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REVISION ACTUALIZADA SOBRE METODOS DE IDENTIFICACION Y

DIAGNOSTICO DE

LEPTOSPIROSIS EN BOVINOS

LINA MARIA JIMENEZ ARISTIZABAL

PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA


FACULTAD DE CIENCIAS
MICROBIOLOGIA AGRICOLA Y VETERINARIA
BOGOT, D.C.
AGOSTO 11 DE 2006
REVISION ACTUALIZADA SOBRE METODOS DE IDENTIFICACION Y

DIAGNOSTICO DE

LEPTOSPIROSIS EN BOVINOS

LINA MARIA JIMENEZ ARISTIZABAL

TRABAJO DE GRADO
Presentado como requisito parcial
Para obtar al titulo de

MICROBIOLOGA AGRICOLA Y VETERINARIA

PONTIFICIA UNIVERSIDAD JAVERIANA


FACULTAD DE CIENCIAS
MICROBIOLOGIA AGRICOLA Y VETERINARIA
BOGOT, D.C.
AGOSTO 11 DE 2006
NOTA DE ADVERTENCIA

Articulo 23 de la Resolucin N 13 de Julio de 1946

La Universidad no se hace responsable por los conceptos emitidos por sus


alumnos en sus trabajos de tesis. Solo velar por que no se publique nada
contrario al dogma y a la moral catlica y por que las tesis no contengan ataques
personales contra persona alguna, antes bien se vea en ellas el anhelo de
buscar la verdad y la justicia.
REVISION ACTUALIZADA SOBRE METODOS DE IDENTIFICACION Y
DIAGNOSTICO DE
LEPTOSPIROSIS EN BOVINOS

LINA MARIA JIMENEZ ARISTIZABAL

APROBADO

________________________
Gustavo Arbelaez M.V.Z., MSc, PhD.
Director

________________________ ________________________
Orlando Torres M.V.Z., MSc. Javier Rivas M.V.Z.
Jurado Jurado
REVISION ACTUALIZADA SOBRE METODOS DE IDENTIFICACION Y
DIAGNOSTICO DE
LEPTOSPIROSIS EN BOVINOS

LINA MARIA JIMENEZ ARISTIZABAL

APROBADO

________________________ ________________________
ngela Umaa Muoz M.Phil. David Gmez Mndez MSc.
Decana Acadmica Facultad de Director de carrera Microbiologa
Ciencias Agrcola y Veterinaria
DEDICATORIA

A mis padres por su apoyo e inters permanente. A ellos dedique este tiempo,
que con su paciencia, orientacin y empeo me encaminaron a terminar con una
de las etapas de la vida y me ayudaron a asimilar el compromiso acadmico,
personal, y social.
AGRADECIMIENTOS

Quiero hacer un reconocimiento al Dr. GUSTAVO ARBELAEZ, M.V.Z, MSc,


PhD, profesor de la Pontificia Universidad Javeriana, por su buena disposicin y
tiempo, adems de su valiosa orientacin que, desde su especialidad enriqueci
mi trabajo.

Finalmente, un especial agradecimiento al Dr. DAVID GOMEZ MENDEZ, MSc, y


Director de Carrera de microbiologa agrcola y veterinaria, ya que con su ayuda
y colaboracin se hizo posible la realizacin de este trabajo.

Agosto 11 de 2006

vii
TABLA DE CONTENIDO

Pginas
1. INTRODUCCIN...12
2. JUSTIFICACION14
3. OBJETIVOS...16
3.1. Objetivo general...16
3.2. Objetivo especifico...16
4. MARCO TEORICO17
4.1. HISTORIA.17
4.2. ETIOLOGIA Y MORFOLOGIA..22
4.2.1. Estructura..24
4.2.2. Crecimiento...26
4.3. TAXONOMIA Y CLASIFICACION27
4.3.1. Clasificacin serolgica...28
4.3.2. Clasificacin opcional..31
4.3.3. Especies31
4.3.3.1. Bovinos..31
4.3.3.2. Caninos y felinos..33
4.3.3.3. Porcinos.33
4.3.3.4. Equinos..33
4.3.3.5. Ovinos y Caprinos34
4.3.3.6. Hombre..34
4.4. EPIDEMIOLOGIA34
4.4.1. Transmisin..37
4.4.2. Hospedero de mantenimiento39
4.4.3. Hospederos accidentales42
4.4.4. Reservorio.43
4.5. PATOGENESIS46
4.6. RESPUESTA INMUNE53
4.7. ASPECTOS CLINICOS...56
4.7.1. Manifestaciones clnicas..58
4.7.1.1. Leptospirosis anicterica.58
4.7.1.2. Leptospirosis ictrica (Sndrome de Weil).60
4.7.2. Presentacin clnica en las diferentes especies animales.63

viii
4.7.2.1. Perros y gatos63
4.7.2.2. Equinos...64
4.7.2.3. Ovinos y Caprinos.65
4.7.2.4. Porcinos..65
4.7.2.5. Bovinos66
4.7.3. Sndrome pulmonar..68
4.7.4. Manifestaciones no comunes.68
4.7.5. Lesiones anatomopatolgicas.68
4.8. DIAGNOSTICO.70
4.8.1. DIAGNOSTICO EPIDEMIOLOGICO..70
4.8.2. DIAGNOSTICO CLINICO.71
4.8.3. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO.71
4.8.3.1. Tcnicas indirectas73
4.8.3.1.1. MAT (Tcnica de aglutinacin microscpica).74
4.8.3.1.2. Prueba de aglutinacin microscpica con antigeno muerto
(MSAT).............................................................................................................79
4.8.3.1.3. Fijacin del complemento (FC).79
4.8.3.1.4. ELISA.80
4.8.3.1.5. Aglutinacin macroscpica.81
4.8.3.1.6. Aglutinacin en microcpsula81
4.8.3.1.7. Hemoaglutinacin indirecta (HA)...81
4.8.3.2. Tcnicas directas.82
4.8.3.2.1. Observacin en microscopio de campo oscuro82
4.8.3.2.2. Tincin Argnica82
4.8.3.2.3. Tcnicas de tincin inmunohistoquimica..82
4.8.3.2.3.1. Inmunofluoresencia83
4.8.3.2.3.2. Inmunoperoxidasa.83
4.8.3.2.4. Tcnicas de deteccin y estudio de cidos nucleicos.83
4.8.3.2.5. Aislamiento..84
4.8.4. DIAGNOSTICO DIFERENCIAL..85
4.9. CONTROL Y TRATAMIENTO.87
4.9.1. Control.87
4.9.1.1. Control inmune87
4.9.1.2. Control higinico- sanitario90
4.10. TRATAMIENTO92

ix
4.10.1. En bovinos92
4.10.2. En humanos.93
5. DISCUSION.95
6. CONCLUSIONES98
7. RECOMENDACIONES.100
8. REFERENCIAS ..101

x
Resumen

En el presente trabajo se dar al lector una recopilacin y anlisis de los


diferentes mtodos de diagnostico existentes para la identificacin especifica de
Leptospira interrogans serovar hardjo causante de abortos en bovinos. Existen
secuelas en vacas preadas en las cuales la infeccin fetal consecuente resulta
en aborto, nacimientos prematuros y de terneros enfermos. La Leptospira es
tambin considerada una enfermedad de tipo ocupacional conocida con el
nombre de enfermedad de Weils. La bacteria puede ingresar al organismo a
travs de la piel o de membranas mucosas nasal o bucal, por el contacto con
deyecciones de ratas contaminadas con la bacteria. Despus de un perodo de
incubacin de das a semanas los huspedes infectados desarrollan la
enfermedad. La prevalencia serolgica de esta enfermedad se ha determinado
mundialmente con base en la prueba de microaglutinacin, por su importancia
socio-econmica y sanitaria, principalmente, por las prdidas econmicas de
carcter reproductivo y productivo en la ganadera.

Lo expuesto anteriormente permite concluir que la leptospirosis bovina es una de


las enfermedades con efecto en la reproduccin, causante de importantes
prdidas econmicas en las explotaciones pecuarias, como es el caso de
abortos, mortinatos y agalactia; y es, adems, una zoonosis capaz de producir la
muerte de animales y hombres infectados.

Abstract

In the present work a will be given reader a collection and analysis of the different
methods of diagnosis existing for the identification specifies of Leptospira
interrogans serovar hardjo responsible of abortions in bovine. Consequences in
pregnant cows exist in which the consequent fetal infection results in abortion,
premature births and of sick calves. The Leptospira is also considered an illness
of occupational type acquaintance with the name of Weil's disease. The
bacterium can enter to the organism through the skin or of mucous membranes
nasally or mouth, by the contact with ejections of rats contaminated with the
bacterium. After a period of incubation during the day to weeks them host
infected they develop the illness. The prevalence serologic of this illness has
been determined worldwide based on the test of microaglutinacin, by its sanitary
and economic importance since situates mainly, in the economic losses of
productive and reproductive character in the stockbreeding.

The exposed thing previously permits to conclude that the leptospirosis is one of
the disease with effect in the reproduction, cause of important economic losses in
the livestock explotations, as is the case of abortions, death calves and decrease
in the milkmaid production; and is, besides, a zoonotic capable to produce the
death of animals and infected men.
1. INTRODUCCION

La leptospirosis es una enfermedad producida por microorganismos


del gnero Leptospira de la especie interrogans. En Colombia el
serovar de mayor importancia para los bovinos es el hardjo; y otros
de menor importancia son el icterohaemorrhagie, grippotyphosa y
canicola. Los signos clnicos caractersticos que presenta esta
enfermedad cursan con septicemia severa con evidencias de
endotoxemia, la mortalidad puede ser alta y se necesita un largo
perodo de recuperacin; Igualmente existen secuelas en vacas
preadas en las cuales la infeccin fetal consecuente resulta en
aborto, nacimientos prematuros y de terneros enfermos; Tambin se
han encontrado altas tasas de infertilidad y bajas tasas de
concepcin despus del parto asociadas a infecciones con
Leptospira interrogans serovar hardjo.

La prevalencia serolgica de esta bacteria se ha determinado


mundialmente con base en la prueba de microaglutinacin; Se han
identificado dos grandes genotipos de L. hardjo en bovinos:
hardjobovis y hardjoprajitno; El hardjobovis aparece como la mejor
adaptada y ha sido identificada en muchos pases; mientras que
hardjoprajitno ha sido reportada nicamente en el reino Unido,
Nigeria, India, Malasya, Brasil, Mxico y Estados Unidos. Las tasas
de incidencias publicadas para esta enfermedad en el mundo varan
notablemente segn la zona y pueden llegar a alcanzar valores
elevados en tiempos de inundaciones y en los pases tropicales y
subtropicales; Adems, presenta una importancia socio-econmica y
sanitaria, que radica principalmente en las prdidas econmicas de
carcter reproductivo y productivo en la ganadera, ya que
constituye una de las enfermedades zoonoticas de mayor
importancia a nivel mundial; Igualmente se debe tener en cuenta los

12
gastos originados que se presentan por causa de este
microorganismo como son el cuidado mdico veterinario, la
vigilancia y control de los lugares de trabajo, ropas especiales de
proteccin, costos de vacunacin y seguros mdicos para el
personal en riesgo.

Por lo anterior, en el presente trabajo se dar al lector una


informacin actualizada sobre los diferentes mtodos de diagnostico
y control de la leptospirosis bovina, ya que se trata de una bacteria
que presenta mltiples serovares que hacen difcil su identificacin.

13
2. JUSTIFICACION

La Leptospirosis es considerada la epizoodemia ms difundida e


importante en el mundo, por las repercusiones econmicas en las
explotaciones pecuarias reflejadas en fallos reproductivos, abortos,
mortinatos, nacimiento de animales dbiles, disminucin de la
fertilidad y a perdidas econmicas asociadas al Sndrome de cada
de la leche o agalactia producida por este microorganismo.

De igual forma la Leptospirosis es una zoonosis, y es considerada


una infeccin accidental, cuyas manifestaciones clnicas mas
importantes son: fiebre, mialgia, procesos hemorrgicos, ictericia,
nefritis, hemoglobinuria, anorexia, nuseas, cefalea, etc. Los pases
tropicales y subtropicales son los ms afectados dentro de las
condiciones climticas como: precipitacin, temperatura, humedad
relativa y pH; La estructura y la composicin del suelo son los
factores ms favorables para su presentacin, pues las Leptospiras
permanecen viables en el agua favoreciendo la infeccin en el
hombre; Siendo la principal fuente de transmisin el contacto con la
orina y heces fecales de roedores, caninos, porcinos y bovinos tanto
durante la enfermedad activa, como en el periodo de portador
sintomtico.

Es imprescindible tomar medidas efectivas para el control de esta


enfermedad, por su fcil transmisin entre las especies, e identificar
oportunamente los animales afectados, as como el serogrupo y/o
serovar actuante, puesto que la presencia de un serovar u otro
depende principalmente de la existencia de su hospedero de
mantenimiento especfico y segn sea el hospedador, las medidas
de control sern diferentes; El control y diagnostico, as como la
patognesis, distribucin y clasificacin de ste microorganismo,

14
sern presentadas en este documento, que pretende recopilar la
informacin mas actualizada y detallada que exista hasta el
momento y darla a conocer al sector ganadero.

15
3. OBJETIVOS

GENERAL
Recopilar y analizar informacin bibliografca existente para la
identificacin de Leptospira interrogans serovar hardjo causante de
abortos en bovinos.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Reunir y organizar informacin histrica de Leptospira sp.,


basndose en su clasificacin taxonmica.
Realizar una revisin exhaustiva sobre aspectos bsicos de
patognesis y transmisin de la leptospirosis en bovinos.
Describir cada uno de los mtodos de diagnstico existentes para
la identificacin de los distintos serovares de leptospiras que
atacan a los bovinos.
Analizar cual de los mtodos diagnstico es el mas especifico
para la identificacin de Leptospira interrogans serovar hardjo.

16
4. MARCO TEORICO

4.1 HISTORIA

Probablemente Lacereaux hizo en 1802, la primera descripcin


clnica de leptospirosis; En esta fecha solo se supona el origen
espiroquetal y su relacin con la fiebre; demostrado por Obermeier
en 1868-1872, y probado con un inoculo humano por Munich en
1874. En 1883 Landarouzi describi un caso tpico con ictericia y
hemorragias denominndolo tifus heptico. La leptospirosis es una
enfermedad conocida desde 1886, ao en que el mdico Alemn
Adolf Weil la describi y denomin Ictericia Hemorrgica, en
Heidelberg, entre trabajadores agrcolas alemanes. Luego,
Goldschimidt en 1887 propuso el nombre de Enfermedad de Weil.
(Herrer, 1958; Acha & Szyfres, 1986 ; Weil, 1886; Faine, 1994;
Ayala et al., 1998; Laguna, 2000; Dutta & Christopher, 2005;
Sandow & Ramrez, 2005).

Exista confusin de esta enfermedad con otras como el dengue, la


fiebre amarilla, hepatitis, malaria, influenza, y otras enfermedades
causantes de fiebre aguda que persistan por esos das. (Herrer,
1958; Landouzy, 1983; Acha & Szyfres, 1986; Mandell, et al.,
2000). Los primeros casos de Leptospirosis en humanos sin conocer
el agente, los describieron, Weiss en 1881 y Weil en 1886. Es en
1915 que los japoneses Inada e Ido encuentran una espiroqueta en
el hgado de cobayos infectados con sangre de mineros enfermos
febriles; en el cobayo aparecieron fenmenos hemorrgicos y es por
esta razn que los investigadores japoneses llamaron al agente
encontrado Spirochaeta icterohaemorrhagiae. El mismo equipo
japons encontr la relacin de este microorganismo con las ratas

17
de desage y al estudiarlas encontraron que el 40% de esas ratas
eran portadoras de la Spirochaeta icterohaemorrhagiae (Van der
Hoeden, 1958; Acha & Szyfres, 1986; Laguna, 2000), luego
renombrado Leptospira en 1917. Tambin en este ao, Noguchi
aisl esta bacteria, pero en ratas de Nueva York, EE.UU. En 1917,
se describe la infeccin en ratas gris (Rattus noruegicus) por el
mismo agente y se postul su posible papel como transmisora de
esta enfermedad al hombre. La confirmacin de aparicin de la
leptospirosis en toda la frontera occidental europea fue obtenida
rpidamente despus de la publicacin de los trabajos de Inada. Las
primeras informaciones sobre la enfermedad de leptospira en los
animales procedan de la leptospirosis humana, datan de 1852, ao
en el que Hofer describi una enfermedad de los perros antes
desconocida que llam Tyfus Seu Febris Nervosa Canum; Keff en
1898 cambi el nombre de esta enfermedad por la enfermedad de
los perros de Stuttgard; Sin embargo, la etiologa de esta
enfermedad fue aclarada en 1922 por el Checoslovaco Lukes, el
cual demostr que el agente era una espiroqueta.

Pero en realidad, la primera descripcin de las Leptospiras como


agentes productores de enfermedad en los animales se realiz en
1933, cuando Klarenbeck y Schuffner demostraron que la L.
canicola era el agente etiolgico de la enfermedad de Stuttgart en
los perros. Michin y Azinov en 1935 fueron los primeros en notificar
la leptospirosis en los bovinos en la antigua USSR, denominndola
como hemoglubinuria infecciosa aguda, y del agente aislado L.
icterohaemorrhagiae bovina. Estudios posteriores apuntaron a L.
grippotyphosa como responsable de aquella enfermedad;
igualmente Freund en 1941 y Jungherr en 1944 notificaron esta
misma especie tanto en Israel como en los Estados Unidos de

18
Amrica respectivamente, quedando este ltimo como la primera
notificacin en el continente Americano. Mientras el primer reporte
en Gran Bretaa fue a cargo de Field y Wellers, 1950, Smith y Perry,
en 1952 divulgaron los primeros casos en Canad.
Los primeros diagnsticos hallados en el continente Africano datan
casi a mediados del siglo XX por Donatien y Gayot en 1950 en
Argelia; Cordier en 1952 en Tnez y Farina y Sobrero en 1960 en
Somalia etc.
La primera descripcin de Leptospirosis en equinos fue en la antigua
Unin Sovitica por Lubaschenko y Nowikowa 1947 y desde
entonces en Australia por Willington y Ferris en 1953; en
Yugoslavia, Zakarija en 1953; en Hungra, Kasza y Kemenes en
1955; en los EE.UU. Roberts Cork y Robinson en 1955 y en Francia,
Rossi y Kolochine Erber en 1955. Pero anteriormente, haba
notificacin sobre la primera observacin de Leptospira en el rin
de equino ya en 1934.

