Determinacin de nitrogeno organico ( metodo del metodo zambelli )

PRCTICA N 2 DETERMINACIN DE NITRITOS EN UNA MUESTRA AGUA

Objetivos

Aprender a manejar el espectrofotmetro (Spectronic 20)

Determinar la concentracin de nitritos que contienen diversas muestras de agua.

Fundamento

El Spectronic 20 es un espectrofotmetro de haz sencillo, con un rango total de longitud de onda de 340
nm a 950 nm. El ancho de ranura espectral nominal es 20 nm constante en todo el rango.

El rango bsico de longitud de onda de 340 a 600 nm, se extiende a 950 nm, aadiendo un filtro y
cambiando el fototubo. La combinacin, permite operacin continua de 400 nm a 700 nm sin hacer
cambio de fototubo. El accesorio juego de filtros ofrece la capacidad de extender el rango de longitud de
onda.

Segn el origen de las aguas, la cantidad de nitritos es bastante variable. El mtodo de reactivo
Zambelli puede aplicarse para contenidos en iones NO2- superiores a 50g/l. Bajo la accin de
fenmenos biolgicos, el equilibrio entre el amoniaco, los nitritos y los nitratos puede variar
rpidamente.

Los nitritos son compuestos no deseados en la composicin de las aguas potables de consumo pblico.
Su presencia puede deberse a una oxidacin incompleta del amonaco o a la reduccin de nitratos
existentes en el agua. La reduccin de nitratos a nitritos puede llevarse a efecto por la accin bacteriana.
El agua que contenga nitritos puede considerarse sospechosa de una contaminacin reciente por
materias fecales.

Algunas aguas, debido a los terrenos por donde discurren o a las condiciones de almacenamiento pobre
en oxgeno, pueden presentar cierto contenidos de nitritos.

En lo que respecta a la vigilancia de las aguas de consumo pblico, la determinacin cualitativa o

cuantitativa de nitritos nos permite detectar posibles variaciones de calidad, ya que la presencia de
nitritos se considera un buen indicador de contaminacin.

Los nitritos existentes en un agua pueden tener un efecto perjudicial sobre la salud de quien la consuma;
sobre todo si se trata de nios, porque los nitritos son responsables de la formacin de
metahemoglobina, reducindose el poder de absorcin de oxgeno por la sangre. La enfermedad
producida por la ingestin de nitritos se denomina metahemoglobinemia.

La reglamentacin espaola establece como valor orientador de calidad la ausencia de nitritos en un

agua de consumo; y como nivel mximo tolerable hasta 0,1 mg/l expresado como NO2-. Cantidades
superiores a sta hacen suponer que el agua es rica en materia orgnica en va de oxidacin.

Las aguas depuradas o tratadas que tienen cloro libre residual y tricloruro de nitrgeno no tienen nitritos
al ser incompatibles con los anteriores.

En aguas suficientemente oxigenadas se transforman en nitratos por medio de bacterias nitrificantes; en

aguas eutrficas, carentes de oxgeno, el proceso es el de reduccin a amoniaco, a travs de bacterias
desnitrificantes.

NITRIFICACIN: (OXIDACIN)

Amoniaco Nitrito Nitrato

DESNITRIFICACIN:

Nitrato Nitrito Amonio

La cantidad de nitritos presentes en el agua variar dependiendo de la calidad de los vertidos y de la

contaminacin en general. Es conveniente determinar los nitritos de una muestra lo ms rpidamente
posible. Si esto no fuera posible se aadiran 40 mg/l de HgCl2 conservndose a 4C, hasta su anlisis.

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El mtodo del reactivo Zambelli se basa en que el cido sulfanlico en medio clorhdrico, en presencia de
ion amonio y de fenol, forma con los iones NO2- un complejo coloreado amarillo cuya intensidad es
proporcional a la concentracin en nitritos.

