Guía Laboratorio Bioquímica 2017 A

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A
DISTANCIA
PRACTICAS DE LABORATORIO
Bioqumica
Docente Director Alberto Garca Jerez

PRACTICA No. 01 Normas de seguridad en el laboratorio
Temticas de la
Seguridad e higiene en el laboratorio, manejo de residuos
prctica
Propsito
Desarrollar en el estudiante la competencia de comportamiento bioseguro en el laboratorio.
OBJETIVO GENERAL
Educar y orientar a los estudiantes sobre las normas de Bioseguridad, con el fin de disminuir al mximo el riesgo de adquirir infecciones en la realizacin
de las practicas de laboratorio y lograr su bienestar fsico, mental y social
OBJETIVOS ESPECFICOS
Conocer y aplicar los estndares de bioseguridad en los laboratorios de la universidad con el fin de garantizarles salud y bienestar aquellos que hagan
uso del mismo.
Intencionalidade Capacitar a los estudiantes, docentes y empleados en el manejo de las normas de bioseguridad.
s formativas
Sensibilizar sobre la importancia del uso adecuado de los equipos e instrumentos de los laboratorios con el fin de que tomen conciencia sobre la
responsabilidad y el cuidado.
Conocer y aplicar los estndares sobre el manejo de los laboratorios con fines de Investigacin en la Universidad.
BIOSEGURIDAD
Se define como el conjunto de medidas preventivas, destinadas a mantener el control de factores de riesgo laborales procedentes de agentes biolgicos,
fsicos o qumicos, logrando la prevencin de impactos nocivos, asegurando que el desarrollo o producto final de dichos procedimientos no atenten contra
la salud y seguridad de trabajadores, estudiantes y docentes que se encuentren en los laboratorios
Es el conjunto de medidas preventivas que tienen como objetivo proteger la salud y la seguridad del personal, de los pacientes y de la comunidad frente a
diferentes riesgos la comunidad frente a diferentes riesgos producidos por agentes biolgicos, fsicos,
qumicos y mecnicos.
La seguridad en el laboratorio no se limita nicamente a la proteccin personal o de la infraestructura,

sino tambin a un manejo adecuado de los reactivos qumicos encaminado a preservarlos de la
contaminacin y del desperdicio.
Agentes biolgicos y materiales que son potencialmente peligrosos para los seres humanos, los
animales y las plantas. Entre ellos podemos citar: bacterias, virus, hongos, parsitos, productos
recombinantes, alrgenos, priones, etc.
El Riesgo biolgico se encuentra presente cada vez que se realiza una actividad prctica en el
Laboratorio, donde se requiera la manipulacin material biolgico (Flores, pan con moho, sangre, etc.) de
cultivos de microorganismos, los cuales pueden alcanzar concentraciones muy elevadas y pueden llegar a
provocar una infeccin si no son manipulados adecuadamente.
Para que se produzca un accidente por un agente biolgico deben estar presente bsicamente 4
elementos: un husped susceptible, un agente infeccioso, una concentracin suficiente de ste y una ruta
de transmisin adecuada; siendo este ltimo punto el que mejor se puede controlar en el laboratorio.
LA BOCA
Comer, beber y fumar en el laboratorio.
Realizar transferencias con pipetas sin utilizar ningn tipo de proteccin.
Transferencia indirecta de microorganismos a travs de los dedos o utensilios contaminados (lpices,
bolgrafos, etc.)
LA PIEL
Inoculacin accidental con una aguja hipodrmica u otros instrumentos punzantes o de vidrio.
Cortaduras o rasguos.
LOS OJOS
Salpicaduras de materiales infecciosos.
Transferencia indirecta de microorganismos a travs de los dedos contaminados.
LOS PULMONES
Inhalacin de microorganismos transportados por el aire (aerosoles).
Cmo ir vestido al laboratorio. Los cabellos largos suponen un riesgo
que puede evitarse fcilmente
recogindolos.
El uso de bata es obligatorio en el laboratorio, por mucho
cuidado que se tenga al trabajar, las salpicaduras de productos
qumicos o biolgicos son inevitables.
La bata es blanca y en algodn, en caso de accidente, el color blanco

permite visualizar fcilmente la sustancia que llegue hasta ella,
igualmente el algodn evita que pueda adherirse a la piel,
aumentando el dao, como si es el caso del material sinttico al
combinarse con un cido o una base fuerte.
El uso de pantalones largo preferiblemente en Jean o dril.
No es permitido el uso minifalda o pantalones cortos, ni tampoco

medias, ya que las fibras sintticas en contacto con determinados
productos qumicos se adhieren a la piel.
Llevar zapatos cerrados y no sandalias.

No eating or drinking in the lab.. of course. I dont allow cough drops, gum etcanything that goes in the mouth.
Color and Number Coded Label Systems
Colors represent kind of hazard
Red = fire
NFPA-type label Yellow = instability
Blue = health
black = specific hazard & personal protection
3 Numbers show degree of hazard
4 2

0 = Minimal
1 = Slight
1
2 = Moderate
3 = Serious
4 = Severe
Color and Number Coded
Label Systems Black = specific hazard
OX = Oxidizer
ACID = Acid
NFPA-type labels ALK = Alkali

COR = Corrosive
3 W = Use no water
Other symbols:
4 2
COR
Clasificacin de los aminocidos.
Grupos R Propiedades de los aminocidos
Apolares alifticos
Los grupos R de esta clase de aminocidos son apolares e hidrofbicos.
Las cadenas laterales de la alanina, valina, leucina e isoleucina tienden a agruparse
entre s en las protenas, estabilizando las estructuras proteicas a travs de
interacciones hidrofbicas.
Otros aminocidos que conforman este grupo son: glicina, metionina y prolina.
Aromticos
Fenilalanina, Tirosina y Triptfano, con sus cadenas laterales aromticas, son
relativamente apolares (hidrofbicos). Todos ellos pueden participar de interacciones
hidrofbicas.
Polares sin carga
Los grupos R de estos aminocidos son ms solubles en agua, que los aminocidos
apolares, debido a que contienen grupos funcionales que forman puentes de hidrgeno
con el agua.
Incluye este grupo la serina, treonina, cistena, asparagina y glutamina.

Cargados Estos aminocidos pueden tener el grupo R cargado positivamente (bsicos) o
negativamente (cidos), siendo ms hidroflicos que los dems aminocidos.
Los aminocidos en los que los grupos R tienen una carga neta positiva significativa a
pH 7.0 Lisina, arginina e histidina
Con una carga neta negativa a pH 7.0 son: aspartamo y el glutamato.

Aminocidos proteicos con nomenclatura clsica sistema de tres letras y sistema de una sola letra,
impuesto en gentica molecular.
Nomenclatura
Una Tres Nombre
Clasificacin
letra letras
A Ala Alanina
G Gly Glicina
I Ile Isoleucina Ae Apolares alifticos
L Leu Leucina Ae
V Val Valina
F Phe Fenilalanina Ae
Apolares aromticos
W Trp Triptfano Ae
C Cys Cisteina
Apolares con azufre
M Met Metionina Ae
N Asn Asparagina
Q Gln Glutamina
+Polares alifticos y sin carga
S Ser Serina
T Thr Treonina Ae
Y Tyr Tirosina Polar aromtico y sin carga
R Arg Arginina
H His Histidina Ae Polar con carga positiva
K Lys Lisina
D Asp Ac. Asprtico o Aspartato
Polar con carga negativa
E Glu Ac. Glutamico o Glutamato
P Pro Prolina Iminoacido
structure of the amino acids (formally, alpha-amino carboxylic acids):
Small Hydrophobic Amino Acids

