Dr,Bachene M.

S Technique histopathologie et cytopathologie 2015/2016

MASTER BIOLOGIE MEDICALE

Les colorations de routine (topographiques)

HE : hmatne et osine

Les solutions dhmatoxyline contiennent de lhmatne et un mordant mtallique (sels d'aluminium

ou de fer). Ce mordant est responsable de la coloration. Losine colore les cytoplasmes en rose et les
fibres dans une gamme de roses plus ou moins vifs selon lacidophilie des diffrents lments.

collagne ................................................... rose ple

muscle ..................................................... rose fonc
cytoplasme acidophile ..................................... rouge
basophiles .................................................... pourpre
noyaux ............................................................... bleu
rythrocytes .......................................... rouge cerise
La chromatine devrait tre bleue pourpre et bien distincte, les Nucloles devraient tre violacs.

HPS : Hmatoxyline Phloxine Safran (milieu francophone)

collagne ............................................ Jaune orang

muscle ............................................................... rose
cytoplasme...................................... rose
noyaux ............................................................... bleu
rythrocytes.................................................... Rouge

Les colorations spciales

Les colorations spciales sont ralises pour prciser des structures ou substances suspectes par le
pathologiste lors de son analyse initiale sur les coupes de technique standard.

Les techniques histochimiques sont bases sur des ractions biochimiques qui permettent de mettre
en vidence in situ (= dans les tissus), diffrents constituants (lipides, glucides, protines, acides
nucliques, mtaux, etc).

Mise en vidence des fibres conjonctives :

Les fibres conjonctives comprennent les fibres de collagne, de rticuline et les fibres lastiques. Les
fibres de collagne sont les plus abondantes. On en trouve partout dans lorganisme sauf dans le
systme nerveux central.
Trichrome de Masson :
Cette coloration met en vidence les fibres de collagnes. Cette mthode est trs populaire. Utile
dans ltude de la pathologie du cur (infarctus), foie (cirrhose ) , rein (fibrose glomrulaire) La
plupart des recettes colore en rouge la kratine et les fibres musculaires, en bleu ou vert le collagne
et los, en rouge-clair ou rose les cytoplasmes, et en noir les noyaux de cellules.
Dr,Bachene M.S Technique histopathologie et cytopathologie 2015/2016
MASTER BIOLOGIE MEDICALE

Rsultats:
Noyaux, chromatine et nuclole.....bleu fonc noir
Cytoplasmerouge
Globules rouges..rouge
CollagneBleu

Cette coloration met en vidence les fibres de collagnes. Elle est parfois demande en pathologie
cardiovasculaire.
MOVATT
Noyaux ...bleu noir
Cytoplasme ..rouge
Muscle.....rouge
Collagne et fibres rticulaires.....jaune verdtre
Fibrine ..rouge intense
Mucine et substance de fond....bleu limette

Coloration de Verhoeff
Elle met en vidence le rseau de fibres lastiques. Cette coloration est utile dans le cadre des
diagnostics de lsions dgnratives congnitales ou acquises (vergetures, lastose solaire), de
vasculite (peut tre demande pour mettre en vidence la limitante lastique des vaisseaux),
dartrite temporale. Cette mthode est base sur la coloration des fibres lastiques par lhmatine
combine liode et au chlorure ferrique.
Rsultats:
Noyaux....gris noir
Fibres lastiques..noir
Cytoplasme..selon contre-coloration
Globules rouges selon contre-coloration
Collagneselon contre-coloration

La Rticuline
Cette coloration marque les fibres rticuliniques du stroma et permet de prciser l'architecture des
tumeurs (exemple : architecture folliculaire). Elle est trs utile dans les cas o la tumeur est ncrose.
C'est une coloration cl dans ltude des lsions qui touchent les organes dont la trame est riche en
rticuline comme le foie (fibrose, montre le collagne plus jeune), la rate et les ganglions
lymphatiques (trame rticulinique constituant le squelette), la moelle osseuse
(mylofibrose).
Rsultats:
Fibres de rticuline...noir
Dr,Bachene M.S Technique histopathologie et cytopathologie 2015/2016
MASTER BIOLOGIE MEDICALE

Mise en vidence des glucides

Le PAS
La coloration PAS (pour Periodic Acid Shiff) met en vidence les mucines (pith. bordures en
brosse), les membranes basales, le glycogne ainsi que les filaments et spores mycliens.
La raction lacide priodique de Schiff correspond loxydation de certains polysaccharides par
lacide priodique, rvle par une coloration rouge. Le PAS est couramment associ la diastase
(PAS-diastase) qui digre le glycogne mais laisse persister la coloration rose des mucines intra ou
extracellulaires. Dans les tumeurs indiffrencies, cette coloration est utile pour orienter le diagnostic
vers une origine glandulaire (adnocarcinome). Elle est demande dans le diagnostic de pathologies
du foie et rein.

