Sunteți pe pagina 1din 3

Frotiul de snge periferic

Definiie:

Frotiul de snge periferic este efectuat n scopul evalurii morfologiei elementelor


figurate.
Frotiul este un preparat microscopic care se realizeaz prin etalarea materialului biologic
n monostrat pe lame portobiect.
Tehnica frotiului de snge

Materiale necesare

- lame obinuite degresate


- lame rodate
- ace sterile
- alcool, vat
- hrtie de filtru, compese
- stativ pentru aezarea lamelor
Etape:
I. Recoltarea:
1. La aduli: - partea lateral a pulpei mediusului sau
inelarului de la mna stng
2. La copil i nou-nscut:
- lobul urechii
- partea lateral a halucelui.
- pielea clciuluii

-locul puncionrii se dezinfecteaz i se degreseaz cu ajutorul unui tampon mbibat n alcool


sau eter.

-se prinde degetul subiectului cu mna stng, fixndu-l ntre index i police, i printr-o
micare rapid se puncioneaz locul dezinfectat cu un ac pentru injecii subcutane,
sterilizat.

-primele 2 picturi se terg cu ajutorul unei comprese usacte deoarece conin prea mult
lichid interstiial sau impuriti de pe piele.

II. Efectuarea frotiului propriu-zis:

-pictura de snge care apare pe pulpa degetului se ridic cu marginea mic a unei lame
lefuite i se aplic pe una din extremitile unei lame portobiect aezate orizontal

-n momentul contactului cu lama portobiect, se imprim lamei pe care se afl pictura de


snge o micare de lateralitate pentru ca sngele s se ntind pe toat linia de contact
-apoi se imprim lamei lefuite o micare de translaie n lungul lamei portobiect.

Frotiul este bine executat dac are:

- Dou margini laterale i se termin n franjuri


- O grosime potrivit: elementele figurate s nu fie
suprapuse i totodat sufficient de dense

Grosimea frotiului de snge depinde de:

- Mrimea picturii de snge = pictur mic frotiu


subire
- Unghiul dintre lama lefuit i lama portobiect trebuie
s fie de300-350 frotiu subire
- Viteza de ntindere = vitez mare frotiu gros.
II. Fixarea frotiului

1.Metode fizice:

-uscare sau desicare la temperature laboratorului prin agitarea lamei pentru a obiene o uscare
rapid. Uscarea lent duce la ratatinarea celulelor

2.Metode chimice:

-alcool absolut timp de 15 miute


-alcool etilic absolute i eter n pri egale timp de 5-
15 minute
-alcool metilic timp de 2 minute
-vapori de OsO4, soluie 2%
III. Colorarea frotiului de snge
-trebuie s se realizeze imediat dup ntiderea lui sau
n primele 24 de ore
-pe lamele necolorate celulele i pierd afinitatea
tinctorial
-se folosete colorarea dubl cu soluie May-
Grmwald-Giemsa
1.Reactivi i materiale necesare:

- soluie May-Grmwald
- soluie Giemsa
- ap distilat
- pipette Pasteur, pipette gradate
2.Etapele colorrii

-se acoper frotiul cu soluie May-


Grmwald i se las 2-3 minute (se
realizeaz fixarea frotiului)

-se adaug apoi, peste soluia May-


Grmwald, un numr egal de picturi de ap
tamponat se omogenizeaz i se las
2minute (diluat, soluia May-Grmwald
acioneaz ca un colorant)

-se ndeprteaz colorantul fr splare i se


acoper cu soluie Giemsa diluat cu ap
distilat tamponat n proporie de 1/1 (1
pictur soluie Giemsa pentru un mililitru
ap) i se las 15-20 minute. Pentru
colorarea trombocitelor se va prelungi colorarea cu Giemsa la 45 de minute.

-se spal lama sub jet de ap. Cnd dorim examinarea trombocitelor evitm splarea sub jet
puternic de ap (acesta va antrena trombocitele

-sugativare uoar

-se aeaz n stativ pentru uscare.

IV. Examinarea frotiului de snge

-la microscopul fotonic

-se ncepe cu obiectivul de 10x pentru verificarea calitii


tehnice a frotiului.

-se pune la punct cu obiectivul cu imersie i se examineaz pe


rnd:

-morfologia eritrocitelor
-frecvena i morfologia trombocitelor
-frecvena i morfologia leucocitelor