Por otro lado, en Centro Amrica, el conocimiento de la leptospirosis


humana en Cuba remonta sobre la existencia por los reportes en
casos humanos y as lo afirman los trabajos realizados por
Francisco Navarro y Valds (La fiebre biliosa grave de los pases
clidos no es la fiebre amarrilla, 1868) y de Emilio Martnez y
Martnez (Curabiladad del ictero grave primitivo, 1888), donde se
precisan ya casi todas las caractersticas epidemiolgicas de la
leptospirosis. Guiteras y col., en 1920, notificaron la primera
comunicacin de los casos presuntivos atribuibles a Leptospirosis
ocurrido en 1910 en trabajadores que construan el alcantarillado de
La Habana; pero estos mismos autores en 1921 diagnosticaron los
primeros casos de leptospiras en Mridos (ratas) capturados en
mataderos de La Habana.

19
Transcurren algunos aos en Cuba sin que aparezcan
investigaciones y es slo cuando Prez en 1943 logr la
comprobacin de la enfermedad en un 28% de caninos a travs de
una encuesta serolgica. Luego la primera confirmacin en humano
por el mtodo serolgico y microbiolgico fue presentada por
Mrquez, Soler y Curbelo en 1945. Ramrez en 1971, hace la
primera notificacin de la existencia de anticuerpos especficos de
valor diagnstico de Leptospira bovina en Cuba. (Sandow &
Ramrez, 2005).
En los aos 1966- 67, Prez Carril y Sokolov estudiaron un brote de
esta entidad en la regin norte de la antigua provincia de Oriente en
Cuba y confirmaron el diagnstico mediante la observacin por
microscopa directa en campo oscuro y cultivo en el medio Werwor-
Wolff, modificado por Tarasov.
A partir de 1990 se report un aumento de la incidencia de la
leptospirosis en Cuba segn datos del Viceministerio de Higiene y
Epidemiologa del Ministerio de Salud Pblica La tendencia de la
enfermedad es ascendente y acentuada por las condiciones
actuales del perodo especial que afronta el pas, dada la existencia
de parcelas de autoconsumo, cra de animales, mayor asistencia de
personal transitorio a la agricultura, etc.. En el ao 1994 hubo 2.829
casos confirmados de leptospirosis a nivel nacional, por esta razn
aument la letalidad en Ciudad de La Habana y provincia La
Habana con respecto al resto del pas en el ao 1993. (Ayala, et al.,
1998).

En Mxico los primeros casos de leptospirosis fueron reportados en


Yucatn por Noguchi y Klieger en 1920. A partir de esa fecha fueron
apareciendo reportes aislados, en su mayora seroepidemiolgicos,
como el que reporta Coln Ortiz y col., en estudios serolgicos

20
realizados en Yucatn, Valle de Mxico y el D.F., en donde se
encontr un promedio de 14.4% de positividad en 9,875 sueros
estudiados entre 1961 a 1995. (Vado, et al., 2002).

En Sur Amrica, En un hospital de Lima en 1917, Arce y Ribeyro


describieron el primer caso de leptospirosis en el Per. En los aos
siguientes se aislaron y diagnosticaron varios casos en humanos;
Durante una epidemia de fiebre amarilla se consigui aislar cepas
de leptospiras que en ese momento fueron denominadas L.
icteroides por que eran diferentes a la L. icterohaemorrhagiae.

En Per, el Instituto Nacional de Salud Pblica inici los estudios


epidemiolgicos en animales. Entre 1955 y 1957 Herrer estudi
perros y gatos infectados por leptospiras y encontr que el 46.4% de
los 444 perros estudiados de Lima y Callao presentaban anticuerpos
con ttulos significativos. Adems en 26 de los 435 perros (6,4%) en
los que se consigui hacer cultivo de macerado de rin, se aisl el
microorganismo, encontrndose L. canicola en 84.5%, seguida de L.
icterohemorragiae con 11.6%; asimismo el 1,4% de los perros
examinados presentaron resultados positivos al hacer anlisis en
campo oscuro. (Herrer, 1958; Laguna, 2000).

La serovariedad hardjo fue aislada por primera vez en 1938 en un


trabajador de una plantacin de caucho de Sumatra cuyo nombre
era Hardjoprajitno. Inicialmente se incluy en el serogrupo
Hebdomadis pero, al dividirse ste en dos serogrupos diferentes, se
uni al serogrupo Sejroe. En dcadas posteriores se pudo
comprobar que esta misma serovariedad, era endmica en las
poblaciones bovinas de muchas reas del mundo. Asimismo,
mediante anlisis con endonucleasas de restriccin se apreciaron

21
diferencias entre las especies aisladas de la serovariedad hardjo,
sugirindose su diferenciacin en dos genotipos: Hardjobovis y
Hardjoprajitno. Todas las cepas aisladas de humanos, ovinos y
ciervos en Nueva Zelanda y de bovinos en Norteamrica
presentaban unos patrones de ADN similares entre s pero que se
diferenciaban de la cepa tipo original (Hardjoprajitno). Estas cepas
han sido designadas como genotipo Hardjobovis46, diferencindose
tres subtipos: A, B y C. La reciente clasificacin gentica refleja
diferencias, ya que el genotipo Hardjobovis se asocia a la
genoespecie L. borgpetersenii, mientras que el genotipo
Hardjoprajitno se asocia a la genoespecie L. interrogans (Acha &
Szyfres, 1986; Faine, 1994; Ayala et al., 1998).

4.2 ETIOLOGA Y MORFOLOGIA

El termino Leptospira procede del griego lepto (fino) y spira


(espiral). Las Leptospiras son espiroquetas aerobias obligadas,
flexibles, muy finas, helicoidalmente enrolladas, (Fuentes, et al.,
1999) y de gran movilidad, de 5 a 20m de largo por 0,1 a 0,5m de
ancho, (Nelson & Horsburgh, 2005), ambos extremos semicirculares
de forma de gancho, aunque a veces uno de los dos extremos est
doblado y el otro se mantiene recto o ambos rectos. Poseen un
movimiento activo de rotacin, ondulatorio y de translacin que se
produce en ausencia de flagelos externos y depende de dos flagelos
periplasmticos (filamento axial), que estn insertados en ambos
extremos de la bacteria (Blaha, 1995). Son agentes tan finos que
pueden pasar filtros que retienen otras bacterias (0,1- 0,45m). Las
Leptospiras solo pueden ser visibles por microscopa de campo
oscuro o de contraste de fase, pero no por microscopa de luz de
campo brillante (Mandell, et al., 2000; Acha & Szyfres, 2001). No se

22
tien con facilidad con los colorantes de anilina aunque son
gramnegativos; pueden impregnarse de plata (Fontana
Tribondeau, Levatidi, Rojo Congo, Tinta China), por fluorescena,
peroxidasa conjugada ms reactivos coloreados o por hibridacin
del ADN con reactivos coloreados biotinaavidit (DAB).

En medio de cultivo lquido, el movimiento de las Leptospiras es de


rotacin rpida sobre su eje longitudinal. En medios semislidos, el
movimiento es en serpentina, y en medio slidos reptan por la
superficie. Al microscopio electrnico se observa que estn
constituidas por: una membrana externa o envoltura (lpidos,
protenas, LPS) (Mandell, et al., 2000), esta envoltura externa es de
gran importancia antignica y rodea la pared celular de
peptidoglucano, poseen dos flagelos periplasmticos (filamentos
axiales) situados entre la membrana externa y la pared celular, fijos
en ambos extremos de la bacteria, cuyos extremos libres se
extienden hacia la parte media y no se superponen, un cilindro
protoplasmtico de forma helicoidal con el contenido celular:
material nuclear, ribosomas, mesosomas y cuerpos de inclusin
celular. Los cuerpos bsales flagelares semejan los de las bacterias
gramnegativas, con la excepcin de L. illini, una especie de
ubicacin incierta, los cuales son similares a los de las bacterias
grampositivas. La denominacin de esta especie est basada en
que el cuerpo basal del flagelo periplasmtico es similar a los de las
bacterias grampositivas ya que poseen tbulos citoplasmticos,
presentes en Treponema pero no en Borrelia. (Sandow & Ramrez,
2005).

23
4.2.1 Estructura

La membrana celular exterior esta compuesta por protenas, lpidos


y lipopolisacaridos (LPS); gran variedad de antgenos estn
asociados con los LPS. OmpL1 es una porina que esta expuesta en
la superficie y se puede observar por microscopia,
inmunoelectroforesis e inmunoprecipitacin; estas porinas son de
bacterias gramnegativas, La OmpL1 es un olgomero y tiene una
migracin electroforetica en gel de acrilamida. La OmpL1 ha sido
caracterizada, incluyendo a LipL21, LipL32, LipL36 y LipL41,
designadas de acuerdo a su aparente peso molecular, el cual es
determinado por electroforesis. (Haake, et al., 2004); igualmente
como se hace con una protena de descarga de calor (Hsp58)
(Quaresma, et al., 2005). La LipL21 y LipL41 aparecen expuestas en
la superficie de membrana, mientras que LipL36 tiene una
restriccin al estar en el interior de la membrana exterior. La OmpL1
y LipL41 exhiben un sinergismo inmunoprotector segn el modelo
de leptospirosis en hmster. La LipL32 es la principal protena de
membrana leptospiral (Dey, et al., 2004; Haake, et al., 2004) y ha
tenido un efecto inmunoprotector cuando los hmsters son
inmunizados con LipL32 incorporados con adenovirus. LipL32,
LipL41 y OmpL1 son los antgenos ms importantes en la respuesta
inmune humoral de leptospirosis. La expresin de dos protenas Lig
(Inmunoglobulinas leptospirales), LigA y LigB estn asociadas con
virulencia. (Haake, et al., 2004).

Debajo de esta membrana, separado por el espacio periplsmico se


encuentra la pared celular. Bajas concentraciones de etanol,
detergentes o proteasas como la tripsina, remueven rpidamente la
membrana exterior, hasta desenrollar gradualmente la hlice, lo cual

24
revela un tubo plano y vaci, que retiene varios antigenos y contiene
cido murmico; Su funcin es mantener la estructura y la forma.
Las leptospiras tienen dos flagelos, uno aparece al final de la
insercin a travs del peptidoglicano; Cuando la clula se divide, se
forma un nuevo flagelo.
Los flagelos son similares a la estructura general de un flagelo de
otras bacterias gramnegativas, comprendiendo un gancho proximal
terminal y un disco rotor, intercalado con capas de la pared celular.
Las reacciones antignicas con inmunoglobulinas producidas por
infecciones animales pueden ser identificadas en la superficie
flagelar. El antgeno flagelar especifico puede ser identificado
utilizando calor, una propiedad utilizada para la identificacin de
antigenos flagelares en presencia de LPS. (Faine, 1994).

LipL21
LipL41
OmpL1

LPS

Membrana
externa
Flagelo periplsmico
LipL32 LipL45 LipL48
Espacio
LipL36 periplsmico
PBPs
Peptidoglicano
Membrana
interna
Figura 1. Estructura de la membrana celular leptospiral. Imagen del simposio de
leptospirosis. Asociacin mexicana de mdicos veterinarios especialistas en
bovinos, A.C.

25
4.2.2 Crecimiento

Estos agentes poseen actividad oxidasa, catalasa, peroxidasa y


estreasa; en condiciones de laboratorio crecen en medios de
cultivos simples a un pH de 7,2 7,6 y a una temperatura de 15 -
18C, utilizan los cidos grasos de cadena larga (Tween) como
fuente de carbono y las sales de amonio como fuente de
aminocidos metabolizados por beta oxidacin. Tambin estos
medios son enriquecidos con Vit.B2 y B12, las cuales estimulan el
crecimiento. Adems, necesitan fsforo y algunos iones metlicos
durante un perodo de incubacin entre 4-14 das, aunque para
determinadas cepas o serovares puede ser superior a cuatro
semanas. El piruvato puede estimular el inicio del crecimiento de
algunas cepas.
Los medios de cultivo pueden presentarse de tres formas: lquido,
semislido y slido. Los medios slidos (Cox) son en general de uso
menos frecuente que los otros dos. La mayora de medios lquidos
(Korrthoff, Stuart, Ellinghausen y McCullough, Johnson y Harris-
EMJH) son habitualmente utilizados para el mantenimiento de cepas
usadas en pruebas serolgicas. El medio semislido (Fletcher)
resulta adecuado para el mantenimiento de cepas de referencia.
Tanto unos como otros, son utilizados para el aislamiento a partir de
muestras sospechosas. Basndose en sus componentes, los
medios se pueden clasificar en tres grandes grupos: con suero de
conejo, con Tween y seroalbumina bovina Ellinghausen,
McCulleugh, Johnson y Harris (EMJH) y sin protenas (Shemberg).
Los medios clsicos fueron modificados por Johnson y Harris en
1976 (EMJH), son validos para el cultivo de los serovares menos
exigentes como icterohaemoarrhaegiae y pomona, pero no son
tiles para los ms exigentes como hardjo en bovino. Para el

26
aislamiento de este serovar, se han descrito medios ms apropiados
como el EMJH suplementado con 1% se suero de conejo o el medio
con Tween 80/40. (Sandow & Ramrez, 2005).

4.3 TAXONOMIA Y CLASIFICACION

Las Leptospiras pertenecen a la divisin Procariontes, clase


Schizomicete, familia Leptospiraceae, segunda familia del orden
Spirochaetales. (Veloso, et al., 2000). En la edicin del Bergeys
Manual of Systematic Bacteriology 1984, se reconoce como nico
gnero dentro de la familia Leptospireceae al gnero Leptospira;
dentro del cual se incluyen tres especies: Leptospira interrogans,
Leptospira biflexa y Leptospira illini, esta ltima considerada de
estado taxonmica incierta aislada de un buey en Illione, EE.UU.
(Johnson y Faine, 1984). En la ltima edicin del Bergeys Manual
of Determinative Bacteriology 1994, ya se recoge como gnero
independiente el Leptonema, cuya especie y tipo seria Leptonema
illini. De esta forma, la familia Leptospireceae est formada por dos
gneros, Leptospira y Leptonema. (Sandow & Ramrez, 2005).
Anteriormente exista otro gnero en esta familia, Turneria, con su
nica especie, parva, ahora denominada Leptospira parva. (Mandell,
et al., 2000). En los ltimos aos y gracias a la utilizacin de nuevas
herramientas y mtodos de clasificacin, se han reconocido varias
especies del gnero Leptospira (Tabla 1).

27
Tabla 1. Especies de leptospira

Patgenas Saprofitas
L. interrogans L. biflexa
L. borgpetersenii L. wolbachii
L. inadai L. parva
L. santarosai
L. noguchii
L. alexanderi
L. kirschneri
L. meyeri
L. fainei
L. Weilii

Fue descrita recientemente, pero su capacidad patognica, no


est clara todava.
Sus estados patognicos no estn claros o es cuestionable.
Ms de 250 serovariantes agrupadas en 25 grupos.
63 serovariantes agrpados en 38 serogrupos.

4.3.1 Clasificacin serolgica

Antes del 1987, el gnero Leptospira fue dividido en dos especies,


L. interrogans, que incluye todas las Leptospiras patgenas y/o de
vida parasitaria, y L. biflexa, especie en la que engloban todas las
saprfitas aisladas del medio ambiente. Existen 250 serovares y 23
serogrupos de L. interrogans (Veloso, et al., 2000; Dutta &
Christopher, 2005), y mas de 60 serovares de L. biflexa. (Perry, et
al., 2000; Bolin, 2003; Yitzhaki, et al., 2004). A pesar de que esta
denominacin es la que ha estado utilizando durante varios aos,
fue admitida oficialmente en 1986, cuando L. interrogans fue
diferenciada de L. biflexa, este ltimo creci a 13C en presencia de
225ug/mL de 8-azoguanina, siendo L. interrogans negativa a ambas
propiedades (Tabla 2). (Sandow & Ramrez, 2005). La L. interrogans

28
es parsita en el hombre y los animales, mientras L. biflexa, es
saprofita, comnmente encontrada en el agua y el suelo; estas
pueden ser aisladas de ros y lagos. (Naigowit, et al., 2000; Trueba,
et al., 2004).

Tabla 2: Caractersticas diferenciales entre las especies de


Leptospira
Leptospira Leptospira Leptospira
interrogans illini* biflexa
Patogenecidad. Si No No
Crecimiento a 13C. No Si Si
Inhibicin del crecimiento por
8-azoguanina (225ug/ml). Si No No
Conversin de las clulas a
formas esfricas por NaCl 1M. Si No No
Actividad lipasa ? Si Si
% de G-C que hay en ADN 35.339.9 38.0-41.0 53
Crecimiento en caldo soya- No No Si
tripticasa No No Si
Tbulos citoplasmticos

*En la 8va edicin del Manual Bergey fue denominado como gnero
Leptonema, pero cambi a especie incertae sedis.

Los seroprupos no poseen taxonmia propia ni se encuentran


definidos, pero tienen importancia epidemiolgica. Se plantea que
para la determinacin de los serovares tanto de, L. interrogans
como, L. biflexa se logra por la aglutinacin despus de una
absorcin cruzada con antgenos homlogos. Dentro de cada
especie de Leptospira, se incluyen uno o ms serovares, que se
diferencian entre si por su composicin antignica. La definicin de
serovares fue formulada por vez primera en 1954 por Wolff y Broom,
no ha sido para la clasificacin sistmica solamente sino para su
aplicacin prctica y la descripcin de la relacin entre hospedero-
parsito. La clasificacin reciente todava utiliza lo que estos dos

29
autores dejaron planteado acerca de la determinacin de los
serogrupos y serovares.
Por razones prcticas, los serovares relacionados antigenicamente
se clasifican bajo el mismo serogrupo. (Sandow & Ramrez, 2005).
Las serovariedades ms frecuentes en Estados Unidos son
icterohaemorrhagiae, canicola, autumnalis, hebdomadis, australis y
pomona. En el Reino Unido, Nueva Zelandia y Australia, la infeccin
por L. interrogans serovariedad hardjo es la ms comn entre
personas que estn en contacto con ganado infectado (Tabla 3).
(Heymann, 2005).

Tabla 3. Serogrupos y algunos serovares ms representativos


de L. interrogans.

Serogrupos Serovar(es)
Australis australis, bratislava, lora
Autumnalis autumnalis, forbragg, bim,
weerasinghe
Ballum ballum, aroborea
Bataviae bataviae
Canicola canicola
Cynopteri cynopteri
Celledoni celledoni
Djasiman djasiman
Grippotyphosa grippotyphosa, canalzonae,
ratnapura
Hebdomadis hebdomadis, jules, kremastos
Hurstbridge hurstbridge
Icterohaemorrhagiae icterohaemorrhagiae,
copenhageni, lai,
Zimbabwe
Javanica javanica, poi
Louisiana louisiana, lanka
Manhao manhao
Mini mini, georgia, swajizak
Panama panama, mangus
Pomona pomona
Pyrogenes pyrogenes

30
Ranarum ranarum
Sarmin sarmin
Sejroe sejroe, saxkoebing, hardjo
Semaranga patoc
Shermani shermani
Tarassovi tarassovi

4.3.2 Clasificacin Opcional

La aparicin de nuevos mtodos de clasificacin e identificacin de


Leptospira, responde a la necesidad de encontrar mtodos ms
fiables y de menos subjetividad que el mtodo clsico que adems
est considerado como lento y difcil de estandarizar. En la reunin
de Subcomit para la Taxonoma del gnero Leptospira (TSCL) en
Praga en 1994, se recomend que el sistema de clasificacin
taxonmica se siga basando en el serovar, aunque se permite la
utilizacin de otros mtodos opcionales para la identificacin y
clasificacin, como: anticuerpos monoclonales, el anlisis de factor e
investigacin de los patrones de fragmentos de cidos nucleicos
obtenidos por tratamiento con enzimas de restriccin mediante
sonda de ADN, estudios de la actividad aminopeptidasa,
microscopia electrnica, etc. Tambin se la llama clasificacin
genotpica donde la clasificacin ha sido remplazada por el
genotipo, con esta clasificacin basados en la hibridizacin del DNA
se han definido 21 genoespecies de Leptospiras, 29 serogrupos y
269 serovares. (Perry, et al., 2000; Biswas, et al., 2005). Esto
incluye todos los serovares de las dos especies ms estudiadas. La
reclasificacin de Leptospiras en base a genetipos,
taxonomicamente es correcto y promueve un fundamento cientfico
para la futura clasificacin.

