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Por:
Jorge Elas Ruiz Martnez
Cdigo: 5074349
Ana Avila
1065619528
Henrry Giovanni Jaimes
1090375649
Lady Margarita Diaz
1065625836
Jhon Alexander Velasco
Grupo:203022_1
b. Alineamiento o Hibridacin
Este paso consiste en un descenso de la temperatura entre 35 y 60 C, para permitir que los
cebadores se unan por complementariedad al DNA molde. La duracin de este paso puede oscilar
entre minuto y 2 minutos.
c. Extensin o Elongacin
En este paso se vuelve a aumentar la temperatura hasta los 72C y se deja actuar a la Taq
polimerasa durante 1 2 minutos. la enzima polimerasa incorpora nucletidos complementarios a
partir del extremo 3 libre de la regin en que han hibridado los cebadores,
La temperatura a la que se lleva a cabo esta fase depende de la enzima polimerasa empleada; si
se utiliza Taq polimerasa como en este caso la temperatura de elongacin suele ser de 72C.
3. Explique por qu los cidos nucleicos son desnaturados cuando son sometidos a altas
temperaturas o pH extremos. Una molcula de ADN desnaturada por calor puede ser
nuevamente renaturada? Cmo?
R/Cuando una estructura de ADN o ARN es sometidas a temperaturas o pH extremos, esta acaba por
romper las fuerzas de unin entre las dos hebras que los conforman y se separan es decir se
desnaturaliza, formando una sola hebra, ya que la energa libre de las interacciones no covalentes que
mantienen la estructura helicoidal del DNA no es muy superior a la energa de los movimientos
trmicos a temperatura ambiente, esto debido a que la estructura de los cidos Nucleicos se mantiene
por medio de enlaces no covalentes, y cada base est unida a su pareja mediante puentes de
hidrogeno.
Una molcula puede ser nuevamente renaturada, formando nuevamente dos hebras, a partir de
molculas de ADN distinto origen y formndose de una partcula de ADN y otra de ARN.
5-AAGAATTGCGAATTCGACTTAAGGGCCGCGCCGAAGCTTTAAAGGTTATATTTCC-3
Cuantos fragmentos resultaran del corte con las siguientes enzimas de restriccin, indique el nmero
de pares (pb) de base de cada fragmento.
EcoRI: (G AATTC):
HaeIII: (GG CC):
NotI: (GC CCGG):
Con las tres enzimas juntas
Asumiendo que esta secuencia corresponde a la secuencia de la hebra codificadora, cul sera la
secuencia de aminocidos del polipeptido producido cuando un ARN mensajero (ARNm) transcrito de
este gen sea traducido?
R/ 5'CTGATAAGGGATTTAAATTATGTGTCAATCACGAATGCTAATCGCTTAACACTTC3'
3GACTATTCCCTAAATTTAATACACAGTTAGTGCTTACGATTAGCGAATTGTGAAG5
ARNm
5CUGAUAAGGGAUUUAAAUUAUGUGUCAAUCACGAAUGCUAAUCGCUUAACACUUC3
Polipeptido:
LEU-ILE-ARG-ASP-LEU-ASN-TIR-VAL-SER-ILE-TRE-ASN-ALA-ASN-ARG-LEU-TRE-LEU
Este fragmento de ADN fue colocado en una solucin con la endonucleasa de restriccin HindIII que
reconoce la secuencia 5-AAGCTT-3 e hidroliza el ADN entre los dos residuos de cido adenlico. Con
relacin a este enunciado, responda: Cuantos pb presenta el fragmento de ADN y cuantos
fragmentos de ADN resultaran de la digestin con HindIII?
7. Un cientfico analiz la secuencia de bases nitrogenadas del ADN de una bacteria y verific que
era formada por los codones AGA-CAA-AAA-CCG-AAT. Verific tambin que la secuencia de
aminocidos en el polipeptido correspondiente era serina-valina-fenilalanina-glicina-leucina. Al
analizar el mismo segmento de ADN de otra bacteria de la misma colonia, verific que la
secuencia de bases era AGA-CAA-AAG-CCG-AAT, sin embargo, no verific cualquier alteracin
en la composicin de aminocidos de la cadena polipeptdica.
