UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE CHILE

FACULTAD DE QUMICA Y BIOLOGA

PRINCIPIOS DE SISTEMAS CELULARES

MICROSCOPA

INTEGRANTES: Francis Gonzlez

Javiera Tapia

PROFESOR: Eduardo Lopez

FECHA DE ENTREGA: 28 de abril de 2017

 1. INTRODUCCIN

Los avances tecnolgicos, como la creacin del microscopio, permitieron superar las limitaciones
impuestas por el ojo humano y comenzar a descubrir de qu estn hechos los organismos vivos. Las
clulas, por ejemplo, son demasiado pequeas para verlas a simple vista, pero con la ayuda del
microscopio ptico fue posible observar clulas vivas y un mundo de organismos microscpicos
mviles.

El microscopio ptico utiliza la luz visible para iluminar las muestras y lentes de cristal para lograr
un mnimo de resolucin de 200 nm, por otro lado el microscopio electrnico, el cual utiliza haces
de electrones en vez de luz visible, posee un mnimo de resolucin de 0,2 nm.

Si se realiza un corte muy fino de un tejido vegetal o animal y colocamos la muestra en un

microscopio ptico, se puede observar que estos tejidos estn divididos en miles de pequeas
clulas con lmites bien definidos que indican la existencia de membrana de envoltura, con un
cuerpo redondeado y grande en el centro llamado ncleo y con una sustancia alrededor de este
ocupando el espacio interior de la clula denominado citoplasma, en el cual se encuentran las
estructuras que componen la clula, pero no todas pueden ser percibidas por este tipo de
microscopio.

Las clulas que poseen ncleo las llamamos eucariontes y poseen una gran variedad de otros
orgnulos con funciones especializadas, la mayora de estos son comunes en todas las eucariontes.
Por ejemplo las mitocondrias son uno de los orgnulos ms destacados ya que son los que
posibilitan a animales, hongos y plantas a utilizar oxigeno para extraer el mximo de energa de los
alimentos que los nutren. Otro orgnulo importante es el cloroplasto, este es verde y grande,entre
sus membranas contiene el pigmento ver clorofila y se encuentra solo en clulas de plantas y algas,
permitindoles obtener su energa a partir de la luz solar, es decir, realizan la fotosntesis. (Alberts,
2011)

En el citoplasma, adems de los orgnulos, hay una mezcla concentrada de molculas grandes y
pequeas que realizan muchos procesos bioqumicos esenciales (Alberts, 2011). Dependiendo de la
concentracin de estas molculas, en comparacin con el medio extracelular, puede entrar o salir
agua de la clula para mantenerse en un ambiente equilibrado. Este proceso se conoce como
osmosis y consiste en el paso de agua, a favor del gradiente hacia donde hay mayor concentracin
de soluto. Si la concentracin de soluto es mayor dentro de la clula, se dice que est en solucin
hipotnica y en consecuencia gana agua, se expandir. Si la concentracin es mayor en el medio
extracelular, se dice que est en solucin hipertnica y se produce encogimiento de la clula por la

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prdida de agua. Si la concentracin de soluto es igual en ambos laos de la membrana, entonces la
solucin es isotnica. Las clulas animales funcionan de manera ptima en solucin isotnica, por
otro lado las clulas vegetales deben estar trgidas para lo que necesitan solucin hipotnica, de lo
contrario pueden sufrir plasmlisis.

2. OBJETIVOS

2.1 Objetivo general:

2.1.1 Conocer y aprender la correcta utilizacin de un microscopio ptico y de las partesque lo

componen, mediante la observacin directa de materiales biolgicos, lo que en este prctico
corresponde a diferentes tipos de clulas.

2.2 Objetivos especficos:

2.2.1 Observar un catafilo de Allium cepa natural y luego bajo tincin con hematoxilina/eosina,
utilizando un microscopio ptico a diferentes aumentos.
2.2.2 Observar e identificar cloroplastos en hoja de elodea y realizar un diagrama a escala.
2.2.3 Observar e identificar principales estructuras de muestras preparadas de Monocotilednea y
Dicotilednea, de Ascaris y msculo estriado.
2.2.4 Observar muestras de sangre, realizando un frotis sanguneo y determinar el efecto que
producen diferentes concentraciones de sacarosa (0,1, 0,3 y 0,6 M) en la muestra original.