31
4.3.3 Especies
4.3.3.1 Bovinos
Se han aislado de bovinos por lo menos 13 serovares. En Amrica
los serovares predominantes en bovinos son pomona, hardjo y
grippotyphosa; a veces se encuentran infecciones por canicola e
icterohaemorrhagiae, como tambin por otros serovares. Los
serovares pomona y hardjo son universales. Los brotes por este
ultimo se han comprobado cada vez con mas frecuencia, al
mejorarse los mtodos de diagnostico de laboratorio. En los ltimos
aos, se estn aislando tambin con ms frecuencia serovares del
grupo Hebdomadis. Es difcil interpretar la importancia de la
infeccin causada por algunos serovares; Tal es el caso del serotipo
paidjan (serogrupo Bataviae), aislado de riones de bovinos
obtenidos en un matadero de Argentina, y del serotipo galtoni
(serogrupo Canicola), aislado en Argentina y Colombia.
En las infecciones por hardjo, se encontr que las leptospiras
pueden residir en los rganos genitales (tero y oviductos), tanto en
hembras preadas como no preadas. Hay quienes sealan que la
infeccin de los rganos genitales indica que existe la posibilidad de
transmisin venrea. L. hardjo se subdivide en dos genotipos hardjo
hardjo-bovis y hardjo hardjo-prajitno. (Lewis, 1999; Veloso, et al.,
2000; Acha & Szyfres, 2001).

Bolin y Alt en 1999, en Estados Unidos describen una prevalencia


de 29% para el serovar hardjo y de 19% para icterohemorrhagiae. El
serovar hardjo es el ms importante en la poblacin bovina por su
carcter endmico. Si un animal es infectado con este serovar y no
es eliminado por los anticuerpos, la leptospira puede establecerse
en los riones o en el tracto genital ocasionado fallas reproductivas.
(Rivera, et al., 2004).

32
La leptospirosis aguda debida a L. pomona afecta principalmente a
los terneros y a veces a los bvidos adultos. (Biberstein & Cheng,
1994). L. hardjo, adems del sndrome de la disminucin de la
produccin de leche, produce problemas de esterilidad en los
bvidos. (Biberstein & Cheng, 1994).
4.3.3.2 Caninos y Felinos
Los serovares predominantes en todo el mundo en los caninos son
canicola e icterohaemorrhagiae. Adems de estos serovares, en
Amrica Latina y el Caribe se han aislado pyrogenes, paidjan y
tarassovi y en los Estados Unidos, ballum, grippotyphosa, pomona y
bratislava. Los serovares que predominan en Europa son similares.
(Acha & Szyfres, 2001).

4.3.3.3 Porcinos
Los serovares que con ms frecuencia se aslan de cerdos en
Amrica y en el mundo son pomona, icterohaemorrhagiae,
grippotyphosa, canicola, tarassovi, bratislava y muenchen del grupo
australis.
El cerdo es un reservorio muy importante de pomona. Las
leptospiras de los serovares bratislava y muenchen, adems de
localizarse en los riones, se refugian en los rganos genitales de
los porcinos, a semejanza de hardjo en los bovinos. (Acha &
Szyfres, 2001).

4.3.3.4 Equinos
Serolgicamente el equino reacciona a muchos serotipos
prevalentes en el medio ambiente. En los Estados Unidos se aisl
pomona y en Argentina, el serotipo hardjo. En Europa, adems de

33
pomona, se ha aislado icterohaemorrhagiae, sejroe y canicola. La
mayora de las infecciones son inaparentes.
Mediante la inoculacin de leptospiras inactivadas de varios
serovares se puede reproducir la opacidad corneal, que
frecuentemente se observa como una secuela de la fase aguda.
(Acha & Szyfres, 2001).

4.3.3.5 Ovinos y Caprinos


Las epizootias en estas especies no son muy frecuentes. En
diferentes pases se aislaron diferentes serovares, que parecen
proceder de otras especies animales del mismo ambiente. En
Australia y Nueva Zelandia se han aislado hardjo, en los Estados
Unidos y Nueva Zelandia pomona, en Israel grippotyphosa y en
Argentina ballum. En Australia occidental se encontraron ovinos con
una leptospiruria persistente por el serovar hardjo, que no tuvieron
contacto con bovinos que estaban infectados por el mismo serovar.
Los autores concluyeron que el ovino podra ser otro husped de
mantenimiento de hardjo, adems del bovino (Acha & Szyfres,
2001).

4.3.3.6 Hombre
El hombre es susceptible a un gran nmero de serovares. Muchas
veces se relaciona con la infeccin por icterohaemorrhagiae, pero
este no es el nico serovar que la puede producir como es el caso
de grippotyphosa. (Acha & Szyfres, 2001; Mayberry, 2003).

34
4.4 EPIDEMIOLOGIA

Los reservorios de L. interrogans son pequeos mamferos de vida


salvaje, sobre todo roedores, en los cuales puede distinguirse entre
hospedadores principales y secundarios.
Las leptospiras se asientan en los riones de los hospedadores que
actan como reservorios, y se eliminan principalmente con la orina.
Esencialmente pueden distinguirse los cuatro grupos siguientes de
procesos epizoticos: - La enfermedad de Weil, procedente de
ratas, afecta al hombre y a los animales; es producida por la
serovariedad L. icterohaemorrhagiae. La fiebre del fango o las
cinagas, que procede de los ms variados mamferos salvajes y
afecta al hombre y animales de explotacin zootcnica . Las
infecciones que tienen su origen en determinadas especies de
animales domsticos y salvajes y que, tras adaptarse a ciertas
especies de explotacin zootcnica, provocan en estas, afecciones
epidmicas.
La frecuencia de la leptospirosis es alta en pases cultivadores de
arroz. La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) ha cifrado su
prevalencia en humanos entre 4 y 100 casos por 100.000 habitantes
y ha descrito un brote en China con una incidencia de 1.300 casos
por 100.000 habitantes. En octubre de 1995, en Achuapa,
Nicaragua, se registraron 2.000 casos y 40 defunciones en humanos
que presentaban una enfermedad febril hemorrgica; inicialmente se
estableci un diagnstico de dengue hemorrgico, pero las pruebas
serolgicas fueron negativas para esta enfermedad y posteriormente
se confirm el diagnstico de leptospirosis. En este mismo pas, en
el perodo posterior al huracn Mitch se registraron 523 casos
sospechosos de leptospirosis, con 7 personas muertas por esta
causa, lo cual representa una tasa de letalidad de 1,3%. Las

35
encuestas serolgicas permiten explorar los factores de riesgo
asociados con la presentacin endmica o epidmica de la
enfermedad en animales y humanos.
Un estudio realizado en Nueva Zelanda investig la presencia de
Leptospira en 1.003 inspectores de carne y encontr una asociacin
entre la positividad y el nmero de aos de empleo. Otra
investigacin realizada en trabajadores de alcantarillado de Canad
en 1995 registr una positividad de 12%, frente a 2% en el grupo de
control (P = 0,003), resalt la importancia de los roedores en la
transmisin de la enfermedad y se hizo nfasis en la necesidad del
uso adecuado de los elementos de proteccin personal.
En Colombia hay informes aislados de leptospirosis desde 1933, en
trabajos con ms orientacin a identificar los reservorios animales.
El primer caso humano en el pas se inform en 1968 y en 1997 se
public una serie en la que se hace referencia a los hallazgos
histopatolgicos, correspondientes a enfermos fallecidos en 1995
durante una epidemia en Barranquilla, con diagnstico clnico y
serolgico de leptospirosis icterohemorrgica (Hoyos, et al., 1998).
En Colombia la leptospirosis no es una enfermedad de notificacin
obligatoria y se desconocen tanto su prevalencia como su impacto
econmico, aunque se han descrito casos aislados en humanos y
brotes en Barranquilla, Buenaventura y Lrida. En un estudio
realizado se utiliz la tcnica de microaglutinacin-lisis (MAT) para
seis serotipos de Leptospira con el objetivo de estimar la prevalencia
de la infeccin en las poblaciones de operarios, bovinos y porcinos y
explorar algunas variables ambientales y del sistema de produccin
asociadas a la seropositividad. La prevalencia de individuos
seropositivos fue de 22,4% (intervalo de confianza de 95% (IC95%:
13,1 a 34,2) en los operarios, de 60,9% (IC95%: 53,2 a 68,2) en las
vacas en produccin, de 10,3% en los cerdos de ceba y de 25,7%

36
en los cerdos de cra. Se encontr una alta prevalencia de
infectados por Leptospira (serotipos pomona, bratislava y hardjo) en
este sistema de produccin, en el que existen condiciones
favorables para la transmisin de este microorganismo en las
diferentes especies animales y en los humanos. (Ochoa, et al.,
2000).
La infeccin por Leptospira en bovinos es importante por las
prdidas econmicas que generan problemas de infertilidad. En
Venezuela, en 1980, se verific que 40,8% de 1.526 abortos bovinos
eran atribuibles a la leptospirosis, y en Irlanda, en 1982, el serotipo
hardjo se asoci con 49,7% de 348 abortos bovinos. El aborto es
una secuela crnica de la infeccin que se produce semanas
despus de la leptospiremia (Hoyos, et al., 1998).

4.4.1 Transmisin

Los animales con la infeccin latente, los enfermos y los que


superaron la enfermedad, en todos los cules hay que contar con el
asentamiento perpetuo de leptospiras en los tubos contorneados de
los riones, eliminan con la orina grmenes de manera continuada
o peridica. Esta representa la fuente ms importante de contagio.
Alrededor de uno de cada tres individuos enfermos se convierte en
eliminador de leptospiras. Los bovinos pueden excretar leptospiras
durante 180 das, los perros durante 700 das, y los cerdos toda su
vida. Adems de la orina, pueden actuar como fuentes primarias de
contagio los anejos del parto y las excretas de animales infectados.

En las pocas hmedas y calidas del ao (por encima de 18C), las


leptospiras pueden conservar su vitalidad durante largo tiempo,
tambin en medios ambientales hmedos y embarrados

37
multiplicndose. El contagio se produce por el coito, al ingerir agua o
pienso contaminado; es mucho ms raro que acten insectos
picadores y otros artrpodos.

Al tener pases, en grandes animales, se produce por lo general


infecciones primarias latentes, que luego van seguidas por un
aumento de la virulencia y un proceso de adaptacin a la especie
hospedadora afectada, con el resultado final de un brote de la
enfermedad. Los animales enfermos excretan regularmente
cantidades de grmenes mayores que las eliminadas por los
animales con la infeccin latente o convaleciente; constituyen por
ello las principales fuentes de contagio. Tambin se consideran
origen de contagios los residuos de matadero, en particular del
tracto urogenital. En los animales sanos, la infeccin ingresa en
forma de serovares adaptados a las correspondientes especies de
animales domsticos, por lo regular con animales infectados de la
misma especie o tambin por otra especie de explotacin
zootcnica. Adems pueden presentarse muy variadas infecciones,
procedentes de sus reservorios naturales y transmitidos por
vectores animados e inanimados. Estos ltimos actan por lo comn
solo espordicamente. Sin embargo, estas infecciones pueden
adoptar carcter enzotico cuando hay una intensa masificacin de
hospedadores y reservorios en las inmediaciones de los animales
domsticos, y si son especialmente buenas las posibilidades de
transmisin de la enfermedad (abrevaderos antihiginicos,
pastizales descuidados, drenados deficientes). Pero en estos casos
la constitucin de las cadenas infecciosas no se mantiene dentro de
una especie domestica, sino, partiendo de los reservorios animales
de vida salvaje, afectando a individuos sueltos de la poblacin
zootcnica a travs del medio ambiente contaminado.

38
Teniendo en cuenta las particularidades epizoticas mencionadas
de la leptospirosis, resulta que es sta una enfermedad estacional
con un mximo de morbilidad en la poca calida del ao. Sin
embargo, con los animales explotados a escala industrial, esto no
sucede; en este caso las mayores cifras de morbilidad coinciden con
los mximos de partos, con la tasa de reproduccin y otros factores.
La llegada de grupo de animales no infectados activa en las
poblaciones afectadas el proceso patolgico. De aqu que el ingreso
de animales nuevos deba hacerse principalmente en poblaciones
que sufrieron la enfermedad tiempo atrs. En virtud de las
oscilaciones que sufren las poblaciones de animales- reservorios,
puede producirse un cierto ritmo en la presentacin de la
enfermedad a lo largo de los aos. En los llamados aos aos de
roedores y en los aos calurosos con precipitaciones, se presenta
tambin la enfermedad frecuentemente en los animales de
explotacin zootcnica.

4.4.2 Hospedero de mantenimiento

Es aquel que asegura la perpetuacin de una poblacin


determinada de patgenos, sin la intervencin de ningn hospedero
accidental. Por lo tanto, la poblacin de mantenimiento ser aquella
especie animal que acta como un reservorio continuo de un
serovar, en un ecosistema determinado. Una o varias especies de
mamferos domsticos o salvajes actan de hospederos de
mantenimiento de cada serovar o serogrupo de Leptospira
patgena, donde una especie animal puede ser reservorio de varios
serovares y diferentes especies animales serlo de un mismo
serovar. La complejidad de la epidemiologa de la Leptospirosis es
basada sobre el gran nmero de especies de diversas familias de

39
mamferos (roedores, carnvoros, marsupiales, etc.), que tienen la
capacidad de mantener una amplia variedad de serovares. Los
hospederos de mantenimiento se caracterizan por los siguientes
elementos:
Gran receptividad a la infeccin por el serovar.
Relativa baja patogenicidad del microorganismo en el hospedero.
Presencia de infeccin renal con leptospiruria prolongada.
Infeccin crnica.
Transmisin eficaz de la infeccin a los animales de la misma
especie por contacto directo.
En algunos hospederos, se mantiene la Leptospira en el tracto
genital.

La transmisin de la infeccin entre hospederos de mantenimiento


se realiza independientemente de las condiciones climticas y
ambientales. Sin embargo, en el caso de la transmisin entre
hospederos de mantenimiento y accidental o entre accidentales
hace necesario la supervivencia del agente en el medio ambiente
para poder efectuar la infeccin.

Hay algunas especies silvestres que actan como hospedero de


mantenimiento en algunos pases europeos: Rata gris (Rattus
norvegicus) y rata negra (Rattus rattus) de icterohaemorrhagiae en
toda Europa, Topillo (Microtus arvalis) de grippotyphosa en Holanda
y Francia, el erizo (Erinaceus europaeus) de bratislava y australis en
Francia. Heath y Johnson en 1994 apuntan al ciervo y al mapache
como reservorios silvestres de pomona. Mientras Heath y Johnson
en 1994 y Bolin en 2000 declararon las ratas como hospederos de
mantenimiento principalmente al serogrupo icterohaemorrhagiae y
ballum; al cerdo de pomona, tarassovi y bratislava, la oveja de

40
hardjo y pomona; al ovino del serogrupo australis, especialmente
serovar bratislava y el perro de canicola. Ellis y col., en 1981 y 1982,
proclamaron al ganado bovino como hospedero de mantenimiento
del serovar hardjo y tambin de pomona y grippotyphosa, siendo en
EE.UU; la L. pomona, al contrario de lo que ocurre en Europa. Quinn
y col., en 2002, sealan a la especie equina como posible especie
de mantenimiento al serovar bratislava.

La presentacin de un contagio y su posterior desarrollo hasta la


enfermedad infecciosa de curso eventualmente epizotico dependen
del serovar actuante, de la dosis y virulencia de las leptospiras
ingeridas, del estado real de las defensas del individuo infectado, as
como las posibilidades de contagio. Los animales se contagian por
las vas oral, genital, conjuntival y, ocasionalmente perctanea a
travs de lesiones preexistentes. (Crdova, et al., 2005). La
predisposicin es mxima en los animales jvenes y hembras
gestantes. La infeccin por leptospiras genera una marcada
inmunidad humoral, que tiene como consecuencia la reclusin del
germen en los tubos contorneados de los riones, lo cual convierte a
una parte de los animales en eliminadores permanentes de
patgenos. Las formas clnicas presentes en una poblacin animal
pueden variar mucho. Mientras que la vaca y otros rumiantes
tienden ms a padecer una enfermedad general de sintomatologa
muy diversa, en la especie porcina prevalecen los abortos y una
elevada mortalidad neonatal. (Blaha, 1995).
El hombre se contamina de manera accidental y transitoria, cuando
entra en contacto con el agente causal, particularmente cuando
desempea actividades tales como: mdico veterinario, ganadero,
trabajador pecuario, matarife, albail o trabajador de obras pblicas.
(Lugo, et al., 2001). Las personas que trabajan con ganado, estn

41
muchas veces expuestas a la orina de los animales, ya sea de modo
indirecto o por aerosol, que puede contaminar sus conjuntivas,
mucosa nasal o abrasiones en las partes descubiertas de la piel
(Wangroongsarb, et al., 2005).Tambin pueden infectarse en forma
indirecta, al caminar descalzos en lugares donde los animales han
orinado. En muchos pases, los animales domsticos, sobre todo
cerdos y bovinos, constituyen importantes reservorios de leptospiras
y una fuente frecuente de infeccin para el hombre.
Los trabajadores de arrozales estn expuestos al agua contaminada
por la orina de roedores que infestan los campos. Entre los
trabajadores agrcolas, los que recogen la caa de azcar
constituyen otro grupo de alto riesgo. Los ratones de campo que
anidan sobre vegetales son una fuente de infeccin para los
trabajadores que recogen diferentes cosechas, especialmente en las
primeras horas de la maana cuando las manos de estos entran en
contacto con el roci mezclado con la orina. (Acha & Szyfres, 2001).

