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ASIGNATURA:
INMUNOLOGA
DOCENTE:
CICLO:
SEXTO
INTEGRANTES
Pimentel, 2016
OBJETIVOS:
1. Describir y conocer los anticuerpos antinucleares.
INTRODUCCIN
Los anticuerpos antinucleares son inmunoglobulinas que reconocen componentes
celulares autologos (nucleares y citoplasmaticos). Adema s de los ANA
autoinmunes, pueden estar en circulacin ANA infecciosos y naturales.
Los ANA detectados por IFI deben ser evaluados en base al patrn y al ttulo. La
deteccion especfica de diversos autoanticuerpos (anti-ENA, ADNcd, etc.) resulta
til en el diagnostico y seguimiento de pacientes con enfermedades autoinmunes.
Por tal motivo, su deteccion debe realizarse de manera ordenada y razonable,
empleando las guas o estrategias enfocadas al buen uso e interpretacin de la
presencia de autoanticuerpos.
Aspectos moleculares:
Esta es una amplia familia de auto anticuerpos que pertenecen al primer grupo
antes mencionado, es decir, tienen reactividad contra antgenos en los ncleos de
las clulas de muchos tejidos y rganos y por ende, se asocian ms
frecuentemente con enfermedades de carcter sistmico Los cidos nucleicos en
el interior del ncleo celular se encuentran asociados con protenas, a esta
asociacin se le llama cromatina, que es una estructura molecular
extremadamente compleja. En la cromatina las protenas ms abundantes son las
histonas. Una subunidad de la cromatina es el nucleosoma, cuya base estructural
consiste de 146 pares de bases de ADN alrededor de una regin central de ocho
molculas de histonas. La cromatina representa uno de los principales blancos de
la respuesta auto inmune en diversas enfermedades sistmicas. Hay una variedad
de anticuerpos que reaccionan contra diferentes componentes de esta estructura,
los ms conocidos son anti ADN, anti histonas, anti centrmero, anti RNP, anti Sm,
anti SS-A/Ro, anti SS-B/La y anti Scl-70. Los nucleolos, por otro lado, representan
las estructuras ms grandes y ms complejas de ribonucleoprotenas dentro del
ncleo celular, en ellos se encuentran cientos de polipptidos y pequeas
protenas acopladas a ARN, especialmente los de la denominada serie U y el
antgeno Ro, que tambin son blanco de auto anticuerpos. En conjunto a estas
partculas se les llama ribonucleoprotenas nucleares pequeas (snRNPs) y
cuando estn en el citoplasma, ribonucleoprotenas citoplsmicas pequeas
(scRNPs). Algunos antgenos que reaccionan con los anticuerpos anti nucleares
pueden extraerse de las clulas usando solucin salina, a stos se les llama
antgenos extractables del ncleo o ENA y a los anticuerpos correspondientes, anti
ENA. Los principales anti ENA son: anti RNP, anti Sm, anti SS-A/Ro, anti SS-B/La
y anti Scl-70, los cuales se pueden detectar en conjunto o individualmente.
Inmunofluorescencia Indirecta
Ttulos de ANA
Las clulas fusionadas resultantes que crecen se llaman hibridomas; cada hibridoma
produce solo una Ig, derivada de un linfocito B del animal inmunizado. Se estudia la unin
al antgeno de inters de los anticuerpos secretados por muchos clones de hibridomas, y
se selecciona y expande el clon con la especificidad deseada. Los productos de estos
clones individuales son anticuerpos monoclonales, cada uno especfico frente a un solo
eptopo del antgeno usado para inmunizar al animal y para identificar los clones
inmortalizados secretores de anticuerpos.
Una de las limitaciones de los anticuerpos monoclonales para el tratamiento es que estos
anticuerpos son ms fciles de producir inmunizando ratones, pero los pacientes tratados
con anticuerpos murinos pueden producir anticuerpos contra la Ig murina llamados
anticuerpos humanos anti-ratn (HAMA, del ingls human anti-mouse antibody). Estos
anticuerpos anti - Ig eliminan el anticuerpo monoclonal inyectado y tambin pueden
provocar la enfermedad del suero.
