Biologa Celular

Desnaturalizacin de Protenas

OBJETIVO

Determinar el comportamiento de una protena globular hidrosoluble

bajo condiciones de desnaturalizacin.
 FUNDAMENTO
Las protenas son los materiales que desempean un mayor nmero de
funciones en las clulas de todos los seres vivos. Por un lado, forman
parte de la estructura bsica de los tejidos (msculos, tendones, piel,
uas, etc.) Y, por otro, desempean funciones metablicas y reguladoras
(asimilacin de nutrientes, transporte de oxgeno y de grasas en la
sangre, inactivacin de materiales txicos o peligrosos, etc.). Tambin
son los elementos que definen la identidad de cada ser vivo, ya que son
la base de la estructura del cdigo gentico (ADN) y de los sistemas de
reconocimiento de organismos extraos en el sistema inmunitario.

Son macromolculas orgnicas, constituidas bsicamente por carbono

(C), hidrgeno (H), oxgeno (O) y nitrgeno (N); aunque pueden contener
tambin azufre (S) y fsforo (P) y, en menor proporcin, hierro (Fe),
cobre (Cu), magnesio (Mg), yodo (I), etc.

Estructura de las protenas

La organizacin de una protena viene definida por cuatro niveles

estructurales denominados:

Estructura primaria: La estructura primaria es la secuencia de

aminocidos de la protena. Nos indica qu aminocidos componen la
cadena polipeptdica y el orden en que dichos aminocidos se
encuentran. La funcin de una protena depende de su secuencia y de la
forma que sta adopte.

Estructura Secundaria: La estructura secundaria es la disposicin de la

secuencia de aminocidos en el espacio. Los aminocidos, a medida que
van siendo enlazados durante la sntesis de protenas y gracias a la
capacidad de giro de sus enlaces, adquieren una disposicin espacial
estable, la estructura secundaria.

Existen dos tipos de estructura secundaria:

La -hlice
La conformacin .
 Estructura terciaria
La estructura terciaria informa sobre la disposicin de la estructura
secundaria de un polipptido al plegarse sobre s misma originando una
conformacin globular.

Estructura Cuaternaria
Esta estructura informa de la unin, mediante enlaces dbiles (no
covalentes) de varias cadenas polipeptdicas con estructura terciaria,
para formar un complejo proteico. Cada una de estas cadenas
polipeptdicas recibe el nombre de protmero.

Cuando la protena no ha sufrido ningn cambio en su interaccin con el

disolvente, se dice que presenta una estructura nativa (Figura inferior).
Se llama desnaturalizacin de las protenas a la prdida de las
estructuras de orden superior (secundaria, terciaria y cuaternaria),
quedando la cadena polipeptdica reducida a un polmero estadstico sin
ninguna estructura tridimensional fija.

En una protena cualquiera, la estructura nativa y la desnaturalizada tan

slo tienen en comn la estructura primaria, es decir, la secuencia de AA
que la componen. Los dems niveles de organizacin estructural
desaparecen en la estructura desnaturalizada.

La desnaturalizacin provoca diversos efectos en la protena:

Cambios en las propiedades hidrodinmicas de la protena: aumenta la
viscosidad y disminuye el coeficiente de difusin.
Una drstica disminucin de su solubilidad, ya que los residuos
hidrofbicos del interior aparecen en la superficie.
prdida de las propiedades biolgicas.

MATERIAL

1. Clara de huevo
2. Etanol
3. Jugo de limn
4. cido Clorhdrico
5. Hidrxido de Sodio 1N
6. Sal de mesa

PROCEDIMIENTO
Colocar un poco Agregue un poco Tapar los tubos
de huevo en etanol, al segundo y esperar 10
siete tubos de un poco de jugo de minutos
ensaye limn, al tercero un
poco de HCl 1N, Al
cuarto un poco de
 Observar lo que
sucede en cada
tubo

RESULTADOS

CONDICION CARACTERIS GRADO DE

TICAS DESNATURALIZ
ACION
1

7
 En esta foto observamos lo que son
los tubos rotulados respectivamente
con un poco de muestra y lo que le
agregamos, esta foto es de cmo se
observ antes de los 10 min.

Aqu podemos observar lo que es

una muestra de clara de huevo con
Hidrxido de Sodio y la muestra se
hizo solida

CUESTIONARIO
Cules son las condiciones de desnaturalizacin de protenas para
someter a una separacin por electroforesis en condiciones
desnaturalizantes?
Polaridad, hidrofobicidad, Impedimento estrico, estado nativo es
termodinmicamente ms estable

Mencione dos mtodos de desnaturalizacin de protenas usados

cotidianamente en casa.
Cuando uno hace huevo en su casa
Al igual la leche cuando uno la calienta por exceso pierde algunas propiedades.

Si quisiramos obtener protenas de un homogenado celular, qu

condiciones experimentales debemos cuidar?
1. Solucin amortiguadora de pH
2. Inhibidor de proteasas
3. 4 C

CONCLUSION

Pudimos determinar lo que son los factores qumicos de las

protenas al agregarle lo que son los reactivos en este caso la clara
de huevo cambia su consistencia y su color esto es porque se
desnaturaliza y por lo tanto cambia sus propiedades fsicas y
qumicas, un ejemplo claro fue el de Hidrxido de Sodio con la
clara de huevo que cambio de semilquida a semislida.

BIBLIOGRAFIA
http://www.ehu.eus/biomoleculas/proteinas/desnaturalizacion.htm
Biologa celular y molecular. 5ta Edicin. Editorial panamericana