UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA

FACULTAD DE INGENIERIA DE MINAS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA QUIMICA

DOCENTE : Dr.Ing Arturo Javier Mendoza Crespo

CURSO : Seminario de Tesis

ALUMNA : Godos Chumacero Indira Gabriela Mercedes

CICLO : 2016-1
 EVALUACIN DE LA
CAPACIDAD FUNGICIDA PARA
EL TRATAMIENTO DE LA
ANTRACNOSIS DEL
QUITOSANO DERIVADO DEL
EXOESQUELETO DE
LANGOSTINO

Autora : Godos Chumacero Indira Gabriela Mercedes

 I. INTRODUCCION

Entre las molculas polimricas ms abundantes en la naturaleza se halla la quitina, que es

un componente de los exoesqueletos de invertebrados y las paredes celulares de algunos
hongos y algas. La quitina se produce por biosntesis en los organismos ante indicados y
presenta una tasa de reposicin tan alta en la biosfera que, se estima, duplica a la de la
celulosa.

Los desechos de crustceos producidos por la industria pesquera son la materia prima para
la industrializacin de la quitina. El procedimiento para obtenerla consiste en aislarla de
protenas, minerales, generalmente calcreos y pigmentos. Las etapas de este procedimiento
se denominan procesos de desproteinizacin y desmineralizacin. El quitosano, principal
derivado de la quitina, se obtiene industrialmente mediante un tratamiento de
desacetilacin. Dependiendo de las condiciones de reaccin, se obtiene quitosanos de
diferente peso molecular y grado de desacetilacin. Estas variables los hacen tiles para
diversas aplicaciones.

El quitosano obtenido en el presente ensayo tiene caractersticas compatibles con el uso

como agente fungicida. Los resultados obtenidos demuestran que el proyecto proporciona
una alternativa concreta, medioambientalmente sostenible y econmicamente productiva.

Al ser el principal mtodo de combate de la antracnosis qumico y el uso excesivo de

agroqumicos en la agricultura para controlar la enfermedad ha provocado, acumulacin de
residuos en el ambiente, destruccin de la flora y fauna silvestre benfica e intoxicaciones
as como tambin, enfermedades en el hombre.
Esta situacin crea la necesidad de buscar medidas alternas que permitan reducir los daos
causados por la enfermedad y disminuir el uso de fungicidas, por lo que la tendencia actual
se dirige a la bsqueda de biofungicidas, una alternativa viable es el uso de productos
orgnicos como el quitosano . En este sentido el uso de quitosano podra ser una estrategia
promisoria para el combate alternativo de la antracnosis.

I. JUSTIFICACIN, IMPORTANCIA Y BENEFICIARIOS DE LA INVESTIGACIN

La importancia de esta investigacin es la evaluacin del quitosano como una alternativa
potencial para el control de ANTRACNOSIS donde se pretende reducir o eliminar el uso
de fungicidas qumicos utilizados en el control de la enfermedad.

El uso del quitosano es una alternativa viable debido a que ha tomado mayor relevancia ya
que es un producto natural biodegradable y no txico que no ocasiona daos a la salud
humana y vegetal, que podra cubrir las necesidades mundiales de la agricultura
sustentable.

IV. OBJETIVOS:
4.1 GENERAL
Realizacin del estudio para determinar la posible actividad fungicida del quitosano
extrado del exoesqueleto del langostino contra la antracnosis.
4.2 ESPECFICOS
Extraccin de quitosano a partir del exoesqueleto de langostino.
Realizar la caracterizacin del quitosano extrado del exoesqueleto del langostino.
Especificar la viabilidad del proceso y el producto obtenido.

V. MARCO TEORICO

5.1 EL QUITOSANO

El quitosano se produce comercialmente mediante la desacetilacin de la quitina, que es un

elemento estructural en el exoesqueleto de los crustceos (cangrejos, gambas, langostas ,
etc), as como en insectos. El grado de desacetilacin (DA) puede ser determinado
porespectroscopia NMR, o por espectroscopia Infrarroja con Transformada de Fourier (IR-
TF): en los quitosanos est en el rango de 60-100%.

El grupo amino en el quitosano tiene un valor pKa que ronda los 6,5, razn por la cual
posee una ligera carga positiva y es soluble en medios cidos o en soluciones neutras con
dependencia de la carga del pH y del valor DA. En otras palabras, es un bioadhesivo y
puede ligarse a las superficies cargadas negativamente tales como las membranas mucosas.
Debido a esta propiedad fsica, permite el transporte de principios activos polares a travs
de las superficies epiteliales, siendo adems biocompatible y biodegradable. Las cualidades
de purificacin de los quitosanos estn disponibles en aplicaciones biomdicas.

El quitosano y sus derivados, como el trimetilquitosano (compuesto en el que el grupo

amino ha sido trimetilado), han sido empleados en el transporte de genes no vricos. El
trimetilquitosano o, incluso, el quitosano cuaternizado se han mostrado capaces de
hacer transfeccin de las clulas malignas del cncer de pecho.

5.1.1 Breve resea histrica sobre el quitosano

Por su amplia distribucin en la naturaleza la quitina es el segundo polisacrido en
abundancia, despus de la celulosa. Fue descubierta por Braconnot en 1811 cuando
estudiaba las sustancias derivadas del Agaricus volvaceus y otros hongos. Posteriormente
Odier, en un artculo sobre insectos report que haba encontrado en algunos insectos la
misma sustancia que forma la estructura de las plantas, llamndola quitina (del griego
tunic, envoltura). Payen, en 1943, inici una controversia que dur mas de cien aos sobre
las diferencias entre la quitina y la celulosa, en parte porque se pensaba que la presencia de
nitrgeno reportada en algunas investigaciones se deba a residuos de protenas que no
podan ser completamente eliminados de las muestras.
El nombre sistemtico de la quitina es (1-4)-2-acetamido-2-desoxi-D-glucosa. Se
encuentra principalmente en las conchas de crustceos y formando parte del exoesqueleto
de los insectos, as como tambin en las paredes celulares de muchos hongos, levaduras y
algas.La quitina es completamente insoluble en agua o en medio cido. Su estructura
qumica es la siguiente:

Por su parte, el quitosano es tambin un polisacrido que se encuentra en estado natural en

las paredes celulares de algunos hongos; sin embargo, su principal fuente de produccin es
la hidrlisis de la quitina en medio alcalino, usualmente hidrxido de sodio o de potasio, a
altas temperaturas. El quitosano fue descubierto por Rouget en 1859, quien encontr que al
tratar quitina con una solucin caliente de hidrxido de potasio se obtiene un producto
soluble en cidos orgnicos. Esta quitina modificada, como l la llam, se tornaba de
color violeta en soluciones diluidas de ioduro y cido, mientras la quitna era verde. Mas
tarde, en 1894, fue estudiada por Hoppe-Seyler quin la denomin quitosano (tambin se
conoce como quitosana en algunos lugares, chitosan en ingls). En el siguiente esquema se
aprecia los pasos elementales en la obtencin del quitosano:
La desacetilacin completa de la quitina produce un material totalmente soluble en medio
cido conocido como quitano; sin embargo, cuando la deacetilacin del material de partida
es incompleta se crea una mezcla de cadenas que tienen distintas proporciones de unidades
(1-4)- 2-acetamido-2-desoxi-D-glucosa y (1-4)-2-amino-2-desoxi-D-glucosa, cuya
relacin depende de las condiciones de reaccin y que, obviamente, genera materiales con
distintas propiedades denominados quitosanos. La diferencia en las propiedades de estos
materiales puede llegar a ser notable, como por ejemplo la distinta solubilidad en medio
acuoso que pueden llegar a tener. Las estructuras qumicas del quitano y el quitosano se
muestran a continuacin:
La presencia de grupos aminas en la cadena polimrica ha hecho del quitosano uno de los
materiales ms verstiles que se estudian desde hace ya algn tiempo, por la posibilidad de
realizar una amplia variedad de modificaciones, tales como la reacciones de anclaje de
enzimas, reacciones de injerto, obtencin de pelculas entrecruzadas, etc., de las cuales se
obtienen materiales con propiedades adecuadas para aplicaciones inmediatas y futuras en
biotecnologa, biomedicina, agricultura, etc

Para finalizar esta breve resea histrica es importante recalcar la febril actividad que se
desarrolla en torno a estos materiales, lo que se ha traducido en la aparicin de Congresos,
Simposios, Conferencias, etc., dedicados exclusivamente a ellos. Su importancia adquiri
matiz internacional como materiales polimricos de primer orden, especialmente por su
biodegradabilidad, ya desde los finales de los setenta, cuando apareci el libro de Chitin
de R.A. Muzarelli, en 1977 y se realiz la Primera Conferencia Internacional sobre Quitina
y Quitosano en 1978. Tambin en iberoamrica se ha venido trabajando con el quitosano y
en el 2000 se celebr en La Habana (Cuba) el Primer Simposium Latinoamericano de
Quitina y Quitosano, en el marco del XI Simposio Latinoamericano de Polmeros (SLAP).

5.1.2 Composicin qumica

La estructura de la quitina
presenta similitud con la de la
celulosa, la diferencia entre ellas
se encuentra en que el carbono 2
contiene un grupo hidroxilo en la
celulosa y un grupo acetamida en
la quitina. Ambos biopol-meros
cumplen roles semejantes: actan
como materiales de soporte y defensa de los organismos que los contienen.

La quitina poli [ (1-4)-2-acetamida-2-desoxi-D-glucopiranosa], es el componente orgnico

ms abundante en la en la estructura esqueltica de muchas de las clases que conforman el
grupo de los invertebrados, como, por ejemplo, los artrpodos, los anlidos, los moluscos y
los celentreos. La quitina se encuentra, adems, presente en algunos hongos y en algas. Es
la segunda sustancia orgnica ms abundante despus de la celulosa, aunque posee una
mayor tasa de recambio que la ltima.
Por ser un producto natural, no podemos esperar una composicin nica. Debe entenderse
por esto que las di-ferentes molculas del polmero presentan variabilidad entre ellas. La
variabilidad abarca su longitud, el porcenta-je de grupos amino-acetilos y la posicin de
estos a lo largo de la cadena.

