Sunteți pe pagina 1din 25

UNIVERSITATEA DE TIINE AGRICOLE I

MEDICIN VETERINAR
CLUJ NAPOCA
COALA DOCTORAL DE TIINE
AGRICOLE INGINERETI
Facultatea de Agricultur

REZUMAT AL TEZEI DE DOCTORAT

CERECETRI PRIVIND IMPLICAREA MICORIZIAN


N PATOLOGIA FUZARIOZEI CARTOFULUI

Drd. Ing. IOANA DANIELA BORCA

Conductor tiinific,
Prof. univ. dr. CARMEN EMILIA PUIA

ClujNapoca
2015
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

INTRODUCERE

Cercetrile efectuate au avut ca premis analiza micorizelor n cadrul unei


agriculturi moderne i impactul lor n protecia plantelor.
n contextul modificrilor globale curente, caracterizate prin: schimbri climatice,
conservarea ecosistemului, agricultura sustenabil, dezvoltarea sistemelor de cultur a
plantelor pentru nevoile viitoare i sigurana alimentar, micorizele ar putea reprezenta o
soluie viabil.
Bolile plantelor reprezint o problem major a agriculturii, la nivel mondial.
Descifrarea mecanismelor accesate de ctre plante pentru a se proteja mpotriva agenilor
patogeni, poate duce la descoperirea unor noi strategii pentru creterea rezistenei la boli,
n cazul plantelor cultivate (Pozo et al., 2005).
Fuzarioza cartofilor reprezint o boal produs de patogenul de sol Fusarium spp..
Acest patogen este recunoscut ca fiind foarte persistent n sol i capabil s
supravieuiasc perioade foarte lungi de timp, fiind dificil de controlat (Leslie and
Summerell, 2006) i avnd o importan economic pe plan mondial (Stevenson et al.,
2001).
Carnegie et al. (2001) au raportat faptul c 60% dintre tuberculii de calitate pot fi
afectai de fuzarioz n timpul depozitrii, iar pierderile anuale de producie atribuite
acestei boli sunt estimate ca fiind cuprinse ntre 6 i 25% .
Rolul micorizelor este de a amplifica procesele de absorbie a nutrienilor din sol
i de a crete rezistena plantelor la secet i boli.
Asociaiile micoriziene mbuntesc abilitatea plantelor de a accesa resursele
nutriionale din sol prin creterea suprafeei de absorbie a sistemului radicular i prin
eliberarea n sol a unor enzime ce au capacitatea de a solubiliza nutrienii greu accesibili
(azot organic, fosfor, fier, etc.) (www.mycorrhizae.com).
Cercetrile efectuate n ultimii 30 de ani recomand controlul biologic ca o
opiune viabil n combaterea bolilor plantelor de cultur (Gnanamanickam, 2002).
Controlul biologic al patogenilor plantelor cultivate reprezint o metod acceptat,
utilizat i chiar promovat n cadrul agriculturii durabile. Aceast metod se bazeaz pe

2
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

managementul resurselor naturale, din care fac parte i anumite organisme din rizosfer
(Siddiqui, 2006).
Fungii micorizieni arbusculari reprezint o component major a rizosferei pentru
majoritatea plantelor i joac un rol important n reducerea incidenei bolilor acestora
(Akthar and Siddiqui, 2008). Asociaiile micoriziene sunt ntlnite n toate sistemele
ecologice, iar micorizele vezicular arbusculare sunt cele mai comune n cadrul sistemelor
agricole (Gianinazzi and Schepp, 1994).
S-a descoperit faptul c mai multe specii de fungi micorizieni au capacitatea de a
controla patogeni de sol, precum specii de: Aphanomyces, Cylindrocladium, Fusarium,
Macrophomina, Phytophthora, Pythium, Rhizoctonia, Sclerotinium i Verticillium
(Harrier and Watson, 2004).
n acest context am propus o analiz de specialitate pentru a evalua implicarea
simbiozelor micoriziene n patologia fuzariozei la cartof.
Obiectivele principale ale acestui studiu le-a reprezentat: identificarea pe baza
caracterelor morfologice a speciei de Fusarium responsabil de producerea putregaiului
uscat al tuberculilor de cartof n zona experimental, analizarea impactului pe care l-a
avut colonizarea micorizian asupra dezvoltrii plantelor de cartof n condiii de infecie
natural i artificial cu Fusarium spp.. Un alt obiectiv al cercetrii prezente l-a constituit
studiul efectului pe care l-a avut infecia natural i artificial cu Fusarium spp. asupra
nivelului de colonizare micorizian n sistemul radicular al plantelor de cartof, n condiii
de micorizare natural i suplimentar.

I. MATERIALUL UTILIZAT I METODOLOGIA APLICAT N CADRUL


EXPERIENELOR DE LABORATOR

1. Identificarea patogenului
Identificarea speciei Fusarium sambucinum Fuckel responsabil de producerea
putregaiului uscat al tuberculilor de cartof, s-a realizat pe baza caracterelor morfologice.
Protocolul de determinare a patogenului l-am prezentat sub forma unei diagrame
(Figura 1).