En Colombia los informes de casos son aislados, sin connotaciones


endmicas y/o epidmicas. Durante el perodo lluvioso del segundo
semestre de 1995 se present en Barranquilla un elevado nmero
de cuadros febriles, de los cuales ingresaron al Hospital
Universitario 23 pacientes en quienes, por pruebas serolgicas de
microaglutinacin, se encontraron en 20 de ellos ttulos positivos
para los serogrupos icterohaemorrhagiae, pomona, canicola y
grippotyphosa. En el grupo admitido se presentaron 6 fallecimientos
en 4 de los cuales se practicaron necropsias.

42
4.4.3 Hospederos accidentales

Cualquier mamfero puede ser, potencialmente, hospedero


accidental de las Leptospiras. Las caractersticas de mayor
importancia de un hospedero accidental durante la infeccin de
leptospira son:
La transmisin es intraespecie y espordica.
Signos de forma aguda grave (hepatitis, crisis hemoltica).
Duracin de la leptospiruria (apenas semanas).
Muestra para el diagnstico (animal enfermo).
Bajo porcentaje de animales seropositivos. (Sandow & Ramrez,
2005).
En el perodo 1968-1974 se hall en bovinos 53% de reactores a
leptospirosis sobre muestras de suero con historia de abortos; al
analizar 1.526 casos de abortos detectados entre 1970 al 1975 en
bovinos en Venezuela, 662 fueron atribuidos a leptospirosis,
incrementndose durante la estacin lluviosa. (Godoy, et al., 1997).

En la actualidad, numerosos factores ambientales intervienen en la


presentacin de la enfermedad como: los cambios edafoclimticos,
el crecimiento demogrfico con urbanizacin descontrolada hacia
zonas perifricas sin saneamiento y presencia de basuras y
criadores clandestinos de animales, pero con mayor impacto en
reas tropicales y subtropicales, las cuales penetran por la piel y
mucosas por contacto con agua contaminada de orina de animales
domsticos y silvestres infectados. (Sandow & Ramrez, 2005). El
agua salina no favorece la supervivencia de este patgeno, al
contrario del agua dulce (arroyos, embalses naturales, etc.).
Necesitan un alto grado de humedad, un pH neutro o ligeramente
alcalino y temperaturas adecuadas. La composicin del suelo

43
tambin influye en su supervivencia. En resumen la fuente de
infeccin y el modo de transmisin son variados y tienen relacin
con actividades de riesgo.

4.4.4 Reservorio

Los reservorios de las leptospirosis son una serie de animales


salvajes y domsticos. La serovariedad de la leptospira infectante
vara de acuerdo con el animal afectado. En las ratas el serotipo
caracterstico es el icterohemorrhagiae, en los cerdos el pomona, en
el ganado bovino hardjo, en los perros cancola y en los mapaches
autumnalis. Sin embargo los serotipos no son necesariamente
especficos de la especie animal y pueden aparecer diferentes
serotipos en los animales. Por ejemplo en un estudio en Tingo
Mara, Liceras, encontr vacunos con el serovar predominante
shermani y pomona, cerdos con Bratislava y VTM-65 adems de
perros con shermani y cancola. Esto se repite en los diferentes
estudios que se encuentran, por lo que es importante no solo el
reservorio sino las caractersticas del medio ambiente.

Otros reservorios han sido incriminados como portadores:


venados, ciervos, ardillas, zorros, mapaches, marsupiales y leones
de mar. Inclusive fueron encontrados anticuerpos en crotlidos. Las
variedades que infectan a los reptiles y anfibios (ranas) al parecer
no infectan al ser humano. En los reservorios la infeccin suele ser
oligo o asintomtica pero mantienen leptospiruria por largo tiempo y
en algunas especies por toda la vida. En el Per, se tienen datos
desde 1966 hasta 1984 donde se muestra que en ese perodo la
seroprevalencia encontrada en la selva peruana entre los perros
(35%) vacunos (32%) porcinos (37%) y equinos (89%) es superior a

44
las encontradas en la costa y sierra del pas. Estos estudios
merecen ser realizados en la actualidad estableciendo muestras
significativas y metodologa adecuada para poder establecer la
seroprevalencia real de la leptospirosis en los reservorios de
nuestras diferentes regiones.
Los roedores son unos de los animales ms importantes en la
transmisin de la leptospirosis sobre todo la relacionada a las
formas ictricas y de mayor cuidado en el humano. La mayora de
ellos vive en ambientes silvestres en equilibrio con la naturaleza
pero al producirse alteraciones de la misma como en el Fenmeno
de El Nio, la redistribucin del curso de las aguas por la lluvia
excesiva llev a la destruccin de sus madrigueras, acercndolos
hacia el abrigo que la vivienda humana puede ofrecerles.
Asimismo, la conservacin de alimentos en el hogar permite que
ellos incrementen el contacto con el humano aumentando las
posibilidades de transmitir la infeccin. Algunas especies que son
llamadas roedores comensales o sinantrpicos se adaptan mejor a
las condiciones ambientales creadas por el hombre (Rattus y mus).
De esta manera Ratus norvergicus (rata de desages), Rattus rattus
(rata del tejado) y mus musculus (ratn domstico) deben ser
reconocidos por sus caractersticas morfolgicas y caractersticas de
su comportamiento entendiendo las reas donde buscan abrigo, la
forma de su dinmica poblacional, cules son sus predadores
naturales as como sus habilidades y comportamiento habitual.
(Laguna, 2000).

En el rea pecuaria infestan casi todas las propiedades de cra de


animales. Estos depredadores pueden comer cerca de 10 % de su
peso cada da (10 a 15 kg/ao/rata), y lo ms importante,
contaminan mucho ms alimento del que pueden comer, lo que

45
favorece la transmisin y dispersin de las leptospiras por
contaminacin del alimento y agua a travs de su orina.

Sin lugar a duda, otro vector importante de contaminacin en


granjas y establos son los perros, que generalmente siempre existen
en este tipo de lugares cumpliendo alguna funcin especfica
(vigilancia o compaa). Por la conducta muy especial de la especie
canina, de marcar sus territorios con orina, esta se disemina
fcilmente por toda la granja o establo y en ocasiones, lleva la
contaminacin directamente al alimento y agua consumida; o incluso
en algunos casos estos animales comparten un mismo espacio, lo
que facilita an ms la contaminacin directa del patgeno.
(Seplveda, et al., 2002).

4.5 PATOGENESIS

Las Leptospiras entran al cuerpo a travs de heridas; piel lesionada


o reblandecida por el agua; membranas mucosas o conjuntiva;
inhalacin por aerosol o gotas microscpicas, y por una posible
ingestin de alimentos o agua. (Mandell, et al., 2000). Existen
adems descripciones de transmisin vertical, ya sea por paso a
travs de la barrera placentaria como por la leche materna (Cornejo,
et al., 2001). Una vez dentro del sistema linftico y en sangre, la
leptospira es llevada rpidamente a los rganos de todo el cuerpo;
aparentemente no tienen un tropismo. La invasin dentro del liquido
cefalorraqudeo (LCR) y el humor acuoso de los ojos, puede
facilitarse por la accin del par de flagelos axiales y la liberacin de
hialuronidasa (Mandell, et al., 2000; Hoyos, et al., 1998). El
lipopolisacrido aislado de la leptospira, llamado L-LPS, parece
actuar intensamente en el desencadenamiento de graves

46
fenmenos inflamatorios, que agreden a la clula endotelial y liberan
citoquinas y potentes compuestos vasoactivos. Algunos autores
describen que la presencia de una sustancia endotoxina en la
espiroqueta estimulara la produccin de citoquinas entre ella el
factor de necrosis tumoral (FNT). (Laguna, 2000). Peptidoglicanos
extrados de la pared celular de la Leptospira interrogans inducen
liberacin de FNT alfa por los monocitos y aumentan la adherencia
de las clulas endoteliales a neutrfilos. La induccin del TNF alfa
por factores txicos bacterianos produce una respuesta local y
sistmica, resultando en dao capilar y vasculitis. (Cornejo, et al.,
2001). Este FNT, cuyo papel es decisivo en la mediacin de la
respuesta inflamatoria induce la produccin de otras citocinas de
importancia en este proceso, tales como interleucina 1y 6 (IL-1 e IL-
6). (Laguna, 2000). Esta capacidad nociva puede ser debida a
factores txicos (hemosilina, fibrolisinas, lipasas) y endotoxinas
(catalasa, hialuronidasa) (Sandow & Ramrez, 2005). Tambin se
describe una alteracin de la bomba Na/K ATPasa. (Cornejo, et al.,
2001).

Una vez que la bacteria atraviesa la mucosa va al torrente


circulatorio, se multiplican, dando origen a una fase leptospirmica
que dura de 7 a 10 das desde el inicio de la enfermedad (Garca, et
al., 1998), esto se puede atribuir a la existencia de determinados
factores de patogenicidad bacteriana, como las hemolisinas y las
lipasas siendo la primera, la causa de la anemia (Sandow &
Ramrez, 2005), produciendo generalmente un sndrome sptico
febril con cefalea, mialgia, compromiso general, dolor abdominal,
vmitos e infeccin conjuntival, manifestaciones que duran 3 a 7
das; en esta etapa se puede aislar leptospira a partir de la sangre y
del LCR (Abuauad, et al., 2005; Hoyos, et al., 1998).

47
Ms tarde, se le suma la accin de los anticuerpos situados en la
superficie eritrocitaria que sensibilizan al eritrocito, causando su
rotura -anemia-. Durante esta fase (leptospiremia) ocurre una
reaccin inflamatoria en la mama (mastitis). La hemlisis producida
por la hemosilina y por el dao hepatocelular se le atribuye a las
causas isquemicas y toxicas ictericia-. Tras esta fase, las
leptospiras se sitan en el rin, lugar de difcil acceso para los
anticuerpos, la ubicacin en los tbulos renales se ve facilitada por
la produccin de ureasa por parte de las Leptospiras (Sandow &
Ramrez, 2005).
Algunos estudios en ratones sugieren la presencia de hemorragias
capilares resultando una disrupcin de las clulas de la membrana
endotelial por el intercambio con toxinas glicoprotenicas, que
sustituyen la recepcin de cidos grasos requeridos para mantener
la integridad vascular de la pared celular. A pesar de todo el
mecanismo, las lesiones petequiales reflejan una vasculitis
sistmica, permitiendo la migracin y proliferacin de espiroquetas
casi dentro de todos los rganos y tejidos, teniendo en cuenta un
amplio espectro por enfermedades clnicas (Mandell, et al., 2000);
Asociada a la agresin de las clulas parenquimatosas, el endotelio
capilar es lesionado con intensidad, probablemente por la accin de
las citotxinas. De Brito y cols. observaron, en la clula endotelial de
capilares del pulmn, rin y diafragma, alteraciones mitocondriales
y del retculo endoplasmtico, semejantes a las detectadas en los
hepatocitos. Las mitocondrias se encuentran dilatadas mientras que
el retculo endoplasmtico est aumentado de tamao. Todos estos
fenmenos precederan a la lesin final de necrosis celular.
(Laguna, 2000).

48
Posteriormente, se multiplicarn en la luz de los tbulos
contorneados renales, principalmente en las proximidades de las
microvellosidades, donde la nefritis es provocada por el dao capilar
y la produccin de determinadas endotoxinas y hemolisinas , que
terminan por producir anoxia, nefrosis y hemoglobinuria, por la
posible isquemia debida a la agregacin intravascular de
hemoglobina que obstruira los capilares y tambin por la presencia
de mononucleares infiltrados por una reaccin autoinmune, lo que
da lugar a la fase de (leptospiruria) que puede tener carcter
continuo o intermitente y de duracin variable segn la especie
afectada. (Sandow & Ramrez, 2005; Garca, et al., 1998).
Puede suceder una lesin vascular severa, causando, por ejemplo,
hemorragias pulmonares, isquemia de la corteza renal con necrosis
de clulas de epitelio tubular (Mandell, et al., 2000), con presencia
de coagulacin intravascular diseminada y trombocitopenia
(Annimo, 2000). La agresin pulmonar, que se manifiesta en su
forma ms grave por un cuadro de neumona hemorrgica, parece
relacionarse con la accin directa de una toxina sobre la pared
capilar. Las lesiones son observadas con mayor frecuencia en la
periferia y bases pulmonares como consecuencia de la abundancia
de capilares y mayor vigor de los movimientos respiratorios de esas
reas. Esta grave agresin pulmonar puede en realidad resultar en
una reaccin de Herxheimer, desencadenada por la liberacin de
lipopolisacridos de la pared celular de la leptospira. El compromiso
de otros rganos como las suprarenales, pncreas cerebro y
meninges parece obedecer a los mismos mecanismos
mencionados. (Laguna, 2000). Igualmente se presenta destruccin
de la arquitectura heptica resultando en ictericia y lesin en clulas
del hgado con o sin necrosis (Mandell, et al., 2000), eritrofagocitosis
y colestasis. En el rin, las manifestaciones histopatolgicas

49
presentan una inflamacin tubulointersticial difusa caracterizada por
una variada infiltracin de clulas inflamatorias como linfocitos,
clulas plasmticas, macrfagos y leucocitos polimorfonucleares
(Nelson & Horsburgh, 2005).

El comprometimiento renal puede manifestarse en una amplia gama


de problemas que incluye desde simples alteraciones del sedimento
urinario hasta cuadros gravsimos de insuficiencia renal aguda. La
insuficiencia renal es primariamente el resultado del dao tisular y
es habitual encontrar leptospiras en la luz tubular. La causa principal
de la lesin tubular parece ser la hipoxemia o algn efecto txico
directo de las leptospiras. Las alteraciones inflamatorias en el rin
pueden observarse en los estadios ms tardos del
desenvolvimiento de la lesin renal y en un caso se asociaron con
inmunocomplejos circulantes y depsitos de componentes del
complemento y cuerpos electrodensos en los glomrulos sugestivos
de glomrulonefritis por inmunocomplejos. La hipovolemia y la
hipotensin causadas por la prdida de volumen intravascular como
resultado de lesin endotelial, pueden contribuir al desenvolvimiento
de la insuficiencia renal. Las lesiones renales parecen iniciarse
dentro de los glomrulos durante la migracin de las leptospiras,
luego surgen las alteraciones tbulo intersticiales causadas tambin
por la migracin de dentro de los capilares peritubulares para el
interstcio y tbulos, responsabilizndose por el compromiso renal
que puede variar de simple disminucin de la funcin glomerular
hasta insuficiencia renal. (Laguna, 2000).

Por otro lado, la ictericia es la manifestacin principal de las


alteraciones hepticas. Ocurre en los casos mas graves y se debe
primariamente a la disfuncin hepatocelular, habitualmente sin

50
necrosis. El dao heptico en apariencia es subcelular y las
leptospiras rara vez se observan en el hgado. (Laguna, 2000). La
microscopa muestra alteraciones celulares en de la zona III del
acino de Rappaport (Cornejo, et al., 2001). En los casos graves la
ictericia es muy intensa y tiene su mecanismo de produccin todava
en discusin. Sin embargo parecen importantes la hemlisis, el dao
hepatocelular y la colestasis intraheptica. La insuficiencia renal y la
reabsorcin de hemorragias parecen factores coadyuvantes. Para
algunos autores la disminucin funcional de la clula heptica
representa el factor primordial en el proceso. La ictericia sera
resultante de la agresin heptica aunque la necrosis hepatocelular
no sea prominente, concordando con los valores poco elevados de
las transaminasas sricas. De Brito, por medio de microscopa
electrnica heptica admite que los defectos bsicos se encuentran
en la captacin (lesin del polo sinusoidal) conjugacin (deplecin
de los grnulos de ribonucleina) y la excrecin de la bilirrubina
(alteraciones mitocondriales de los ductos biliares), con
predominancia de la lesin en la ltima fase. La ictericia en los
casos graves es muy intensa, y puede presentar una coloracin
anaranjada por lo que se le denomina cprica o rubnica. Ella se
produce por la asociacin entre la impregnacin bilirrubnica,
amarilla y la dilatacin e hiperpermeabilidad vascular que resulta en
congestin y hemorragia. (Laguna, 2000).

El bovino puede tener una leptospiruria hasta 7 meses; equino de 2-


3 meses, el cerdo hasta un ao; perro hasta 6 meses o ms;
roedores toda la vida. La localizacin de agentes patgenos en el
hgado y humor acuoso complica el cuadro y el desenvolvimiento
clnico. Tambin el aborto es causa de fiebre y la reaccin sistmica
general, por el paso de hemosilina y otras toxinas a travs de la

51
placenta destruyen los eritrocitos fetales y los cambios
degenerativos microscpicos en la placenta interfieren en le
intercambio fisiolgico entre la madre y el feto, pudiendo originar la
muerte fetal. Siempre hay que tener en cuenta que, en algunos
casos, la aparicin del aborto es muy posterior al momento de la
infeccin. Por ltimo, la uvetis recurrente en equinos parece
involucrar la produccin de anticuerpos contra el antgeno leptospiral
en reaccin cruzada con tejidos oculares. El dao de la retina con
uvetis tiene una relacin con la presencia de linfocito B en la retina.

La aparicin de anticuerpos especficos detectables


aproximadamente a los 10 das de la infeccin junto a la accin
leptospiricida de las beta-macroglobulinas del suero y la accin del
complemento y la lisozima, hacen que desaparezcan las leptospiras
en torrente sanguneo pero, se localizan en diferentes rganos, tales
como: la cmara interior del ojo, las meninges y el rin donde los
anticuerpos tienen poco acceso y en el tero grvido (esto hace que
se produzca aborto) (Sandow & Ramrez, 2005). La respuesta
inmune humoral es dirigida hacia los epitopes LPS de la envoltura
externa, los mismos epitopes son usados para la clasificacin de
serotipos de leptospiras. Los antgenos LPS inducen la produccin
de inmunoglobulinas M (IgM) y ms tarde de IgG especficos, para
unirse a los epitopes LPS del serovar, o para la reaccin cruzada de
un serovar o varios, causando infeccin. Despus de la
opsonizacin y una subsecuente fagocitosis del pulmn e hgado,
las espiroquetas son removidas de la circulacin por el sistema
reticuloendotelial. Las manifestaciones crnicas, como la uvetis,
puede seguir con una enfermedad severa o leve y puede estar
mediada por el complejo antigeno-anticuerpo en la aparente
ausencia del microorganismo.

52
Los antigenos de superficie pueden tener muchos roles, con ciertos
serovares asociados con enfermedades leves (ballum, canicola,
grippotyphosa, hardjo, hebdomadis, hyos, pomona y tarassovi),
mientras que otros serovares, como los miembros del serogrupo
Icterohaemorrhagiae (australis, autumnalis, bataviae, copenhageni,
icterohaemorrhagiae, lai y pyrogenes), estn asociados con muchas
enfermedades severas (Mandell, et al., 2000). La inmunidad
adquirida despus de la infeccin es serotipo especfica, pudiendo el
mismo individuo ser afectado ms de una vez por serotipos
diferentes (Carneiro, et al., 2004).

Resumiendo, las alteraciones encontradas en la leptospirosis segn


algunos son consecuencia de la accin directa del microorganismo
integro o degradado y de sus productos que actuando sobre
membranas celulares (parenquimales o endoteliales), en un primer
momento determinan disturbios funcionales de la membrana que
pueden culminar posteriormente con la muerte celular.

