UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR

LIC. EN CIENCIAS NATURALES Y EDUCACIN AMBIENTAL

PROGRAMA MICROBIOLOGA

PRCTICA DE LABORATORIO 6.
OBSERVACIN DE ESTRUCTURAS INTERNAS DE CLULAS EUCARIOTAS

Docente: Rolando Hernndez Lazo

Departamento de Ciencias Naturales y Educacin Ambiental.
Fecha de realizacin:
Grupo: PEDRO ALDAIR PICO ARDILA, NEYKELLIS GRANADO, DANITZATH BETANCUORTH

OBJETIVOS:

Objetivo General:
Reconocer las formas y estructuras de las clulas sanguneas y del epitelio de la cavidad bucal

Objetivos Especficos:
Reconocer las formas y estructuras en las clulas sanguneas
Identificar los diferentes tipos de clulas sanguneas
Observar las clulas del epitelio de la mucosa bucal

INTRODUCCIN

Una clula es un microcosmo de vida, es la unidad ms pequea que puede llevar a cabo toda la
actividad propia de los seres vivos, el concepto de clula como unidad funcional de los sere vivos
apareci entre los aos 1830 y 1880, la invencin del microscopio establece el punto de partida para el
descubrimiento de la clula .
En el presente trabajo estaremos dndole a conocer los diferentes tipos de clulas sanguneas, las
diferentes estructuras que se pueden identificar en las clulas sanguneas y en la mucosa bucal en las
cuales fueron identificadas en la prctica de laboratorio
FUNDAMENTO TERICO
Las clulas eucariotas son muy complejas con un citoplasma organizado con orgnulos
limitados por membranas biolgicas, que son similares en su composicin a la membrana
celular. El ncleo es el orgnulo ms notable y caracterstico tanto en clulas animales como
en vegetales, hongos y protistas. Por esto mismo un ejemplo tpico para observar una
estructura interna de una clula animal es el ncleo. Frotis sanguneo La tcnica de frotis
sanguneo consiste en una extensin de sangre realizada sobre un portaobjeto con ayuda de
otro portaobjeto (Fig. 10), que permite observar bajo el microscopio diferentes formas celulares
sanguneas. Con dbil aumento se explora la preparacin para localizar la zona en la que el
frotis es ms perfecto (Fig. 11).

En el campo del microscopio se ven con un dominio predominante los eritrocitos (tambin
llamados glbulos rojos o hemates), teidos de color rojo. No tienen ncleo y se observa un
entorno ms claro en medio que en los bordes. Los leucocitos (tambin llamados glbulos
blancos) se identifican fcilmente por la presencia del ncleo. Estos se clasifican en:
Linfocitos: Un poco ms grandes que los eritrocitos, con un ncleo muy voluminoso que
ocupa casi toda la clula. Aparece fuertemente teido de un color violeta oscuro.
Monocitos: Normalmente son poco frecuentes, hay que desplazarse por la preparacin para
encontrar alguno. Tienen un ncleo muy grande y redondeado que aparece teido en color
violeta.
Polimorfonucleares: Presentan el ncleo fragmentado, como lbulos grandes.
Eosinfilos: Son granulocitos poco abundantes de color rojizo y el ncleo teido de color azul
marino. Estas clulas aumentan su nmero en caso de parasitosis o alergia.
Basfilos: Presentan un ncleo teido de rojo y grnulos en el citoplasma teidos de color
azul oscuro.
Fig. 11: Morfologa celular y ncleo de las clulas sanguneas (extrado de "Prcticas de
citologa").

