Test 4

Q1. Care sunt principalele diferene ntre cromatografia de lichide de nalt

performan i cea de gaze?
Q2. Ce tip de detector de GC este utilizat cel mai frecvent? Explicai principiul
su de lucru i care sunt limitele sale?
Q3. Care sunt gazele purttoare utilizate n mod obinuit n analiza GC atunci
cnd se utilizeaz detectorul FID?
Q4. Care sunt caracteristicile dorite ale unui detector GC?
Q5. Ce nelegei prin specificitatea unui detector?
Q6. Care sunt tipurile de coloane capilare cel mai frecvent utilizate?
Q7. Ce nelegei prin eficiena coloanei i cum se exprim?
Q8. Ce nelegei prin programarea temperaturii n analiza GC?
Q9. Cnd este util modul de lucru izoterm?
Q10. Ce msuri ati adopta pentru a prelungi durata de via util a unei coloane?
Ans1.
n HPLC faza mobil este un lichid; n cromatografie n faz gazoas faza mobil sau
purttorul este un gaz.
Cromatografia de gaze se aplic pentru analiza compuilor volatili; compuii nevolatili
pot fi uor analizati prin HPLC.
Cromatografie de gaze nu poate fi utilizata pentru analiza moleculelor cu mas
molecular mare; HPLC are aplicaii pentru separarea i identificarea compuilor cu
greutate molecular foarte mare.
HPLC necesit presiuni de lucru mai mari dect GC, deoarece lichidele necesit
presiuni mai mari dect gazele pentru transport prin intermediul sistemului.
Coloane HPLC sunt scurte i late, n comparaie cu coloanele GC.
Ans2.
Detectorul cel mai frecvent utilizat este detectorul cu ionizare in
flacr. Compusul separat care a ajuns la detector este ars cu ajutorul
gazului combustibil i produce ioni i electroni care pot conduce
electricitate prin flacr. Prin aplicarea unei diferene mari de potenial
la vrful arztorului i la electrodul colector localizat deasupra flcrii
si se msoara curentul dintre electrozi. Detectorul este dependent de
debitul masic i rspunsul nu este afectat de schimbrile debitului de
gaz purttor. Cu toate acestea, detectorul nu detecteaza gaze
anorganice, cum ar fi CO, O2, NH3, N2, CS2, CO2, etc.
Ans3.
Atunci cnd se utilizeaz detectorul FID gazele inerte frecvent utilizate
n analiza sunt azot si heliu. Azotul este mai frecvent utilizat, deoarece
este mai puin costisitor dect heliu. Puritatea gazului purttor ar trebui
s fie mai mult de 99,995%, de aceea ar trebui folosite capcane on-line
pentru a preveni umezeala rezidual sau alte impuriti de la intrarea n
sistem.
Ans4.
Alegerea detectorului pentru analize are la baza criteriile:
Reproductibilitate la modificri ale concentraiei compuilor de eluat.
Domeniu dinamic liniar larg.
Sensibilitate ridicat.
Ar trebui s aib volum intern mic pentru a da peak-uri nguste i, de
asemenea, sa faciliteaz splarea urmelor din proba anterioara.
Ar trebui s fie, de preferin, non-distructiv.
Ans5.
Detectoarele se mpart n trei categorii, n funcie de rspunsul la
compuii eluati:
neselectivi dau rspuns pentru toti compusii din faza mobila cu
excepia gazului purttor.
selectivi - rspund la o anumit clas de compui cu proprieti fizice
sau chimice comune.
specifici - rspunsul la un singur compus specific.
Ans6.
Coloanele capilare sunt n general tuburi lungi de 10 - 100 m, cu un
diametru interior cuprins ntre 0,1 - 0,5mm, realizat din material
flexibil, cum ar fi silice topit. Tipuri de coloane capilare:
Wall coated open tubular (WCOT) - peretele intern este acoperit cu o
pelicul foarte fin de lichid adsorbant
Surface coated open tubular (SGOT) - peretele interior este cptuit
cu un strat de suport solid pe care este absorbit faza lichid.
Coloanele sunt flexibile i nfurate n mai multe bobine; fixate n
interiorul cuptorului.
Ans7.
Prin utilizare continu, o coloan i pierde treptat puterea de rezoluie original.
Eficiena coloanei este exprimat pe baza conceptului teoriei talerelor. In timpul
separarii, fiecare component de separat petrece un timp finit n fiecare taler teoretic.
Eficiena coloanei este cu atat mai buna cu cat nlimea talerului este mai mic, ceea
ce inseamna un numr de talere (N) cat mai mare.

unde N = numr de talere teoretice; tr = timpul de retenie al unui peak

w = limea peak-ului la baz;
N poate fi de asemenea exprimat ca:
unde w1/2 este limea peak-ului la jumtatea nlimii
Eficiena coloanei este exprimat n termeni de nlime echivalent a talerelor
teoretice (HETP): HETP = L/N, unde L = lungimea coloanei n de mm; o valoarea
mic a HETP semnific o eficien mai mare coloanei.
Ans8.
Programarea temperaturii nseamn schimbarea temperaturii coloanei
cu o vitez predeterminat n timpul ciclului de analiz. Aceasta are
aceeai influen asupra timpului de eluie a componentelor separate ca
programarea gradientului n analiza HPLC. Programul de temperatura
ajut la reducerea timpului de analiz permind eluarea timpurie a
componentelor mai puin volatile.
Ans9.
Modul de lucru izoterm este util atunci cnd este necesar o rezoluie
ridicat pentru separarea compuilor cu interval de fierbere ngust.
Temperatura este setat la mijlocul intervalului de puncte de de fierbere
ale constituenilor. Acest lucru permite obtinerea unei rezolutii bune la
separarea unor componenti cu puncte de fierbere mici, dar ar putea
conduce la peak-uri cu largite in cazul componentilor cu puncte de
fierbere mai mari, datorit reteniei lor n coloan timp mai indelungat.
Ans10.
Conditionarea coloanei nainte de prima utilizare sau dup depozitare
timp ndelungat.
Avei grij s nu depeasc limita superioar de temperatur
specificat de productor
A se evita injectarea soluiilor care sunt puternic acide sau bazice n
natur
Spalarea coloanei prin injectare cu solveni cum ar fi metanol, clorur
de metilen sau hexan pentru a ndeprta contaminarea coloanei dup
utilizare excesiv.