Apunte Guia de Laboratorio de Biologia PDF

APUNTE
GUA DE LABORATORIO DE BIOLOGA
Facultad de Salud, Deporte y Recreacin

Departamento de Ciencias Qumico-Biolgicas
Autores: Prof. Tanya Neira Pea
Marzo 2014
1
APUNTE
GUA DE LABORATORIO BIOLOGA

CTEDRA: Biologa
AO: 2014
Profesor: TANYA NEIRA PEA
Doctor(c) en Ciencias Biomdicas de la Universidad

de Chile. Bioqumico de la Universidad de Santiago
de Chile. Diplomada en Educacin Superior en
Universidad Santo Toms.
Coordinadora de Biologa e Histoembriologa.
Atiende las ctedras de Biologa Histoembriologa,

Qumica y Bioqumica para la Salud, Qumica de la
Universidad Bernardo OHiggins.
2 Gua de laboratorio de Biologa

NDICE.
PRESENTACIN.................................................................................................................................... 4
NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO .................................................................................. 5
OBLIGACIONES DEL ESTUDIANTE .................................................................................................... 7
PAUTA ELABORACIN DE INFORMES ................................................................................................. 8
LABORATORIOS ................................................................................................................................. 10
ACTIVIDAD ENZIMTICA ................................................................................................................... 11
MARCO TERICO ........................................................................................................................... 11
TRABAJO PRCTICO....................................................................................................................... 12
Reactivos y Materiales .............................................................................................................. 12
Metodologa .............................................................................................................................. 12
MICROSCOPA ................................................................................................................................... 14
MARCO TERICO ........................................................................................................................... 14
TRABAJO PRCTICO....................................................................................................................... 19
METABOLISMO .................................................................................................................................. 21
MARCO TERICO ........................................................................................................................... 21
TRABAJO PRCTICO....................................................................................................................... 22
MEIOSIS ............................................................................................................................................. 23
MARCO TERICO ........................................................................................................................... 23
TRABAJO PRCTICO....................................................................................................................... 25
CARIOTIPO ......................................................................................................................................... 31
MARCO TERICO ........................................................................................................................... 31
CONCLUSIONES ................................................................................................................................. 39
REFERENCIAS ..................................................................................................................................... 40
3
PRESENTACIN
El presente apunte tiene como principal propsito entregar de manera ordenada los
contenidos y trabajos prcticos a realizarse en los laboratorios de Biologa impartidos para
las carreras de la Facultad de Salud, Deporte y Recreacin.
A travs de stos, se espera que los estudiantes consoliden sus conocimientos mediante la
ejecucin y anlisis de experiencias prcticas, las cuales han sido planificadas acorde a las
temticas desarrolladas durante la ctedra. Se espera que los estudiantes se familiaricen
con el trabajo en un laboratorio a travs del desarrollo de habilidades relacionadas con la
observacin y anlisis de fenmenos biolgicos. Igualmente importante es que los
estudiantes desarrollen la rigurosidad en sus prcticos y la capacidad de trabajar en
equipo.
El apunte corresponde a material realizado por el docente junto a una recopilacin de

experiencias prcticas. ste se organiza en tres partes:
a) Normas de seguridad de laboratorio. Esta seccin es de vital importancia a fin de

asegurar la seguridad de los estudiantes dentro del laboratorio.
b) Pautas de realizacin de informes: El estudiante al final del curso deber ser capaz de
comunicar, analizar y discutir los resultados obtenidos en los trabajos prcticos a
travs de un informe de laboratorio, el cual debe cumplir con las pautas analizadas en
esta seccin.
c) Trabajos prcticos: Es fundamental que el estudiante al momento de iniciar cada

trabajo prctico sea capaz de responder qu va a hacer, por qu lo va a hacer y cmo
lo va a hacer y qu resultado espera. Con este efecto se presenta un breve marco
terico relacionado al experimento, junto con la metodologa experimental a
desarrollar. Es de responsabilidad del estudiante ahondar en los detalles.

NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO
El trabajo en el Laboratorio requiere de una serie de normas de seguridad para

evitar posibles accidentes debido a desconocimiento de lo que se est haciendo o a una
posible negligencia del estudiante. Estas normas aplican a todas las reas de la ciencia en
las que se usen aparatos que pueden llegar a resultar peligrosos al ser manipulados
inadecuadamente.
Para el desarrollo de las prcticas es conveniente tener en cuenta algunas normas

elementales que deben ser observadas con toda escrupulosidad.
Antes de realizar una prctica, debe leerse detenidamente para adquirir una idea
clara de su objetivo, fundamento y tcnica. Los resultados deben ser siempre
anotados cuidadosamente apenas se conozcan.
El orden y la limpieza deben presidir todas las experiencias de laboratorio. En

consecuencia, al terminar cada prctica se proceder a limpiar cuidadosamente el
material que se ha utilizado.
Cada grupo de prcticas se responsabilizar de su zona de trabajo y de su material.
Antes de utilizar un compuesto hay que fijarse en la etiqueta para asegurarse de que
es el que se necesita y de los posibles riesgos de su manipulacin.
No devolver nunca a los frascos de origen los sobrantes de los productos utilizados sin
consultar con el profesor.
No tocar, oler o probar los productos qumicos.
Todo el material, especialmente los aparatos delicados, como lupas y microscopios,

deben manejarse con cuidado evitando los golpes o el forzar sus mecanismos.

Los productos inflamables (gases, alcohol, ter, etc.) deben mantenerse alejados de
las llamas de los mecheros. Si hay que calentar tubos de ensayo con estos productos,
se har al bao Mara, nunca directamente a la llama. Si se manejan mecheros de gas
se debe tener mucho cuidado de cerrar las llaves de paso al apagar la llama.
Cuando se manejan productos corrosivos (cidos, lcalis, etc.) deber hacerse con
cuidado para evitar que salpiquen el cuerpo o los vestidos. Nunca se vertern
bruscamente en los tubos de ensayo, sino que se dejarn resbalar suavemente por su
pared.
Cuando se quiera diluir un cido, nunca se debe echar agua sobre ellos; siempre al
contrario: cido sobre agua.
Cuando se vierta un producto lquido, el frasco que lo contiene se inclinar de forma

que la etiqueta quede en la parte superior para evitar que si escurre lquido se
deteriore dicha etiqueta y no se pueda identificar el contenido del frasco.
No pipetear nunca con la boca. Se debe utilizar la bomba manual, una jeringuilla o
artilugio que se disponga en el Centro.
Las pipetas se cogern de forma que sea el dedo ndice el que tape su extremo
superior para regular la cada de lquido.
Al enrasar un lquido con una determinada divisin de escala graduada debe evitarse
el error de paralaje levantando el recipiente graduado a la altura de los ojos para que
la visual al enrase sea horizontal.
Cuando se calientan a la llama tubos de ensayo que contienen lquidos debe evitarse
la ebullicin violenta por el peligro que existe de producir salpicaduras. El tubo de
ensayo se acercar inclinado a la llama y procurando que sta acte sobre la mitad

superior del contenido y, cuando se observe que se inicia la ebullicin rpida, se

retirar, acercndolo nuevamente a los pocos segundos y retirndolo otra vez al
producirse una nueva ebullicin, realizando as un calentamiento intermitente. En
cualquier caso, se evitar dirigir la boca del tubo hacia la cara o hacia otra persona.
Cualquier material de vidrio no debe enfriarse bruscamente justo despus de

haberlos calentado con el fin de evitar roturas.
Los cubreobjetos y portaobjetos deben cogerse por los bordes para evitar que se
engrasen.
OBLIGACIONES DEL ESTUDIANTE
El estudiante deber cumplir con lo siguiente para entrar al trabajo prctico:
- Deber utilizar delantal blanco con mangas largas
- Deber mantener su pelo tomado.
- No utilizar bufandas, pauelos, audfonos, collares u otros.
- Deber ingresar con pantaln y zapato cerrado.
- Las mochilas o bolsos debern mantenerse en los casilleros habilitados.
- En el mesn el estudiante deber tener solo su cuaderno de apuntes de laboratorio y

un lpiz.

PAUTA ELABORACIN DE INFORMES
El objetivo de la realizacin de un informe es instruir a los estudiantes en la

capacidad de comunicar ideas y resultados a travs de un medio escrito. Un informe es el
reflejo del trabajo en laboratorio; un laboratorio bien realizado se traducir en un informe
claro. Adems un buen informe puede ser entendido y utilizado por cualquier persona. En
orden a alcanzar una comunicacin efectiva, es recomendable seguir el siguiente formato:
1. Portada. Debe incluir:
Nombre de la institucin educativa

Nombre de la asignatura
Nmero y nombre de la prctica de laboratorio
Nombre del/los autor/es del informe con seccin de laboratorio
Nombre del profesor
Fecha de presentacin del informe
2. Introduccin. Presenta antecedentes relacionados directamente con el trabajo

prctico, y una breve descripcin del experimento a realizar. Esta seccin no debe
exceder de una pgina.
4. Objetivos. Definicin clara de la motivacin de la experiencia. Debe clasificarse en

objetivos generales y objetivos especficos.
5. Procedimiento Experimental. Esta seccin debe incluir una descripcin de materiales y

reactivos, junto con las metodologas empleadas en el prctico. Se escribe en tercera
persona pasado. Ejemplo: Se agit con una varilla, se centrifug etc. Y no
centrifugamos, centrifugue.