Materiales

Espectrofotmetro (Spectronic 20)

Cubetas de vidrio

Reactivos

Nitrito sdico (NaNO2: 97% , P.m = 69, Para anlisis)

cido clorhdrico (HCl: 35% , P.m = 3646 , d = 1185 gr/cc)

Fenol (C6H5OH: P.m = 9411, Pursimo)

Muestras de diferentes aguas:

1: Agua tortugas profesora Beln

2: Agua tortugas Beln

3: Agua acuario Aitziber

4: Agua acuario Nerea

5: Agua Red

Procedimientos

Se prepara el material.

Se prepara el reactivo Zambelli del siguiente modo:

Se introduce en un matraz de 1 litro 260cc de HCl y 625cc de agua desionizada.

Se disuelven 5gr. de c. sulfalnico y 75 gr. de fenol en el matraz, calentando ligeramente a bao

mara hasta disolucin completa.

Se aaden 135gr. de NH4Cl.

Se agita hasta disolucin.

Se deja enfriar y se enrasa con agua desionizada hasta 1 litro.

Se prepara 1 litro de disolucin madre patrn de NO2- de concentracin 023 gr/l. (230ppm).

Se preparan 100cc de la disolucin hija de NO2- 23ppm a partir de la primera.

Se enciende el espectrofotmetro.

Se aade a 6 matraces aforados de 50cc las siguientes sustancias y cantidades en cc:

N de
Testigo I II III IV V
matraces

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NO2- 23 ppm 0 1 5 10 15 20

Agua
50 49 45 40 35 30
desionizada

Se pasan las disoluciones a erlenmeyers correctamente rotulados.

Se aaden 2cc de reactivo Zambelli a cada erlenmeyer.

Se espera 10 minutos y se aaden 2cc de amoniaco a cada erlenmeyer.

Se ajusta el espectrofotmetro siguiendo las instrucciones del manual, con = 435 nm., la absorbancia
a cero con el matraz testigo.

Se introducen los patrones de menor a mayor concentracin y se anota su absorbancia.

Se calcula la recta de calibrado.

Se aaden de igual modo 2cc de Zambelli y 2cc de amoniaco a 50 cc de muestra.

Se introducen la muestras anotando su absorbancia, para calcular sus concentraciones.

Se limpia y se recoge el material.

Clculos y resultados

Disolucin hija: 230ppm V = 23 100cc

V = 23 100 /230 = 1cc a tomar

Patrn I: 0046 ppm 0012 U.A

Patrn II: 023 ppm 0119 U.A

Patrn III: 046 ppm 0249 U.A

Patrn IV: 069 ppm 037 U.A

Patrn V: 092 ppm 050 U.A

Recta de calibrado: y = 05554x - 00105; r = 09999; r2 = 09998

M1: Agua tortugas profesora Beln: 000 U.A 0019 ppm

M2: Agua tortugas Beln: 0235 U.A 0442 ppm

M3: Agua acuario Aitziber: 0099 U.A 0197 ppm

M4 :Agua acuario Nerea: 000 U.A 0019 ppm

M5: Agua Red: 000 U.A 0019 ppm

r Muestra Muestra Muestra

Recta de Muestra 4 Muestra 5
Equipo
calibrado r2 1 (ppm) 2 (ppm) 3 (ppm) (ppm) (ppm)
Beln 0.9999
0.5123x 0.062 0.4328 0.1938 0.0204 0

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 Nerea
-0.0002 0.9999
Aintzane
Ainara 0.9998
0.5021x -
7.1710-3 0.5608 0.1884 0.0112 3.1810-3
Aitziber 0.016 0.9997
Araceli 0.9999
0.496x -
0.021 0.455 0.2135 0.0280 0.020
Lorena 0.0099 0.9999
Jone
0.9999
Zirats 0.319x -
0.012 0.4210 0.1870 0.0150 0.010
0.00194 0.9999
Amaiur
MCarmen
0.9983
Sergio 0.3195x -
0.015 0.4786 0.2000 0.0034 0.015
0.0071 0.9966
Guillermo
Diego
0.9998
Ftima 0.5554x
0.019 0.4420 0.1970 0.0190 0.019
-0.0105 0.9998
Joana

Muestra 1= los resultados que son menores de 005 ppm no son ni precisos ni fiables; por lo
tanto dado que todos lo son, la media es: < 005 ppm