3
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

PLANTA BOLNAV

Izolarea patogenului

RECUPERAREA SPECIILOR
DE FUSARIUM

Este nevoie s se NU Fusarium sp.


continue?
DA
REALIZAREA DE SUBCULTURI
PE PDA

PURIFICAREA CULTURILOR DE FUSARIUM

IDENTIFICAREA SPECIILOR DE
FUSARIUM PE PDA

CARACTERELE MORFOLOGICE
ASPECTUL COLONIEI ALE CONIDIILOR

RATA DE CRETERE MACROCONIDIILE


forma
mrimea
CARACTERISTICILE
modul de formare
MICELIULUI AERIAN

MICROCONIDIILE
REVERSUL form
COLONIEI/PIGMENTAREA mrime
abundena

COLECTAREA I SINTETIZAREA CONFRUNTAREA


INFORMAIILOR TAXONOMIC
(morfologice, fiziologice, gazda,
distribuia geografic)

Figura 1. Diagrama protocolului de identificare a speciilor de Fusarium (original)

4
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

Cultivarul*

Inocularea

Manifestarea simptomelor specifice bolii

Reizolarea
(Metoda singurului spor)

Cultura pur

Reidentificarea

Patogenul Patogenul
identic cu cel diferit de cel
utilizat pentru utilizat pentru
inocularea inocularea
cultivarului cultivarului

Test de patogenitate reuit Test de patogenitate euat

Figura 2. Diagrama testului de patogenitate (original)


*cultivarul trebuie sa fie identic cu cel de pe care s-a observat i izolat boala n cmp

5
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

2. Testarea patogenitii
Pentru a dovedi patogenitatea organismului izolat s-a realizat testul de patogenitate
utiliznd o adaptare a postulatelor lui Koch, etap important a procesului de diagnoz
descris de Lester et al. (2008).
Paii parcuri pentru testarea patogenitii sunt prezentai sub forma unei diagrame
(Figura 2).
3. Infecia artificial
Dup identificarea speciei Fusarium sambucinum Fuckel, aceasta a fost cultivat
pe plci Petri (PDA) n vederea obinerii inoculului necesar procesului de infecie
artificial.
Realizarea infeciei artificiale s-a realizat astfel:
Experiena an I: dup 10-14 zile de la obinerea culturilor pure de Fusarium
sambucinum Fuckel s-a realizat cu ajutorul unei suspensii de spori. dup metoda
utilizat de Askar and Rashad (2010).
Experiena an II i III: infecia artificial cu Fusarium sambucinum Fuckel s-a
realizat la tuberculii de smn (360 tuberculi/experien, 120 tuberculi/soi)
utiliznd metoda descris de Sagar et al. (2011).
4. Analiza probelor radiculare n vederea determinrii nivelului de colonizare
micorizian
a. Colorarea probelor, faz pentru realizarea creia s-a modificat metoda descris de
ctre Phillips and Hayman (1970) i dezvoltat de Vierheilig et al. (1998).
b. Estimarea colonizrii micoriziene s-a realizat conform parametrilor propui de
Trouvelot et al. (1986, citat de www.dijon.inra.fr):
- Frecvena micorizelor n sistemul radicular (%)
- Intensitatea colonizrii micoriziene n sistemul radicular (%)
- Intensitatea colonizrii micoriziene n fragmentele de rdcin (%)
- Abundena arbusculilor n prile micorizate ale fragmentelor de rdcin
(%)
- Abundena arbusculilor n sistemul radicular (%)
Pentru a crea o imagine ct mai precis i complet asupra gradului de colonizare
micorizian s-a adaptat formula de calcul a gradului de atac folosit n aprecierea strii
fitosanitare a culturilor agricole.

6
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

n cadrul acestei lucrri gradul de atac a fost denumit grad de colonizare


micorizian (%).

II. MATERIALUL UTILIZAT I METODOLOGIA APLICAT N CADRUL


EXPERIENELOR DE CMP

Pentru desfurarea experienei trifactoriale, s-a amplasat cmpul experimental n


localitatea Rscruci, jud. Cluj.
1. Protocolul experienei
Metoda de cercetare: Metoda parcelelor subdivizate
A x B x C - R3 x 2 x 2 - 3
Factorul A soiul, cu 3 graduri:
a1 = timpuriu (ROCLAS)
a2 = semitimpuriu (CHRISTIAN)
a3 = tardiv (GARED)
Factorul B inocularea micorizian, cu 2 graduri:
b1 = natural
b2 = suplimentar
Factorul C infecia cu Fusarium spp., cu 2 graduri
c1 = natural
c2 = artificial (Fusarium sambucinum Fuckel)
La nivelul fiecrei variante experimentale s-au plantat 20 cuiburi pe cte 4 rnduri,
cu o distan de plantare de 27 cm ntre plante/rnd i 75 cm ntre rnduri, respectnd
tehnologia de cultur propus de Muntean i colab. (2008).
Plantarea, rebilonarea i recoltarea s-au efectuat manual, iar pe parcursul perioadei
de vegetaie nu s-au aplicat tratamente chimice.
Ca inocul micorizian s-a folosit produsul Mykosoil al firmei GreenBase un
stimulent biologic ce conine fungi micorizieni de tip arbuscular (www.mykorrhiza.eu).
2. Analiza parametrilor de dezvoltare a plantelor
n cadrul cercetrii s-au efectuat observaii pe secvene de vegetaie, la 30 i 50
zile de la plantare conform protocolului utilizat n experienele efectuate de ctre