Glycine
The smallest and most flexible amino acid. Tends to be a structure breaker because of the
Gly
entropy cost of restraining its flexibility. The only achiral amino acid.
G
Alanine The John Q. Public of amino acids. When molecular biologists want to know where important
Ala amino acids are, they can "alanine scan," replacing each amino acid in turn to look for functional
A effects.
http://www.biochem.umd.edu/biochem/kahn/teach_res/amino_acids/
Large Hydrophobic Amino Acids
Branched at C-beta: the carbons are identified by Greek letters as shown. Hydrophobic, therefore
Valine side chain tends to pack inside the protein. Discrimination between valine and isoleucine is a
Val challenge for the translational machinery, as they differ by one methyl group. Valine can fit
V anywhere Ile can. To aminoacylata tRNAIle specifically, a separate smaller active site removes
mis-added valine.
Branched at C-gamma. The classic large hydrophobic. The most common amino acid. "Leucine
Leucine zipper" transcription factors have a series of leucines (every seventh residue) lined up on one
Leu face of an alpha helix that forms part of an interface to another subunit, forming a dimer.
L
Chiral at C-beta (don't worry about the configuration). See valine above.
Isoleucine
Ile
I
Methionine One of two sulfur-containing amino acids, the other being Cys. They are useful for radioactively
Met labeling proteins, for example in in vitro transcription-translation systems. Formyl-Met is the N-
M terminal amino acid during protein synthesis, though it is often cleaved off. Rare.
Cyclic, rigid ring structure. Strictly not an amino acid, often called an imino acid. The lack of a
Proline
hydrogen on the N (after incorporation into a peptide) means that it cannot form the H-binds seen
Pro
in extended structures, therefore acts as a structure breaker. The only amino acid that can exist
P
significantly with a cis- peptide bond.
Phenylalani Mnemonic _F_ennelalanine. One of three aromatic amino acids, therefore absorbs UV light,
ne although not as weell as Tyr or Trp. Hydroxylated to form tyrosine. If this pathway is defective,
Phe phenylketonuria or PKU results. This was the first genetic disease of metabolism whose
F molecular mechanism was understood. Aspartame is half Phe, PKU sufferers must avoid it.
Aromatic. Largest and rarest amino acid. Mnemonic is W for wide, or for you New Jersey
Tryptophan residents it's "Twp," the abbreviation for townships. Absorbs furthest into the red (at 280 nm, in
Trp the UV), therefore often added to designed proteins as a convenient spectroscopic handle.
W
Polar Amino Acids
Serine The only amino acid with a primary hydroxyl, often seen as a nucleophile in enzyme active sites. Can
Ser act as a hydrogen bond donor or acceptor. Can be phosphorylated, the most commonly
S phosphorylated amino acid.
Threonine The only amino acid with a secondary hydroxyl. Chiral C-beta. Can be phosphorylated, though less
Thr frequently than Ser.
T
Amide functional group can act as a donor and acceptor of hydrogen bonds. Can be hydrolyzed
during workup, and then becomes Asp. If the identity is uncertain, the amono acid is denoted Asx
Asparagine
(abbreviation B).
Asn
N
Similar to Asn but one methylene group longer. Can be hydrolyzed during workup, and then becomes
Glutamine Glu. If the identity is uncertain, the amono acid is denoted Glx (Z). The main control point for
Gln assimilation of nitrogen from the environment.
Q
The other sulfur-containing amino acid. Two Cys's can be reversibly oxidized to form the disulfide
Cysteine crosslink shown. Disulfides are typically extracellular, as in insulin and antibodies. Also can act as a
Cys nucleophile, with a sulfhydryl side-chain pKa of about 8.4, giving thiolate anion (S-) upon
C deprotonation.
Mnemonic tYrosine. Phenylalanine plus a hydroxyl. Side chain pKa of about 10.5 fo rthe indicated
form, meaning it's usually neutral. Tyrosine can be a nucleophile (as in DNA topoisomerases), can be
Tyrosine
phosphorylated. Tyr phosphorylation is rare, but critical in cellular responses to extracellular stimuli.
Tyr
Y
Charged Amino Acids
Mnemonic: K is before L. Lysine has a primary amino group. A pKa of around 10.5 for the
Lysine protonated form shown means that for practical purposes it is nearly always positively
Lys charged. Often found interacting with nucleic acids. The amine can be reacted with
K carboxylates to form an isopepttide linkage, as seen with the conjugation of the small protein
ubiquitin to its targets, which marks them for degradation by the proteasome.
Mneomonioc aRrrrgh. Arginine is the most basic amino acid, with a side-chain pKa for the
guanidinium group of about 12.5. Positive charge is extensively delocalized as shown. Can
Arginine
donate several H-bonds, often seen in protein-nucleic acid interaction.
Arg
R
Histidine is the only amino acid with a pKa in the physiological range, hence often seen in
active sites when donation or abstraction of a proton is needed. The protonated form shown
Histidine
has a pKa around 6 for the indicated proton , meaning it's mainly neutral at pH 7.
His
H
Aspartate
(aspartic
Mnemonic "aspardic" acid. Side chain pKa of about 4. Part of Aspartame. One of two
acid)
negatively charged amino acids.
Asp
D
Glutamate
(glutamic
Mnemonic one letter larger than D. Side chain pKa of about 4. Neurotransmitter. Monosodium
acid)
glutamate is a flavor enhancer -- MSG is the "fifth flavor," after sweet, sour, bitter, and salty.
Glu
E
Practica 2: PROPIEDADES BIOQUMICAS DE LOS AMINOCIDOS
Pruebas bioqumicas para identificar aminocidos.
Prueba bioqumica Descripcin de la reaccin qumica entre los aminocidos y los reactivos.
El grupo alfa-amino de los aminocidos forma complejos coloreados con la ninhidrina:
violeta azuloso en la mayora de los aminocidos cuyo grupo amino es primario,
Reaccin con la ninhidrina
amarillo para la prolina e hidroxiprolina y caf para la asparagina que tiene un grupo
(Hidrato de tricetohidrindeno)
amido en la cadena lateral. Esta reaccin tambin identifica los grupos alfa-amino libres
presentes en pptidos y protenas
El anillo fenlico tiene un comportamiento caracterstico frente a las sales de Mercurio a
Reaccin de Milln pH cido, formando complejos color rojo ladrillo con el anillo fenlico de la tirosina y
las protenas que la contienen.
Los anillos aromticos presentes en algunos aminocidos reaccionan con cido ntrico
Reaccin Xantoprotica concentrado formando nitroderivados de color amarillo o anaranjado por lo cual esta
reaccin permite reconocer la presencia de Tirosina, Fenilalanina y Triptfano.
El grupo guanidinio presente en la cadena lateral de la Arginina reacciona con soluciones
Reaccin de Sakaguchi de alfa naftol en presencia de Bromo en medio alcalino formando complejos coloreados
rosados o rojos.
La presencia de anillos aromticos fenlicos o nitrogenados en la cadena lateral de los
Aminocidos se puede identificar mediante la reaccin con cido sulfanlico y nitrito de
Reaccin de Ehrlich
Sodio por formacin de sales de Diazonio fuertemente coloreadas permitiendo as
detectar la presencia de Tirosina e Histidina libres o formando pptidos y protenas.
El anillo indlico presente en la cadena lateral de los alfa-aminocidos libres o haciendo
Reaccin de Adamkiewick o
parte de pptidos y protenas se puede reconocer mediante reaccin con el cido
Hopkins Cole
glioxlico a pH cido, puesto que forma complejos de coloracin violeta.
Los Aminocidos azufrados como Metionina, Cistena y Cistina se reconocen por la
Reaccin con acetato de Plomo formacin de precipitados de Sulfuro de Plomo de color gris oscuro o negro que se
alcalino forman cuando reacciona con Acetato de Plomo en medio alcalino.
Procedimiento a realizar para la reaccin de Ninhidrina.
Clculos preparacin
Tubos Cantidad Reactivo Procedimiento
soluciones
con 1.5 mL de Para cada uno de los tubos de Solvente de la nihidrina en
1 ninhidrina
Glicina al 2% ensayo, aadir 5 gotas de reactivo etanol
con 1.5 mL de de ninhidrina 1% *
1 ninhidrina
Albmina al 2%
con 1.5 mL de calentar los tubos de ensayo en un
1 ninhidrina
Tirosina al 2% punto de ebullicin
con 1.5 mL de bao de agua durante
1 ninhidrina
Gelatina al 2% aproximadamente 5 min. Registre
con 1.5 mL de sus observaciones.
1 ninhidrina
Caseina al 2%
Observar y tomar apuntes de los
cambios.
con 1.5 mL de
1 albumina de suero ninhidrina
* Ninhydring reagent = 200 mg
bovino al 2 %
ninhydrin in 200 mL n-butanol (water
saturated)
Reaccin de Ninhidrina: permite identificar la presencia de protenas y aminocidos libres. En compuestos que posean
al menos un grupos amino y otro carboxilo, con desprendimiento de dixido de carbono.
El grupo alfa-amino de los aminocidos al reaccionar con la ninhidrina (hidrato de tricetohidrindeno) forma complejos
de color azul-violeta.
La ninhidrina es capaz de reaccionar rpidamente con el grupo -amino de los aminocidos, oxidndolo y
liberando amonio. Este se condensa con la ninhidrina reducida y con otra molcula de ninhidrina para
producir un aducto o unin de molculas prpura denominado Prpura de Ruhemann
Los aminocidos porina e hidroxiprolina, que no poseen grupo amino sino imino (-NH-), dan un color rojo que pasa
rpidamente a amarillo.
Ninhidrina: Disolver 0.1 g de ninhidrina en 100 ml de etanol

Condensacin de la Ninhidrina con el aminocido:
Formacin de la base de Schiff: Formacin del dicetohidrindeno:
Condensacin del amino-dicetohidrindeno con otra El ltimo compuesto en esta

molcula de ninhidrina: cadena de reacciones es de color
azul violceo, e indica la presencia
de grupos carboxilo y/o amino
libres
http://www.einsten.net/pdf/1350246083.pdf
REACCIN DE BIURET.
Clculos preparacin
soluciones
con 1,5 ml de
NaOH 10%
solucin de Preparar los tubos de ensayo. Clculo de gramos para
+
1 Albumina soluciones variando el
0.5% CuSO4 (sulfato
suero bovino Agregue a cada tubo de volumen en ml y el
cprico)
al 2% ensayo agregue 1 ml de porcentaje del volumen
NaOH 10% NaOH 10% Gramos de suloto
con 1.5 mL de + de la solucin correspondiente. Gramos de NaOH=
2
Albmina1% 0.5% CuSO4 (sulfato 10%*25ml/100
cprico) Agregue 3 gotas de solucin de
NaOH 10% sulfato cprico al 5 % a cada
con 1.5 mL de + tubo de ensayo. CuSO4 (sulfato cprico)
3
Gelatina 1% 0.5% CuSO4 (sulfato Prepara en agua destilada
cprico) Agite cada tubo de ensayo
NaOH 10% % Peso =(gramos del
con 1.5 mL de + Observar y tomar apuntes de soluto/Volumen solucin)
4
Glicina 2% 0.5% CuSO4 (sulfato los cambios. *100
cprico)
NaOH 10%
con 1.5 mL de +
5
Tirosina 2% 0.5% CuSO4 (sulfato
http://vlab.amrita.edu/?sub=3&brch=63&sim=1094&cnt=1
cprico)
# de equivalentes de soluto N Litros de solucin gramos de soluto
N=
Litros de solucin
REACCIN DE BIURET:
permite determinar la presencia de enlaces peptdicos en una muestra debido a la formacin de un compuesto
de coordinacin de color violeta. El reactivo de Biuret consiste en CuSO4 en solucin acuosa alcalina
Es una reaccin general para la identificacin de pptidos y/o protenas. Se le da ese nombre debido a que
el color que se produce en esta reaccin, es similar al de la condensacin de dos molculas de urea
(H2N=C=NH2), conocido en alemn como: Biuret. Se fundamenta en la formacin de un compuesto azul
violeta por la reaccin del in cpicro con el pptido o protena en medio alcalino.
Este in forma un enlace covalente coordinado con los enlaces peptdicos

Mtodo de Biuret
Reaccin de sales de Cu+2 con molculas que contienen ms de dos enlaces peptdicos en un medio alcalino; el Cu+2
es reducido a Cu+1
Entre las reacciones coloreadas especficas de las protenas, que sirven por tanto para su identificacin, destaca la
reaccin del Biuret. Esta reaccin la producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos ya que se debe
a la presencia del enlace peptdico CO-NH que se destruye al liberarse los aminocidos.
El reactivo de Biuret lleva sulfato de Cobre (II) y sosa. El Cu, en un medio fuertemente alcalino, se une con los
enlaces peptdicos formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la
concentracin de protena
REACCION XANTOPROTEICA.
Tubos Cantidad Reactivo Procedimiento Clculos preparacin soluciones

