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Accin de protectores bacterianos sobre la

viabilidad de inoculantes de soja y la respuesta de
nodulacin

Fabio Montero

La produccin de inoculantes de soja constituye un tema de trascendental importancia en el

cultivo de plantas que nodulan. Si se consideran todas las etapas que se incluyen en la
utilizacin de estos biofertilizantes, la supervivencia bacteriana sobre la semilla es un aspecto
relevante en razn de que el xito de los preparados de inoculacin depende en su ltima etapa
de la viabilidad de las bacterias sobre las semillas en los sistemas de inoculacin
convencionales, asociado al estado fisiolgico de las cepas involucradas y al efecto de factores
ambientales.

La aplicacin de inoculantes formulados con Bradyrhizobium japonicum sobre semillas de

soja es una prctica comn realizada para lograr una efectiva nodulacin y subsiguiente
fijacin de N2. Inmediatamente despus de la inoculacin, los rizobios frecuentemente quedan
expuestos a condiciones ambientales adversas hasta que ocurre la infeccin. Se conoce que la
mortalidad de B. japonicum sobre la semilla de soja es muy alta desde los primeros minutos
desde el tratamientos de inoculacin.

Una estrategia empleada para mejorar la viabilidad de bacterias sobre semilla es el uso de
protectores bacterianos, diseados principalmente para disminuir el impacto de la desecacin
celular desde que la bacteria se adhiere sobre la superficie de la semilla en el momento de la
inoculacin. El hecho de proteger la bacteria beneficia a la prctica de inoculacin tanto para
las siembras inmediatas como para las retrasadas. Lo retrasos de siembra se pueden producir
por varias causas, entre ellas ciertos factores climticos desfavorables. La presencia de un
protector bacteriano aplicado con el inoculante tambin puede reducir el impacto de las altas
temperaturas ambientales sobre la viabilidad de la bacteria adherida en la semilla.

En la Tabla 1 se presenta el efecto del uso de un protector bacteriano aplicado junto al

inoculante en el momento del tratamiento de semilla de soja Se puede apreciar que la accin
del protector comienza desde el momento en que las bacterias se adhieren a la semilla ya que
en tiempo 0 h el mismo permite la recuperacin de ms del doble de bacterias que en el caso
de inoculante solo. Tambin se observa que las diferencias de viabilidad sobre semilla entre los
dos tratamientos se van incrementando hacia las 48 h, momento en que el efecto del protector
mantiene viable un nmero bacteriano casi 10 veces superior al tratamiento de inoculante

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solo.

Tabla 1. Nmero de B. japonicum sobre semilla de soja tratada con inoculante

lquido solo o en conjunto con un protector bacteriano. Distintas letras indican
diferencias significativas (p< 0,05; DGC).

Tiempo desde Inoculante Inoculante +

inoculacin (h) protector

N B. japonicum semilla-1 (x1000)

0,0 1280 b 3590 a

1,5 423 d 2900 a

3,0 492 d 3130 a

4,5 280d 2590 a

6,0 440d 3270 a

9,0 395d 2190 a

12,0 372d 2050 a

15,0 337d 1470 b

18,0 247d 947 c

24,0 143e 927 c

36,0 88f 813 c

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48,0 67 f 540 c

En la prctica, un tiempo mnimo entre inoculacin y siembra puede ser de 30 minutos. En la

Figura 1 se observa qu ocurre con la viabilidad de un inoculante lquido sobre semilla bajo dos
mtodos de uso. El tratamiento con inoculante y protector promueve una supervivencia
bacteriana varias veces superior a la observada con inoculante y agua.

Fig. 1. Nmero de B. japonicum por semilla de soja a los 30 minutos desde la

inoculacin. Distintas letras indican diferencias significativas (p< 0,05; prueba
LSD).

Para los casos en que el productor quiera asegurar la viabilidad de bacterias del inoculante
sobre la semilla bajo condiciones ambientales adversas, nuestra experiencia indica que puede
ser ms conveniente utilizar una dosis de protector bacteriano en lugar de triplicar la dosis de
inoculante. La Figura 2 muestra un ejemplo de este efecto en la nodulacin de plantas de soja
desarrolladas bajo cmara de crecimiento.

