Clase 4: Osmosis, Osmolaridad

y Presin Osmtica
Objetivo de la clase de hoy: Comprender los conceptos de osmosis,
osmolaridad y presin osmtica.
Se hablar del movimiento del solvente, no de los solutos a travs de la
membrana, y las consecuencias que trae eso a las clulas, tejidos y cuerpo
completo.

Osmosis

Caso especial de difusin (movimiento

pasivo) donde el solvente se mueve en
funcin de la concentracin de solutos.
En sistemas biolgicos la osmosis es el
flujo de agua (difusin del agua)
desde soluciones de baja concentracin
de soluto a soluciones con mayor
concentracin de soluto.
Difunde libremente a travs de la
membrana, pese a que hay aquaporina
que facilitan el transporte. El componente
resistivo es muy bajo.

Flujo de agua: el componente resistivo tiende a cero y se mueve de acuerdo a

las gradientes del soluto, pero como se habla del movimiento del solvente, el
agua se mueve desde donde hay MENOR concentracin de solutos hacia donde
hay mayor concentracin de solutos.

Si se tiene una palangana con una membrana con un soluto cualquiera, si la

membrana es permeable al soluto, se espera que se mueva el soluto al
compartimiento donde est menos concentrado hasta que se igualen las
concentraciones.
Si la membrana es permeable al agua, al solvente y no a los solutos, lo que uno
espera ver es un flujo neto de agua al compartimento donde hay ms
solutos.
En la imagen se muestra un experimento
con diferentes concentraciones de soluto, y
se observa que el compartimento con
mayor concentracin de soluto aumenta su
volumen, y la nica explicacin de eso es
un flujo neto de agua hacia donde hay ms
soluto.

La direccin de la osmosis est

determinada por la concentracin de
solutos a ambos lado de la membrana.
Hipertnica ms soluto, menos agua.
Hipotnica menos soluto, ms agua.
Isotnica - igual soluto, igual agua.

Cuando se habla de la TONICIDAD de las soluciones, siempre es relativo a otra.

El tono est dado por los solutos, por lo tanto, es sinnimo a osmtico.
Entonces cuando se dice que la solucin es hipotnica es que tiene poco soluto
a la cual la estamos comparando, y tambin se puede decir que es
hipoosmtica.
En general, cuando se habla de hipotnico o hipertnico, se refiere a la
solucin y al efecto que produce la solucin en el volumen del otro
compartimento (volumen celular)
Un suero hipotnico, por defecto, sin decir nada ms, se refiere a la tonicidad
fisiolgica que est dada por el nmero de solutos.
El tono de la solucin est dada por la presin hidrosttica por un lado
y la presin de los solutos en el contenedor, y esto se puede medir
como OSMOLARIDAD.

La Osmolaridad fisiolgica del plasma y de la clula es de 280-300

miliOsmoles/Litro.

Presin Osmtica: La presin que hay que ejercer sobre una solucin para
evitar la entrada de agua a travs de la membrana es la presin osmtica de
la solucin.

La direccin del flujo neto

de agua est dado por el
gradiente de soluto, y
siempre va desde la
solucin hipoosmtica
hacia donde estn ms
concentrados los solutos.
Si el contenedor est
abierto, se genera un
aumento del volumen del
compartimento.
Si el contenedor est
cerrado (volumen
constante) hay un
aumento de la presin porque empieza a entrar ms agua (si se pone una
tapa).

La presin empieza a subir, hasta que queda fija porque no hay ms entrada de
agua. Y esa presin que impide el flujo de agua hacia el otro compartimiento es
lo que se denomina presin osmtica y est determinada por los solutos
presentes.

En los barmetros se habla de presin en mm de mercurio, porque se observa

un aumento en columnas, cuando se tiene un compartimento hipertnico con
una membrana permeable en la cual entra el agua y aumenta la columna.

La presin osmtica se puede cuantificar a travs de la ecuacin de vant Hoff.

Esta ecuacin permite determinar la
presin osmtica en uno de los
compartimentos.
Esta ecuacin dice que la presin
osmtica es proporcional a la
osmolaridad (cantidad de solutos
presente). R es la constante de gases
ideales y T es temperatura (que se puede
hacer constante). Mientras ms solutos
hayan, mayor es la presin osmtica.

