PRACTICA 02: HEMATOLOGIA: EL HEMOGRAMA AUTOMATIZADO, VELOCIDAD DE

SEDIMENTACION
El objetivo de la prctica es proporcionar al alumno, en base al anlisis del hemograma automatizado, las
posibilidades diagnsticas en diferentes entidades nosolgicas. Tambin se pretende que al final del curso
tiene que ser capaz relacionar el problema con la interpretacin del ensayo.

EL HEMOGRAMA AUTOMATIZADO
HISTOGRAMAS:
Los actuales autoanalizadores hematolgicos de parmetros mltiples, permiten obtener una gran
informacin para la ayuda diagnstica al clnico.
En nuestro laboratorio disponemos de un autoanalizador que estudia los diferentes parmetros por tres
mtodos independientes y en el caso de los leucocitos por doble sistema.
La tecnologa utilizada es la siguente:
-Impedancia elctrica :
Contaje total de hemates (RBC)
Contaje total de leucocitos (WIC)
Contaje total de plaquetas (PLT)
VCM y VPM.
El sistema de impedancia elctrica cuenta y detecta el tamao de los eritrocitos, plaquetas y leucocitos. Este
se basa en la deteccin de los cambios en la resistencia elctrica producidos por una partcula suspendida
en un diluyente conductor a su paso por una abertura.
-Colorimetra :
La medicin directa de hemoglobina (HGB), se realiza por el mtodo modificado de la
cianmetahemoglobina, utilizando como fuente lumnica un diodo emisor de baja energa, a 540 nm.
-MPASS (Multi Angle Polarized Scatter Separation) :
Contaje total de leucocitos (WOC)
Diferencial de 5 poblaciones (frmula)
Reticulocitos
El MPASS es un sistema de citometra de flujo y lser He/Ne.

HISTOGRAMAS:
-Parmetros eritrocitarios:
Los datos de los ertrocitos se representan sobre histogramas, en las que el nmero relativo de clulas se
indica en el eje de ordenadas y la distribucin del tamao en el de abscisas. Los resultados se
complementan con el MCV (volumen corpuscular medio), HCT (hematocrito), MCH (hemoglobina
corspuscular medio), MCHC (concentracin de hemoglobina corpuscular media) y RDW ( amplitud de
distribucin de los eritrocitos), que es una medida de la heterogeneidad de la poblacin eritrocitaria.
Una correcta utilizacin de los parmetros medidos nos permite una orientacin diagnstica de las anemias,
por ejemplo utilizando la combinacin entre los niveles del VCM (volumen corpuscular medio) y del RDW
( amplitud de distribucin eritrocitaria) .

-Parmetros plaquetarios:
Los datos de las plaquetas se representan sobre histogramas, en los que el nmero relativo de clulas se
indica sobre el eje de ordenadas y la distribucin por tamao en el de abscisas. Los resultados se
complementan con el MPV (volumen plaquetario medio), el PCT (plaquetcrito) y el PDW ( amplitud de
distribucin de las plaquetas.

