UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

Facultad de Ingeniera Qumica

Escuela de Ingeniera Qumica

Ingeniera de las Reacciones Qumicas I

Quimioluminiscencia

Nombres:
Lalangui Santiago

Montalvo Diego

Vsquez Diego

Sptimo Semestre
 2015

INTRODUCCION

El uso analtico de la quimioluminiscencia (QL) est experimentando un creciente inters, ya

que representa una alternativa simple, barata y sensible para cuantificar una gran variedad de
compuestos.
Desde hace unos treinta aos, el fenmeno de la luminiscencia, se ha convertido en una rama de
la espectrometra aplicada, dentro de la qumica analtica. Debido a la nueva instrumentacin y,
especialmente a la incorporacin de tcnicas modernas, algunas nuevas y otras tomadas de otras
disciplinas, la QL y la bioluminiscencia (BL) se aplican de forma rutinaria en el anlisis tanto
cualitativo como cuantitativo.
Debido a su alta sensibilidad y selectividad, los mtodos basados en detecciones QL suponen
una herramienta analtica de gran utilidad, los mtodos quimioluminiscentes han sido ms
ampliamente utilizados, fundamentalmente en anlisis bioqumico y ambiental.
Las tendencias ms actuales en qumica analtica implican la aplicacin de la QL como sistema
de deteccin, combinada con electroforesis capilar (EC) como mtodo previo de separacin,
proporcionando una selectividad y sensibilidad analtica excelentes y permitiendo la resolucin
y cuantificacin de varios analitos en mezclas relativamente complejas.
Hoy en da, el inters analtico de la QL est aumentando considerablemente debido a las
ventajas ya comentadas, como bajos lmites de deteccin, rangos dinmicos amplios, alta
sensibilidad y la gran versatilidad de los mtodos QL.
Recientemente, las investigaciones se estn centrando especialmente en el desarrollo de
productos quimioluminiscentes para aplicaciones de diagnstico clnico; as, la QL es hoy en da
un posible sustituto del marcado isotpico, remplazando as el uso de radioistopos. La QL se
aplica tambin en el control de calidad de productos crnicos y residuos, existiendo igualmente
aplicaciones en la medida del ozono ambiental.
Siguiendo la tendencia general en qumica analtica, la mejora en los mtodos de deteccin est
dirigida actualmente a la miniaturizacin y, por lo tanto, a reducir el gasto de disolventes
orgnicos en mtodos de separacin, empleando ms sistemas acuosos y volmenes de muestra
menores con concentraciones inferiores. Como las tcnicas quimioluminiscentes pueden
proporcionar mejoras en estas situaciones, la instrumentacin para medidas
quimioluminiscentes y el desarrollo de acoplamientos con interfaces selectivas fsicas o
qumicas que permitan medidas selectivas estn tambin dirigidos a conseguir este fin, de modo
que puedan eliminarse las desventajas de las tcnicas basadas en medidas directas de QL (como
falta de selectividad o dependencia de factores fsico-qumicos).
 FUNDAMENTO

La QL se define como la emisin de radiacin electromagntica (normalmente en la regin del