Muestra 2= todos los resultados se admiten a la hora de hacer la media; por tanto la media es:
0465 ppm

% Error = - 495% C.V = 1096%

Muestra 3= todos los resultados se admiten a la hora de hacer la media; por tanto la media es:
0.197 ppm

% Error = 019% C.V = 490%

Muestra 4= los resultados que son menores de 005 ppm no son ni precisos ni fiables; por lo
tanto dado que todos lo son, la media es: < 005 ppm

Muestra 5= los resultados que son menores de 005 ppm no son ni precisos ni fiables; por lo
tanto dado que todos lo son, la media es: < 005 ppm

Cuestiones

Cuanto tiempo puede pasar desde que la muestra llega al laboratorio hasta ser analizada?

Dado que es un compuesto inestable se debe analizar inmediatamente despus que llega al laboratorio,
mximo 24 horas, tambin se puede aadir HgCl2 y conservar en nevera a 4C, envasado en vidrio o en
polietileno.

Por que se realiza una disolucin hija?

Porque al pasar directamente desde la madre, deberan de ser volmenes muy pequeas con
micropipetas; dando facilidad al error.

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Qu tipo de enfermedades pueden provocar los nitritos?

Los nitritos existentes en un agua pueden tener un efecto perjudicial sobre la salud de quien la consuma;
sobre todo si se trata de nios, porque los nitritos son responsables de la formacin de
metahemoglobina, reducindose el poder de absorcin de oxgeno por la sangre y produciendo colapso
vascular. La enfermedad producida por la ingestin de nitritos se denomina metahemoglobinemia.

Tambin, los nitritos se combinan con las aminas formando nitrosaminas con poder cancergeno .

Observaciones

Las muestras no han sido tratadas correctamente antes de su anlisis, por lo tanto los
resultados no son muy fiables

Los anlisis no fueron hechos en la misma fecha

PRCTICA N 3 DETERMINACIN DE NITRATOS EN UNA MUESTRA DE AGUA

Objetivo

Determinar la concentracin de nitratos que contienen diversas muestras de agua

Fundamento

PYE UNICAM UV-V 550

Es un aparato de un solo haz, que mide la transmitancia y absorbancia, y las concentraciones.

Medida de la absorbancia:

Colocar el MODE encendido a 10% de T. Si la mezcla en la regin ultravioleta est por debajo de 325
nm. con un modelo ultravioleta (450/550) colocar la lmpara de deuterio encendida sobre el panel
posterior en ON. Dejar al menos 15 minutos para que se caliente.

Si se utiliza el mando de longitud de onda colocar la longitud de onda requerida.

Mirar el indicador codificado de color y entonces seleccionar el detector y emisor apropiado.

Solamente en modelos ultravioleta.

Abrir la tapa del compartimento para las muestras.

La lectura debera ser aproximadamente cero, si se necesita, ajustar la correccin de fondo.

Colocar la celda o tubo de ensayo la solucin referencia en el compartimiento de las muestras.

Se cierra el compartimiento de la muestra.

Establecer el mando de MODE colocado a 0-1 A.

Utilizar el mando de cero para ajustar la lectura a cero.

Sacar la celda o tubo de ensayo con el blanco.

Colocar la celda o tubo de ensayo que contiene la muestra en la posicin de medida. Cerrar la tapa
del compartimento de muestra.

El valor de la absorbancia de la muestra aparecer en la pantalla.

Medida de la concentracin:

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 Colocar el MODE encendido a 10% de T. Si la mezcla en la regin ultravioleta est por debajo de 325
nm. con un modelo ultravioleta (450/550) colocar la lmpara de deuterio encendida sobre el panel
posterior en ON. Dejar al menos 15 minutos para que se caliente.

Si se utiliza el mando de longitud de onda colocar la longitud de onda requerida.

Mirar el indicador codificado de color y entonces seleccionar el detector y emisor apropiado.

Solamente en modelos ultravioleta.

Abrir la tapa del compartimento para las muestras.

