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LDL Liquiform
INDICAO MDICA DO EXAME
Estudos retrospectivos e prospectivos demonstram claramente uma inter-relao curvilinear
entre os nveis do colesterol srico, mais especificamente o colesterol LDL, e a patognese da
arteriosclerose e da Doena Arterial Coronariana (DAC).
PRINCPIO
Na primeira fase da reao, um surfactante especfico presente no Reagente 1 solubiliza os
quilomcrons, as lipoprotenas de alta densidade e as lipoprotenas de muito baixa densidade
(HDL e VLDL). O colesterol solubilizado consumido pela ao da colesterol esterase (CE) e
colesterol oxidase (CO) em uma reao no formadora de cor.
Na segunda fase, um surfactante presente no Reagente 2 solubiliza o colesterol da LDL, que
hidrolisado pela colesterol esterase a colesterol livre e cidos graxos. O colesterol livre
oxidado pela colesterol oxidase a colest-4-en-ona e perxido de hidrognio. Em seguida, ocorre
uma reao de acoplamento entre perxido de hidrognio, 4-aminoantipirina e
disulfobutilmetatoluidina sdica (DSBmT), catalisada pela peroxidase, produzindo uma
quinoneimina que tem mximo de absorbncia em 546 nm.
A intensidade da cor formada diretamente proporcional concentrao de colesterol LDL na
amostra.
AMOSTRA
Preparo do paciente
Jejum de no mnimo 8 horas.
Tipos de amostra
Usar soro ou Plasma (heparina-ltio e EDTA).
Armazenamento e estabilidade da amostra
O analito estvel por 14 horas entre 15 30 C, 5 dias entre 2 8 C e 30 dias a 20 C
negativos.
Volume mnimo
(Definir o volume mnimo a ser encaminhado para anlise)
Volume ideal
(Definir o volume ideal a ser encaminhado para anlise)
Critrios para rejeio da amostra
Fazer referncia ao manual ou POP de colheita, separao e distribuio de material.
PRODUTO UTILIZADO
LDL Liquiform, Catlogo 111-1/40 ANVISA - 10009010136
Labtest Diagnstica
Av. Paulo Ferreira da Costa, 600
Lagoa Santa, MG, 33400-000
Reagente 1 - Reagente lquido pronto para uso. Armazenar entre 2 8 C. No congelar.
Contm tampo pH 6,3; colesterol esterase <1500 U/L; colesterol oxidase <1500 U/L,
peroxidase <1300 U/L, 4-aminoantipirina <0,1%; ascorbato oxidase <3000U/L e surfactante
<1,0%.
Reagente 2 - Reagente lquido pronto para uso. Armazenar entre 2 8 C. No congelar.
Contm tampo pH 6,3; surfactante <1,0% e DSBmT <1,0 mM.
3. Calibrador Reagente liofilizado. Concentrao no rtulo do frasco. Armazenar entre 2 8
C. Aps reconstituio estvel 2 semanas entre 2 8 C. Preparao contendo colesterol
LDL humano e azida sdica 0,1%.
Preparo do Calibrador: Adicionar 1,0 mL de gua qualidade reagente (ver observao no. 2),
ao contedo do frasco do Calibrador. Deixar em repouso durante 5 minutos. Misturar por
inverso suave evitando a formao de espuma. Estvel 2 semanas entre 2 8 C em
recipiente hermeticamente fechado para evitar evaporao do solvente.
Procedimento automatizado
Fazer referncia ao manual ou POP para utilizao do equipamento analtico. Anexar o guia de
aplicao dos reagentes para o sistema automtico.
Precaues e cuidados especiais
1. Para manusear e descartar reagentes e material biolgico, aplicar as normas
estabelecidas de segurana. Fazer referncia ao manual ou POP de segurana.
2. A limpeza e secagem adequadas do material so fatores fundamentais para a
estabilidade dos reagentes e obteno de resultados corretos. Fazer referncia ao
manual ou POP de limpeza e verificao da qualidade da limpeza dos materiais.
3. A gua utilizada no laboratrio deve ter a qualidade adequada a cada aplicao.
Assim, para preparar reagentes e usar nas medies, deve ter resistividade 1
megaohm ou condutividade 1 microsiemens e concentrao de silicatos 0,1 mg/L
(gua tipo II). Para o enxge da vidraria a gua pode ser do tipo III, com
resistividade 0,1 megaohms ou condutividade 10 microsiemens. No enxge final
utilizar gua tipo II. Quando a coluna deionizadora est com sua capacidade saturada
ocorre a produo de gua alcalina com liberao de vrios ons, silicatos e
substncias com grande poder de oxidao ou reduo que deterioram os reagentes
em poucos dias ou mesmo horas, alterando os resultados de modo imprevisvel.