visible o del infrarrojo cercano) producida por una reaccin qumica. Cuando esta emisin
proviene de organismos vivos o sistemas derivados de ellos, se denomina bioluminiscencia.
Ambos fenmenos son procesos luminiscentes que se han identificado tradicionalmente
mediante un prefijo que identifica la fuente de energa responsable del inicio de la emisin de
radiacin electromagntica.
Como la intensidad de emisin es funcin de la concentracin de las especies qumicas
implicadas en la reaccin QL, las medidas de la intensidad de emisin pueden emplearse con
fines analticos. Una ventaja de las tcnicas QL es que permiten emplear una instrumentacin
bsica bastante sencilla, ya que el sistema ptico no requiere fuente externa de excitacin. La
QL se describe a menudo como una tcnica de campo oscuro: la ausencia de niveles altos de
luz de fondo, que s ocurren en espectrofotometra y fluorimetra, reduce el ruido y permite
mejorar los lmites de deteccin. La instrumentacin para medidas de QL vara desde sistemas
muy simples hasta instrumentacin ms compleja, pudindose usar un fluormetro simplemente
con la fuente de excitacin apagada.
No obstante deben considerarse algunas limitaciones en el anlisis por QL, como la
dependencia de la emisin quimioluminiscente de varios factores ambientales que deben ser
controlados, la falta de selectividad, ya que un reactivo quimioluminiscente no se limita a un
nico analito, y finalmente, como ocurre en otros sistemas de deteccin en flujo, la emisin
quimioluminiscente no es constante sino que vara con el tiempo (el flash de luz est compuesto
de una seal que se produce tras la mezcla de los reactivos, alcanza un mximo y despus cae
hasta la lnea de base), y este perfil de emisin frente al tiempo puede variar ampliamente en
diferentes sistemas quimioluminiscentes, por lo que hay que extremar el cuidado para detectar
la seal en sistemas en flujo, midiendo en periodos de tiempo bien definidos.
INSTRUMENTACION BSICA
La medida de la luz emitida por una reaccin qumica o bioqumica est relacionada con la
concentracin de las especies participantes: la produccin total de luz est directamente
relacionada con la cantidad de luz emitida y, consecuentemente, es proporcional a la
concentracin de la especia concentrada. Por esta razn, la medida de luz emitida es un
indicador de la cantidad de analtico presente y al instrumento bsico que es capaz de realizar
estas medidas se la llama luminometro.
Una de las ventajas ms importantes de la QL como tcnica analtica es la simplicidad de la
instrumentacin, que incluye como componentes principales: una clula a la luz, un dispositivo
de inyeccin y mezcla de reactivos y/o de muestra, un detector de luz y un sistema de
adquisicin y procesador de seal.
En las tcnicas de QL, una vez mesclados los reactivos y la muestra comienza la reaccin
quimio luminiscente y la intensidad de la emisin que se est produciendo, disminuye una vez
que los reactantes se han agotado.
INTRODUCCION DE LA MUESTRA
Dependiendo de la configuracin del dispositivo y del mtodo de introduccin de muestra y
reactivos, los sistemas pueden clarificarse en: estticos o sistemas en flujo.
En este proceso se inyecta un reactivo especfico para el anlisis del analito.
Esta metodologa tiene la ventaja de un bajo consumo tanto de muestra como la de reactivos y la
utilizacin de una clula de menor volumen, evitando a su una dilucin excesiva; la seal es
muy reproducible y precisa ya que se puede conseguir que se corresponda con la mxima altura
de pico.

CLULA DE REACCIN
La clula es una cmara en la que se lleva a cabo la reaccin en fase slida lquida o gaseosa, en
la cual la mezcla analto- reactivo esta frente al detector, normalmente se construyen de
materiales transparentes a la luz en la regin de visible y que sea compatible con la muestra,
estos permiten una mayor cantidad de luz al detector, consiguindose con ello unos mejores
lmites de deteccin

DETECTOR
Hay cuatro requerimientos bsicos para del detector que constituye la parte crtica del
luminometro
- Debe ser capaz de detectar una seal luminosa de varios rdenes de magnitud de
intensidad desde pocos fotones por segundo a decenas de millones por segundo
- Debe ser sensible al menos en la regin espectral de 400-600 nm, idealmente en la
regin completa del visible (380-750nm) incluso en las regiones pertenecientes al UV e
IR
 - La seal registrada por el detector debe estar relacionada directamente con la intensidad
de la luz ha llegado a l, idealmente directamente proporcional en todo el rango de
sensibilidad requerido. La seal producida por el detector debe poder ser fcilmente
leda, registrada y analizada
- La velocidad de respuesta del detector debe ser ms rpida que la velocidad de la
reaccin de QL, si no la seal ser una versin distorsionada de la seal original

PRINCIPALES APLICACIONES QUIMIOLUMINICESNTES

En los ltimos aos el inters en el uso de sistemas quimioluminicentes en qumica analtica
est creciendo exponencialmente, principalmente en fase gaseosa y lquida, como por ejemplo
para los siguientes analitos
Tipos de luminiscencia

Dependiendo del tipo de excitacin empleada tendremos distintos tipos de

luminiscencia:

Tipo de Excitacin Tipo de luminiscencia

Radiacin Ultra-Violeta Fotoluminiscencia

Excitaciones mecnicas Triboluminiscencia

Trmicas Termoluminisencia o crioluminiscencia

Elctricas Electroluminiscencia

Bombardeo con electrones Ctodoluminiscencia

Rayos X Roengenoluminiscencia

Rayos Gamma Radioluminiscencia

Fenmenos Qumicos Quimioluminiscencia

Vibraciones sonoras Sonoluminiscencia

FOTOLUMINISCENCIA

Se trata de un caso particular de luminiscencia en el cual la radiacin que incide sobre el slido
es ultra-violeta o visible produciendo la emisin del material en el rango visible o infrarrojo
cercano.
Bsicamente, el proceso que estamos estudiando es el siguiente:
Inicialmente se hace incidir una radiacin de una determinada longitud de onda sobre el
material a estudiar. Dicha radiacin tendr asociada una determinada energa, sta interactuar
con los electrones de los tomos del material haciendo que stos abandonen su nivel
fundamental, ya que toda molcula tiende a estar en una configuracin de mnima energa,
excitndolos slo a unos determinados niveles de energa correspondientes a estados excitados
compatibles con la energa de la radiacin incidente.
Al cabo de un tiempo, estos electrones se desexcitarn, perdiendo energa, y por lo tanto
pasando a niveles de energa inferior, cediendo este exceso de energa en forma de radiacin.

Espectro de Absorcin.
Todos los tomos y molculas absorben radiacin de ciertas frecuencias caractersticas
correspondientes a las transiciones de sus electrones a estados excitados. La representacin de
estas frecuencias caractersticas de absorcin es lo que se llama espectro de absorcin.

Espectro de Emisin.
El decaimiento de los electrones a niveles de energa inferior como consecuencia de la
desexcitacin lleva consigo la emisin de radiacin de determinadas frecuencias
correspondientes a dichas transiciones. Estas frecuencias conforman el espectro de emisin.
Es decir si radiamos la muestra con una energa de una frecuencia determinada, que podemos
aislar fcilmente mediante un monocromador, el material emitir en unas frecuencias concretas.
Para nuestro diagrama de tres niveles tendremos los casos siguientes:

Espectro de excitacin de luminiscencia.

Definimos el espectro de excitacin como aquellas frecuencias de la radiacin incidente que nos
permiten obtener cada una de las frecuencias correspondientes al espectro de emisin.

Es decir, si en el espectro de emisin del material aislamos una lnea de frecuencia , queremos
saber con que energas (y por lo tanto, frecuencias) podemos radiar nuestro material para que
podamos ver esa lnea en concreto (espectro de excitacin de luminiscencia).

Desarrollo experimental.
El dispositivo experimental para el estudio de la fotoluminiscencia consta de una lmpara cuya
luz es focalizada sobre la rendija de entrada del primer monocromador (monocromador de
excitacin) y a su salida se focaliza sobre la muestra. La luminiscencia es focalizada mediante
una lente sobre la rendija de entrada de un segundo monocromador (monocromador de emisin)
a cuya salida se sita el detector. En el dispositivo se suele incluir tambin a la entrada del
monocromador de excitacin una lmina semitransparente que desve parte de la radiacin
incidente hacia una clula de referencia a fin de corregir posibles fluctuaciones de intensidad de
la lmpara.
 Fuente
Monoc. A Muestra
de Luz

Monoc. B

Detector

Clculo del espectro de emisin

Seleccionamos con el monocromador de entrada cada una de las frecuencias posibles de
absorcin y variando el monocromador de salida para cada caso tendremos las emisiones
posibles correspondientes.

Clculo del espectro de excitacin de la luminiscencia.

Se seleccionan en el monocromador de salida cada una de las frecuencias posibles de emisin y
variando el monocromador de entrada obtendremos en cada caso aquellas frecuencias que nos
permitan seguir observando la lnea fijada a la salida.

Eficiencia luminiscente. Transiciones no radiactivas.

La intensidad que emite un material es proporcional a la intensidad que ha sido extrada
(absorbida) del haz incidente sobre el material. Es decir

(I0 I) Ilum

Donde:
I0 = intensidad incidente,
I = la intensidad transmitida a travs del material y
Ilum = intensidad de luminiscencia.

Ilum = Ke lum (I0 I)

Donde:
Ke = constante que recoge diversos factores experimentales como son la geometra, la respuesta
de los diferentes componentes del equipo, etc,

lum = eficiencia luminiscente.