7
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

Bhattarai and Mishra (1984), pentru stabilirea influenei pe care o are colonizarea
micorizian asupra parametrilor de dezvoltare a plantelor.
Parametrii urmrii au fost:
Talia plantelor (cm)
Aria foliar (cm2)
Numrul de tulpini
La recoltare s-au prelevat date n ceea ce privete producia, date care au fost
raportate la ha, iar parametrii urmrii au fost:
Numrul tuberculilor (ha)
Greutatea tuberculilor (kg/ha)
3. Colectarea probelor radiculare pentru estimarea nivelului de colonizare
micorizian
Pentru o imagine ct mai complet asupra nivelului de colonizare micorizian i a
evoluiei acestuia n sistemul radicular al plantelor de cartof, probele radiculare s-au
colectat din cmp n trei secvene de vegetaie, la 30, 50 i 70 zile de la plantare
(Bhattarai and Mishra, 1984).
Probele de rdcini au fost prelevate din fiecare variant a experienei, fiind
etichetate corespunztor i duse la laborator n vederea analizelor corespunztoare.

III. REZULTATE PRIVIND IDENTIFICAREA SPECIEI FUSARIUM SAMBUCINUM


FUCKEL

Dup obinerea unei culturi pure prin tehnica singurului spor s-a trecut la
identificarea patogenului pe mediu de cultur (PDA), etap n care s-au urmrit
caracterele macroscopice i microscopice dezvoltate de patogen.
Pentru partea macroscopic a identificrii izolatelor de Fusarium sambucinum
Fuckel s-au fcut observaii cu privire la creterea i dezvoltarea coloniilor prin
msurarea diametrelor de cretere, dar i cu privire la aspectul coloniilor prin
caracterizarea miceliului aerian i a reversului coloniei.
Etapa microscopic a identificrii izolatelor de Fusarium sambucinum Fuckel a
cuprins observaii asupra caracterelor morfologice ale conidiilor. n cadrul experienelor

8
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

s-au msurat lungimea i limea a cte 100 spori din fiecare izolat de Fusarium
sambucinum Fuckel.
Toate coloniile crescute pe mediu PDA au avut diametrele cuprinse ntre limitele
specifice pentru Fusarium sambucinum Fuckel (izolatul in vivo=5.4 cm, izolatul in
vitro=5.9) i aspectul coloniilor dezvoltate pe mediu de cultur a fost caracteristic speciei
identificate.
Observaiile i msurtorile microscopice au indicat faptul c macroconidiile
analizate sunt tipice speciei Fusarium sambucinum Fuckel: au o form falcat prezentnd
o celul apical sub form de bot i o celul bazal sub form de picior. Numrul de
septe al macroconidiilor a fost cuprins ntre trei i ase. Microconidiile au fost semnalate
ntr-un numr redus i au fost ntlnite n miceliu aerian, avnd o form oval i
prezentnd nici o sept sau doar una singur.
Dimensiunile macroconidiilor se ncadreaz n limitele specifice pentru Fusarium
sambucinum Fuckel, iar microconidiile sunt foarte rare, caracter tipic speciei identificate.
Pentru izolatul in vivo lungimea macroconidiilor a prezentat valori cuprinse ntre
21,39 m (minim) i 40,83 m (maxim). Pentru majoritatea macroconidiilor msurate,
valorile s-au ncadrat ntre 25,28 m i 38,89 m.
n ceea ce privete limea macroconidiilor izolatului in vivo valorile au oscilat
ntre un minim de 3.47 m i un maxim de 6.07 m. Majoritatea valorilor s-au situat n
intervalul cuprins ntre 3,90 m i 5,63 m.
Pentru izolatul in vitro lungimea macroconidiilor a nregistrat valori minime de
20.2 m i maxime de 36 m, n timp ce majoritatea macroconidiilor au avut lungimea
cuprins ntre 22,82 m i 35,11 m.
Limea msurat pentru macroconidiile izolatului in vitro a variat ntre valori
de minim 3.5 m i maxim 5.6 m. Majoritatea macroconidiilor msurate au prezentat
valori ale limii cuprinse ntre 3,68 m i 5,25 m.

IV. REZULTATE PRIVIND TESTAREA PATOGENITII

Aceast etap a presupus inocularea n condiii controlate a tuberculilor de cartof


cu organismul patogen identificat (Fusarium sambucinum Fuckel).

9
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

Pentru testarea patogenitii speciei Fusarium sambucinum Fuckel, responsabil


de producerea putregaiului uscat al tuberculilor de cartof, s-a utilizat acelai tip de
cultivar de pe care s-a realizat izolarea patogenului n vederea identificrii iniiale.
Inocularea patogenului, pentru ca boala s poat fi reprodus, s-a realizat pe
suprafaa tuberculilor de cartof deoarece aceast metod coincide cu mecanismul natural
de infecie.
Dup aproximativ 5 zile de la inocularea tuberculilor au nceput s se manifeste
primele simptome. Simptomele manifestate au fost tipice putregaiului uscat produs de
patogenul inoculat (Fusarium sambucinum Fuckel).
S-a trecut mai departe la reizolarea patogenului pe mediu de cultur (PDA) i s-au
fcut observaii n legtur cu caracterele macroscopice i microscopice ale coloniilor
dezvoltate pe plcile de reizolare.
Patogenul reizolat a prezentat caractere morfologice identice cu patogenul utilizat
pentru inocularea cultivarului (Fusarium sambucinum Fuckel), lucru care confirm
reuita testului de patogenitate.

