clulas que se copian a ADN complementario
(ADNc) gracias a la retrotranscriptasa.

Para introducir el gen en el vector se utilizan las enzimas de restriccin y las


ligasas. Una vez que el vector presente el gen de inters se transfiere a la clula
husped (anfitriona) que debe caracterizarse por:

1. Poder crecer rpidamente.


2. Hacerlo de manera barata.

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3. Que sea fcilmente manipulable.

Hay tres tipos de clulas husped: Bacterias (E. coli), levaduras y clulas
eucariotas de lneas celulares de mamferos. Cada uno de estos tipos celulares
tiene sus ventajas e inconvenientes. Las bacterias se caracterizan porque su
material gentico es muy simple, suelen crecer muy rpido y las condiciones de
crecimiento son bastante sencillas. Su principal inconveniente es que no llevan a
cabo algunas de las modificaciones que s realizan las clulas eucariotas en las
protenas, como la glucosilacin. Las levaduras y las lneas celulares son ms
complicadas, especialmente estas ltimas, no crecen tan rpido y suelen ser ms
difciles de tratar. No obstante, la ventaja es que ambos sistemas pueden llevar a
cabo modificaciones como las descritas anteriormente.

Posteriormente se clona la clula modificada y se obtiene un nmero elevado de


clulas idnticas capaces de fabricar la protena especfica del gen introducido.

La tcnica para obtener una protena por ingeniera gentica se realiza en varios
pasos:

Seleccin y obtencin del gen.


Seleccin de un vector.

Formacin de un ADN recombinante.

Seleccin de una clula anfitriona.

Sntesis y obtencin de protenas correspondientes al gen manipulado.

De esta forma se obtienen muchas protenas humanas como insulina, hormona del
crecimiento, factores de coagulacin, etc.

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AMPLIFICACIN DEL ADN

Para aumentar el nmero de copias de un fragmento de ADN se utilizan dos


tcnicas de amplificacin: la clonacin bacteriana y la reaccin en cadena de
la polimerasa (PCR).

La clonacin bacteriana sigue el procedimiento descrito anteriormente.

La reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) permite sintetizar en pocas


horas millones de copias de un segmento de ADN a partir de una muestra muy
pequea.

Para ello se necesita:

El ADN que se quiere amplificar (deben conocerse los extremos)


Nucletidos trifosfato

ADN cebador

ADN polimerasa que acta a temperaturas elevadas (72C)

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1.- Se calienta la muestra por encima de los 90 para provocar la


desnaturalizacin del ADN (se separan las hebras).

2.- Se baja la temperatura hasta 50C en presencia de los cebadores que hibridan
con los extremos complementarios de cada cadena.

3.- Se eleva la temperatura a 72C y la ADN polimerasa sintetiza ADN.

Repitiendo este ciclo unas veinte veces se pueden obtener hasta un milln de
copias del fragmento de ADN.

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Esta tcnica se utiliza en las pruebas de paternidad y en criminologa.

SECUENCIACIN DE ADN

Para conocer la secuencia de nucletidos de un fragmento de ADN se utilizan


tcnicas de secuenciacin. Las primeras fueron desarrolladas entre 1977 y 1980 por
los equipos de Sanger y Gilbert, pero eran procedimientos muy laboriosos.
Posteriormente se han introducido mejoras a dichas tcnicas y adems se han
automatizado e informatizado de forma que el trabajo lo realizan actualmente unos
aparatos llamados secuenciadores.

Consultar la tcnica de secuenciacin de SANGER (mtodo didesoxi)

http://www.arrakis.es/~ibrabida/vigdidesoxi.html

La secuenciacin de genes ha permitido la reconstruccin de genomas completos


abriendo paso a dos nuevas disciplinas: la Genmica y la Protemica.

Genmica

Estudia el genoma de los seres vivos. Su mayor hito es el Proyecto Genoma


Humano.

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Protemica

Estudia el conjunto de protenas expresadas por un genoma (proteoma).

Proyecto GENOMA

El Proyecto Genoma Humano (PGH) naci en 1990 con el fin de localizar, identificar,
conocer la secuencia de nucletidos y la funcin de los genes que componen el
genoma humano.

En el ao 2003 se complet la secuencia de todo el genoma humano. Aunque no se


conoce la funcin de todo l su estudio ha proporcionado cinco conclusiones
bsicas.

