UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE

SAN MARCOS
Universidad del Per, DECANA DE
AMRICA
CUANTIFICACIN DE CROMO EN LQUIDOS BIOLGICOS
FACULTAD DE FARMACIAYYMEDIO AMBIENTE
BIOQUIMICA
ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL FARMACIA Y
BIOQUIMICA

Profesor: Mg. Jos Antonio Llahuilla Quea

Integrantes:

Ancasi Hinostroza, Roxana

Ataucusi Esquivel, Kevin

Cotrina Ordoez, Yuly

Torre Altez, Andy

Yi Zapata, Diego

Horario de prctica: jueves 10 am 2 pm

Fecha de realizacin de la prctica: 20/04/2017

Fecha de entrega del informe: 27/04/2017

2017
UNMSM - Cuantificacin de cromo en lquidos biolgicos y medio ambiente

I. OBJETIVOS

Cuantificar la concentracin de cromo en orina utilizando el mtodo

espectrofotomtrico

II. FUNDAMENTO DEL MTODO

El mtodo utilizado fue el espectrofotomtrico, para realizar las lecturas a 540

nm se debe tener muestra que contenga al cromo en su estado de oxidacin (+6),
la reaccin del cromo (+2, +3) presente en la muestra de orina en medio cido
(dada por el cido sulfrico) con un oxidante como el permanganato de potasio,
harn que el cromo cambie su estado de oxidacin a cromo (+6), este ser de
coloracin morada oscura pudiendo interferir en los resultados de la lectura
espectrofotomtrica, para ello se decolora con una gota de solucin azida sdica
para luego formar el complejo agregando 1ml de difenilcarbazina y agua
destilada, este complejo resultante ser inestable por lo que se le aade un
buffer (solucin de fosfato cido monosdico). Esta muestra oxidada y
decolorada ser llevada a lectura a 540 nm para determinar su absorbancia y
concentracin con ayuda de la curva de calibracin (ug Cr/ml de orina).

III. PROCEDIMIENTO

Materiales

Pipetas 1, 10 ml
Pipetas Pasteur
Bombillas
Pera de bromo
Tubos de ensayo
Soporte metlico
Campana extractora de gases
Espectrofotmetro UV

1
UNMSM - Cuantificacin de cromo en lquidos biolgicos y medio ambiente

Reactivos

cido sulfrico 0.2N

KMnO4 0.1N
Difenilcarbazina 10%
Azida sdica 5%
Fosfato cido monosdico
Agua destilada

Metodologa

DMO Adicionar II gotas de

KMnO4 0.1N
Redisolver el residuo en 10 ml de
H2SO4 0.2N

1 2

Llevar a calor suave en bao Mara por

30 minutos 3

Adicionar

1 ml de Sol. Azida sdico 5%

4
1ml Sol. Difenilcarbazina 10% y agitar
suavemente

Adicionar

2.5 ml Sol. Fosfato cido monosdico y

completar con agua destilada csp. 25
2
ml
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Lectura a 540 nm en
espectrofotmetro

IV. RESULTADOS

Volumen de muestra analizada: 1ml

3
UNMSM - Cuantificacin de cromo en lquidos biolgicos y medio ambiente

Realizando los clculos: Se estructura la curva de calibracin utilizando lecturas

previas y de la muestra problema.

Cr st
ug/ mL Abs
0 0
5 0.05
10 0.09
15 0.15
20 0.2

Lectura de la muestra problema (MP): Absorbancia - 0.015

Curva de calibracin de cromo

0.25

0.2
f(x) = 0.01x - 0
0.15

Absorbancia
0.1

0.05

0
0 5 10 15 20 25

ug/mL

Determinando la concentracin de MP en ug/ml de orina:

4
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Se usa la ecuacin de la recta y=0.0099 X 0.002

Y: absorbancia de MP: 0.015

X: concentracin de MP: 1.717 ug/ml

Determinando la concentracin de cromo en la MP: ug Cr/ml orina

C = c x 1000

C: Concentracin de cromo en la MP ug Cr/ml

c: Concentracin de cromo en ug Cr/ml de orina leda en la curva de calibracin.

C= 1.717 ug/ml x 1000

C= 1717 ug Cr/ml
Ahora:

Hallando la concentracin de ug Cr/g creatinina se tieneque es igual a:

ugCr / L orina
ug Cr/g creatinina = g creatinina /L orina

Segn datos refrenciales de valores de creatinina promedio: 0.9 mg/dL = 9 g

creatinina/ L orina.

Reemplazando:

ugCr 1717 ugCr/ L orina 146.7 ugCr/ L orina

g creatinina = 9 g creatinina /L orina = g creatinina /L orina = 190.77

ugCr
g creatinina

5
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V. DISCUSIN

Si bien el cromo es un nutriente para nuestro organismo, su leve aumento o

exceso constituir un peligro ya que est demostrada la accin cancergena que
poseen algunos compuestos de cromo +6, por lo que su determinacin en el
laboratorio ser fundamental para controlar valores altos en orina y como
consecuencia proponer una mejora en la calidad de condiciones de trabajo. Este
problema se da con frecuencia en trabajadores que manipulan o usan el cromo
+6 como reactivo hidrosoluble siendo reducido en el organismo a cromo +3 y
determinndose con mtodo espectrofotomtrico. 1

La grfica de la curva de calibracin nos muestra una consistencia en los puntos

de las concentraciones de los estndares de cromo con lo que se procede a
realizar los clculos mediante una regresin lineal. La concentracin de cromo en
la orina se cuantific 190.77 ug Cr/g creatinina lo que representa una elevada
concentracin de cromo en orina ya que segn la ACGIH propone, para una
exposicin de 8 horas durante 5 das a la semana, los valores de 10 ug Cr/g
creatinina de incremento durante una jornada de trabajo, y 30 ug Cr/g
creatinina al final de la jornada laboral. Estos valores representan a un
trabajador sano con una exposicin por inhalacin ambiental. 2

El resultado de concentracin de cromo 190.77 ug Cr/g creatinina es una

sospecha de que la persona que brind la muestra de orina pudo estar
contaminada con una carga ambiental de cromo mucho mayor o que haya
consumido cromo directamente haciendo elevar los valores de este metal.

La cuantificacin y comparacin en valores de ug Cr/g creatinina se realiz

debido a que se quiere tener variables fisiolgicas de su efecto acumulativo,
tomando al clearance como indicador de niveles de excrecin de cromo en
orina.3

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VI. CONCLUSIONES

Se determin la concentracin de cromo mediante el mtodo

espectrofotomtrico, cuantificndose 190.77 ug Cr/g creatinina por lo que este
supera considerablemente a los valores normales (10 30 ug Cr/g creatinina)
segn la ACGIH para trabajadores sanos con exposicin por inhalacin ambiental.

VII. RECOMENDACIONES

Recoger la muestra de orina en ptimas condiciones y tratar de

que esta sea la ms homognea posible.
Tratar de eliminar los factores de riesgo de contaminacin
Debe ser recogida en frascos de polietileno

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

1. Calabuig J. Medicina Legal y Toxicologa. 6ta Edicin. Editorial Masson.

Barcelona. 2004.
2. Association Advancing Occupational and Environmental Health. Thresholds
limit values and Biological exposure indices for 1990-1991. Cincinnati,
1990.
3. lvarez M, Hermida J. Determinacin simultnea de Cr, Ni y V en orina
mediante et aas. Qum Nova. Sao Paulo; 34(6). 2011.