V. REZULTATE PRIVIND PARAMETRII DE CRETERE AI PLANTELOR DE


CARTOF

Pentru analizarea parametrilor de cretere a plantelor de cartof s-au realizat


msurtori, n cadrul fiecrei variante experimentale, n dou secvene de vegetaie,
respectiv 30 zile i 50 zile de la plantare.
1. Analiza taliei plantelor
n condiii de infecie natural i sub influena micorizrii suplimentare talia
plantelor a fost cea mai ridicat n primul an experimental pentru ambele secvene de
vegetaie luate n calcul.
Soiul cel mai puternic influenat de micorizarea suplimentar a fost soiul timpuriu
(24,33 cm - 2012; 14,00 cm - 2013; 22,1 cm - 2014) pe parcursul primei secvene de
vegetaie i soiul semitimpuriu (63,00 cm 2012; 60,11 cm 2013; 22, 24 cm - 2014) pe
parcursul celei de-a doua secvene.
n ceea ce privete influena infeciei artificiale cu Fusarium sambucinum Fuckel
asupra parametrului studiat, n condiii naturale de micorizare s-a observat faptul c pe

10
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

prima secven de vegetaie toate soiurile au avut cele mai mici valori n cel de-al doilea
an al experienei (8,00 cm Roclas; 5,29 cm Christian; 8,95 cm Gared).
Pe parcursul celei de-a doua secvene de vegetaie, pentru soiul timpuriu (32,33
cm) i cel semitimpuriu (23,84 cm), tot anul doi experimental s-a evideniat ca fiind cel
mai puternic influenat n urma infeciei artificiale cu Fusarium sambucinum Fuckel.
Dintre cele trei soiuri studiate n condiii de micorizare natural, cel mai puternic
influenat n urma infeciei artificiale cu Fusarium sambucinum Fuckel, pe parcursul
anilor experimentali i a secvenelor de vegetaie, a fost soiul semitimpuriu.
Efectul micorizrii suplimentare asupra taliei plantelor n condiii de infecie
artificial cu Fusarium sambucinum Fuckel pe parcursul tuturor secvenelor de vegetaie
studiate, a fost cel mai evident n al treilea an experimental. Acest lucru s-a nregistrat
pentru toate soiurile de cartof luate n calcul, excepie fcnd soiul semitimpuriu pe
parcursul celei de-a doua secvene de vegetaie, acesta a avut cele mai mari valori ale
parametrului analizat n anul doi al experienei.
Efectul infeciei artificiale cu Fusarium sambucinum Fuckel asupra taliei
plantelor, n condiiile unei micorizri suplimentare, s-a manifestat cel mai puternic n
cadrul celui de-al doilea an experimental.
2. Analiza ariei foliare a plantelor
Sub influena inoculrii suplimentare cu fungi micorizieni i n condiii naturale de
infecie cu Fusarium spp., aria foliar a celor trei soiuri de cartof studiate, a nregistrat
cele mai ridicate valori pe parcursul celei de-a doua secvene de vegetaie din cadrul
primului an al experienei (2499.66 cm2 Roclas; 2294,62 cm2 Christian, 1493,1 cm2
Gared).
n decursul primei secvene de vegetaie, cea mai puternic influen a micorizrii
suplimentare s-a manifestat pentru primul an experimental n cazul soiului timpuriu
(1026,52 cm2) i tardiv (864,42 cm2).
Cele mai mici valori ale ariei foliare s-au nregistrat pentru soiul tardiv.
Sub efectul infeciei artificiale cu Fusarium sambucinum Fuckel i n condiii
naturale de micorizare, cele trei soiuri de cartofi prezint cele mai mici valori ale ariei
foliare pe parcursul primei secvene de vegetaie i n cadrul celui de-al doilea an de
studiu (247,5 cm2 Roclas; 131,06 cm2 Christian; 444,4 cm2 Gared). n cea de-a doua
secven de vegetaie, evoluia valorilor ariei foliare respect acelai model ca n prima

11
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

secven (971,92 cm2 Roclas; 655,61 cm2 Christian), cu excepia soiului tardiv.
Acesta a nregistrat cele mai ridicate valori (1865,28 cm2 Gared) pe parcursul celui de-
al doilea an experimental.
Din punct de vedere al dezvoltrii ariei foliare n condiii de infecie artificial i
micorizare natural, cele mai mici valori le-a prezentat soiul semitimpuriu, indiferent de
anii experimentali sau de secvenele de vegetaie. Acest lucru indic faptul c acest soi a
fost cel mai puternic influenat n urma infeciei artificiale cu Fusarium sambucinum
Fuckel.
Influena negativ a infeciei artificiale cu Fusarium sambucinum Fuckel asupra
dezvoltrii ariei foliare a plantelor de cartof n condiii de micorizare suplimentar a fost
cea mai puternic, pentru toate soiurile (141,41 cm2 Roclas; 45,7 cm2 Christian; 30,09
cm2 Gared), pe parcursul celui de-al doilea an experimental i pe parcursul primei
perioade de vegetaie luate n calcul.
Dintre toate soiurile de cartof analizate, soiul semitimpuriu a fost cel mai puternic
influenat n urma infeciei artificiale. Acesta a nregistrat cele mai mici valori pe
parcursul tututor secvenelor de vegetaie i n decursul celor trei ani experimentali.
3. Analiza numrului de tulpini
n condiii de micorizare suplimentar i infecie natural cu Fusarium spp. toate
cele trei soiuri de cartof au prezentat cele mai mari valori ale parametrului studiat n
primul an experimental, pentru ambele secvene de vegetaie luate n calcul.
Pe parcursul celei de-a doua secvene de vegetaie, cele mai ridicate valori ale
numrului de tulpini formate au fost nregistrate de soiul timpuriu (7,67) i cel
semitimpuriu (8,33), n cadrul primului an experimental.
Sub influena infeciei artificiale cu Fusarium sambucinum Fuckel i n condiii
naturale de micorizare, numrul de tulpini formate a prezentat cele mai ridicate valori,
pentru toate soiurile de cartof luate n studiu i pe ambele secvene de vegetaie, n cadrul
celui de-al treilea an experimental.
Dintre cele trei soiuri analizate, soiul timpuriu a nregistrat cele mai mari valori
(6,95 30 zile; 7,61 50 zile) pe parcursul celui de-al treilea an experimental.
Sub efectul infeciei artificiale cu Fusarium sambucinum Fuckel i a micorizrii
suplimentare, pe parcursul ambelor secvene de vegetaie luate n calcul, s-a evideniat al