La lectura debera ser aproximadamente cero, si se necesita, ajustar la correccin de fondo.

Poner el mando de MODE encendido en la posicin de concentracin.

Cerrar la tapa del compartimento de la muestra.

Girar el mando de concentracin siguiendo la direccin de las agujas del reloj.

Colocar la celda o tubo de ensayo con el blanco en el compartimiento.

Cerrar la tapa del compartimento de la muestra.

Usar el control ZERO para ajustar a cero.

Quitar el blanco y meter la muestra en el tubo de ensayo o celda contenido en la solucin estndar de
concentracin conocida.

Cerrar la tapa.

Utilizar el mando de CONCENTRACIN para ajustar la lectura al valor de la solucin estndar.

Los explosivos derivados del nitrgeno

En general, cuando el cido ntrico acta sobre algunas funciones orgnicas, principalmente
hidrocarburos, aminas y alcoholes (polisacridos, inclusive) se forman nitroderivados o steres:

RH > R-NO2

RNH2 > RNHNO2

ROH > R-ONO2

el radical NO2 -o el NO2O- se pueden fijar en ms de una posicin de la molcula soporte. Estos
productos, especialmente los polifuncionales, son, en general, explosivos, entre los que cuentan,
adems, otros pocos productos de la qumica mineral (clorato potsico, nitrato potsico, nitrato amnico)
y tambin unos cuantos ms de carcter orgnico, que tienen carcter iniciador.

Se denomina explosivo a toda sustancia que por la accin de una causa externa -roce- percusin,
temperatura- se transforma en gases, en tiempo brevsimo, y con una tonalidad trmica elevada y
positiva. La rapidez del fenmeno es fundamental, pues gracias a ella no tiene tiempo a disiparse el calor
de la reaccin, quedando momentnea y progresivamente acumulado en los gases hasta que, con un
violento estallido, la energa desencadenada se transforma en trabajo mecnico. El fenmeno se
denomina genricamente explosin y la accin, el verbo, explosionar.

La mayor parte de los explosivos se obtienen por "nitracin", bien sea una nitracin propiamente dicha, o
una esterificacin (de alcoholes con cido ntrico). En el proceso se suele forman agua, que diluye al
cido ntrico (HNO3) y paraliza su accin. A parte de los explosivos obtenidos por nitracin, hay otros tres
que son bastante corrientes: el fulminato de mercurio, el nitruro de plomo y el estifnato de plomo.
Contrariamente a los de nitracin, estos tres son de estructura muy inestable -el metal sobrecarga la
molcula lineal como una viga bajo un peso puntual muy exagerado (fulminato y nitruro) o flexiona y
tensa el anillo bencnico en la sustitucin 1-3 en el estifnato.

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En consecuencia, su descomposicin explosiva es endotrmica o muy poco exotrmica. Su inestabilidad
les hace muy sensibles y aptos para estallar fcilmente por acciones exteriores. Por eso se usan como
cebos o iniciadores de la explosin de los otros ms estables, capaces de efectos rompedores
importantes, que no tienen los iniciadores. Por lo tanto, iniciadores y rompedores se complementan.

La explosin

La explosin, qumicamente, es un fenmeno redox, que en los explosivos nitrados resulta

concretamente en la oxidacin del carbono e hidrgeno de la molcula, por el oxgeno contenido en la
misma, pero unido al nitrgeno, que es el elemento reducido.

La frmula general de un explosivo se puede representar por la de la especie cuaternaria:

CaHbOcNd

cuya ecuacin qumica de su transformacin al explotar ser:

CaHbOcNd > aCO2 + 0,5bH2O + 0,5dN2

porque un grado o mayor o menor de oxidacin del C, del H o del N no es posible o supondra prdida de
efecto calorfico. De esta expresin resulta que c=2a + 0,5b. Si c es mayor que 2a+0,5b, el explosivo
tiene exceso de oxgeno; si es menor, tiene defecto.

Para mejorar los efectos de los explosivos que tienen defecto de oxgeno en su molcula, se les
incorporan otros que lo tienen en exceso. Lo ideal, desde este punto de vista, es que la mezcla quedara
oxiequilibrada para asegurar la combustin completa, aunque no siempre se consiguen as los mejores
efectos explosivos.