Assim, fundamental estabelecer um programa de controle da qualidade da gua.
Fazer referncia ao manual ou POP de gua reagente.
CLCULOS
Ver Linearidade.
A primeira leitura da absorbncia (A1) deve ser corrigida para o volume final da reao obtendo-
se A1cor, antes de realizar o clculo da concentrao de LDL.
A1cor = A1 x 0,75
Teste (A2 A1cor)
Colesterol LDL (mg/dL) = ------------------------------------ x CC
Calibrador (A2 A1cor)
CC: concentrao do Calibrador
Devido a grande reprodutibilidade que pode ser obtida com a metodologia, o mtodo do fator
pode ser empregado.
CC
FATOR = -------------------------------
Calibrador (A2 - A1cor)
Colesterol LDL (mg/dL) = Teste (A2 -A1cor) x Fator
RESULTADOS
Unidade de medida
mg/dL
Converso de mg/dL para Unidade SI: mmol/L = mg/dL x 0,0259
VALORES DESEJVEIS OU RECOMENDADOS
Os valores a seguir substituem os valores de referncia e foram determinados a partir de dados
epidemiolgicos tratados estatisticamente, que relacionam as concentraes do colesterol com
a prevalncia de doena arterial coronariana (DAC).
Inserir o nome do Procedimento Operacional Padro Pgina 4 de 5
Laboratrio LDL Liquiform POPBIO xxx/xx
Adultos3
Classificao ATP III - Colesterol Total, LDL e HDL (mg/dL)
Colesterol Total
<200 Desejvel
200 239 Limiar elevado
240 Elevado
Colesterol LDL
< 100 timo
100 129 Limiar timo
130 159 Limiar elevado
160 189 Elevado
190 Muito elevado
Colesterol HDL
<40 Baixo
60 Elevado (desejvel)
Crianas e Adolescentes4
Colesterol Total
Idade: 2 a 19 anos
<170 mg/dL Desejvel
170 a 199 mg/dL Limtrofe
200 mg/dL Elevado
Colesterol LDL
Idade: 2 a 19 anos
<110 mg/dL Desejvel
110 a 129 mg/dL Limtrofe
130 mg/dL Elevado
Colesterol HDL
Idade: <10 anos
40 mg/dL Desejvel
Idade: 10 a 19 anos
35 mg/dL Desejvel
LIMITAES DO PROCEDIMENTO
Linearidade
A reao linear entre 6,6 e 992 mg/dL. Para concentraes superiores a 992 mg/dL, diluir a amostra
com NaCl 150 mmol/L (0,85%), realizar nova determinao e multiplicar o resultado obtido pelo fator de
diluio. Diluir a amostra para obter um resultado entre 100 e 200 mg/dL. Sugerimos a verificao da
linearidade metodolgica e fotomtrica, no mnimo semestralmente, utilizando amostras com valores at
992 mg/dL. Indicar o procedimento de diluio utilizado no laboratrio.
Interferncias
1- Concentraes de bilirrubina total at 20 mg/dL, hemoglobina at 500 mg/dL, cido ascrbico at 50
mg/dL, gamaglobulinas at 5000 mg/dL e triglicrides at 1293 mg/dL no interferem significativamente
na reao. Amostras com concentrao de triglicrides >1293 mg/dL no devem ser diludas.
Amostras com bilirrubina, hemoglobina, cido ascrbico e gamaglobulina em concentraes maiores
que as acima referidas devem ser diludas em NaCl 150 mmol/L (0,85%) antes de se realizar os ensaios.
Multiplicar o resultado obtido pelo fator de diluio.
2- Para uma reviso das fontes fisiopatolgicas e medicamentosas de interferncia nos resultados e na
metodologia sugere-se consultar: www.fxol.org/aaccweb/
SIGNIFICADO CLNICO
A LDL um produto do catabolismo da VLDL. A hidrlise dos triglicrides da VLDL pela lipoprotena
lipase (LPL) leva formao de uma lipoprotena de vida curta, denominada lipoprotena de densidade
intermediria (IDL). Esta , em seguida, catabolizada pela lipase heptica, formando a partcula de LDL,
rica em colesterol.
O catabolismo da LDL ocorre no fgado e nos tecidos perifricos, atravs principalmente da interao
desta lipoprotena com receptores de alta afinidade presentes na membrana celular. Aps a ligao da
LDL com o receptor na superfcie celular, a membrana da clula se invagina, interiorizando a
Inserir o nome do Procedimento Operacional Padro Pgina 5 de 5
Laboratrio LDL Liquiform POPBIO xxx/xx