12
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

treilea an experimental. n cadrul acestui an s-au nregistrat cele mai ridicate valori ale
parametrului analizat pentru toate cele trei soiuri de cartof.
Soiul semitimpuriu a prezentat cele mai reduse valori ale numrului de tulpini
formate, pe toate secvenele de vegetaie i pe parcursul tuturor anilor experimentali.

VI. REZULTATE PRIVIND PARAMETRII DE PRODUCIE AI PLANTELOR DE


CARTOF

Pentru a analiza influena micorizrii suplimentare i a infeciei artificiale cu


Fusarium sambucinum Fuckel asupra parametrilor de producie s-au fcut msurtori din
punct de vedere al numrului de tuberculi produi i a greutii acestora.
1. Analiza numrului de tuberculi
Sub efectul micorizrii suplimentare i a infeciei naturale valoarea parametrului
prezint oscilaii n decursul anilor experimentali. n cazul celor trei soiuri de cartof s-au
nregistrat cele mai ridicate valori n anul doi de experien (93004,11 Roclas;
108641,97 Christian, 88065,84 Gared), fiind urmat de ultimul an experimental
(67821,13 Roclas; 45384,71 Christian, 40829,65 Gared).
n condiii de infecie artificial cu Fusarium sambucinum Fuckel i micorizare
natural, pentru toate soiurile de cartof studiate, numrul de tuberculi formai au
nregistrat cele mai mici valori (17283,95 Roclas; 20576,13 Christian, 18106,99
Gared) pe parcursul primului an experimental.
Din punct de vedere al influenei micorizrii suplimentare i a infeciei artificiale
cu Fusarium sambucinum Fuckel asupra numrului de tuberculi cel de-al doilea an
experimental s-a evideniat cu cele mai ridicate valori pentru toate cele trei soiuri de
cartof (74074,07 Roclas; 54320,98 Christian, 79835,38 Gared). Cele mai mici
valori (21399,17 Roclas; 24691,36 Christian, 23045,27 Gared) au fost nregistrate
n cadrul primului an experimental.
Ierarhiznd soiurile de cartof din punct de vedere al influenei micorizrii
suplimentare i infeciei artificiale asupra parametrului studiat, pe parcursul celor trei ani
experimentali, soiul tardiv a prezentat cele mai ridicate valori, urmat de soiul timpuriu i
de cel semitimpuriu.

13
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

2. Analiza greutii tuberculilor


n condiii de micorizare suplimentar i infecie natural soiul semitimpuriu se
evideniaz cu cele mai mari valori ale greutii tuberculilor n al doilea an de studiu
(7983,54 kg/ha). Cele mai mici valori ale parametrului urmrit ( 1234,56 kg/ha) s-au
nregistrat la soiul tardiv n primul an experimental.
La modul general, toate soiurile de cartof studiate, au avut cele mai mari valori n
cel de-al doilea an experimental i cele mai mici valori n primul an de studiu.
Cel mai puin influenat de micorizarea suplimentar, pe parcursul celor trei ani, a
fost soiul tardiv care a nregistrat cele mai mici valori ale parametrului studiat.
Valorile greutii tuberculilor au fost influenate negativ n urma infeciei
artificiale cu Fusarium sambucinum Fuckel. Pentru toate soiurile de cartof studiate cele
mai mici valori (1028,8 kg/ha Roclas; 823,04 kg/ha Christian, 864,19 kg/ha Gared)
s-au nregistrat n primul an experimental.
n cazul soiului timpuriu cele mai mari valori (4403,29 kg/ha) ale parametrului au
fost semnalate n cel de-al doilea an experimental, iar in cazul celorlalte dou soiuri de
cartof studiate, anul trei al experienei a fost caracterizat de cele mai ridicate valori
(2482,67 kg/ha Christian; 4835,98 kg/ha Gared).
n condiii de micorizare suplimentar i infecie artificial cu Fusarium
sambucinum Fuckel, greutatea tuberculilor a manifestat oscilaii ntre soiurile studiate pe
parcursul anilor de studiu. Cele mai ridicate valori (5308,64 kg/ha) au fost semnalate de
soiul timpuriu n cel de-al doilea an experimental i cele mai mici valori (1028,80 kg/ha)
ale parametrului au fost semnalate pentru soiul tardiv n primul an al experienei.

