Prctica 1. Factores que afectan las separaciones cromatogrficas.

OBJETIVO

Analizar la influencia de algunos factores que afectan las separaciones

cromatogrficas.

RESULTADOS
POLARIDAD DEL VOLUMEN CONCENTRACI EFECTO DE MATRIZ
DISOLVENTE DE N DE LA
MUESTRA MUESTRA
Rf Anch
o de Asimetra Otros
Disolvente L g/mL Disolvente Rf Rf
banda (si o no) Anlitos
S R
(mm)
AcOEt 0.9
0.73 1 4 1 No MeCN 0.30 NaCl 0.31
2
AcOEt:Hex
. 0.9 0.325 2 3 5 No MeOH 0.33 Sacarosa 0.33
(1:1)
AcOEt:Hex
0.7
. 0.095 4 2 10 No H2O 0.33 H2O 0.33
4
(3:7)

POLARIDAD DEL DISOLVENTE VOLUMEN DE LA MUESTRA

CONCENTRACIN DE LA MUESTRA EFECTO DE MATRIZ

DISCUSIN DE RESULTADOS
Polaridad del Disolvente

Se fue disminuyendo la polaridad del disolvente porque se fue adicionando hexano

a la mezcla por lo cual podemos observar que el desplazamiento y Rf del Rojo de
metilo disminuye considerablemente en comparacin con el Sudan I el cual
disminuyen los mismos parmetros, pero en menor valor, por lo cual podemos
decir que el Rojo de metilo es ms polar que el Sudan I. El desplazamiento de la
muestra y por ende su Rf se ven afectados por las interacciones que hay entre el
anlito-FE y el anlito-FM, por lo cual si el anlito es ms afn la FM este se
desplazara ms que si la FM fuera menos afn al anlito.
Efecto del volumen de muestra aplicada

El Rf de las 3 aplicaciones es el mismo, pero cuando se coloca un volumen

excesivo se puede observar que la difusin de la mancha aumenta lo cual provoca
una baja resolucin, esto puede causar problemas ya que si se quiere separar de
algn compuesto no se podr y a su vez no se podr calcular el Rf por que no se
podrn diferenciar las manchas.
Concentracin de la muestra

Al aumentarse la concentracin del anlito, este interaccionara ms con la FE

provocando que se d asimetra en la mancha (ya sea coleo o fronteo
dependiendo de la direccin de elucin) y por esto puede afectarse el valor de Rf.
Efecto de matriz
a) Efecto de la naturaleza del disolvente de la muestra
a. El disolvente se toma en cuanta, ya que este puede interaccionar con la FE
y FM, provocando variaciones en el Rf o que la resolucin de la mancha
sea baja, debido a que el disolvente no es el correcto para disolver al
anlito, como el caso del Rojo de metilo que no se disuelve en H2O
provocando que la mancha sea tenue en comparacin con los otros
disolventes utilizados.
b) Presencia de otros anlitos
a. Si la muestra contiene otros anlitos se debe de tomar en cuenta su
coeficiente de particin para que podamos separar el anlito de inters, ya
que al no considerar esto puede afectar el Rf o que haya coleo por las
interacciones que pueden tener con la FE o FM, como en la muestra con
NaCl en el cual se afecta el Rf que es menor y se puede ver tal vez coleo,
ya que este es afn a la FE, mientras que en el caso de la sacarosa y H2O
el Rf no se afecta y no hay un coleo muy claro ya que estos son afines a la
FM.
CONCLUSIONES
A mayor afinidad del anlito por la FM, mayor ser el Rf y esto estar dado por la
polaridad de ambos.
A mayor volumen de muestra, menor resolucin tendr.

CUESTIONARIO

BIBLIOGRAFA
https://rua.ua.es/dspace/bitstream/10045/8246/7/T2cromagraf.pdf (19/02/2017)