3. MATERIALES Y MTODOS

3.1 Observacin de un catfilo de Allium cepa

Se otorg por el profesor un catafilo de un bulbo de cebolla el cualse mantuvo en una placa con
agua destilada, se cort en dos el catfilo sumergido, la primera parte fue puesta sobre un
portaobjetos y cubierto con un cubreobjetos.

La segunda parte del catfilo, se someti a tincin con hematoxilina/eosina. Primero, se sumergi al
catafilo en hematoxilina durante 10 minutos,luegose lav con agua destilada para eliminar el exceso
de tincin, se trat por 30 segundos con HCL 0,2%, se lav con abundante agua, se cubri con
eosina durante 5 minutos y finalmente, se elimin exceso de tincin con abundante agua.

Ambos catafilos (el natural y el teido), se observaron al microscopio ptico (Axiostar Plus, Carl
Zeiss), a una resolucin de (10x),(40x) y (100x).

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 3.2 Observacin de cloroplastos en Elodea

Se expuso una hoja de Elodea sumergida en agua a oscuridad, luego, se extrajo y se traspas la
muestra rpidamente al portaobjetos, sta fue llevada al microscopio ptico(Axiostar Plus, Carl
Zeiss), en donde se observ a una resolucin de (10x), (40x) y (100x).

3.3 Observacin de muestras preparadas

A partir de muestras preparadas otorgadas por el profesor en el laboratorio (Monocotilednea y

Dicotilednea,Ascaris y msculo estriado), se observ cada una al microscopio ptico(Axiostar
Plus, Carl Zeiss) a resoluciones de (10x), (40x) y (100x), luego se registr lo observado en cada
caso.

3.4 Observacin de una muestra de sangre

Mediante una pipeta se agreg a tres tubos de ensayos, previamente rotulados, 3mL de solucin de
sacarosa 0,1[M], 0,3[M] y 0,6[M], respectivamente. Luego, a cada tubo se le agregaron 3 mLde una
muestra de sangre proporcionada por el profesor. Se observ la apariencia de la mezcla y se
prepararon cuatro laminillas, una con la muestra de sangre original, y las otras tres con muestras
obtenidas de los tres tubos de ensayos preparados anteriormente. Finalmente, se observaron las
cuatro muestras al microscopio ptico(Axiostar Plus, Carl Zeiss), a diferentes resoluciones,
registrando finalmente lo observado en cada muestra.

4. RESULTADOS

4.1 Observacin de un catafilo de cebolla.

Se observan las paredes de las clulas vegetales que conforman el tejido catafilo

Figura 4.1: Catfilo de bulbo de cebolla natural A) Catfilo a (10x) B) Catfilo a (40x) y C)
Catfilo a (100x).

Se observan las paredes celulares y unos pequeos crculos rojos que corresponden al ncleo de las
clulas vegetales.

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Figura 4.2: Catfilo de bulbo de cebolla teido con hematoxilina/eosina A) Catfilo teido a (10x)
B) Catfilo teido a (40x) y C) Catfilo teido a (100x).

4.2 Observacin de cloroplastos en hoja de Elodea.

Se observan crculos verdes que corresponden a los cloroplastos y adems, en la imagen C) se

observa cmo se van agrupando en la pared celular al ser expuestos a la luz solar.

Figura 4.3: Hoja de elodea A) Observada a (10x) B) Observada a (40x) C) Observada a (100x)

4.3 Observacin de muestras preparadas.

Se observa la estructura del tallo de una monocotilednea, en la figura es posible apreciar haces
vasculares dispuestos irregularmente en el tejido fundamental del tallo.

Figura 4.4: Muestra de Monocotilednea A) Muestra observada a (10x) B) Muestra observada a

(40x) C) Muestra observada a (100x).

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Se observa la estructura del tallo de una dicotilednea, en la figura es posible apreciar haces
vasculares dispuestos de forma concntrica formando un anillo que delimita el tejido fundamental
del tallo.

Figura 4.5: Muestra de Dicotilednea A) Muestra observada a (10x) B) Muestra observada a (40x)
C) Muestra observada a (100x).

Se observan las clulas de Ascaris en el proceso de divisin celular, a una mayor resolucin se
observa este proceso de manera ms detallada.

Figura 4.6: Muestra de Ascaris A) Muestra observada a (10x) B) Muestra observada a (40x) C)
Muestra observada a (100x).

Se observan fibras musculares longitudinales y una mayor resolucin (Figura B y C), se observan
pequeos ncleos celulares.

Figura 4.7: Muestra de msculo estriado A) Muestra observada a (10x) B) Muestra observada a
(40x) C) Muestra observada a (100x).