PROCEDIMIENTO 1

MATERIAL A UTILIZAR
Guantes
Papel de cocina
Lancetas estriles.
Soporte de tincin
Cinta adhesive
Aplicadores de madera largos.
6 portaobjetos
6 cubreobjetos
Material biolgico: Sangre humana

REACTIVOS
Etanol 90%
Agua destilada.
Metanol
Giemsa

PROCEDIMIENTO
Fijacin
1. Colocar una servilleta de papel sobre la superficie donde se trabaja.
2. Colocar los 6 portaobjetos desengrasados sobre la servilleta.
3. Lavar y limpiar con un antisptico el extremo libre del dedo ndice.
4. Con la lanceta pinchar rpidamente el extremo del dedo.
5. Apretar la punta del dedo hasta lograr ver una gota de sangre.
6. Colocar una gota de sangre en el extremo de uno de los portaobjetos.
7. Seguidamente colocar un portaobjeto como lo indica Fig. 10 y deslizarlo de un extremo al
otro. Slo debe pasarse una vez de forma continua e ininterrumpida.
8. Repetir la operacin con 2 portaobjetos ms, con el fin de seleccionar la mejor tincin.
9. Secar al aire las extensiones lo ms rpido posible. La desecacin se facilita con un
movimiento en forma de abanico, nunca soplando ni usando calor. La rpida desecacin evita
la deformacin de las clulas sanguneas.
10. Depositar el portaobjeto con la extensin de sangre encima del soporte de tinciones.
11. Depositar sobre la extensin unas gotas de metanol y esperar que se evapore.

Tincin
1. Una vez evaporado el metanol, depositar unas gotas de Giemsa (vase anexo I) cubriendo
toda la extensin, evitar desecacin y esperar 5 min.
2. Lavar con A. dest. la preparacin hasta que arrastre todo el colorante.
3. Secar al aire o bien al calor dbil de la flama del mechero.
4. Colocar el cubreobjeto y observar al microscopio iniciando con 40x y despus con 100x.
5. Identificar las clulas sanguneas de acuerdo a la Fig. 11. ESQUEMATIZAR
Nota: Esta tcnica es muy til en anlisis clnicos para el conteo de clulas sanguneas y
comparar los resultados con valores estandarizados. En esta prctica no se tiene tal objetivo.

Eliminacin de residuos biolgicos:

1. Las mesetas de trabajo se desinfectan con etanol al 70 %.

2. Al final de la prctica los portaobjetos con muestra pueden ser sumergidos
en etanol al 70 % por 20 min o en solucin de hipoclorito de sodio; despus
lavarlos con agua y jabn para ser reutilizados o depositarlos donde se
almacena vidrio para reciclar. Los cubreobjetos se desechan al contenedor de
basura punzocortante con peligro biolgico infeccioso.
3. Los guantes se deben colocar en el recipiente donde se almacena material biolgico
infeccioso. El color del recipiente es rojo con el smbolo de riesgo biolgico (Fig. 1).
Resultados 1. Dibujar y nombrar los diferentes tipos de clulas sanguneas con el ncleo
correspondiente.

1. Anlisis de resultados
NEUTROFILOS SEGMENTADOS
PROCEDIMIENTO N 2
TCNICA PARA OBSERVAR LAS CLULAS DEL EPITELIO QUE REVISTE LA CAVIDAD
ORAL:
MATERIALES, INSUMOS Y REACTIVOS POR GRUPO DE TRABAJO
Solucin salina (suero fisiolgico)
Hisopos
Laminas porta objetos
Laminillas cubre objetos
Azul de metileno
Microscopio ptico

Procedimiento
1. Coloque una gota de solucin salina isotnica en un portaobjetos limpio, con un hisopo frote
ligeramente la cara interna de la mejilla y el material que obtenga mzclelo con movimientos
rotatorios junto con la solucin salina isotnica hasta obtener un material con aspecto lechoso
homogneo. Agregue una gota de azul de metileno y cubra la preparacin con un cubreobjetos.
2. Con el objetivo de menor aumento, localice las clulas (va a encontrar algunas clulas
asociadas, otras dobladas o rotas). Busque una o dos que estn completas. El ncleo es
claramente visible si se ajusta la luz convenientemente, tambin se podr observar el
citoplasma y la dimensin de la MC.

2. Resultados
Anlisis de resultados

Cuestionario
1. Qu otras estructuras internas celulares eucariotas se podran observar al microscopio
de campo claro? Por qu?