La intensidad transmitida a travs del material se puede escribir en funcin de la incidente

como:

I = I0 e- d

Donde:

= coeficiente de atenuacin de la radiacin

d = espesor de la muestra.
Con lo cual nos queda que

Ilum = Ke lum I0 (1 - e- d )

La eficiencia luminiscente da cuenta del hecho de que no toda la radiacin absorbida es devuelta
en forma luminiscente. Efectivamente, aunque hasta ahora hemos supuesto que los tomos
excitados decaen siempre de forma radiativa (devuelven su energa en forma de radiacin
electromagntica), esto no es siempre as, sino que existe la posibilidad de desexcitacin por
procesos no radiativos (radiacin trmica que se traduce en vibraciones de la red en forma de
fonones).
La eficiencia luminiscente se define como:

n de fotones emitidos
lum
n de fotones absorbidos
(0 lum 1)

Al considerar procesos no radiativos, la eficiencia luminiscente se reduce.

Si lum = 1 tendramos luminiscencia del 100% (cosa poco probable)

Si lum 0 tendremos sustancias no luminiscentes (la gran mayora de los casos).

Como consecuencia de esto, la luminiscencia de un material ser mayor cuanto

mayor sea la intensidad de excitacin I0 , lum y Ke .

Podemos sacar las siguientes conclusiones:

 = 0 Ilum = 0 ( Io I ) = 0 toda la radiacin que incide se transmite a travs del
material sin tener lugar fenmenos de absorcin y por tanto de luminiscencia
Ilum = Ke lum I0 la radiacin que incide en el material se absorbe ntegramente,
dando lugar a que la radiacin de luminiscencia sea proporcional a la radiacin incidente y a
la lum.

<<1 podemos aproximar la exponencial por un desarrollo en serie de la forma: e -x 1

- d de forma que nos queda para la intensidad de luminiscencia:

Ilum = Ke lum I0 ()d

Siendo la intensidad absorbida y, por lo tanto, la luminiscencia proporcional al coeficiente de

absorcin en este lmite. Recordando la definicin de la densidad ptica:

D.O. = log10(I0/I)
Tenemos que
D.O.() = ()d/ 2.3

Sin embargo la expresin anterior deja de se vlida para D.O. moderadamente elevadas
(D.O.>0.2). Al aumentar la absorcin por encima de D.O. 1 la luminiscencia permanece
prcticamente constante. Esto provoca un achatamiento del espectro de excitacin. Para valores
grandes de tenemos:

Este achatamiento del espectro de emisin, se puede utilizar para corregir los espectros por la
dependencia con la longitud de onda del conjunto formado por la lmpara y el monocromador
de excitacin. Para ello utilizaremos un material luminiscente de muy alta concentracin,
generalmente para este fin se suelen usar disoluciones acuosas concentradas de colorantes
orgnicos (como por ejemplo la rodamina). Estos materiales se caracterizan por un espectro de
excitacin prcticamente plano en un amplio rango de longitudes de onda. Como consecuencia
de esto, la seal de salida responder a la variacin de la intensidad que llega a la muestra por la
accin de la lampara y del monocromador.
El espectro que obtendremos lo utilizaremos para corregir el espectro de excitacin del material
estudiado mediante la divisin de ambos espectros.
Icorregida ()= I()/ Ireferencia()

De forma similar corregiremos el efecto de la variacin con la longitud de onda del detector y el
monocromador de emisin en el espectro de emisin. Utilizaremos para esto un material con
espectro de emisin plano, como por ejemplo sulfato de bario, con lo que cualquier variacin en
el espectro, ser debida a la respuesta espectral del sistema experimental y por tanto podremos
hacer las correcciones necesarias de forma anloga a como lo hicimos en el espectro de
excitacin.

DESPLAZAMIENTO DE STOKES.
La existencia de los procesos no-radiativos hacen que no toda la radiacin absorbida sea
emitida. El desplazamiento de Stokes nos da la diferencia de energa que existe entre las
absorciones y emisiones entre dos mismos niveles.

Estokes = (Eabsorcin Eemisin)

La probabilidad de desexcitacin radiativa entre dos niveles aumenta con la diferencia de

energa entre ellos, mientras la no-radiativa disminuye, por lo que la primera domina cuando los
niveles energticos estn separados mientras la segunda lo hace cuando tenemos niveles
prximos.