6. Resultados. Presentacin de los resultados obtenidos, acompaados de tablas, grficos,

diagramas, etc. Las figuras deben ser numeradas secuencialmente. Deben
identificarse claramente las variables contenidas en el Grfico o Tabla, con las
unidades correspondientes. Los grficos adems deben exponer claramente variables
asignadas a cada eje, escalas, puntos experimentales e identificacin de curvas.
7. Discusin. Seccin dedicada a un anlisis profundo de los resultados obtenidos.
8. Conclusiones. El trabajo prctico cumpli los objetivos propuestos? En caso contrario,

plantear observaciones o sugerencias orientadas a alcanzar los objetivos propuestos.
9. Referencias. Autor(es) (Apellido, Nombre). Nombre de Texto. Edicin. Lugar de Edicin,

Editorial, Ao de Edicin. Ejemplo: Chang, Raymond. Qumica. Sptima Edicin.
Mxico. McGraw-Hill. 2002.

LABORATORIOS

ACTIVIDAD ENZIMTICA
MARCO TERICO
Las enzimas son protenas que tienen como funcin catalizar una reaccin al
interior de la clula, es decir, hacer que una reaccin sea ms eficiente. Esto lo logra
acercando los sustratos, de manera que aumenten las probabilidades de que estos se
encuentre. Adems, una vez que los sustratos entran en contacto con la enzima, estos
adquieren la ubicacin espacial esencial para que ocurra la reaccin.
Uno de los modelos que mejor explica el funcionamiento de una enzima es el

modelo llave-cerradura, elaborado por Emil Fisher. Este plantea que la enzima posee un
sitio dentro de su estructura, llamado sitio activo, en donde los sustratos calzan
perfectamente, de la misma forma que una llave encaja en una cerradura. Lo que hace a
las enzimas altamente especficas para catalizar una reaccin.
Debido a su naturaleza proteica las enzimas pueden modificar su actividad por

cambios de temperatura y pH, factores que pueden alterar la estructura molecular de la
enzima, provocando su desnaturalizacin. En general una reaccin qumica aumenta su
velocidad de reaccin al aumentar la temperatura, pero en el caso de las reacciones
catalizadas por enzimas, este efecto se observa slo entre 0 y 40 C, ya que a
temperaturas mayores la enzima se desnaturaliza debido a la ruptura de enlaces dbiles,
principalmente puentes de hidrgeno y la prdida de su conformacin nativa.
Debido tambin a su naturaleza proteica la enzima presenta numerosos grupos

ionizables, los que derivan de los radicales de sus aminocidos constituyentes. Las
alteraciones del pH pueden cambiar el grado de ionizacin de los grupos qumicos
involucrados en el sitio activo de la enzima, afectando su actividad cataltica.

Las enzimas son activas en un rango estrecho de pH, con una actividad mxima a
un valor de pH denominado pH ptimo. Por tal motivo la actividad enzimtica se mide en
presencia de tampones o amortiguadores de pH.
La amilasa salival es una enzima que rompe especficamente los enlaces

glicosdicos 1-4 de los polisacridos. La hidrlisis del almidn por amilasa salival da como
producto una mezcla de maltosa, maltotriosa (dextrinas) y glucosa. El almidn es un
polisacrido formado por 2 tipos de cadena: amilasa (lineal), que presenta slo enlaces
1-4 y amilopectina (ramificada), con enlaces 1-4 y 1-6. El almidn se reconoce
qumicamente por el color azul intenso que desarrolla en presencia de yodo, por lo que la
hidrlisis enzimtica del almidn se puede determinar por la prdida del color azul de una
mezcla de reaccin.
TRABAJO PRCTICO
Reactivos y Materiales
Preparacin enzimtica: Lavado bucal con agua destilada, filtrado y mantenido en hielo.
Tampn fosfato 0.1 M, pH 7.0, pH 5.0, pH 6.0 y pH 8.0
Solucin de cloruro de sodio 0.03 M
Solucin de almidn 1% p/v
Solucin de lugol
Bao termoregulado y de agua hirviendo
Metodologa
A.- Efecto de la temperatura sobre la hidrlisis enzimtica del almidn
Numere 4 tubos de ensayo y agregue a cada uno 2 mL de la preparacin