Se han usado tcnicas de ingeniera gentica para ampliar la utilidad de los anticuerpos
monoclonales. De un hibridoma pueden aislarse los ADN complementarios (ADNc) que
codifican cadenas polipeptdicas de un anticuerpo monoclonal, y estos genes pueden
manipularse en el laboratorio. Como se o ha expuesto antes, solo porciones pequeas de
la molcula de anticuerpo son responsables de la unin al antgeno; el resto de la
molcula de anticuerpo puede considerarse como un armazn. Esta organizacin
estructural permite insertar segmentos de ADN que codifican las zonas de unin al
antgeno procedentes de un anticuerpo monoclonal de ratn al ADNc que codifica una
protema de mieloma humano, lo que crea un gen hbrido. Cuando se expresa, la protena
hbrida resultante, que conserva la especificidad por el antgeno del monoclonal murino
original, pero con la estructura central de una Ig humana, se denomina anticuerpo
humanizado. Los anticuerpos monoclonales completamente humanizados tambin se
utilizan en la clnica. Se obtienen usando mtodos de exposicin en fagos o en ratones
con linfocitos B que expresan transgenes de Ig humanos. Los anticuerpos humanizados
tienen menos probabilidades de parecer extraos en los seres humanos y de inducir
respuestas contra el anticuerpo. No obstante, por razones desconocidas, una proporcin
de los sujetos que recibe anticuerpos monoclonales completamente humanizados como
tratamiento produce anticuerpos bloqueantes.
La generacin de anticuer-
pos monoclonales.
En este procedimiento se fu-
sionan clulas esplnicas de un ratn
inmunizado con
un antgeno, o mezcla de antgenos conocidos,
con una lnea celular de mieloma que carece
de una
enzima mediante el uso de sustancias
qumicas, co-
mo el polietileno glicol, que pueden facilitar la
fusin
de las membranas plasmticas y la formacin
de
clulas hbridas que conserven muchos
cromosomas
de las parejas de fusin. La pareja de mieloma
usada
es una que no secreta su propia Ig. Estas
clulas
hbridas se colocan despus en un medio de
selec-
cin que permite la supervivencia solo de
hbridos
inmortalizados; estas clulas hbridas se
cultivan
despus como clones celulares y se
comprueba
en ellas la secrecin del anticuerpo de inters.
El
medio de seleccin incluye hipoxantina,
aminopterina
y timidina, y se llama, por tanto, medio HAT.
Hay dos
vas de sntesis de purina en la mayora de las
clulas,
una de novo, que precisa tetrahidrofolato, y
una va
de rescate, que usa la enzima hipoxantina-
guanina
CONCLUSIONES
1. Los anticuerpos antinucleares (ANA) tienen como blanco toda una serie de
macromolculas, incluyendo DNA, RNA y protenas, as como complejos de
protenas y cidos nucleicos; estas protenas se encuentran principalmente
en el ncleo celular, aunque el trmino ANA se aplica a menudo a anticuerpos
que se unen a cidos nucleicos o a complejos protena-cido nucleico en el
citoplasma.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
1. Javier Cabiedes, Carlos A. Nuez lvarez . Antiuerpos Monoclonales.
Laboratorio de Inmunologa, Departamento de Inmunologa y
Reumatologa, Instituto Nacional de Ciencias Mdicas y Nutricin
Salvador Zubirn, Mxico DF, Mxico Disponible en:
www.reumatologiaclinica.org. Acceso: 22 de octubre del 2016
2. Carlos A. Javier-Zepeda. Anticuerpos anti-nucleares. Disponible en:
http://www.bvs.hn/RMH/pdf/2002/pdf/Vol70-4-2002-8.pdf . Acceso: 22 de
octubre del 2016.
3. BRIAN B. ADAMS, DIYA F. MUTASIM. Importancia diagnstica de la
determinacin de los anticuerpos antinucleares. Departamento de
Dermatologa, Facultad de Medicina de la Universidad de Cincinatti,
Cincinatti, Ohio. Disponible en: http://piel-l.org/blog/wp-
content/uploads/2009/01/anticuerpos-antinucleares.pdf . Acceso: 22 de
octubre del 2016