Cuantificacin

de Protenas y Glucgeno

Autores:
Catalina Alfaro Ayala.
Yaricza Bugeo Chavez.
Carolina Morales Llanos.
Constanza Pizarro Thompson.
Catalina Tapia Tapia.
Asignatura: Bioqumica (BIO-005).
Carrera: Enfermera.
Seccin: 2.
Grupo: 1.
Docente: Rodrigo Caldern.
Ayudante: Matas Tapia.
Fecha de realizacin: 14/09/2016.
Fecha de entrega: 28/09/2016.
 Introduccin:

Hiptesis

Objetivo General

Objetivos Especificos

Materiales y Mtodos:

Resultados:

2
 Discusin:

Conclusin:

Cuestionario:

1.- Indique 2 tcnicas colorimtricas adicionales para cuantificar protenas y

comprelas con el mtodo usado en este trabajo (indicando para ello una
ventaja y una desventaja del mtodo de Biuret en comparacin a los
mtodos propuestos).

R:- Bradford: se basa en la unin de un colorante (Comassie Blue G-250) con las
protenas, el colorante en solucin acida, existe en dos formas una azul y otra
naranja, las protenas se unen a la forma azul para formar un complejo protena-
colorante. Este mtodo es ms simple, sensible (1-15g), rpido, barato y pocas
sustancias interfieren en su determinacin.

BCA: El acido bicinconinico, sal sdica, es un compuesto capaz de formar un

complejo purpura intenso con iones Cu1+ en medio alcalino. Este reactivo forma la
base de un mtodo analtico capaz de monitorizar el in cuproso producida en una
reaccin entre las protenas Cu 2+ en medio alcalino. La estabilidad del reactivo y el
cromforo proporciona un mtodo para cuantificar protenas es rpido, sencillo y
sensible y muestra una gran tolerancia a compuestos que afectan a otros mtodos

La ventaja de la tcnica de Biuret en comparacin con las dos tcnicas antes

mencionadas es que este mtodo es el ms simple para el reconocimiento de
protenas.
La desventaja es que estos dos son mucho ms sensibles a captar las protenas

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sin necesidad de que estn en concentraciones muy altas como las que necesita
el Biuret.

2.- De acuerdo a la ley de Lambert-Beer existe un valor de absorbancia que

limita la deteccin por espectofotometria debido a la frmula que lo gobierna
Cul es el lmite? Si su muestra cae en esta condicin cmo podra
resolverlo?

El limite existente entre la determinacin de la espectrofotometra est entre la

absorbancia y la concentracin para una misma longitud de onda dentro de una
misma concentracin. El que exista un lmite en la determinacin permite llevar a
cabo la tcnica de la espectrofotometra y la obtencin de resultados seguros. Es
ptimo el trabajar con concentracin que cumplan la ley de Lambert-Beer con el fin
de poder obtener una curva lineal. Las soluciones con concentraciones muy altas
arrojan un color intenso, esto no permite la lectura de la espectrofotometra,
traspasando el lmite y entregando datos no concluyentes. De esta forma es ms
recomendable o efectivo el uso de una solucin muestra 1:80, en vez de 1:40,
para que as sea factible la lectura de datos, adems de la utilizacin de
soluciones con baja concentracin.

Bibliografa:
1. Cox M. et al Nelson D. Lehninger. Principios de Bioqumica. Cuarta edicin
(ed. Omega, S.A.) 65 pp.
2. Raymond Chang, Williams College 2007. Qumica. Dcima edicin. Mxico.
(ed. McGraw-Hill Companies, Inc. Pp. 614 -658 equilibrio qumico (capitulo
14 y 15) cido y base 660-662