enzimtica, 1 mL de la solucin de cloruro de sodio, 1 mL de la solucin tampn fosfato pH
7.0 y 2 mL de solucin de almidn. Mezcle suavemente sin agitar e incube durante 15

minutos en las siguientes condiciones: tubo 1 a 0C (sobre hielo), el tubo 2 a 37C en un

bao termorregulado, el tubo 3 a 100C (bao mara) y el tubo 4 a temperatura ambiente.
Incluya un quinto tubo sin cloruro de sodio en la mezcla de reaccin a temperatura
ambiente. Al cabo de los 15 minutos agregue 1 gota de lugol, mezcle y observe. Anote y
discuta sus resultados.
B.- Efecto del pH sobre la actividad de la amilasa salival
Numere 4 tubos de ensayo y agregue a cada uno 2 mL de preparacin enzimtica,

1 mL de solucin de cloruro de sodio y 2 mL de solucin de almidn. Posteriormente
adicione 1 mL de tampn fosfato pH 4.0 al tubo 1, 1 mL buffer pH 5.0 al tubo 2 , 1 mL
buffer pH 6.0 al tubo 3 y 1 mL buffer pH 8.0 al tubo 4. Mezcle y deje incubando a
temperatura ambiente por 15 minutos. Al cabo de ese tiempo agregue una gota de lugol,
mezcle y observe. Anote y discuta sus resultados.

MICROSCOPA
MARCO TERICO
Los microscopios son aparatos que, en virtud de las leyes de formacin de

imgenes pticas aumentadas a travs de lentes convergentes, permiten la observacin
de pequeos detalles de una muestra dada que a simple vista no se percibiran.
Partes del Microscopio
Sistema ptico
OCULAR: Lente situada cerca del ojo del

observador. Ampla la imagen del objetivo.
OBJETIVO: Lente situada cerca de la

preparacin. Ampla la imagen de sta.
CONDENSADOR: Lente que concentra los

rayos luminosos sobre la preparacin.
DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que

entra en el condensador.
FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

Sistema mecnico
SOPORTE: Mantiene la parte ptica.

Tiene dos partes: el pie o base y el
brazo.
PLATINA: Lugar donde se deposita la

preparacin.
CABEZAL: Contiene los sistemas de

lentes oculares. Puede ser monocular,
binocular,..
REVLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los
objetivos.
TORNILLOS DE ENFOQUE: Macromtrico que aproxima el enfoque y micromtrico que

consigue el enfoque correcto.
Manejo y Uso del Microscopio.
Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la platina

completamente. Si el microscopio se recogi correctamente en el uso anterior, ya debera
estar en esas condiciones.
Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas.
Comenzar la observacin con el objetivo de 4x (ya est en posicin) o colocar el de

10 aumentos (10x) si la preparacin es de bacterias.
Para realizar el enfoque:

Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo

macromtrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a travs del ocular, ya que
se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparacin pudindose daar alguno de
ellos o ambos.
Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de

la preparacin con el macromtrico y, cuando se observe algo ntida la muestra, girar el
micromtrico hasta obtener un enfoque fino.
Pasar al siguiente objetivo. La imagen debera estar ya casi enfocada y suele ser
suficiente con mover un poco el micromtrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de
objetivo se perdi por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo
anterior y repetir la operacin desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca
distancia de la preparacin y por ello es fcil que ocurran dos tipos de percances:
incrustarlo en la preparacin si se descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con
aceite de inmersin si se observa una preparacin que ya se enfoc con el objetivo de
inmersin.
Empleo del objetivo de inmersin:
Bajar totalmente la platina.
Subir totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz que nos
indica la zona que se va a visualizar y donde habr que echar el aceite.
Girar el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo a medio camino entre

ste y el de x40.
Colocar una gota mnima de aceite de inmersin sobre el crculo de luz.

Terminar de girar suavemente el revlver hasta la posicin del objetivo de

inmersin.
Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente

toca la gota de aceite. En ese momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a
la lente.
Enfocar cuidadosamente con el micromtrico. La distancia de trabajo entre el

objetivo de inmersin y la preparacin es mnima, aun menor que con el de 40x por lo que
el riesgo de accidente es muy grande.
Una vez se haya puesto aceite de inmersin sobre la preparacin, ya no se puede

volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se manchara de aceite. Por tanto, si
desea enfocar otro campo, hay que bajar la platina y repetir la operacin desde el paso 3.
Una vez finalizada la observacin de la preparacin se baja la platina y se coloca el

objetivo de menor aumento girando el revlver. En este momento ya se puede retirar la
preparacin de la platina. Nunca se debe retirar con el objetivo de inmersin en posicin
de observacin.
Limpiar el objetivo de inmersin con cuidado empleando un papel especial para

ptica. Comprobar tambin que el objetivo 40x est perfectamente limpio.
Mantencin y Precauciones
1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posicin
de observacin, asegurarse de que la parte mecnica de la platina no sobresale del
borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda.