VII. REZULTATE PRIVIND GRADUL DE COLONIZARE MICORIZIAN

Analiza gradului de colonizare micorizian n sistemul radicular al plantelor de


cartof s-a realizat pe parcursul a trei secvene de vegetaie, respectiv 30 zile, 50 zile i 70
zile de la plantare, n fiecare an al experienei (2012, 2013, 2014).
Analiznd evoluia gradului de colonizare micorizian n sistemul radicular, pe
parcursul secvenelor de vegetaie luate n calcul i n decursul anilor experimentali, s-a
constatat c n condiii naturale de micorizare i infecie cu Fusarium spp. (Figura 3)
distribuia valorilor nregistrate a fost uniform.

14
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

n condiii de micorizare suplimentar i infecie natural cu Fusarium spp.


(Figura 4), valorile nregistrate ale gradului de colonizare sunt mai ridicate n comparaie
cu cele din variantele micorizate i infectate natural.

Figura 3 Evoluia gradului de colonizare (%) pe parcursul secvenelor de vegetaie i a anilor


experimentali, n condiii naturale de micorizare i infecie cu Fusarium spp.

Figura 4. Evoluia gradului de colonizare (%) pe parcursul secvenelor de vegetaie i a anilor


experimentali, n condiii de micorizare suplimentar i infecie natural cu Fusarium spp.

Deoarece infecia artificial cu Fusarium sambucinum Fuckel, n primul an


experimental nu a fost realizat la nfiinarea cmpului experimental, s-au prelevat date

15
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

referitoare la influena acesteia asupra gradului de colonizare micorizian ncepnd din a


treia secven de vegetaie.
n condiii de micorizare natural si infecie artificial cu Fusarium sambucinum
Fuckel (Figura 5), soiul timpuriu pe parcursul primului an al experienei a prezentat cel
mai ridicat grad de colonizare.

Figura 5. Evoluia gradului de colonizare (%) pe parcursul secvenelor de vegetaie i a anilor


experimentali, n condiii de micorizare natural i infecie artificial cu Fusarium sambucinum
Fuckel

Figura 6. Evoluia gradului de colonizare (%) micorizian pe parcursul secvenelor de vegetaie i a


anilor experimentali, n condiii de micorizare suplimentar i infecie artificial cu Fusarium
sambucinum Fuckel
Sub influena micorizrii suplimentare, n condiii de infecie artificial cu
Fusarium sambucinum Fuckel (Figura 6), gradul de colonizare micorizian din sistemul

16
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

radicular al celor trei soiuri de cartof studiate a avut valori mai ridicate comparativ cu
cele nregistrate n aceleai condiii de infecie dar de micorizare natural. Acest lucru
demonstreaz influena pozitiv a micorizelor asupra infeciei cu Fusarium sambucinum
Fuckel.

VIII. REZULTATE PRIVIND PROCENTUL DE COLONIZARE ARBUSCULAR

n cadrul acestui studiu s-a analizat impactul infeciei naturale i artificiale cu


Fusarium spp., n condiii de micorizare natural i suplimentar, asupra abundenei
arbusculilor din prile micorizate ale fragmentelor de rdcin, respectiv din sistemul
radicular, pe parcursul a trei secvene de vegetaie (30 zile, 50 zile i 70 zile de la
plantare) n cadrul fiecrui an experimental (2012, 2013, 2014).
1. Analiza abundenei arbusculare din prile micorizate ale fragmentelor de
rdcin
Evoluia abundenei arbusculare n fragmentele de rdcin, n condiii naturale de
infecie i micorizare (Figura 7), nregistrat n anii experimentali i pe parcursul
secvenelor de vegetaie a fost una oscilant pentru toate soiurile de cartof luate n studiu.

Figura 7. Evoluia abundenei arbusculare din fragmentele de rdcin (%) pe parcursul


secvenelor de vegetaie i a anilor experimentali, n condiii naturale de micorizare i infecie cu
Fusarium spp

Sub influena micorizrii suplimentare i n condiii de infecie natural cu


Fusarium spp. (Figura 8.) s-a observat faptul c valorile nregistrate ale abundenei

17
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

arbusculilor n prile micorizate ale fragmentelor radiculare au fost mai ridicate pentru
toate soiurile de cartof studiate, comparativ cu cele nregistrate n condiii naturale de
infecie i micorizare. Acest lucru demonstreaz efectul pozitiv al colonizrii micoriziene
suplimentare asupra parametrului analizat.

Figura 8. Evoluia abundenei arbusculare din fragmentele de rdcin (%) pe parcursul


secvenelor de vegetaie i a anilor experimentali, n condiii de micorizare suplimentar i infecie
natural cu Fusarium spp.

n condiii de micorizare natural i infecie artificial cu Fusarium sambucinum


Fuckel (Figura. 9.), cea mai ridicat valoare a abundenei arbusculare n fragmentele de
rdcin, pe parcursul celei de-a treia secvene de vegetaie, a fost nregistrat n ultimul
an experimental pentru soiul semitimpuriu.
Efectul negativ al infeciei artificiale cu Fusarium sambucinum Fuckel asupra
parametrului analizat, a fost resimit de majoritatea soiurilor de cartof luate n studiu.
n cazul soiului timpuriu i a celui semitimpuriu a fost evident influena
micorizrii suplimentare n condiii artificiale de infecie cu Fusarium sambucinum
Fuckel (Figura 10). n condiiile descrise, acestea au nregistrat valori mai ridicate ale
abundenei arbusculilor n prile micorizate ale fragmentelor de rdcin comparativ cu
variantele micorizate natural.
Analiza parametrului n cadrul ultimei secvene de vegetaie a celor trei ani
experimentali, a evideniat soiul timpuriu care n cel de-al treilea an experimental a
nregistrat cea mai ridicat valoare a parametrului. La polul opus, cu cea mai mic
valoare a parametrului s-a situat soiul tardiv n al doilea an de studiu.