Si dos explosivos, uno con defecto y otro con exceso de oxgeno, tienen respectivamente las frmulas
CaHbOcNd y , Ca'Hb'Oc'Nd' la ecuacin de explosin de la mezcla equlibrada ser:

CaHbOcNd + nCa'Hb'Oc'Nd' > (a + na')CO2 + 0,5(b + nb')H2O + 0,5(d + nd')N2

y deber ocurrir que:

c + nc' = 2(a + na') + 0,5(b + nb')

o sea:

n = (2a + 0,5b -c) / (-2a' -0,5b' - c')

siendo n el nmero de moles de la especie explosiva sobreoxigenada que hay que mezclar con un mol de
la suboxigenada.

As, por ejemplo, en el caso de nitrato amnico y la trilita, la mezcla equilibrada resulta ser aquella que
contiene 10,5 moles de nitrato amnico por mol de trilita, que es la proporcin del explosivo comercial
"nitramita", de gran calor de explosin.

Esta prctica est basada en la absorcin de la radiacin ultravioleta por el ion nitrato (NO3-). Nos vamos
a basar en un mtodo espectrofotomtrico selectivo.

Para calcular la concentracin de NO3- en distintas muestras de agua vamos a realizar dos lecturas. Una
a 220 nm. y otra a 275 nm. por lo que es imprescindible que el espectrofotmetro tenga lmpara de
deuterio, sin ella el anlisis no se podra realizar.

En el agua, junto con los nitratos y otras sustancias, encontramos tambin en disolucin materia
orgnica. A un = 220 nm., tanto los nitratos como la materia orgnica dan lectura positiva de
absorbancia. Por lo que:

A220 = Anitratos + Amateria orgnica

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Para corregir el error de la absorbancia que se realiza en la primera medida se realiza una segunda a una
= 275 nm., donde los nitratos no dan absorbancia, y toda la que registramos pertenece a la materia
orgnica. Adems sabemos que la absorbancia de la materia orgnica a 220 nm. es el doble que a 275
nm. Por lo que:

Amateria orgnica = 2 A275

Por lo tanto, para hallar la absorbancia correspondiente a los nitratos tendremos:

Anitratos = A220 - 2 A275

Una vez conseguido el dato de absorbancia de nitratos, vamos a la curva de calibrado y obtenemos la
concentracin de nitratos.

Material

Espectrofotmetro Pye Unicam UV/V 550

Cubeta de cuarzo

Reactivos

HCl 1N

Patrn de NO3- (443 ppm)

Etanol

Muestras de diferentes aguas:

1: Agua tortugas profesora Beln

2: Agua tortugas Beln

3: Agua acuario Aitziber

4: Agua acuario Nerea

5: Agua Red

Procedimiento

Se prepara el material.

Se enciende el espectrofotmetro con colocando la lmpara de Deuterio.

Se prepara la disolucin patrn de 1 litro de NO3- de concentracin 0.443 ppm.

A partir de ella se prepara disolucin hija de NO3 250 cc de 44.3 ppm es decir 1/10

Se preparan 250 cc de disolucin de cido clorhdrico 1N

Aadir a 7 matraces aforados de 50 cc las siguientes sustancias y siguientes cantidades en cc y

despus a los erlenmeyers:

N de matraz Blanco I II III IV V VI

NO3 44.3 ppm 0 2 5 10 15 20 25

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 Agua destilada 50 48 45 40 35 30 25

HCl 1N 1 1 1 1 1 1 1

Se ajusta el espectrofotmetro Pye Unicam, con = 220 nm tal y como se explica en el manual

Se ajusta la absorbancia a cero con el blanco

Se introducen los patrones de menor a mayor concentracin anotando sus respectivas absorbancias