As, los tiempos de transiciones radiativas r sern mayores que los de las no radiativas nr (r
10-9-10-3 seg ; nr 10-12 seg).
Los procesos no-radiativos son debidos a la interaccin de los centros pticamente activos
(absorbentes y emisores) con los tomos que le rodean (slido).
Estos centros representan un entorno localizado que favorece recombinaciones radiativas. Esto
quiere decir que los electrones excitados deben encontrarse protegidos de la posibilidad de
interaccionar con la red con la emisin de fonones.
Normalmente una transicin entre niveles electrnicos viene acompaada de transiciones entre
estados vibracionales y rotacionales de la molcula. Las intensidades de los componentes de la
estructura vibracional observada son explicadas por el principio de Franck-Condon. Es decir, las
transiciones electrnicas en molculas ocurren tan rpido que los ncleos no cambian sus
posiciones relativas en su movimiento vibracional.

Consideremos brevemente el ejemplo del Rub, cuyas absorciones y emisiones son debidas a
centros de Cr3+ en el cristal de almina (Al2O3). El in Cr3+ est rodeado de otros iones del
slido con los que interacciona, y por tanto, la energa de los niveles electrnicos depender de
la distancia d a sus vecinos que no es constante puesto que la red no es rgida.
As, la representacin de los niveles electrnicos en funcin de d toma la forma:

La figura siguiente representa un diagrama de niveles donde el eje de abcisas representa las
posiciones relativas en la red y el de ordenadas las energas del centro activador. Representamos
las curvas de energa del nivel fundamental y del primer nivel excitado y vemos que los
mnimos de ambas no coinciden, esto es consecuencia de las diferentes interacciones con la red
del estado fundamental y primer estado excitado.
Las transiciones electrnicas las representamos verticalmente de acuerdo con el principio de
Franck-Condon que excluye movimientos inicos o atmicos en el corto periodo de tiempo
durante el cual tiene lugar la relajacin electrnica. Ser posteriormente cuando los iones
vecinos adopten las posiciones de equilbrio correspondientes al nuevo estado electrnico.
La promocin del electrn desde el estado fundamental (A) de energa E 1 implica la absorcin
de un cuanto de energa que es proporcionado en nuestro caso por la radiacin incidente y lo
promociona al nivel excitado de energa E 2. Supongamos que lo excita al punto (B) prximo al
mnimo de energa (C). Una vez el electrn se encuentre en el nivel excitado tratar de llegar al
mnimo de energa (C) y el camino hacia ste conllevar una prdida de energa en forma de
vibracin trmica que disipar en forma de fonones. A este proceso no-radiativo, le puede seguir
otra transicin radiativa hasta el nivel fundamental (D) con emisin de energa correspondiente
a la transicin, a la cual, al igual que antes, le seguir otra disipacin de fonones hasta alcanzar
de nuevo el mnimo del estado fundamental.
Si se diera el caso de que la curva de la energa presenta un rizo como el de la figura, en las
proximidades de (E) y (F). Si un electrn pudiese alcanzar este punto (E) por efecto de la
agitacin trmica, podran retornar al estado fundamental bsicamente por procesos trmicos,
salvo por una pequea parte de energa (E5 E6) que perdera. Esto supondra una prdida de la
luminiscencia original. La dependencia de la luminiscencia con la temperatura se explica porque
la probabilidad de que llegue al punto (E) desde el punto (C) es una funcin de la
temperatura con la forma de:

Exp (-( E5 E6)/KT)