18
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

Figura 9. Evoluia abundenei arbusculare din fragmentele de rdcin pe parcursul secvenelor de


vegetaie i a anilor experimentali, n condiii de micorizare natural i infecie artificial cu
Fusarium sambucinum Fuckel

Figura 10. Evoluia abundenei arbusculare din fragmentele de rdcin (%) pe parcursul
secvenelor de vegetaie i a anilor experimentali, n condiii de micorizare suplimentar i infecie
artificial cu Fusarium sambucinum Fuckel

2. Analiza abundenei arbusculare din sistemul radicular


Din punct de vedere al evoluiei abundenei arbusculilor din sistemul radicular, n
condiii naturale de infecie i micorizare (Figura 11.) s-a evideniat cel de-al treilea an
experimental cu cele mai mari valori nregistrate, pentru toate soiurile de cartof luate n
studiu.

19
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

n condiii de micorizare suplimentar i infecie natural (Figura 12), valorile


abundenei arbusculare din sistemul radicular au fost mai ridicate comparativ cu cele
nregistrate n condiii naturale de micorizare, lucru valabil pentru toate cele trei soiuri de
cartof studiate.

Figura 11. Evoluia abundenei arbusculilor din sistemul radicular (%) pe parcursul secvenelor de
vegetaie i a anilor experimentali, n condiii naturale de micorizare i infecie cu Fusarium spp.

Figura 12. Evoluia abundenei arbusculilor din sistemul radicular (%) pe parcursul secvenelor de
vegetaie i a anilor experimentali, n condiii de micorizare suplimentar i infecie natural cu
Fusarium spp.

20
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

n condiii de micorizare natural i infecie artificial cu Fusarium sambucinum


Fuckel (Figura 13), la o comparaie ntre cei trei ani experimentali, cele mai ridicate
valori ale parametrului analizat n cazul tuturor soiurilor studiate s-au nregistrat n cel
de-al treilea an experimental.

Figura 13. Evoluia abundenei arbusculilor din sistemul radicular (%) pe parcursul secvenelor de
vegetaie i a anilor experimentali, n condiii de micorizare natural i infecie artificial cu
Fusarium sambucinum Fuckel

Sub influena micorizrii suplimentare i a infeciei artificiale cu Fusarium


sambucinum Fuckel (Figura 14) abundena arbuscular din sistemul radicular al soiurilor
de cartof studiate au prezentat valori mai ridicate dect n condiii de micorizare natural.

Figura 14. Evoluia abundenei arbusculilor din sistemul radicular pe parcursul secvenelor de
vegetaie i a anilor experimentali, n condiii de micorizare suplimentar i infecie artificial cu
Fusarium sambucinum Fuckel

21
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

CONCLUZII

1. Micorizarea suplimentar, n condiii de infecie natural cu Fusarium spp., a


influenat pozitiv parametrii de dezvoltare ai plantelor de cartof, att sub aspectul
parametrilor de cretere ct i a celor de producie. Acest lucru avnd o contribuie
indirect la realizarea unui profit mai mare din punct de vedere economic.
2. Inocularea suplimentar cu fungi micorizieni a redus efectul negativ al infeciei cu
Fusarium sambucinum Fuckel asupra dezvoltrii plantelor de cartof.
3. Fungii micorizieni au mbuntit tolerana plantelor de cartof la atacul
patogenului Fusarium sambucinum Fuckel prin compensarea pierderii din
biomasa rdcinii i implicit a funciilor acestora cauzate de patogen. Acest lucru
reprezint o contribuie indirect n ceea ce privete rolul simbiozelor micoriziene
n controlul biologic, prin compensarea funciilor sistemului radicular al plantelor
de cartof datorit hifelor fungilor micorizieni care se dezvolt n sol i cresc
suprafaa de absorbie a rdcinilor, dar i prin faptul c menin activitatea celular
prin formaiunile arbusculare.
4. Simbiozele micoriziene vezicular-arbusculare pot reduce pagubele cauzate de
patogenul Fusarium sambucinum Fuckel n cadrul culturii de cartof.
5. Rezultatele obinute au demonstrate faptul c micorizele vezicular-arbusculare au
redus efectul negative al infeciei cu Fusarium sambucinum Fuckel n cazul
plantelor de cartof infectate artificial, dar i incidena fuzariozei n condiii
naturale de infecie cu Fusarium spp..
6. Infecia cu Fusarium sambucinum Fuckel a afectat n mod negativ nivelul de
colonizare micorizian n sistemul radicular al plantelor de cartof, att din punct
de vedere al gradului de colonizare ct i al arbuscularitii.
7. Efectul de protecie al micorizelor vezicular arbusculare depinde de potenialul
virulent i de nivelul de inocul al patogenului n sol.
8. Utiliznd o diversitate mai mare de fungi micorizieni n cadrul inoculrii
suplimentare a rezultat o competiie mai acerb cu patogenul (Fusarium
sambucinum Fuckel). Acest lucru poate explica rezultatele obinute, conform
crora nivelul de colonizare micorizian din sistemul radicular al plantelor