-Parmetros leucocitarios:
El sistema MPASS, utiliza tcnicas de citometra de flujo y luz lser para analizar las subpoblaciones
leucocitarias. Las clulas dispersan la luz lser en ngulos diferentes, proporcionando informacin sobre el
tamao de las clulas, su estructura interna, su granularidad y su morfologa de superficie.
Se utilizan diversas combinaciones de cuatro mediciones diferentes de dispersin para clasificar las
subpoblaciones y representarlas en un histograma.
Los histogramas ms utilizados son la que combinan tamao (size) y complejidad (complexity) que nos
clasifica las cinco subpoblaciones leucocitarias y nos da las alarmas de subpoblaciones anmalas, y la que
relaciona granularidad (granularity) y lobularidad (lobularity) que nos permite la separacin de la
subpoblacin de los eosinfilos.
Fig. 9. Tecnologa M.A.P.S.S. (dispersin polarizada con mltiples ngulos) que muestra la medicin e identificacin de clulas mediante el
estudio de dispersin de la luz en cuatro ngulos diferentes
6. Tamao de GB de Glbulos Rojos y de plaquetas obsrvese la diferencia de fL de cada grfica
SERIE ROJA ERITROPOYESIS
PROERITROBLASTOS
Identificables morfolgicamente. 14 a 19 nm de dimetro. Ncleo grande, dos a ms nucleolos, Borde
basfilo del citoplasma. Cada proeritroblasto sufre una serie de divisiones para producir varios;
La basofilia se debe a la cantidad de ribosomas y polisomas.
PROERITROBLASTOS BASOFILOS.
Citoplasma basfilo. Cromatina grumosa densa. No hay nucleolos visibles. Se establece sntesis de
hemoglobina. Estos de dividen y dan una descendencia de:
ERITROBLASTOS POLICROMATOFILOS.
Son de menor tamao. De cromatina ms condensada. Desaparecen nucleolos y por lo tanto no hay mas
ribosomas. Aumenta la hemoglobina sintetizada de un modo continuo. (absorbe eosina). Es la ultima clula
que se divide en la serie eritroide.
NORMOBLASTO. (ERITROBLASTOS ORTOCROMATICOS)
Cuando la clula ha adquirido su dotacin completa de hemoglobina su citoplasma es eosinfilo con un tinte
residual azul perifrico. El ncleo es excntrico y fuertemente teido y mas pequeo. Miden de 7 a 14
micras.
ERITROCITOS POLICROMATOFILOS.
Se elimina el ncleo excntrico con una delgada pelcula de citoplasma. Los ncleos eliminados son
ingeridos y destruidos por los macrfagos. La porcin anucleada del eritrocito se libera al torrente
sanguneo. Los eritrocitos contienen pequea cantidad de material basfilo dispersados entre la
hemoglobina.
RETICULOCITOS
Los ribosomas residuales se agrupan y forman masas, que se tien de un color azul dentro del citoplasma
rosado y dan un aspecto de red.
ERITROCITOS.
Alrededor de 1.9 x1010 se eliminan en el bazo cada da. El mismo nmero de otros nuevos se produce en la
mdula.
GRANULOPOYESIS
MIELOBLASTO
La primera etapa morfolgicamente reconocible. Esta es una gran clula redondeada de 15 a 20 micras.
El reborde de su citoplasma basfilo est desprovisto de grnulos. Su ncleo esfrico es muy grande.
Fina cromatina dispersa. Posee dos o ms nucleolos prominentes.
PROMIELOCITO
Se forman grnulos azurfilos que no permiten distinguir las tres distintas variedades de promielocitos
a) Neutroflicos b) Eosinoflicos c) Basoflicos. Aparecen como clulas muy grandes. Nucleolos prominentes.
Citoplasma denso.
MIELOCITO
Implica una reduccin notable del tamao celular. Cambia el aspecto ncleo y el citoplasma.
El ncleo casi ovoide presenta una depresin ms profunda y se coloca en posicin excntrica.
Solo se la denomina mielocito cuando posee una docena de grnulos en su citoplasma.
Aparecen los grnulos especficos permiten distinguir tres tipos diferentes de mielocitos.
Mielocitos Neutroflicos
Mielocitos Eosinoflicos
Mielocitos Basoflicos.
A partir de esta etapa existe una prdida de la capacidad mittica.
METAMIELOCITO
Tiene un ncleo de forma arrionada. Tambin se pueden reconocer tres tipo independientes de
metamielocitos, de acuerdo al color de sus grnulos especficos. Con la maduracin de cada serie de
granulocitos tiene lugar una mayor disminucin del tamao celular y en nuevos cambios de la forma del
ncleo.
LEUCOCITO GRANULOCITO
La forma en banda. La forma segmentada.
FORMACION DE EOSINOFILOS
La primera etapa reconocible es el mielocito Eosinfilo. Para la etapa de metamielocito el ncleo se llega de
subdividir en dos lbulos interconectados por una fina hebra. La maduracin del eosinfilo implica la