Los nombres quitina y quitosano son ampliamente usados en la literatura, pero ninguno de
ellos representa una estructura qumica nica. Podemos definir como quitina nativa al
polmero contenido en los exoesqueletos de los crustceos insectos y paredes celulares de
ciertos hongos; el termino quitina se refiere al biopolmero aislado de su matriz original.
Este biopolmero se caracteriza ms especficamente al evaluar la fraccin acetilada la que
se coloca entre corchetes adjunta la palabra quitina. As,

5.1.2 Aplicaciones del quitosano

Dado el gran nmero de trabajos que existen sobre este verstil material es conveniente
realizar una clasificacin por rea sobre las aplicaciones que se le han ido dando. A
continuacin se presentan algunas de ellas, aunque la lista no pretende ser exhaustiva.

Qumica analtica: aplicaciones cromatogrficas, intercambiadores de iones, absorcin de

iones de metales pesados y absorcin de cidos, fabricacin de electrodos especficos para
metales, etc.

Biomedicina: membrana de hemodilisis, suturas biodegradables, sustituyentes artificiales

de la piel, agente cicatrizante en quemaduras, sistemas liberadores de frmacos, liberacin
de insulina, transporte de agentes anticancergenos, tratamiento de tumores (leucemia),
control del virus del SIDA, etc.

Agricultura y ganadera: recubrimiento de semillas para su conservacin durante el

almacenamiento, sistemas liberadores de fertilizantes, aditivo para alimento de animales, en
formulacin de pesticidas, etc.

Cosmticos: Espumas de afeitar, cremas para la piel y el cuerpo.

Dietticos: Adelgazantes (existe una amplia variedad de productos comerciales que ofrecen
el polmero como atrapador de grasas en el estomago.

Industria: del papel, textil, alimentaria (soporte para inmovilizacin de enzimas en la

produccin de maltosa, espesante en alimentos, agente de oxidacin controlada, agente
preservante).
Tratamiento de agua: agente floculante, agente coagulante, tratamientos de flotacin para
la remocin de aceite de pescado en agua , agentes filtrantes para piscinas y spas, remocin
de metales, remocin de surfactantes, etc.

5.1.3 Caracterizacin fisicoqumica del quitosano.

Determinacin del grado de desacetilacin (dga): normalmente los estudios de

caracterizacin del quitosano se centran en la determinacin de su grado de desacetilacin
(gda). En ese sentido hay una serie de mtodos que ya se han hecho rutinarios para ste
propsito, incluyendo estudios de C-RMN en estado slido. Uno de los ms utilizados es la
valoracin titulomtrica de los grupos aminos, para lo cual se pueden utilizar distintas
formas de determinacin del punto final. En la figura 2 se puede observar una titulacin
conductimtrica tpica para distintas cantidades de quitosano disuelto en HCl.
Medidas viscosimtricas: la masa molar del quitosano ha sido estimada de medidas
viscosimtricas utilizando una modificacin de la ecuacin de Mark-Houwink-Sakurada
(MHS) , que tiene la siguiente forma:

donde el valor de qMHS cambia de una muestra a otra y es funcin de las masas molares
promedio en peso, en nmero y en difusin, de
acuerdo con la siguiente relacin:

la constante c depende solo del exponente y la constante b de y de (Mz/Mw)

Igualmente, el gda es un parmetro

importante en la determinacin de las
masas molares. Brugnerotto , usando un
detector de dispersin de luz multiangular en sus estudios de cromatografa de exclusin
por tamao (SEC), y basndose en el modelo de cadena tipo gusano (wormlike), predijo
los parmetros de MHS de diversas muestras (homogneas y heterogneas) en soluciones
acuosas de cido actico/acetato de sodio. Los valores predichos en estos estudios apuntan
a que K disminuye sustancialmente cuando el gda disminuye, mientras que el valor de
solo aumenta muy ligeramente.

Distribucin de las unidades acetiladas: el papel de la distribucin de los sustituyentes

acetilo a lo largo de la cadena del quitosano en el control de sus propiedades, especialmente
en lo que se refiere a su solubilidad y a la hidrofobia, ha sido estudiada usando MNR.
Algunos autores han propuesto que las muestras parcialmente desacetiladas, preparadas
homogneamente y con el mismo gda, presentan una distribucin al azar de estos
sustituyentes, concordando con una distribucin bernouillana.

5.1.4 Algunas reacciones del quitosano

En esta parte se expondrn resumidamente algunos de los resultados ms actuales en las

siguientes reacciones del quitosano:

Formacin de policomplejos: Los complejos polielectrolitos son formados por la

atraccin electrosttica de dos polielectrolitos con cargas opuestas como fuerza conductora
del proceso. Por su naturaleza policatinica, el quitosano ha sido usado para la
complejacin de protenas acdicas en una variedad de fluidos biolgicos, los cuales pueden
ser manipulados con relativa facilidad . Igualmente se ha logrado preparar una serie de
policomplejos que tienen caractersticas de hidrogeles, motivo por el cual ha sido posible
estudiarlos en la liberacin controlada de drogas, incluyendo tratamientos anticancerosos.

En su proceso de hinchamiento normalmente los hidrogeles preparados por el

entrecruzamiento de una sola especie de polielectrolito (un policatin o un polianin) son
altamente sensibles al pH del medio. Por lo general, los hidrogeles preparados con
quitosano logran un grado de hinchamiento mximo a valores de pH cidos bien
determinados, debido a que el mximo grado de hinchamiento de estos materiales surge de
un compromiso entre la mxima repulsin que pueden experimentar los grupos cargados y
el mnimo apantallamiento que genera la adicin de un exceso del cido. En el caso de los
complejos polielectrolitos, entrecruzados qumicamente en reacciones posteriores, es
posible obtener materiales que se hinchen tanto a pH cido como a pH bsico. La
generacin de un hidrogel, formado inicialmente mediante la formacin de un complejo
polielectrolito entre el policido acrlico y el quitosano (mediante una reaccin de
polimerizacin a templado del cido acrlico va radicales libres en medio acuoso) es un
ejemplo de este tipo de materiales [9]. En la figura 3 se muestra su comportamiento de
hinchamiento en funcin del pH en el medio externo.
La figura 4 muestra las fotografas del hidrogel obtenido del complejo polielectrolito
formado por la polimerizacin a templado cido itacnico y el quitosano, usando
cantidades relativamente bajas del policatin . La realizacin de este trabajo ha permitido
confirmar que la interaccin electrosttica entre ambos polielectrolitos puede llegar a ser
bastante significativa, como para producir un entrecruzamiento fsico, an cuando uno de
ellos se encuentre en cantidades iniciales tan pequeas como el 1,1% de los grupos
cargados en el polielectrolito en exceso. Por debajo de estas cantidades los materiales
obtenidos son completamente solubles, como puede inferirse de la tabla siguiente:

Tabla 1. Masas molares promedios, polidispersidad, relacin COOH/NH2 y rendimiento y

de los policomplejos obtenidos en la polimerizacin a templado de cido itacnico en
soluciones acuosas de quitosano.

En este breve resumen es conveniente mostrar un tipo de ensamblaje tipo complejo

polielectrolito que encapsula una solucin concentrada de un polielectrolito dentro de una
piel formada por la interaccin electrosttica de dicho polielectrolito con otro de carga
opuesta. La figura 4 (b) muestra un modelo propuesto para la formacin de dicho
ensamblaje, usando una solucin de quitosano, encapsulada en la piel formada con el
biopolmero denominado Sclerox, el cual es el producto de la oxidacin a policido del
scleroglucano. En la figura 4 (a) se muestra un esquema del proceso de preparacin de estos
ensamblajes interpolimricos, que incluso han sido probados en su capacidad para atrapar
diversas especies, como por ejemplo colorantes aninicos y cationes metlicos como Cu 2+.
Igualmente este tipo de ensamblajes ha sido propuesto para la encapsulacin de enzimas.
Reacciones de entrecruzamiento: los hidrogeles qumicos son redes tridimensionales
formadas por la unin covalente de todas las cadenas de polmeros existentes en un sistema
determinado, hasta formar, tericamente, una sola macromolcula. El quitosano es uno de
los biomateriales ms extensamente estudiados en este sentido. Existen varios agentes
entrecruzantes que han sido estudiados para tal fin, como por ejemplo la epiclorhidrina y el
etilenglicol glicidil ter. Pero quizs la reaccin de entrecruzamiento ms frecuentemente
utilizada para este fin es la reaccin con dialdehidos para formar uniones qumicas tipo base
de Schiff . Las bases de Schiff (ii) son especies generadas a partir de reacciones reversibles;
sin embargo, estas especies pueden ser convertidas en materiales ms estables (iii) mediante
una reaccin de hidrogenacin con reactivos comunes como el cianoborohidruro de sodio,
de acuerdo con el siguiente esquema:

Reacciones de entrecruzamiento para producir hidrogeles de quitosano usando un

dialdehido como agente entrecruzante. Obviamente un polmero con grupos aldehidos es
candidato obligado para la preparacin de este tipo de hidrogeles, especialmente si dicho
material proviene de fuentes naturales como el biopolmero denominado scleroglucano
(Polytran, Biopolmero CS), el cual es secretado por hongos del gnero Sclerotium, entre
otros. Este material ha sido oxidado exitosamente a un derivado conocido como
sclerodialdehido mediante la conocida reaccin de grupos hidroxilo vecinales con periodato
de sodio. Posteriormente, a travs de un reaccin similar a la mostrada en el esquema
anterior, se ha logrado producir un hidrogel que ha sido estudiado en sus propiedades de
hinchamiento en funcin del pH del medio, absorcin de compuestos aninicos como el
cido saliclico, cationes metlicos y tambin su interaccin con surfactantes, donde fue
posible observar el llamado colapso del sistema . La figura 6 muestra el perfil de liberacin
en el tiempo del surfactante dodecilbencensulfonato de sodio (SDSS) y el compuesto de
comparacin, p-toluen sulfunato de sodio (p-TSS), mientras que en la figura 7 podemos
observar las respectivas isotermas de absorcin.