22
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

infectate artificial a fost mai sczut dect n cazul sistemului radicular al plantelor
de cartof neinfectate artificial.
9. Condiiile de mediu influeneaz att virulena agentului patogen (Fusarium spp.)
ct i gradul de protecie asigurat de micorizele vezicular arbusculare.
10. Dintre cele trei soiuri de cartof luate n studiu, soiul tardiv (Gared) a fost cel mai
puin influenat ca urmare a micorizrii suplimentare, dar i a infeciei artificiale
cu Fusarium sambucinum Fuckel.
11. Soiul de cartof cel mai influenat n urma inoculrii suplimentare cu fungi
micorizieni, dar i a infeciei artificiale cu Fusarium sambucinum Fuckel a fost
soiul semitimpuriu (Christian).
12. Din punct de vedere al anilor experimentali s-a evideniat cel de-al treilea an
(2014) ca fiind anul n care efectul micorizrii suplimentare, dar i cel al infeciei
artificiale cu Fusarium sambucinum Fuckel a fost cel mai redus.
13. Evoluia nivelului de colonizare micorizian n sistemul radicular pe parcursul
secvenelor de vegetaie luate n calcul, a fost influenat de timpurietatea soiurilor
de cartof analizate.
14. n cadrul sistemului radicular al plantelor de cartof s-au ntlnit att fungi
micorizieni vezicular arbusculari de tip Arum ct i de tip Paris. Acest lucru s-a
manifestat att n cadrul variantelor micorizate natural ct i a celor micorizate
suplimentar.

23
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

BIBLIOGRAFIE SELECTIV

1. Akthar M.S., Z.A. Siddiqui, 2008, Arbuscular mycorrhizal fungi as potential


bioprotectants against plant pathogens. Mycorrhizae: sustenaible agriculture
and forestry. Springer Netherlands, Dordrecht, The Netherlands, pp. 61-97.
2. Al Askar A. A., Y. M. Rashad, 2010, Arbuscular mycorrhizal fungi: a
biocontrol agent against common bean Fusarium root rot disease, Plant
Pathology Journal 9(1): 31-38.
3. Bhattarai I.D., Mishra R.R., 1984, Study on the vesicular-arbuscular
mycorrhiza of three cultivars of potato (Solanum tuberosum L.), Plant and Soil
79: 299-303.
4. Carnegie S.F., A.M. Cameron, P. Haddon, 2001, The effect of date of haulm
destruction and harvest on the development of dry rot caused by Fusarium
solani var. coeruleum on potato tubers, Ann. Appl. Biol. 139:209-216.
5. Gianinazzi S., H Schepp, 1994, Impact of arbuscular mycorrhizas on
sustainable agriculture and natural ecosystems, Birkhauser, Basel.
6. Gnanamanickam S.S., 2002, Biological Control of Crop Diseases, Marcel
Dekker Inc., New York, USA.
7. Harrier L.A., C.A. Watson, 2004, The potential role of Arbuscular Mycorrhizal
(AM) fungi in the bioprotection of plants against soil-borne pathogens in
organic and/or other sustainable farming systems. Pest Manage. Sci., 60: 149-
157.
8. Leslie J.F., B.A. Summerell, 2006, The Fusarium Laboratory Manual,
Blackwell Publishing: Oxford.
9. Lester W.B., E.K. Timothy, T. Len, T.P. Bhien, 2008, Diagnostic manual for
plant diseases in Vietnam, Australian Center for Agriculture Research in
Canberra.
10. Muntean L. S., S. Cernea, G. Morar, M. M. Duda, D. I. Vrban, S. Muntean,
2008, Fitotehnie, Editura AcademicPres, Cluj-Napoca.
11. Phillips J. M., D. S. Hayman, 1970, Improved procedures for clearing roots
and staining parasitic and vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi for rapid

24
Ing. Ioana Daniela Borca Rezumatul tezei de doctorat

assessment of infection, Transactions of the British Mycological Society, 55:


157-160.
12. Pozo M.J., L.C. Van Loon, C.M.J. Pieterse, 2005, Jasmonates - Signals in
plant-microbe interactions, J. Plant Growth Regul 23 : 211 222.
13. Sagar V., S. Sharma, A. Jeevalatha, S. K. Chakrabarti, B. P. Singh, 2011,
First report of Fusarium sambucinum causing dry rot of potato in India, New
Disease Reports 24, 5.
14. Siddiqui Z.A., 2006, A proteomics perspective on biocontrol and plant defense
mechanism, PGPR Biocontrol and Biofertilization, Publisher Springer
Netherlands, pp. 233-255.
15. Stevenson W.R., R. Loria, G.D. Franc, D.P. Weingartner, 2001, Compendium
of Potato Diseases, 2nd ed., The American Phytopathological Society, St.
Paul, MN.
16. Vierheilig H., A. Coughlan, U. Wyss, Y. Piche, 1998, Ink and vinegar, a
simple staining technique for arbuscular mycorrhizal fungi, Applied and
Environmental Microbiology 64, 5004-5007.
*http//www.dijon.inra.fr
*http://www.mykorrhiza.eu
*http://www.mykorrhizae.com

25