Evaluacin del efecto ecotoxicolgico del efluente del rio Huyacoloro-Chosica

sobre Lemna minor

Alissa A, Cesar C, Daisy R & Johan R1

Laboratorio de Ecotoxicologa, Facultad de Ciencias Naturales y Matemtica.

Universidad Nacional Federico Villarreal. Calle Ro Chepn s/n, El Agustino. Lima, Per.
Correo electrnico: akitosan35@gmail.com
INTRODUCCIN

El agua es un elemento vital del planeta. Los sistemas fluviales mantienen la vida
terrestre y proveen de agua al 90% de la poblacin mundial (FAO, 1992). En los
ltimos aos se ha observado una creciente preocupacin mundial por los temas
referidos a la calidad del agua. Numerosos cientficos que participaron en la
Conferencia Internacional sobre Agua y Medio Ambiente (Dublu, 1992) y la
Conferencia de las Naciones Unidas sobre Medio Ambiente y Desarrollo (Ro de
Janeiro, 1992) debatieron temas referidos a la necesidad de proteger la calidad del
agua para el manejo seguro y sostenible de los recursos hdricos (FAO, 1992).

Si por agua entendemos el compuesto qumico H2O, cualquier cosa distinta a este
elemento est cambiando su caracterstica y podra considerarse como un
contaminante. Por supuesto que este concepto es muy poco prctico, puesto que el
agua pura rara vez se encuentra en la naturaleza. Tendemos a aceptar la nocin de
que un contaminante del agua es cualquier sustancia o compuesto cuya concentracin
limite o impida sus usos benficos. Se define entonces la contaminacin del agua
como la introduccin por el hombre en el ambiente acutico (mares, ros y lagos) de
elementos abiticos o biticos que causen efectos dainos o txicos, perjudiquen los
recursos vivos, constituyan un peligro para la salud humana, obstaculicen las
actividades martimas (incluida la pesca), menoscaben la calidad del agua o
disminuyan los valores estticos y de recreacin (FAO, 1992).

La contaminacin ambiental y especficamente de las aguas constituye una de los

problemas que ms inters y preocupacin han generado en los ltimos aos y que
hoy en da es un serio problema que enfrentan los pases desarrollados y los que
estn en vas de desarrollo. Las estadsticas plantean que un 51 % de los desechos
tienen como destino final los ros, embalses y aguas costeras.(Velsquez L.,1987)

La generacin de aguas residuales domsticas e industriales en Lima Metropolitana es

de aproximadamente 19m3/s (Meiorin and Noriega, 1999). Menos del 2% de esta agua
residual es tratada en lagunas de oxidacin y el resto es descargado directamente
sobre los ros (Rmac, Chilln y Lurn) o el mar. Una pequea parte del agua tratada es
usada para la irrigacin de cultivos (Meiorin and Noriega, 1999). Debido al no-
tratamiento y a la escasez del agua, el uso de las aguas residuales y/o contaminadas
es una condicin de vida a la que se enfrentan la mayora de agricultores urbanos y
peri-urbanos de esta ciudad.

Especialmente el ro Rmac sufre de contaminacin industrial. La quebrada del Ro

Huaycoloro se ubica en la cuenca del ro Rmac y abarca los distritos de Lurigancho,
Chosica y San Antonio de Chaclla de las provincias de Lima y Huarochir en el
departamento de Lima. Su importancia radica en que es el ltimo punto de afluencia
hacia el ro Rmac, antes de entrar a la planta de tratamiento de aguas La Atarjea,
para luego ser distribuida en la ciudad de Lima. Por lo cual es necesario monitorear la
calidad del agua de este cuerpo de agua.

En la quebrada Huaycoloro, existen ms de diez empresas altamente contaminantes.

En este ro se identifican establecimientos industriales tales como fbrica de productos
lcteos, textiles, curtiembres, cerveza, etc. La contaminacin industrial ha llegado a tal
punto, que en algunos sectores cercanos a las lavanderas y empresas textiles, el ro
tiene una coloracin azul y gris, asimismo, a lo largo del ro Huaycoloro se establecen
asentamientos humanos que vierten sus aguas residuales domsticas sin tratamiento
al recurso hdrico.

Por estas razones, es importante determinar el nivel de riesgo ambiental del efluente
propio del lugar utilizando bioensayos ecotoxicolgicos (un ensayo de toxicidad es un
mtodo que permite evaluar el potencial txico de una sustancia sobre un organismo
vivo). Estos ensayos son tiles para identificar el efecto que diferentes
concentraciones de un contaminante especfico puedan tener sobre las especies
presentes en un ecosistema. (Iannacone, J; Alvario, L,2000)

El objetivo de este estudio fue determinar los efectos ecotoxicolgicos del efluente del
rio Huaycoloro sobre Lemna minor.