Tambin ha sido posible obtener hidrogeles de este tipo, usando quitosano, mediante una
serie de modificaciones qumicas sumamente interesantes en un polmero sinttico como el
polivinil alcohol (PVA) . Este ltimo fue inteligentemente modificado aprovechando que
normalmente en su cadena pueden encontrarse, distribuidas al azar, uniones cola-cola que
generan grupos OH vecinales; estos grupos vecinales pueden ser oxidados a grupos
aldehidos, los que a su vez pueden formar bases de Schiff con el quitosano, etc, etc. La
formacin de redes tridimensionales con quitosano tambin se han realizado con diversos
agentes entrecruzantes macromoleculares, como por ejemplo mediante reacciones de injerto
del policido acrlico a travs del grupo amina

Cuaternizacin (alquilacin exhaustiva del grupo amino).

Debido a que el quitosano posee un valor del pKa 5,6, siendo soluble solo en soluciones
cidas con valores de pH < 6, se ha venido buscando extender el intervalo de pH donde se
pueda utilizar dicho biopolmero en solucin, para darle una mayor aplicabilidad. En ese
sentido, un material con una mayor densidad de carga generara seguramente una mayor
solubilidad; por ello, una de las rutas propuestas para lograr este objetivo es lograr una alta
eficiencia en la cuaternizacin de los grupos aminas en las cadenas del polmero. Existen
diversos mtodos de cuaternizacin de grupos amino primarios y secundarios, algunos de
los cuales ya se han aplicado con xito al quitosano, obtenindose diferentes derivados
alquilados. Se ha logrado comprobar experimentalmente que el grado de cuaternizacin y
su porcentaje pueden ser controlados mediante el nmero de pasos de la reaccin, el tiempo
de duracin de dichos pasos y la concentracin del agente alquilante.

Uno de los mtodos ms usados para realizar esta modificacin hace uso de la preparacin
de intermediarios monoalquilados tipo base de Schiffs para su posterior alquilacin
exhaustiva usando ioduro de metilo. Normalmente los productos obtenidos mejoran
sustancialmente su solubilidad en agua con relacin al quitosano virgen. Estos materiales
han mostrado actividad antibacterial sobre S. Aureus, habindose notado un incremento de
dicha actividad conforme aumenta el tamao de la cadena alquilante. Tambin Jia y
colaboradores sintetizaron y estudiaron derivados cuaternizados del quitosano en su accin
antibacterial sobre E. Coli , demostrando que esta es mayor para altos pesos moleculares y
aprecindose mayor efectividad para sustituyentes alquilos con mayores longitudes de
cadena.

Una aplicacin sumamente interesante de los derivados cuaternizados del quitosano es la

que pudiera derivarse de las prometedoras propiedades de transporte de compuestos
hidroflicos, a travs de monocapas de clulas intestinales de Caco-2, que ha exhibido el
trimetil-quitosano (TMC). Thanou y colaboradores han observado que este polmero es
capaz de abrir las uniones compactas del epitelio intestinal a valores de pH fisiolgico,
donde el quitosano es insoluble, y por lo tanto, inefectivo. Han sugerido que la alta
densidad de carga del TMC es necesaria para mejorar sustancialmente la permeabilidad
paracelular del epitelio intestinal; se espera a corto plazo que este material refuerce la
permeacin de drogas macromoleculares hidrfilas como, por ejemplo, los pptidos y las
protenas. Otros investigadores han confirmado estos resultados.
En otro tipo de aplicacin, los derivados cuaternizados del quitosano han sido utilizados
tambin como agente floculante en el tratamiento de aguas de desecho que contienen
glutamato de sodio mostrando alta eficiencia en la remocin de la turbidez en un intervalo
amplio de pH. Por su parte, Kim y colaboradores tambin han sintetizado una serie de
derivados cuaternizados que han mostrado un alto poder floculante, independientemente del
valor del pH; aparentemente el poder floculante incrementa con el tamao de la cadena
alqulica. En nuestro laboratorio se trabaja actualmente en la metilacin exhaustiva del
quitosano y su caracterizacin (vase la figura 9 (a) con los espectros de espectroscopia
infrarroja con transformada de Fourier (FTIR) de la especie obtenida) habindose ensayado
algunos de los materiales obtenidos en la floculacin de kaolinita y polvo de tierra en agua
desmineralizada y en agua del grifo. Existe una mejora manifiesta en la solubilidad de los
materiales cuaternizados, as como tambin se ha confirmado su comportamiento de
polielectrolito fuerte cuando se realizan estudios de viscosimetra y se comparan con los del
material de partida, en las mismas condiciones de pH, tal como puede observarse en la
figura 9(b)
La figura 10, por su parte, muestra los valores de turbidez antes y despus del proceso de
floculacin inducido por la presencia de TMC, a diferentes valores de pH, incluyendo
valores mayores que 6,5 como puede apreciarse.

Preparacin y modificacin de electrodos: el uso de electrodos para la determinacin

selectiva de iones metlicos es ampliamente conocido. Como un ejemplo de la aplicacin
de este tipo de electrodos basados en membranas preparadas con quitosano, ste se ha
estudiado en mezclas con distintos polmeros, habindose obtenido algunas membranas que
resultaron selectivas al Cr(III). En este sentido, se han obtenido resultados aceptables con
acetato de celulosa . Los estudios se realizaron simulando condiciones similares a la de los
baos de cromo en teneras, con el fin de desarrollar un mtodo analtico para la
determinacin de esta especie y su posible aplicacin en procesos industriales. El sistema
incluso mostr selectividad por el Cr(III) cuando se estudi la presencia de algunos
interferentes, bien sean otros iones metlicos como Fe3+, Ca2+, Cu2+, Na+ , el in amonio
o el fenol.

Por otro lado, se han reportado algunos trabajos en los cuales se ha logrado modificar
qumicamente la superficie electrdica con quitosano, mediante un adecuado tratamiento
previo de sta. Jinrui y Bin mostraron, por ejemplo, que un electrodo de carbn vtreo
(GCE), modificado de acuerdo al tratamiento que se muestra en el esquema de la figura 8
(a), puede aumentar de forma notable la respuesta de pH durante los estudios de voltametra
despojo andico diferencial (figura 8 (b)).

Finalmente es importante mencionar que en la actualidad se han iniciado algunos estudios

para la modificacin de pasta de carbono con quitosano, con el fin de aprovechar sus
propiedades de agente quelante y su posible selectividad en la determinacin de metales.
Los ensayos iniciales con mezclas fsicas han mostrado que es necesario fijar qumicamente
el quitosano a las partculas de carbn, debido a que su alta hidroflia (en medio cido) hace
difcil retenerlo dentro de la pasta en estas condiciones.

5.2 POTENCIALIDADES DE LA QUITINA Y EL QUITOSANO PARA USOS

RELACIONADOS CON LA AGRICULTURA

En general, la bsqueda de materiales menos agresivos con el ambiente es una tarea

continua en todas las reas del quehacer humano debido a los altos niveles de
contaminacin presentes en todo el planeta. En la agricultura este trabajo es doblemente
complicado porque, por un lado se deben producir materiales que logren su efecto
especfico en la planta o en sus productos, mientras que por el otro, se necesita que stos se
eliminen sin efectos perturbadores en el medio ambiente. Adicionalmente, en los sistemas
agrcolas es necesario garantizar que los diversos agroqumicos utilizados como biocidas,
estimuladores de crecimiento, fertilizantes, etc., no produzcan efectos perjudiciales como la
induccin de resistencia en patgenos o su acumulacin en los consumidores humanos. Se
estima que muchas de las enfermedades actuales se producen por las causas anteriores.

El uso de agroqumicos de origen natural podra ser una solucin satisfactoria a la

problemtica anterior. Son muchas las sustancias que desde mucho tiempo se usan en este
sentido. En el presente trabajo se aborda la revisin de algunas aplicaciones de la quitina y
el quitosano, dos biopolmeros de origen natural que se han convertido rpidamente en una
alternativa prometedora para la agricultura.

Las propiedades antimicrobianas de la quitina y el quitosano son conocidas por el hombre

desde la antigedad. En un principio, no se conoca la relacin entre dichas propiedades y
la composicin qumica de estos materiales. S se conocan, no obstante, sus propiedades
curativas, las cuales fueron aprovechadas ampliamente, como por ejemplo en la aceleracin
de la cicatrizacin de heridas. En este sentido, se sabe que los primeros mexicanos usaban
preparaciones derivadas de hongos para acelerar la cicatrizacin de heridas y que los
coreanos primitivos utilizaban quitina, proveniente de la pluma de calamar, para favorecer
la curacin de abrasiones corporales (Goodman, 1989).

El uso del quitosano en actividades agrcolas es mucho ms reciente pero, a pesar de ello,
puede considerarse hoy en da abundante y en aumento. El cuadro 1 muestra algunas de las
aplicaciones que se han ensayado para este biopolmero en actividades relacionadas con la
agricultura.