1. No existe relacin entre la complejidad de un organismo y su nmero de


genes (el ser humano y la rata poseen 30.000 genes)
2. Compartimos genes con otros organismos incluidas las bacterias.
3. El 99,99% de la informacin gentica es igual en todos los humanos.
4. Un gen puede originar varias protenas.
5. La mayor parte del ADN est constituida por secuencias repetitivas o
interrumpidas cuya funcin se desconoce.

Repercusiones del PGH

Posibilidad de estudiar las


enfermedades genticas.

Ha mejorado la comprensin del


desarrollo embrionario (activacin e
inactivacin secuencial de genes).

Avances en el conocimiento de la
evolucin.

Determinacin de genes esenciales


para la vida.

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CLONACIN

La palabra CLON significa copia exacta. Con la ingeniera gentica podemos obtener
clones de ADN, de clulas o de organismos completos. As, se pueden distinguir tres
tipos de clonacin:

Clonacin celular: se utiliza para obtener copias de ADN mediante unas


clulas llamadas clulas anfitrionas.
Clonacin de clulas: con esta tcnica podemos obtener clulas iguales.
De esta forma se crean tejidos reparadores de otros que estn enfermos o
deteriorados, sin que se produzca rechazo por parte del enfermo.

Clonacin de organismos completos: se obtienen individuos que son


genticamente idnticos.

Mediante la tcnica de transferencia nuclear se consigui clonar la oveja Dolly


en 1996.

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5.- APLICACIONES DE LA BIOTECNOLOGA

Las aplicaciones de la biotecnologa, tradicional o moderna, son mltiples. Sectores


como la industria alimentaria, la qumica, la energtica, la minera, la agricultura, la
ganadera, la medicina o el medio ambiente, han obtenido resultados beneficiosos
gracias a esta disciplina. A modo de ejemplo podemos citar los siguientes:
1. Obtencin de protenas de inters mdico y econmico: antibiticos,
enzimas, hormonas (insulina, hormona del crecimiento), vacunas (hepatitis
B), factores de coagulacin ,interfern.
2. Mejora gentica de animales y vegetales para obtener una mayor
produccin y mejor calidad nutricional.
3. Obtencin de plantas clnicas para cultivos.
4. Obtencin de "bioinsecticidas", animales y plantas capaces de destruir a
otros seres vivos que se alimentan de los cultivos.
5. Obtencin de animales y vegetales transgnicos

Se llaman organismos transgnicos a los organismos genticamente


modificados mediante la introduccin de un gen de otra especie totalmente
diferente.

Animales Vegetales
obtencin de rganos animales resistentes a insectos: maz y
(cerdos) con genes humanos para algodn con un gen que produce una
no ser rechazados en transplantes toxina para orugas y escarabajos
animales con carnes y huevos con a herbicidas: soja, algodn, maz,
menos colesterol y grasas resisten a altas concentraciones de
herbicidas que se echan en los
campos para erradicar malas hierbas
pollos sin plumas a condiciones ambientales: fro,
sequa, alta salinidad, etc
Incremento del rendimiento
fotosinttico
Maduracin retardada

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6. Biorremediacin y bioadsorcin.

Consiste en producir microorganismos modificados genticamente con el fin de


que degraden o eliminen sustancias txicas o contaminantes. De esta forma se
combaten las mareas negras, se eliminan plaguicidas o metales pesados o se
tratan las aguas residuales; consiguiendo regenerar suelos y aguas
contaminadas.

7. Terapias gnicas

Consisten en manipular genticamente clulas enfermas para que ellas mismas


puedan producir las protenas cuya falta o mal funcionamiento provoca la
enfermedad.

Con la ayuda de un vector adecuado se introduce el gen correcto y se integra en


el ADN de la clula enferma. Puede hacerse de tres formas distintas: Ex vivo, in
vivo o in situ.

a. Ex vivo: Se extraen clulas del enfermo y se cultivan. Se les


introduce el gen normal y se reintroducen en el organismo del
paciente.

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b. In vivo: Los genes se introducen por va sangunea unidos a


vectores. Los vectores poseen en su superficie molculas que son
reconocidas por las clulas diana, de forma que slo all transfieren la
informacin gentica que portan.
c. In situ: Se introducen directamente los genes en los tejidos.