La presin osmtica del lquido intracelular es de 6,7 atmsferas (es bastante

grande). Se puede determinar la presin osmtica, porque se conoce la
concentracin inica del plasma sanguneo.
La diferencia entre concentracin molar y concentracin osmtica.
La osmolaridad (o concentracin osmtica) tiene que ver con partculas activas
en el solvente. Un mol de NaCl se disocia en Na+ y Cl -, y por lo tanto, se
obtienen 2 especies que contribuyen a la presin osmtica, en contraposicin a
lo que ocurre con la glucosa que no de disocia en el agua, por ende, 1 mol de
glucosa es un osmol de glucosa.
El CaCl2 , que son 2 molculas de cloruro unido al calcio, genera 3 osmoles por
cada mol del compuesto.
Es importante entonces considerar si se disocian o no los solutos presentes en
el suero.

El suero ms sencillo es que se hace con NaCl 150 mM que genera 300 mOsm.
Pero un paciente que viene desnutrido se le agrega glucosa, entonces hay que
quitarle osmoles.
Cuando se habla de osmolaridad, lo importante es la suma total de sus
componentes, no importa la composicin en trminos del balance de agua de
la clula.
Una clula tiene 280-300 mOsm/L, la mayora est dada por el potasio y
cloruro, pero en medio externo que tiene la misma osmolaridad, pero la
mayora est dada por el sodio.
Concentracin osmtica: Nmero de partculas osmticamente activas
en el solvente

Una solucin de glucosa 300 mM es isosmtica respecto al medio intracelular.

Una solucin de NaCl 300 mM es hiperosmtica (600 mOsm/L) respecto al
medio intracelular.
Una solucin de urea 200 mM es hiposmtica (200mOsm/L) respecto al medio
intracelular

mOsm/L = 1 mol/L x n partculas/mol

En conclusin, en trminos de balance, regulacin de volumen y grado de
hidratacin de los tejidos lo que importa es la osmolaridad de las soluciones

Frente a la resaca, es conveniente toar soluciones hipotnicas, tambin

se aplica en bebs deshidratados por semanas.
Frente al ejercicio, es conveniente tomar soluciones isotnicas, debido a
la prdida de sales.
Y un ejemplo especfico en el que se pueda administrar soluciones
hipertnicas, es en el caso de intoxicaciones con agua radioactiva, caso
que se dio del terremeto en Fukushima.

m=/RT

Si la concentracin osmtica (m) se expresa en osmoles / litro, se habla de

osmolaridad.
Si la concentracin osmtica (m) se expresa en osmoles /Kg solvente,
osmolalidad.
1 osmol, se define como el peso molecular expresado en gramos de un
soluto que al disolverse en 1 litro de agua genera una presin osmtica de 25.4
atmsferas (37C).

Osmosis
Todo lo que sabe del volumen celular
se ha trabajado en eritrocitos, porque
son clulas fciles de obtener.
La tonicidad se define en funcin del
otro compartimento, que por regla
general, que ser la solucin interna
de la clula o el plasma.
-La solucin isotnica es cuando el
flujo neto de balance de agua es 0.
No hay cambios en el volumen
celular.
-Solucin Hipertnica ocurre cuando la clula disminuye el volumen
(Crenacin). El agua va hacia donde hay concentracin de solutos.
-Solucin Hipotnica ocurre cuando hay aumento del volumen celular, porque
hay una solucin intracelular con mayor concentracin de soluto y por tanto,
hay un flujo neto de agua hacia la clula, que dependiendo de la intensidad del
ambiente hipotnico, las clulas pueden incluso reventar por lisis.
200 mOsm/L es un ambiente hipotnico que genera un gran aumento del vol.
celular. Con 100mOsm/L las clulas empiezan a reventar.

Cmo se mueve el agua a travs de la membrana?

