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Matriel
une plante quelconque, except une Brassicace ou une Chnopodiace
(groupes non-symbiotiques, avec des poils absorbants seulement). Avec une
Fabace, on observera aussi des nodosits. Nous avons aussi eu de bons rsultats
avec du Pturin, et dexcellents avec du Plantain et une racine drageonnante (super-
ficielle) de Merisier. Eviter surtout les sols trs riches, o les plantes se nourrissent
des tubes essai dans un portoir allant dans un bain marie 90 C. Mettez un
thermomtre dans le bain-marie, car quand les rsistances sont entartres elles ne
montent qu 80 C !
un tamis ou micropline pour rcupration et rinage ;
Protocole
1. Laver prcautionneusement les racines et prendre les plus jeunes, les couper
une longueur de 1-2 cm
2. Les mettre dans un tube essai avec la potasse 10 %, et chauffer au bain-marie
90 C durant 30 min (on peut optimiser ce temps, parfois 10-15 min suffisent si lon
est press et/ou si les racines sont fragiles). Cette opration dtruit le contenu des
cellules vgtales et dcolore les tanins des racines ligneuses. La solution devient
alors brun-rouge.
3. Jeter la potasse et filtrer dans un tamis, rincer avec leau acidifie pour neutraliser.
4. Remettre dans le bleu coton au bain marie 10 15 minutes. Filtrer nouveau
dans un tamis et rincer leau distille.
5. Pour une observation directe, monter dans leau. Si on souhaite observer plus
tard ou conserver les lames, monter dans le lactoglycrol. Si cest trop pais, cra-
ser doucement avec le dos dun crayon papier en bois, voire donner un coup sec
avec une gomme carre (pour ne pas casser la lamelle). Si on souhaite conserver la
prparation plusieurs annes, mettre une pince linge sur la lamelle et du vernis
ongles transparent tout autour de la lamelle (le lactoglycrol est un peu miscible
avec le vernis). Le lendemain dplacer la pince linge et remettre une couche de
vernis. Lun de nous a conserv des lames 15 ans avec cette technique !
Rsultat
Le bleu coton marque le champignon mycorhizien, prsent dans tout le parenchy-
me cortical, sans jamais entrer dans le cylindre central. On distingue (fig. 1) des arbus-
cules lintrieur de certaines cellules racinaires (structure dchange entre partenaires)
Protocole
Suspendre 0,25 l environ de sol (dont on a auparavant limin les gros blocs et
morceaux visibles) dans 0,75 l deau. Homogniser puis laisser brivement dcan-
ter et tamiser le surnageant sur trois tamis de 250, 150, et 50 m (placs les uns au-
dessus des autres, le plus fin en bas !). Laver leau distille chaque tamis puis
recueillir chaque fraction laide dun peu deau (rincer le tamis lenvers) dans
une bote de Ptri et lobserver sans coloration, la binoculaire. On peut aussi lob-
server au microscope optique, sans coloration (attention, vue la taille des spores, ne
pas craser la lame pour ne pas les dtruire !).
Rsultat
On observe, entre des dbris de mme taille, de grosses spores (fig. 2). Elles sont
rondes et bourres de rserves (si on crase, une goutte lipidique sort), avec parfois
dun ct un filament ou une hernie : cest le reste de lhyphe qui a gnr la spore
son extrmit.
2. Spores de Glomromyctes
a) vue densemble, la barre mesurant 200 m, b) vue de dtail avec hyphe gnratrice flche,
la barre mesurant 50 m (clichs P.-E. Courty)
Conclusion
Ces observations donnent accs aux champignons mycorhiziens, une fraction
importante de la biodiversit microbienne du sol. Elles permettent dillustrer la dfi-
nition dune mycorhize, un organe mixte form par la racine dune plante et un
champignon du sol . Elles mettent en vidence un aspect fonctionnel majeur,
lexistence dun contact troit, formant une surface dchange entre les partenaires,
pour lesquels cet organe mixte a un rle trophique.