Sunteți pe pagina 1din 42

MTODOS DE ESTUDIO DE LAS

ENTEROPARASITOSIS
IMPORTANCIA

Diagnstico de enteroparasitosis sintomticas,


asintomticas.
Diagnstico diferencial de infecciones entricas.
Diagnstico diferencial con otras patologas del
aparato digestivo.
Tratamiento especfico.
Valoracin de respuesta al tratamiento.
Prevencin.
DIAGNSTICO
DE ENTEROPARASITOSIS

ETAPAS DEL DIAGNSTICO

Pre-analtica
Analtica
Post-analtica
DIAGNSTICO DE
ENTEROPARASITOSIS
MTODOS DIRECTOS:
Coproparasitario

Coloraciones

Mtodo de Graham - Esptula adhesiva

Sondeo Duodenal

Biopsia duodenal

Coproantgenos

MTODOS INDIRECTOS:
En suero: anticuerpos sricos

Amibiasis invasiva, estrongiloidiasis,fasciolosis,esquistosomiasis, etc


ETAPA PRE-ANALTICA
ETAPA PRE-ANALTICA

Indicaciones del examen parasitario

Pacientes con sintomatologa sugestiva; pacientes asintomticos con


antecedentes epidemiolgicos relevantes; control o control post-
tratamiento

Solicitud del examen parasitario

Datos filiatorios del paciente

Datos clnicos (sntomas y signos, diagnstico clnico presuntivo)

Antecedentes personales: inmunosupresin, viajes al exterior

Antecedentes familiares

Antecedentes ambientales (agua potable, saneamiento)

Tratamientos previos anti diarreicos, antiparasitarios, antibiticos etc.


ETAPA PRE-ANALTICA

Indicacin de Rgimen alimentario

48 a 72 hs antes de realizarse el estudio (libre de frutas,


verduras y grasas dado que estas preparaciones obstaculizan
la visualizacin microscpica lo que puede conducir a
resultados Falsos Negativos o Falsos Positivos).

Necesario?

Emisin

Espontanea.

No en periodo menstrual, ni posterior a realizacin de


estudio radiolgico con bario.
ETAPA PRE-ANALTICA

Muestra de materia fecal

Aproximadamente 50 grs (tamao de una nuez) si heces formadas


o 10 a 15 ml si heces lquidas.

Rotular adecuadamente.

En recipiente de boca ancha, transparente y con tapa de rosca.

Emitidas recientemente o conservadas en heladera hasta 24 horas.

Evitar contaminacin con orina para evitar deterioro de los


parsitos.
ETAPA ANALTICA
COPROPARASITARIO
DEFINICIN
Conjunto de tcnicas diagnsticas complementarias que
permiten la identificacin de la mayora de las enteroparasitosis
causadas por protozoarios y helmintos intestinales o de aquellos
que si bien tienen una localizacin tesidual sus huevos se
eliminan en las materias fecales.
Se debe tener en cuenta a la hora de su indicacin que esta
metodologa es til para protozoarios y helmintos cuyas formas
evolutivas se eliminan con las materias fecales:
Trofozotos
Quistes
Ooquistes
Huevos
Larvas
Adultos
EXAMEN COPROPARASITARIO
SERIADO

Se considera que muestras nicas solo permiten un diagnstico positivo en


un 40%-60% aprox. de las materias fecales con parsitos (ciclos de los
parsitos alternan perodos negativos de eliminacin de quistes) *

Existen diferentes esquemas sobre la secuencia de recoleccin de materia


fecal para realizar el examen coproparasitario. Los ms usados son:

3 muestras seriadas en das alternos

3 muestras separadas por intervalos de una semana entre si

* Manual de Toma de muestras para estudio Bacteriolgico y Micolgico.