Fig. 2. Respuesta a la inoculacin de soja en cmara de crecimiento con suelo de

Tres Arroyos conteniendo B. japonicum naturalizado. Distintas letras indican
diferencias significativas (p< 0,05; prueba LSD).

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En la Figura 3 se presenta un ejemplo del resultado de una cuantificacin de bacterias por

semilla inoculada y la respuesta de nodulacin. Para este caso la semilla estaba tratada con 7
das de pre-inoculacin. En el tratamiento con inoculante lquido comercial (A) se detectan
alrededor de 30000 bacterias por semilla, en cambio en el tratamiento con protector (B) la
enumeracin resulta en aproximadamente 700000 bacterias por semilla. En cuanto a la
nodulacin tambin se observa un incremento significativo en presencia del protector, como
resultado del mantenimiento de la aptitud del inoculante adherido a la semilla que condujo a
la produccin de ndulos.

Fig. 3. Nmero de bacterias por semilla de soja y respuesta de nodulacin en

plantas desarrolladas bajo condiciones controladas. La semilla tena 7 das de
pre-inoculacin con inoculante lquido (A) o con inoculante lquido y protector
bacteriano (B).

A (inoculante)

B (inoculante + protector)

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La semilla de soja frecuentemente se trata con productos qumicos de aplicacin directa tales
como fungicidas, para prevenir daos por enfermedades en los primeros estados del cultivo.
En ciertos casos, existe incompatibilidad entre el producto qumico y el inoculante, lo cual se
traduce en una disminucin de la viabilidad bacteriana sobre semilla y en una alteracin de la
nodulacin de la leguminosa. Uno de los principios activos ms usados actualmente en el
tratamiento antifngico de semillas de soja es el Tiram y ha sido reportado con distintos
grados de compatibilidad con respecto a la supervivencia de B. japonicum sobre semilla de
soja y la respuesta de nodulacin. Los resultados pueden diferir dependiendo de la
formulacin comercial que contiene Tiram y tambin si ste se utiliza en conjunto con otros
principios activos o formulaciones de agroqumicos. Es de importancia agrcola el desarrollo
de agroqumicos en cuyo diseo se considere la compatibilidad con bacterias de inoculantes.
La accin de los protectores bacterianos de uso conjunto con los inoculantes puede atenuar los
efectos txicos de fungicidas, mejorando la compatibilidad entre el producto biolgico y el
qumico, en todas las etapas de la inoculacin donde el inoculante est en contacto con el
agroqumico. En la Tabla 2 se muestra la supervivencia de bacterias sobre semilla provenientes
de una mezcla de productos de aplicacin simultnea; el agregado de protector en la mezcla de
inoculante y fungicida (Tiram 10% + Carbendazim 10%) mejora significativamente la
viabilidad de las bacterias en esas condiciones y esto se traduce en una mayor supervivencia
sobre semilla.

Tabla 2. Nmero de B. japonicum por semilla de soja, recuperado de mezclas de

inoculante lquido, protector y fungicida (Tiram 10% + Carbendazim 10%) que
haban permanecido hasta 24 h en reposo y a temperatura ambiente. Distintas
letras minsculas dentro de una fila indican diferencias significativas entre
tratamientos de mezclas (p< 0,05; LSD); distintas letras maysculas dentro de
una columna indican diferencias significativas entre niveles de tiempo (p< 0,05;
LSD).

Tiempo desde Inoculante Inoculante + Inoculante +

preparacin de fungicida fungicida +

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mezcla (h) protector

N B. japonicum semilla-1 (x1000)

0 199,2 a1 185,8 a 1686,7 b

A2 C C

2 545,8 b 100,0 a 893,3 b

B B B

5 445,8 b 63,7 a 906,7 c

B B B

24 397,5 c 9,3 a 72,1 b

B A A

En la Tabla 3 se presentan resultados de compatibilidad de un inoculante de soja aplicado en

conjunto con distintos fungicidas de uso comn y un protector bacteriano, a nivel de
supervivencia de Bradyrhizobium sobre semilla de soja. En general se evidencia la accin del
protector bacteriano desde el primer tiempo de determinacin (1 h). En los tratamientos con
fungicidas, la presencia de protector incrementa la supervivencia bacteriana sobre semilla
hasta 15 veces respecto a los tratamientos sin protector, para las 24 h desde la inoculacin.