2. Cuando no se est utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su

funda para evitar que se ensucien y daen las lentes. Si no se va a usar de forma
prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del
polvo.
3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy
suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de ptica.
4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el

microscopio.
5. Despus de utilizar el objetivo de inmersin, hay que limpiar el aceite que queda en el
objetivo con pauelos especiales para ptica o con papel de filtro (menos
recomendable). En cualquier caso se pasar el papel por la lente en un solo sentido y
con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que
limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este
tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes en exceso se pueden daar las
lentes y su sujecin.
6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macromtrico, micromtrico,

platina, revlver y condensador).
7. El cambio de objetivo se hace girando el revlver y dirigiendo siempre la mirada a la

preparacin para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de
objetivo agarrndolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se est observando a
travs del ocular.
8. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algn
lquido, secarlo con un pao. Si se mancha de aceite, limpiarla con un pao
humedecido en xilol.

9. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesin prctica

y, al acabar el curso, encargar a un tcnico un ajuste y revisin general de los mismos.
TRABAJO PRCTICO
1.- Escoja una muestra de su inters.
2.- Enfoque SIGUIENDO LAS INSTRUCCIONES DEL PROFESOR.
3.- Observe la muestra en aumento 10X, 40X y 100X.
4.- Registre sus resultados.
1.- DIBUJE CON OBJETIVO DE 10X
NOMBRE DE LA PREPARACIN:
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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METABOLISMO
MARCO TERICO
Todos los seres vivos poseen metabolismo, el cual a travs de un conjunto de

reacciones bioqumicas, permiten a una clula llevar a cabo todas sus funciones vitales.
Existen dos grandes grupos de reacciones metablicas, las reacciones de tipo

catablicas y las anablicas. En las primeras la clula degrada biomolculas para obtener
energa a partir de la ruptura de sus enlaces, almacenando esta energa en molculas de
ATP. Por otra parte las reacciones anablicas son aquella reacciones de sntesis a partir de
las cuales las clulas construyen biomolculas para lo cual ocupan las molculas de ATP
generadas en el catabolismo.
El principal combustible para las clulas es la glucosa. Existen dos rutas

metablicas a partir de las cuales se obtiene energa a partir de glucosa. En el catabolismo
aerbico, es decir en presencia de oxgeno, las clulas catabolizan la glucosa hasta
convertirla en CO2, H2O y 36-38 molculas de ATP. En el catabolismo anaerbico, la
glucosa es convertida a 2 molculas de piruvato, obtenindose como ganancia neta 2
molculas de ATP por molcula de glucosa, para luego dar inicio al proceso de
fermentacin, el cual busca restituir los cofactores reducidos durante la gliclisis.

TRABAJO PRCTICO
1.- Prepare los siguientes tratamientos en tubos de ensayo
2.- Deje reposar las preparaciones hasta que observe alguna variacin en las
bombitas. Tome nota de los cambios ocurridos. Deje reposar 20 minutos todas las
preparaciones manteniendo los tubos en el bao de agua tibia.
3.- Observe el estado final de las bombitas en cada una de las preparaciones.

MEIOSIS
MARCO TERICO
La meiosis es una divisin celular que ocurre solo en las clulas que darn origen a
los gametos. Se caracteriza por pasar por una etapa de duplicacin del material gentico
(S), seguida de dos divisiones celulares, la Meiosis I y la Meiosis II, de manera que al
finalizar la meiosis II, se obtiene a partir de una clula, 4 clulas que poseen la mitad del
material gentico. En el caso de las clulas diploides (2n, c), se obtienen 4 clula n, c
(haploides), todas distintas entre s y distintas a la clula progenitora.
Meiosis I
Profase I. Es una etapa mucho ms larga que la de mitosis y se subdivide en:

Preleptonema. Los cromosomas se observan con mayor nitidez, largos, delgados, y
presentan un engrosamiento denominado crommeros.
Cigonema. Los cromosomas homlogos duplicados comienzan a aparearse formando
el complejo sinaptotmico.
Paquinema. Los cromosomas homlogos que se han duplicado durante S, se aparean
formando una estructura denominada Ttrada, en donde cada pareja de cromosomas
homlogos tiene 4 cromtidas. En esta etapa e produce el Crossing-over o
intercambio de material gentico entre genes alelos, hecho fundamental en la
variabilidad gentica.
Diplonema. Los cromosomas homlogos duplicados y recombinados, comienzan a
separase quedando unidos por puntos denominados quiasmas.
Diacinema. El nmero de quiasmas disminuye, quedando los homlogos unidos en un
solo extremo.
Prometafase I. Los cromosomas se condensan al mximo, desaparece el ncleo.
Metafase I. La ttrada se ubica en el ecuador de la clula, enganchados al huso mittico.
La orientacin de cada ttrada es al azar, lo que implica que se producen todas las

combinaciones posibles. Este hecho se denomina permutacin cromosmica y tambin

contribuye a la variabilidad.
Anafase I. El huso mittico tracciona los cromosomas homlogos duplicados hacia polos
opuestos de la clula.
Telofase I. Se reconstituye el ncleo.
Citoquinesis.
Como resultado de la meiosis I se obtiene dos clulas haploides con material gentico
duplicado: n, 2c.
Meiosis II
La meiosis II es muy similar a la mitosis.
Profase II. Aparece el huso mittico, el ncleo comienza a desorganizarse.
Metafase II. Los cromosomas se ubican en el ecuador y se enganchan al huso mittico.
Anafase II. El huso tracciona las cromtidas hermanas de cada cromosoma hacia polos
opuestos de la clula.
Telofase II. Comienza a reorganizarse el ncleo.
Citoquinesis.
El resultado final son 4 clulas haploides con material gentico simple, n, c.

TRABAJO PRCTICO
Observe en aumento 10x, 40x y 100x las siguientes muestras e identifique clulas
en distintas etapas de meiosis.
Ovario de rata
Testculo de rata
Anteras de Lilium

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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
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OBSERVACIONES: ___________________________
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
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OBSERVACIONES: ___________________________
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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AUMENTO TOTAL: ___________________________
TINCIN: ___________________________________
OBSERVACIONES: ___________________________
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CARIOTIPO
MARCO TERICO
El cariotipo es el complemento cromosmico particular de un individuo y viene

definido por el nmero y morfologa de los cromosomas en la metafase mittica. En la
especie humana la dotacin cromosmica es de 2n = 46 (22 pares de autosomas y un par
de cromosomas sexuales). Utilizando tcnicas de tincin estndar los cromosomas
aparecen uniformemente teidos en metafase y se clasifican en 7 grupos de la A a la G
atendiendo a su longitud relativa y a la posicin del centrmero que define su morfologa.
Los autosomas se numeran del 1 al 22 ordenados por tamaos decrecientes y por la
posicin del centrmero. Los cromosomas sexuales X e Y constituyen un par aparte,
independientemente del resto (por su tamao, el cromosoma X se incluira en el grupo C,
y el Y, en el grupo G). De esta forma el cariotipo humano queda constituido as:
Grupo Pares cromosmicos Caractersticas
A 1, 2 y 3 Cr. muy grandes casi metacntricos (1 y 3

metacntricos, pero 2 submetacntrico)
B 4y5 Cr. grandes y submetacntricos, con dos brazos muy

diferentes en tamao
C 6, 7, 8, 9, 10, 11 y 12 Cr. medianos submetacntricos
D 13, 14 y 15 Cr. medianos acrocntricos con satlites
E 16, 17 y 18 Cr. pequeos, metacntrico el 16 y submetacntricos

17, 18
F 19 y 20 Cr. pequeos y metacntricos
G 21 y 22 Cr. pequeos y acrocntricos, con satlites.
X, Y El cr. X es parecido al 6. El Y, al grupo G, pero sin

satlites.

(Todos los cromosomas autosmicos estn ordenados en orden decreciente de

tamao, excepto el cromosoma 21 que ahora se sabe que es ms pequeo que el 22)
Sin embargo, atendiendo solamente a estos parmetros no es posible identificar

inequvocamente cada par de cromosomas. Para ello es necesario utilizar diferentes
tcnicas de bandeo cromosmico. Los distintos patrones de bandas que se consiguen son
constantes y especficos de cada tcnica y determinan la distribucin de regiones
cromosmicas que se revelan positiva o negativamente segn el mtodo utilizado.
Clasificacin de los cromosomas.
A B
1 2 3 4 5
6 7 8 9 10 11 12
D E
13 14 15 16 17 18
Crs.
sexuales
19 20 21 22
X Y
F G
La Citogentica Humana ha ido desarrollndose como una ciencia mdica que

permite diagnosticar diversas cromosomopatas, entre las que cuentan:
- Variaciones cromosmicas estructurales: afectan a la estructura del cromosoma

en cuanto a la ordenacin lineal de los genes. Aqu se incluyen deleciones, duplicaciones,
inversiones y translocaciones.
- Variaciones cromosmicas numricas: afectan al nmero de cromosomas.

