Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
CREARE A VARIABILITII LA
PLANTELE CULTIVATE I LA VIA DE
VIE
Variabilitate somaclonal. Cauze i frecvena de
apariie
Cultura de esuturi constituie o metod rapid i sigur de
nmulire asexuat a plantelor.
n prezent, multe specii ornamentale, lemnoase i plante de
cultur sunt micropropagate in vitro i comercializate.
Micropropagarea prin culturi de esuturi a revitalizat anumite
sectoare ale industriei plantelor ornamentale i a facilitat
introducerea rapid de noi cultivare deoarece multe dintre
acestea prezint fenomenul de variaie somaclonal.
Regenerarea plantelor din celule cultivate in vitro este un
proces asexuat, care implic numai diviziuni celulare
mitotice. Procesul de regenerare a neoplantulelor poate fi
considerat ca fiind sinonim cu clonarea intrucat se poate
presupune c toate plantele regenerate din celulele unei
plante mam sunt clone.
Variabilitate somaclonal.
Cauze i frecvena de apariie
Via de vie este una dintre
Cercetatorii, SCOWCROFT (1985) si
principalele culturi horticole
SKIRVIN (1994), studiind variabilitatea rspndite n toat lumea.
somaclonal, afirm c uniformitatea Multe cultivare aparinnd
clonal este recunoscut mai degrab ca unui numr mic de specii
o excepie, dect ca o regul. ale genului Vitis au fost
Variabilitatea somaclonal este comercializate n ultimele
neuniformitatea care apare ntre plantele secole, dar industria
necesit noi cultivare cu
regenerate prin cultura de esuturi.
grad mrit de rezisten i
Variaia poate fi preexistent sau poate fi productivitate.
indus. Metodele tradiionale de
Asupra populaia n care variabilitatea ameliorare sunt limitate din
cauza duratei lungi a unei
natural este asociat cu cultura de
generaii i a naturii extrem
esuturi se poate aciona cu o anumit de heterozigote a acestei
presiune de selecie pentru a izola clone. culturi.
Variabilitate somaclonal.
Cauze i frecvena de apariie
Sursa explantului
La via de vie, cercettorii chinezi ZOU i LI (1981), citai de POPESCU i
TEODORESCU (2004), au fost singurii care au raportat regenerarea de
plante haploide (n = 19) din cultura de antere a soiul Triumph. Dup doi ani
de la plantarea n cmp, autorii au semnalat faptul c plantele au prezentat
un aspect morfoanatomic normal, specific soiului de origine, iar numrul de
cromozomi determinat a fost 2n = 38.
ntr-un alt studiu s-a artat c anterele de Vitis latifolia L. (via slbatic)
cultivate pe un mediu Nitsch i Nitsch suplimentat cu 20 mM 2,4-D i 9 mM
BAP au produs calus dup 4-6 sptmni. Plantele regenerate au avut
grade diferite de ploidie fa de 2n = 38 i n = 19 (SALUNKHE, 1999).
Cultura in vitro de antere i polen ofer posibilitatea manipulrii gradului
de ploidie la plantele regenerate prin androgenez sau embriogenez.
Factorii care influeneaz spectrul i amplitudinea variabilitii
somaclonale
Genotipul
Influeneaz att capacitatea de regenerare in vitro ct i amplitudinea variaiei somaclonale.
La via de vie, rezultatele obinute n experimentele efectuate cu genotipuri aparinnd diferitelor specii
de Vitis, experimente care au vizat regenerarea de plante din cultura in vitro de antere, indic faptul c
genotipul joac un rol determinant n exprimarea rspunsului embriogenic.
RAJASEKARAN i MULLINS (1979), citai de POPESCU i TEODORESCU, 2004, arat c exist
diferene mari ntre specii, soiuri i hibrizi ai genului Vitis, n ceea ce privete capacitatea de calusare
i de difereniere a embrionilor somatici din anterele cultivate in vitro.
Speciile Vitis rupestris i Vitis longii sunt creditate cu cea mai ridicat capacitate embriogen,
fiind urmate de Vitis labrusca i Vitis champinii. Diferene mari au fost semnalate i ntre
genotipurile aparinnd aceleai specii. Astfel, cercetrile au demonstrat c inducerea formrii de
calus din antere a fost posibil numai la trei din 26 de genotipuri testate.
De asemenea, se apreciaz c la Vitis vinifera, specia cea mai important din genul Vitis, potenialul
de embriogenez, respectiv cel de regenerare de plante din antere este foarte sczut i limitat la un
numr mic de genotipuri, incluznd soiurile Gamay, Cabernet Sauvignon, Pinot Noir, Chardonnay,
Mission, Valerien, Coarn neagr selecionat, Siegfried Rebe FS4 (POPESCU i
TEODORESCU, 2004).
Factorii care influeneaz spectrul i amplitudinea variabilitii
somaclonale
Condiiile de cultur
Acestea conduc la aberaii genomice n celulele plantelor i animalelor cultivate in
vitro, i apar, cel mai adesea, cnd acestea sunt scoase de sub influena controlului
exercitat de organismul ntreg i sunt plasate n condiii nenaturale.
Cnd o plant este excizat i rnit n vederea transferului n cultura in vitro,
sistemele de control care regleaz ntreaga plant sunt ntrerupte.
De exemplu, n planta ntreaga calusul este rspunsul la rnire i rareori
dobndete un nivel de organizare celular suficient pentru a produce lstari sau
rdcini.
n culturile de esuturi, calusul este frecvent o faz comun prin care trec prile
excizate din plant, nainte de organizarea meristematic care poate produce
rdcini, lstari sau ambele. Regulatorii de cretere sau ali stimuli in vitro mediaz
aceste evenimente, de aceea nu este surprinztoare apariia de lstari adventivi cu
fenotipuri anormale.
Riesling italian
Feteasc regal
Cabernet Sauvignon
Transformarea genetic
La via de vie, cu toate c s-au nregistrat progrese privind
aplicarea metodelor de inginerie genetic prin transfer de gene
exist unele cultivare recalcitrante la transformarea genetic
(MULLINS i colab., 1990). Unele cercetri arat faptul c la Vitis
vinifera transformarea genetic mediat de unele specii din genul
Agrobacterium cum ar fi Agrobacterium tumefaciens,
Agrobacterium rhizogenes sau Agrobacterium vitis se realizeaz
cu dificultate. Dintre factorii implicai n transformarea genetic se
pot aminti: sua bacterian, mediul de cultur utilizat pentru
meninerea calusului embriogen i genotipul cultivarului de vi de
vie (TORREGROSA i colab., 2002).
La via de vie, un rol important n reuita transformrii genetice l
are identificarea unor protocoale privind selecia potenialelor
plante transformate genetic prin intermediul bacteriilor din genul
Agrobacterium (PEROS i colab., 1998, BORNHOFF i colab., 2000).
Factorii care influeneaz spectrul i amplitudinea variabilitii
somaclonale
Transformarea genetic
Plantele transgenice au fost regenerate in vitro prin organogenez i
embriogenez.
Studii mai recente arat faptul c la unele specii de vi de vie s-au
nregistrat progrese privind transformarea genetic a culturilor in
vitro de embrioni somatici folosind co-cultivarea cu Agrobacterium
sp.
Astfel, plante transgenice au fost obinute la:
Vitis rupestris, soiul St. George,
la Vitis rotundifolia, soiurile Alachua i Carlos,
la Vitis vinifera, soiurile Cabernet Franc, Chardonnay, Merlot, Pinot
Noir, Sauvignon Blanc etc.,
precum i la unii hibrizi (DHEKNEY i colab., 2007).