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4.4 Observacin de una muestra de sangre

Se observa gran concentracin de eritrocitos en la muestra de sangre que no est disuelta, por otro
lado, se observa una disminucin en la cantidad de eritrocitos tanto en la solucin 0,1M como en la
0,6M.

Figura 4.8: A) Muestra de sangre a (10x) B) Muestra con solucin 0,1M de sacarosa a (40x)
C) Muestra con solucin 0,6M de sacarosa a (40x).

Se observan gran concentracin de eritrocitos en la muestra de sangre con solucin 0,3 M de

sacarosa, similar a la observada en muestra de sangre no disuelta.

Figura 4.9: Muestra de sangre con solucin de sacarosa 0,3M A) a (10x) B) a (100x).

5. DISCUSIN

5.1 Observacin de un catfilo de cebolla

Al observar el catafilo de Allium Cepa sin tincin, se observa en la figura 4.1A, las clulas
vegetales conformando una red ordenada en el catfilo, en la estructura celular se puede apreciar la
pared celular y el medio citoslico. Al aumentar la resolucin no es posible observar otra estructura.

Analizando el catfilo bajo tincin con hematoxilina/eosina (Figura 4.2), se observa un contorno
redondeado dentro del citoplasma, al ir aumentando la resolucin (Figura 4.2 A, B y C) se puede
observar ese contorno ms detalladamente, el cual corresponde al ncleo de la clula vegetal.

La hematoxilina y eosina son colorantes de uso frecuente para el estudio de la composicin,

estructura y caractersticas de los tejidos orgnicos de los seres vivos. Desde un punto de vista

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estructural, la hematoxilina no es un colorante bsico, pero tiene propiedades tintoriales muy
semejante a las de las anilinas bsicas. Los colorantes bsicos reaccionan con los componentes
aninicos de las clulas y los tejidos. Por otra parte, la eosina corresponde a un colorante cido, los
colorantes cidos reaccionan con los grupos catinicos de las clulas y los tejidos (Michael H. Ross,
2008).

Gracias a esta caracterstica de los colorantes, es posible observar el ncleo celular inmerso en el
citoplasma, ya que la hematoxilina reacciona con las cargas negativas presentes en los cidos
nucleicos del ADN. En cambio, la eosina reacciona con las cargas positivas del citoplasma celular.

5.2 Observacin de cloroplastos de elodea.

Se observaron pequeos crculos verdes que corresponden a los cloroplastos de la hoja de elodea,
pero adems en la experiencia se vio como estos cloroplastos se fueron agrupando en las paredes de
las clulas luego de que la hoja fuera expuesta a la luz solar. Este fenmeno se debe a que los
cloroplastos son los que contienen a la clorofila, cuando se mantiene una planta en la oscuridad su
color verde desaparece y cuando se la coloca otra vez a la luz, el color reaparece (Alberts, 2011).

5.3 Observacin de muestras preparadas.

5.3.1 Monocotilednea y dicotilednea:

En las figuras 4.4 y 4.5 es posible observar dos clases de tallos de Angiospermas, las
monocotiledneas y dicotiledneas, respectivamente. Ambas son plantas vasculares, el sistema de
tejidos vasculares es el encargado de transportar materiales entre races y tallos.

En la mayor parte de monocotiledneas el tejido vascular est formado por numerosos haces
vasculares dispersos a travs del tejido fundamental, lo que es posible apreciar en la figura 4.4 A
donde se observan dos haces vasculares dispersos irregularmente en la mdula de la
monocotilednea.

Por otra parte, en la mayora de las dicotiledneas, el tejido vascular forma un anillo. En la imagen
4.5A se puede observar este anillo conformado por una serie de haces vasculares que se encuentran
muy prximos unos de otros. La mdula es la regin que queda encerrada por el tejido vascular.

El tejido vascular contiene al xilema, al floema y a otros tejidos accesorios dependiendo del grupo
al que la planta pertenece.

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En la imagen 4.4 B y C se observa en aumento el haz vascular de la Monocotilednea en donde se
encuentra el xilema (denotado por a en la imagen 4.4 B) y el floema (denotado por b en la
imagen 4.4 B)

Por otra parte, en la dicotilednea (figura 4.5) el floema se ubica ms cerca del centro, mientras que
el xilema se ubica ms cerca de la superficie del tallo, al contrario de la monocotilednea en donde
estas estructuras se encuentras dentro de cada haz vascular disperso en el tejido fundamental (Jos
R. Alonso Pea, 2011).

