Sunteți pe pagina 1din 8

61.

Genul Candida
61. 1. Generaliti

Genul cuprinde peste 81 de specii, din care 7 sunt sigur implicate n patologia
uman. Fac parte din levuri. Candida albicans produce pseudomicelii att n culturi,
ct i n produse patologice sau la nivel tisular.

61. 2. 1. Habitat

Speciile de Candida pot fi izolate de la omul sntos, spre exemplu de la nivelul


tractului respirator superior, digestiv i de la nivel vaginal. n aceste zone echilibrul
ntre microorganism i gazd poate fi modificat, situaie n care pot aprea o serie de
aspecte patologice. Mai rar (de obicei la persoane a cror aprare antiinfecioas
este deficitar) pot rezulta diseminri hematologice (fungemie) i diferite infecii de
tipul tromboflebitei, endocarditei, infeciilor oculare sau la nivelul altor organe.

61. 2. 2. Caractere morfotinctoriale

n frotiurile realizate din produse patologice, Candida albicansapare ca o levur


ovalar, Gram-pozitiv, cu dimensiuni de 2-3/4-6 m, cu posibilitatea apariiei unor
pseudohife.

61. 2. 3. Caractere de cultur

Pe mediul de cultur Sabouraud, incubate la temperatura camerei sau la 37C, apar


colonii de tip S, cu o consisten cremoas i cu un miros relativ caracteristic.

Produc colonii de tip S, rotunde, bombate, netede, asemntoare cu unele


colonii bacteriene dar cu dimensiuni mai mari. Coloniile apar n 1-4 zile, au
o culoare alb sau alb-glbuie i consisten cremoas. n timp suprafaa
coloniilor capt un aspect zbrcit.
61. 2. 4. Caractere biochimice

Candida albicans fermenteaz glucoza i maltoza cu producere de acid i de gaz.


Produce acid din sucroz i este lactoz-negativ. Fermentarea carbohidrailor
permite diferenierea C. albicans de alte specii de Candida.

61. 2. 5. Structur antigenic

n structura corpului celular al speciilor de Candida exist antigene zaharidice care


permit mprirea genului n dou grupe (A i B). Extrasele antigenice utilizate n
testele serologice i respectiv imunobiologice constau de fapt din mai multe structuri
antigenice nedifereniate. Anticorpii care apar fa de aceste structuri antigenice pot
fi identificai prin reacii de precipitare, imunodifuzie, contraimunoelectroforez sau
latex aglutinare.

61. 2. 6. Rspuns imun

S-a reuit experimental imunizarea unor animale de laborator care devin rezistente
fa de o eventual candidoz sistemic. n cazul omului, se poate afirma
deocamdat doar c mecanismul imun este complex i n curs de elucidare.

61. 2. 7. Caractere de patogenitate

Factorii de patogenitate ai C. albicans sunt reprezentai de anumite enzime, spre


exemplu proteinaze, hidrolaze, esteraze, ribonucleaze i de anumite substane care
inhib rspunsul imun (spre exemplu mananul, care s-a dovedit c inhib
proliferarea limfocitelor T).

61. 3. Patogenie i patologie specific. Principalele afeciuni produse

Este necesar de subliniat c n apariia unei infecii diseminate cu Candida sunt


implicai n special anumii factori care in de gazda infectat, aceasta avnd anumite
deficiene n aprarea antiinfecioas.
61. 3. 1. Factorii implicai n apariia unei candidoze

Factorii care sunt implicai n apariia unei candidoze ar putea fi mprii n dou
categorii: intrinseci i extrinseci.

Factorii intrinseci mai importani sunt reprezentai de:

- vrst (nou-nscui, vrstnici);

- sarcin, ncepnd din luna a IV-a;

- endocrinopatii (diabet zaharat, insuficien suprarenalian,


insuficien tiroidian);

- hemopatii maligne;

- anemii aplazice;

- agamaglobulinemie i hipogamaglobulinemie;

- infecia cu HIV i SIDA;

- alte cauze de imunodepresie.

Factorii extrinseci mai importani sunt reprezentai de:

- antibioterapia incorect administrat, care poate conduce la dismicrobisme


i la un grad de inhibare a rspunsului imun;

- terapia antituberculoas i antiparazitar;

- terapia imunosupresiv;

- utilizarea (pe cale general) a medicamentelor anticoncepionale;

- efectuarea anumitor manopere medico-chirurgicale (cateterisme,


implante etc);

- utilizarea radiaiilor ionizante.

