Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Ochratoxina A
Cereale neprocesate 5 g/kg
Cereale neprocesate, destinate direct consumului uman 3 g/kg
Cereale procesate pentru copii 0,5 g/kg
Deoxinivalenol
Cereale neprocesate, altele dect gru dur, ovz i porumb 1250 g/kg
Gru dur, porumb i ovz neprocesate 1750 g/kg
Cereale i produse de mcini destinate direct consumului uman 750
g/kg
Paste finoase 750 g/kg
Pine, biscuii, snacks 500 g/kg
Cereale procesate pentru copii 200 g/kg
Produse de la mciniul porumbului cu particule > 500 m 750 g/kg
Produse de la mciniul porumbului cu particule 500 m 1250 g/kg
Zearalenon
Cereale neprocesate, altele porumb 100 g/kg
Porumb neprocesat 200 g/kg
Cereale destinate direct consumului uman 75 g/kg
Pine, biscuii, snacks 50 g/kg
Cereale procesate pentru copii 20 g/kg
Porumb neprocesat, cu excepia celui destinat procesrii umede 350
g/kg
Porumb destinat direct consumului uman, mlai 100 g/kg
Produse de la mciniul porumbului cu particule > 500 m 200 g/kg
Produse de la mciniul porumbului cu particule 500 m 300 g/kg
Aflatoxine
Cereale, produse cerealiere B1 2 g/kg;
B1+B2+G1+G2 4 g/kg
Porumb dup tratamente fizice B1 5 g/kg;
B1+B2+G1+G2 10 g/kg
Cereale procesate pentru copii B1 0,1 g/kg
Fumonisine
Porumb neprocesat, cu excepia celui destinat
procesrii umede 4000 g/kg
Porumb destinat direct consumului
uman 1000 g/kg
Produse pentru mic dejun, snacks-uri
din porumb 800 g/kg
Produse pe baz de porumb
pentru copii 200 g/kg
Mlai, germeni 1000 g/kg
Produse de la mciniul porumbului
cu particule > 500 m 1400 g/kg
Produse de la mciniul porumbului
cu particule 500 m 2000 g/kg
Tehnici rapide de determinare a micotoxinelor
ANALIZA
IMUNOLOGICA
ELISA
IMUNO
DETERMINARI
TEHNOLOGIA BAZATE PE
LUMINEX xMAP MEMBRANE
TEHNOLOGIA ANALIZA
MICROARRAY MICOTOXINE FLUORIMETRICA
POLIMERI CU
RECUNOASTERE METODA
MOLECULARA FLUOROMETRICA
TEHNOLOGIA
UNDELOR
EVANESCENTE
Monitorizarea coninutului de micotoxine (DON, ZEA, OTA) din gru i
pine cu coninut ridicat de fibre se va realiza folosind metoda imunologica
ELISA.
Testul ELISA se bazeaz pe reacia antigen-anticorp. Avantajul tehnicii
deriv din caracterul extrem de selectiv al reaciei antigen anticorp ca i
din posibilitatea de a folosi o mare varietate de marcatori fapt ce permite
sensibilizarea teoretic nelimitat a determinrii.
CLASIFICAREA TEHNICILOR
CROMATOGRAFICE
S-au realizat numeroase variante ale metodei
cromatografice, diferind unele de altele n primul rnd prin
natura fazei mobile, dar si a celei stationare. Astfel se
distinge:
a. cromatografia de lichide (LC) cnd faza mobila este un
lichid in
cadrul careia se distinge:
-cromatografia de lichide pe coloana deschisa;
-cromatografia de lichide pe coloana inchisa;
b. cromatografia de gaze (GC) cnd faza mobila este un
gaz;
c. cromatografia cu fluide supracritice la care faza
mobila este un
lichid aflat peste temperatura critica.
A. n cadrul cromatografiei in lichide (LC) se disting mai
multe variante, n functie de mecanismele de separare:
1. Cromatografia de adsorbtie utilizata pentru separarea
substantelor organice cu molecule de dimensiuni mici si
medii pe adsorbanti, ca silicagel si alumina, folosindu-se, ca
faze mobile, diferite amestecuri de solventi organici.
2. Cromatografia ionica (de schimb ionic), care se petrece
pe o faza
stationara solida, poroasa, formata din materiale specifice -
schimbatorii de ioni
- substante cu o retea solida afnata, de natura organica sau
anorganica. Cele mai raspndite sunt rasinile schimbatoare
de ioni.
3. Cromatografia de excluziune sterica se desfasoara pe
faze
stationare poroase dar cu porozitatea selectionata astfel
nct sa corespunda dimensiunilor moleculelor supuse
separarii. O parte dintre molecule intra prin pori, iar altele
sunt excluse deplasndu-se practic neretinute odata cu faza
mobila. Tehnica se mai ntlneste si sub denumirea de
filtrare prin geluri sau permeatie prin geluri n functie de
natura apoasa sau organica a fazei mobile.
4. Cromatografia lichid-lichid (LLC), n care faza
stationara este o
faza lichida, nemiscibila cu cea mobila si imobilizata pe un
suport solid, ntr-o coloana. Aici suportul solid este inert fata
de componentele din proba. Acesta tehnica este cea mai
raspndita devenind aproape sinonima cu cromatografia de
lichide.