MATERIALES Y MTODO

Para el estudio se utiliz la Lemna minor, especie con abundante representatividad

ecolgica, miembro de la cadena trfica, con buena disponibilidad y adecuabilidad
para pruebas de laboratorio y una adecuada informacin sobre la biologa y la ecologa
(Prez Davison G.Lic.et.al.,2000).

La especie evaluada, Lemna minor, se colect de los Pantanos de Villa (UTM

283349.08 - 8649511.16), ubicado a 32 km al sur del departamento de Lima-Per, Las
muestras de L. minor fueron trasladadas en baldes de 20L, al laboratorio para su
adaptacin (N. Morales, 2006).

El efluente estudiado fue trado del ro Huaycoloro (UTM 18 L 291195.02- 8672481.7) y

usado el mismo da en que se mont el ensayo.

El ensayo se desarroll en un sistema esttico para la determinacin de la

ecotoxicidad provocado por el efluente, sobre las plantas acuticas de la especie
Lemna minor. Este estudio dur 7 das (168 horas), donde se evalu un total de 10
especmenes por envase, a seis concentraciones con cuatro repeticiones (incluyendo
el control).

Los especmenes seleccionados contenan tres hojas pequeas aproximadamente del

mismo tamao, los envases de experimentacin fueron envases de plstico
transparente de 250 ml, donde se agregaron para T1 200 ml, T2 100 ml, T3 50 ml, T4
25 ml y T5 12.5ml del efluente, respectivamente para los tratamientos T2, T3, T4, T5
se complet los volmenes con agua mineral de la marca San Mateo hasta llegar a los
200ml, as mismo para el control, solo se agreg 200ml de agua mineral de la marca
San Mateo.

El bioensayo se realiz a 21+/- 1C, se evalu el pH y la conectividad para los 5

tratamientos ms el control al inicio del bioensayo, luego los envases se colocaron
aleatoriamente frente a la ventana para asemejar las condiciones de su entorno (luz) y
se dej por 7 das para su posterior evaluacin.

Las lecturas finales de los siete tems a evaluar, se realizaron teniendo en cuenta
aquellos parmetros capaces de cambiar el aspecto normal de las plantas y/o signos
de fitotoxicidad que expresen trastornos fisiolgicos y detrimentales (O, Hondal,
J,Hernndez, 2003) , que incluan formacin de hojitas nuevas, clorosis (50% de
prdida de pigmento), necrosis (50% de tejido muerto) y ruptura de colonias, fueron
realizadas bajo el microscopio estereoscpico a 4x de aumento para la evaluacin de
sntomas, seguido de la evaluacin de peso hmedo y peso seco, haciendo uso de la
estufa durante 24 horas

Tipos de bioensayo Esttico

Tiempo de exposicin 7 das
Temperatura 24 +/- 3 C
pH 7 +/- 1
Fotoperiodo Oscuridad
Tamao de envase 500 ml
Volumen de solucin 200 ml
Edad de organismo 2 hojas
N de rplicas por concentracin 4
N de concentracin ms control 6
N de organismos por concentracin 40
N de organismos por envase 10
No requiere
Rgimen de alimentacin
alimentacin
Agua de control y disolucin Agua mineral
Tiempo de observacin en la placa de
1 semana
recuento
Respuesta letalidad Necrosis
Respuesta subletalidad Clorosis
Criterios de aceptabilidad 70%

RESULTADOS

Durante el tiempo del ensayo no se observaron signos de ecototoxicidad ni ocurri

mortalidad en los diferentes ensayos. Los datos obtenidos a los 7 das de exposicin,
arrojaron para la prueba de anlisis de varianza de Anova significancias de: porcentaje
de clorosis (p=0.9305), porcentaje de necrosis (p=0.8045), nmero de hojas (p =
0.0730), nmero de frondas (p=0.1388) y peso hmedo (p=0.0622) donde no se
observ diferencias con el control, mientras para el parmetro de ruptura de hojas
(p=0.0041) y de peso seco (p=0.0078) hubo diferencias con el control.

Luego se aplic la prueba de Tukey para ver cul de las concentraciones difiere con el
control, para la ruptura de hojas el T1 tiene diferencia significativa y el T2 una ligera
diferencia significativa, para el peso seco el T1 tiene diferencia significativa y la de T4 y
T525 una ligera diferencia significativa.

Adems de ello se determin un NOEC mayor al T1 Para los parmetros de ruptura de

hojas y peso seco determin un NOEC igual a T4 y T3 y para LOEC, T3 y T4
respectivamente.