Speciile de Candida implicate patogenic (de exemplu Candida albicans) ader la


epitelii i mucoase (au afinitate pentru componente ale peretelui celular),
colonizeaz i se multiplic, trecnd n starea de pseudofilamente. Ulterior pot
traversa epiteliul i pot invada capilarele sanguine, ducnd la fungemie i eventual la
septicemie fungic.
61. 3. 2. Forme clinice

Formele clinice mai frecvent ntlnite sunt:

a). bucale i peribucale:

- stomatit (mucoasa bucal este eritematoas, cu depozite albicioase);

- glosit (limba este neted, depapilat sau prezint depozite albicioase, cu aspect
pros, cu urmtoarele simptome: arsuri la deglutiie, mncrime, dureri);

- amigdalit;

- cheilit (buzele sunt crpate, scuamoase, sngernde, leziunile fiind localizate la


nivelul comisurii bucale).

b). genitale:

- vaginite;

- vulvite;

- balanoprostatite;

c). cutanate i ale fanerelor:

- onixis i perionixis (dureri i tumefacii periunghiale);

- intertrigo axilar, submamar, interfesier, interdigital, cu leziuni exsudative,


eritematoase, scuame i uneori vezicule cu lichid clar sau purulent (n cazul unor
suprainfecii bacteriene).

d). generalizate:

- viscerale (bronhopneumonie, endocardit, meningit, infecii digestive, infecii


urinare);

- septicemii.

61. 4. Diagnosticul de laborator n infeciile produse de Candida albicans

Diagnosticul infeciilor fungice nu este un diagnostic facil, dar este foarte important i
ar trebui realizat de rutin, pentru c trebuie s avem n vedere c aceste afeciuni
sunt mult mai frecvente dect sunt raportate, n ara noastr.
61. 4. 1. Diagnosticul micologic

1. Recoltarea i transportul produsului patologic trebuie s se realizeze respectnd o


serie de reguli (ct mai aproape de debutul bolii, nainte ca pacientului s fi primit
antibiotice antifungice, ct mai rapid i corect din punct de vedere al tehnicilor
utilizate, respectnd toate normele de asepsie i antisepsie etc). n cazul
candidozelor superficiale, dup antiseptizarea suprafeei leziunii raclm spre ex.
tegumentul i colectm scuamele rezultate ntr-un recipient. Mai putem recolta fire
de pr, fragmente de unghie etc. n principiu putem introduce p.p. recoltat n pachet
de hrtie, introdus la rndul lui ntr-o cutie Petri. Transportul trebuie s dureze maxim
48 de ore. n cazul candidozelor profunde ca i n cazul candidozelor localizate la
nivelul mucoaselor trebuie s evitm uscarea p.p. pe parcursul transportului. Vom
utiliza recipiente care se pot nchide ermetic i dac estimm c transportul va dura
mai mult de 1-2 ore introducem n recipient un tampon de vat sau tifon umezit cu
soluie salin fiziologic. Pentru a preveni multiplicarea bacterian putem aduga
p.p. antibiotice (ex. penicilin, streptomicin, cloramfenicol). Este bine ca volumul de
p.p. recoltat s fie ct mai mare. n cazul candidozelor profunde preferm ca
recoltarea s fie urmat imediat de realizarea preparatelor microscopice i
nsmnare pe medii de cultur (la patul bolnavului).

2. Examinarea microscopic a produsului patologic se realizeaz diferit, n


funcie de p.p. prelucrat, dar face parte din orice examen micologic.

n cazul n care examinm o secreie sau un produs obinut prin raclare de la


nivel tegumentar sau fragmente de unghie vom realiza un preparat proaspt
(umed), montat n soluie de 10-30% KOH-glicerol. Putem utiliza pentru
colorare calcofluor alb, un fluorocrom care permite evidenierea levurilor
datorit faptului c au n compoziie chitin (la nivelul peretelui celular).
Elementele fungice (levuri ovoide, cu dimensiunea de
4/6 m, pseudomicelii i micelii) apar galben-verzui sau alb-albstrui n
funcie de lungimea de und a radiaiei de excitaie. Punerea n eviden a
formaiunilor menionate mai sus permite suspicionarea prezeneiCandida
spp., dar pentru confirmarea prezenei C. albicans este necesar obinerea
culturilor pure i identificarea acestora.

n cazul n care examinm secreii de la nivelul mucoaselor vom pregti att


preparate umede ct i frotiuri pe care le vom colora (Gram, AM sau Giemsa).
Pentru creterea sensibilitii examinrii preparatelor umede, acestea vor fi
colorate cu calcofluor alb sau cu lactofenol albastru cotton. Indiferent de
metoda utilizat, punerea n eviden a levurilor i pseudomiceliilor ridic o
suspiciune, ns datorit prezenei Candida spp., n flora microbian normal
(ex. bucal, vaginal etc) doar punerea n eviden a miceliilor alturi de
prezena formelor levurice (Gram pozitive la coloraia Gram) poate permite
confirmarea infeciei. Este necesar obinerea culturilor pure i identificarea
acestora. Pe de alt parte, dorim s menionm c o cultur pozitiv n
absena unui examen microscopic pozitiv ridic semne de ntrebare privind
diagnosticul infecie cu C. albicans.

n cazul candidozelor profunde, interpretarea se va face difereniat. Atunci


cnd p.p. este normal steril (recoltat prin puncie lombar, lavaj bronho-
alveolar, puncie bioptic etc), identificarea structurilor fungice (levuri,micelii)
este foarte important pentru diagnostic. Dac p.p. este reprezentat de urin,
materii fecale, sput sau alt produs potenial contaminat de flora microbian
normal, interpretarea este mai dificil n ceea ce privete semnificaia
structurilor fungice observate. Pentru examinarea p.p. recoltate de la pacieni
care prezint candidoze profunde vom realiza att preparate umede ct i
frotiuri fixate, colorate prin metodele amintite. Este posibil ca elementele
fungice s apar deformate datorit fixrii precipitatelor de colorant, pe frotiul
colorat Gram. n cazul biopsiilor tisulare am putea utiliza coloraiile
histochimice.