Se calcula la recta de calibrado

Se aaden a cada 50 cc de muestra 1 cc de HCl 1N

Se introducen las muestras en el espectrofotmetro y se mide su absorbancia en = 220 nm y en 275

nm

Se repiten las mediciones anotando los resultados de cada muestra

Se limpia y se recoge el material

Se realizan los clculos

Clculos y resultados

1000 cc Disolucin madre = 443 ppm

250 cc Disolucin hija = 44.3 ppm

V 443 = 250 44.3 V = 25 cc a tomar de la madre

Patrn I => 44.3 2 = 50 C C = 1.77 ppm //Absorbancia = 0.083 U.A

Patrn II => 44.3 5 = 50 C C = 4.43 ppm //Absorbancia = 0.207 U.A

Patrn III => 44.3 10 = 50 C C = 8.86 ppm //Absorbancia = 0412 U.A

Patrn IV => 44.3 15 = 50 C C = 13.29 ppm //Absorbancia = 0.600 U.A

Patrn V => 44.3 20 = 50 C C = 17.72 ppm //Absorbancia = 0.798 U.A

Patrn VI => 44.3 25 = 50 C C = 22.15 ppm //Absorbancia = 0.958 U.A

Recta de calibrado

y = Bx + A = 0.0433x + 0.0176; r = 0.9993 y r2 = 0.9986

Muestras

1: Agua tortugas profesora Beln =

= 220 nm Absorbancia = 0.302 U.A

= 275 nm Absorbancia = 0.027 U.A

2: Agua tortugas Beln =

= 220 nm Absorbancia = 1.251 U.A

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= 275 nm Absorbancia = 0.059 U.A

Observamos que se nos sale del rango de los patrones por lo que decidimos diluir la muestra a ..

2: Agua tortugas Beln a =

= 220 nm Absorbancia = 0.66 U.A

= 275 nm Absorbancia = 0.03 U.A

3: Agua acuario Aitziber = No quedaba muestra para poder analizar

4: Agua acuario Nerea =

= 220 nm Absorbancia = 2.958 U.A

= 275 nm Absorbancia = 0.127 U.A

Observamos que se nos sale del rango de los patrones por lo que decidimos diluir la muestra a 1/10

4: Agua acuario Nerea a 1/10 =

= 220 nm Absorbancia = 0.819 U.A

= 275 nm Absorbancia = 0.02 U.A

5: Agua Red =

= 220 nm Absorbancia = 0.242 U.A

= 275 nm Absorbancia = 0.015 U.A

La absorbancia correspondiente a los nitratos Anitratos = A220 - 2 A275

Por lo tanto; con la recta de calibrado obtendremos:

Muestra 1= 5.321 ppm

Muestra 2 = 13.45 ppm diluida a por lo que; 13.45 2 = 26.9 ppm

Muestra 4 = 17.584 ppm diluida a 1/10 por lo que; 17.584 10 = 175.84 ppm

Muestra 5 = 4.48 ppm

Muetra 1 Muestra 2 Muestra 3 Muestra 4 Muestra 5

Equipo r
ppm ppm ppm ppm ppm
Nerea

Aintzane
3.6 23.9 138.6 161.1 3.3 0.9994

Beln
Aitziber

5.0 26.8 150.3 176.1 4.9 0.9985

Ainara
Araceli

4.9 26.5 145.6 169.5 4.1 0.9957

Lorena

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 Jone

Zirats
3.8 26.7 X 170.3 3.9 0.9993

Amaiur
Guillermo

Sergio
5.5 24.2 X 157.3 3.9 0.9998

MCarmen
Joana

Ftima
5.3 26.9 X 175.9 4.5 0.9992

Diego

Media muestra 1 = 4.7 ppm; Error = (5.3 - 4.7)/ 4.7 100 = 12.8 % error

Media muestra 2 = 25.8 ppm; Error = (26.9 - 25.8)/ 25.8 100 = 4.3 % error

Media muestra 4 = 168.4 ppm Error = (175.9 - 168.4)/ 168.4 100 = 4.5 % error

Media muestra 5 = 4.1 ppm Error = (4.5 - 4.1)/4.1 100 = 9.8 % error

Relacionando las tablas de nitritos y nitratos, podemos observar que las muestras 3 y 4 son las aguas
ms contaminadas.

