Universidade Federal de Cincias da Sade de Porto Alegre

Disciplina de Hematologia
Professor Alexandre Luz de Castro
Andressa Barreto Glaeser e Laura Jesuno Nogueira
Biomedicina Integral

Esfregao sanguneo e colorao

Porto Alegre, 07 de Abril de 2017.

Introduo

O esfregao trata-se de uma tcnica que possibilita a separao celular em

meio lquido. Trata-se de provocar a dissociao de elementos celulares e sua
aderncia ao vidro, formando uma fina camada de clulas e viabilizando a
observao no microscpio.
A utilizao mais conhecida na observao de sangue, mas tambm pode ser
utilizado para outros lquidos orgnicos. Em todos os casos, depois de seca, o
material pode ser corado e fixado de acordo com a necessidade.
A realizao do esfregao sanguneo um dos pontos cruciais para realizao
de uma contagem diferencial confivel. Os esfregaos podem ser gerados por
mquinas especializadas ou, mais comumente, atravs de realizao manual.
Para realiza-lo preciso utilizar uma lmina limpa, sem resqucios de gordura
ou outros materiais e uma distensora de vidro transparente, mais estreita que a
lmina tradicional. O esfregao ideal no pode ter falhas, paradas, ser muito ou
pouco espesso e no deve ter falhas na cauda.
Para um esfregao ser considerado bom ele deve ser delgado, logo os glbulos
devem estar estendidos em uma nica camada sem superposio ou formao
de gros e flocos. Tambm precisa estar completo, sendo a gota de sangue
totalmente distendida, por isso no deve ser muito grande.
A colorao do esfregao permite a melhor visualizao das clulas
sanguneas, e o mtodo de colorao Romanowski foi o incio de mtodos
universalmente empregados atualmente, como o mtodo do Pantico, que foi
realizado em aula. A tcnica do Pantico consiste na utilizao de corantes
cidos como a eosina, que cora hemoglobina (substncia bsica), e corantes
bsicos como o azul de metileno, que cora o ncleo das clulas DNA
(substncia cida)

Objetivo

A aula prtica realizada no dia 28 de Abril de 2017 teve o objetivo de

proporcionar o aprendizado da tcnica de esfregao sanguneo e de mtodos
de colorao. Alm de treinar a contagem diferencial de leuccitos.

Materiais e Mtodos
O esfregao sanguneo foi realizado utilizando o sangue total (coleta em tubo
roxo), lminas limpas e desengorduradas e uma lmina distensora, que mais
estreita que a lmina normal. Inicialmente, obteve-se uma gota de sangue da
amostra e colocou-se na lmina. A gota de sangue no deve ser muito grande,
para que o esfregao no fique espesso, e nem muito fina, pois pode no se
distender por toda a lmina. Em um movimento rpido (para evitar coagulao),
a lmina distensora deve deslizar, em um ngulo de 45 e sem pausas, sobre a
gota de sangue. Aps, necessrio esperar o esfregao secar.

Com o esfregao seco, o mtodo de colorao foi iniciado, atravs da tcnica

do pantico rpido: pantico 1 por 10 segundos (escorrer por 5 segundos),
pantico 2 por 10 segundos (escorrer por 5 segundos), pantico 3 por 20
segundos (escorrer por 5 segundos) e lavagem em gua corrente. A lmina
deve ser secada, para posterior anlise microscpica em objetiva de imerso.

O pantico 1 possui a finalidade de extenso e realce da colorao das

plaquetas, o pantico 2 serve para a colorao do citoplasma e o pantico 3
para a colorao do ncleo das clulas.
A contagem celular diferencial de leuccitos foi realizada atravs de
microscopia na objetiva de 100x com leo de imerso, sendo que o campo
adequado para a visualizao e contagem no corpo da lmina

Resultados

Clula Valor de Referncia Valor encontrado

Neutrfilo Segmentado 55-65% 62%
Linfcito Tpico 20-30% 27%
Moncito 4-8% 4%
Eosinfilo 2-4% 3%
Basfilo 0-1% 1%
Neutrfilo Bastonete 3-5% 3%

Clula Valor de Referncia Valor encontrado

Neutrfilo Segmentado 55-65% 59%
Linfcito Tpico 20-30% 28%
Moncito 4-8% 6%
Eosinfilo 2-4% 3%
Basfilo 0-1% 0%
Neutrfilo Bastonete 3-5% 2%

Com as lminas confeccionadas, foi possvel visualizar os leuccitos de forma

correta, sem haver sobreposio ou distanciamento excessivo. Foram contadas
100 (cem) clulas brancas e os valores obtidos foram anotados. Os valores
encontrados quando comparados com os de referncia esto dentro do
esperado para cada populao sangunea. No foram informados valores
obtidos por contagem atravs de mquina automatizada para fins de avaliao
da contagem manual.
Concluso

Atravs da aula prtica, podemos concluir que a realizao correta da tcnica

de esfregao muito importante para a contagem diferencial de leuccitos. A
tcnica exige treinamento, pois gotas de sangue espessas ou finas resultam
em uma anlise prejudicada; lminas sujas com gordura geram erros na
colorao e a secagem e lavagem inadequada aps colorao tambm
dificultam a anlise. Ainda, importante saber o campo adequado para realizar
a anlise, pois campos como a cabea e a cauda da lmina no permitem uma
visualizao clara. Alm disso, conclumos que a contagem diferencial de
leuccitos exige ateno e conhecimento das caractersticas morfolgicas das
clulas sanguneas.

Referncias

FAILACE, Renato; Hemograma. Manual de interpretao. 5 edio. 2010.

Esfregao sanguneo: https://www.ufrgs.br/lacvet/esfregaco.htm. Acesso em 05

de Abril de 2017.

Tcnica esfregao sanguneo: http://vidrariadelaboratorio.com.br/tecnica-

esfregaco-sanguineo. Acesso em 05 de Abril de 2017.