La diversidad de uso de estos materiales en diferentes reas del quehacer humano, en

muchas partes del mundo, y el poco conocimiento que de stos se tiene en el sector agrcola
de nuestra regin ha motivado la realizacin de esta revisin bibliogrfica, buscando darle
mayor difusin a este conocimiento acumulado. Igualmente, el trabajo realizado pretende
servir de puente entre las investigaciones previas relacionadas con algunas aplicaciones del
quitosano desarrolladas por el autor (Lrez, 2002; Lrez, 2006, Lrez et al., 2007) y el
sector agroproductor de la regin andina de Venezuela, la cual es productora de rubros
agrcolas que en nuestro pas se obtienen casi exclusivamente en dicha zona, como el caso
de la papa, la mora, el apio, etc. Es importante sealar que este sector, especialmente el
asentado en la denominada zona alta, ha enfrentado desde hace mucho tiempo graves
problemas medioambientales, muchos de los cuales estn relacionados con el uso
indiscriminado de biocidas y agroqumicos sintticos, su consecuente acumulacin en
suelos y la contaminacin del agua (Gutirrez, 1998), con lo cual un trabajo motivador del
uso de quitina y/o quitosano para estos fines parece una accin importante.
5.3 PROPIEDADES DEL QUITOSANO TILES EN AGRICULTURA

5.3.1 Actividad bactericida

La carga positiva que se desarrolla en el quitosano en medio cido (pH < 5,5; Figura 1),
debido a la protonacin del grupo amino presente en cada una de sus unidades
glucosamina, lo hace soluble en medio acuoso, diferencindolo de su polmero matriz la
quitina y, segn muchos autores, confirindole tambin mayor actividad biocida (Papineau
et al., 1991; Helander et al., 2001; Devlieghere et al., 2004). Los mecanismos de accin por
los cuales el quitosano (con distintos grados de acetilacin), y por extensin sus derivados,
ejercen dicha actividad no han sido dilucidados completamente; sin embargo, hay algunos
mecanismos propuestos para explicar acciones especficas, como por ejemplo:

La interaccin electrosttica entre el quitosano cargado positivamente (polielectrolito

catinico) y algunas bacterias con membranas celulares cargadas negativamente (Gram
negativas como la Echerichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus typhimurium,
etc.) altera significativamente las propiedades de barrera de la membrana exterior del
microorganismo (Helander et al., 2001). Algunos autores han propuesto que la formacin
del complejo polielectrolito bloquea fsicamente la membrana celular externa del
microorganismo, impidiendo el flujo normal de nutrimentos/desechos, provocando la
muerte bacteriana (Chung et al., 2004).

La interaccin electrosttica entre los grupos NH3 + del policatin y los grupos fosforilos
(Fernndez et al., 2003) de los fosfolpidos presentes en la membrana celular de bacterias
Gram negativas causa daos en sta, provocando la salida de material intracelular (Liu et
al., 2004). En este sentido se han realizado estudios espectroscpicos de la salida de dicho
material, el cual absorbe en la regin ultravioleta (270 nm). Ms recientemente Chung y
Chen (2008) han determinado que la salida del material intracelular bacteriano se ve
favorecida por grados de acetilacin ms altos, tanto en bacterias Gram negativas (E. coli)
como en Gram positivas (Staphylococcus aureus).

Para algunas bacterias Gram positivas (como S. aureus y Bacillus cereus) que carecen de
cargas negativas en la membrana celular, el quitosano ha mostrado actividad incluso mayor,
en algunos casos, que para bacterias Gram negativas. En el caso de S. aureus recientemente
se ha planteado la posibilidad de que la membrana celular de estos microorganismos tenga
poros lo suficientemente grandes como para que el quitosano logre entrar al interior de las
clulas (Li et al., 2007) y alterar funciones vitales de stas. Su interaccin con el ADN, por
ejemplo, podra inhibir la replicacin del ARNm y la sntesis de protenas (Hadwiger et al.,
1985; Sudarshan et al., 1992) y su efecto quelante podra disminuir la concentracin de
algunos metales necesarios en procesos enzimticos (Cuero et al., 1991). Sin embargo,
otros autores creen que la longitud de persistencia del quitosano cargado positivamente es
demasiado grande para poder pasar al interior de las clulas (Chung et al., 2003)
 La interaccin selectiva del quitosano con trazas de metales pudiera inhibir la produccin
de toxinas y el crecimiento microbiano (Sudarshan et al., 1992). En este sentido se conoce
bien que el quitosano puede ejercer una accin quelante bien especfica (Varma et al.,
2004).

Como puede inferirse de los mecanismos propuestos, la actividad antimicrobiana del

quitosano depender en gran manera de aquellos factores que ayuden a acentuar las cargas
positivas en la cadena del biopolmero. Entre estos factores cabe destacar el grado de
desacetilacin, la distribucin de los grupos desacetilados a lo largo de la cadena, la
longitud de la cadena, la distribucin de los pesos moleculares (Terbojevich et al., 1991), el
pH, la fuerza inica del medio, el contrain asociado en su forma sal y la temperatura.

En ese sentido, la dependencia de la carga con respecto al grado de desacetilacin es lineal

debido a que los quitosanos ms desacetilados (de una misma longitud de cadena) tendrn
mayor nmero de grupos aminos libres para ionizar, lo cual depender obviamente del pH
del medio (Rinaudo et al., 1993); asimismo, un peso molecular mayor implicar una
molcula con ms grupos cargados (para un mismo grado de desacetilacin y al mismo pH)
y una mayor interaccin electrosttica con grupos cargados negativamente.

Por su parte, el contrain asociado al quitosano en su forma salina puede apantallar en una
extensin variable las cargas positivas de ste, entre otras razones por efectos estricos
(Lrez et al., 2008). Un estudio sobre la actividad del quitosano disuelto en distintos cidos
sobre E. coli confirm que los cidos orgnicos de menor tamao produjeron soluciones
con mejores propiedades bactericidas. El cido frmico es ms eficaz que el cido actico,
cuyas soluciones a su vez mostraron mayor actividad que las preparadas con cido
propanoico (Chung et al., 2003). El apantallamiento de las cargas en la cadena tambin
puede surgir de la presencia de iones externos (algunas veces aadidos al medio para
controlar la fuerza inica), lo que modifica la magnitud de las interacciones entre stas
(Rinaudo et al., 1993); sin embargo, debe considerarse tambin que las molculas de
quitosano tienen una mayor solubilidad a valores de fuerza inica mayores, con lo cual
pueden compensar la mayor flexibilidad que adquieren en estas condiciones. La mayor
actividad bactericida observada contra E. coli y S. aureus para valores de fuerza inica ms
altos as parece demostrarlo (Chung y Chen, 2008). La explicacin anterior tambin podra
ser vlida para justificar la mayor actividad bactericida que se ha observado con soluciones
de quitosano cuando se incrementa la temperatura (Tsai y Su, 1999), en contra de lo que
debera esperarse si se considera que al aumentar la temperatura las cadenas se hacen ms
flexibles y compactas (Launay et al., 1986) y/o disminuyen su volumen especfico porque
se desfavorecen los puentes de hidrgeno con el agua (Noguchi, 1981).
5.3.2 Actividad fungicida

La actividad fungicida del quitosano se ha estudiado, tanto in vitro (El Ghaouth et al.,
1992a) como in vivo (Li y Yu, 2001; Yu et al., 2007). El quitosano inhibe multitud de
especies de hongos, exceptuando, o siendo menos efectivo con aquellas que lo poseen en
sus paredes celulares (Roller y Covill, 1999; Allan y Hardwiger, 1979), como cabra
esperar. Los hongos que poseen quitosano como componente de sus paredes celulares
deberan ser menos sensibles a la aplicacin de dosis razonables de ste por dos razones: (a)
la presencia natural de quitosano en las paredes celulares no genera efectos adversos para el
microorganismo y (b) las interacciones electrostticas del quitosano aadido (exgeno),
cargado positivamente, deberan verse menos favorecidas con paredes celulares que poseen
quitosano endgeno que cuando stas poseen material con cargas negativas. Estos estudios
han dejado claros los principales requerimientos que deben satisfacerse para lograr una
mayor efectividad fungicida del biopolmero. Los ms importantes son:

Existe una alta correlacin entre la concentracin de quitosano aplicada y la inhibicin

fngica; por Lrez-Velsquez. Algunas potencialidades de la quitina y el quitosano para
usos en la agricultura en Latinoamrica Revista UDO Agrcola 8 (1): 1-22. 2008 5 ello,
para una buena efectividad se deber encontrar la dosis adecuada en cada situacin.

Existen evidencias de que la sensibilidad de los hongos patgenos hacia el quitosano

puede cambiar en los diferentes estadios de su desarrollo. Por ejemplo, en el trabajo de Liu
et al. (2007), se reporta que el quitosano es mejor inhibidor de la germinacin de
Penicillium expansum que la de Botrytis cinerea, contrariamente a lo que se observ en el
crecimiento micelial de estas especies. De manera similar, un estudio reciente ha mostrado
que el quitosano es ms efectivo sobre los conidios que sobre las hifas de algunos hongos
fitopatgenos (Palma-Guerrero et al., 2008). En general, estos resultados son similares a los
reportados para otros agentes fungicidas, como por ejemplo el caso reportado por Everett et
al. (2005), quienes encontraron que la germinacin de esporas de Botryosphaeria parva fue
menor con la aplicacin del agente fluazinam que la de Colletotridum gloeosporioiodes,
pero ocurri lo contrario para la inhibicin del crecimiento micelial.

Tambin se ha encontrado una relacin directa entre la actividad fungicida y el peso

molecular del quitosano (Hirano y Nagano, 1989; BautistaBaos et al., 2005). De igual
modo, la actividad fungicida del quitosano se ha asociado desde hace mucho a su carcter
catinico. La interaccin de los grupos amino libres, cargados positivamente en medio
cido, con los residuos negativos de las macromolculas expuestas en la pared de los
hongos, cambian la permeabilidad de la membrana plasmtica, con la consecuente
alteracin de sus principales funciones (Benhamou, 1992). Otras posibles explicaciones de
la actividad fungicida del quitosano se relacionan con la inhibicin de la sntesis de algunas
enzimas presentes en los hongos (El-Ghaouth et al., 1992a) o la ocurrencia de alteraciones
citolgicas, como se ha reportado en el caso de B. cinerea, donde se ha observado al
microscopio la aparicin de vesculas y/o clulas vacas carentes de citoplasma, despus del
tratamiento con soluciones acuosas al 1,75% de quitosano (Barka et al., 2004). El cuadro 2
muestra algunos de los patgenos para los que se ha determinado in vitro la capacidad
inhibitoria del quitosano.