4.6 RESPUESTA INMUNE

La defensa del organismo se establece mediante la interaccin


coordinada de diversos sistemas y mecanismos tanto especficos (el
sistema linfoide y sus productos) como no especficos (el sistema
fagocitario y diversos elementos de la respuesta inflamatoria, etc.),
que tienen como funcin primordial la proteccin del individuo contra
agresiones provenientes del medio ambiente externo, en especial
las inducidas por microorganismos patgenos o del ambiente
interno, representadas fundamentalmente por proliferaciones
neoplsicas malignas.

53
La respuesta inmunitaria contra un antgeno se produce por
influencia de varias subpoblaciones celulares, entre las cuales se
encuentran los linfocitos y los monocitos; estos reconocen el
antgeno y responden a un determinante antignico especfico y la
respuesta de esta clula antgeno sensible puede resultar en la
produccin de anticuerpos o en la produccin de clulas que
participan en la respuesta inmunitaria mediada por clulas.

El desarrollo de inmunidad mediada por clulas o de inmunidad


humoral es regulado por una serie de interacciones esenciales entre
macrfagos, clulas T y B. Las interacciones reguladoras entre los
constituyentes del sistema inmunitario pueden manifestarse por la
intensificacin o la supresin de las respuestas inmunitarias.

Los mtodos utilizados para identificar poblaciones de linfocitos son


diferentes, uno de ellos es la determinacin de inmunoglobulina en
su membrana plasmtica, la cual se detecta empleando el marcador
anti-lg. Sin embargo, un gran rango de valores ha sido reportado por
los diferentes investigadores debido a diferencias en los
procedimientos de marcaje con anti-lg. Muller caracteriz linfocitos B
mediante la tcnica de formacin de rosetas con eritrocitos cubiertos
con anticuerpos y complemento. Nakanishi, et al., identificaron
linfocitos B bovinos en sangre perifrica, ndulos linfticos y bazo,
mediante la tcnica de inmunofluorescencia directa con anti-
inmunoglobulina marcada con isotiocianato de fluorescencia.

Los macrfagos tienen diferentes funciones en la respuesta


inmunitaria, en especial la de presentar los antgenos a los linfocitos;
adems, secretan varios mediadores biolgicamente activos
capaces de actuar sobre los linfocitos T y B mediante el incremento
o la supresin de la divisin celular o de su diferenciacin. Ms aun,

54
el macrfago juega un papel en el procesamiento del antgeno, ya
que es la principal clula fagoctica del sistema monocitos-
macrfagos (Aidorevich & Soyano, 1991).

En mamferos, los grnulos citoplasmticos de leucocitos


polimorfonucleares son la mayor reserva de polipptidos de
defensa, los cuales tienen una diversa estructura primaria y un
variado espectro en la actividad antimicrobial. Las CAP18 (protena
cationica 18- kD) son protenas derivadas de granulocitos. La
hCAP18 cDNA, es una protena compuesta por 30 aminocidos
peptdicos, 103 aminocidos con dominio N-terminal donde no se
conoce su funcin y 27 aminocidos con dominio en el C-terminal
que une a los lipopolisacaridos, los neutraliza mediado por
activacin de monocitos y reduce una toxicidad letal de los LPS en
ratones. La inyeccin de pptidos CAP18 reducen los niveles de
FNT (factor de necrosis tumoral), esta inmunidad innata puede ser
crucial para la primera defensa contra el hospedero. Los LPS
asociados con leptospiras han sido descritos como factores de
virulencia. Estudios qumicos y serologicos de LPS de leptospiras
han demostrado que estos no son un constituyente comn de la
membrana externa. Isogai, et al., 2004, reporta que los Bac5 y
Bac7, que son pptidos antimicrobiales de neutrofilos de bovinos,
inmovilizan y matan la Leptospira interrogans y la Leptospira biflexa,
igual a la actividad que tienen los neutrofilos humanos (hCAP18).
Estos autores describen que aunque estos pptidos son de la familia
de la catelicidina son nicos en varios mamferos, y esto puede
efectivamente contribuir a la reduccin de la viabilidad de Leptospira
y a la neutralizacin de sus LPS.

55
La mayora de los estudios realizados se basan, nicamente, en la
investigacin de la inmunidad humoral. Tras la infeccin,
inicialmente se produce una elevacin de las IgM, que alcanzan
niveles detectables a los pocos das de la desaparicin del periodo
febril que acontece durante la fase de bacteremia, es decir a los 2-5
das de la aparicin de los signos de la enfermedad aguda. Los
anticuerpos IgM dificultan la multiplicacin de las leptospiras, pero
no las destruyen, poco despus de la aparicin de las IgM,
comienzan a detectarse las IgG especficos, que producen la lisis de
las leptospiras. Estos anticuerpos persisten durante aos en el
animal. Las IgM alcanzan su pico mximo a las 3- 4 semanas y las
IgG a las 4- 12 semanas post infeccin.
Durante toda la fase de leptospiruria, los niveles de IgM pueden no
detectarse en sangre. En cambio, se puede detectar las IgG en
orina, aproximadamente a las 6 semanas despus de la infeccin.
Adems, los animales suelen presentar una respuesta inmune local,
lo que provoca la aparicin de IgA en la orina, hacia las 12 semanas
post infeccin.
En la mayora de los casos, en el momento del aborto los niveles de
anticuerpos son bajos, incluso negativos. Esto redunda en una
dificultad a la hora de realizar el diagnstico de los abortos por
leptospiras (Sandow & Ramrez, 2005).
La inmunidad es muy resistente, y, supuesta la presencia
simultanea de patgenos en los riones, es probable que se
mantenga durante muy largo tiempo. De acuerdo con el tiempo de
utilizacin del animal domestico, esta inmunidad puede conservarse
durante toda su vida. La inmunidad protege, sin embargo,
nicamente frente a la serovariedad que la origino y ante los
serovares que exhiben una reaccin con ella mas o menos

56
marcada. Por consiguiente, los animales inmunes pueden actuar
como fuentes de contagio (Blaha, 1995).

4.7 ASPECTOS CLINICOS

La leptospirosis presenta cuadros clnicos diversos, conforme al


tropismo del agente, intensidad de la infeccin y condiciones
inmunitarias del hospedero. Entre los signos y sntomas, algunos
son comunes a todas las formas clnicas. La leptospirosis es una
tpica enfermedad bifsica. Este comportamiento bifsico se
desarrolla en los dos tipos de presentaciones que tiene esta
enfermedad: la forma anictrica y la segunda, ms grave, en la
forma ictrica.

El perodo de incubacin es de 7-12 das (mximo de 2 a 20 das17)


(Laguna, 2000; Rodrguez, 2000). Esto se ha podido estudiar
despus de exposicin accidental o el tiempo transcurrido despus
de una inmersin. Enseguida comienza la primera fase que es la
llamada fase sptica que dura alrededor de 4-7 das. Es la fase
donde las caractersticas principales pueden ser gripales. En esta
fase se puede aislar a las leptospiras de la sangre, el lquido
cefalorraqudeo (LCR) y la mayora de los tejidos. Posteriormente
aparece una etapa intercalar donde inclusive puede el paciente
presentarse afebril por uno o dos das; Luego aparece la segunda
fase que es llamada fase inmune, donde las leptospiras
desaparecen de la sangre y LCR, siendo posible hallarlas en el
rin, orina y humor acuoso. Algunas veces pueden aislarse las
leptospiras hasta 24 horas despus de iniciada la ictericia (en las
formas ictricas). En esta fase que dura de 4 a 30 das se

57
desarrollan los anticuerpos circulantes presentndose la afeccin
renal, heptica, meningitis y uvetis.

Entre los pacientes con leptospirosis, el 90% presenta la forma


anictrica que es la ms leve de la enfermedad mientras que entre
5-10% tiene la forma grave de la leptospirosis, con ictericia.
(Laguna, 2000; Vado, et al., 2002; Dutta & Christopher, 2005). Esta
ltima es la llamada enfermedad de Weil o Sndrome de Weil. Se
admite que el 60-70% de los pacientes presentan manifestaciones
diagnosticadas como gripe o resfriado y solo se identifican mediante
estudios serolgicos.
4.7.1 Manifestaciones Clnicas

4.7.1.1 Leptospirosis Anictrica. En la fase sptica la enfermedad se


caracteriza por ser de inicio sbito con fiebre remitente alta, cefalea
persistente y mialgias intensas, dolor abdominal, adems malestar
general y astenia. Esta es la forma leve de la leptospirosis. Estos
signos y sntomas se mantienen por 4-7 das. De manera general no
hay muertes en esta fase. Puede suceder que no pase a la fase
inmune.
Los pacientes en esta fase estn agudamente enfermos, febriles y
con bradicardia relativa adems de normotensos. Asimismo puede
aparecer alteracin del sensorio en el 25% de ellos. La cefalea es
intensa y su presencia y severidad puede anunciar que se inicia la
meningitis.

Suele ser frontal, ocasionalmente bitemporal y occipital. Responde


mal a los analgsicos siendo el dolor muy intenso. Puede asociarse,
con menor frecuencia, a dolor retrobulbar. Las mialgias
comprometen la regin paraespinal, el abdomen y el cuello de

58
manera particular a los msculos gemelos de las pantorrillas. El
dolor es intenso y se acompaa de hiperestesia cutnea. La
asociacin de vmitos, dolor abdominal y nuseas ocurren hasta en
el 95% de los pacientes (esto es muy inespecfico). La hepato
(<15%) y la esplenomegalia (< 22%) son poco frecuentes en la
forma anictrica. Lo ms frecuente en la fase sptica es la
sensibilidad muscular y las manifestaciones oculares como
hemorragias conjuntivales, fotofobia y dolor ocular. El signo ms
caracterstico podra ser el de la hiperemia conjuntival, que le da una
tonalidad rojiza a las esclerticas y que usualmente aparece en el
tercer o cuarto da de la enfermedad. Asimismo aparecen
eventualmente hemorragias subconjuntivales. Ocasionalmente los
pacientes presentan diarrea. Menos frecuentemente aparecen:
irritacin farngea, linfadenopatas, hemorragias cutneas y rash
(irritacin) maculopapular o urticarial que se presenta en el tronco.
En la segunda semana de la enfermedad se inicia la fase inmune.
En ella, la fiebre, en caso de estar presente, es baja y dura de uno a
tres das. Esta fase se correlaciona con la aparicin de anticuerpos
IgM circulantes mientras que la concentracin de C3 se encuentra
en el rango normal. Habra evidencias de depsito de IgG e IgM,
as como beta 1C, en el msculo de la pantorrilla, presencia de
autoanticuerpos para msculos esquelticos y corazn, depsitos
en los riones, de IgG, IgM y beta 1C. El dato ms importante,
desde el punto de vista clnico es la presencia de la meningitis
asptica. En esta fase las leptospiras ya desaparecieron del LCR sin
embargo, aparecen las manifestaciones clnicas relacionadas con la
aparicin de anticuerpos. Las manifestaciones no son especficas y
el diagnstico puede ser confundido con meningitis de etiologa viral,
debido a la presencia de pleocitosis mononuclear. Cuando las fases
estn bien definidas, el examen clnico induce a diagnosticar

59
meningitis asptica por leptospirosis. Esta manifestacin
neurolgica dura algunos das (rara vez hasta tres semanas) y no es
fatal sobretodo en los casos anictricos. Al examinar el LCR, los
mononucleares no son mas que 500 clulas por mm3 hay glucosa
normal y clnicamente no hay focalizacin ni encefalitis. La cefalea
es intensa y la puncin lumbar puede proporcionar alivio a sta.
Todos los serotipos patognicos para el humano son probablemente
capaces de causar meningitis asptica. Los serotipos con mayor
prevalencia son icterohaemorrhagiae, cancola y pomona.

Varios meses despus de la enfermedad aguda, puede presentarse


uvetis en el 2% de los pacientes. Este problema puede ser crnico
o recurrente prolongado. Menos frecuentemente aparecen
iridociclitis, neuritis ptica, y otras manifestaciones del sistema
nervioso que incluyen mielitis, encefalitis y neuropata perifrica.

4.7.1.2 Leptospirosis Ictrica (Sndrome de Weil). La forma ictrica


fue descrita originalmente con la especie icterohaemorrhagiae,
como se ha descrito anteriormente, pero se observa casi en
cualquier tipo de leptospira. Este sndrome tiene como caracterstica
principal la disfuncin renal y heptica con fenmenos hemorrgicos
colapso vascular as como alteraciones graves de conciencia y una
mortalidad que puede llegar al 5- 10% de los pacientes. Las
manifestaciones de este sndrome comienzan a aparecer entre el
tercero y sexto da de enfermedad, pero es en la segunda semana
que se les identifica plenamente. Las manifestaciones
gastrointestinales incluyen dolor en el cuadrante derecho y aumento
de las transaminasas hasta en cinco veces el valor normal. La
hiperbilirrubinemia es conjugada y parece que el mecanismo
fisiopatolgico incluye el bloqueo intracelular heptico que le impide

60
la excrecin de bilirrubina (Laguna, 2000), Hoyos, et al., 1998,
describe que los niveles de bilirrubina casi siempre son menores a
20 mg/dl, pero pueden ser tan altos como 60-80 mg/dl; igualmente,
los valores de aminotransferasas rara vez exceden de 100/200 U/l;
Hay elevacin de nitrgeno srico ureico y de creatinina srica.
Laguna, 2000; comenta que existe hepatomegalia en el 70 % de los
casos. Hay complicaciones raras como la colecistitis aguda de
tratamiento quirrgico que se asocia con la infeccin de L.
autumnalis. En los nios pueden presentarse hipertensin,
colecistitis acalculosa, pancreatitis, as como vasculitis necrotizante
perifrica.

En los casos graves hasta el 10% de los pacientes pueden


presentar alteraciones respiratorias. Tambin se han relatado
neumonas intersticiales y bronconeumonas aisladas. (Laguna,
2000; Seijo, et al., 2002). En ocasiones estas complicaciones
respiratorias dificultan el diagnstico inicial. Los pacientes graves
pueden presentan tos, disnea y hemoptisis. Inclusive hasta
Sndrome de dificultad respiratoria del adulto que puede ser de difcil
diagnstico con el cuadro pulmonar que presenta el compromiso por
hantavrus. Algunos autores mencionan que, inclusive, en la fase
sptica pueden aparecer manifestaciones pulmonares en el 25-86%
de los pacientes las cuales se caracterizan por tos y dolor torcico,
siendo la hemoptisis de presentacin muy rara. Tambin estn
descritas manifestaciones oculares de las cuales la ms comn es
la iridociclitis que puede surgir en el perodo de la diseminacin a los
tejidos o tambin mas tarde cuando el cuadro clnico empieza a
disminuir siendo por esto considerada una manifestacin auto-
inmunitaria. La leptospirosis puede presentar coagulacin
intravascular diseminada que podra ser consecuencia del ingreso a

61
la circulacin de sustancias procoagulantes como la tromboplastina
de los tejidos o de cogulos en la superficie del vaso lesionado. El
compromiso renal es bastante variable, puede ser poco agresivo y
presentar solo albuminuria y hematuria en muchos casos o
presentarse como insuficiencia renal grave con oliguria progresiva.
La insuficiencia renal generalmente es producto de la disminucin
de la perfusin renal, relacionada a la deshidratacin y con menor
frecuencia a la disfuncin miocrdica.

La excrecin urinaria disminuye y en ocasiones hay anuria. El pico


de la azoemia es aproximadamente entre el quinto y el stimo da.
La azoemia que sigue se acompaa de nauseas, vmitos,
obnubilacin progresiva y finalmente coma. El compromiso renal y
sus complicaciones son las principales causas de mortalidad en la
leptospirosis. Las alteraciones cardacas son tambin relativamente
frecuentes. Pero con expresin electrocardiogrfica ms que clnica.
La insuficiencia cardiaca congestiva y el shock cardiognico pueden
estar presentes en los casos graves. Sin embargo, son menos
frecuentes que las alteraciones electrocardiogrficas, como las
alteraciones del ritmo y bloqueos diversos que pueden versen
agravados por los disturbios metablicos como la hiperpotasemia y
la uremia. La miocarditis es otra de las formas de expresin y
presenta intensidad variable. Hay relatos de 13 de 26 casos a la
necropsia, con miocarditis hemorrgica. Se describen diferentes
tipos de arritmia cardiaca, como fibrilacin y flutter auricular,
taquicardia ventricular, las cuales, frecuentemente, son de poca
significanca clnica. De cualquier manera en algunas ocasiones se
ha descrito insuficiencia ventricular izquierda como consecuencia de
miocardiopata dilatada. Los serotipos que han sido relacionados
con la miocarditis son el icterohaemorrhagiae, pomona y

62
grippothyphosa. Es importante tener electrocardiogramas de los
pacientes durante la hospitalizacin. Existe una descripcin clnica
caracterizada, entre otras cosas, por lesiones eritematosas,
sobreelevadas de 1-5 cm, que ha sido denominada Fiebre de Fort
Bragg y parece estar relacionada a infecciones por leptospira del
serotipo autumnalis, aunque parece que ha habido asociacin con el
serotipo pomona. Esta enfermedad fue observada en el verano de
1942 y su fase inicial era similar a la fase sptica de la leptospirosis.
Lo que llam la atencin fue la presencia de las lesiones pretibiales
simtricas alrededor del cuarto da. Adems, al contrario de los otros
cuadros relacionados a leptospiras la esplenomegalia estuvo
presente en el 95% de los casos.

La leptospirosis durante la gestacin puede verse asociada a


aumento de riesgo de prdida del producto. Con frecuencia, al dar
de alta al paciente, se observan atrofia muscular y anemia (Figura 1)
(Biberstein & Cheng, 1994).

63
Figura 1. Caractersticas clnicas de leptospirosis ictrica y anicterica.

4.7.2 Presentacin clnica en las diferentes especies animales.


4.7.2.1 Perros y gatos
La forma mas aguda afecta a los cachorros jvenes, produciendo
fiebre sin signos localizados y normalmente es mortal en un plazo
de das. Ante mortem, con frecuencia se observan hemorragias en
las mucosas y en la piel, o se manifiestan por epistaxis o por heces
teidas con sangre y vmito. No existe ictericia.
La forma ictrica tiene un curso ms lento y las hemorragias son
menos visibles. La ictericia es evidente. La localizacin renal
provoca la retencin de nitrgeno, a la vez que en la orina aparecen
cilindros renales y leucocitos.

64
La forma urmica, que se centra en los riones, sigue a las otras
dos o aparece en su ausencia. Puede ser aguda y rpidamente
mortal con signos de trastornos gastrointestinales, respiracin
urmica y lceras en el tramo anterior del tracto alimentario; o puede
seguir un curso lento con aparicin retrasada. (Biberstein & Cheng,
1994).