RTA:

Con el Microscopio campo claro se pueden observar CLULAS VIVAS o Preparaciones fijadas o
coloreadas; se distinguen la FORMA de las clulas y la presencia de la mayora de sus componentes
pero es imposible reconocer la estructura de los mismos. Tambin puedes observar TEJIDOS. Por
ejemplo en la observacin del tejido epitelial de revestimiento se observa la forma de la capa superficial
de clulas basndose en la forma y disposicin de los NCLEOS (nicos elementos identificables). Las
clulas cbicas tendrn ncleos esfricos y las cilndricas como valos alargados dispuestos en sentido
perpendicular a la superficie. Los ncleos parecen ser alargados como valos (clulas cilndricas) y en
otros parecern que son esfricos (clulas cbicas).

2. Cul estructura interna es la ms notable dentro del compartimento de una clula

vegetal?

RTA : El citoplasma, ya que es la parte del protoplasma que, en una clula eucariota, se encuentra entre
el ncleo celular y la membrana plasmtica.Y Consiste en una dispersin coloidal muy fina de aspecto
granuloso, el citosol o hialoplasma, y en una diversidad de orgnulos celulares que desempean
diferentes funciones.

Su funcin es albergar los orgnulos celulares y contribuir al movimiento de estos.

El citoplasma se divide en ocasiones en una regin externa gelatinosa, cercana a la membrana, e

implicada en el movimiento celular, que se denomina ectoplasma; y una parte interna ms fluida que
recibe el nombre de endoplasma y donde se encuentran la mayora de los orgnulos.

El citoplasma de las clulas eucariotas est subdividido por una red de membranas (retculo
endoplasmtico liso y retculo endoplasmtico rugoso) .

3. Cul estructura interna ms notable dentro de las clulas del epitelio de la mucosa bucal ?
explique
Ciertas estrucuturas epiteliales tienen prolongaciones denominadas cilios los cuales ayudan a
eliminar sustancias extraas. Por ejemplo de las vas respiratoria
El tejido epitelial se deriva de las tres capas germinativas : ectodermo, endodermo y
mesodermo

4. Elabore una lista de las estructuras internas que constituyen a las clulas eucariotas y
distinga cada una de ellas de acuerdo al tipo de clula animal, vegetal y hongos.
Clula animal Clula vegetal
Estructuras bsicas Membrana Membrana plasmtica
plasmtica Citoplasma
Citoplasma Citoesqueleto
Citoesqueleto
Orgnulos Ncleo (con Ncleo (con nuclolo)
nuclolo) Retculo endoplasmatico rugoso
Retculo Retculo endoplasmatico liso
endoplasmatico Ribosomas
rugoso Aparato de golgi
Retculo Mitocondria
endoplasmatico liso
Vesculas
Ribosomas
Vacuola central(con tenoplasto)
Aparato de golgi
Plastos
Mitocondria
(cloroplastos,leucoplastos,cromopla
Vesculas stos
Lisosomas Microcuerpos
Vacuolas (peroxisomas,glioxisomas)
Centrosomas (con
centriolos)
Estructuras Flagelos Flagelos (solo en gametos )
adicionales Cilios Pared celular
Plasmodesmos

ESTRUCTURA DE LOS HONGOS : son eucarioticos , carentes de clorofila, con pared celular
de estructura similar a la de las plantas , pero con quitina en lugar de celulosa

5. Cuales son las cifras normales de hemoglobina que debe tener el ser humano?

Los resultados normales para los adultos varan, pero en general son:

Hombre: de 13.8 a 17.2 gramos por decilitro (g/dL) o 138 a 172 gramos por litro (g/L)

Mujer: de 12.1 a 15.1 g/dL o 121 a 151 g/L

Los resultados normales para los nios varan, pero en general son:

Recin nacido de 14 a 24 g/dL o 140 a 240 g/L

Beb de 9.5 a 13 g/dL o 95 a 130 g/L

Los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre diferentes laboratorios.
Algunos laboratorios utilizan diferentes mediciones o analizan muestras diferentes su examen.