5 mL de
1 solucin gelatina HNO3 Preparar los tubos de ensayo.
2%
1.5 mL de HNO3
2 HNO3
Albmina 2 %
1.5 mL Tirosina Calentar los tubos de ensayo en un bao de
3 HNO3
al 2%. agua hirviendo durante unos 2 minutos..
1.5 mL de
4 HNO3 Observar y tomar apuntes de los cambios.
prolina al 2%
Esta reaccin presenta formacin de un compuesto aromtico nitrado de color amarillo, cuando las protenas son tratadas
con cido ntrico concentrado. Generalmente, se forma primero un precipitado blanco que cambia a amarillo al calentarlo.
El color se empieza a tornarse anaranjado cuando la solucin se vuelve bsica. La prueba da resultado positivo en aquellas
protenas con aminocidos portadores de grupos bencnicos, tirosina, fenilalanina y triptofano, obtenindose
nitrocompuestos de color amarillo, que se vuelven anaranjados en medio fuertemente alcalino (formacin del cido pirmico
o trinitrofenol).
Reaccin de Xantoprotica: esta prueba caracteriza a los aminocidos aromticos. Los aminocidos
reaccionan con cido ntrico concentrado y forman nitrocompuestos de color amarillo
Permite identificar aminocidos que

tienen anillo bencnico en su
estructura, tales como la fenilalanina o
la tirosina.
En esta reaccin el aminocido

reacciona con cido ntrico
concentrado, ocurriendo la nitracin del
anillo aromtico Como productos
finales de la reaccin se forman
nitroderivados de color amarillo.
Clara de huevo.
En esta prueba se produce la nitracin

del anillo bencnico presente en dichos
aminocidos.
REACCION DE MILLON.
Clculos preparacin
soluciones
1.5 ml de ** Million reagent = 2.2%
Reactivo de
1 solucin de Para cada uno de los tubos de Hg(NO3)2 in 5.3 M HNO3
Milln
Tirosina 2% ensayo, aadir 5 gotas de reactivo de
1.5 mL de Reactivo de Millon **
1
Albmina2% Milln
con 1.5 mL
Reactivo de
1 de prolina y calentar los tubos de ensayo en un
Milln
2% punto de ebullicin
1,5 ml de bao de agua durante
solucin de aproximadamente 2 min. Registre
Albumina sus observaciones.
suero bovino
al 2%
Ensayo especfico para los aminocidos fenlicos (tirosina). Esta reaccin da una tonalidad rosa o un precipitado
rosa
Reaccin de Millon: Sirve para caracterizar los aminocidos con grupos fenlicos ( ). Si en la protena hay tirosina,
da positivo (color carne). Este reactivo consiste en una solucin de nitrato de mercurio(II) en solucin de cido
ntrico-nitroso.
Reaccin de Milln:
Permite identificar la presencia de tirosina en una muestra. La mezcla de nitrito y nitrato mercricos y de cido
ntrico, (reactivo de Milln) reacciona con este aminocido formando una sal de color rojo.
Tiene especificidad para detectar la

presencia de tirosina o de protenas que
la contengan. Es una variante de la
reaccin xantoproteca, identifica los
compuestos que contienen un grupo -OH
ligado al anillo bencnico.
En dicha reaccin adems de la ++

nitracin del anillo fenlico, se incorpora
a su estructura el mercurio (Hg )
producindose un derivado mercrico
de nitrotirosina de color rojo.
REACCION DE SAKAGUCHI.
Tubos Cantidad Reactivo Procedimiento Clculos preparacin soluciones
Hidrxido de Sodio Solucin de alfa naftol a-naftol.............. 5.0 g
(NaOH) 2M Preparar los tubos de ensayo. Alcohol etlico (95%)................... cbp 100 mL
+
con 5 mL de
alfa-naftol 1 mL (NaOH) 2M
1 solucin de
+ -naftol al 1% en etanol
Arginina 1%
hipoclorito de sodio 1 mL -naftol
+
Disolucin de Urea Enfre en bao de hielo por 10 minutos.
Hidrxido de Sodio
(NaOH) 2M 1 mL disolucin alcalina de hipoclorito sdico .
+
con 1.5 mL de alfa-naftol Esperar 30 segundos
2
Albmina1% +
hipoclorito de sodio Agregue con un gotero, 3 gotas de alfa-naftol al 1% a
+ cada tubo de ensayo.
Disolucin de Urea
Hidrxido de Sodio 1 mL de disolucin de urea
(NaOH) 2M
+ Observar y tomar apuntes de los cambios.
con 1.5 mL de
alfa-naftol
3 protena de trigo
+
1%.
hipoclorito de sodio
+
Disolucin de Urea Esta prueba es positiva para compuestos que contengan el
Hidrxido de Sodio grupo guanidinio como la arginina. El reactivo que se utiliza
(NaOH) 2M
+
contiene -naftol e hipoclorito sdico, en medio alcalino. La
con 1.5 mL de alfa-naftol aparicin de una coloracin roja es indicativo de una reaccin
4
Leucina + positiva.
hipoclorito de sodio
+
Disolucin de Urea
REACCION DE SAKAGUCHI Esta prueba es positiva para compuestos que contengan el grupo guanidinio
como la arginina. El reactivo que se utiliza contiene -naftol e hipoclorito sdico, en medio alcalino. La
aparicin de una coloracin roja es indicativo de una reaccin positiva.
El grupo guanidinio presente en

la cadena lateral de la Arginina
reacciona con soluciones de
alfa-naftol en presencia de
Bromo en medio alcalino
formando complejos coloreados
rosados o rojos.
Est reaccin es especfica para la identificacin del grupo guanidino. Se fundamenta en la condensacin del
grupo guanidino con el a-naftol en un medio altamente oxidante, con la posterior produccin de un compuesto
de color rojo intenso. Esta prueba da positiva frente a la arginina as como a las protenas que contienen este
aminocido.
Solucin de alfa naftol a-naftol............. 5.0 g Alcohol etlico

http://www.biochem.umd.edu/biochem/kahn/teach_res/amino_acids/
(95%)............................................ cbp 100 mL
Reaccin De Aminocidos Azufrados, Grupos SH.
Clculos preparacin
Tubo Cantidad Reactivo Procedimiento
soluciones
hidrxido sdico Preparar los tubos de ensayo.
con 3 mL de
+
1 solucin de Albmina
acetato de plomo Aadir 2 ml de solucin de HIDRXIDO
de huevo 2%
SDICO al 20%.
con 3 mL de Hidrxido sdico
solucin de + Aadir 10 gotas de solucin de acetato
1
aminocidos Cistena Acetato de plomo de plomo al 5%
al 2%
hidrxido sdico Calentar el tubo hasta ebullicin.
con 3 mL de Leche al +
1
2% acetato de plomo Observar y tomar apuntes de los
cambios.
hidrxido sdico
con 3 mL de +
1
Ametionina al 2% acetato de plomo El precipitado de color negruzco indica
que se ha formado sulfuro de
hidrxido sdico Plomo, utilizndose el azufre de los
con 3 mL de + aminocidos
1
Glucosa 2% acetato de plomo
Los aminocidos azufrados
La METIONINA y la CISTENA se reconocen por la formacin de precipitados de sulfuro de plomo de color gris
oscuro o negro que se forma cuando reacciona el acetato de plomo en medio alcalino
Se pone de manifiesto por la formacin de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Se basa esta reaccin en
la separacin mediante un lcali, del azufre de los aminocidos, el cual al reaccionar con una solucin de acetato
de plomo, forma el sulfuro de plomo.
Methionine Cysteine
Resumen de las reacciones de aminocidos en las diferentes tcnicas.
NINHIDRINA
(-) incolora (+) Violeta o amarillo
(+) Rojo o amarillo fuerte
No es protena ni claro protena,
Hidroxiprolina o prolina
aminocido polipptido o aminocido
BIURET
(-) Azul o amarillo (+) Violeta Protenas y
aminocidos polipptidos
XANTOPROTICA COAGULACIN
(+) Amarillo, naranja o (-) No coagula (+) Coagula
(-) Incoloro
verde Tirosina, Histonas, protaminas o Albminas o globulinas
Otros aminocidos
fenilalanina o triptfano polipptidos
ADAMKIEWICK o HOPKINS COLE SULFATO DE AMONIO
(+) Precipita (-) No
(+) Azul o violeta (-) Incoloro
Globulinas Precipita
Triptfano Tirosina o Fenilalanina
Albminas
MILLN 1.PREGUNTAS:
(+) Rojo (-) Incoloro Escriba la reaccin para cada una de las pruebas realizadas.
Proponga de acuerdo a la pruebas una clasificacin de los
Grupo SH Tirosina Fenilalanina aminocidos utilizados y relacione la importancia de la aplicacin de
algunas de estas pruebas aplicadas a otras reas del conocimiento
SAKAGUCHI como: microbiologa, qumica de alimentos entre otras.
(+) Negro o gris Para el siguiente pentapptido, diga cuales pruebas y porque sern
(-) Incolora (+) Rojo positivas. (ALA-
Cistena, cistina, VAL-GLY-GLU-LYS)
Otros aminocidos Arginina
metionina Defina los siguientes trminos: aminocidos, protenas, anlisis
cualitativo, cuantitativo.
Practica 3. BIOQUMICAS DE LAS PROTENAS .
Mtodo Descripcin Desventajas
Biuret Gornell AG, C. J. Bardawill, and M. M. DAVID. Determination of serum proteins El mtodo se usa para soluciones que tienen
by means of the biuret. reaction. J. BioZ. Chem. 177: 751-766, 1949 de 0.5 a 10 mg protena/ml.
Se basa en la reaccin de sales de Cu+2 con molculas que contienen ms de
dos enlaces peptdicos en un medio alcalino; el cobre es reducido a Cu+ Es un mtodo poco sensible. Es til cuando
formando complejos color prpura que tienen un mximo de absorcin a 540 se quiere analizar grandes lotes de protena.
nm.
Lowry Lowry, OH, NJ Rosbrough, AL Farr, and RJ Randall. J. Biol. Chem. 193: 265.
1951
Este es un mtodo muy sensible, por lo que
Resulta de la reaccin de Biuret sobre los enlaces peptdicos, adems de la permite trabajar con soluciones muy diluidas
reduccin del reactivo de fosfomolibdato-fosfotungstato (Folin-Ciocalteu) por las de protenas (0.02 - 0.5 mg protena/ ml)
protenas pretratadas con cobre en medio alcalino, dando una coloracin azul,
determinado a 650 nm.
El Cu+ y los grupos R de la tirosina, triptofano y cistena reaccionan con el

reactivo de Folin, produciendo un producto inestable que es reducido a azul de
molibdeno/tungsteno.
Bradford Bradford, M. M. (1976) Anal. Biochem. 72, 248 Muestra interferencias con detergentes
Basado en el Azul Brillante de Coomasie G-250 cambia de rojo a azul, al unirse Existen reacciones de coloracin que son
a residuos aromticos y arginina en las protenas. especficas para aminocidos de esas protenas y
son importantes tanto para la deteccin como para el
La reaccin entre el colorante y la protena es muy rpida (aproximadamente 2
dopaje de aminocidos y protenas. Existen tambin
min), y el completo protena-colorante permanece disperso en solucin por un reacciones generales porque sirven para caracterizar
tiempo relativamente largo. grupos comunes a todas las protenas como grupos
Rango de deteccin: 0.5-10 mg protena/ml. amino o uniones.
PREGUNTAS:
Cules son los principales mtodos colorimtricos usados en la determinacin de protenas?