condensacin de su cromatina.
Los grnulos lisosmicos especficos de los eosinfilos se desarrollan de la misma manera que los
lisosomas de los otros tipos celulares.
FORMACION DE BASOFILOS
El ncleo de un mielocito basfilo sufre menos cambios de los que sufre la formacin del neutrfilo.
En la etapa del metamielocito puede desarrollar encogimientos irregulares, pero generalmente se convierte
en bilobulado. La cromatina del basfilo se condensa del modo incompleto y se tie de color relativamente
claro. En contraste los grnulos especficos se tien profundamente y oscurecen al ncleo.
MONOPOYESIS
Los estudios experimentales de colonias esplnicas han revelado que la estirpe celular del monocito-
macrofago comparte con los granulocitos una clula madre comprometida comn, la clula formadora de
colonias- granulocito/macrfago (UFC-GM).
MONOBLASTO
Se ha descrito un monoblasto en las colonias de cultivo celulares, pero se las identifica con dificultad en la
mdula. Su divisin da origen a los: PROMONOCITOS. La mitad aproximadamente de los promonocitos de
la mdula proliferan rpidamente para generar monocitos no proliferantes.
MONOCITOS
Se pueden reconocer los precursores linfociticos denominados LINFOBLASTOS y PROLINFOCITOS.
En frotis medulares se pueden reconocer linfocitos pequeos que representan a sus clulas hijas.
Clulas plasmticas que representan a las clulas hijas de los linfocitos-B.
TROMBOPOYESIS
Los trombocitos y las plaquetas son elementos celulares de la sangre implicados en la proteccin contra la
prdida de sangre gracias a su participacin en la coagulacin en los puntos de lesin de los tejidos.
TROMBOPOYESIS se refiere a los fenmenos evolutivos de los rganos hematopoyticos que
corresponden a la formacin de trombocitos y plaquetas.
MEGACARIOCITOS
Son clulas verdaderamente grandes con un gran ncleo que se tie de oscuro. Est compuesto por una
serie de lbulos interconectados. Esta morfologa nuclear es consecuencia de la poliploidia. La mayora de
los megacariocitos tiene ocho veces el nmero diplode de cromosomas. Los megacariocitos poseen una
gran cantidad de citoplasma. Estas clulas producen plaquetas sanguneas las cuales son fragmentos
liberados del citoplasma que circula en la sangre perifrica.
Los megacariocitos son clulas terminales que convierten en poliploides al experimentar endoreduplicacin.
Se multiplican cromosmicamente sin que se divida el citoplasma, los cromosomas no se segregan en
ncleos separados, lo que da la formacin de un ncleo nico multilobulado y poliploide. (endomitosis). La
trombopoyetina es regulador humoral.
Existe un sistema complejo y anastomosado de membranas internas que subdividen su citoplasma en
numerosas porciones, cada una de las cuales tiene su propia membrana limtrofe.
Las porciones citoplasmticas tienen aproximadamente el tamao de una plaqueta.
Cada vescula se funde con sus vecinas.
Los megacariocitos se localizan debajo del endotelio de los senos vasculares de la mdula.
Desde este punto unas prolongaciones de los megacariocitos maduros penetran a travs del endotelio y
quedan largas porciones de su citoplasma flotando dentro de los sinusoides.
Estas estructuras a veces llamadas PROPLAQUETAS, pueden contener 1200 subunidades plaquetarias.
Se estima que un megacariocito puede producir y soltar unas 6 proplaquetas, lo que da origen a unas
8 mil plaquetas. El ncleo polimorfo rodeado por una capa residual de citoplasma est revestido por una
membrana celular intacta. No se descarta la posibilidad de que estos megacariocitos residuales puedan
reconstituir su citoplasma y producir una nueva serie de plaquetas.
LINFOPOYESIS
Aunque es en los rganos linfoides donde tiene lugar una considerable proliferacin de los linfocitos
estimulados a lo largo de toda la vida, es en la mdula sea donde se origina propiamente la estirpe celular
linfopoytica.
Los estimados a convertirse en linfocitos T abandonan la mdula y son llevados por la sangre hacia la
corteza del timo donde proliferan y adquieren sus marcadores de superficie caractersticos a medida que se
van trasladando hacia la mdula tmica. De ah son transportados hacia el bazo, donde sufren una ulterior
maduracin antes de convertirse en elementos de la poblacin recirculante de linfocitos pequeos de larga
vida.