Nota: mg/dL = miligramos por decilitro

6. Porqu se considera a los glbulos rojos clulas anucleadas? Explique.

RTA :los glbulos rojos no tienen ncleo, por lo que disponen de ms espacio
para transportar Oxigeno y son ms ligeros, Adems ,la desventaja de no tener
ncleo es que son incapaces de restaurar sus partes internas, por lo que,
despus de unos ciento veinte das, empiezan a deteriorarse y pierden su
elasticidad. Su accionar es pasivo, simplemente se limitan a seguir la corriente de la
sangre, de ah que algunos los cataloguen como clulas muertas.

7. Qu importancia tiene la presencia de diferentes estructuras en el torrente sanguneo?

El torrente sanguneo se puede definir como el flujo de sangre por los vasos sanguneos
y cada unas de sus estructuras cumple una funcin en especifico como son :

Los leucocitos o glbulos blancos tienen como funcin principal defender al organismo contra las
infecciones. De acuerdo con el aspecto de su citoplasma y su ncleo, se dividen en polimorfonucleares
(neutrfilos, basfilos y eosinfilos) y mononucleares (monocitos y linfocitos).

Las plaquetas o trombocitos son restos celulares derivados de unas clulas llamadas megacariocitos, y
participan en el proceso de coagulacin sangunea.

Los hemates o glbulos rojos contienen una sustancia llamada hemoglobina, a la cual deben su color
rojo; y como este compuesto de hierro es sumamente afn con el oxgeno, los hemates son los
responsables de fijarlo y transportarlo a travs de la sangre.
 PARMETROS DE EVALUACIN DE LA PRCTICA DE LABORATORIO

1. Para el Estudiante:

NOMBRE DE LOS
ITEM DE EVALUACIN VALO
ESTUDIANTES DEL
GRUPO R
Usa atuendo requerido para estar en el
laboratorio
Llega puntual al laboratorio
Es proactivo y dedicado en su quehacer
prctico
Mantiene el orden y la disciplina en el
laboratorio
Intercambia opiniones con sus
compaeros de manera respetuosa y
cordial
Usa atuendo requerido para estar en el
laboratorio
Llega puntual al laboratorio
Es proactivo y dedicado en su quehacer
prctico
Mantiene el orden y la disciplina en el
laboratorio
Intercambia opiniones con sus
compaeros de manera respetuosa y
cordial
Usa atuendo requerido para estar en el
laboratorio
Llega puntual al laboratorio
Es proactivo y dedicado en su quehacer
prctico
Mantiene el orden y la disciplina en el
laboratorio
Intercambia opiniones con sus
compaeros de manera respetuosa y
cordial
Usa atuendo requerido para estar en el
laboratorio
Llega puntual al laboratorio
Es proactivo y dedicado en su quehacer
prctico
Mantiene el orden y la disciplina en el
laboratorio
Intercambia opiniones con sus
compaeros de manera respetuosa y
cordial
 Usa atuendo requerido para estar en
el
Laboratorio
Llega puntual al laboratorio
Es proactivo y dedicado en su quehacer
prctico
Mantiene el orden y la disciplina en el
laboratorio
Intercambia opiniones con sus
compaeros de manera respetuosa y
cordial
Usa atuendo requerido para estar en el
laboratorio
Llega puntual al laboratorio
Es proactivo y dedicado en su quehacer
prctico
Mantiene el orden y la disciplina en el
laboratorio
Intercambia opiniones con sus
compaeros de manera respetuosa y
cordial

2. Para el grupo:

ITEM DE VALO
EVALUACIN
Elaboran los objetivos de la prctica de manera correcta de acuerdo a los R
parmetros establecidos.
Redactan la introduccin de la gua con base en los principios establecidos
en la metodologa de la investigacin.
Describen sus resultados de manera clara teniendo mediante un discurso
contextualizado y coherente a partir de hechos reales observados.
Demuestran una actitud cientfica mediante los anlisis construidos a partir
de una hiptesis acertada y el uso de elementos conceptuales tericos,
con el fin de explicar los hechos observados.
Elaboran su pre-informe y organizan sus materiales de trabajo,
previamente antes de ingresar al laboratorio.