Cul es la reaccin de un alfa-aminocido y ninhidrina?
Cul es la reaccin con el reactivo de Biuret?
Qu protenas dan positivas con la prueba de Hopkins-cole?
Cmo se manifiesta la desnaturalizacin de la clara de huevo?
Cul de los tres agentes utilizados tiene mayor poder de desnaturalizacin?
Cmo podramos saber que una sustancia desconocida es una protena?
Qu coloracin da la reaccin del Biuret? 5. Una protena coagulada podra dar la reaccin del Biuret?
Si se realiza la reaccin del Biuret sobre un aminocido como la Glicina es positiva o negativa? Por
qu?
Prctica 4: IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS .
Los hidratos de carbono constituyen el grupo de biomolculas ms abundante sobre la superficie terrestre,
representando aproximadamente el 75 % de la materia orgnica existente. En ocasiones, se denominan
tambin carbohidratos, azcares, sacridos o glcidos. Todos son trminos que hacen referencia a su sabor
dulce, o a que poseen la composicin Cn(H2O)n.
Estructuralmente, un hidrato de carbono tpico es una cadena hidrocarbonada con varios grupos alcohol y un carbono ms oxidado, en
forma de grupo carbonilo. Este grupo oxidado puede situarse en el extremo de la cadena (aldehdo), o adyacente, en posicin 2 (cetonas)
Ilustracin 1 Clasificacin de carbohidratos.

Diferentes ensayos para reconocimiento en carbohidratos.
Ensayo Descripcin del ensayo
Molisch: Este ensayo es un ensayo para reconocimiento general de carbohidratos en el que los polisacridos y disacridos se hidrolizan con cido sulfrico
concentrado hasta monosacridos y se convierten en derivados del furfural o 5-hidroximetil furfural los cuales reaccionan con -naftol formando un color
prpura violeta.
Fehling -Fehling A: CuSO4 disuelto en H2O
-Fehling B: NaOH y tartrato Na-K disueltos en agua
(Detecta la presencia de azcares reductores) Los azcares reductores, en medio alcalino, son capaces de reducir el in Cu2+ de color azul a Cu+ de color
rojo. Para ello el grupo carbonilo del azcar se oxida a grupo carboxilo. En medio fuertemente bsico, como es en este caso el NaOH, el in Cu2+ formara Cu
(OH)2 insoluble, por eso se aade tartrato sdico potsico en el Fehling B (el reactivo de Fehling consta de dos componentes: Fehling A y Fehling B) que
acta como estabilizador al formar un complejo con el Cu2+.
NaOH +Calor
+R
CuSO2 Cu(OH)2 Cu2O (rojo
(azul) ladrillo)
Benedict (Detecta la presencia de azcares reductores) Se basa en la reduccin de Cu2+ a Cu+ en medio bsico dbil. Aunque es similar a la reaccin de Fehling, el
medio bsico dbil y el estabilizante (citrato sdico) utilizados hacen que este test sea ms sensible y estable.
-Sulfato cprico.
-Citrato de sodio.
-Carbonato anhidro de sodio
Barfoed cido actico

Acetato cprico
(Detecta la presencia de monosacridos) El reactivo de Barfoed es dbilmente cido y es reducido solamente por monosacridos, formndose como producto
de reaccin xido cuproso.
En medio cido, tan slo los monosacridos son capaces de reducir el Cu2+ a Cu+. El Cu+ as producido reduce al cido fosfomolbdico a un complejo de
intenso color azul oscuro.
Ioduro Los polisacridos sin ramificar forman complejos caractersticos cuando reaccionan con yodo. Los ramificados tambin lo hacen, pero los complejos formados
tienen menos intensidad de color.
Seliwanoff Este ensayo es especfico para cetosas y se basa en la conversin de la cetosa en 5-hidro-metil-furfural y su posterior condensacin con resorcinol formando
as complejos coloreados.
Bial El reactivo de Bial contiene orcinol en cido clorhdrico, el cual forma complejos de coloracin slo con las pentosas.
Lugol El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de yodo y yoduro, permite reconocer polisacridos, particularmente el almidn por la formacin de una
coloracin azul violeta intensa y el glicgeno y las dextrinas por formacin de coloracin roja.
Carbohydrates
H+ or enzyme
1. Monosaccharide + H2O no hydrolysis
H+ or enzyme
2. Disaccharide + H2O two monosaccharide units
H+ or enzyme
3. Polysaccharide + many H2O many monosaccharide units
Glucose + Glucose Maltose (malt sugar)

Fructose + Glucose Sucrose (cane sugar)
Galactose + Glucose Lactose (milk sugar)
Los carbohidratos
Representan un conjunto numeroso de molculas distribuidas ampliamente en la naturaleza.
Qumicamente se definen como aldehdos o cetonas

polihidroxiladas, diferencindose entre ellos bsicamente en el
nmero de carbonos y en la ubicacin espacial de los grupos
hidroxilo de cada monmero, as como en el nmero de
monosacrido que los conforman.
Basndose en las diferencias estructurales que stos presentan,

es posible la identificacin de los mismos utilizando reacciones
qumicas que demuestren alguna propiedad qumica especfica
del carbohidrato cuya presencia se quiere determinar.
Las pruebas para la determinacin de los carbohidratos pueden

ser generales como la reaccin de Molisch, la cual no
discrimina el tipo de carbohidrato analizado, o especficas si el
resultado final logra la identificacin de un carbohidrato en
particular.
Estos derivados furfricos reaccionan con compuestos fenlicos como el -naftol, el orcinol, el resorcinol o la antrona, para
formar cromgenos que evidencian la positividad de las reacciones. El tipo de compuesto fenlico utilizado depender del tipo de
carbohidrato a determinar y por lo tanto de la reaccin que se est realizando.
A continuacin se muestran tres ejemplos

de la reaccin de formacin de furfurales.
-naphthol
[Present in the reagent ]
furfural
-naphthol
Purple ring
La primera propiedad es la
formacin en medio cido de
5- hydroxymethyl furfural
compuestos conocidos como
derivados furfricos. Estos se
producen al deshidratar los
azcares mediante la aplicacin de
calor y la exposicin a un medio
fuertemente cido.
Fructopyranose Fructofuranose
Glucose conversion; Functionalized ionic liquid; 5-hydroxymethyl furfural; Levulinic acid
Furfural, o furfuraldehdo
El compuesto qumico furfural es un aldehdo industrial derivado de varios subproductos de la agricultura, maz, avena, trigo,
aserrn. El nombre furfural espor la palabra latina furfur, "salvado", en referencia a su fuente comn de obtencin.
Furfural, o furfuraldehdo, aldehdo orgnico lquido, de frmula C5H4O2, que se obtiene por
la destilacin con cido clorhdrico o sulfrico del salvado, cascarilla de arroz y otros
productos ricos en pentosas
Los pentosanos abundan tanto como la celulosa en la naturaleza. El pentosano ms

abundante es el xilano, uno de los componentes de la madera, el cual es un polisacrido de
la D-xilosa con enlaces -1,4-(similares a los enlaces de la glucosa en la celulosa).
El xilano representa del 25% al 30% de los cereales

y granos (del 32% al 36% en el salvado); del 15% al
25% de la madera de rbol y del 5% al 15% de la
madera de conferas.
Segunda propiedad, el poder reductor. Existen carbohidratos que al oxidarse permiten la reduccin de otros
compuestos. Durante dicha oxidacin se libera la energa necesaria para la reduccin de otra molcula, por lo
que se conoce este proceso como oxido-reduccin y ocurre como una reaccin acoplada.
La mayora de los reactivos que permiten evidenciar esta propiedad contienen cobre. Este metal se reduce
(gana electrones) y se hace insoluble originando un precipitado rojo, lo que demuestra que el carbohidrato
analizado es reductor.
Los monosacridos y la mayora de los disacridos poseen poder reductor, que deben al grupo carbonilo que
tienen en su molcula. Este carcter reductor puede ponerse de manifiesto por medio de una reaccin redox
llevada a cabo entre ellos y el sulfato de Cobre (II).
Tercera propiedad la capacidad de rotar la luz polarizada, la formacin de osazonas, entre otras, que nos
abren nuevas posibilidades y recursos, tiles en la identificacin de estas biomolculas.
O H O H
C C
H C OH HO C H
HO C H H C OH
H C OH HO C H
H C OH HO C H
CH2OH CH2OH
D-glucose L-glucose
Rotacin ptica.
Es una propiedad importante que permite identificar los carbohidratos, y determinar el grado de pureza de los mismos,
particularmente monosacridos, ocasionada por la presencia de centros asimtricos o quirales en la estructura molecular,
los cuales desvan el plano de luz polarizada.
Esta propiedad no es exclusiva de los carbohidratos pues la presentan todas aquellas sustancias denominadas ptimamente
activas, por tener en su estructura centros quirales.
O H O H
El plano de luz polarizada hacia la derecha se
llaman dextrgiros o dextro rotatorios, y esa C C
caracterstica se indica anteponiendo el signo
(+) al nombre del compuesto. H C OH HO C H
HO C H H C OH
Los compuestos que desvan el plano de luz H C OH HO C H
polarizada hacia la izquierda se llaman H C OH HO C H
levgiros o levo rotatorios, y esa
caracterstica se indica anteponiendo el signo CH2OH CH2OH
(-) al nombre del compuesto.
D-glucose L-glucose
Prueba de Benedict (detecta la presencia de azcares reductores).
Clculos preparacin
soluciones
3 mL de Glucosa
1 de Benedict
al 2% Preparar los tubos de ensayo.
3 mL de sacarosa
2 de Benedict
al 2% Agregue a cada tubo de ensayo 2
3 mL de almidn ml de reactivo de Benedict.
3 de Benedict
al 2%
3 mL de jugo de Tubos de ensayo en un bao de agua
4 de Benedict
cebolla al 2% hirviente por unos 10 minutos.
3 mL de Fructosa
5 de Benedict
al 2% Agite cada tubo de ensayo