Departamento de Laboratorio Clnico. Hospital de Clnicas. 2004


EXAMEN MACROSCPICO

Consistencia: moldeada, pastosa, semilquida, inhomognea


Color: marrn, amarillo, macilla, negruzco, verdoso
Olor: sui generis, ftido, butrico
Presencia de elementos anormales: sangre, mucus, pus
Presencia de seudoparsitos
Bsqueda de parsitos macroscpicos
EXAMEN MACROSCPICO
EXAMEN MACROSCPICO

En el caso de hallar progltides de Taenia:


Dejar en agua destilada durante 24hs
Colocar el segmento sobre un recuadro de papel
Comprimir entre dos lminas
Observar las ramificaciones del tero
Tambin se pueden teir con Carmn Clorhdrico
EXAMEN MICROSCPICO

Examen directo de una pequea porcin de heces frescas

Examen despus de aplicar un mtodo de concentracin

Examen de frotis o preparaciones permanentes

EXAMEN DIRECTO

Suero Fisiolgico

Lugol
Objetivo 10 x
Objetivo 25-40 x
Habitualmente no se emplea objetivo de inmersin
Importante: No diluir demasiado las muestras
EXAMEN MICROSCPICO

DIRECTO EN FRESCO CON SUERO FISIOLGICO Y LUGOL


Inconvenientes:
Escaso material, por lo que es necesario la realizacin de tcnicas
de Enriquecimiento o Concentracin (Ritchie, Faust, Sheater)

Ventajas:
Movilidad de trofozotos, clulas intestinales, clulas inflamatorias,
mala absorcin.
MTODOS DE ENRIQUECIMIENTO
O CONCENTRACIN

Aumentan el nmero de parsitos a partir de un volumen conocido.

Procedimientos por
Sedimentacin
Procedimientos por Flotacin

Procedimientos Biolgicos
TCNICAS DE ENRIQUECIMIENTO
O CONCENTRACIN
MTODOS FSICOS

o Dilucin minuciosa de heces en lquido o solucin de densidad:

o Inferior a la de los parsitos (Tcnicas de sedimentacin)


o Superior a la de los parsitos (Tcnicas de flotacin)

o Ventajas:
o Realizacin muy simple
o Precisan poco material

o Inconvenientes:
o Procesos largos
o Exigen mucha manipulacin
o No aplicables a series grandes de muestras
MTODOS FSICOS

SEDIMENTACIN SEDIMENTACIN -
SIMPLE CENTRIFUGACIN
Espontanea Ritchie (formol-ter)
Telemann (ter-
cido clorhdrico)
Carles y Barthlmy
(ter-cido ctrico)
TCNICAS DE ENRIQUECIMIENTO
POR SEDIMENTACIN
Basados en la utilizacin de suero fisiolgico (SF) y otras soluciones de
baja densidad.

Se recuperan huevos, larvas, ooquistes y quistes del fondo de un tubo


en el que se depositan por ser ms densos.

SEDIMENTACIN SIMPLE
Lentos y poco prcticos

Mayor utilidad para huevos de trematodos

SEDIMENTACIN /CENTRIFUGACIN
Se destaca el mtodo de Ritchie (con formol y ter o acetato de etilo),
que es el ms usado en los laboratorios de nuestro medio
SEDIMENTACIN SIMPLE
o Homogeneizar 2 a 5 gr de heces (10-20 gr) en 10 ml de SF o agua.
o Colocar la dilucin en tubo cnico de 50 ml, filtrando a travs de gasa.
o Completar el volumen con SF o agua de la canilla.
o Agitar y dejar reposar por 45 minutos.
o Desechar sobrenadante.
o Resuspender con SF o agua de la canilla.
o Dejar sedimentar 45 minutos.
o Desechar sobrenadante.
o Repetir esta operacin varias veces, hasta que el sobrenadante quede
transparente.
o Tomar con pipeta el material sedimentado.
o Hacer tres tomas:
o Superficie
o Media altura
o Fondo Sensibilidad 55%
MTODO DE RITCHIE
SEDIMENTACIN-CENTRIFUGACIN
o Homogeneizar materia fecal con SF (aprox. 25 ml).
o Filtrar suspensin por embudo con triple gasa a tubo de centrfuga de fondo
cnico.
o Centrifugar a 2300 rpm por 1 min, descartar sobrenadante, resuspender con SF
y agitar con varilla de vidrio.
o Centrifugar nuevamente a 2300 rpm por 1 min, repitiendo hasta 3 veces o hasta
obtener un sobrenadante lmpido.
o Agregar al sedimento obtenido 3 a 5 ml de formol al 10%, homogeneizando con
varilla o pipeta Pasteur.
o Dejar reposar por 5 min con fines de fijacin.
o Agregar 1 ml de ter o acetato de etilo, agitar vigorosamente el tubo tapado
para extraer las grasas.
o Centrifugar tubo a 1500 rpm durante 2 min.
o Descartar sobrenadante y limpiar la boca del tubo con hisopo de algodn.
o Tomar con pipeta el sedimento obtenido .
o Depositar sobre lamina y laminilla con SF y lugol parasitolgico.
MTODO DE RITCHIE