5.3.2 Ascaris:

De la muestra de Ascaris, es posible observar que las clulas se encuentran en distintas fases del
proceso de mitosis.

A partir de la imagen 4.6 se puede apreciar que algunas clulas se encuentran en telofase y otras en
citocinesis. Se puede observar que un nmero de clulas en telofase, tienen sus ncleos
relativamente unidos, en cambio otras clulas, tienen sus ncleos ya divididos. Las clulas en
citocinesis tienen un espaciado entre ellas, demostrando una divisin en el citoplasma.

5.3.3 Msculo estriado:

El tejido muscular tiene a su cargo el movimiento del cuerpo y de sus partes y el cambio de tamao
y forma de los rganos internos. Este tejido se caracteriza por poseer conjuntos de largas clulas
especializadas dispuestas en haces paralelos, cuya funcin principal es la contraccin (Michael H.
Ross, 2008). La caracterstica estructural ms importante de estas clulas a caracterstica es la
presencia de miofilamentos de dos tipos, filamentos delgados de actina y filamentos gruesos de
miosina. En las clulas musculares estriadas los miofilamentos se disponen ordenados en unidades
morfolgicas y funcionales denominadas sarcmeras que dan lugar a una estriacin transversal
caracterstica. El citoplasma (tambin denominado sarcoplasma) est mayoritariamente ocupado por
miofilamentos dispuestos en sentido longitudinal (Ricardo Paniagua,2007).

En la figura 4.7 Se pueden observar fibras (clulas) musculares largas y dispuestas paralelamente
que conforman el tejido muscular. Las fibras parecen ser de diferentes grosores se encuentran
rodeados por una regin blanca denominada endomisio, el cul es un tejido convectivo que delimita
cada fibra muscular mantenindolas unidas. A una resolucin mayor (figura 4.7 A y C) se puede
observar que estas clulas contienen ncleos orientados perifricamente, sin embargo, no es posible
apreciar las estriaciones transversales caractersticas.

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5.4 Observacin de muestras de sangre.

Al observar la figura 4.9 se aprecia que la cantidad de eritrocitos es similar a la observada en la

muestra de sangre pura (figura 4.8 A), por lo que se puede decir que las clulas se encontraban en
un medio isotnico en la solucin 0,3M de sacarosa.

Se observa que la cantidad de eritrocitos en la muestra con solucin 0,1M de sacarosa (figura 4.8
B), es inferior a la observada en muestra de sangre no disuelta, adems se aprecia que las clulas
estn hinchadas, por lo que se puede decir que la solucin es hipotnica y que la disminucin en la
concentracin es debido al estallido de clulas debido a la presin producida por el exceso de
liquido ingresado.

En la muestra de sangre con solucin 0,6M de sacarosa (figura 4.8 C) se observa que el volumen de
los eritrocitos es inferior que el de los de la sangre pura y adems su concentracin tambin es
menor. Lo apreciado es debido a que la solucin es hipertnica, producindose destruccin de
clulas por deshidratacin.

6. CONCLUSIN

6.1 Se identifica claramente el ncleo y pared de celular de catfilo de Allium Cepa a travs del
microscopio (a 10x,40x y 100x), gracias a una tincin con hematoxilina/eosina.

6.2 Se identificaron los cloroplastos de la hoja de elodea y se aprecio la interaccin entres los
cloroplastos y la luz solar.

6.3 Se identificaron principales estructuras de muestras preparadas de Monocotilednea y

Dicotilednea, de Ascaris y msculo estriado.

6.4 Se observo el efecto producido por soluciones con distintas concentraciones de sacarosa a los
eritrocitos de una muestra de sangre.

7. REFERENCIAS

7.1 Alberts, Bray, Hopkin, Johnson, Lewis, Raff, Roberts, Walter (2011). Introduccin a la biologa
celular. 3 ed. Editorial mdica panamericana (Mxico). pp: 6-19.

7.2 Michael H. Ross y WojciechPawlina (2008). Histologa: texto y atlas color con biologa celular
y molecular. 5 ed. Editorial mdica panamericana (Buenos Aires). pp: 6-7, 304-306.

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7.3 Ricardo Paniagua (2007). Citologa e histologa vegetal y animal. 2 vols. 4 ed. Editorial
McGraw-Hill Interamericana. pp: 643-647.

7.4 Jos R. Alonso Pea (2011). Manual de histologa vegetal. Ediciones Mundi-Prensa (Madrid-
Mxico) pp: 115-123, 125, 151-155.

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