Reacciones Colorimtricas de las Protenas.

Objetivos:

Reconocer las protenas mediante sus propiedades e identificar el tipo de aminocidos presentes
en una protena.

Introduccin:

(1)Una reaccin colorimtrica es aquella en que el producto de la reaccin es una molcula que,
al modificar su estructura qumica durante la reaccin, genera una molcula que presenta un
color. Se habla de reaccin colorimtrica cuando se mide la intensidad de la coloracin en una
reaccin y se compara con un estndar o con una curva de calibracin.

Las protenas son biomolculas de gran tamao y peso molecular formadas por C, H, O, y N.
Son macromolculas o polmeros de aminocidos. En cambio los aminocidos son molculas
orgnicas que presentan grupo amino (- NH2) y un gruponacido carboxi8lico (- COOH).En
disolucin los aminocidos forman iones dobles denominados (Zwitteriones) debido a sus grupos
cido y base; adems, un aminocido, dependiendo del PH de la solucin, puede comportarse
como acido o como base por esta razn se les denomina anftera.

Reacciones de reconocimiento(2)

Reaccin de Biuret

El reactivo de Biuret est formado por una disolucin de sulfato de cobre en medio alcalino, este
reconoce el enlace peptdico de las protenas mediante la formacin de un complejo
de coordinacin entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrgeno que
forma parte de los enlaces peptdicos, lo que produce una coloracin rojo-violeta.

Reaccin Xantoproteca

Reconoce grupos aromticos, es decir aquellas protenas que contengan tirosina o fenilalanina,
con las cuales el cido ntrico forma compuestos nitrados amarillo

Reaccin de aminocidos azufrados

Se pone de manifiesto por la formacin de un precipitado negruzco de sulfuro de plomo. Se basa

esta reaccin en la separacin mediante un lcali, del azufre de los aminocidos, el cual al
reaccionar con una solucin de acetato de plomo, forma el sulfuro de plomo.
 Resumen:

En esta prctica se utilizaran reacciones con el fin de reconocer las protenas mediante sus
propiedades e identificar el tipo de aminocidos presentes en una protena, mediante la
Reaccin Xantoproteca, Reaccin de Biuret y Reaccin de aminocidos azufrados.

Desarrollo Experimental:

En un tubo de
ensayo ; 3ml de
muestra

Reaccin Aadir 1 ml de
Xantoproteica HNO3 concetrado
Enfriar en agua fria
Calenta a bao
Mara
Reacciones Colorimtricas de

Aadir una gota de

En un tubo de NaOH al 40%
ensayo ; 3ml de
las Protenas.

muestra

Reaccin de Aadir 2ml de

Biuret NaOH al 20%

Aadir 4-5 gotas

de sulfato cprico
al 1%
En un tubo de
ensayo ; 3ml de
muestra

Aminocidos Aadir 2 ml de
azufrados NaOh AL 20%

Aadir 10 gotas de
Calentar el tubo
acetato de plomo
hasta ebullicin
al 5%

Materiales
2 Baln de aforo de 50ml
2 Baln de aforo de 25ml
2 Pipeta de 5ml Reactivos:
3 tubos de ensayos Vaso de Muestras:
precipitacin de 250 y 500 ml Leche,
1 pinza de madera Clara de huevo,
2 Gradilla Jugo de espinacas
1 Gotero Hielo
1 Bao mara HNO3 concentrado
1 Termmetro NaOH al 40% y 20 %
1 Peseta Sulfato cprico 1%
1 Pera Acetato de plomo al 5%
 Clculos:

NaOH al 20%

100ml 20g NaOH

50ml X = 10g

NaOH al 40%

100ml 40g

50ml x= 20g

CuSO4 al 1%

100ml 1g

50ml x= 0,5g

C4H8O6Pb2 al 5%

100ml 5g

50ml x= 2,5g

Resultados y discusin:

Muestras Reaccin Reaccin de Reaccin de

Xantoproteca Biuret Aminocidos
Azufrados

Huevo Dio positivo, color Si reaccion color Reaccion con color

naranja violeta negro y en el centro
amarillento

Leche No hubo cambios Si reaccion Color Se torn color

violeta obscuro y en el
fondo amarillo

Zumo de Espinaca No hubo cambios No reaccion Si reaccion; color

negro y en la parte
del fondo verde
obscuro, y hubo
cambio en su
 aspecto fsico

(3)En la reaccin Xantoproteca, la coloracin fue anaranjada y esto se debe a la

presencia de un grupo fenilo en la molcula proteica, para esta prueba se produce la
nitracin del anillo, bencnico presente en los aminocidos obtenindose
nitrocompuestos de color amarillo, que se vuelven anaranjados en medio
fuertemente alcalinos.
Se realiza mediante el uso de HNO3 concentrado que, en presencia de protenas o
aminocidos con restos aromticos torna la solucin de un color amarillo
anaranjado.

En la reaccin de Biuret, la coloracin que presenta es el color violeta, indica

la presencia de protenas, debido a la formacin de un complejo de coordinacin
entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrgeno que
forma parte de los enlaces peptdicos.

En la reaccin de aminocidos azufrados se forma un precipitado de color negruzco

nos indica que se ha formado sulfuro de plomo, utilizndose el azufre de los
aminocidos, lo que nos sirve para identificar protenas que tienen en su
composicin aminocidos con azufre.

Concluciones:

Se reconoci las protenas mediante sus propiedades y pudimos identificar el

tipo de aminocidos presentes en una protena.
Las protenas estn constituidas por aminocidos por los cuales los mtodos se
basan en el reconocimiento de los aminocidos
Al realizar las diferentes pruebas con la albmina se pudo comprobar
experimentalmente efectivamente que se trata de una protena, por el color que
present al reaccionar.
Las protenas son sensibles con las sales metlicas pesadas (mercurio,cobre
,plomo) formando precipitados
 En las reacciones donde se obtuvo precipitacin se debi a un cambio en el
estado fsico de la protena , mientras que en la coagulacin se ha producido un
cambio en el estado fsico y en la estructura qumica por eso es irreversible.

Recomendaciones

Los volmenes deben medirse con la probeta.

Trabajar con el respectivo material y vestimenta correcta.

Bibliografa:

-(1)Edgar Vzquez(2003) Fmedic, Recuperado el 27 de Junio del 2015 en:

http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/enlace%20peptidico.html

o Las protenas; (s, f), Informacin sobre alimentos y protenas, Recuperado el 04 de Julio del 2015 en :
http://proteinas.org.es/que-son-las-proteinas

-(2)Aminocidos, (s, f), Qu son los aminocidos?, Recuperado el 04 de Julio del 2015 en:
http://www.aminoacido.eu/aminoacidos/que-son-los-aminoacidos.html

-(3) Angel Fire, (2008), Reconocimiento de Protenas, Recuperado el 04 de Julio del 2015 en :
http://www.angelfire.com/scifi/anarkimia/Reconocimiento%20de%20Protenas.html

o -CTEDRA DE QUMICA ORGNICA-, (2012 ), Aminocidos, Recuperado el 04 de Julio del 2015 en :

file:///C:/Users/Vero/Downloads/902310219.Practico%20N%205%20aminocidos%20y%20proteinas
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