ter
Restos vegetales y
grasa

Formol 10%

Sedimento (Parsitos)
KITS COMERCIALES DE
SEDIMENTACIN - CENTRIFUGACIN

Aspectos comunes Diferencias

Unidades de Tubos
filtracin Con o sin
Limpios conservantes
Bioseguridad Con o sin
surfactante
Cucharitas
Hisopos
Bolsas
FECAL PARASITE CONCENTRATOR
JUMBO EVERGREEN

Remplaza embudo y gasa.


Los orificios del filtro permiten pasar larvas, huevos, quistes y retienen la mayor
parte de los desechos fecales.
Surfactante Tritn x-100, disuelve y disgrega las heces y el mucus.
TCNICAS DE
ENRIQUECIMIENTO POR
FLOTACIN
FLOTACIN -
FLOTACIN SIMPLE
CENTRIFUGACIN
Bass Faust (Sulfato de Zinc)
Sheater modificado
(azcar). Para
coccidios
Bailinger (ter y
Sulfato de Zinc)
Quinn (Sulfato de
Magnesio)
TCNICAS DE CONCENTRACIN
FLOTACIN
Los elementos parasitarios se recogen de la superficie de un
lquido denso al cual ascienden por su menor peso
especfico. Pelcula
superficial
Caractersticas a considerar:
Densidad solucin empleada, densidad de parsitos,
concentracin en superficie.
Importante:
Manipular rpidamente
Posible alteracin en la morfologa
de los huevos
Sulfato Zinc

Sedimento
MTODO DE BAERMANN
TCNICAS BIOLGICAS DE
CONCENTRACIN

Basados en el conocimiento
del ciclo vital del parsito

MTODO DE BAERMANN
Apropiado para el diagnstico de
Estrongiloidiasis (aprovechando la
termofilia e hidrofilia de las larvas
de Strongyloides stercoralis)
MTODO HARADA - MORI
TCNICAS BIOLGICAS DE
CONCENTRACIN

Busca embrionar huevos de


trematodes y cestodes.

Larvas de nematodes.

Strongyloides stercoralis
TCNICAS PARA RECUENTO
DE HUEVOS

Intensidad de infeccin de helmintos transmitidos por el suelo.


Cuantifican el nmero de huevos por gramo de materia fecal.

Recuento en placa microscpica.


Tcnica de Kato Katz.
COLORACIONES

Coloraciones temporarias
Lugol, Negro de Clorazol, Azul de Tionina

Coloraciones permanentes (Frotis)


Ziehl Neelsen modificado o Kinyoun para diagnstico de
coccidiosis intestinales (Criptosporidiosis, Isosporosis,
Ciclosporosis)
Hematoxilina Frrica para amibiasis

Tricrmica y Gram Cromotrope para microsporidiosis


COLORACIN DE KINYOUN
ZIEHL NEELSEN MODIFICADO EN FRO
PARA COCCIDIOS INTESTINALES
Fijacin frotis: Metanol por 30 seg