Cmo usted explica el hecho de bacterias de una misma colonia presenten, para el mismo
segmento de ADN, diferentes secuencias de bases y que esas bacterias presenten la misma
composicin de aminocidos en la cadena polipeptdica correspondiente?
EL CDIGO GENTICO
AGA-CAA-AAA-CCG-AAT
Arginina-Glutamina-Lisina-Prolina-Asparagina
AGA-CAA-AAG-CCG-AAT
UCU-GUU-UUU-GGU-UUA
Serina-Valina-Fenilalanina-Glicina-Leucina
Dado que en la naturaleza existen 64 codones para 20aminoacidos entonces un aminocido puede
ser codificado por varios codones ,por lo tanto las secuencias de ADN diferentes puden originar una
misma secuencia de protena .Las diferencias entre bacterias de una misma colonial se pude
explicar por error en una replicacin de una batera en una colonia (Pueden ocurrir errores durante
la replicacin que resulten en cambios dentro de la secuencia de nucletidos en los cromosomas. Si
estos cambios ocurren en genes, pueden alterar las funciones de la clula).
8. La profesora del curso Organismos Transgnicos inform a sus estudiantes que un cientfico
espaol afirm haber encontrado protenas en el huevo fsil de un dinosaurio que podran
ayudarlo a reconstituir el ADN de esos animales.
a) Haga un esquema demostrando cmo, a partir de una secuencia de ADN se obtiene una
protena.
ESQUEMA
b) A partir de una protena, es posible recorrer el camino inverso y llegar a la secuencia de ADN
que la gener, justifique.
A partir de una secuencia de una protena, se puede inferir la secuencia RNA mensajero
correspondiente que codifica dicha protena, y a partir de este RNA se infiere por complementariedad
de base nitrogenada, la secuencia del ADN que pudieron codificar la secuencia de la protena
Los intentos hasta el momento por revertir el proceso han sido fallidos, lo cual llevado a lo que Francis
Crick llamo el doman de la biologa molecular, que establece que las va es como lo plantean el
esquema en la figura 1,y las flechas indican la unidirreccionalidad .No es posible que la molcula de
ARN cambie su estructura bajo los efecto de una protena.
.
1. Imagine que un determinado individuo, reciba un gen de otra especie, este gen es responsable
por la produccin de una protena compuesta por los siguientes aminocidos: cistena - serina -
arginina - alanina - leucina - glutamina - valina - glutamina - treonina - lisina.
a) Esta protena no podra ser producida porque el receptor del gen no posee los ARNr necesarios
para la fase final de traduccin, encontrados solamente en el donador del gen.
b) La molcula de RNA, transcrita por ese gen tendra mnimo una serie de 10 codones con un total de
30 nucletidos, presentando bases pricas de adenina e guanina e bases pirimdicas de citosina y
uracilo.
c) Esa molcula proteica no podra ser producida por el receptor del gen porque los aminocidos
necesarios para la traduccin slo son encontrados en el organismo donante del gen.
e) La molcula proteica podra ser perfectamente montada en el organismo del receptor del gen
desde que fueran tambin transfundidos los anti-codones del ARNt del donante.
Indique si las anteriores afirmaciones son verdaderas o falsas, sustente cada una de las
respuestas.
Respuestas
1.Esta afirmacin es verdadera ya que el vector debe contener un marcador de seleccin es decir
genes de resistencia a antibiticos o genes de enzima que la clula husped no tiene, para poder
distinguir las clulas husped que transportan el vector de las que no lo contienen
2. Afirmativo ya que los vectores contienen sitios nicos para el corte con varias enzimas de restriccin
diferentes (entre 10 y 15) que se usan para insertar en esta regin (sitio de clonacin mltiple)
3. Afirmativo el vector debe tener un sitio mltiple de clonacin, que es un segmento con numerosas
secuencias que pueden ser cortadas por enzimas de restriccin.
4. Afirmativa ya que el vector exgeno debe tener algn sitio de corte para enzima de restriccin y un
gen o marcador de tal manera que pueda insertar segmentos de ADN cortados con la misma enzima.
Bibliografa
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Ed. Montevideo: Oficina del Libro FEFMUR, 65-90.