5.3.3Actividad antiviral

Se han publicado algunos trabajos sobre la inhibicin que provocan las soluciones de
quitosano en enfermedades de plantas provocadas por virus y viroides (Chirkov, 2002;
Pospieszny et al., 1989; Pospieszny et al., 1991; Pospieszny 1997). As, por ejemplo,
Pospieszny et al (1989) encontraron que una solucin acuosa 0,1% de quitosano (rociada o
adicionada al inculo) logra controlar completamente la infeccin local causada por el virus
del mosaico de la alfalfa (VMA) en hojas de frijoles. Se obtuvieron resultados similares
para otros virus como el virus de la necrosis del tabaco, virus del mosaico del tabaco
(VMT), virus del no crecimiento del man, virus del mosaico del pepino y el virus X de la
papa (Pospieszny et al., 1991). Por otra parte, se ha reportado la inhibicin de la
enfermedad causada por inoculacin de hojas de tomate con un viroide que afecta la papa
(potato spindle tuber viroid), cuando stas fueron tratadas con soluciones de quitosano
(Pospieszny 1997). Las principales observaciones de estos estudios han sido:

La eficacia del quitosano en la inhibicin de infecciones virales depende de la

combinacin virus/hospedante, la concentracin de quitosano aplicado y la forma de
aplicacin.

La mayor proteccin ocurri en las partes tratadas con quitosano (hojas) pero el efecto
protector tambin pudo apreciarse en otras partes no tratadas de las plantas que recibieron
el tratamiento (efecto sistmico).

El quitosano aadido a los protoplastos del tabaco bloquea completamente la acumulacin

del VMT an despus de 6-8 horas de aplicado.

El tratamiento previo con quitosano reduce significativamente la infeccin viral en varias

especies vegetales.

5.3.4 Estimulacin del crecimiento

En trminos generales, la aplicacin de quitosano ha mostrado efectos positivos en el
crecimiento de las plantas, tanto en la estimulacin de la germinacin de semillas como en
el crecimiento de partes de la planta como races, retoos y hojas. En algunos casos, se ha
observado que la estimulacin de la germinacin de semillas por tratamiento con quitosano
ha logrado elevar el porcentaje de germinacin a los niveles requeridos para la certificacin
(Bhaskara et al., 1999).

Los efectos beneficiosos del quitosano se han observado en plantas florales

(Wanichpongpan et al., 2001) y en plantas de cosecha (Chibu y Shibayama, 2001). As, por
ejemplo, cuando se aplicaron soluciones muy diluidas de quitosano en las races de
orqudeas, en forma de aerosol, stas mostraron una estimulacin en su crecimiento y
renovaron su produccin de flores (Chandrkrachang, 2002), entre otros efectos favorables.
Un estudio ms reciente, relacionado con el crecimiento de tejidos vegetales, ha mostrado
que el origen del quitosano es un aspecto importante. Los quitosanos procedentes de
hongos necesitaron de dosis menores para la induccin de la diferenciacin de tejidos de
plantas de orqudeas que los oligmeros procedentes de caparazones de camarones (Nge et
al., 2006), lo cual no es del todo extrao. A este respecto se sabe que uno de los aspectos
fundamentales en las propiedades fisicoqumicas del quitosano es su fuente de extraccin.
As por ejemplo, la quitina obtenida de camarones y cangrejos tiene una estructura
cristalogrfica , en la cual las cadenas principales estn ordenadas en agregados
antiparalelos que les permite formar puentes de hidrgenos intermoleculares muy fuertes,
mientras que la procedente de las plumas de calamar tiene una estructura , con las cadenas
ordenadas en arreglos paralelos y fuerzas intermoleculares ms dbiles (Tolaimate et al.,
2000).

En el cuadro 3 se pueden observar algunos resultados interesantes, que confirman el efecto

beneficioso del quitosano en algunas variables relacionadas con el crecimiento en plantas
de mijo perla, cuyas semillas fueron tratadas previamente con Elexa, un agroqumico que
contiene quitosano como ingrediente activo.

5.3.5 Induccin de resistencia

Desde hace tiempo se ha comprobado que el quitosano induce reacciones de defensa en

algunas plantas (Pearce y Ride, 1982), sensibilizndolas para responder ms rpidamente al
ataque de patgenos. Entre las sustancias cuya induccin se ve favorecida por la presencia
de quitina y/o quitosano, as como tambin muchos de sus derivados, se incluyen:

Fitoalexinas: pisantina, risitina, orchinol, genistein, etc.

Protenas relacionadas a la patognesis.

Inhibidores proteicos

Ligninas.
En el caso del quitosano se ha propuesto que esta sensibilizacin ocurre porque su
presencia estimula mecanismos de defensa ya conocidos (Barka et al., 2004), como por
ejemplo la produccin de quitinasas y glucanasas (Benhamou, 1996); la lignificacin en
hojas daadas (Pearce y Ride, 1982) o intactas (Moerschbacher et al., 1986); la generacin
de perxido de hidrgeno (Lee et al., 1999) o la formacin de fitoalexinas en legumbres y
plantas solanceas (Cote y Hahn, 1994). Los compuestos que provocan este tipo de
respuestas se conocen como inductores.

Un factor importante a considerar en el uso de quitosano como un inductor es, adems del
peso molecular, su grado de acetilacin. Los quitosanos completamente desacetilados no
inducen respuestas defensivas en la mayora de los sistemas donde han sido ensayados; los
resultados con materiales parcialmente acetilados son muchas veces dependientes del
sistema estudiado, pero en general stos actan como excelentes inductores, lo que ha
llevado a pensar en mecanismos de induccin diferentes (Lee et al., 1999). Por esa razn, se
ha pensado que la actividad del quitosano como inductor reside en sus regiones acetiladas.

La actividad inductora del quitosano altamente desacetilado y la no actividad de los

oligmeros completamente desacetilados ha sido explicada por un mecanismo
independiente de receptores especficos (Kauss et al., 1989), considerando que puede
ocurrir una interaccin entre las cargas positivas del policatin con fosfolpidos
negativamente cargados de la membrana plasmtica en las plantas, afectndose la
integridad de esta ltima. Sobre la base de estas consideraciones, se debera esperar un
aumento en la actividad inductora del quitosano cuando su grado de acetilacin disminuye,
es decir, cuando sus grupos cargados aumentan; sin embargo, es preciso tambin recordar
que su actividad desaparece cuando el material est completamente desacetilado.

En el cuadro 4 se muestran algunos de los sistemas donde se ha estudiado la capacidad

inductora del quitosano. Es importante resaltar que en algunos casos la capacidad inductora
del quitosano no slo puede ser aprovechada para proteger la planta sino que se puede
utilizar para incrementar el rendimiento de alguna sustancia comercialmente importante,
como algunos metabolitos secundarios en los casos del aceite esencial d-limoneno en
algunos ctricos y el mentol en la menta (Lockwood et al., 2007; Chang et al., 1998).

5.4 USOS ESPECFICOS DE LA QUITINA Y EL QUITOSANO EN REAS

RELACIONADAS CON LA AGRICULTURA

5.4.1 Proteccin de frutos y vegetales frescos con recubrimientos de quitosano

El uso de quitosano para el recubrimiento de frutas y vegetales se ha propuesto y ensayado

desde hace ms de 15 aos (El Ghaouth et al., 1991) debido a sus propiedades bactericidas
y fungicidas, su capacidad para formar pelculas y su baja toxicidad en seres humanos, la
cual haba sido estudiada en la dcada de los sesenta del siglo pasado (Arai et al., 1968). En
principio, la capacidad del quitosano para formar pelculas favorece la preservacin de los
productos debido a la modificacin de la atmsfera interna y a la disminucin de las
prdidas por transpiracin. En la mayora de los sistemas estudiados se observ un efecto
positivo en la conservacin de los productos despus de su recubrimiento con quitosano.
As por ejemplo, Devlieghere et al. (2004) observaron que el recubrimiento de fresas con
soluciones de quitosano tiene efectos benficos notables a partir del cuarto da, en la
preservacin del fruto. Las principales observaciones en estos sistemas han sido las
siguientes:

Disminucin en las prdidas por transpiracin. La respiracin disminuye lentamente,

aunque inicialmente se observa un incremento de la misma que se atribuye al estrs
ocasionado por la solucin acuosa de cido lctico/lactato de sodio usada para disolver el
quitosano.

Se conserva una mejor textura con el tiempo; en los casos donde se realizaron mediciones
cuantitativas se estableci una mayor firmeza en los frutos tratados con quitosano que en
aquellos no tratados.

Aparte de un ligero sabor amargo inicial durante el primer da, que desaparece
rpidamente y que no Lrez-Velsquez. Algunas potencialidades de la quitina y el
quitosano para usos en la agricultura en Latinoamrica 8 Revista UDO Agrcola 8 (1): 1-22.
2008 se aprecia en das posteriores, la presencia de quitosano no caus diferencias
organolpticas apreciables entre los frutos tratados y los frutos no tratados con quitosano.

La carga microbiolgica a lo largo del tiempo permaneci siempre ms baja en los

sistemas tratados con quitosano. En este mismo trabajo se reportaron resultados similares
para una mezcla de legumbres frescas (lechuga, endibia, rbano, etc.) tratadas con una
solucin de quitosano al pH natural de stas. Sin embargo, en este caso se observaron dos
situaciones iniciales adversas:

El sabor amargo inicial de las muestras tratadas con quitosano permanece durante un
tiempo mayor, aunque ste va desapareciendo en el tiempo. Se atribuy este sabor amargo
al pH inicial ms alto de la solucin de quitosano (alrededor de 5) ya que las soluciones de
quitosano con pH < 5,5 tienen un sabor astringente que se hace menos pronunciado a
medida que el pH aumenta (Rodrguez et al., 2003)

Una apariencia limosa inicial de las legumbres, que va tornndose con el tiempo similar a
la de las muestras control.