Le Bleu Alcian
Cette coloration est souvent demande en complment au PAS, PAS-diastase car il rvle les mucines
acides.
Rsultats: les mucosubstances acides deviennent bleues sur fond ros

Le PASM
Le PASM (Methanamine Argent) met en vidence les membranes basales (glycolipides), en
particulier celles des glomrules et tubules rnaux.

Mise en vidence des lipides

Lhuile rouge ou Oil RedO
Se fait sur les coupes conglation. Montage aqueux. Elle est surtout demande pour les pathologies
de la glande parathyrode renfermant des acini et des vacuoles graisseuses. Ou encore pour
visualiser les adnomes ou le stroma graisseux
Rsultats
Lipides liquides et semi-liquidesrouge
NoyauxBleu

Mise en vidence des dpts de calcium

Von Kossa
Les sels de calcium sont transforms en sels dargent rduit ensuite en forme mtallique, indiquant
les sites de calcification. calcifications du sein (dystrophiques)
Rouge alizarin
Met en vidence le calcium tissulaire.

Mise en vidence de lamyloide

Le Rouge Congo
Cette coloration marque en rouge les dpts d'amylose. Il prsente une birfringence rouge-verte en
lumire polarise. Ces dpts sont souvent prsents dans les carcinomes mdullaires de la thyrode
et parfois dans les plasmocytomes et mylomes.
Les tissus le plus souvent touchs par lamyloidose sont le cur (dfaut de contractibilit), la paroi
des vaisseaux, les reins, la rate, le foie et les surrnales (accumulation extracellulaire)
Dr,Bachene M.S Technique histopathologie et cytopathologie 2015/2016
MASTER BIOLOGIE MEDICALE

Rsultats
Amyloide..rose rouge
Noyaux..Bleu

Mise en vidence des micro-organismes

La coloration de Ziehl :
Cette coloration est utilise pour la recherche de Bacilles Acido-Alcoolo-Rsistants . Elle est requise
en cas de suspicion clinique ou histologique de tuberculose, dinfections par mycobactries
atypiques chez des sujets atteints de SIDA (bacilles incurvs et perls).
Rsultats :
Bacilles acido-alcoolo-rsistants..rouge
Fond....Bleu ple

Le Grocott :
Cette coloration met en vidence les micro-organismes soit les levures ou champignons et
parasites ,les glucides de la paroi des champignons sont transforms en aldhydes par oxydation.

Gram :
Trs utilise en bactriologie mdicale; elle permet de colorer les bactries et de les distinguer par
leur aptitude fixer le violet de gentiane Gram + ou la fuchsine Gram -.
La coloration de Gram est fonde sur l'action successive d'un colorant d'aniline, le cristal violet, d'iode
puis d'un mlange d'alcool et d'actone.
Dans un premier temps, le colorant pntre dans la paroi et le cytoplasme, dans un second temps,
l'iode ragit avec le colorant et le rend insoluble. La permabilit plus grande des bactries Gram
ngatif l'alcool permet la dcoloration.
Les bactries Gram positif restent colores en violet ou mauve. Une contre-coloration (par exemple
en rose) permet de visualiser nouveau, les corps cellulaires des bactries Gram ngatif.

Mise en vidence des pigments et prcipits

La coloration de Perls :
Elle tudie le mtabolisme du fer. Met en vidence les complexes insolubles contenant du fer:
hmosidrine, mitochondries surcharges en fer.
Elle est utile dans certaines hmatopathologies (mylodysplasie) ou les pathologies hpatiques.
Caractrise danciennes cicatrices.
Le bleu de Prusse ou le bleu de Turnbull peuvent galement mettre en vidence le fer.
Rsultats
Sels ferriques (Hmosidrine)..Bleu
Noyaux et cytoplasme..Ros