6 3 mL de agua de Benedict
cambios. Positiva aparece un precipitado
rojizo, verde o amarillo.
Reactivo de Benedict
Algunos azcares como la glucosa se llaman azcares reductores porque son capaces de transferir hidrgenos (electrones)
a otros compuestos, un proceso llamado reduccin. Cuando los azcares reductores se mezclan con el reactivo de
Benedicts y se calientan, una reaccin de reduccin hace que el reactivo de Benedicts cambie de color.
El color vara de verde a rojo oscuro (ladrillo) o marrn oxidado, dependiendo de la cantidad y el tipo de azcar.
Los azcares reductores son aquellos que tienen un aldehdo libre o potencialmente libre o cetona. En una solucin de pH 8
o superior, el azcar es capaz de reducir ciertos agentes oxidantes dbiles tales como hidrxido cprico junto con una
oxidacin resultante del grupo carbonilo del azcar.
Las pruebas de Benedicts y Barfoeds identifican los azcares

reductores.
Glucosa + 2Cu (OH)2 ---------> Cu2O + 2H2O + glucosa
(Iones cpricos oxidados: azul) (iones cuprosos reducidos: rojo)
RCHO + 2Cu++ + 4OH- RCOOH + Cu2O + 2H2O precipitado rojo
http://medicina.usac.edu.gt/quimica/Carbonilo/Propiedades_Qu_micas.htm
Los hemiacetales y hemicetales ordinarios, que se forman cuando las molculas que contienen un grupo funcional
aldehdo o cetona reaccionan con un alcohol, son inestables y revierten con facilidad a sus formas aldehdo o cetona
Sin embargo, cuando el grupo aldehdo o cetona y el grupo funcional alcohol son parte de la misma molcula se produce
una reaccin de ciclacin intermolecular que puede formar productos estables.
Los anillos cclicos hemiacetal y hemicetal ms estables contienen cinco o seis tomos. Al producirse la ciclacin, el
carbono carbonilo se transforma en un nuevo centro quiral. Este carbono se denomina tomo de carbono anomrico
Reactivo de Benedict se utiliza como una prueba para la presencia de reduciendo azcares. Esto incluye todos los
monosacridos y muchos disacridos, incluidas la lactosa y la maltosa. Incluso ms en general, la prueba de Benedict
detectar la presencia de aldehdos, y alfa-hidroxi-cetonas, incluyendo las que ocurren en ciertas cetosas
CHO
1
CH2OH
In solution glucose exists in ring form
H C OH
1
2
HO
3
C H D-glucose 2C O
H C OH (linear form)
4
H C OH HO C H
1 CH2OH
3 HOH2C 6
5 O
CH2OH
6
H C OH
6 CH2OH 6 CH2OH
4 5 H HO 2
H
5 O H H
5 O OH H C OH H 4 3 OH
H H 5
4 OH H 1 4 OH H 1 OH H
OH OH OH H 6
CH2OH
3 2 3 2
H OH
-D-glucose
H OH
-D-glucose
D-fructose (linear) -D-fructofuranose
The anomeric carbon atom

for glucose is carbon 1
Reaccin de Fehling (detecta la presencia de azcares reductores).
Clculos preparacin
soluciones
3 mL de Fehling A
1
Glucosa al 2 % Fehling B Preparar los tubos de ensayo.
3 mLde Fehling A
2
sacarosa al 2% Fehling B Aadir 1 ml del reactivo Fehling
3 mL de Fehling A A y B 1 ml del
3
almidn al 2 % Fehling B
3 mL de jugo Tubos de ensayo en un bao
Fehling A
4 de cebolla al de agua hirviente por unos 10
Fehling B
2% minutos.
3 mL de
Fehling A
5 Fructosa al Bao de agua hirviente por
Fehling B
2% 10 minutos.

3 mL de Fehling A
6 Observar y tomar apuntes de
Lactosa al 2% Fehling B
los cambios.
Reactivo Fehling A: disolver 7 g CuSO4 5 H2O en 100 ml de agua destilada.
Reactivo Fehling B: 35 g de tartrato de sodio y potasio + 12 g NaOH en 100 ml de agua destilada
Este ensayo pone de manifiesto la presencia de azucares reductores (aldosas: glucosa, ribosa, eritrosa, etc.). Se trata de una
reaccin redox en la que el grupo aldehdo (reductor) de los azcares es oxidado a grupo cido por el Cu2+ que se reduce a
Cu+ .
El reactivo de Fehling es una solucion alcalina de ion complejo cuprico con ion tartrato (o la solucion de Benedict, en la que el
complejo cuprico es con el ion citrato); desaparece el color azul intenso de la solucion y precipita oxido cuproso rojo, no sirve
para diferenciar aldosas de cetosas, ya que estas reducen aquellos reactivos, comportamiento caracteristico de a-
hidroxicetonas, en segundo lugar no
Los reactivos para la determinacion de azucares reductores contienen ion cuprico (Cu 2+ ) asociado con un agente de
quelacion, generalmente tartrato, o contienen ferrocianuro como el agente de oxidacion.
El cation Cuprico (Cu 2+ ) del reactivo de fehling reacciona con los glucidos reductores pasando a oxido cuproso (Cu+), que es
un precipitado de color rojo ladrillo. Esta es una reaction que resulta positiva solo si el glucido es reductor. Los glucidos
reductores se manifiestan en medio alcalino, pero el Cu2+ en ese medio tiende a precipitar espontaneamente como el oxido
cuprico (que en esa forma reacciona), de manera que es necesaria para secuestrar el cation ++, a fin de evitar la formation
del oxido cuprico
AZCAR OBSERVACIN
GLUCOSA Si nos dio el precipitado rojo ladrillo, lo cual nos indica que si es un azcar reductor +
FRUCTOSA Si nos dio el precipitado rojo ladrillo, lo cual nos indica que si es un azcar reductor +
SACAROSA La reaccin es negativa, el color se mantuvo en un tono azul. -
LACTOSA Si nos dio el precipitado rojo ladrillo, lo cual nos indica que si es un azcar reductor +
Esta prueba se utiliza para el reconocimiento de azcares reductores.
El poder reductor que pueden presentar los azcares proviene de su grupo carbonilo, que puede ser oxidado a grupo carboxilo
con agentes oxidantes suaves. Si el grupo carbonilo se encuentra combinado no puede presentar este poder reductor.
Los azcares reductores, en medio alcalino, son capaces de reducir el in Cu2+ de color azul a Cu+ de color rojo. Para ello el
grupo carbonilo del azcar se oxida a grupo carboxilo. En medio fuertemente bsico como en nuestro caso el NaOH el in
Cu2+ formara Cu (OH)2 insoluble por eso aadimos tartrato sdico potsico que acta como estabilizador al formar un
complejo con el Cu2+
Se prepara en el momento de su utilizacin mezclando Fehling A (solucin cprico) con Fehling B (solucin alcalina de tartrato
sdico-potsico) en partes iguales. Se forma un complejo con el in cprico que es reducido por los mismos compuestos que
reducan al reactivo de Tollens.
Si la reaccin es positiva se forma un precipitado rojo de Cu2O
RCHO + 2Cu+++ OH-RCOOH + CuO2+ H2O

Reaccin de Molisch.
Clculos preparacin
soluciones
de Molisch
3 mLde de
1 + Preparar los tubos de ensayo.
Glucosa al 1%
H2SO4
de Molisch Agregue dos gotas de reactivo de
3 mL de Sacarosa
2 + Molisch
al 1%
H2SO4
de Molisch Mezcle bien
3 mL de
3 +
Galactosa al 1%
H2SO4 Incline el tubo y deposite 1 mL de
de Molisch H2SO4 concentrado deslizndolo
3 mL de Ribosa
4 + lentamente por la pared del tubo.
1%
H2SO4
de Molisch No mezcle. Slo coloque el tubo en
3 mL de Fructosa
5 + posicin vertical y observe la
al 1%
H2SO4 formacin del anillo rojo violeta que
de Molisch aparece en la zona de contacto de
3 mL de maltosa
6 + los dos lquido
al 1%
H2SO4
La prueba de Molish permite detectar la presencia de hidratos de carbono en una muestra; est basada en la
formacin de furfural o derivados de ste (originado por los cidos concentrados que provocan una
deshidratacin de los azcares) a partir de los carbohidratos para obtener el furfural.
Detecta la presencia de carbohidratos en general, se basa en la formacin de derivados furfricos en medio

cido a temperatura ambiente o en caliente, los cuales reaccionan con un compuesto aromtico -naftol para
dar como productos compuestos coloreados.
Es una reaccin muy sensible puesto que soluciones de glucosa al 0.001% y sacarosa al 0.0001% dan positiva
la prueba. Tambin sirve para el reconocimiento general de carbohidratos donde polisacridos y disacridos se
hidrolizan formando monosacridos formando un color prpura violeta.
La reaccin de Molisch ocurre al

condensarse dos molculas de -naftol
con la funcin aldehdo del 5-
hidroximetilfurfural producido al calentarse
el carbohidrato en medio fuertemente cido,
como se muestra a continuacin.
Prueba De Tollens.
Tubos Cantidad Reactivo Procedimiento Cada tubo

