Inmunoglobulina IgA

Desde hace muchos aos el fenmeno de inmunidad local en algunas

enfermedades infecciosas, se conoce. Por ejemplo, la inmunidad al clera se
relaciona con el ttulo de anticuerpos en las heces (llamados coproanticuerpos),
ms que con el ttulo de anticuerpos en el suero. De modo similar, la
concentracin de la antitoxina diftrica es elevada en la saliva. En varias
enfermedades se han hallado anticuerpos, importantes para la resistencia a la
infeccin, localizados en secreciones externas; tienen, sin duda, gran importancia
en la resistencia a la infeccin. La clase dominante de anticuerpos en las
secreciones externas es la IgA, conocida por ello como inmunoglubulna de
secrecin.

Se ha encontrado IgA en el suero y

en la secrecin de las glndulas
partidas, submaxilares y lacrimales,
en los lquidos nasales
traqueobronquiales, gstricos y
seminales, en la orina y en el
calostro. En el suero, el peso
molecular de la lgA se aproxima a
170 000, mientras que tanto la IgA de
secrecin como la IgA del calostro
tienen un peso molecular cercano a
380 000. Estos pesos corresponden
a unos coeficientes de sedimentacin
de 7 s y 1 1 s, aproximadamente.
Tambin se encuentran en la
secrecin polmeros del 6 a 20 s. La
concentracin de IgA en el suero
vara de 1 a 4 mg/ml.

La cadena H de la lgA, cadena a, es

la misma tanto para las molculas de
calostro como para las del suero. El
peso molecular de la cadena a es de unos 65 000, lo cual la hace ms grande que
la cadena y de la 130, cuyo peso molecular en el hombre es de 53 000. La cadena
a humana no posee el alotipo Gm. Las cadenas: yA no son distintas de las otras
molculas de inmunoglobulinas. Las cadenas ligeras de algunas protenas IgA del
mieloma, se hallan unidas por puentes disulfuro, y, en consecuencia, estn muy
prximas, aunque esto no ocurre en todas las molculas de lgA.

Se acepta generalmente que una estructura caracterstica, la pieza secretora (PS)

se asocia con la molcula de IgA, lo cual posibilita su secrecin. En geles de urea
alcalina se ha identificado la pieza secretora como una banda catdica nica de
rpido desplazamiento. Se ha observado una banda similar, llamada transporte
(T), en la A de calostro de conejo. La pieza secretora reviste gran inters, aunque
no se haya clarificado todava la forma de unin a la molcula de IgA. Datos
recientes indican que es factible, tanto una unin covalente como no covalente. El
peso molecular de la PS aislada va de 50 000 a 60 000 y la molcula puede
constar de dos subunidades, cada una con un peso molecular de 25 000, unidas
por puentes disulfuro. La PS probablemente se halle ligada a la cadena a. Se ha
sugerido que la PS se sintetiza en las clulas epiteliales y se aade a las
molculas de IgA cuando sta es transportada

DEFICIENCIA SELECTIVA DE IgA Los individuos con Deficiencia Selectiva de IgA

son deficientes en IgA pero usualmente tienen cantidades normales de otros tipos
de inmunoglobulinas. La Deficiencia Selectiva de IgA es la ms comn de las
enfermedades de inmunodeficiencia primarias. Los pacientes con Deficiencia
Selectiva de IgA pueden tener sntomas muy variables. Algunos pacientes con
deficiencia de IgA se pueden encontrar relativamente bien con enfermedades
clnicas muy leves, si es que llegan a presentarlas mientras que otros pueden ser
afectados por una variedad de problemas clnicos significativos.
Los individuos con Deficiencia Selectiva de IgA no producen IgA. Producen, sin
embargo, todas las otras clases de inmunoglobulinas. Adems, la funcin de los
linfocitosT, clulas fagocticas y sistema complemento son normales o casi
normales. Por lo tanto, esta afeccin es conocida como Deficiencia Selectiva de
IgA. Los individuos con Deficiencia Selectiva de IgA tienen linfocitos B
aparentemente normales, pero que no maduran en IgA produciendo clulas
plasmticas.