Por lo que a temperaturas altas es poco probable que se produzca la transicin radiativa entre
(C) y (D).
Todo esto hace que la energa de emisin sea menor que la de absorcin y se produzca, por lo
tanto, un corrimiento hacia longitudes de onda mayores del espectro de emisin con respecto al
de absorcin (desplazamiento de Stokes). Ahora se entiende bien por que radiando con
radiacin ultra violeta obtenemos radiacin en el visible.
Si el desplazamiento que experimenta el espectro de emisin es tal que parte de l se superpone
con el espectro de absorcin, ambas curvas se cortarn en un punto.
En el corte, se deduce que la energa de absorcin es igual a la energa de emisin. El electrn
emite con la misma energa que absorbi llegando exactamente al nivel de partida. Desde este
mismo punto de corte o transicin 0-0 hasta cada uno de los mximos de los espectros, nos dar
la prdida energtica que se produce por procesos no-radiativos en cada transicin de absorcin
o de emisin, a esto se llama prdida de Stokes y es una medida del cambio en la geometra
entre las configuraciones de equilibrio de los estados entre los que tiene lugar la transicin.
Cuando las lneas de emisin son muy afiladas, esto se puede interpretar como representativo
del hecho de que los centros estn particularmente bien protegidos (o apantallados) de la red que
los rodea. En el caso de que las lneas se ensanchen como ocurre en nuestro ejemplo, esto se
debe a que el apantallamiento solo es parcialmente efectivo.
La emisin depende por tanto de la manera en que los activadores y coactivadores de los centros
activos se sitan en la red cristalina y de la interaccin de estos con cualquier otra
imperfecciones presentes en el material.
Por regla general, en un proceso luminiscente siempre existe una cierta prdida energtica que
se cede a la red en forma vibracional (trmica), incluso en procesos con eficiencia luminiscente
100%.
Que la eficiencia luminiscente sea del 100% no quiere decir que no haya desplazamiento de
Stokes:
lum = (n de fotones emitidos) / (n de fotones absorbidos) =1
n de fotones emitidos = n de fotones absorbidos
Tenemos igual nmero de fotones absorbidos que emitidos, pero en cada caso, tendrn energas
diferentes en general, produciendo el mencionado corrimiento del espectro de emisin hacia
longitudes de onda mayores (menores energas).
Es por esto, que se define la eficiencia luminiscente en trmino del nmero de fotones emitidos
y absorbidos (intensidades) y no en trminos de energas.

El desplazamiento de Stokes puede considerarse como un buen indicativo del nivel de

interaccin entre los centros luminiscentes y la red. As, en el caso de centros poco acoplados a
la red (distancia d grande) el desplazamiento es pequeo, producindose las absorciones y
emisiones a energas muy parecidas (por ejemplo: Tierras raras), mientras que en el caso de
interacciones fuertes el desplazamiento de Stokes puede ser muy grande (ejemplo: Centros de
color FA, con absorciones en el visible y emisiones en el infrarojo).
Finalmente, diremos que la luminiscencia es una tcnica de muy alta sensibilidad. Al igual que
los espectrofotmetros, acoplar un tratamiento digital de la seal permite una elaboracin ms
sofisticada de los espectro y obtener sus derivadas sucesivas, as como la acumulacin de
espectros con el fin de mejorar la relacin seal-ruido.

Relacin entre Ifluo y concentracin

n Fotones Emitidos
I||=
n Fotones absorbidos
I
= f

Iabs=Po-P

If=k(Po-P)= k Po(1-P/Po)

P
T= =10bC
Po

P
1 =110bC
Po

f =k Po (1-10-bC) 110bC= Serie Mac Laren =1-e-2.3bC

Para C bajas solo se toma primer miembro del desarrollo

f=k Po.2.3 b C

La no linealidad a concentraciones altas. Es debido a fenmenos de:

1. Autoatenuacin. ( del choque entre molculas excitadas, al aumentar la concentracin,

aumentar la probabilidad de que se produzcan colisiones)
2. Autoabsorcin. la fluorescencia de una molcula es absorbida por otra molcula del mismo
soluto
Ejemplo de reaccin de la quimioluminiscencia para la reaccin del sulfuro
de di metilodeasd

A + B > X*
X* > X + h

Aplicacin quimioluminiscencia

O3 + C2H4 C2H2O*
C2H2O* C2H2O + h1
SO2 + h1 SO2*
SO2* SO2 + h2
 h 1 > h2

Bibliografa

http://clickmica.fundaciondescubre.es/recursos/unidades-didacticas/33-unidades-
didacticas/255-reacciones-luminiscentes
http://www.google.com/url?
sa=t&rct=j&q&esrc=s&source=web&cd=5&sqi=2&ved=0CDMQFjAE&url=http
%3A%2F%2Fbiblioteca.uns.edu.pe%2Fsaladocentes%2Farchivoz%2Fcurzoz
%2Fespectroscopia_luminiscente.doc&ei=ZYqcVeWdNIy5-
QGMpo2IDA&usg=AFQjCNEfbph6rrBrOcHEzpCvyj9ClsPy9Q&sig2=hOx82cbZL
SHxImYQEAQntA&bvm=bv.96952980%2Cd.cWw
https://www.uam.es/personal_pdi/ciencias/lhh345a/Luminiscecia.pdf