Los porcentajes elevados de error son debido a las diferentes fechas de mediciones por los distintos
equipos, y a que las condiciones de mantenimiento de la muestra no fueron las idneas.

Cuestiones

Por qu se utilizan 6 patrones?

Para comprobar que cumple la ley de Beer - Lambert en varios puntos; aunque lo normal es usar 2 3
patrones. Cuantos ms patrones tengas ms dificultades tendrs de lograr una r buena, pero tambin
ms exacto ser a la hora de medir y compararlo con la realidad.

Cuantos patrones mnimos hay que usar para realizar la recta de calibrado?

1 patrn, dado que con un blanco y un patrn se puede trazar una recta puesto que tendramos 2
puntos.

Con la recta de calibrado de NO2- podemos seguir analizando muestras continuamente. Sin embargo, en
los laboratorios cada cierto tiempo hay que comprobar esta recta y volver a recalibrar si es necesario.
Por qu?

Porque todo el material se va gastando, ensuciando y descalibrando; por tanto al cabo de un cierto
tiempo leer menos.

Observaciones

Las muestras no han sido tratadas correctamente antes de su anlisis, por lo tanto los
resultados no son muy fiables

Los anlisis no fueron hechos en la misma fecha

10.-Nitritos. Mtodo colorimtrico del reactivo de Zambelli:

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Los nitritos son compuestos no deseados en la composicin de las aguas potables de consumo pblico.
Por su estado de oxidacin, se encuentran en un estado intermedio entre los nitratos y el amonio, luego
pueden aparecer en el agua por una reduccin de los NO3- o por una oxidacin del NH4+.

Los nitratos aparecen por la solubilidad de las sales de estos en los suelos y por los abonos, apareciendo
junto con el amonio en fertilizantes (NH4NO3).

La presencia del NO2- es perjudicial para la salud, sobre todo si se trata de nios, porque son
responsables de la formacin de metahemoglobina, que se combina con estos, teniendo una capacidad
de transporte de O2 menor. Por tanto, la enfermedad producida por el NO2- se conoce como
metahemoglobinemia.

Adems, la presencia de NO2- en las aguas se produce el aumento de la concentracin de las

nitrosaminas, que producen cncer en las vas digestivas superiores y en el hgado. Las aminas forman
dentro del cuerpo compuestos aromticos, como las anilinas, lo que lleva a factores de riesgo de
aparicin de cncer. Por ello, la legislacin espaola, en las aguas de consumo, considera la ausencia de
nitritos como un parmetro de calidad, considerando un nivel mximo permitido de 0,1mg NO2-/l.

La presencia de mayor cantidad de nitritos hace suponer que el agua tiene cantidades considerables de
materia orgnica en vas de oxidacin.

Las aguas depuradas o tratadas que tienen cloro libre residual y tricloro de nitrgeno no tienen nitritos,
debido a la incompatibilidad de estos iones con el cloro residual (Cl-, HClO, ClO-). Esas sustancias son
oxidantes y reductoras, segn con quin acten, con lo que ampla la gama de destruccin. Cuando hay
presencia de estas sustancias, el cloro provoca que los NO2- desaparezcan, oxidndolos o reducindolos.

El mtodo Zambelli se utiliza para aguas potables, superficiales y residuales domsticas e industriales.

La determinacin con este mtodo puede realizarse siempre y cuando la concentracin de nitritos se
encuentre entre 0 - 0,92 mgNO2-/l.

Cuando existe NO2-, el cido sulfanlico en medio clorhdroco y en presencia de NH4+ y de fenol, forma
un complejo coloreado amarillo cuya intensidad de color es proporcional a la concentracin de NO2-.

cido sulfanlico (paraaminobencenosulfnico o paraanilinsulfnico):

NH2

Anilina de ella derivan las

sulfamidas

cido sulfnico HSO3 H2O

H2SO4 - 1H2O

Al ser un medio clorhdrico, deber aadirse HCl y en presencia de fenol. El complejo que se forma es
una sustancia con un grupo principal rodeado de una sustancia mediante enlaces de tipo covalente. En la
segunda esfera de coordinacin est en la sustancia inica.