Generalmente no se encuentran lo suficientemente enfermos para ser vistos por

un mdico. Por lo tanto, nunca se les descubre la Deficiencia de IgA. De hecho, la
mayora de los individuos con Deficiencia Selectiva de IgA son relativamente
sanos y no presentan sntomas
Un problema comn en la deficiencia de IgA es la susceptibilidad a infecciones.
Infecciones recurrentes del odo, sinusitis, bronquitis y neumona son las
infecciones ms comnmente observadas en pacientes con Deficiencia Selectiva
de IgA. Esto es fcil de entender porque la IgA protege a las superficies mucosas
de infecciones. Estas infecciones se pueden volver crnicas. Adems, puede ser
que las infecciones no desaparezcan con tratamiento, y los pacientes pueden
permanecer con antibiticos durante ms tiempo de lo normal.
El segundo problema ms importante en la deficiencia de IgA es la ocurrencia de
enfermedades autoinmunes. En las enfermedades autoinmunes el individuo
produce anticuerpos o linfocitos T que reaccionan con sus propios tejidos
resultando esto en dao a estos tejidos. Algunas de las enfermedades
autoinmunes ms frecuentes asociadas con la deficiencia de IgA son: Artritis
Reumatoide, Lupus Eritematoso Sistmico y Prpura Trombocitopnica Inmune
(ITP por sus siglas en ingls). Estas enfermedades autoinmunes pueden causar
inflamacin y dolor en articulaciones de manos y rodillas, erupcin en la cara,
anemia (recuento bajo de glbulos rojos) o trombocitopenia (recuento bajo de
plaquetas). Otros tipos de enfermedades autoinmunes pueden afectar el sistema
endocrino y/o sistema gastrointestinal.
DIAGNSTICO: Habitualmente se sospecha el diagnstico de dficit selectivo de
IgA en pacientes con infecciones recurrentes o crnicas, alergias, enfermedades
autoinmunes o combinaciones de estos problemas. El diagnstico se establece
cuando los anlisis del suero sanguneo del paciente demuestran una marcada
reduccin o casi ausencia de IgA con niveles normales de otras clases principales
de inmunoglobulinas (IgG e IgM). La mayora de los pacientes producen
anticuerpos normalmente. Algn paciente ocasional puede tambin tener
deficiencia de la subclase IgG2 y deficiencia asociada de anticuerpos. La cantidad
y funciones de linfocitos T son normales.

TRATAMIENTO: Las preparaciones de globulina gamma que se encuentran

disponibles en este momento no contienen cantidades significativas de IgA. An
cuando dichos productos pudieran ser preparados, no existe la forma de hacer
que el IgA administrado por inyeccin encuentre su camino a las membranas
mucosas a las que les falta esta inmunoglobulina. Por lo tanto, en el presente no
es posible reemplazar el IgA en pacientes con deficiencia de IgA. Sin embargo, un
paciente ocasional que tiene deficiencia de IgA tambin tiene deficiencia subclase
IgG2 con una deficiencia en la produccin de anticuerpos. En estos individuos, el
uso de globulina gamma de reemplazo puede ser de ayuda para disminuir la
frecuencia de infecciones. El tratamiento de los problemas asociados con la
Deficiencia Selectiva de IgA debe ser dirigido hacia el problema en particular.

PURIFICACIN
Calostro humano
El calostro humano se obtiene de madres sanas entre los 2 y 4 das posteriores al
alumbramiento, colectado de forma manual en frascos de vidrios estriles y
almacenados a -20 C.

Cromatografa de intercambio ionico

La IgAsh fue purificada a partir de 50 mL de calostro humano, centrifugado
durante 1 h a 330 000 g. Se obtienen tres fases diferentes: una fase superior que
contiene la fraccin lipdica, una capa intermedia con la fase acuosa y el
precipitado, consistente en los elementos celulares del calostro humano. El suero
se obtiene acidificando la fase acuosa con NaCl 1mol/L, pH 6,4 y luego,
centrifugado a 13 000 g durante 20 min. Se aplican 25 mL del suero en una
columna DEAE Sepharose FF, estabilizada con fosfato de sodio 10 mmol/L, pH
7,6. La fraccin especfica se elude con fosfato de sodio 100 mmol/L, pH 6,4.