La terapia gnica plantea algunos problemas: los genes pueden integrarse al


azar dentro del genoma provocando la fragmentacin de genes importantes, los
genes implantados no producen la cantidad suficiente de protena y las clulas
modificadas terminan murindose y con ellas su efecto.

8. Produccin de productos biodegradables (bioplsticos, espumas de


poliuretano).
9. Obtencin de biocombustibles
Bioalcoholes A partir de biomasa y hongos del G Sacharomyces se
obtiene etanol
Bioaceites A partir de plantas ricas en aceites vegetales como la
colza, la soja, el girasol o la palma. Se utilizan en
motores disel.
Biogs o gas Biotransformacin de residuos urbanos, agrcolas o
natural industriales.
10. Extraccin de minerales por bioprocesado.
11. Recuperacin de especies en peligro de extincin (mediante
clonacin).
12. Diagnstico de enfermedades genticas.
13. Obtencin de anticuerpos monoclonales.
14. Extraccin de clulas madre de embriones humanos obtenidos por
clonacin de clulas del propio enfermo (mediante transferencia nuclear). De
esta forma se evita el problema del rechazo de trasplantes (autotrasplante).
Dado que este mtodo genera graves problemas bioticos, la obtencin de
clulas madre suele estar restringida a las procedentes de embriones
desechados de la FIV, del cordn umbilical o de la mdula sea.

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6.- BIOTICA

La Biotecnologa y la Ingeniera Gentica han proporcionado grandes beneficios a la


humanidad, pero tambin pueden producir consecuencias negativas. Por ello, se

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han elaborado una serie de normas ticas y legales, algunas de aplicacin a nivel
mundial.

Declaracin Universal sobre el Genoma Humano y los Derechos Humanos


(UNESCO 1977): art 1: El Genoma Humano es Patrimonio de la
Humanidad.
Prohibicin de clonacin con fines reproductivos o experimentales
en seres humanos (Consejo de Europa 1977).

En nuestro pas la Ley de Investigacin Biomdica regula la utilizacin de la


Biotecnologa y la Ingeniera Gentica, prohibiendo de forma expresa la clonacin
reproductiva y la creacin de embriones destinados a la investigacin.

INGENIERA GENTICA
BENEFICIOS INCONVENIENTES
SOCIALES Alimentos de mayor calidad Posibilidad de obtener humanos
nutricional. genticamente modificados

Retraso en la maduracin de Capacidad para producir clones


frutas y verduras. de humanos

Animales y plantas ms Vulneracin del derecho a la


resistentes a enfermedades y intimidad de las personas por
plagas. uso de su informacin gentica

Animales y plantas con mayor Control del mercado de


rendimiento econmico. alimentos por las multinacionales
de biotecnologa
SANITARIOS Prevencin de enfermedades Posible aparicin de efectos
genticas secundarios por el consumo de
alimentos transgnicos
Introduccin de genes
sanos en clulas enfermas. Aparicin de nuevos organismos
y nuevas enfermedades
Obtencin de frmacos
nuevos Creacin de embriones humanos
con el fin de la investigacin
Aplicacin para estudios
cientficos

Pruebas de paternidad y
medicina forense
ECOLGICOS Bacterias degradadoras de Posible contaminacin gentica
vertidos desde organismos transgnicos
por transferencia espontnea de
Bacterias recuperadoras de genes
suelos contaminados
Invasin de zonas naturales por
Bacterias productoras de organismos transgnicos ms
plsticos biodegradables

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resistentes

Desaparicin de especies
naturales por el uso de especies
modificadas

ENLACES

1. http://recursostic.educacion.es/secundaria/edad/4esobiologia/4quincena8/4
quincena5_contenidos_1a.htm: En estas pginas puedes encontrar la receta
de cmo fabricar yogur casero gracias a las fermentaciones (biotecnologa
tradicional).

2. http://recursos.cnice.mec.es/biosfera/alumno/4ESO/Genetica2/contenido4.h
tm

3. http://www.biotecnologica.com/

4. http://es.wikipedia.org/wiki/Cultivo_celular

5. http://es.wikipedia.org/wiki/Anticuerpos_monoclonales

6. http://es.wikipedia.org/wiki/Enzima_de_restricci%C3%B3n

7. http://portales.educared.net/wikiEducared/index.php?
title=Enzimas_de_restricci%C3%B3n

8. http://biotec.amgen.es/html/adn_reco.html

9. http://www.arrakis.es/~ibrabida/vigcorte.html

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