Tabla 3. Nmero de B. japonicum sobre semilla de soja tratada con inoculante

lquido en combinacin con protector bacteriano y fungicida biolgico o
fungicidas qumicos, entre 1 y 144 h desde la inoculacin. Distintas letras indican
diferencias significativas entre tratamientos (p< 0,05; DGC).

Inoculacin Tiempo desde Sin protector Con protector

inoculacin (h)

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N B. japonicum/semilla (x1000)

Inoculante + agua 1 320 a 730 a

24 160 a 410 a

48 100 b 420 a

72 61 b 310 a

144 22c 190a

Inoculante + Tiram 10% + 1 260 a 550 a

Carbendazim 10%

24 80 b 240 a

48 90 b 270 a

72 26 c 140 a

144 9d 78 b

Inoculante + Fludioxonil 2,5% + 1 220 a 530 a

Metalaxil-M 1%

24 44 b 420 a

48 13 d 340 a

72 9d 220 a

144 2e 110 b

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Inoculante + Tiram 20%+ 1 100 b 470 a

Carboxin 20%

24 20 d 310 a

48 26 c 200 a

72 9d 79 b

144 5e 56 b

En la Figura 4 se muestra la accin del protector bacteriano sobre la nodulacin potencial de

plantas de soja originadas de semillas tratadas con inoculante y fungicida (Tiram 20% +
Carboxin 20%), que permanecieron hasta 6 das entre la inoculacin y la siembra, en suelo
libre de B. japonicum y bajo condiciones controladas. Se observa la respuesta positiva del
protector bacteriano en la produccin de ndulos y su masa seca, especialmente en las plantas
procedentes de semillas pre-inoculadas desde 1 da antes de la siembra.

Fig. 4. Nodulacin de soja tratada con inoculante lquido y fungicida (Tiram 20%
+ Carboxin 20%), con o sin protector bacteriano. Distintas letras minsculas
indican diferencias significativas de nmero de ndulos / planta (p< 0,05; DGC);
distintas letras maysculas indican diferencias significativas de masa seca
ndulos / planta (p< 0,05; DGC); la barra es 1 error estndar.

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Estos resultados indican que es posible la inoculacin en presencia de fungicidas, siempre que
la misma se realice con todas las precauciones necesarias. Es fundamental partir de un
inoculante de alta calidad, no contaminado, con alta concentracin de clulas fisiolgicamente
activas y metablicamente aptas para resistir las adversidades ambientales a las que se
exponen una vez adheridas a la semilla. A su vez, es muy importante el uso de un protector
bacteriano que haya sido correctamente diseado para que cumpla su funcin de proteccin
celular y cuya utilizacin a campo resulte prctica. Para que se cumplan estos requisitos los
productos deben ser fabricados bajo esquemas de proceso acordes y con controles estrictos de
calidad en todos los puntos crticos de la elaboracin y en el posterior almacenamiento durante
su vida til especificada.

En conclusin, es fundamental aprovechar al mximo el nitrgeno de la

atmsfera en un cultivo de soja a travs de una simbiosis rizobio-leguminosa
exitosa. Hay numerosos factores que afectan tal mecanismo, siendo muy
influyente la carga de rizobios viables y fisiolgicamente activos que permanecen
sobre las semillas hasta el momento de la infeccin, parmetro que
frecuentemente se puede asociar a las cepas involucradas, la calidad del
inoculante, el tiempo transcurrido desde la inoculacin, la presencia de
protectores bacterianos y el efecto de agroqumicos aplicados en conjunto, entre
otros factores. El conocimiento y ajuste cuidadoso de cada uno de esos factores
durante una prctica de inoculacin contribuir a optimizar la fijacin biolgica
de N y el rendimiento del cultivo.

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