Cromatografa de fin de filtracin

La fraccin de IgA obtenida de la cromatografa de intercambio inico se aplica en
una columna cromatogrfica, empaquetada con Superose 6 grado preparativo
(Amersham Biotech, Suecia)

Caracterizacin de la IgAsh mediante Dot blot y SDS-PAGE

Se utiliza el ensayo de Dot blot para la identificacin de la fraccin conteniendo la
IgAs posterior a la cromatografa de gel filtracin. Se aplican 100 L de cada
fraccin obtenida en papel de nitrocelulosa bajo vaco. La membrana fue
bloqueada con 3% de leche descremada en solucin salina tamponada con
fosfatos (SSTF) durante 30 min a 37 C. Posteriormente, se incuba la membrana
con anti-IgA humana marcada con peroxidasa (Sigma), diluido 1/2000 en la
solucin SSTF-Tween 20-leche descremada al 1,5%, durante 1 h en agitacin a 37
C. Se lav cuatro veces con SSTFTween 20 durante 5 min, seguido un lavado
con SSTF. La reaccin fue desarrollada con diaminobencidina (DAB, Sigma). La
fraccin de IgAsh identificada por Dot blot (10 L) fue incubada a 100 C por 2 min
en presencia de 2mercaptoetanol (Merck, Alemania) y separada mediante
SDSPAGE (gel de acrilamida al 12,5%), seguido de tincin con R250 Azul
Coomassie

ANTISUERO TRIVALENTE (IGG, IGA, IGM)

Inmunofijacin / Inmunoelectroforesis
Presentacin: 1 ml
Tcnica: Electroforesis Agarosa
La inmunofijacin en suero consiste en la deteccin, mediante electroforesis
alcalina en gel de agarosa y uso de anticuerpos, de protenas monoclonales en
suero. Las protenas migran en la electroforesis y se inmunofijan con antisueros de
diferentes especificidades: anti-gamma, para la deteccin de inmunoglobulina G
(IgG); anti-alfa, para inmunoglobulina
A (IgA); anti-mu, para inmunoglobulina M (IgM); anti-lambda, para cadenas ligeras
lambda, y anti-kappa, para cadenas kappa. Posterior a la inmunofijacin, las
protenas que se precipitan se tien con violeta cido para permitir su visualizacin
Inmunofijacin: La inmunofijacin es una tcnica que permite que una protena
quede anclada al sitio donde migr durante la electroforesis, lo cual se logra a
partir de la formacin de un complejo insoluble con anticuerpos. En trminos
generales, la inmunofijacin consta de cuatro fases

Biosensor de IgA

Biosensor electroqumico de espectroscopia de impedancia con electrodos

interdigitados para la deteccin de inmunoglobulina A humana
Electrodos interdigitados (IDE) que tienen una serie de electrodos paralelos
Microband con microbandas conectadas entre s alternando fueron utilizados en
espectroscopia de impedancia electroqumica (EIS) para construir una
inmunoglobulina humana A (IgA) inmunosensor libre de etiquetas. IgA anti-humana
(anti-IgA) se emplea como un receptor de IgA y se inmoviliz covalentemente en la
superficie IDE a travs de una monocapa auto-ensamblado, como se confirm por
microscopa de fuerza atmica. Mediciones de EIS revelaron que la adsorcin
especfica de IgA en el inmovilizado anti-IgA dio lugar a un claro aumento en el
valor de la resistencia de transferencia de carga interfacial (ECA). Una relacin
lineal entre Rct y el logaritmo de la concentracin de IgA se encontr para el
intervalo de concentracin de 0,01 a 100 ng / mL. No modulacin de Rct se
detect mediante la inmersin del sensor en soluciones de otras protenas tales
como la inmunoglobulina G humana o albmina de suero bovino, que confirm
una alta selectividad de este inmunosensor para IgA. Estos resultados
demostraron que el receptor de anti-IgA simplemente inmovilizado en la superficie
IDE puede proporcionar un biosensor sensible.

Bibliografa

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22917917
Edward S Golud. Base celular de la respuesta inmunolgica, ed, 2, editorial reverte, Mxico 1988