NaOH al 5%
con 3 mL de solucin
1 + Preparar los tubos de ensayo.
Glucosa al 1%
AgNO3 al 5%
NaOH al 5% aadir 2 gotas de una disolucin de
con 3 mL de solucin NaOH al 5%
2 +
de Sacarosa al 1%
AgNO3 al 5%
NaOH al 5% ml de disolucin acuosa de AgNO3
con 3 mL de solucin al 5%
3 +
de Galactosa al 1%
AgNO3 al 5%
NaOH al 5% Agitar el tubo y aadir
con 3 mL de solucin gota a gota y con agitacin NH4OH
4 +
de Lactosa 1% 2N, hasta que se consiga disolver
AgNO3 al 5%
NaOH al 5% el precipitado de AgOH
5
con 3 mL de solucin
+
de Fructosa al 1% No mezcle. Slo coloque el tubo
AgNO3 al 5%
en posicin vertical y observe la
NaOH al 5% formacin del anillo rojo violeta que
con 3 mL de solucin
6 + aparece en la zona de contacto de
de maltosa al 1%
AgNO3 al 5% los dos lquido
El reactivo de Tollens ( Ag(NH3)2+ ), es un agente de oxidacin suave, su solucin de Nitrato de plata es transparente
e incolora de pH bsico. Para evitar en el Test de diagnostico la precipitacin de iones de Plata como Hidrxido de Plata
insoluble, se agregan unas gotas de una solucin de Amoniaco, que con los iones de plata forma un complejo llamado
Diamina-Plata (I) que es soluble en agua.
Las cetonas no dan esta reaccin, excepto las hidroxicetonas y las dicetonas 1 -2, que son reductoras y algunos
compuestos nitrogenados como las hidrazinas, hidroxilaminas, aminofenoles, que no estn comprendidos en este grupo,
por lo que no interfieren.
Ag NO3+ NH4OH Ag(NH3)OH R-CHO + 2Ag(NH3)OH R-COOH + 2NH3+ 2Ag0(espejo) + H2O
Al oxidar un Aldehdo con el reactivo de Tollens, se produce el correspondiente cido Carboxlico y los iones de Plata se
reducen simultneamente a Plata metlica.
Por ejemplo:
El Acetaldehdo produce cido Actico, la Plata suele depositarse formando un espejo de Plata en la superficie interna del
recipiente de reaccin. La aparicin de un espejo de Plata es un resultado positivo a la presencia de un Aldehdo.
El Aldehdo se oxida a cido Carboxlico, por lo tanto, es un agente reductor. Los iones de Plata se reducen a Plata
metlica, esto quiere decir que los iones de Plata son los agentes oxidantes.
Reaccin de almidones con lugol (yoduro potsico).
Clculos preparacin
soluciones
con 3 ml de solucin
1 lugol
Glucosa al 1% Preparar los tubos de ensayo.
con 3 mL de solucin
2 lugol
sacarosa al 1% Agregar 5 gotas de lugol
con 3 mL de solucin
3 lugol
almidn al 1% Observar y tomar apuntes de
con 3 mL de solucin los cambios.
4 lugol
jugo de cebolla al 1%
con 3 mL de solucin
5 de almidn de papa al lugol
1%
6 con 3 mL de agua lugol
La prueba del lugol (que es una disolucin de I2) con el almidn produce un color violeta
ya que el yodo se introduce entre las espiras de la molcula de almidn.
El color que dan los polisacridos con el lugol (solucin de I2 y de IK) se debe a que el I2
ocupa espacios vacos en las hlices de la cadena de unidades de glucosa, formando un
compuesto de inclusin que altera las propiedades fsicas del polisacrido,
especialmente la absorcin lumnica. Esta unin del I2 a la cadena es reversible, y por
calentamiento desaparece el color, que al enfriarse reaparece.
El lugol da con el almidn color azul y con el glucgeno color rojo caoba.
PREGUNTAS.
Explique por qu el monosacrido gliceraldehido da negativa la prueba Molish.
Cules son las aplicaciones prcticas de las pruebas estudiadas?
Defina los siguientes trminos: carbono anomrico, centro quiral, levorrotatorio.
Dibuje los monosacridos glucosa, galactosa, ribosa y fructosa, clasifquelos segn el nmero de tomos de carbono y la
funcin principal
Efectu un enlace hemiacetlico y uno hemicetlico, escriba las diferencias entre ambos enlaces.
Escriba las funciones: aldehdica, cetnica, alcohlica, cida, colquelas en orden de reactividad y explique el porqu de
ese orden.
Explique en qu consiste la hidrlisis cida de disacridos.
Defina los siguientes trminos: azcar reductor y azcar no reductor, cite ejemplos.
Efectu un enlace glucosdico.

Practica 5. CARACTERSTICAS DE LOS CIDOS GRASOS .
Los lpidos son biomolculas orgnicas formadas por C, H y O pudiendo contener adems N, P y S. Son un grupo muy
heterogneo de molculas aunque tienen en comn las siguientes propiedades: Son insolubles en agua, pero solubles en
disolventes orgnicos, es decir, no polares, como el ter, cloroformo, benceno, acetona, etc.
cidos grasos Saturados: Si todos los enlaces son simples

Formados por una larga cido palmtico: CH3 -CH2 -CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2- CH2- CH2- CH2- CH2-CH2-COOH
cadena hidrocarbonada y un
grupo carboxilo (-COOH) Insaturados: Insaturados: si tienen algn doble o triple enlace.
cido Oleico: CH3 -CH2 -CH2-CH2-CH2-CH2-CH2-CH2=CH2-CH2- CH2- CH2- CH2- CH2-CH2-COOH
Configuracin cis: Los restos R1 y R2 de la cadena aliftica se sitan al mismo lado del doble enlace.
La mayora presentan configuracin cis, lo que obliga a torcer la cadena formando cadenas dobladas o curvadas.
Isomera cis-trans: Slo la
poseen los cidos grasos
insaturados
Configuracin trans: Los restos R1 y R2 se sitan en lados contrarios.
Clasificacin de acuerdo a las Propiedades qumicas
Esterificacin: Es la unin de un cido graso con un alcohol para obtener un ster, con liberacin de una molcula de agua.
Saponificacin: Es la unin de un cido graso con una base fuerte, normalmente KOH o NaOH para obtener una sal de cido graso conocida como
jabn y con liberacin de una molcula de agua.
Lpidos Lpidos simples u Son steres de cidos grasos y un alcohol.
saponificables hololpidos
Acilglicridos Glicridos y son steres de un alcohol polivalente, la glicerina, con uno, dos o tres cidos grasos.
Se forma un monoglicrido si se une un nico cido graso, un diglicrido si se unen dos y un triglicrido si se
unen tres.
Las grasas Aceites: Estn formados por cidos grasos insaturados por lo que a temperatura ambiente
Constituyen la son lquidos. Son propios de los vegetales
principal reserva Grasas o sebos: Grasas o sebos: estn formados mayoritariamente por cidos grasos saturados por
energtica de los lo que a temperatura ambiente son slidos. Son propios de los animales.
seres vivos.
Cridos Son steres de un cido graso con un alcohol monovalente lineal de cadena larga. Ejemplo: la cera de la
abeja: cido palmtico + alcohol miriclico (C30H61OH)
Lpidos complejos o Son molculas compuestas por Fosfolpidos: glicerofosfolpidos o fosfoglicridos
heterolpidos componentes lipdicos y otros no Formados por: 1 glicerina + 2 cidos grasos + 1 cido fosfrico, que
lipdicos. Se encuentran formando la constituye el cido fosfatdico, que es la unidad estructural de los
bicapa lipdica de las membranas fosfoglicridos del cual derivan los distintos tipos al unirse a un
celulares por lo que tambin se les alcohol aminado.
llama lpidos de membrana Los principales aminoalcoholes son: etanolamina, colina y serina.
Fosfolpidos: Formados por 1 alcohol: esfingosina + 1 cido graso + 1 cido fosfrico + 1 alcohol aminado La esfingosina y
esfingofosfolpidos o el cido graso constituyen la ceramida, que es la unidad estructural de los esfingolpidos y que es la parte
fosfoesfingolpidos hidrfoba. Abundan en el tejido nervioso.
Glucolpidos: Cerebrsidos: El glcido es un monosacrido: la glucosa o galactosa. Abundan en las membranas de
Esfingoglucolpidos las neuronas y vainas de mielina.
Formados por una Ganglisidos: El glcido e un oligosacrido complejo. Abundan en las neuronas y glbulos rojos. Se
ceramida unida a un encuentran en la cara externa de las membranas.
glcido.
Lpidos Terpenos o Formados por la polimerizacin de molculas de isopreno (2-metil, 1-3-butadieno). Son
insaponificables isoprenoides lpidos vegetales.
Segn el nmero de molculas de isopreno se denominan:
Monoterpenos: 2 unidades de isopreno. Componen los aceites esenciales de muchas plantas que
les dan olor y sabor (mentol, geraniol,.)
Diterpenos: 4 unidades de isopreno. Ej: fitol de la clorofila
Triterpenos: 6 unidades de isopreno. Ej: precursores del colesterol
Tetraterpenos: 8 unidades de isopreno. Ej: pigmentos como la xantofila y los caroteno.
Politerpenos: muchas unidades de isopreno. Ej: caucho.
Esteroides Derivados del ciclopentanoperhidrofenantreno o esterano. Son molculas muy activas que
intervienen en el metabolismo celular.
Esteroles Tienen un OH en el carbono 3 y una cadena carbonada en el 17
El principal esterol el LDL (lipoprotena de baja densidad): Tiene ms lpido que protenas. Tambin se llama LDF o
colesterol: Forma parte colesterol malo. Transportan el colesterol a todos los tejidos menos al hgado.
de las membranas HDL (lipoprotena de alta densidad): Tambin llamado colesterol bueno. Tiene ms protenas que
celulares y se sita entre lpidos. Recogen el colesterol y lo llevan al hgado donde es eliminado por la bilis.
los fosfolpidos fijndolos
para dar estabilidad a la
membrana.
El colesterol es precursor Vitamina D: controla el metabolismo del P y Ca
de: cidos biliares: Emulsionan las grasas para que puedan ser atacadas por las lipasas.
Hormonas: como las sexuales: andrgenos y estrgenos y las de las cpsulas suprarrenales:
aldosterona y cortisol
Prostaglandinas Una clase especial de cidos grasos insaturados. Son hormonas locales sintetizadas en el mismo
lugar donde ejercen su accin a partir de los lpidos de las membranas.
Practica 5. CARACTERSTICAS DE LOS CIDOS GRASOS .
Clasificacin de lpidos.
Lpidos saponificables Simples Acilglicridos
Cridos
Complejos Fosfolpidos
Glucolpidos
Lpidos insaponificables Terpenos
Esteroides
Prostaglandinas
Determinacin de solubilidad en lpidos.

con 3 ml de Aceite 4 mL de agua Preparar los tubos de ensayo. 4 mL de hexano
1
vegetal destilada
con 3 ml de Aceite 4 mL de hexano 3 ml de Aceite vegetal
2 4 mL de hexano
vegetal +
Agite los tubos. Agite los tubos
+
deje reposar unos minutos Dejar en reposo.
+
Observar y tomar apuntes de los Observar y tomar apuntes de los
cambios. cambios.
SAPONIFICACIN
Muchos lpidos, como por ejemplo: los cidos grasos, reaccionan con bases fuertes, NaOH o KOH, dando
sales sdicas o potsicas que reciben el nombre de jabones. Esta reaccin se denomina de
saponificacin. Son saponificables los cidos grasos o los lpidos que poseen cidos grasos en su
estructura

3 mL de aceite 3 mL de NaOH Agregar manteca en un tubo de
1
vegetal (1 N) Preparar los tubos de ensayo. ensayo.