El cuadro clnico grave se caracteriza por anorexia, polidipsia,


vomito y deshidratacin, tambin se presenta hiperestesia por dolor
renal, muscular y meningitis. (Annimo, 2000). La ictericia puede
producirse tanto por el serotipo icterohaemorrhagiae como por el
cancola. La letalidad estimada es del 10%. Por otro lado en los
gatos la enfermedad es poco frecuente (Laguna, 2000; Acha &
Szyfres, 2001).

4.7.2.2 Equinos
La mayora de las infecciones son inaparentes o asintomticas.
(Rahim, et al., 2005). La fase aguda es febril puede haber fotofobia,
lagrimeo, edema de la conjuntiva ocular, miosis e iritis. En la fase
crnica, se pueden observar adherencias anteriores y posteriores,
cuerpo vtreo turbio, formacin de cataratas, uvetis y otras
anormalidades oftalmolgicas. Ocasionalmente puede haber abortos
en yeguas infectadas. (Acha & Szyfres, 2001).
Se reconoce, en muchas oportunidades, slo la secuela de la
enfermedad que es la oftalma peridica, la cual aparece despus
de un perodo de latencia que puede ser de varios meses luego del
perodo febril. En los ojos pueden detectarse las leptospiras, as
como anticuerpos en el humor acuoso. En los equinos existen otras
causas de oftalmia peridica y debe ser evaluada por un mdico
veterinario con experiencia en equinos. La enfermedad puede

65
presentarse con sndromes hepatonefrticos y cardiovasculares
como se ha descrito en Europa. Los serotipos que predominan son
icterohaemorrhagiae, pomona, hardjo, y canicola (Laguna, 2000).
Otros sndromes clnicos que han sido reportados en caballos son
uvetis, abortos, pirexia e ictericia (Rahim, et al., 2005); as como,
hemoglobinuria, necrosis de la piel y los labios, conjuntivitis con
edema de los parpados, lagrimeo y fotofobia (Sandow & Ramrez,
2005).

4.7.2.3 Ovinos y caprinos


La enfermedad es febril, con anorexia y en algunos animales hay
ictericia, hemoglobinuria, anemia, abortos, mortinatos, o infertilidad
(Laguna, 2000). Adems causa disnea, palidez de las mucosas,
infertilidad, nacimiento de cras dbiles o muertas y aborto (Sandow
& Ramrez, 2005). La gravedad del cuadro clnico depende de la
virulencia del serovar infectante y el estado del animal. Las
epizootias no son muy frecuentes.

4.7.2.4 Porcinos
La presentacin clnica vara pudiendo ser subclnica o febril fugaz
(Laguna, 2000). Presentan sntomas como anorexia, perturbacin
del equilibrio, parlisis progresiva, disminucin de peso y
produccin Lctea (Sandow & Ramrez, 2005). En otros animales
puede presentarse con abortos y presencia de lechones dbiles o
con retardo del crecimiento, adems ictericia, hemoglobinuria,
convulsiones, y trastornos gastrointestinales. Pueden aparecer
signos neurolgicos y meningitis. El aborto aparece entre los 15-30
das post infeccin principalmente si la infeccin se produjo en el
ltimo tercio de gestacin. Los cerdos son los principales reservorios

66
del serotipo pomona. Adems pueden albergan tarassovi, cancola,
grippotyphosa, e icterrohaemorrhagiae.

4.7.2.5 Bovinos
La infeccin puede provocar una enfermedad de curso agudo,
subagudo o permanecer clnicamente inaparente. La enfermedad se
manifiesta por una fiebre de 4 a 5 das, anorexia, conjuntivitis y
diarrea. La leptospiruria por hardjo es mucho mas prolongada que
por pomona. El serovar hardjo (serogrupo Sejroe) en bovinos se
caracteriza por dos sndromes: a) agalactia, o una reduccin
importante de la produccin lctea y b) abortos o paricin de
terneros dbiles que mueren al poco tiempo de nacer. (Acha &
Szyfres, 2001).

La infertilidad puede ser secuela de la infeccin. En las vacas hay


una disminucin de la produccin lctea (Laguna, 2000; Bolin, 2003;
Rodrguez, 2000) y es frecuente la mastitis atpica con la ubre
flcida, leche amarillenta, viscosa y a veces teida con sangre. En
los casos graves hay ictericia. Los sntomas ms notorios son el
aborto y la hemoglobinuria que aparecen en algunos de los
animales. La susceptibilidad es independiente de la edad del animal
pero la severidad de la enfermedad es mayor en los terneros. Se
producen epizootias (varios animales enfermos) que se difunden
rpidamente con alta tasa de morbilidad. Probablemente el pasaje
rpido de las leptospiras entre los animales exalte la virulencia de
estas. Cuando la epizootia tiene curso lento la tasa de infeccin
inaparente vara de rebao a rebao. Los serovares ms frecuentes
en bovinos son pomona, hardjo, y grippothyphosa (Laguna, 2000).

67
Las infecciones con serovar Hardjo, generalmente resultan con
ningn signo o signos clnicos agudos relativamente leves, pero
produce un estado renal asociado con largos perodos de prdida
urinaria. La infeccin persistente en el tracto genital de machos y
hembras es tambin un rasgo prominente de infecciones por hardjo.
(Bolin, 2003).

Por otro lado, hay quienes describen, que las manifestaciones


clnicas que presenta el hospedador de leptospira se dividen en dos
formas diferentes a las anteriores; la forma crnica que afecta a
vacas preadas y causa abortos. Esta es la forma de leptospira mas
importante que causa perdidas econmicas. La forma aguda de
leptospira que afecta algunas veces a terneros, causando fiebres
altas de 41,5C (107F), causando depresin, membranas mucosas
plidas y con pequeas hemorragias, los terneros algunas veces
presentan anemia, lo cual resulta en incremento del ritmo cardiaco
y respiratorio, se presenta ictericia y usualmente la muerte (Agri-
facts; Floyd). Los animales viejos, son usualmente infectados y no
mueren, pueden presentar abortos e inflamacin en las
articulaciones, otros animales evidencian fotosensibilidad (Agri-
facts). En ocasiones se presenta una forma subaguda que es menos
severa que la forma aguda; presenta aborto y sndrome de la cada
de la leche, a veces la leche presenta cogulos de sangre
presentando leucocitosis, disminucin de la rumia, fiebre entre 39-
40,5 C y anorexia (Sandow & Ramrez, 2005).
Las personas infectadas con L. hardjo han sido reportadas,
asociadas con fiebres severas y moderadas, mialgias, dolor y
letrgia, anorexia y linfoadenopatia generalizada. Muchos pacientes
presentan esplenomegalia y/o hepatomegalia (Belmaker, et al.,
2004).

68
4.7.3 Sndrome pulmonar

El sndrome pulmonar es caracterizado por hemoptisis, pulmones


irregulares y falla respiratoria, tambin se presenta otras
manifestaciones hemorrgicas que Andamans llam Fiebre
hemorrgica Andaman. Hemorragias pulmonares severas han sido
descritas en China, Korea y Nicaragua, donde los pacientes mueren
(Belmaker, et al., 2004; Dutta & Christopher, 2005).

4.7.4 Manifestaciones no comunes

Las manifestaciones poco comunes de leptospirosis es hemorragia


con disfuncin renal no significativa o ictericia, y podra tratarse de
dengue o fiebre hemorrgica. Otras manifestaciones no comunes
son generalmente linfoadenopatias, faringitis y colecistis (Dutta &
Christopher, 2005).

4.7.4 Lesiones anatomopatolgicas

Las lesiones que aparecen en la Leptospirosis no son


patognomnicas, por lo que no puede basarse en ellas para el
diagnstico de la enfermedad. Tambin las lesiones poco
observables dependen del serovar implicado, as como de los
rganos y especies afectadas. El cadver animal revela ictericia,
necrosis de la piel, de los ollares, de la cavidad nasal y bucal.
En la necropsia se puede observar acmulo de un lquido rojizo en
el tejido subcutneo, hgado hipertrfico y palidez heptica, o color
amarillenta, vescula biliar llena, espesa y viscosa de color pardo o
verde oscuro, bazo de tamao normal o ligero color amarillento,

69
lesiones muy variables desde lesiones blanco amarillento en la
superficie o focos hemorrgicos en pulmn. El msculo cardaco se
presenta degenerado y en algunos puntos hay hemorragias. Los
riones son edematosos de color rojizo o pardo oscuro con nefritis
intersticial, lesiones necrticas e ictricas por toda la superficie,
tambin hemorragia. La vejiga, llena de orina turbia o rosada, los
ganglios tumefactos y las mucosas intestinales pueden estar
inflamadas.

En los fetos abortados se observa congestin generalizada y


deposiciones lquidas. Tambin se puede encontrar ictericia,
mastitis, fludo libre en cavidades corporales, lesiones petequiales
dispersas, edema perirenal, ndulos linfticos aumentados de
tamao, bilis de consistencia pastosa y color negrusco (Sandow &
Ramrez, 2005).

El reconocimiento clnico de las leptospiras es difcil porque las


leptospiras pueden afectar diferentes rganos, resultando en una
amplia variedad de presentaciones clnicas. Consecuentemente, la
leptospirosis es a menudo diagnosticada como influenza, meningitis
asptica, encefalitis, dengue febril, hepatitis o gastroenteritis (Effler,
et al., 2002).

4.8 DIAGNOSTICO

El diagnstico de los casos de Leptospirosis humana y animal


puede ser complicado o difcil, debido, principalmente, a las
caractersticas intrnsecas de las leptospiras y a la epidemiologa de
la pandemia. En la actualidad, se cuenta con un gran nmero de

70
tcnicas de laboratorio distintas, para su realizacin previa, es
conveniente aunar informacin sobre una serie de datos que puedan
orientar en el diagnstico.
Para ello, se debe tener en cuenta el diagnstico epidemiolgico,
clnico y de laboratorio.
Un diagnstico especfico y definitivo depende del aislamiento del
microorganismo, pruebas serologicas y una deteccin de DNA
especfico.

El diagnstico real debera basarse en el aislamiento, cultivo e


identificacin, pero las peculiares caractersticas de las leptospiras
tales como su difcil y lento crecimiento, hacen que esta metodologa
est indicada en aquellos casos que otros ms sencillos, como los
serolgicos, que carecen de confiabilidad (Sandow & Ramrez,
2005).
En el caso de los estudios epidemiolgicos, en los que se cuenta un
gran nmero de muestras y el objetivo es la obtencin de un
resultado de prevalencia, las tcnicas indicadas son, las serolgicas,
a pesar de que su interpretacin es subjetiva muchas veces.

4.8.1 DIAGNSTICO EPIDEMIOLGICO

En la aparicin de cuadros sintomatolgicos compatibles con un


caso de Leptospirosis bovina, se debe enfatizar en la poca del ao
en la que ha aparecido el brote, con especial atencin a los factores
climticos (precipitacin, temperatura y humedad relativa); aptitud
del rebao, manejo y estado sanitario de la explotacin incluyendo,
entrada de animales nuevos, manejo de la recra, alimentacin, si
hay monta natural o inseminacin artificial etc.; presencia de otras
especies domsticas (ovejas, perros, cerdos etc.); control de

71
animales silvestres portadores; si el rebao comparte el bebedero
con otros animales silvestres; edad y sexo de los animales
afectados; sintomatologas predominantes y caractersticas de los
signos clnicos; antecedentes de leptospiras; y si se realiza
vacunacin contra la Leptospirosis.

4.8.2 DIAGNSTICO CLNICO

Tiene un carcter presuntivo y se realiza fundamentalmente en los


signos y sntomas que presenten los bovinos (descritos
anteriormente). Adems las lesiones anatomopatolgicas
caractersticas de la enfermedad que aportan una gran contribucin.
Lo mas indicado para el diagnostico en caso de aborto es disponer
del feto abortado y someter las membranas circundantes y/o la
placenta a pruebas de laboratorio (Sandow & Ramrez, 2005).

4.8.3 DIAGNSTICO DE LABORATORIO

Las tcnicas bacteriolgicas son las ms complejas, pero brindan


resultados muy importantes, tales como: la observacin, el
aislamiento y la identificacin del microorganismo. El diagnstico
debe basarse en el conocimiento de la patogena del
microorganismo, as como de sus propiedades. Estos mtodos
pueden ser tcnicas indirectas, las cuales detectan anticuerpos
frente a las leptospiras y las tcnicas directas encaminadas a la
deteccin de leptospiras o sus antigenos y/o cidos nucleicos en los
tejidos y/o fluidos corporales (Rahim, et al., 2005).

Para el diagnstico de la leptospirosis, la eleccin de la muestra a


procesar es de vital importancia. En caso de intentar aislar el

72
microorganismo es necesario tener en cuenta el tiempo de la
enfermedad que tiene el paciente, de tal manera que ser necesario
obtener sangre para hemocultivo dentro de la primera semana de la
enfermedad y en caso que sobre pase ese tiempo, es necesario
realizar el aislamiento a partir de la orina. El cultivo del lquido
cefalorraqudeo, igualmente ser til en la primera semana de la
enfermedad; aunque suele ser difcil la sospecha clnica en esa
etapa (Laguna, 2000).

En caso de muestras procedentes de fetos, las tcnicas directas


estn ms indicadas que las indirectas, ya que el diagnstico
individual cobra mayor importancia. Para las muestras procedentes
de animales adultos, las tcnicas indirectas se utilizan ms
frecuentemente pues son ms sencillas de realizar y su costo es
menor. De los animales vivos, se enviar sangre y leche en fase
aguda de la enfermedad y orina en la crnica. De los fetos, los
rganos de eleccin son: hgado, rin, cerebro, glndula adrenal y
pulmn, as como cualquier fluido interno. En caso de animales
muertos y sacrificados, las muestras que se deben enviar son:
cerebro, mdula espinal, LCR y ojo cuando hay sntomas nerviosos,
y la mayora de los rganos parenquimatosos en los casos que
cursan con ictericia (hgado, rin, bazo etc.), la vejiga y su
contenido, humor acuoso, aborto y contenido estomacal.

Las muestras postmortem ms adecuadas son: rin (parte cortical),


hgado, bazo, as como sangre de corazn o liquido cefalorraqudeo,
humor acuoso, lquido peritoneal, cerebro, fetos abortados, semen y
leche materna; deben conservarse congelados en glicerol a partes
iguales.

73
Para propsitos epidemiolgicos, pueden obtenerse muestras de
agua y suelo, y en caso de epidemias o epizootias, sangre, rin,
hgado de animales capturados (roedores u otros animales
silvestres) (Rahim, et al., 2005).

4.8.3.1 Tcnicas indirectas.

Los mtodos serolgicos nos brindan un diagnstico en corto tiempo


y son capaces de detectar anticuerpos antileptospirales (que pueden
ser de la clase IgM e IgG), y constituyen las tcnicas de eleccin.
Adems, son las pruebas de laboratorio ms utilizadas en el
diagnstico de la leptospirosis, al igual que para la realizacin de
estudios epidemiolgicos. Los niveles de anticuerpos, aunque se
mantengan durante aos, alcanzan niveles tan bajos en animales
que no siempre se detectan, adems en los casos de infeccin por
serovares, un porcentaje de los animales pueden no presentar
respuestas de anticuerpos.
Para el diagnstico serolgico se han utilizado tcnicas como:
prueba de aglutinacin microscpica (MAT), prueba de
microaglutinacin microscpica con antigeno muerto (MSAT),
aglutinacin macroscpica, prueba hemoltica, fijacin de
complemento, ensayo inmunoenzimatico (ELISA) y PCR (Sandow &
Ramrez, 2005).

4.8.3.1.1 MAT (Tcnica de aglutinacin microscpica).

Es el mtodo serolgico de referencia a la hora de evaluar otras


pruebas para el diagnstico de Leptospirosis (De Azevedo, et al.,
2004; Kocabiyik & Cetin, 2004; Rahim, et al., 2005). Cornejo, et al.,

74
2001 y Dutta & Christopher, 2005, lo considera el gold estndar.
Esta tcnica esta basada en la formacin de agregados de bateras
que resultan de la adicin de una suspensin de leptospiras (suero)
(Yitzhaki, et al., 2004). Se emplea para detectar anticuerpos en
sueros de pacientes sospechosos o enfermos donde el suero del
paciente sospechoso o enfermo que reaccionan con antgenos vivos
(Laguna, 2000) de leptospiras de 10 das de crecimiento en medio
lquido de EMJH con enrequicimiento, y es el ms utilizado.
Adems, es la prueba oficial para la exportacin e importacin de
animales. El MAT fue ideado por Martn et al., en 1917 y en 1918,
Martn y Pettit lograron describir el fenmeno de aglutinacin y lisis
con suero. Desde entonces, el mtodo ha sido modificado y
mejorado por Schffner y Mochtar, 1926; Borg-Peterson y Fagroeus,
1949; Wolff, 1954; Carbrey, 1960; Galton et al., 1965; Cole et al.,
1973; Sulzer y Jones, 1973. Estos autores trataron de estandarizar
factores como: tiempo y temperatura de incubacin, el punto de
corte, la concentracin del antgeno y la edad de siembra (Rahim, et
al., 2005).

El mtodo consiste en la utilizacin de un suero de conejo con


anticuerpos antileptospira, el cual se hace reaccionar con plasma
del paciente y se observa la precipitacin. Se considera positiva la
mxima dilucin a la cual se aglutina el 50% o ms del antgeno,
observado en un campo de 100x en microscopio de campo oscuro.
Un ttulo mayor de 1:800 compatible clnicamente, certifica el
diagnstico. Un ttulo aislado de 1:200 con cuadro compatible se
consideran positivos y ttulos de 1:100, se consideran probables
(Cornejo, et al., 2001; Lunn, et al., 2000; Ebrahimi, et al., 2003;
Hoyos, et al., 1998). La seroconversin tarda se presenta en un
10% de los pacientes, pudiendo llegar a tardar 30 das desde el

75
inicio del cuadro. Existe reaccin cruzada con antigenos de
legionella, sfilis y enfermedad de Lyme (Cornejo, et al., 2001).

Antiguamente, era conocido como la prueba de aglutinacin lisis por


la formacin de lisis (Schffner y Mochtar, 1927) o lisis de glbulos
(van Thiel, 1948), pero Borg-Peterson y Wolff et al., (1954)
demostraron que no se produca una lisis sino una aglutinacin. En
la actualidad, para obtener una adecuada sensibilidad, se
recomienda utilizar cepas representativas de todos los serogrupos
presentes en un lugar determinado concreto y de la especie objeto
de estudio. Tambin hay reportes de una sensibilidad y especificad
de MAT hasta 92 % y 95 %, respectivamente, con un valor
predictivo positivo de 95 % y negativo de 100 %.
Para la realizacin de la prueba se utilizan cultivos de cuatro a ocho
das de edad cuya suspensin produzca una transmitancia del 60-70
% en un espectofometro a 400nm de longitud de onda. Adems, es
necesario determinar el punto de corte, ttulo por debajo del cual es
considerado que la aglutinacin es debido a reacciones
inespecficas. Los anticuerpos leptospirales aparecen dentro de
pocos das despus de la infeccin y persisten por semanas o
meses y en varios casos hasta por aos (Rahim, et al., 2005). El
ttulo de anticuerpos del suero ser la dilucin ms alta en la cual
encontramos el 50 % de aglutinacin. El punto de corte ms
recomendado es el ttulo 1:100 en bovino, pero ste, no siempre
resulta adecuado, principalmente en infecciones por serovar hardjo.
En caso de abortos en bovinos 1:40 se considera diagnstico,
aunque el porcentaje de fetos que presentan reaccin de inmunidad
humoral es bajo (Sandow & Ramrez, 2005). Para L. interrogans
serovar pomona, se han detectado niveles de anticuerpos desde
1:100 a 1:6.400. (Godnez, et al., 1999).