Difusin simple y difusin facilitada.
Las acuaporinas fueron descritas en 1985. El flujo era ms de lo esperado, pero
igual saturaba, lo cual predeca que haba un facilitador.
Difusin facilitada" del agua.
Predichas tericamente, descubiertas por serendipia (Premio Nobel 2003, Dr
Agre en Chicago). El 20% de las protenas que se expresan en la membrana no
tiene funcin conocida. El grupo de Dr Agre estaban buscando protenas del
tipo rh, y encontraron estas protenas que las clonaron y analizaron la
estructura primaria y la expresaron en un sistema heterlogo (sistemas
artificiales).
AQP tiene 6 segmentos TransMembrana, dos dominios especulares.
Forman tetrmeros pero cada monmero es un canal de agua funcional.
Las molculas de agua pasan en fila india a travs de un anillo de Asp-Pro-
Ala. El poro proteico que se forma es bsicamente es casi del dimetro de la
molcula de agua.
Presenta un filtro de selectividad (Arg) que impide el paso de H+, HO3- y
otras cargas.
Especies pequeas pueden difundir a travs de la AQP (glicerol, CO2, urea).
El CO2 difunde ms rpidamente hacia afuera de la clula que el oxgeno hacia
adentro, y se debe a que pueden pasar por las acuaporinas. Para saber
contribucin en una clula X de cuanto es por dif. simple y cuanto por
aquaporina, se pueden poner bloqueadores selectivos de la acuaporina, como
cationes como lantano, y solo quedar solo la difusin simple que se compara
con la difusin total. Pero en general las acuaporinas tienen mayor
contribucin.
La mutacin de AQP2 causa la diabetes inspida hereditaria.
Acuaporinas: claves en el balance hidrosalino (renal)

Regulacin por la hormona antidiurtica

El principal mecanismo antidiurtico de la ADH (vasopresina) es promover la

translocacin de AQP2 en tbulo colector del nefrn.
El tpico feedback negativo en el balance hidrosalino es que aumenta la
osmolaridad del lquido extracelular (deshidratacin), se concentran los solutos
en el plasma, en el Ncleo Supraptico del hipotlamo hay neuronas que
responden especficamente a cambios en la osmolaridad plasmtica. Si la
osmolaridad plasmtica sube por sobre los 300 mOsm/L, las neuronas se
excitan, disparan potenciales de accin y estimulan a nivel de la neurohipfisis
la secrecin de ADH, esto genera en el aumento de la reabsorcin de agua en
el rin.
La ADH circulando en el plasma se une a receptores especficos V2 o ADH2,
que a travs de un aumento de la actividad del AMPc (clsico segundo
mensajero) acta en la protein quinasa A y promueven la traslocacin de
acuaporinas que estn listas y maduras en la membrana apical del tbulo
colector y distal, y adems promueve el anclaje de acuaporinas 3 en la
membrana basal o basolateral, una traslocacin es muy rpida.
Entonces obviamente, la vasopresina aumenta el nmero de acuaporinas
presentes en la membrana, entonces el agua empieza a ser reabsorbida.

En un grfico, de un flujo de agua en

condiciones control agregando
vasopresina.
Si se agrega vasopresina, se aumenta el
nmero de aquaporinas, no hay una mayor
Km.

El 70% de nuestro cuerpo es agua. El rin al da reabsorbe 180 L de agua, es

decir, pasa todo el agua al cuerpo, y filtra y reabsorbe, filtra y reabsorbe...
El rin es uno de los rganos que ms energa le exige al cuerpo.

Demostracin experimental acerca de la relevancia de las

acuaporinas.

Se pone la clula en un medio

hipoosmtico y se espera que
aumente el volumen, y se demora
en 20 minutos en una clula sin
acuaporinas. Sin embargo, en una
clula con mensaje para que
exprese la acuaporina se hincha a
los pocos minutos.
El balance del volumen celular es
relevante tambin para el turgor tisular.