Incluyen las poliploidas (triploida: 3n; tetraploida: 4n) y los diversos tipos de aneuploida
(trisomas: 2n+1; monosomas: 2n-1).
Por otra parte, las anomalas cromosmicas pueden afectar a los autosomas o a los
cromosomas sexuales.
Las alteraciones cromosmicas ms frecuentes en humanos son:
Anomalas autosmicas:
Sndrome de Down, por trisoma del cromosoma 21, translocacin 21/21 o translocacin
14/21.
Sndrome de Patau, por trisoma del par 13.
Sndrome de Edwards, por trisoma del par 18.
Sndrome Cri du Chat, por delecin parcial del brazo corto del cromosoma 5 (5p).
Sndrome de DiGeorge, por delecin parcial del brazo largo del cromosoma 22 (22q11).

Cromosoma Filadelfia, formado por una translocacin entre los cromosomas 9 y 22.
Anomalas de los cromosomas sexuales:
Sndrome de Klinefelter, por una constitucin XXY, XXXY, XXXXY.
Sndrome XYY, cromosoma Y extra en varones.
Sndrome de Turner, constitucin X0.
Sndrome XXX, cromosoma X extra en mujeres.
Actualmente se ha llegado a profundizar bastante en el conocimiento del cariotipo

humano y se sabe que es relativamente frecuente la aparicin de anomalas
cromosmicas. Por ejemplo, cerca de un 25% de los abortos ocurridos antes de la octava
semana de gestacin tienen cariotipos anormales y un 0,5% de los recin nacidos
presentan aneuploidas.
Estas alteraciones no slo pueden producir anomalas en el propio individuo

portador sino que, por tratarse de anomalas genticas, pueden transmitirse a la
descendencia en el caso de que afecten a las clulas germinales. La deteccin anticipada
de anomalas cromosmicas permite dictaminar las posibilidades de que la descendencia
de una pareja portadora de una de ellas pueda presentarla o no. Para ello es preciso
conocer el cariotipo de cada progenitor, lo que permite emitir un diagnstico de su
posible descendencia, con lo que el individuo ser consciente de sus posibilidades.
El estudio del cariotipo tiene tambin su aplicacin en el diagnstico prenatal. Es

posible determinar la constitucin cromosmica del feto antes de su nacimiento pudiendo
as observarse si presenta alguna anomala cromosmica detectable. Hoy en da, el
diagnstico prenatal se practica a posteriori del inicio de la gestacin y los resultados

positivos suelen plantear conflictos ticos y emocionales. Si bien, en muchos casos este
tipo de diagnstico es el nico posible, como cuando la anomala cromosmica se produce
en las clulas germinales de uno de los progenitores.
Actividad.
Usted dispone de 2 cariotipos pertenecientes a dos pacientes distintos.
1.- Ordene el cariotipo generando un ideograma
2.- Determine si los pacientes presentan o no una alteracin gentica y determine que
tipo de anomala es.




CONCLUSIONES
La gua de laboratorio de Biologa constituye un documento que contiene la

informacin ms importante y suficiente para que el estudiante realice las actividades
descritas en cada paso prctico y en su ejecucin los estudiantes debieron lograr una
profundizacin y/o consolidacin de sus conocimientos de los principales conceptos de la
Biologa. Los temas incluidos (microscopa, metabolismo, meiosis y cariotipo) representan
tpicos y herramientas principales de la Biologa, se espera que el estudiante haya logrado
conectarlos con lo aprendido en ctedra.
El aprendizaje efectivo de dichos conceptos facilitar al estudiante la comprensin

de los contenidos de cursos posteriores, que utilizan los conceptos bsicos de la biologa.

REFERENCIAS
Audesirk, T. y G. Audesirk, (2008) Biologa. La vida en la Tierra .8va edicin. Prentice Hall.
Karp, G. (2009).Biologa Celular y Molecular. Conceptos y Experimentos. (2da edicin).