76
En varias ocasiones se reportan resultados falsos negativos, se
identifica incorrectamente el serogrupo, o se identifican muestras
positivas para cualquier serogrupo; igualmente se reportan
variaciones en los ttulos en particular en muestras con un serovar
especifico; existen varios factores que pueden contribuir a un error
en el diagnostico del MAT como, contaminacin y deterioro del
antigeno (Chappel, et al., 2004).

Es comn obtener resultados de serologias negativas en los


primeros 7-10 das despus de la infeccin y es necesario repetir la
prueba en 2-3 semanas para confirmar el diagnstico (Dutta &
Christopher, 2005). En la historia de la vacunacin es til interpretar
los ttulos; aunque los ttulos vacnales pueden ser muy altos
inmediatamente despus de la vacunacin, estos declinan
rpidamente. Los ttulos vacnales pueden ser tan altos como 1:400
en animales evaluados despus de doce semanas de la vacunacin
(Annimo, 2000; etinkaya, et al., 2000).
Al igual que otras pruebas serologicas, para diagnosticar una
infeccin individual mediante MAT, se requiere estudiar dos
muestras pareadas de 7-14 das de intervalo de la primera y si se
observa que ha habido seroconversin, se considera de valor
diagnstico un cambio en el titulo de al menos, cuatro veces el titulo
inicial. Es una prueba principalmente de rebaos, pues la obtencin
de ttulos individuales frente a las leptospiras, se considera poco
significativo. A pesar de ser la prueba ms recomendada y
extendida, presenta una serie de desventajas: no distingue
anticuerpos vacunales de los de infeccin, resulta difcil su
estandarizacin ya que su valoracin es subjetiva, requiere el
mantenimiento de cultivos de leptospiras y no siempre detecta a los
animales infectados, en especial cuando el serovar implicado es L.

77
hardjo, el cual es poco antignico (Sandow & Ramrez, 2005).
Igualmente, Veloso, et al., 2000., describen que este mtodo falla en
la deteccin de anticuerpos durante las infecciones crnicas o en la
fase temprana de la enfermedad.

Un estudio realizado en 3 provincias de Cuba, donde se aislaron 18


cepas de pacientes con leptospirosis humana, se conservaron en
medio Fletcher, cada cepa fue cultivada en medio de cultivo EMJH e
incubada a 28 o 30 C y observada al microscopio de campo oscuro
hasta una concentracin aproximada de 1-7 x 108 clulas/ml. Las 18
cepas fueron seroagrupadas por la tcnica de aglutinacin
microscpica enfrentndolas a una batera de antisueros
policlonales pertenecientes a 8 serogrupos de referencia1 y despus
fueron enfrentadas a varios anticuerpos monoclonales (AcMs), en
correspondencia al serogrupo en el que haba sido ubicada cada
cepa (Victoria, et al., 2002); Igualmente en un estudio diferente, se
utiliz este mtodo siguiendo el protocolo propuesto por la Sociedad
internacional de leptospirosis; llevando a cabo una preparacin
previa de los antgenos de leptospira (L. pomona, L. canicola, L.
bratislava, L icterohaemorrhagiae, L. grippotyphosa). Estas cepas se
mantuvieron en medio base EMJH para leptospira, se subcultivaron
cada ocho das y se incubaron a 28C. Los antgenos se diluyeron
en solucin salina tamponada hasta conseguir una dilucin de 1:5.
Los sueros se diluyeron hasta obtener la dilucin inicial de 1:25.
Para el control negativo de cada antgeno se tomaron tubos y se
adicionaron 0.1 ml de solucin salina tamponada y 0.1 ml de la cepa
a confrontar previamente diluida. De cada uno de las diluciones se
tom con un asa una gota y se coloc sobre el portaobjeto,
incluyendo un control negativo. Se observ en el microscopio de
campo oscuro, con un objetivo de 10X. El grado de aglutinacin y/o

78
lisis, se interpret tomando como referencia la cantidad de
leptospiras presentes en el control negativo. Se reconoci una
reaccin como positiva s tena el 50% o ms de leptospiras
aglutinadas o lisadas. Una reaccin negativa fue aquella igual al
control negativo, en nmero aproximado de leptospira no
aglutinadas ni lisadas. Los sueros positivos fueron sometidos a
diluciones dobles seriadas hasta alcanzar el ttulo correspondiente
en la ltima dilucin positiva. Las diluciones obtenidas alcanzaron un
rango entre 1:50 1:6400. Se consideraron positivos los sueros que
mostraron ttulos >1:100. Para el anlisis de la significanca de las
diferencias encontradas entre las seroprevalencias se utiliz la
prueba de j cuadrado para proporciones (Almenteros, et al., 2004).

En un estudio realizado en Venezuela se caracterizaron linfocitos B,


en bovinos con ttulos de anticuerpos contra la leptospirosis
superiores a 1/100, empleando un suero hiperinmune anticadenas
livianas de lgG, marcado con isotiocinato de fluorescena, este
procedimiento se llev a cabo, gracias al implemento de la tcnica
MAT; como antgeno; se emplearon los serovares:
icterohaemorrigiae, canicola, castellonis, pomona, grippotyphosa y
hardjo, los cuales se mantuvieron viables en medio liquido. La
concentracin utilizada fue de 1 x 1 06/ml de cada Serovar como
antgeno, la cual se determin por contaje directo en microscopio de
campo oscuro. Se emplearon volmenes iguales de antgeno y
diluciones de suero y el material se incub entre 30 minutos y 1
hora, a temperatura ambiente, y se hizo la lectura en microscopio de
campo oscuro. (Aidorevich & Soyano, 1991).

79
4.8.3.1.2 Prueba de Aglutinacin Microscpica con Antgeno
Muerto (MSAT)

Utiliza leptospiras formoladas y centrifugadas, resuspendidas a una


cierta densidad estndar, con un pool de antgenos de varios
serogrupos. La aglutinacin que se produce es semicuantitativa y
puede leerse a simple vista. Esta reaccin es menos especfica que
MAT, menor nivel de ttulos obtenido, mayor reaccin cruzada, los
antigenos son estables a 4 C por lo menos un ao, es especfica de
especie y de la misma forma que MAT, no diferencia reaccin entre
anticuerpos de la infeccin reciente y tarda, pero tiene una buena
reaccin temprana de la enfermedad.

4.8.3.1.3 Fijacin del Complemento (FC).

Es una prueba gnero-especfica, se considera tan fiable como el


MAT para la deteccin de animales con leptospiruria, pero, detecta
infeccin reciente; es til en la deteccin de grandes cantidades de
sueros ya que puede semiautomatizarse. Es una herramienta
epidemiolgica para diagnstico rpido, menos laboriosa que el
MAT. Las desventajas son las sustancias anticomplementarias del
suero, la corta vida e inestabilidad del antgeno, no permite la
diferenciacin de serovares y no detecta niveles bajos de
anticuerpos (Sandow & Ramrez, 2005).

4.8.3.1.4 ELISA

Las deficiencias que presenta el MAT han obligado a los cientficos


a emplear esta tcnica que ayude a la deteccin de anticuerpos
tanto en tanque de leche, como en el suero. Es capaz de detectar la

80
IgM (Rahim, et al., 2005; Laguna, 2000; Dutta & Christopher, 2005),
durante la primera semana de la enfermedad y la deteccin tarda
de IgG, lo cual permite diferenciar infecciones recientes de las
pasadas. La deteccin de anticuerpos especficos IgM con una sola
muestra es confirmatoria de una infeccin reciente por leptospiras.
Adems, se considera ms sensible que MAT, es fcil de
estandarizar, los antgenos se pueden almacenar durante meses, no
tiene ningn riesgo para los tcnicos y pocas reacciones cruzadas,
tampoco diferencia los anticuerpos vacunales de las infecciones. A
pesar de que es una prueba muy eficaz, aun no est considerada
como prueba oficial.

El mtodo de ELISA da una sensibilidad y una especificidad del 85%


y 88.8% respectivamente (Naigowit, et al., 2000; Cspedes, et al.,
2002). En un estudio, la prueba de diagnstico rpido IgM especfica
dot ELISA ha mostrado ser sensible y especfica para el
serodiagnstico de la leptospirosis aguda. Este examen no es caro,
es simple, rpido de realizar, necesita de volmenes mnimos de
antgenos de leptospira muerta y es fcil de adaptar al trabajo de
campo. En ese estudio al compararse con la aglutinacin
microscpica su especificidad, fue de 81% (Laguna, 2000), en otro
se encontr que esta tcnica tenia un 100% de sensibilidad y un
93% de especificidad (Dutta & Christopher, 2005).

4.8.3.1.5 Aglutinacin macroscpica

Se desarroll para evitar los problemas derivados del mantenimiento


de cepas vivas de leptospiras en el laboratorio. Pocos autores la

81
recomiendan debido a su falta de sensibilidad y porque no es capaz
de determinar el serovar.
En la aglutinacin macroscpica se utilizan antgenos muertos y es
til para la evaluacin masiva (Laguna, 2000).

4.8.3.1.6 Aglutinacin en microcpsula

Es una tcnica que se present como posible opcin a las utilizadas


habitualmente. En ella, se utiliza antgeno leptospiral transportado
en microcpsulas de un polmero sinttico. Los autores la
consideran como una prueba muy especfica y sensible. En una
evaluacin internacional fue ms sensible que MAT o ELISA-IgM en
la fase aguda de la enfermedad, pero no puede detectar infecciones
causada por otros serovares. Se puede trabajar sin la modificacin
del suero de otra especie animal.

4.8.3.1.7 Hemoaglutinacin indirecta (HA)

Es una prueba serolgica gnero-especfica de alta sensibilidad y


solamente detecta las IgM. Utiliza eritrocitos de ovejas o del grupo
sanguneo O humano. A pesar de que siempre se ha considerado
de utilidad, no ha llegado a desplazar al MAT y de hecho, se utiliza
de manera paralela a l. Resulta de valor para la limpieza y
separacin de sueros y para la deteccin de infecciones recientes.
Esta tcnica revel una sensibilidad y especificad de 92 % y 95 %
comparada con MAT respectivamente.

82
4.8.3.2 Tcnicas directas

La demostracin de la presencia de Leptospiras, o sus componentes


en la sangre, tejidos y/o leche de animales con signos clnicos es de
gran valor diagnstico.

4.8.3.2.1 Observacin en microscopio de campo oscuro

Este mtodo se realiza para la observacin de leptospiras en los


fluidos orgnicos. Es difcil debido al gran nmero de artefactos que,
por su parecido con las leptospiras, pueden crear confusin.
Adems precisa que haya un gran nmero de microorganismos en
las muestras.

4.8.3.2.2 Tincin Argnica

Dentro de este grupo podemos considerar diferentes tcnicas,


como: la tcnica de Warthing-Starry y sus modificaciones y la
tcnica de Steiner y Steiner. Se utiliza para la demostracin de
Leptospiras en los rganos de animales presumiblemente muertos
por leptospiras. La presencia de leptospiras en fetos abortados y
mortinatos son indicadores claros de que es una infeccin activa en
el feto y crnica en la madre, considerado de valor diagnstico.
Adems de su baja especificidad y sensibilidad, presenta las
mismas inconveniencias que la tcnica anterior.

4.8.3.2.3 Tcnicas de tincin Inmunohistoquimica


Tienen baja sensibilidad, por lo que son poco adecuadas para el
diagnstico de portadores crnicos, lo que depende del nmero de
microorganismos en la muestra.

83
4.8.3.2.3.1 Inmunofluoresencia
Esta tcnica consiste en examinar muestras bajo luz ultravioleta.
Casi siempre se utiliza en el diagnstico para los casos de abortos y
la presencia de Leptospiras en sedimentos de orina. Su mayor
desventaja es que requiere la produccin de antisueros policlonales
de buena calidad y necesita la utilizacin de microscopio de
fluorescencia (Sandow & Ramrez, 2005). Puede detectar
leptospiras en los tejidos o fluidos del feto o de animales infectados.

4.8.3.2.3.2 Inmunoperoxidasa
Es ms rpida y asequible que la anterior ya que no precisa de un
microscopio de fluorescencia.

4.8.3.2.4 Tcnicas de deteccin y estudio de cidos nucleicos:


Son pruebas relativamente modernas que aun precisan ms
estudios sobre su efectividad y utilidad. Comprende: marcado con
sondas de ADN, hibridacin de ARN marcado con radio y PCR con
mayor efectividad en la orina (Sandow & Ramrez, 2005; Lucchesi,
et al., 2004). La reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) ha sido
utilizado para la deteccin de leptospiras y otros microorganismos
presentes en la orina (Veloso, et al., 2000), en sangre, LCR y humor
acuoso (Dutta & Christopher, 2005). El xito del PCR depende en
cantidad al DNA, este debe ser libre de contaminantes y nucleasas
que daan el proceso de amplificacin. La adicin de tiocianato,
cetiltrimetil bromuro de amonio o extraccin de fenol del espcimen,
son las opciones disponibles (Veloso, et al., 2000).
Varios estudios han encontrado que se ha incrementado el uso del
mtodo de PCR en el diagnstico de leptospirosis causado por el
bajo crecimiento de microorganismos contaminantes en esta

84
tcnica; un consenso general a definido como una alternativa el
PCR con amplificacin del gen 16S rRNA para identificar bacterias
patgenas.

Se ha utilizado en la secuencia de nucletidos el gen 16SF (5-


CTCACCGTTCTCTAAAGTTCAAC-3) y 16SR (5-
TGAATTCGGTTTCATATTTGC-3),el gen flaB L-flaB F1(5-
TCTCACCGTTCTCTAAAGTTCAAC-3) y L-flaB R1 (5-
CTGAATTCGGTTTCATATTTGCC-3); los primers FlaB se han
tomado como referencia de la secuencia nucletida del Banco de
genes. El producto de la amplificacin de los genes 16S rRNA y flaB
son 300 y 790 bp, respectivamente (Wangroongsarb, et al., 2005).

4.8.3.2.5 Aislamiento

Para muchos autores, es la tcnica ms sensible para el diagnstico


de leptospiras, adems es la que confirma la presencia del
microorganismo, tanto en casos agudos como crnicos, a pesar de
que requiere mucho tiempo y de laboratorios especializados.
En la mayora de laboratorios de diagnstico no se realiza esta
prueba porque las leptospiras tienen una naturaleza frgil, por
costos y por la complejidad en los medios de aislamiento, adems,
por el prolongado periodo de incubacin (Rahim, et al., 2005; Lunn,
et al., 2000).

La inoculacin en animales de experimentacin puede considerarse


una forma especial del aislamiento y es considerada la tcnica ms
sensible por algunos cientficos. Tambin, existen otros mtodos
pero no de amplio uso en el mundo como: Prueba Hemoltica (HL),

85
Contrainmunoelectrforesis (CIE), Inmunoabsorcin Magntica,
Hibridizacin de ADN, Absorcin de antigeno inmunomagnetica etc.
(Sandow & Ramrez, 2005).
Tambin se realizan aislamientos de este microorganismo,
manejando muestras de orina infectadas por leptospira y realizando
un aislamiento del agente en medios de cultivo bsicos como tween/
suero de bovino + albmina, con suero de conejo, inhibidores y
0.15% de agar (Schnberg, et al., 2005). Tambin se utilizan medios
semislidos como el de Fletcher, o en medio de Ellinghausen-Mc
Cullogh-Johnson-Haris (EMJH) enriquecido con albmina y cidos
grasos. Esta tcnica es difcil y puede demorar hasta 16 semanas.
La sensibilidad del hemocultivo slo alcanza el 50% de los casos
(Cornejo, et al., 2001; Dutta & Christopher, 2005).

Algunos autores han recomendado la utilizacin de antibiticos


inhibidores de contaminacin en los medios de cultivo, pero estas
son sustancias inhibitorias que igualmente tienen un efecto
perjudicial en la fase de multiplicacin de las leptospiras (De
Freitas, et al., 2004). Thiermann en 1984, declara que existen
varios factores importantes para el aislamiento de leptospiras como
son asepsia en el material colectado, rpido procesamiento, medio
de cultivo con antibiticos apropiados y selectivos.

4.8.4 DIAGNSTICO DIFERENCIAL

Para llegar al diagnstico diferencial, es necesaria una buena


anamnesis que abarque los antecedentes particulares y/o animales
enfermos de 15-20 das anteriores a la presentacin de la
enfermedad. Dada las diversas presentaciones, se deben diferenciar

86
por especies, segn las manifestaciones clnicas predominantes
(Sandow & Ramrez, 2005).

En bovinos se deben diferenciar con otros cuadros que cursan con:


hemoglubinuria, hematuria, hemlisis, abortos, mastitis y
disminucin de la produccin lctea como: anaplasmosis,
babesiosis, pasteurellosis, brucelosis, listeriosis, vibriosis,
trichomoniasis, toxoplasmosis, IHBB., intoxicacin por cobre,
hemoglubinuria posparto y trastornos alimentarios (Sandow &
Ramrez, 2005).

Cuando los pacientes se presentan con ictericia durante o despus


de una enfermedad aguda febril, la leptospirosis se debe diferenciar
de otros casos de ictericia febril como, malaria, septicemia, hepatitis
y hepatitis tifoidea.
Los altos niveles de bilirrubina como en la enfermedad de Weil con
una elevacin moderada de transaminasas se debe diferenciar de
hepatitis viral, ya que esta se presenta con grandes elevaciones de
transaminasas (Dutta & Christopher, 2005).

En el departamento de Crdoba, as como en Colombia, la


leptospirosis es una zoonosis rara vez diagnosticada,
probablemente por falta de conocimiento de la enfermedad o
ausencia de mtodos diagnsticos de la infeccin por Leptospira
(Njera, et al., 2005). El instituto colombiano agropecuario (ICA), es
el encargado de diagnosticar y notificar la presencia de leptospirosis
bovina en Colombia, all utilizan la tcnica de microaglutinacin,
acompaada de cultivo y microscopia de campo oscuro, se notifica
que prevalece L. hardjo en zonas con clima calido y templado, como
Caquet, Tolima y Crdoba.