La carga microbiolgica en la mezcla de lechugas comienza a aumentar a partir del cuarto

da; los autores asumen que la actividad bactericida de la solucin de quitosano usada en
estos ensayos es menor debido a que el pH alto (5) lo hace tener una menor fraccin de
cargas positivas. Los aspectos que deben ser considerados en la preservacin de frutos y
vegetales mediante el uso de recubrimientos de quitosano son:
a) El tipo de quitosano a emplear (grado de acetilacin, peso molecular, procedencia).

b) cido usado para preparar las soluciones acuosas.

c) pH del medio, cuidando de respetar el pH natural del producto a proteger.

d) Temperatura de almacenamiento.

e) La presencia de otros componentes en el producto a proteger, como por ejemplo

azcares, sales, protenas, etc. Se puede observar un resumen de algunos sistemas
estudiados mediante proteccin con recubrimientos de quitosano en el cuadro 5.

5.4.2 Proteccin de plntulas

Una de las mayores necesidades agrcolas es la proteccin de las plntulas contra

enfermedades causadas por patgenos. En este sentido, un estudio reciente relacionado con
la proteccin de plantitas de uva (Barka et al., 2004) mostr que el quitosano no slo es
efectivo para inhibir el crecimiento de B. cinerea en las plantitas expuestas a este
microorganismo sino que adems parece activar mecanismos de defensa. Igualmente, el
tratamiento con el biopolmero estimul el crecimiento de las plantitas. Otros estudios
realizados con plntulas de tomate han mostrado resultados similares en la induccin de
resistencia hacia Fusarium oxysporum (Benhamou et al., 1998).

Se considera que el quitosano puede inducir la acumulacin masiva de sustancias

fungitxicas en los lugares de aplicacin y/o constituirse en una barrera que impida el flujo
de nutrimentos hacia el patgeno; esta ltima consideracin se soporta en seales de
deterioro que a menudo muestran las clulas fngicas expuestas a quitosano, como por
ejemplo la formacin anormal de depsitos enriquecidos en quitina entre la membrana
plasmtica y la pared celular (Benhamou et al., 1998; ElGhaouth et al., 2000).

5.4.3 Clarificacin de jugos de frutas

El carcter coagulante/floculante del quitosano se ha aprovechado desde hace ms de 30

aos en algunas aplicaciones relacionadas con el tratamiento de aguas provenientes de
diversas fuentes (Bough, 1975; Roussy et al., 2005) as como en la recuperacin de slidos
suspendidos en aguas residuales que pueden ser an aprovechables (Bough y Landes,
1978). Sin embargo, la utilidad de dichas aplicaciones ha estado limitada por la solubilidad
del biopolmero a valores de pH > 6,5. En ese sentido, una estrategia comn ha sido la
modificacin qumica del quitosano para generar materiales solubles en un intervalo de pH
ms amplio, incluyendo valores de pH alcalinos, que pueda permitir el tratamiento de aguas
de diversa procedencia. As, por ejemplo, la metilacin exhaustiva del grupo amino del
biopolmero produce un material soluble en agua que tiene mejores propiedades
coagulantes/floculantes que el quitosano de partida (Lrez et al., 2003).

Por otra parte, en varios pases se ha aprobado el uso del quitosano para ser utilizado como
aditivo en la clarificacin de jugos de frutas (Baxter et al., 2005; Oszmiaski y Wojdyo,
2007), aunque ste presenta los mismos inconvenientes de insolubilidad en medios neutros
o alcalinos, por lo que se han ensayado quitosanos modificados para solventar dicha
insolubilidad. Una de las vas rpidas que se ha encontrado para solubilizar el quitosano es
la disminucin de su grado de polimerizacin mediante hidrlisis con cido actico a 95 C
(Chatterjee et al., 2004); el hidrolizado as obtenido se us, despus de su purificacin,
como agente coagulante/floculante en la clarificacin de jugos de varias frutas (manzana,
uva, naranja y limn) obtenindose resultados satisfactorios. As por ejemplo, para todos
los jugos ensayados con este quitosano se obtuvo una mayor disminucin de la turbidez que
con otros agentes clarificantes como bentonita y gelatina, un contenido Lrez-Velsquez.
Algunas potencialidades de la quitina y el quitosano para usos en la agricultura en
Latinoamrica 10 Revista UDO Agrcola 8 (1): 1-22. 2008 de cidos y azcares similar a
los originales y un contenido de slidos totales y protenas slo ligeramente inferior; de la
misma manera, las propiedades de sabor, color, apariencia y aceptabilidad mejoraron
despus del tratamiento con quitosano.

5.4.4 Matriz para la liberacin controlada de agroqumicos

Los agroqumicos son sustancias usadas para mejorar la produccin en las cosechas; sin
embargo, su aplicacin convencional puede llegar a resultar en la contaminacin de suelos
y aguas. Por ello, se hace necesario disminuir las cantidades usadas de ingredientes activos
sin reducir la eficiencia de los tratamientos. El reemplazo de formulaciones agroqumicas
tradicionales por sistemas de liberacin controlada no solo ayuda a evitar el empleo de
cantidades excesivas de sustancias activas sino que a menudo ofrece soluciones tcnicas
adecuadas en reas especiales, como por ejemplo: el control del arroz silvestre (Zizania
aquatica), el manejo de enfermedades en campos deportivos, etc. Los objetivos
fundamentales que se pretenden alcanzar mediante el uso de formulaciones para la
liberacin controlada son:

Proteccin de los agentes suministrados.

Permitir la liberacin automtica del agroqumico nicamente en el lugar seleccionado, a

una velocidad adecuada.

Mantener su concentracin en el sistema dentro de los lmites ptimos durante un periodo

de tiempo especificado, otorgando especificidad y persistencia En este sentido, la liberacin
sostenida en el tiempo de agroqumicos, de diversa ndole, es una de las metas a lograr en la
agricultura debido a que sta puede permitir tomar el control de varios problemas, entre los
cuales se pueden mencionar:

Los efectos de los agroqumicos liberados se prolongan con lo cual se obtienen ahorros
econmicos sustanciales debido a que se puede ejercer un mejor control de las cantidades
usadas.

La liberacin desde la matriz ocurre cuando la planta lo necesita, generalmente en dosis

menores a las que se obtienen cuando el agroqumico se aplica solo.

Reduccin del nmero de aplicaciones, disminuyendo el contacto del personal con los
agroqumicos y las horas dedicadas a este trabajo, as como tambin el estrs en las plantas.

Disminucin del riesgo en la toxicidad hacia humanos y animales debido a que la

aplicacin se realiza en la vecindad de cada planta y en dosis controladas.

Uso de las cantidades necesarias del agroqumico, lo que obviamente conlleva a menores
costos econmicos.
 Un trato ms amigable del medioambiente debido a la liberacin de las cantidades
necesarias para las plantas. Igualmente, la degradacin del biomaterial usado como soporte
no afecta la calidad del suelo.

Una de las primeras propuestas para el uso de derivados de quitosano, en forma de

membrana protectora, para la liberacin controlada de agroqumicos fue realizado por
Hirano (1978). As mismo, la quitina se utiliz como matriz para la liberacin de un
agroqumico en los inicios de los aos ochenta, cuando se report la unin qumica del
herbicida metribuzin a este biopolmero y su subsiguiente liberacin (McCormik et al.,
1982). Posteriormente, se publicaron estudios para la liberacin controlada de urea y
atrazina, un herbicida de uso comn para controlar la cizaa (Lolium temulentum) en
campos de maz, usando pelculas y perlas fabricadas con hidrogeles de quitosano y
derivados de este biopolmero (Teixeira et al., 1990). Los ensayos mostraron que las
matrices usadas eran efectivas para controlar la liberacin de los agroqumicos estudiados y
extender su tiempo de liberacin hasta periodos 180 veces mayores que cuando stos se
aplican solos. En el cuadro 6 se muestran algunos de los sistemas basados en quitina y/o
quitosano utilizados para la liberacin controlada de agroqumicos.
5.4.5 Biocidas basados en quitina y quitosano

El uso de la quitina para el control de nemtodos del suelo se conoce desde hace tiempo
(Mankau y Das, 1969) y en la actualidad existen en el mercado algunos productos que
pueden ser usados con este fin tales como Clandosan, Biolizer NC, EcoPoly 2, etc. El
mecanismo de accin de la quitina est basado en el hecho de que su presencia en el suelo
estimula la proliferacin de bacterias y actinomicetos que se alimentan de ella, como por
ejemplo los hongos nematfagos; estos microorganismos, una vez consumida la quitina
agregada pasan a consumir quitina de otras fuentes, como nematodos y sus huevos
(Rodrguez-Kabana et al., 1987). Por otra parte, es necesario considerar la dosificacin de
quitina en suelos debido a que su descomposicin puede tener efectos fitotxicos,
originados por el amonio que se libera durante su descomposicin (Culbreath et al., 1985).
La dosis tpica recomendada por varios autores est entre 3-4 toneladas por acre (Spiegel et
al., 1986; Spiegel et al., 1987), lo que la hace costosa para muchos cultivos.

Por otra parte, el principal uso como biocida que se le ha dado al quitosano ha sido como
fungicida en la proteccin de semillas. Esta propiedad, junto con la estimulacin del
crecimiento, ha hecho al quitosano realmente atractivo para su uso en la agricultura. Sin
embargo, han aparecido otras aplicaciones que implican su uso como biocida y, en ese
sentido, para el ao 2001 el quitosano aparece registrado en el proyecto IR-4 como un
bioplaguicida para uso en cultivos de uvas y fresas, quedando pendiente la revisin para los
mismos fines en pepino, meln y pomelos (Baron, 2001). El proyecto IR-4 (The IR-4
project) es una de las mayores fuentes de datos usados por los agricultores norteamericanos
para el manejo de plagas, el cual ha sido desarrollado por la Agencia de Proteccin
Ambiental Estadounidense (EPA) como soporte para el desarrollo de valores legales de
tolerancia en plaguicidas de nuevo uso.