3 mL de aceite Agregar 3 mL solucin de NaOH
2 3 mL de KOH
vegetal (1 N). 3 ml de la solucin de NaOH (1 N).
+
Agitar. Bao de agua hirviente por
10 minutos.
Bao de agua hirviente por Observar y tomar apuntes de los
10 minutos. cambios.

Dejar enfriar.

Observar y tomar apuntes de los cambios.
Si posible repetir el mismo procedimiento con

KOH
La saponificacin consiste en una hidrlisis alcalina de la
preparacin lipdica (con KOH o NaOH). Los lpidos derivados de
cidos grasos (cidos monocarboxlicos de cadena larga) dan lugar
a sales alcalinas (jabones) y alcohol, que son fcilmente extrables
en medio acuoso.
Los aceites vegetales y las grasas animales son triglicridos (esteres de

glicerina con cidos grasos), y al ser tratados con una base fuerte como
(NaOH) o (KOH) se saponifican, es decir se produce el jabn (sal del cido
graso) y la glicerina (glicerol). (hidrxido sdico, NaOH) y la potasa
(hidrxido potsico, KOH).
Estos compuestos tienen la particularidad de ser anfipticos, es decir

tienen una parte polar y otra apolar (o no polar), con lo cual pueden
interactuar con sustancias de propiedades dispares. Por ejemplo, los
jabones son sales de cidos grasos y metales alcalinos que se obtienen
mediante este proceso.
REACCIN CON EL SUDN III
El Sudn III es un colorante que se utiliza para detectar especficamente las grasas, porque es insoluble en agua y en
cambio es soluble en las grasas. Al ser de color rojo, cuando se disuelve tie las grasas de color rojo anaranjado.

con 3 ml de 3 ml de Aceite vegetal
1 Sudan III
Aceite vegetal Preparar los tubos de ensayo.
con 3 mL de 8 gotas de Sudan III
2 Tinta roja
Aceite vegetal Agregar 3mL de aceite vegetal.
Agregar 8 gotas de Sudan III cambios.


cambios.
Sudan III
Sudan III is a lysochrome (fat-soluble dye) diazo dye. It is
structurally related to azobenzene.
Sudn III es predominantemente usados para la tincin de triglicridos en los tejidos animales (secciones
congeladas).Detecta las cadenas de hidrocarbonos.
El reactivo de Sudn produce una reaccin hidrofbica donde los grupos no-polares (los hidrocarbonos) se agrupan y son
rodeados por molculas del reactivo.
La prueba de Sudn tie los hidrocarbonos de rojo. Es un grupo de colorantes disolventes solubles en lpidos a menudo
llamadas lisocromos y son colorantes diazo. Tambin se pueden utilizar para teir algunos lpidos unidos a protena en
secciones de parafina.
Precauciones de uso, han sido clasificados como carcingenos de categora 3 por la Agencia Internacional para la
Investigacin sobre el Cncer.
Sudan III (CAS 85-86-9)
Precauciones de uso, han sido clasificados como

carcingenos de categora 3 por la Agencia
Internacional para la Investigacin sobre el Cncer.
1. PREGUNTAS:
Qu son los jabones? Cmo se pueden obtener los jabones?

Por qu en la saponificacin la glicerina aparece en la fase acuosa?
Qu enzima logra en el aparato digestivo la hidrlisis de las grasas?
Indica lo que ocurre con las mezcla aceite sudan III y aceite-tinta y explica a qu se debe la
diferencia entre ambos resultados.
Qu ocurre con la emulsin de agua en aceite transcurridos unos minutos de reposo? Y con la
de los otros compuestos empleados? A qu se deben las diferencias observadas entre ambas
emulsiones?
Qu ocurre con la emulsin cuando se le aade detergente?
1 18
IA VIIIA
1 H
1 2
IIA
Periodic Table 13
IIIA
14
IVA
15
VA
16
VIA
17
VIIA
2
He
1.00797 4.0026
3 4 5 6 7 8 9 10
2 Li Be B C N O F Ne
6.939 9.0122 10.811 12.0112 14.0067 15.9994 18.9984 20.179
11 12 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18
3 Na Mg IIIB IVB VB VIB VIIB VIIIB IB IIB Al Si P S Cl Ar
22.9898 24.305 26.9815 28.086 30.9738 32.064 35.453 39.948
19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36
4 K Ca Sc Ti V Cr Mn Fe Co Ni Cu Zn Ga Ge As Se Br Kr
39.102 40.08 44.956 47.90 50.942 51.996 54.9380 55.847 58.9332 58.71 63.54 65.37 65.37 72.59 74.9216 78.96 79.909 83.80
37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54
5 Rb Sr Y Zr Nb Mo Tc Ru Rh Pd Ag Cd In Sn Sb Te I Xe
85.47 87.62 88.905 91.22 92.906 95.94 [99] 101.07 102.905 106.4 107.870 112.40 114.82 118.69 121.75 127.60 126.904 131.30
Los tomos que componen la materia viva se llaman
55 56 57 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83bioelementos.
84 85 86
6 Cs Ba La Hf Ta W Re Os Ir Pt Au Hg Tl Pb Bi Po At Rn
% en la
132.905 137.34 138.91 178.49 180.948 183.85 186.2 190.2 192.2 195.09 196.967 200.59 204.37 207.19
Bioelementos 208.980
materia viva [210] [210]
tomos [222]
87 88 89 104 105 106 107 108 109 Primarios 96% C, H, O, N, P, S
7 Fr Ra Ac Ku
Secundarios 3,9% Ca, Na, K, Cl, I, Mg, Fe
[223] [226] [227] [260]
Oligoelementos 0,1% Cu, Zn, Mn, Co, Mo, Ni, Si.
DIVERSAS MANERAS DE EXPRESAR LA CONCENTRACION DE UNA SOLUCION .
La gran importancia de las soluciones como medio de reaccin, hace necesario estudiar las diversas
maneras de expresar sus concentraciones y todo lo relacionado con dilucin y mezclas.
Las concentraciones expresadas por unidad de volumen como densidad, molaridad, formalidad, normalidad y
porcentaje en volumen se afectan con los cambios de temperatura debido a que el volumen vara con la
temperatura; generalmente las variaciones son pequeas y suelen ignorarse salvo en clculos cuidadosos y
en soluciones gaseosas.
La molalidad, fraccin molar, partes por milln y porcentaje en peso, son relaciones de peso y no son
afectadas por la temperatura.
Densidad: la densidad de una solucin es la masa contenida en la unidad de volumen:
Gramos de solucin
Gramos de solucin
P= o
Mililitro de solucin
Mililitro de solucin
Se prepara una solucin disolviendo 0,5 gramos de soluto en 8,5 gramos de solvente y se encuentra
que la solucin ocupa un volumen de 10 mililitros.
Calcular la densidad de la solucin.
(0,5 + 8,5) = 9 gramos de solucin

10 ml = Volumen de la solucin
9 g de solucin
p= 09 g/ml
10 ml Volumen de la solucin
Una densidad de 0,9 g/ml quiere decir que un mililitro de la solucin pesa 0,9 gramos.
Porcentaje en peso: se expresa como el nmero de gramos de soluto por 100 gramos de
solucin:
g de soluto
% peso = x 100
g de solucin
Una solucin contiene 30 gramos de soluto en 270 gramos de solvente. Calcular el porcentaje en peso.
30 g de soluto
% peso = 0,1x 100 =10
(30 + 270) g de solucin
Preparar 500 gramos de solucin acuosa de glucosa al 10% en peso.
20 X 500 g de soluto 10en peso

=50 g de
= ;X
glucosa
100 500 100
Se pesan exactamente 50 gramos de glucosa y se agregan a 450 gramos de agua para que el peso total de la
solucin sea 500 gramos.
Porcentaje en volumen: expresa el nmero de unidades de volumen de soluto en 100 unidades
de solucin:
Volumen de soluto
% volumen x 100
Volumen de solucin
Cinco mililitros de metanol ms el solvente necesario para completar 100 mililitros de solucin
5 ml
x 100 =5 % volumen
100ml
Preparar 500 gramos de solucin acuosa de glucosa al 10 en peso.
Preparar 200 mililitros de solucin acuosa de etanol al 20% en volumen
20 X 20 x 200
= ;X =40 g de etanol
100 200 100
Fraccin molar: relacin entre el nmero de moles de un componente de la solucin y el nmero de moles
totales.
nA nA
XA = = La suma de las fracciones molares es igual a uno: X i = 1
nA + nB + ... nT
2 2
X H2S04 = =0,0196
2 + 100 102
100
X H20= =0,9804
102
X H2S04 + X H20 = 0,0196 + 0,9804 = 1,0000

Una densidad de 0,9 g/ml quiere decir que un mililitro de la solucin pesa 0,9 gramos.
Nmero de moles-gramos de soluto No. moles

M= =
Nmero de litros de solucin V (l)
Si en 4 litros de solucin de metanol hay 2 moles de metanol, la solucin es de 2 moles/4 litros = 0,5 M en metanol.
Preparar 200 ml de solucin de glucosa 0,5 M.
Nmero de moles-gramos de soluto No. moles

M= =
M X V = No. moles soluto = 0,5 mol/l x 0,2l = 0,1 moles soluto

0,1 moles C6H1206 x 180 g/mol = 18,0 g de glucosa. .
Se pesan exactamente 18,0 gramos de glucosa, se disuelven en agua, se completa el volumen a 200 ml y se
mezcla bien. Esta solucin es 0,5 M en glucosa.
Formalidad: una solucin formal es aquella que contiene un peso frmula-gramo de soluto disuelto en cada
litro de solucin:
Nmero de pesos-frmula-g soluto No. pfg

F= =
Una solucin 1 formal de NaCI contiene un peso-frmula-gramo, 58,5 gramos de NaCI, por litro de solucin.
Cuntos gramos de sulfato de sodio (Na2S04) estn contenidos en 250 ml de solucin 0,1 F de sulfato de so dio?
Solucin:
V x F = No. pesos-frmula-g = 0,25 L x 0,1 peso-frmula/l = 0,025 pfg
Na2S04 x 142 g/pfg = 3,55 g Na2S04
.
Normalidad: una solucin normal contiene un equivalente-gramo de so luto en un litro de solucin:
No. de equivalentes-gramo soluto No. eq-g