87
4.9 CONTROL Y TRATAMIENTO

Para que las medidas a tomar sean efectivas para el control de la


enfermedad en cuestin, es imprescindible la identificacin lo antes
posible de los animales afectados, as como el serogrupo y/o
serovar actuante, puesto que la presencia de un serovar u otro
depende principalmente de la existencia de su hospedero de
mantenimiento especfico y segn sea el hospedador, las medidas
de control sern diferentes (van der Hoeden, 1958; Ellis, 1994;
Heath y Johnson, 1994).

4.9.1 Control
Desde el punto de vista epidemiolgico, la Leptospirosis es una
enfermedad difcil de controlar ya que el microorganismo se puede
albergar en el rin y ser eliminado en la orina de muchos animales,
perpetundose entre ellos el estado de portador. Sin embargo, se
deben realizar esfuerzos para conocer la prevalencia de serotipos
especficos en una determinada poblacin y describir los focos de
contagio a fin de evitar aparicin de nuevos casos (WHO, 1982).

4.9.1.1 Control inmune

Dentro de la inmunoprofilaxis se puede considerar tanto la


vacunacin como la inmunizacin pasiva con suero hiperinmune
(Michna, 1970; Anonimo. 2000). La vacunacin es una prctica muy
extendida en muchos pases, siendo, para algunos autores, la mejor
herramienta de control (Ellis, 1994). Sin embargo, presenta una
serie de inconveniencias en primer lugar: las vacunas comerciales
son bacterinas (Ellis, 1996) y no proporcionan inmunidad cruzada
entre serovares distintos y solo permiten una proteccin limitada

88
frente a cepas distintas de un mismo serovar. Estos productos
pueden aumentar su respuesta si se les adicionan adyuvantes, los
cuales son sustancias que estimulan la respuesta inmune y su
duracin. Asimismo, la desparasitacin de bovinos con productos
que contengan levamisol, potencializa la respuesta inmune humoral
en animales inmunosuprimidos. (Brunner & Muscoplat, 1980;
Vanselow, 1987). Los serovares y las cepas varan entre pases, por
lo que la proteccin ofrecida por las vacunas elaboradas con cepas
de otro pas o regin, en otras regiones puede ser poca eficaz
(Thiermann, 1984). En segundo lugar, diversos estudios sobre las
vacunas existentes, han demostrado que tanto vacunas
monovalente, bi y hasta pentavalente, no evitan la infeccin, la
migracin al tero y oviducto ni la persistencia de la infeccin renal y
por con siguiente, tampoco evitan la leptospiruria ni el nacimientos
de algunas cras dbiles y mortinatos (Bolin et al., 1989; Bolin et al.,
1991).

A pesar de estas limitaciones, la vacunacin sigue siendo parte


importante del control en los rebaos (Heath & Johnson, 1994). Little
et al., (1992) demostraron que con un programa de vacunacin de
todo un rebao (bovino) durante cinco aos, es posible el control de
las infecciones por L. hardjo y su eliminacin del rebao. Tambin,
se considera que el calendario de vacunacin debe ser al principio
del perodo seco y en el parto, puede disminuir las prdidas
econmicas por abortos (Hanson, 1977; Heath & Johnson, 1994).
Primera vacunacin: se vacunan todos los animales del rebao,
machos, hembras y terneros. Segunda dosis a los 21 das de la
primera. Revacunacin en forma anual o semestral de acuerdo al
productor. En machos se debe vacunar antes de entrar al servicio
para proteger al rodeo. En las hembras se debe vacunar antes del

89
servicio y previo al parto, para los terneros hay que vacunar a los 2
meses de edad y luego revacunar en dependencia del productor
(Faine, 1982; WHO, 1986; Ellis, 1992; Bielansk & Surjballi, 1998;
Bolin, 2003).
La otra variante es la vacunacin total del rebao y luego tratar con
dihidroiestreptomicina 2 mg/kg. a todas las vacas preadas (South &
Stoenner, 1974; Bolin, 2003). Tambin hay programa de vacunacin
cuando se que aplica en los cerdos y perros.

En los seres humanos las vacunas se aplican de modo ms


restrictivo, a las poblaciones de alto riesgo y/o en zonas endmicas.
La inmunizacin casi siempre en humano utiliza vacunas
polivalentes en trabajadores de arrozales, caeros, etc. en China
(Chen, 1985)
En Cuba se utiliza una vacuna trivalente de pomona, canicola e
icterohaemorrhagiae (Martinez et al., 1998).En los ltimos aos en
Cuba, se ha utilizado la vacuna Vex-Spiral en dos dosis de intervalo
de 6 semanas (Ginebra, 2001). La quimioprofilaxis mediante la
aplicacin de doxiciclina en la dosis de 200 mg una vez a la semana
durante 4-6 semanas, ha tenido efectividad del 95 % en los adultos
de alto riesgo (Hickey, 2002) y tambin en los animales, sobre todo
en ganado porcino en combinacin con la vacuna.

La vacuna se prepara a partir de Leptospira interrogans muerta, sta


considerada en algunos pases, produce activa inmunizacin contra
Leptospira icterohaemorrhagiae en personas con alto riesgo de
contraer la enfermedad. (Martindale, 1993). La vacuna evaluada en
Cuba recientemente presenta una efectividad del 97% con una
prevencin de 8 sobre 10 casos y con muy bajos efectos adversos.
(Marinez, et al., 2000).

90
4.9.1.2 Control higinico sanitario

El control higinico-sanitario es esencial para la prevencin de la


leptospirosis en una poblacin humana y animal, pero siempre ha de
formar parte de un sistema general de control, junto con la
vacunacin y el tratamiento, ya que ninguna de estas medidas son
eficaces por separado (Ellis, 1994). Las medidas higinicas-
sanitarias deben basarse en dos puntos esenciales: el control de
hospedadores silvestres y el control de hospederos domsticos
(Ellis, 1994; Heath y Johnson, 1994). Tambin los factores
ecolgicos que influyen en la epizootiologa de la Leptospirosis
como: densidad alta de poblacin animal, su migracin natural o
planeada, las caractersticas geogrficas, agronmicas y
meteorolgicas del ambiente y los cambios estacinales (Ginebra,
2001).
Algunas de las medidas principales recomendadas por varios
autores son:
Educacin y difusin a las poblaciones en especial las de alto
riesgo sobre la forma de contagio y como evitar la enfermedad.
Proteccin individual de los trabajadores como: ganaderos,
trabajadores de alcantarillados, obreros agrcolas veterinarios,
arrozales, caeros etc. mediante el uso de calzado y vestimentas
apropiadas (botas, delantales guantes, antiparras, tapaboca) segn
la tarea que desempeen.
Higiene personal y del ambiente domstico, se debe impedir el
ingreso de animales al interior de los domicilios as como a los
galpones de produccin o almacenamiento de alimento se debe
hacer hincapi en la higiene y desinfeccin en los locales de ordeo
etc., con hipoclorito de sodio.

91
Buen drenaje o relleno de terrenos bajos o fcilmente inundables
de residuos lquidos y agua pluviales.
Se debe prohibir tanto a la poblacin humana como animal beber o
baarse en agua de ros, charcos y lagunas posiblemente
contaminados con el agente.
Disposicin, colecta y eliminacin de los residuos (recipientes
apropiados, colecta permanente y coordinada con la poblacin,
relleno sanitario correcto y en condiciones).
Control ecolgico de la poblacin animal salvaje.
Aislamiento de los animales domsticos.
Tratamiento especifico de personas y animales enfermos segn
los esquemas teraputicos.
Drenaje, canalizacin de cursos o espejos de agua que tienden a
provocar inundaciones o que representen posible focos de esta
enfermedad.
Realizar estudios epidemiolgicos para tener nocin sobre
prevalencia de la enfermedad en la especies as como para saber
que serogrupo o serovar esta circulando.
Desratizacin general de la explotacin y construccin de edificio a
prueba de roedores.
Reducir el pastoreo conjunto con otras especies domsticas y con
otros rebaos.
Mantener una poltica de ciclo cerrado y en su defecto someter a la
cuarentena estricta a los animales de reposicin que entran nuevos
en la explotacin.
No separar las cras de las madres despus de parto (bovino).
Evitar el uso de machos enfermos para la monta directa.
Las mascotas deben vacunarse anualmente.
Realizar informe anual sobre la situacin de la enfermedad en el
territorio.

92
(Faine, 1982; OIE., 1992; WHO., 1993; Ellis, 1994; Heath &
Johnson, 1994; Fenga et al., 2000; Acha & Syfres, 2001; Lyford &
Herrera, 2002; Willat, 2002; Heymann, 2005).

4.10 TRATAMIENTO

El objetivo primordial para el tratamiento contra la infeccin por


Leptospirosis, es controlar la infeccin antes del dao irreparable
que puede ocurrir en el hgado y rin. Prcticamente todos los
antimicrobianos tienen efecto sobre la infeccin por leptospiras,
excepto de las sulfanamidas y el cloranfenicol en animales (van der
Hoeden, 1958). Los antibiticos ms recomendados son:
dihidroestreptomicina, penicilina, estreptomicina, oxitetraciclina,
tetraciclina, etc. (Michna, 1970; South & Stoenner, 1974; Amatredjo
& Campbell, 1975; Thiermann, 1984; Ellis et al., 1985; Instituto,
1997; Labiofam, 1997; Fajardo et al., 1998; Guijarro & Calvo, 1999;
Merck, 2000).

4.10.1 En bovinos
Se administran los siguientes antibioticos:
Dihidriestreptomicina: 25mg/kg./5 das /IM.
Estreptomicina: 12-25mg/kg./ dos veces al da por 3 das / IM.
Estreptomicina: 25mg/Kg. una sola vez durante la fase de
leptospiruria.
Clorhidrato de tetraciclina: 11mg/kg./5 das
Tetraciclina: 15-25 ml/kg./4 das / IM.
Oximicina: 100g/5 das / IM.
Transfusin sangunea 5-10 L/450kg en caso de anemia hemoltica.

93
Adems de los antibiticos, en dependencia de la gravedad y
sintomatologa se admite la aplicacin de: transfusin sangunea,
analgsicos, sueros hiperinmunes y gammaglobulinas.
En bovinos, un trabajo relativamente reciente propone la amoxiclina
como opcin a la dihidroestreptomicina en el tratamiento de ganado
infectado con L. hardjo (Smith et al, 1997).

La estreptomicina es uno de los dos primeros antibiticos utilizados


para la terapia de leptospirosis y es considerada, una de las
mejores opciones de tratamiento. En un estudio realizado por Alt, et
al., 2001, utilizando cuatro esquemas de tratamiento para la
leptospirosis en 42 bovinos infectados, concluyeron, que la
asociacin entre la dihidroestreptomicina y la penicilina G, mejora el
tratamiento; igualmente que otros antibiticos como la
oxitetraciclina, tilmicosina y ceftiofur. (Girio, et al., 2005)

4.10.2 En humanos
Tomando en cuenta que la Leptospirosis humana, tiene una
evolucin clnica sumamente variable y suele ser una enfermedad
fatal cuando se tarda en su reconocimiento temprano. Resulta difcil
evaluar con precisin la eficacia del tratamiento antimicrobiano; por
lo que de considerar estos elementos de gran importancia en su
manejo (Grell et al., 1971; Kobayashi et al., 1984; Tan et al., 1986;
Muthusethupati & Shivakumar, 1987; Dupont et al., 1997; Ginebra,
2001).

Existe un grupo de antibiticos con grado variable de efectividad


contra la leptospira. Los ms importantes son: penicilina, doxiciclina,
tetraciclina, eritromicina, ampicilina, amoxacilina y estreptomicina.
De estos, la penicilina y la doxiciclina son los ms utilizados y

94
aceptados en la prctica clnicas (Okuzaki & Ringen, 1975; McClain
et al., 1984; Alexander & Rule, 1986; Cornejo, et al., 2001). El
tratamiento siempre se indicara de inmediato y en correspondencia
con los sntomas que presente el paciente.

Las cefaloporinas de tercera generacin (cefotaxina, ceftizoxina)


han tenido buenos resultados en Cuba (Ginebra, 2001). Tambin
algunos autores proponen la misma cefaloporina un gramo por va
endovenosa de cada 4 horas durante las primeras 72 horas y
continuar posteriormente con un gramo diario por va intramuscular
durante 7 das (Russell, 1958; McClain et al., 1984; Pea, 1999;
Rusell et al., 1999; Guidugli et al., 2002; Hickey, 2002).

95
5. DISCUSION

El presente trabajo ha permitido conocer una enfermedad con gran


impacto econmico y zoonotico como es la Leptospirosis bovina,
adems de un breve resumen de esta enfermedad en otras
especies, especialmente en el hombre; as, se da a conocer, la
especie de leptospira que ataca a los bovinos como es la Leptospira
hardjo, la presencia de este patgeno en el organismo se manifiesta
con trastornos reproductivos como infertilidad, aborto, mortinatos y
agalactia, cursando de forma septicmica principalmente en los
animales jvenes, estos aspectos clnicos representan perdidas
econmicas importantes para el sector ganadero por la baja
produccin lctea y la salud del animal, as, impidiendo la
comercializacin; por esta razn, la leptospirosis debera ser una
enfermedad de mayor atencin no solo para el sector ganadero,
sino tambin, para el estado (instituto colombiano agropecuario
(ICA), encargado de la vigilancia de la salud animal).

De manera general las prdidas econmicas ocasionadas por la


leptospirosis no han sido cuantificadas, en parte por las dificultades
para el diagnstico de la enfermedad y por la subestimacin que se
tiene frente a esta enfermedad. Por su carcter zoontico, a los
efectos sobre la produccin animal se le adiciona un importante
impacto en la salud pblica. El hombre no acta como hospedador
de mantenimiento de ningn serovar, por lo que la infeccin ser
siempre accidental, siendo el serovar con mayor frecuencia
implicado el icterohaemorrhagiae, y tambin, habituales infecciones
por pomona y hardjo.

El diagnstico puede confirmarse con pruebas serolgicas como, la


tcnica de microaglutinacin (MAT), considerada el mtodo gold

96
estndar para la deteccin de leptospirosis, ya que es la mas
sensible y especifica si se utilizan los serovares apropiados, sin
embargo, tiene limitaciones para su interpretacin porque es posible
encontrar falsos positivos y la posibilidad que exista reacciones
cruzadas con los serovares; otros mtodos serolgicos son la
tcnica de ELISA y PCR, pero estas tcnicas adems de costosas,
exigen que las muestras con leptospiras no presenten otros
microorganismos contaminantes; por lo tanto la tcnica de
predileccin para el diagnostico de leptospirosis es la MAT, que es
la prueba internacional aceptada para la identificacin de dicha
enfermedad. Es importante la utilizacin del laboratorio como
herramienta fundamental de diagnstico, para el diseo efectivo de
estrategias de control sobre la base de una correcta interpretacin
de los resultados, por lo tanto el diagnostico de esta enfermedad no
debera basarse solo en la utilizacin de mtodos serolgicos, sino
tambin, en tcnicas como aislamiento de la bacteria, microscopia
de campo oscuro, tcnica de ELISA; adems, tener en cuenta la
procedencia del animal, verificar si este vive en zona de riesgo,
observar el medio en el que habita, su alimento y consumo de agua,
presencia de roedores, etc.; es decir, integrar todo tipo de
diagnostico para la confirmacin y veracidad de los resultados.

En el caso que se presente una sospecha de leptospirosis se debe


notificar inmediatamente al superior encargado de la vigilancia de
salud publica y animal, y se debe investigar la fuente de infeccin,
como agua, fuentes industriales u ocupacionales; pero lo mas
importante es la educacin sanitaria del personal en riesgo para
difundir las medidas de prevencin y control.

97
Lo anterior permite focalizar las medidas preventivas y de promocin
de la salud, haciendo ms efectivas las intervenciones en la salud
pblica y animal. Si se realiza un plan estratgico para la prevencin
y control de la leptospirosis seguramente la enfermedad no causara
daos graves e irreversibles en la salud y economa de la poblacin
en riesgo.

Por ltimo, el trabajo aport una informacin importante sobre la


presencia de leptospirosis a nivel nacional y mundial, y debe ser
incluida en el diagnstico diferencial de las patologas infecciosas
tropicales que se presentan en nuestro pas.

98
6. CONCLUSIONES

Lo expuesto anteriormente permite concluir que la leptospirosis es


una de las enfermedades con incidencia en la reproduccin,
causante de importantes prdidas econmicas en las explotaciones
pecuarias, representadas en abortos, mortinatos y agalactia; y es,
adems, una zoonosis capaz de producir la muerte de animales y
hombres infectados.

Las Leptospiras se comportan de una manera en su hospedero


natural y de otra manera cuando se encuentran en un hospedero
accidental. La relacin entre el serovar y su hospedero natural se
caracteriza, por tener una alta susceptibilidad a la infeccin y
transmisin endmica dentro de la misma especie, siendo esta, una
enfermedad muy compleja, en parte debido a los problemas de la
relacin husped-hospedador, y a los cambios en el
comportamiento de la enfermedad como resultado de la vacunacin.

Por lo tanto el diagnostico de esta enfermedad se basa en un


manejo integral de varios tipos de diagnostico como son el
epidemiolgico, el clnico y el de laboratorio. Con este ltimo, se
manejan mtodos de aislamiento y serolgia como la tcnica de
microaglutinacin en campo oscuro (M.A.T.) con cepas vivas de
cada serovar de leptospira. Esta tcnica utiliza diferentes diluciones
de cada suero sospechoso con el antgeno vivo de cada serovar y
luego se determina por microscopa directa en campo oscuro la
existencia de aglutinacin. Se considera positivo, cuando ms del
50% de las leptospiras estn aglutinadas. Cuando un animal es
positivo se puede tratar con antibioticos como la estreptomicina, la
oxitetraciclina, penicilina y eritromicina, entre otros; pero el xito de

99
la erradicacin de la bacteria consiste en medidas de prevencin y
control especialmente mascotas, roedores, agua y suelos
contaminados.

100
7. RECOMENDACIONES

Es necesario que en nuestro pas se realicen estudios que permitan


establecer y definir, mediante el aislamiento bacteriano y mtodos
serolgicos, los serotipos circulantes en la zona y los grupos de
animales y operarios sanos y enfermos, con el fin de verificar el
impacto de las condiciones ambientales sobre la transmisin de la
leptospirosis y sobre la salud de los habitantes de la zona.

Cuando se sospeche la existencia de leptospirosis bovina o se haya


diagnosticado oficialmente, la poblacin bovina se declarara ncleo
contaminado y se debern tomar medidas como la prohibicin de
pastar, desinfeccin continua del hato, caminos y recintos al aire
libre; correcta muda de las ropas protectoras de trabajo; tener un
disposicin para combatir los roedores depredadores y el control de
mascotas; el manejo adecuado del estircol, labrando
inmediatamente el lugar que ocupan y consumir nicamente cocida
la leche de las vacas con sospecha de leptospirosis.

Igualmente se sugiere una mayor comunicacin de esta enfermedad


al personal en riesgo para que exista un mejor control y manejo de
los animales y as garantizar no solo una buena calidad de vida, sino
tambin un aumento en la produccin ganadera.

101
8. REFERENCIAS

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