Igualmente, han aparecido en fecha reciente algunos trabajos que demuestran una mayor
actividad fungicida (Xu et al., 2007) e insecticida (Zhang y Tan, 2003) de los oligmeros
del quitosano, lo cual pareciera estar fundamentado en la mayor facilidad que tienen estos
oligmeros para atravesar la membrana celular. Kendra y Hadwiger (1984) haban
mostrado que el heptmero de quitosano tena la mxima actividad fungicida contra F.
solani (y la mayor capacidad inductora), incluyendo en la comparacin oligmeros que
contienen de 1 a 5 unidades repetitivas.

Es importante resaltar que la concentracin de quitosano en las formulaciones aplicadas

puede tener efectos importantes para cada tipo de fitopatgeno en particular. As, por
ejemplo, en algunos casos la actividad biocida del quitosano puede verse favorecida con un
aumento de la concentracin del quitosano (El-Ghaouth et al., 1992b) y en otros casos
puede suceder lo contrario (Wojdya et al., 1996). Esto, sin duda, hace pensar que el
quitosano puede actuar como biocida mediante diversos mecanismos bioqumicos
(Szczeponek et al., 2006), lo que complica el entendimiento de sus mecanismos de accin.
Adicionalmente, es importante considerar que en muchos casos estudiados es difcil separar
su efecto inductor, el cual contribuye a la autoproteccin de la planta.

5.5 ANTRACNOSIS
5.5.1Generalidadades
Es una enfermedad producida por hongos que causa la desintegracin de los tejidos. Se
observan manchas negras y hundidas en forma de lcera que aparecen sobre hojas, tallos,
flores y frutos de numerosas plantas de los jardines. Pueden aparecer rayas de color marrn
oscuro en la punta de las hojas. Prosperan en ambientes clidos y hmedos. Al dificultar la
fotosntesis las hojas se tornan amarillas y rugosas hasta su destruccin total. Ataca especies
ornamentales como por ejemplo: murdago, phitosporum, ligustro, laurentino, jazmn,
rosal, evnimus y tambin frutales como los ctricos y la uva. Es la enfermedad ms
importante en el cultivo de la guayaba y de las plantas de zonas calurosas y hmedas. Ataca
flores, frutos y ramas. Es causada por un hongo que puede ser generalmente el
Colletotrichum o el Gloeosporium. Los sntomas inciales de la afeccin, lo constituyen
manchas amarillentas en las flores, las cuales continan en la fruta pequea.
5.5.2 Sintomas de la enfermedad
Los sntomas inicialmente se presentan en forma de exudados gomosos y luego pequeas
lesiones de 1cm de dimetro de aspecto aceitoso y luego estas se tornan de color caf con
halo amarillo que tienden a hundirse en el borde; con el tiempo las lesiones coalescen y se
extienden a varias zonas del fruto. En la zona central de la lesin se observa un pequeo
hundimiento y el centro es de color gris a caf con puntos de color salmn o rosa en donde
se ubican los acrvulos y en el interior los conidios (estructuras reproductivas). A medida
que el fruto madura se presenta ablandamiento de la epidermis y a medida que aumenta el
ablandamiento el hongo coloniza ms el fruto presentndose lesiones mayores a 3cm.
5.5.3Ciclo y Epidemiologa:
La antracnosis se desarrolla dentro de un rango amplio de temperaturas. Los sntomas de la
pudricin basal se desarrolla a temperaturas ms frescas (15 a 25C, o 60 a 78F), mientras
que los sntomas foliares ocurren a temperaturas superiores a los 26C (79F). Los brotes
de la antracnosis foliar se han podido predecir usando una combinacin de la duracin de
humedad en la hoja y la temperatura ambiental. Para la infeccin se necesita una humedad
continua sobre la hoja de 12 horas o ms y de temperaturas entre 14 y 28C (57 a 82F),
que se intensifica con un incremento de la temperatura y de la duracin de la humedad
sobre la hoja. El periodo de latencia (tiempo entre la infeccin y la produccin de nuevas
esporas) se piensa que es de 10 a 12 das. Las plantas juveniles exhiben una buena
resistencia a la antracnosis foliar causada por C. cereale. Al madurar las plantas, los
sntomas inciales se desarrollan en las hojas ms viejas y en estado de senescencia. En el
pasto azul anual (Poa annua), los sntomas de antracnosis foliar se incrementan en
severidad tras las antesis (apertura de flores). Se cree que las plantas sometidas a estrs por
sequa y/o estrs de fertilidad son ms susceptibles a la infeccin. Hospedantes especficos.
Aislados de C. cereale muestran un grado de especificidad patognica ya sea hacia pasto
azul anual (Poa annua) o hacia csped bent trepador, aunque algunos aislados pueden
infectar a ambos hospederos. Anlisis de ADN indican que aislados de pasto azul, csped
bent trepador y maz son genticamente diferentes. Adems, similitudes genticas entre
aislados de C. cereale estn ms influenciadas por la planta husped que por origen
geogrfico. Por ejemplo, aislados de C. cereale procedentes del csped bent trepador y de
pasto azul anual pueden diferir en la longitud de apresorio y esporas. Los resultados de un
estudio indican que la media de longitud del apresorio fue 0.8 m ms larga para aislados
del csped bent trepador que para aislados de Poa annua. En contraste, la media longitud de
la espora fue 1.5 m ms corta para aislados del csped bent trepador que para aislados de
pasto azul. Adems, cuando se cultiv en agar, el color de las colonias de C. cereale fue
influenciado por el tipo de csped. Cultivos negro-grisceos fueron aislados de csped bent
trepador, y cultivos con coloracin rosa fueron aislados de pasto azul anua

5.5.4 Alternativas de manejo integrado de la enfermedad

Dentro de las prcticas de manejo en campo para evitar la aparicin de la enfermedad en el

cultivo de la estn:

Realizar drenajes, para evitar que en condiciones de alta precipitacin el agua se

estanque aumentando as la humedad relativa del cultivo.

Poda fitosanitaria, eliminar las hojas clorticas y las senescentes las cuales son
frecuentemente las hojas bajeras de la planta.

Recoleccin de hojas senescentes, frutos enfermos y frutos cados, pues son fuente
de inoculo.

En el momento de la cosecha es importante evitar golpear la fruta o dejarla caer al

suelo, por tanto se recomienda cosechar fruto por fruto y envolver frutos en papel para
evitar el roce con otros frutos.

Disponer los frutos en canastillas aislndolos del suelo.

Adecuada fertilizacin principalmente de elementos como Ca y B los cuales juegan

un papel importante en la formacin de la pared celular de los frutos, confiriendo
rigidez.

Aplicacin de fungicidas con diferentes mecanismos de accin.

5.5.5 Manejo poscosecha para prevenir antracnosis

Despus de cosechados los frutos, los cuales generalmente se cosechan en grado de

maduracin 3 (escala para Colombia) estos pueden ser lavados o sumergidos en una
solucin con agua limpia ms fungicida, generalmente de ingrediente activo
Tiabendazol o Procloraz; es importante cambiar constantemente la solucin para
evitar contaminaciones y usar proteccin adecuada. Posteriormente a la inmersin
 los frutos se dejan secar y se protege cada fruta con mallas o espumas que eviten el
golpe de las frutas. Se empacan en cajas, formado solo una capa de fruta (evitar
disponer una fruta sobre otra) evitando daos mecnicos.

Despus de empacada la fruta debe entrar a cadena de frio entre 12-14C, lo ideal es
mantener la temperatura constante puesto que si se presenta un incremento en la
temperatura se genera un aumento en la respiracin de la fruta y por tanto
condensacin del agua en el empaque, condicin ideal para el crecimiento de
antracnosis. Adicionalmente, es indispensable evitar golpes de las frutas para evitar
el ablandamiento de la epidermis.

Otra medida poscosecha de control de antracnosis es el tratamiento trmico, para

esto los frutos se sumergen en agua caliente 49C por un tiempo de 10 minutos, o
tambin realizar un choque trmico introduciendo la fruta en agua fra 4C por 5
minutos y enseguida sumergirla en agua caliente.

VI. HIPTESIS
El quitosano extrado a partir del exoesqueleto de langostino es eficaz en el tratamiento de
quitosano.
VII. MATERIALES Y METODOS

7.1 TIPO DE INVESTIGACIN: Predictiva

7.2 EL MODELO TERICO: Qumicos

7.3 EL DISEO DE LA INVESTIGACIN: Experimental

7.4 MATERIALES

7.4.1 Materia Prima:

Cscara de langostino

7.4.2 Elementos de Laboratorio

Balanza analtica.
Vasos precipitado 500 ml.
Agitador magntico
Tubos de ensayo 100 ml.
Tamices.
Esptula.
Varillas de vidrio
 Termmetros.
Balones.
Filtros de papel y metlicos.
Piseta.
Pipetas.
Estufa de cultivo

7.4.3 Reactivos

Solucin de NaOH 0,8 N, y 13 N.

Solucin de HCL 1,3 N.

7.5 PROCEDIMIENTO
1. Desmineralizacin
2. Desproteinizacin
3. Desacetilizacin
4. Moldeo

7.6 EXTRACCIN DE QUITINA A PARTIR DE CAPARAZONES DE

CRUSTCEOS Y TRANSFORMACIN A QUITOSANO

El proceso inicial es la extraccin de minerales y luego, la protena aunque esta secuencia

puede invertirse en algunos casos.

Se comienza el proceso actuando siempre sobre muestras de 10 gr para manejar volmenes

pequeos de reactivos en el laboratorio.

1. AISLAMIENTO DE LA QUITINA

a) Recepcin de la materia prima: se parti de residuos de langostinos congelados. Se

pesan y lavan con agua potable y se separaran las colas y restos de pulpa de las
cscaras y se separan de otros residuos orgnicos e impurezas que contiene el
exoesqueleto. Se secan y se trituran en morteros con el piln hasta obtener un polvo
rosado que se tamiza con un tamiz de 20 - 30 unidades mesh.
b) Desmineralizacin: El contenido mineral de los residuos de los crustceos oscila
entre 30% y 55%, y est constituido, principalmente, por carbonato de calcio y en
menor proporcin (10%), por fosfato de calcio. La remocin del carbonato de calcio
se realiza por tratamiento acido. Para ello, se utiliz cido clorhdrico (HCl) a una
concentracin de 1,3 N, a temperatura ambiente (25C) durante una hora.