3. Cultivarea pe medii de cultur a produsului patologic se realizeaz n aa fel


nct s se poat obine colonii izolate i respectiv o cultur pur, care se va
identifica. Exist mai multe medii de cultur care pot fi utilizate. Cel mai cunoscut
este mediul Sabouraud (agar, glucoz sau maltoz, polipepton) produs i de
INCDMI Cantacuzino. n cazul p.p. contaminate vom folosi i medii selective, de
ex. mediul Sabouraud cu antibiotice (cloramfenicol, gentamicin i/sau tetraciclin)
i/sau mediul Sabouraud cu cicloheximid. Dorim s menionm c n cazul p.p.
necontaminate realizm cultivarea numai pe mediul Sabouraud neselectiv n timp ce
n cazul p.p. contaminate vom realiza cultivarea att pe mediul neselectiv ct i pe
mediile selective. Putem incuba plcile la 22-30 C, dar mai frecvent incubarea se
realizeaz la 28 C (sau la temperatura camerei) i la 35-37 C, timp de 24-96 ore n
cazul candidozelor superficiale i pn la maxim 3 sptmni n cazul candidozelor
profunde.

4. Identificarea microorganismului implicat patogenic se va realiza pe baza mai


multor caractere:

Caractere morfotinctoriale:

Caractere de cultur:

Caractere biochimie:
Auxanograma: Levurile prezint un anumit echipament enzimatic
cu ajutorul cruia pot s utilizeze un anumit carbohidrat ca unic surs de
carbon. Dezvoltarea pe un mediu n care este inclus un singur carbohidrat
demonstreaz utilizarea acestuia ca unic surs de carbon. n mod
asemntor se poate testa capacitatea asimilrii unor substane
azotate. C. albicans asimileaz glucoz, maltoz, trehaloz, galactoz etc.

Zimograma: Testarea fermentrii unor carbohidrai

Utilizarea unor teste produse comercial precum API 20C, API 32C, Vitek
etc

Caractere antigenice:

Se pot utiliza reacia de aglutinare pe lam, reacia de latex-aglutinare sau


ELISA folosind antiseruri cunoscute. Ultimele dou tehnici sunt folosite i
n scopul identificrii prezenei Ag de Candida spp. n diferite p.p.

5. Antifungigrama (verificarea sensibilitii la antibiotice i chimioterapice n


vederea stabilirii tratamentului) a fost pus la punct relativ recent. Eforturile depuse
n vederea standardizrii acestei tehnici au avut la baz creterea interesului fa de
infeciile fungice precum i apariia fenomenului de rezisten la medicamentele
antifungice a tulpinilor izolate. Metoda recomandat de NCCLS este cea a diluiilor n
bulion.

61. 4. 2. Diagnosticul imunologic poate fi serologic i imunobiologic

Diagnosticul serologic

Cu toate c o serie de autori consider drept nerelevant acest tip de diagnostic,


diferite studii arat c identificarea i titrarea Ac anti-C. albicans poate fi util n
diagnosticul candidozelor profunde. Iniial au fost utilizate tehnici de aglutinare
pentru detectarea prezenei Ac anti-manan. Ulterior au fost puse la punct tehnici
pentru detectarea prezenei Ac fa de Ag localizate n citoplasma C. albicans. Au
fost utilizate imunodifuzia n gel, contraimunoelectroforeza, ELISA i tehnica de
latex-aglutinare.

Diagnosticul imunobiologic

Intradermoreacia cu candidin este pozitiv la practic toate persoanele adulte, fiind


astfel util nu n diagnosticarea unei infecii cu Candida, ci n aprecierea RIC. Se mai
poate utiliza testul transformrii blastice a limfocitelor n prezena unor Ag de C.
albicans.
Trebuie s menionm c exist o serie de probleme privind standardizarea i
interpretarea tehnicilor diagnosticului imunologic. Cu toate c prin aceste modaliti
utilizate izolat nu putem pune diagnosticul de candidoz, interpretarea ansamblului
rezultatelor de laborator obinute poate fi de folos n elucidarea implicrii patogenice
a tulpinilor de Candida albicans.

61. 5. Tratament

Nistatina nu se absoarbe intestinal, astfel nct nu este eficace n infeciile


candidozice sistemice. Pot fi utile ketoconazolul sau amfotericina B. n infeciile
localizate este de preferat folosirea unor medicamente antifungice topice locale.
Trebuie reinut: cel mai bun tratament este reprezentat de eliminarea cauzei care a
predispus la infecie n cazul gazdei respective.