DISCUSIONES
Los resultados obtenidos para clorosis y necrosis, no mostraron diferencias
significativas y esto se puede deber a la capacidad de las macrofitas de ser
biorremediadoras de metales pesados como los explica Burk y Weis (2000), quienes
mencionan que las plantas acuticas acumulan gran cantidad de metales pesados en
sus tejidos, los cuales son liberados posteriormente al medio. Autores como
Mentaberry (2009), describen los mecanismos de evasin o tolerancia, de tres formas,
captacin celular limitada (evasin), metabolismo resistente a metales pesados y
detoxificacin por quelacin, compartimentalizacin o precipitacin.

Para el modelo biolgico, Lemna minor, se dej un da antes de empezar la

preparacin del bioensayo para que se adece al ambiente del laboratorio, sin
embargo en otros trabajos se cra masivamente durante dos semanas antes del inicio
de la prueba, en un acuario de 60 cm largo x 30 cm de ancho x 30 cm de alto con
sales nutritivas (Iannacone y col. 2000), a una profundidad del agua mayor de 80 mm y
con un fluorescente de luz blanca de 4300 lux. No se utiliz una sustancia nutritiva
debido a que no se cro a la macrofita acutica, pero la implementacin de est, una
preparacin salina (preparacin de Steinberg modificado por Altenburger), le provee un
crecimiento ptimo en condiciones controladas. El medio nutritivo de Steinberg es
recambiado 3 veces por semana para evitar efectos alelopticos que puedan provocar
la aparicin de microalgas (Van Vierssen and Prins 1985; Kemp et. al., 1988).

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

Burk, D.; Weis, J. (2000); Release of metals by the leaves of the salt marsh grasses
Spartina alterniflora and Phragmites australis. Estuarine, Coastal and Shelf Science:
51, 153-159.

FAO: Evaluacin de la contaminacin del suelo: manual de referencia , 2000.:

Prevencin de la contaminacin del agua por la agricultura y actividades a fin.
Informes sobre temas hdricos, Santiago de Chile, 1992.

Iannacone, Jos, Alvario, Lorena, Caballero, Cecilia, & Snchez, Javier. (2000).
CUATRO ENSAYOS ECOTOXICOLOGICOS PARA EVALUAR LINDANO Y
CLORPIRIFOS. Gayana (Concepcin), 64(2), 139-146.

Mentaberry A. (2009); Curso Agrobiotecnologa, Fitorremediacin Departamento de

Fisiologa, Biologa Molecular y Celular. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.
Universidad de Buenos Aires. Disponible en:
http://www.fbmc.fcen.uba.ar/materias/agbt/teoricos/Fitorremediacion.pdf. Fecha de
consulta: 20 de octubre de 2010.

N. Morales, K. Arvalo, J. Ortega, B. Briceo, C. Andrade, E. Morales. ( 2006). El pH y

la fuente nitrogenada como moduladores del crecimiento de la macrfita Lemna sp..
Rev. Fac. Agron. (LUZ), 23, 67-79.

Onelio Carballo Hondal, Jos Trujillo Hernndez, Emilio lvarez, Yaisel Pomares
Iturralde, Pilar Villa. (2003). Toxicidad aguda del fungicida biolgico Gluticid en planta
acutica: Lemna minor. RETEL:Revista de toxicologia en linea, 1, 21-34.

Prez Davison G.Lic.et.al.,(2000). Tesis presentada en opcin al grado cientfico de:

Maestro en Ciencias. Estudios Ecotoxicolgicos al Biobras- 16. Universidad de la
Habana. Instituto de Farmacia y Alimentos. Centro de Investigaciones y Evaluaciones
Biolgicas.

Van Viersen, W., and Prins, T. C. (1985). Relationship between the growth of algae and
aquatic macrophytes in brackish waters. Aquat. Bot. 21, 165

Velsquez Lustiniano, Plantas Acuticas Vasculares de Venezuela. Cdigo: L 323.97

(1987)

Wang, W. & J. Williams. 1990. The use of phytotoxicity tests (common duckweed,
cabbage and millet) for determining effluent toxicity. Environ. Monit. Assess. 14:45.
ANEXOS

Anexo 1. Condiciones y criterios de aceptabilidad de la prueba toxicidad con Lemna

minor

Cuadro de Anlisis de la Varianza (SC tipo III)

F.V. SC gl CM F p-valor
Modelo. 36.25 5 7.25 0.26 0.9305
TRATAMIENTOS 36.25 5 7.25 0.26 0.9305
Error 507.03 18 28.17
Total 543.28 23

Test: Tukey Alfa=0.05 DMS=11.92682

Error: 28.1684 gl: 18
TRATAMIENTOS Medias n E.E.
2 2.04 4 2.65 A
3 2.27 4 2.65 A
6 2.50 4 2.65 A
4 2.78 4 2.65 A
5 4.33 4 2.65 A
1 5.42 4 2.65 A

Anexo 2. Anova de un factor para el parmetro porcentaje de clorosis.