Madrid. McGraw-Hill Interamericana.
Velurtas S. Estudio y reconocimiento de las biomolculas que forman parte de los

organismos vivientes. Consultado 13032013, disponible en
http://www.mdp.edu.ar/exactas/mdp08/2_institucional/departamentos/biologia/grupos/
version%201_1/Practicos/archivos/074_079_TP_Biomoleculas.pdf
Skirzewski M., Tiskow G., Manual de prcticas de laboratorio de Fisiologa I. Consultado

13032013, disponible en:
http://www.ucla.edu.ve/dmedicin/DEPARTAMENTOS/fisiologia/WEB%20FISIO/GUION%20
PRACTICO%20FISIOLOGIA%20I.pdf
Snchez J. Prcticas de Laboratorio. Consultado 13032013, disponible en:

http://www.iespando.com/web/departamentos/biogeo/web/departamento/2BCH/LABO
RATORIO/cariotipo.htm

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APUNTE

GUA DE LABORATORIO DE BIOLOGA

Facultad de Salud, Deporte y Recreacin

Facultad de Salud, Deporte y Recreacin

Doctor(c) en Ciencias Biomdicas de la Universidad

Coordinadora de Biologa e Histoembriologa.

Atiende las ctedras de Biologa Histoembriologa,

2 Gua de laboratorio de Biologa

El apunte corresponde a material realizado por el docente junto a una recopilacin de

a) Normas de seguridad de laboratorio. Esta seccin es de vital importancia a fin de

c) Trabajos prcticos: Es fundamental que el estudiante al momento de iniciar cada

4 Gua de laboratorio de Biologa

NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO

El trabajo en el Laboratorio requiere de una serie de normas de seguridad para

Para el desarrollo de las prcticas es conveniente tener en cuenta algunas normas

El orden y la limpieza deben presidir todas las experiencias de laboratorio. En

Cada grupo de prcticas se responsabilizar de su zona de trabajo y de su material.

No tocar, oler o probar los productos qumicos.

Todo el material, especialmente los aparatos delicados, como lupas y microscopios,

5 Gua de laboratorio de Biologa

Cuando se vierta un producto lquido, el frasco que lo contiene se inclinar de forma

6 Gua de laboratorio de Biologa

superior del contenido y, cuando se observe que se inicia la ebullicin rpida, se

Cualquier material de vidrio no debe enfriarse bruscamente justo despus de

OBLIGACIONES DEL ESTUDIANTE

El estudiante deber cumplir con lo siguiente para entrar al trabajo prctico:

- Deber utilizar delantal blanco con mangas largas

- Deber mantener su pelo tomado.

- No utilizar bufandas, pauelos, audfonos, collares u otros.

- Deber ingresar con pantaln y zapato cerrado.

- Las mochilas o bolsos debern mantenerse en los casilleros habilitados.

- En el mesn el estudiante deber tener solo su cuaderno de apuntes de laboratorio y

7 Gua de laboratorio de Biologa

PAUTA ELABORACIN DE INFORMES

El objetivo de la realizacin de un informe es instruir a los estudiantes en la

1. Portada. Debe incluir:

Nombre de la institucin educativa

2. Introduccin. Presenta antecedentes relacionados directamente con el trabajo

4. Objetivos. Definicin clara de la motivacin de la experiencia. Debe clasificarse en

5. Procedimiento Experimental. Esta seccin debe incluir una descripcin de materiales y

8 Gua de laboratorio de Biologa

6. Resultados. Presentacin de los resultados obtenidos, acompaados de tablas, grficos,

7. Discusin. Seccin dedicada a un anlisis profundo de los resultados obtenidos.

8. Conclusiones. El trabajo prctico cumpli los objetivos propuestos? En caso contrario,

9. Referencias. Autor(es) (Apellido, Nombre). Nombre de Texto. Edicin. Lugar de Edicin,

9 Gua de laboratorio de Biologa

10 Gua de laboratorio de Biologa

Uno de los modelos que mejor explica el funcionamiento de una enzima es el

Debido a su naturaleza proteica las enzimas pueden modificar su actividad por

Debido tambin a su naturaleza proteica la enzima presenta numerosos grupos

11 Gua de laboratorio de Biologa

La amilasa salival es una enzima que rompe especficamente los enlaces

A.- Efecto de la temperatura sobre la hidrlisis enzimtica del almidn

Numere 4 tubos de ensayo y agregue a cada uno 2 mL de la preparacin

12 Gua de laboratorio de Biologa

minutos en las siguientes condiciones: tubo 1 a 0C (sobre hielo), el tubo 2 a 37C en un

B.- Efecto del pH sobre la actividad de la amilasa salival

Numere 4 tubos de ensayo y agregue a cada uno 2 mL de preparacin enzimtica,

13 Gua de laboratorio de Biologa

Los microscopios son aparatos que, en virtud de las leyes de formacin de

Partes del Microscopio

OCULAR: Lente situada cerca del ojo del

OBJETIVO: Lente situada cerca de la