REGULACIN ISOTNICA DEL VOLUMEN CELULAR (En condiciones de reposo)

t=0 t=
Equilibrio Gibbs-Donnan: La bomba sodio potasio es la que principalmente
la que est impidiendo que la clula se siga hinchando.
Soluciones isotnicas a tiempo 0 y membrana permeable a Na+, Cl- y
H2O, pero no a protenas (P-). Las protenas son polianinicas y no permea. A
sera compartimento intracelular.
Cl- difunde hacia A, porque no hay cloruro en ese compartimiento
intracelular y hay una gran gradiente, la membrana es permeable con baja
resistencia. Se genera una diferencia de cargas entre ambos compartimentos.
El movimiento neto del Na+ es 0. EL MOVIMIENTO DE CARGA ES UNA
CORRIENTE, ENTONCES SE GENERA UNA CORRIENTE Y MS IMPORTANTE AUN
UNA DIFERENCIA DE POTENCIAL.
La electronegatividad del compartimento A promueve la difusin de Na+
desde B hacia A. Debido a un gradiente eltrico, si se mueve Na+ y cloruro, la
solucin A se torna hipertnica, y el agua empezar a mover agua.
Esta gradiente osmtica favorece el flujo de agua desde B hacia A.
Aumenta el volumen del compartimento A. El P- al ser impermeable genera
parte el desbalance elctrico, porque se va a mover el cloruro. Siempre una
solucin conductora es electroneutra, es decir, por cada carga positiva hay una
carga negativa. Por lo tanto, cuando se establece el potencial de membrana (-
70 milivolts) depende de 3 factores: fuga de potasio, actividad de la bomba
sodio potasio y las protenas intracelulares.
Las clulas estn bajo constante estrs mecnico por su tendencia a
aumentar de volumen.
La actividad electrognica de la ATPasa Na+-K+ contrarresta el efecto Gibbs-
Donnan.
A tiempo infinito, la palangana queda con una diferencia de volumen y
diferencia de potencial.
El gradiente elctrico compensa las fuerzas del gradiente qumico, entonces se
igualan: la energa asociada al gradiente qumico es igual a la energa del
gradiente elctrico (G = Gc).

Equilibrio de Gibbs-Donnan: La clula tiende a hincharse, por este fenmeno, y

es una regulacin isotnica porque ocurre en condiciones de reposo. Ej: una
clula con sus 300 mOsm que se coloca en un suero fisiolgico, tendr una
presin osmtica muy grande que tender a hincharla, y parte de la actividad
de la bomba electrognica (que saca ms sodio que el potasio que entra)
favorece que sacando sodio solvatado arrastre agua y minimice el estrs. Si se
bloquearan todas las bombas con oubaina en una concentracin mxima,
probablemente la clula reciente.
REGULACIN ANISOTNICA DEL VOLUMEN CELULAR (Cuando las soluciones
tienen diferentes concentraciones osmolares, que se puede producir por
ejemplo, por una deshidratacin).
La regulacin anisotnica est relacionada con las soluciones de distinto tono
(una es hipo o hipertnica respecto al plasma).
Ac se observa el volumen celular en una
escala relativa. Si tiene un volumen 1, a
esta clula se le baa con una solucin
hipotnica (150 mOsm/L, es decir, la mitad
de osmoles fisiolgicos), entonces la clula
se hincha rpidamente. Lo interesante es
que estando la clula todava en esta
solucin hipotnica, empieza a disminuir el
volumen al minuto y medio, debido a
mecanismo de homeostasis que tienden a
mantener el estado estacionario, es decir,
compensa la perturbacin (hinchazn). Esto
es lo que se denomina Disminucin
regulada del volumen (RVD), que
dependiendo de la intensidad del estmulo hipotnico puede volver
completamente a su valor original, o quedarse ms arriba, pero si o si la clula
compensa.
Pasa un tiempo, se deja a la clula en suero isotnico, vuelve a su valor basal,
ahora vuelve a una solucin levemente hipertnica (330 mOsm/L) y cae el
volumen celular casi en un 80-90% del valor original (es una respuesta refleja:
crenacin leve), pero despus de varios minutos recupera su valor original, y
esto se conoce como Aumento regulado del volumen (RVI).
** La respuesta a la hinchazn es ms efectiva, y se activan las corrientes
activadas por estiramiento o hinchazn, que son corrientes de potasio y
cloruro. Tambin transportadores. En el caso de una hinchazn: el estiramiento
de la membrana genera apertura de los poros (canales) y adems aumenta la
cintica de algunos co transportadores, as pueden salir iones. La capacidad
de transporte de un canal (poro) permite el paso de gradientes, por ejemplo,
para el sodio que est ms concentrado afuera, tiene un gran gradiente
electroqumico es muy grande, por lo tanto, cuando se abre un canal de sodio,
entran del orden de millones a 10 millones de iones sodio por segundo. En
cambio, el transportador no tiene esta velocidad, el ms rpido es el GLUT4,
puede mover en el rango de 10.000 molculas de azcar por segundo, que no
se compara a la velocidad de los canales.
 transportadores: 102 - 104
iones/s
canales: 106 -107 iones/s
En respuesta a un medio
hipotnico, cuando se abre un
canal de potasio, sale un montn
de potasio y agua tambin. Hay
un co-transporte K+ - Cl- que
aumenta su cintica con la
hinchazn de la membrana, y
transportan estos 2 iones y agua.
En respuesta a una solucin
hipertnica, lo que uno ve es que
se activa la bomba Na+ - H+ pero
no es electrognica, es electroneutra porque por cada Na + mueve un H+,
entonces no hay un balance positivo.
Hay canales de sodio epiteliales ENAC que se abren cuando al clula est
crenndose, por lo tanto, si la gradiente qumica y elctrica favorece el sodio,
entra soplado y arrastrando agua. Entonces la regulacin de volumen
celular por canales, son mucho ms efectivos que por
transportadores.