N= =
No. De litro de solucin V (l)
El nmero de equivalentes que contiene un mol o un peso-frmula de una sustancia, depende de la reaccin en la cual
participe, pero siempre se cumple que al reaccionar varias sustancias se consume un nmero exactamente igual de
equivalentes de cada una de ellas.
un equivalente-gramo es la cantidad de sustancia que consume o produce un mol de iones H+.
Cuando el cido sulfrico reacciona con una base para neutralizarla, su peso molecular-gramo (98), proporciona 2 moles
de iones H+. De acuerdo con la definicin de peso equivalente, el del cido sulfrico, en este caso, es su peso molecular
dividido por dos:
H2 SO4 /2 98 / 2 = 49
Un litro de solucin que contenga 49 gramos de este cido es una solucin normal. Una solucin formal de cido sulfrico
contiene un peso frmula de cido sulfrico por litro, es decir dos equivalentes- gramo por litro; por tanto es 2 N.
Un peso frmula-gramo de NaOH proporciona, en la neutralizacin de un cido, un mol de iones OH-, los cuales consumen
un mol de iones H+: H+ OH H2O
Por tanto, NaOH/1, 40 gramos de hidrxido de sodio constituyen el peso de un equivalente-gramo de base. Un litro que
contenga esta cantidad de NaOH es una solucin normal de la base. En este caso la solucin normal y la formal son
idnticas.
Normalidad: ejercicio
Calcular el peso equivalente de las siguientes sales:

a) KCl
b) FeCl3
c) Fe2 (S04)3
Solucin:
a) KCl + H20 K+ (ac) + Cl- (ac) en solucin acuosa
Peso equivalente = KCl/1 = 74,5/1 = 74,5 g/eq
b) FeCl3 + H20 Fe+3 (ac) + 3 Cl- (ac) en solucin acuosa

Peso equivalente = FeCl3 /3 = 162,5/3 = 54,17 g/eq
c) Fe2 (S04)3 + H20 2Fe+3 (ac) + 3S04-2 (ac) en solucin acuosa

Peso equivalente = Fe2 (S04)3 / 6 = 400/6 = 66,67 g/eq
Normalidad: ejercicio
No. de equivalentes-gramo soluto No. eq-g

N= =
No. De litro de solucin V (l)
Calcular cuntos gramos de cido sulfrico se necesitan para neutralizar 10 gramos de NaOH.
Solucin: Como siempre un equivalente-gramo de cido neutraliza un equivalente- gramo de base, se tiene:
49 g de H2S04 40 g de NaOH 4910 12,5g

neutralizan X= =
40
X 10 g
En una reaccin de neutralizacin siempre se produce H20 y la sal correspondiente en solucin:

2 NaOH + H2S04 _ 2Na+ + S04 -2 + H20
El peso equivalente de una sal se define como el peso de sustancia que es capaz de producir un mol de cargas positivas o
negativas. Un peso-frmula de Na2SO4 es capaz de producir, en solucin acuosa, dos moles de cargas positivas o dos moles
de cargas negativas, por tanto, el Na2SO4 contiene 2 eq-g por peso-fr-mula y su peso equivalente es Na2SO4 /2= 71 g.
Molalidad: las soluciones que contienen un peso molecular gramo o un peso frmula gramo de soluto, disuelto en 1 000
gramos de agua se denominan molales. Estas son tiles en clculos, cuando se estudian ciertas propiedades de las
soluciones:
No. de moles de soluto No. moles soluto

m= =
Kg de solvente 1000 g de solvente
Calcular la molalidad de una solucin formada por 45 gramos de glucosa, C6H1206, y 500 gramos de H20.
moles de soluto
No. de moles de soluto 45g 0,25 moles

m= moles de soluto = =
Kg de solvente 180 g/mol
0,25 moles 05 m
m= =
0,5 kgH20
Partes por milln: se define como miligramos de soluto por kilogramo de solucin:
mg soluto
ppm =
Kg de solucion
Una solucin de 3 mg de Cu en 50 g de solucin da: = 60 ppm
Se usa cuando la cantidad de soluto es muy pequea.

Generalmente, para facilitar los clculos de laboratorio, es necesario convertir unas unidades de concentracin en otras.
Ejercicio
Expresar la concentracin del cido ntrico del 68 en peso y densidad 1,40 g/ml como:
a) Formalidad. e) Molalidad.
b) Normalidad. d) Fraccin molar.
Solucin: 68 g HN03
1 litro de solucin pesa: (1,40 g/ml) x 1000 ml = 1 400 g. 1400 g solucin x =952g HN03
En 1 400 g de solucin, el 68 es cido puro.
100 g solucin
952 g HN03
a) No. p-f HN03= =15,1g/p-f As, 15,1 p-f/l= 15,1 formal.
63 g/p-f
b) El peso equivalente del cido ntrico cuando acta como cido es HN0 3/1 = 63 g, por tanto, una solucin 15,1 F es igual a 15,1 N.
No. p-f soluto Gramos de solucin = Gramos soluto + Gramos solvente 15,1 p-fHN03
c). m= 1400 g = 952 g + X m= =30,94
kg solvente X = 488 g de H20 = 0,488 Kg de H20 0,488 kg H20
No. moles HN03 No. moles HN03 = 15,1

d). X HN03 = No. moles H20 = 488 g/18 g/mol = 27,1 mol
No. moles HN03 +No. moles H20 X HN03 = 15,1/(15,1 + 27,1) = 0,36
Dilucin:
Generalmente los reactivos se expenden en soluciones muy concentradas y es necesario prepararlos como
soluciones diluidas para uso de laboratorio. Para diluir una solucin se debe agregar ms solvente. Esto trae como
consecuencia disminucin en la concentracin por aumento en el volumen.
Se puede establecer para una dilucin que: V i x C i = V f x C f

Vi, Ci, V f y C i son los volmenes y las concentraciones iniciales y finales.
Cuntos ml de H2S04, 15 F se deben diluir a dos litros para que la nueva concentracin sea 0,6 F?
Vi=? v f =2l 2Lx0,6F

C i = 15F C f = 0,6F Vi= =0,084
15F
Se deben medir 80 ml de H2S04 concentrado (15F), adicionarlos a un baln de 2 L que contenga algo de agua, completar el volumen
con ms agua y mezclar bien; la solucin preparada de esta manera es 0,6 F.

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UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A

Docente Director Alberto Garca Jerez

Desarrollar en el estudiante la competencia de comportamiento bioseguro en el laboratorio.

La seguridad en el laboratorio no se limita nicamente a la proteccin personal o de la infraestructura,

La bata es blanca y en algodn, en caso de accidente, el color blanco

El uso de pantalones largo preferiblemente en Jean o dril.

No es permitido el uso minifalda o pantalones cortos, ni tampoco

Llevar zapatos cerrados y no sandalias.

NFPA-type labels ALK = Alkali

Incluye este grupo la serina, treonina, cistena, asparagina y glutamina.

Con una carga neta negativa a pH 7.0 son: aspartamo y el glutamato.

Small Hydrophobic Amino Acids

Ninhidrina: Disolver 0.1 g de ninhidrina en 100 ml de etanol

Formacin de la base de Schiff: Formacin del dicetohidrindeno:

Condensacin del amino-dicetohidrindeno con otra El ltimo compuesto en esta

Este in forma un enlace covalente coordinado con los enlaces peptdicos

Tubos Cantidad Reactivo Procedimiento Clculos preparacin soluciones

Permite identificar aminocidos que

En esta reaccin el aminocido

En esta prueba se produce la nitracin

Tiene especificidad para detectar la

En dicha reaccin adems de la ++

El grupo guanidinio presente en

Solucin de alfa naftol a-naftol............. 5.0 g Alcohol etlico

El Cu+ y los grupos R de la tirosina, triptofano y cistena reaccionan con el

Cules son los principales mtodos colorimtricos usados en la determinacin de protenas?

Ilustracin 1 Clasificacin de carbohidratos.

Barfoed cido actico

Glucose + Glucose Maltose (malt sugar)

Qumicamente se definen como aldehdos o cetonas

Basndose en las diferencias estructurales que stos presentan,

Las pruebas para la determinacin de los carbohidratos pueden

A continuacin se muestran tres ejemplos

Los pentosanos abundan tanto como la celulosa en la naturaleza. El pentosano ms

El xilano representa del 25% al 30% de los cereales

Las pruebas de Benedicts y Barfoeds identifican los azcares

Glucosa + 2Cu (OH)2 ---------> Cu2O + 2H2O + glucosa

(Iones cpricos oxidados: azul) (iones cuprosos reducidos: rojo)

RCHO + 2Cu++ + 4OH- RCOOH + Cu2O + 2H2O precipitado rojo

The anomeric carbon atom

SACAROSA La reaccin es negativa, el color se mantuvo en un tono azul. -

Si la reaccin es positiva se forma un precipitado rojo de Cu2O

RCHO + 2Cu+++ OH-RCOOH + CuO2+ H2O

Detecta la presencia de carbohidratos en general, se basa en la formacin de derivados furfricos en medio

La reaccin de Molisch ocurre al

Tubos Cantidad Reactivo Procedimiento Cada tubo

Ag NO3+ NH4OH Ag(NH3)OH R-CHO + 2Ag(NH3)OH R-COOH + 2NH3+ 2Ag0(espejo) + H2O

Explique por qu el monosacrido gliceraldehido da negativa la prueba Molish.

Cules son las aplicaciones prcticas de las pruebas estudiadas?

Defina los siguientes trminos: carbono anomrico, centro quiral, levorrotatorio.

Explique en qu consiste la hidrlisis cida de disacridos.

Efectu un enlace glucosdico.

cidos grasos Saturados: Si todos los enlaces son simples

Determinacin de solubilidad en lpidos.

Tubos Cantidad Reactivo Procedimiento Cada tubo

Tubos Cantidad Reactivo Procedimiento Cada tubo

Si posible repetir el mismo procedimiento con

Los aceites vegetales y las grasas animales son triglicridos (esteres de

Estos compuestos tienen la particularidad de ser anfipticos, es decir

Tubos Cantidad Reactivo Procedimiento Cada tubo

Observar y tomar apuntes de los

Sudan III (CAS 85-86-9)

Precauciones de uso, han sido clasificados como

Qu son los jabones? Cmo se pueden obtener los jabones?