Extendido Cromosmico

Nicols Carrero Muoz

Ingeniera Biolgica, Facultad de ciencias, Universidad Nacional de Colombia Sede Medelln

jecariasdi@unal.edu.co

06/Septiembre/ 2016

RESUMEN

La citogentica es el estudio de los cromosomas y de las aberraciones que pueden presentar en una
especie de inters. El extendido cromosmico es un procedimiento que se lleva a cabo para observar
estos cromosomas en la metafase de la mitosis y analizarlos. En esta prctica se llev a cabo un barrido
en el que se contaron 1000 ncleos entre mitticos y activos con el objetivo de calcular el ndice
mittico, adems de observar 5 metafases de inters a partir de las cuales se pueden hacer varias
inferencias. Se estudi una muestra potencial de humano en donde se calcul un ndice mittico de
5.3%, ste ndice mittico est dentro del el rango esperado para una persona sana (5 a 7%).

Palabras Clave: cromosomas, cariotipo, metafase, ndice mittico, citogentica.

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1. Introduccin analizados a 1.000 aumentos en un

La citogentica es el estudio de los
cromosomas y de las aberraciones que
estos pueden tener. Los cromosomas son
estructuras complejas donde se
conglomeran segmentos de ADN
condensado y comprimido con la ayuda
de protenas llamadas histonas. Durante la
divisin celular se condensan lo suficiente
como para poder ser fcilmente
microscopio ptico [1].
Cuando el ncleo celular comienza el
proceso de divisin (cariocinesis), esa
maraa de hilos inicia un fenmeno de
condensacin progresivo que finaliza en
la formacin de entidades discretas e
independientes: los cromosomas. Por lo
tanto, cromatina y cromosoma son dos
aspectos morfolgicamente distintos de cuenta los ncleos inactivos. Se calcula
una misma entidad celular [2][3]. de la siguiente manera:

A partir del anlisis de la metafase Cantidad de mitosis

= x 100 ( 1 )
observada, se puede hacer un conteo de Ncleos totales
cromosomas donde se identifica el
nmero de cromosomas y las
Ecuacin 1. Frmula para el clculo del ndice mittico
aberraciones que pueden presentar.
2. Materiales y mtodos
Para poder ver los cromosomas con un
microscopio, es necesario teirlos. 2.1 Materiales
Cuando se los tie, los cromosomas
parecen tiras con "bandas" claras y - Microscopio
oscuras. La representacin grfica (la - Placa con extendido cromosmico
fotografa real de una clula) de todos los - Plantillas
46 cromosomas, en sus respectivos pares,
recibe el nombre de "cariotipo" El
cariotipo normal de la mujer se escribe 2.2 Observacin de extendidos
46, XX, mientras que el cariotipo normal cromosmicos.
del hombre se escribe 46, XY. El anlisis
estndar del material cromosmico evala
Se tom la placa con el extendido
tanto el nmero como la estructura de los
cromosmico y se inici un barrido tal
cromosomas con una gran precisin. Los
como se muestra en la figura 1. Durante
anlisis cromosmicos en general se
este recorrido, se fueron identificando los
realizan a partir de una muestra de sangre
ncleos activos de los inactivos y las
(glbulos blancos), muestras prenatales,
metafases, se contaron 1000 ncleos
biopsia de piel o alguna otra muestra de
activos y mitticos. Se eligieron 5
tejido [4].
metafases que se analizaron, contando el
nmero de cromosomas. Se calcul el
Durante la observacin al microscopio es ndice mittico.
comn observar ncleos activos, ncleos
inactivos y ncleos en metafase. Se
diferencian unos de otros por la
coloracin que adquieren tras la
preparacin de la muestra. Es decir, los
ncleos activos se ven de color rosado o
magenta claro, mientras que los ncleos
inactivos se les apreciarn con un color Figura 1. Representacin grfica de cmo se debe
morado o prpura. Las metafases se llevar a cabo el barrido a travs de la placa

identifican porque los cromosomas son

visibles claramente. 3. Resultados

A la relacin ente el nmero de mitosis y No. Ncleos No. Ncleos No. Ncleos
las clulas totales se le llama ndice Activos en Metafase Totales
Mittico (IM), cuyo clculo es relevante (mitosis)
como un indicativo de posibles problemas
patolgicos [5]. El (IM) no tiene en 947 53 1000
Tabla 1. Conteo de ncleos activos y en metafase

53
= x 100=5.3
1000

Metafas No.
e Cromosoma
s

1 43

2 46

3 44

4 45

5 46

Tabla 2. Conteo de cromosomas en las metafases

escogidas, y la presunta especie usada segn el nmero
promedio de cromosomas contados.

Tabla 3. Imgenes capturadas de las 5 metafases

escogidas. Objetivo 100x

4. Discusin

La observacin del extendido

cromosmico en el microscopio depende
mucho de cmo se ha tratado la muestra.
En ocasiones se pueden llevar a cabo
prdidas de informacin gentica dentro
del radio del ocular o porque los
cromosomas se dispersan mucho. Durante
la observacin de las metafases
escogidas, y durante su posterior anlisis,
fue arduo contar los cromosomas ya que
por la mencionada dispersin se pierden
en el ocular o a lo largo de la placa.
Con respecto a la especie tomada para
este experimento, no se asegura que sea
un humano ya que puede evidenciarse
una variacin en el nmero de
cromosomas contados, pero se puede
decir con cierta confianza que es un
humano pues las imgenes de las mitosis
2 y 5 tienen una mejor distribucin de los
cromosomas, adems de una mejor
resolucin; se recomienda entonces
utilizar un soporte para la cmara con el
fin de obtener imgenes de mejor calidad.
5. Conclusiones
Se debe contar con herramientas
de bbuena calidad en el
labotatorio, que garanticen un
ptimo desarrollo del experimento
de inters.
El montaje de extendido
cromosmico es una tarea cuya
realizacin debe llevarse a cabo de
manera cuidadosa, de tal forma
que la muestra se pueda observar
adecuadamente en el microscopio.
La observacin del extendido
cromosmico es una tarea ardua
que requiere de una cantidad
considerable de tiempo y de la
paciencia del investigador para
observar con detalle las mejores
metafases y escoger aquellas que
sean ms fciles de analizar para
su posterior anlisis.
Segn el nmero de cromosomas
contados, se intuye que la especie
es un humano.
El clculo del IM, 5.3%, indica
que el individuo del cual se tom
la muestra era un individuo sano.
Sin embargo, se recomienda hacer
un conteo de 2000 ncleos activos
para que la muestra representativa
y el resultado ms confiable.
Referencias
1 McDonald D., 2008. Citogentica Bsica, Seattle. WA,
USA [en lnea]. Disponible en:
http://www2.uah.es/biomodel/citogene/dynacare/genin
fo.htm
2 Panzera, F., Ruben Prez y Yanina Panzera.
Identificacin cromosmica, cariotipo. Facultad de
Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional de La
Plata.
3 Piqueras, J.F., Fernndez Peralta, A.M., Hernndez,
J.S., Gonzlez Aguilera, J.J. 2002. Gentica. Ariel
Ciencia, Espaa, 474 pp. ISBN: 84-344-8056-5.
4 University of Utah. Estudios cromosmicos:
cariotipo, bandeo, extendido, hibridacin
fluorescente in situ (FISH) y anlisis de
microarreglo cromosmico. [en lnea]. Disponible
en:
http://healthcare.utah.edu/healthlibrary/related/doc.
php?type=90&id=P05224
5 Lpez Juan B. Manual de Gentica. Universidad
Nacional de Colombia. Sede Medelln.