Programa de Ps-graduao Stricto

sensu em Medicina Tropical

Ana Carolina da Fonseca Mendona

Professora: ngela Junqueira

Qual a conduta de coleta, conservao e transporte areo de amostras de sangue
e de vetores/ hospedeiros para pesquisa de Microfilria, Caramujo Africano e T.
cruzi em quatro municpios da Microrregio do Rio Negro, estado do Amazonas?
Complementando: ser feita pesquisa de parasita por PCR, parasitolgico e
isolamento do agente etiolgico.

Conduta da Coleta e conservao de triatomneos, ceratopogondeos e simuldeo:

A coleta e conservao de triatomneos pode ser feita atravs da captura manual (ativa) ou
utilizando armadilhas (passiva).
Material necessrio para a coleta no campo: luvas, lcool, bolsas, maletas de transporte,
lanterna, pinas de tamanhos variados, pilhas, recipientes para os insetos coletados (potes e
tubos de plstico ou vidro, com papel dentro), GPS, etiquetas e fichas ou cadernos de campo.
Os EPIs necessrios para as coletas em campo so: cala comprida, botas compridas, chpeu,
camisa de manga comprida, repelente e protetor solar.
A coleta intradomiciliar feita atravs da pesquisa minuciosa em todas as dependncias da
casa, entre fendas, buracos ou frestas que sirvam de abrigo para os barbeiros. importante
procurar por adultos e formas jovens atrs de mveis e outros objetos, embaixo de colches e
no forro do telhado. Esses insetos possuem hbitos noturnos, ento importante a escolha do
horrio de coleta. A busca de triatomneos em regies peridomiciliares deve ser realizada nos
seguintes locais: abrigos de cachorros e gatos, estbulos, galinheiros, chiqueiros, ninhos de
pssaros, currais e em reas prximas. Em rea silvestre, a busca pode ser realizada em
ambientes como tocas de animais e ninhos ou de forma passiva, utilizando armadilhas
luminosa e com alguma isca.

Coleta e conservao de simuldeos segue o mesmo princpio da coleta anterior, utilizando os

EPIs (botas para rio) necessrios e todo material de coleta j citado ( alm de tubos de ensaio
para a produo de puprios e pu com rede entomolgica e tubo de suco). Para a coleta
de larvas e pupas aderidas as pedras nos riachos e outros substratos devem ser retiradas e
postas em bandejas. Essas bandejas devem est com gua para que as larvas e pupas no
desidratarem at serem fixadas no lcool 80%. A coleta de pupas requer um puprio afim de
ver a evoluo dessas para determinar os simuldeos presentes na rea de coleta. As pupas
no aproveitadas devem ser fixadas em lcool 80%. Para a coleta de indivduos adultos
utilizado um pu com rede entomolgica e um aspirador de tubo aonde os simuldeos ficaro
retidos, o aspirador utilizado para captura de simuldeos aderidos em folhas em
decomposio. O armazenamento desses feita em tubos. Para retirada do simuldeo adulto
do tubo coletor posto um pouco de lcool com gua e o contedo despejado no tubo.

A coleta e conservao de ceratopogondeo segue os mesmos princpios anteriores e se

assemelha com a coleta de simuldeos de vida livre. Para a coleta das formas imaturas deve
ser realizada em gua contendo matria orgnica, em bambus, axilas de bananeira-brava e
bromlias. Para coleta das larvas, pode ser utilizada uma pipeta plstica ou namualmente e o
material coletado ser despejado em uma bandeja plstica de cor branca para triagem. Essas
larvas podem ser depositadas em tubos de ensaio para acompanhar o desenvolvimento e
mortalidade dos indivduos. H a possibilidade da coleta de fmeas em atividade
hematofgica em humanos, com auxlio de colaboradores voluntrios ou a coleta por
armadilhas luminosas com frasco acoplado contendo etanol a 70%, onde os insetos atrados
ficavam depositados e conservado

Conduta de transporte de triatomneos, ceratopogondeos e simuldeo:

Os espcimes capturados em ambientes naturais ou artificiais podem ser enviados vivos, por
via area, desde que estejam em conformidade com os regulamentos aplicveis, descritos na
International Air Transport Association - IATA Live Animal Regulation (2009).
Os triatomneos capturados devem ser mantidos em um recipiente primrio, com tiras de
papel de filtro dobradas em forma de sanfona para reter umidade e fezes dos triatomneos. As
tampas devem conter frestas estreitas que permitem a entrada de ar, mas impeam a fuga dos
insetos. Para o transporte, os recipientes devem ser lacrados em material mais rgido, para
impedir a fuga dos insetos em caso de abertura ou quebra, mantendo a integridade dos
espcimes coletados. Com isso o recipiente primrio deve: impedir que os insetos saiam;
oferecer proteo no manuseio; evitar picadas e no causar dano ao triatomneo. O interior da
embalagem secundria dever ser preenchido com material apropriado. Recomenda-se a
utilizao de flocos de isopor ou bolas de papel (jornal) para evitar movimentos e
trepidaes. Por fim, a caixa dever ser completamente selada e etiquetada de acordo com o
descrito no item Marcao e etiquetagem de embalagem. As informaes de coleta
incluem: local de origem (Pas, Estado, Municpio e localidade), coordenadas geogrficas
(obtidas com uso de GPS), habitat, data, nome do coletor e possveis reservatrios. Para os
outros espcimes deve ser seguida as mesmas recomendaes contudo o recipiente primrio
deve ser adaptado para cada um. No caso dos ceratopogondeos e simuldeos o recipiente
primrio no precisa ter seu espao interno preenchido por papel.

Conduta para coleta de sangue e retalho cutneo:

A coleta de sangue para pacientes com T. cruzi na fase aguda faz-se necessrio a gota
espessa, e para a fase crnica faz-se o xenodiagnstico. Todos os ambientes da moradia
devem ser pesquisados. Uma vez detectada a presena do vetor, a sua imobilizao e
transferncia devem ser realizadas com auxlio de pina entomolgica. Para a realizao do
xenodiagnstico a pesquisa realizar o transporte de triatomneos saudveis, provenientes da
criao de triatomneos do laboratrio certificado. Os triatomneos, utilizados no
xenodiagnstico, sero transportados vivos para diagnstico de infeco por T. cruzi para o
Laboratrio destino.

A coleta de sangue da microfilria ser realizado no local por meio da gota espessa para a
visualizao da microfilrias, faz-se necessrio tambm a realizao pelo mtodo de Knott e
pelo mtodo de Filtrao por Membrana de Policarbonato e, no caso da oncocercose, que se
localiza na superfcie da pele necessrio o retalho cutnea, utilizando sempre os EPIs
necessrios. Para o ensaio pela PCR na Fiocruz/RJ, o sangue coletado dos pacientes sero
armazenados nos tubos com EDTA que ir deixa-lo adequado para a PCR no Laboratrio
destino. Tubo de ensaio devidamente etiquetado e armazenado em um freezer -20C. Ao
finalizar a coleta, as amostras congeladas sero transportadas em uma embalagem apropriada
at Manaus e de l sero acondicionadas em outra embalagem com gelo seco para o
transporte dessas mesmas amostras de Manaus para a Fiocruz/RJ.

Conduta de coleta de caramujo

Os moluscos lmnicos podem ser encontrados em diferentes colees hdricas, tais como:
audes, alagados, brejos, crregos, lagoas, lagos, valas de esgoto ou drenagem, riachos e rios.
J os representantes da classe Gastropoda so encontrados aderidos vegetao, s rochas ou
s margens de rios, podendo tambm estar enterrados no fundo do corpo dgua; este ltimo
comportamento mais freqente nos moluscos pertencentes classe Bivalvia. Para a coleta
nesses locais necessrio equipamentos especficos como: concha de captura, pinas longas e
pinas com pontas finas, recipientes plsticos e sacos de plstico ou de tecido umedecido em
gua, para acondicionar os moluscos, luvas e botas de borracha, caderneta de campo, lpis e
fita adesiva para a identificao do bitopo e da coleta e por fim Bolsa trmica ou isopor
para o transporte.

Transporte de molusco vivo

O transporte do molusco vivo importante para sua identificao e verificao de agentes

infecciosos. Antes de transportar os caramujos importante verificar se todos esto vivos
antes de embalar. Aps selecionado os vivos, envolva os moluscos com uma gaze de algodo
mida. Estenda a gaze sobre uma superfcie plana e coloque os moluscos transversalmente e
enfileirados, de modo que fiquem distantes uns dos outros. Tal distncia depender do
tamanho do exemplar, sendo 1cm para os menores (por exemplo: Drepanotrema) e 2cm para
os maiores (Biomphalaria). Nenhum exemplar deve ser colocado nas margens da gaze, as
quais devem ter cerca de 3cm livres, para facilitar o fechamento do cilindro.O material deve
ser colocado em uma caixa resistente(recipiente primrio), envolta em pedaos de isopor,
para se evitar qualquer coliso com as laterais da caixa e possveis danos ao molusco. A caixa
no deve ser perfurada e nem ser submetida refrigerao durante o transporte.

Isolamento de helminto