Tincin: 5 min (fro) con solucin de Fucsina bsica


Fucsina bsica 4 g
Fenol 8 g
Etanol (95%) 90 ml
Agua destilada 100 ml

Lavado
Etanol 50%: 3-5 min
Agua corriente

Decoloracin: cido sulfrico 1% por 2 min

Contracoloracin: Verde de Malaquita o Azul de Metileno por 1-2 min


OTROS EXAMENES DIRECTOS
PARA DIAGNSTICO DE
ENTEROPARASITOSIS
EXAMEN DIRECTO DE LQUIDO DUODENAL
o Se obtiene por sondeo duodenal o con cpsula entrica o test del cordn o
Enterotest
o Observacin

o Fresco (directo o tras centrifugacin)

o Frotis coloreados

o Utilidad / Rendimiento
o Trofozotos de Giardia lamblia
o Ooquistes de Isospora y Cryptosporidium
o Huevos de Fasciola hepatica
o Larvas de Strongyloides stercoralis
ELEMENTOS NO PARASITARIOS
EN LAS HECES
o Restos alimenticios semi-digeridos

o Clulas epiteliales (mucosa intestinal)

o Clulas sanguneas
Leucocitos (lceras intestinales)
Macrfagos amebas patgenas
Hemates

o Bacterias

o Hongos
ELEMENTOS NO PARASITARIOS
EN LAS HECES
Restos alimenticios
o Tejido conjuntivo
o Fibras musculares estriadas (carne)
o Grasas neutras Glbulos refringentes tamao variable
o cidos grasos Agujas finas
o Almidn
o Crudo: Granos en capas concntricas
o Clulas reserva amilcea
o Celulosa
o Digerible: Masas celulsicas (clulas reserva)
o No digerible: Traqueadas, pelos vegetales, polen etc.
ELEMENTOS NO PARASITARIOS
EN LAS HECES

Cristales
o Origen alimentario (oxalato de calcio)
o Endgeno:
o Oxalato de calcio
o Fosfato amnico-magnsico
o de Charcot-Leyden
o Medicamentos
MTODO DE ESPTULA ADHESIVA
TCNICA DE GRAHAM
o Oxiurosis o Enterobiosis (Enterobius vermicularis)
o Observacin microscpica del material recogido de la zona
perianal, por aplicacin de una superficie adhesiva

o La cinta se dispone sobre un soporte rgido, con la superficie adhesiva hacia el


exterior

o Se aplica varias veces sobre la piel de la regin perianal sin introducir en el


recto

o Se enva al laboratorio y se observa al microscopio (10X)

IMPORTANTE
o Realizar la toma de muestra a 1 hora por la maana, antes de
levantarse de la cama, durante 3 maanas consecutivas
MTODO DE GRAHAM
DIAGNSTICO OXIUROSIS
ETAPA POST-ANALTICA
ETAPA POST-ANALTICA

Validacin
Informe de resultados
Importancia de relacin con el mdico
clnico
Observaciones, orientaciones y sugerencias
METODOLOGA
COLORACIONES MACROSCPICO
Ziehl Neelsen Nematodes
Tricrmica Platelmintos
H. frrica

ENRIQUECIMIENTO COPROPARASITARIO COPROANTGENOS

Quistes de patgenos: G. lamblia


Primarios Crypto. spp
Oportunistas E. histolytica
Discutidos
EXAMEN DIRECTO
Huevos
Larvas Trofozotos
B. hominis

ESPTULA ADHESIVA
ORIENTACIN CLNICA
EOSINOFILIAS: CPs+EA

DOLOR ABDOMINAL:
CPs+EA SNTOMAS
INESPECFICOS: CP+EA

CUADROS CLNICOS DIARREA CRNICA


DIARREA DEL
VINCULADOS A CON MALABSORCIN:
ADULTO: CP
ENTEROPARASITOSIS CPs+CAg

DIARREA AGUDA
DIARREA DEL
INFANTIL,DIARREA
VIAJERO: CP+ZN
PROLONGADA: CP+ZN

INMUNODEPRIMIDOS
CON DIARREA:
CPs+ZN+TRIC+CAg+CA
cp

S-ar putea să vă placă și