6.3.

CARBOHIDRATOS TOTALES METODO DE ANTRONA

(ESPECTROFOTOMETRIA UV)

A. PROPSITO ESPECFICO DE LA PRCTICA.

El Alumno en formacin a travs del conocimiento adquirido en la teora del curso,
sea capaz de realizar la determinacin de carbohidratos totales, por
espectrofotometra UV, analizando las bondades del mtodo y su aplicacin en la
prctica.

B. CRITERIOS DE DESEMPEO:
El Alumno ser competente cuando sepa realizar e interpretar los resultados del
anlisis de carbohidratos totales y explique sus resultados.

C. RESULTADOS ESPERADOS:
El equipo de trabajo determinara el mtodo, Este mtodo es aplicable a alimentos.
Reportndose como materia grasa insoluble en ter de petrleo fraccin no
saponificable en 100g de grasa.

D. FUNDAMENTO:
En presencia del cido sulfrico del reactivo de antrona, los carbohidratos
experimentan deshidratacin convirtindose en furfural-6-hidroxi-metil furfural.
Estos productos pueden condensarse con aminas aromticas, fenoles, antrona etc;
produciendo compuestos coloreados. La formacin del furfural-y y sus derivados
acomplejados con estas sustancias puede utilizarse como mtodo cualitativo o
cuantitativo para estimar azucares, ya que la intensidad de color desarrollado
durante la condensacin va a estar en funcin de la concentracin de carbohidratos
presentes en la muestra. (Osborne & Voogt, 1996)

E. MATERIAL Y EQUIPO:
Probeta de 100 mL con tapn
Matraz volumtrico de 250 mL
Pipetas graduadas de 1 y 10 mL
Parrilla elctrica
Balanza analtica
Espectrofotmetro

F. REACTIVOS:
Acido perclrico 52%
cido sulfrico. 760 mL de cido sulfrico concentrado en 330 mL de agua
Reactivo de antrona 0,1% en la solucin anterior de cido sulfrico
Solucin patrn de glucosa. 0.1g de glucosa en 100 mL de agua
Solucin patrn de glucosa diluida. 10 mL de la solucin anterior en 100 mL
de agua
 G. METODOLOGA
Extraccin. Pesar 1 g de muestra seca, o 2.5 g de muestra hmeda, transferir a una
probeta de 100 ml con tapn, aadir 10 ml de agua, 13 ml de cido perclrico al 52
%, agitar durante 30 minutos, diluir el contenido a 100 ml. Mezclar y filtrar en un
matraz volumtrico de 250 ml, lavar la probeta con agua y transferir los lavados al
matraz volumtrico, aforar.
Determinacin. Diluir 10 ml del extracto de muestra a 100 ml de agua, pipetear 1 ml
a un tubo de ensayo. Utilizar como blanco 1 ml de agua. Pipetear el patrn utilizando
1 ml de glucosa diluida. Agregar rpidamente a todos los tubos 5 ml de reactivo de
antrona recientemente preparado, tapar los tubos y mezclar, colocar los tubos a un
bao de agua hirviendo durante 12 minutos, enfriar a temperatura ambiente, medir
la absorbancia de la muestra y el patrn a 630 nm.

H. CALCULOS:

25
%Glucosa=

donde:
B= Absorbancia de la muestra
A= Absorbancia del patrn diluido
W= Peso de la muestra (g)

I. RESULTADOS
Para determinar la concentracin de azucares Totales en la muestra se aplica el
mtodo matemtico de la ecuacin lineal de la curva patrn. para determinar su
respectiva absorbancia y as su concentracin.

J. SISTEMA DE EVALUACIN
Los conocimientos y habilidades sern evaluados a travs del formato de prctica
como se indicar, adems se le cuestionar sobre los contenidos. El formato se
revisa y acatara las observaciones para mejorar la calidad de la misma. Las
actitudes se evaluarn a travs de la responsabilidad del alumno ante su prctica y
su entorno.
K. MTODO DE ASIGNACIN DE CALIFICACIONES.
Asistir a laboratorio y cumplir con las actividades es obligatorio para tener
calificacin en cada prctica.
Lista de cotejo 5%
Entrega y calidad del formato 5%