Estos complejos forman un color que es ms intenso segn la concentracin de NO2-, lo que nos va a
permitir saber cuntos iones tenemos en la muestra mediante un espectrofotmetro.

As, si encontramos la longitud de onda en la que produce ese color, se mide la absorbancia o
transmitancia de los de los patrones y se relacionan los parmetros con la absorbancia o transmitancia,
obteniendo la concentracin en las tablasPRCTICA 27. DETERMINACIN DE LOS NITRITOS (NO2)-

Mtodo del reactivo de Zambelli

Principio

El cido sulfanlico en medio clorhdrico , en presencia del in amonio y de fenol, forma con los iones
nitrito un complejo coloreado cuya intensidad es proporcional a la concentracin de nitritos.

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Reactivos

Amoniaco puro NH3 =0,925

Reactivo de Zambelli&

cido clorhdrico HCl puro =1,19 gr/cc 26 cc

cido sulfanlico 0,5 gr

Fenol cristalizado 0,75 gr

Cloruro amnico 13,5 gr

Agua destilada exenta de iones nitrito 62,5 cc

Introducir en un vaso mediano 62,5 cc de agua destilada

Aadir los 26 cc de cido clorhdrico HCl

Colocar el vaso de precipitados sobre un soporte con un mechero de alcohol

Calentar suavemente y aadir el cido sulfanlico (0,5 gr) y el fenol (0,75 gr) y disolver

Aadir aun en caliente los 13,5 gr de cloruro amnico y agitar hasta disolucin

Dejar enfriar

Trasvasar la mezcla a un matraz de 100 cc

Enrasar si fuese necesario con agua destilada

Solucin madre patrn de nitritos NO2- de 0,23 gr/l&

Nitrito Sdico NaNO2 0,1725 gr

Agua recientemente destilada hasta enrase 500 cc

Esta solucin se conserva mejor si se toma la precaucin de aadirle 1 cc de cloroformo

Solucin hija de iones NO2- de 0,0023 gr/l

Solucin madre patrn 0,23 gr/l 1 cc

Agua destilada hasta enrase 100 cc

Preparacin De La Curva De Calibrado

En una serie de vasos de precipitados de unos 80 cc o matraces aforados de 100 cc introducir

sucesivamente:

N vasos T I II III IV V

Sol. Hija patrn 0,0023 gr/l (cc) 0 1 5 10 15 20

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Agua destilada (cc) 50 49 45 40 35 30

Agitar suavemente

React. Zambelli (cc) 2 2 2 2 2 2

Agitar suavemente

ESPERAR 10 MINUTOS

Amoniaco puro (cc) 2 2 2 2 2 2

Agitar suavemente

Corresp en mgr/l de nitritos 0 0,046 0,23 0,46 0,69 0,92

Efectuar las lecturas en el espectrmetro a =435 nm

Procedimiento Para Preparar La Muestra

Agua a analizar (cc) 50

React Zambelli (cc) 2

Agitar suavemente

ESPERAR 10 MINUTOS

Amoniaco puro (cc) 2

Agitar suavemente

Expresin De Los Resultados

Para una muestra de 50 cc, la curva da directamente la cantidad de nitrito expresada en mgr/l de agua

Este valor multiplicado por 0,305 da la cantidad de nitrgeno nitroso expresado en mgr/l de agua

Datos Obtenidos

mgr/l de nitrgeno nitroso (x

Absorbancia A-T=a a mgr/l de nitritos
0,305)

T 0,026

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 I 0,050 0,05 - 0,026 0,024 0,046 0,01403

II 0,160 0,16 - 0,026 0,134 0,23 0,07015

III 0,301 0,301 - 0,026 0,275 0,46 0,1403

IV 0,426 0,426 - 0,026 0,400 0,69 0,21045

V 0,584 0,584 - 0,026 0,558 0,92 0,2806

M 0,130 0,13 - 0,026 0,104 0,17 0,05185

, donde se introduce el dato conocido en un eje y, al ir al otro, se obtiene el resultado de la

concentracin.

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