PRUEBA DEL LAZO (fragilidad capilar)

Sinonimia: mtodo de Rumpel -Leede

Mtodo: Se coloca un esfingomanmetro en el antebrazo (como para tomar presin arterial), y se insufla a
presin media entre la mxima y la mnima del paciente, dejndolo durante 5 minutos. Pocos minutos
despus de quitar la presin, se cuenta el nmero de petequias en el antebrazo e incluso en el dorso de la
mano.
Se debe revisar si el antebrazo escogido contiene petequias o manchas que puedan confundirse con las
que aparecen por la compresin.
Se lee con buena luz el sitio examinado y se cuentan las petequias formadas.
Valor de referencia: Se considera prueba positiva a ms de 10 petequias en la regin del antebrazo, por
debajo del pliegue del codo.
Se informa por cruces. La positividad del test puede graduarse entre 1 y 4 cruces cuanto ms distal es el
sitio de aparicin de las petequias mayor es el valor de positividad de la prueba.
Una cruz: pocas petequias en la cara anterior del antebrazo
Dos cruces: muchas petequias sobre la superficie anterior del antebrazo.
Tres cruces: muchas petequias sobre todo el antebrazo y mano.
Cuatro cruces: petequias de gran tamao y confluentes en todo el antebrazo.
Significado clnico:
La pared vascular, normalmente, no permite extravasacin alguna de sangre, sin embargo, en algunas
circunstancias anormales, tales como desnutricin, carencias, intoxicaciones, desarreglos hormonales, se
puede presentar una fragilidad del endotelio capilar o pared vascular que permite una salida anormal de la
sangre hacia los tejidos circundantes, lo cual se traduce por la aparicin de petequias.
La fragilidad vascular se puede estudiar aumentando la presin sangunea intracapilar, por obstruccin del
retorno venoso o disminuyendo la presin extracapilar, por aplicacin de una presin negativa sobre la piel
(ventosa).
El nmero de petequias obtenido (extravasacin sangunea) est relacionado a la presin capilar alterada y
a la fragilidad capilar. La fragilidad capilar depende del estado de elasticidad de la pared capilar.
Se debe tener en cuenta que es una prueba poco especfica. Normalmente la extravasacin de sangre no
se evidencia externamente porque las plaquetas forman un tapn hemosttico. Si hay disfuncin plaquetaria
aumenta el nmero de petequias.
Utilidad clnica:
Evaluacin de la fragilidad capilar y permeabilidad vascular y evaluacin de la funcin plaquetaria.
Variables preanalticas:
Aumentado:
Antes o inmediatamente despus de la menstruacin.
En la menopausia.
Variables por enfermedad:
Aumentado:
Se encuentra aumentada en fragilidad vascular, en trombocitopenias, dficit de vitamina C, anormalidades
vasculares hereditarias, reacciones vasculares txicas. Se encuentra positiva en trombocitopatas, prpuras
vasculares, fragilidad capilar y permeabilidad vascular aumentada.
Variables por drogas:
Aumentado:
Se encuentra aumentada la fragilidad capilar por uso prolongado de esteroides, posiblemente debido a
prdida de tejido subcutneo.
Disminuido:
Los estrgenos y la cortisona mejoran la resistencia capilar.

Es prueba para la evaluacion del DENGUE hemorragico

Hay cuatro criteriostodos los cuales se deben reunir para satisfacer la definicin de casoque fueron
establecidos inicialmente por un grupo de trabajo de la Organizacin Mundial de la Salud para notificar de
un caso de DH. Estos criterios, tal como los enuncia actualmente la Organizacin Mundial de la Salud, son:

1. Fiebre, o historia reciente de fiebre aguda;

2. Manifestaciones hemorrgicas;
3. Bajo recuento de plaquetas (100.000/mm3 o menos);
4. Evidencia objetiva de aumento de la permeabilidad capilar, tal como se refleja por uno o ms de los
siguientes hallazgos: -Prueba de lazo positiva
HOSPITAL NACIONAL HIPOLITO DEPARTAMENTO DE PATOLOGIA CLINICA LABORATORIO
UNANUE DE HEMATOLOGA
TITULO VELOCIDAD DE SEDIMENTACIN GLOBULAR
POE N REVISION FECHA DE REVISION 15 FECHA DE APLICACIN PAGINA 1
HEM010 N 01 -11 -2010 22 -11 -2010 DE 1
OBJETIVO Evaluar la velocidad con que sedimentan los eritrocitos por el mtodo de Wintrobe.
ALCANCE Hematologa central. Emergencia, hematologa clnica
MUESTRA Sangre total anticoagulada con EDTA
MATERIALES Y Agujas descartables, tubo al vaco con EDTA, algodn y alcohol, tubos de
EQUIPOS Wintrobe, pipetas pasteur, Reloj cronmetro, soporte de tubos.
PROCEDIMIENTOS
1 Colectar sangre perifrica con la aguja y tubo al vaco con EDTA, previa desinfeccin con
algodn y alcohol.
2 Colocar sangre total homogenizada en tubo de wintrobe hasta el 0 sin burbujas.
3 Colocar el tubo en el soporte de manera que quede en posicin vertical.
4 Reposar por 60 minutos y leer el descenso de los hemates en la columna
5 Interpretar el resultado de inmediato

NOTAS a) Valores referenciales: < de 50 aos: 0 a 20 mm/hora,

> de 50 aos:0 a 30 mm/hora.
b) Aumento de VSG: LES, TBC, Artritis Reumatoideo, aumento de
inmunoglobulinas, mieloma mltiples, macroglobulinemias, linfomas,
mononucleosis infecciosa, etc.
c) Disminucin de la VSG: Policitemia vera, anemia drepanoctica, algunas formas
de Macroglobulinemias (Sndrome de Hiperviscocidad).