Cuadro de Anlisis de la Varianza (SC tipo III)

F.V. SC gl CM F p-valor
Modelo. 3.2E-03 5 6.4E-04 0.45 0.8045
TRATAMIENTOS 3.2E-03 5 6.4E-04 0.45 0.8045
Error 0.03 18 1.4E-03
Total 0.03 23

Test: Tukey Alfa=0.05 DMS=0.08403

Error: 0.0014 gl: 18
TRATAMIENTOS Medias n E.E.
3 0.00 4 0.02 A
2 0.00 4 0.02 A
5 0.01 4 0.02 A
4 0.02 4 0.02 A
6 0.03 4 0.02 A
1 0.03 4 0.02 A
Anexo 3. Anova de un factor para el parmetro porcentaje de necrosis.

Cuadro de Anlisis de la Varianza (SC tipo III)

 F.V. SC gl CM F p-valor
Modelo. 374.38 5 74.88 2.45 0.0730
TRATAMIENTOS 374.38 5 74.88 2.45 0.0730
Error 549.25 18 30.51
Total 923.63 23

Test:Tukey Alfa=0.05 DMS=12.41345

Error: 30.5139 gl: 18
TRATAMIENTOS Medias n E.E.
4 23.25 4 2.76 A
6 24.50 4 2.76 A
5 25.75 4 2.76 A
3 32.00 4 2.76 A
1 32.00 4 2.76 A
2 32.75 4 2.76 A
Anexo 4. Anova de un factor para el parmetro nmero de hojas.

Cuadro de Anlisis de la Varianza (SC tipo III)

F.V. SC gl CM F p-valor
Modelo. 136.71 5 27.34 5.17 0.0041
TRATAMIENTOS 136.71 5 27.34 5.17 0.0041
Error 95.25 18 5.29
Total 231.96 23

Test:Tukey Alfa=0.05 DMS=5.16940

Error: 5.2917 gl: 18
TRATAMIENTOS Medias n E.E.
5 1.25 4 1.15 A
4 2.00 4 1.15 A
1 2.25 4 1.15 A
6 3.00 4 1.15 A
2 3.75 4 1.15 A B
3 8.50 4 1.15 B
Anexo 5. Anova de un factor para el parmetro ruptura de hojas.

Cuadro de Anlisis de la Varianza (SC tipo III)

F.V. SC gl CM F p-valor
Modelo. 1324.38 5 264.88 1.93 0.1388
TRATAMIENTOS 1324.38 5 264.88 1.93 0.1388
Error 2468.25 18 137.13
Total 3792.63 23

Test:Tukey Alfa=0.05 DMS=26.31492

Error: 137.1250 gl: 18
TRATAMIENTOS Medias n E.E.
4 30.50 4 5.86 A
3 37.75 4 5.86 A
6 39.75 4 5.86 A
5 42.00 4 5.86 A
2 51.25 4 5.86 A
1 51.50 4 5.86 A
Anexo 6. Anova de un factor para el parmetro nmero de frondas.
Cuadro de Anlisis de la Varianza (SC tipo III)
F.V. SC gl CM F p-valor
Modelo. 8.2E-04 5 1.6E-04 4.49 0.0078
TRATAMIENTOS 8.2E-04 5 1.6E-04 4.49 0.0078
Error 6.6E-04 18 3.7E-05
Total 1.5E-03 23

Test: Tukey Alfa=0.05 DMS=0.01359

Error: 0.0000 gl: 18
TRATAMIENTOS Medias n E.E.
1 0.59 4 3.0E-03 A
5 0.60 4 3.0E-03 A
3 0.60 4 3.0E-03 A
6 0.60 4 3.0E-03 A B
4 0.60 4 3.0E-03 A B
2 0.61 4 3.0E-03 B
Anexo 7. Anova de un factor para el parmetro peso seco.

Cuadro de Anlisis de la Varianza (SC tipo III)

F.V. SC gl CM F p-valor
Modelo. 0.01 5 1.9E-03 2.59 0.0622
TRATAMIENTOS 0.01 5 1.9E-03 2.59 0.0622
Error 0.01 18 7.2E-04
Total 0.02 23

Test:Tukey Alfa=0.05 DMS=0.06012

Error: 0.0007 gl: 18
TRATAMIENTOS Medias n E.E.
1 0.66 4 0.01 A
3 0.66 4 0.01 A
6 0.67 4 0.01 A
5 0.67 4 0.01 A
4 0.68 4 0.01 A
2 0.72 4 0.01 A
Anexo 8. Anova de un factor para el parmetro peso hmedo.