Al concluir la operacin se produce el lavado de la quitina con abundante agua

destilada hasta pH neutro. Se filtra con papel de filtro y se obtiene el slido seco
para la prxima etapa.
 c) Desproteinizacin: En el proceso qumico para separar la protena presente en el
material biolgico, los exoesqueletos de crustceos son tratados usualmente con
soluciones de NaOH 0,8 Na 80C durante un periodo de 4 horas.

Al concluir la etapa se lava nuevamente la quitina con abundante agua destilada hasta pH
neutro, se filtra con papel de filtro y se obtiene el slido seco para la prxima etapa.

A esta etapa debera seguirle una decoloracin con agentes decolorantes del tipo del agua
oxigenada al 0,5 3 % pero como el pigmento es escaso y no afecta el producto final, en
este caso este paso se omiti.

2. OBTENCIN DEL QUITOSANO

La principal reaccin de derivatizacion de la quitina es la hidrlisis de los grupos acetamida

para generar el polmero desacetilado, quitosano aunque las amidas, en principio, pueden
hidrolizarse bajo condiciones acidas o alcalinas, se excluye el uso de hidrlisis acida debido
a la susceptibilidad a la misma de los enlaces glicosidicos de la quitina.

Esta reaccin se conduce bajo condiciones alcalinas muy severas, con hidrxido de sodio
13 N y una tempe-ratura de 100C durante 15 horas.
Una prueba rpida para saber si el producto obtenido es quitosano es ver la cantidad que se
solubiliza en ci-do actico al 5%, si solo queda retenido luego del filtrado del mismo una
proporcin menor al 20% estamos en presencia de un buen producto.

CARACTERIZACIN DEL QUITOSANO

1. Porcentaje de residuos slidos: 15%

2. Porcentaje de humedad: 9%
3. Determinacin del grado de desacetilacin (DA%):

RENDIMIENTO

El rendimiento de quitosano fue calculado en porcentaje en peso, como gramos de quitina

obtenidos a partir de 10 gramos de cscaras secas,
Muestras de Langostinos secas: 10 gr.
Producto Final, quitosano: 2 gr.
Rendimiento aproximado: 20 %

Para producir 2 gramos se utilizaron 60 ml de cido clorhdrico 1,3 N, 90 ml de hidrxido

de sodio 0,8N y 60 ml hidrxido de sodio 13N.

Es decir que con 1 litro de cido clorhdrico y 1,8 litros de hidrxido de sodio se puede
aislar 40 gr de quito-sano por lo menos.

Si el costo de los reactivos es de $ 40 por litro aproximadamente. Entonces con $ 120 se

producen 40 gr de quitosano.

Costo del Quitosano $3 por gramo aproximadamente.

IV. RESULTADOS Y DISCUSION

Resumiendo los resultados y determinaciones propias se obtuvieron los siguientes

resultados:
7.7 ACCIN ANTIFUNGICA DEL QUITOSANO PARA EL TRATEMIENTO DE
LA ANTRACNOSIS
7.7.1 Mecanismos de accin del quitosano.
Se han propuesto diferentes mecanismos, por los que el quitosano puede actuar sobre los
microorganismos e inhibir su crecimiento y desarrollo. Se plantea la permeabilidad de la
membrana citoplasmtica, mediante la interaccin de sus grupos NH3 + con componentes
fosfolipdicos cargados negativamente en las membranas, con lo que se altera el
intercambio con el medio, adems de la formacin de quelatos con los metales de transicin
y la inhibicin de algunas enzimas.
El biopolmero puede actuar a nivel molecular, sobre los cidos nucleicos y alterar sus
funciones, mediante cambios transcripcionales especficos , o inducir alteraciones
estructurales de las clulas fungosas como la presencia de vesculas en el micelio, clulas
sin contenido citoplasmtico, otras desorganizaciones celulares que abarcan la excesiva
ramificacin y ensanchamiento de la pared celular, la prdida de la misma y hasta la
desintegracin del citoplasma.
7.7.2Actividad fungicida del quitosano.
La actividad fungicida del quitosano se ha estudiado, tanto in vitro como in vivo.El
quitosano inhibe el desarrollo de numerosas especies de hongos, siendo menos efectivo con
aquellas que lo poseen en sus paredes celulares .
Los hongos que poseen quitosano como componente de sus paredes celulares deberan ser
menos sensibles a la aplicacin de dosis razonables de ste por dos razones: (a) la presencia
natural de quitosano en las paredes celulares no genera efectos adversos para el
microorganismo y (b) las interacciones electrostticas del quitosano aadido (exgeno),
cargado positivamente, deberan verse menos favorecidas con paredes celulares que poseen
quitosano endgeno que cuando stas poseen material con cargas negativas.
Estos estudios han dejado claros los principales requerimientos que deben satisfacerse para
lograr una mayor efectividad fungicida del biopolmero. Los ms importantes son: Existe
una alta correlacin entre la concentracin de quitosano aplicada y la inhibicin fngica;
por ello, para una buena efectividad se deber encontrar la dosis adecuada en cada
situacin. Existen evidencias de que la sensibilidad de los hongos patgenos hacia el
quitosano puede cambiar en los diferentes estados de su desarrollo. Por ejemplo, en el
trabajo de Liu et al. [76], se reporta que el quitosano es mejor inhibidor de la germinacin
de Penicillium expansum que la de Botrytis cinerea, contrariamente a lo que se observ en
el crecimiento micelial de estas especies.
De manera similar, un estudio reciente ha mostrado que el quitosano es ms efectivo sobre
los conidios que sobre las hifas de algunos hongos fitopatgenos.
En general, estos resultados son similares a los reportados para otros agentes fungicidas,
como por ejemplo el caso reportado por Everett et al quienes encontraron que la
germinacin de esporas de Botryosphaeria parva fue menor con la aplicacin del agente
fluazinam que la de Colletotrichum gloeosporioiodes, pero ocurri lo contrario para la
inhibicin del crecimiento micelial.
Tambin se ha encontrado una relacin directa entre la actividad fungicida y el peso
molecular del quitosano . De igual modo, la actividad fungicida del quitosano se ha
asociado desde hace mucho a su carcter catinico. La interaccin de los grupos amino
libres, cargados positivamente en medio cido, con los residuos negativos de las
macromolculas expuestas en la pared de los hongos, cambian la permeabilidad de la
membrana plasmtica, con la consecuente alteracin de sus principales funciones. Otras
posibles explicaciones de la actividad fungicida del quitosano se relacionan con la
inhibicin de la sntesis de algunas enzimas presentes en los hongos o la ocurrencia de
alteraciones citolgicas, como se ha reportado en el caso de B. cinerea, donde se ha
observado al microscopio la aparicin de vesculas y/o clulas vacas carentes de
citoplasma, despus del tratamiento con soluciones acuosas al 1,75% de quitosano. En la
Tabla 3 se resumen los principales estudios in vitro realizados para el combate de
enfermedades fitopatogenas mediante la aplicacin de quitosano.
V. CONCLUSIONES

Se ha demostrado que el quitosano induce o inhibe diferentes actividades

bioqumicas durante la interaccin planta-patgeno mejorando la tolerancia a una
amplia variedad de fitopatgenos, lo cual indica que el uso de este compuesto como
inductor natural puede ser explotado en la agricultura sostenible

VI. RECOMENDACIONES
En general, la bsqueda de materiales menos agresivos con el ambiente es una tarea
continua en todas las reas del quehacer humano debido a los altos niveles de
contaminacin presentes en todo el planeta. En la agricultura este trabajo es doblemente
complicado porque, por un lado se deben producir materiales que logren su efecto
especfico en la planta o en sus productos, mientras que por el otro, se necesita que stos se
eliminen sin efectos perturbadores en el medio ambiente.

Adicionalmente, en los sistemas agrcolas es necesario garantizar que los diversos

agroqumicos utilizados como biocidas, estimuladores de crecimiento, fertilizantes, etc., no
produzcan efectos perjudiciales como la induccin de resistencia en patgenos o su
acumulacin en los consumidores humanos. Se estima que muchas de las enfermedades
actuales se producen por las causasanteriores.

El uso de agroqumicos de origen natural podra ser una solucin satisfactoria a la

problemtica anterior. Son muchas las sustancias que desde mucho tiempo se usan en este
sentido. En el presente trabajo se aborda la revisin de algunas aplicaciones de la quitina y
el quitosano, dos biopolmeros de origen natural que se han convertido rpidamente en una
alternativa prometedora para la agricultura.

Las propiedades antimicrobianas de la quitina y el quitosano son conocidas por el hombre

desde la antigedad. En un principio, no se conoca la relacin entre dichas propiedades y
la composicin qumica de estos materiales. S se conocan, no obstante, sus propiedades
curativas, las cuales fueron aprovechadas ampliamente, como por ejemplo en la aceleracin
de la cicatrizacin de heridas. En este sentido, se sabe que los primeros mexicanos usaban
preparaciones derivadas de hongos para acelerar la cicatrizacin de heridas y que los
coreanos primitivos utilizaban quitina, proveniente de la pluma de calamar, para favorecer
la curacin de abrasiones corporales (Goodman, 1989).

El uso del quitosano en actividades agrcolas es mucho ms reciente pero, a pesar de ello,
puede considerarse hoy en da abundante y en aumento. El cuadro 1 muestra algunas de las
aplicaciones que se han ensayado para este biopolmero en actividades relacionadas con la
agricultura
VII REFERENCIAS BIBLIOGRAFCAS

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ANEXOS
Fig. Mango infectado con antracnosis

Fig. Langostino usado para la extraccin de quitosano.