RVD y RVI son respuestas rpidas (min, hrs) que permiten corregir el
volumen celular al activar diversas vas de transporte pre-existentes.
La estrategia de la clula es modificar modificar su propia osmolaridad.
Entonces, la clula prefiere un estrs osmtico por sobre un estrs
hdrico.
RVD y RVI generan un desbalance en la concentracin inica intracelular. Si la
perturbacin osmtica persiste, se gatillan otros mecanismos de regulacin, se
cambia el metabolismo y se ven mecanismos que intentan volver a los valores
fisiolgicos normales.
En estado isotnico, se gasta energa tambin.
En este dibujo (respuesta a la crenacin)
En condiciones basales, el ambiente es isotnico y hay flujo 0.
En un ambiente hipertnico (450 mOsm/L) la clula se encoge por prdida de
agua y como consecuencia, la respuesta es incorporar sales y se recupera el
volumen original. Sin embargo, ahora la osmolaridad intracelular es 450
mOsm/L, es decir, 50% ms que su valor fisiolgico, y eso es un estrs para la
clula.

En respuesta a la hinchazn, se baja la osmolaridad plasmtica de 300 a 200.

Entra agua y se activan las corrientes de iones (K, Cl), y ahora la clula queda
hiposmtica respecto al estado estacionario.
Hematocrito
El hematocrito es la cantidad de glbulos rojos en la sangre.
 Una muestra de sangre, se coloca en un
tubo y se centrifuga y debido a esto
precipitan todos los elementos
figurados (95% son eritrocitos).
Del total, de un 100%, precipita el 45%
del tubo, el 45% ser el hematocrito.
En una persona sana debe estar entre
45-55%.
Si tiene menor proporcin de eritrocitos,
es indicativo de anemia.
Lo relevante es que con esta
preparacin, es ver cmo pueden
responder las clulas a cambios anisotnicos: si las clulas responden las
clulas estn sanas. Si se coloca en una relacin 1:1 sangre y un ambiente
hipotnico, entonces lo que se esperara es que los glbulos rojos deberan
ocupar ms espacio y el hematocrito debera estar ms alto, y esto no indica
CANTIDAD de eritrocitos, sino volumen.
Las personas deshidratadas pueden presentar hematocrito bajo, sin presentar
anemia necesariamente.

Qu sucede con la clula en una solucin de ?

**Hay que considerar los gradientes (solutos y agua por arastre) y las
permeabilidades.

urea 300 mM? Es isotnico, pero la urea permea en la membrana. Hay un

gradiente gigante, entra urea, y por ende, entra agua.
Cuando se coloca en 300 en 15, revienta. Sin embargo, en 350 de urea, se
demora 1 minuto en reventar porque va a salir agua porque es un ambiente
hipertnico (afuera).
glucosa 300 mM? Isotnica, no pasa nada.
NaCl 300 mM? Se crenan (600 mOsm/L) y pueden hasta morir.
glicerol 320 mM? En general, no vara la osmolaridad.
agua destilada? Se revienta completamente.
Composicin del cuerpo humano