5. Cromatografia pe coloana deschisa sau
cromatografia planara
(PC) faza mobila circula printr-un material poros dispus ntr-
un plan si formnd un strat relativ subtire, dar de compozitie
asemanatoare cu cele mentionate la cromatografia pe
coloana. Se disting:
Cromatogafia pe hrtie, tehnica n care faza stationara
este o hrtie poroasa din celuloza (initial o hrtie de filtru)
care este irigata de solvent prin forte capilare.
Cromatografia pe strat subtire (TLC), n care faza
stationara pulverulenta este fixata de suportul plan (sticla,
aluminiu, material plastic) cu un liant, formnd un strat
subtire (0.1- 0.5mm) de asemenea irigata prin capilaritate.
Cromatografia pe strat subtire de nalta performanta
(HPTLC), n care faza stationara are granulatie extrem de
fina ridicndu-se astfel eficienta separarilor dar si viteza
acestora.
B. n mod analog, n cazul cromatografiei de gaze (sau
mai pretentious cromatografiei n faza gazoasa), denumita
prescurtat GC se disting urmatoarele tehnici:
1. Cromatografia gaz-lichid n care faza stationara este un
lichid
nevolatil imobilizat pe un suport solid. Aici suportul poate fi
unul granular, poros, situat ntr-o coloana n asa-numita
cromatografie de gaze conventionala sau chiar pe peretii
coloanei, confectionata de dimensiuni capilare, n
cromatografia pe coloana capilara.
2. Cromatografia gaz-solid este analoga cu cromatografia
de adsorbtie si la cea de excluziune sterica cu deosebirea ca
schimbarea gazului nu modifica selectivitatea. Faza
stationara o constituie tot silicagelul sau alumina, respectiv
sitele moleculare (niste silicati naturali sau sintetici)
respective granulele de carbon poros. Metoda este extrem
de importanta pentru separarea gazelor permanente (CO,
CO2, O2, N2, gaze nobile etc.)
Generalitati
Cromatografia de lichide de nalta performanta (HPLC)
acopera azi, n proportie aproximativ 80%, analiza
substantelor moleculare: organice, organometalice si
anorganice inclusiv compusii foarte polari sau labili termic
precum si compusii cu masa moleculara ridicata (naturali
sau sintetici). De aceea, mpreuna cu cromatografia de gaze
constituie un punct de sprijin important n analizele chimice
moderne. Desi eficacitatea coloanelor nu o egaleaza nca pe
cea din GC, prin faptul ca se poate modifica, pe lnga faza
stationara, si faza mobila, cromatografia de lichide (LC) face
posibile separari si analize uneori
imposibil de realizat prin alte tehnici. Cuplajul cu
spectrometria de masa a transformat, n ultimul timp,
aceasta metoda n principalul mijloc de analiza a compusilor
moleculari naturali sau sintetici, constituind unul din pilonii
pe care se sprijina chimia sintetica actuala si pe care s-a
dezvoltat biochimia si biotehnologia moderna.
Injectarea in coloana
Identificare si masurare
C) Validare
1) Specificitate
- teste in diferiti solventi (polari si nepolari cel putin 5)
- lipsa interferentelor la RT
2) Partea Esentiala preparari solutii
a) liniaritate din faza mobila se prepara 8 conc. (3 la minim)
A. Tatonari
a) se prepara solutii standard n mediu apos sau solvent
preselectat:
- prepararea solutiilor de concentratii medii si mici utiliznd
substanta active si apa purificata sau solvent pur;
- se stabilesc parametri de lucru ai sistemului HPLC;
- se alege coloana cromatografica si faza mobila de lucru;
- eventual se stabileste gradientul de concentratie respectiv
etapele intermediare de spalare a coloanei cromatografice.
b) se prepara blanc-uri de solutie n vederea eliminarii
posibilelor interferente cu substantele active luate n lucru:
- se stabilesc parametri de lucru ai sistemului HPLC;
- se efectueaza studii pe coloana cromatografica si faza mobila
aleasa;
- se efectueaza studii pentru alegerea gradientului de
concentratie si a
etapelor de spalare a sistemului.
c) se dopeaza matricea cu substante active la concentratii medii
si mici:
- se stabilesc parametri de lucru ai sistemului HPLC astfel nct
semnalele
de raspuns ale substantelor active respectiv ale componentelor
de degradare sa nu se suprapuna, pentru posibilitatea evaluarii
cantitative a substantelor active dopate;
- se efectueaza studii pe coloana cromatografica si faza mobila
aleasa;
- se efectueaza studii pentru alegerea gradientului de
concentratie si a
etapelor de spalare a sistemului.
d) se stabileste profilul de actiune al substantei active:
- se stabileste daca exista substante rezultate printr-o posibila
degradare sau asociere;
- se stabileste semnalul de raspuns corespunzator fiecarei
componente
cunoscute;
- se efectueaza studii de determinare a substantelor noi aparute
n procesul de dopare (substante de asociere, degradare,
metaboliti etc), n vederea selectarii celor care prezinta interes.
B. Faza de stabilire a caracteristicilor de performan ta a
metodei
a) se efectueaza studii de stabilitate on-line pentru substantele
active, derivati respectiv standarde de lucru, n autosamplerul
sistemului HPLC, la temperatura prestabilita si la intervale de
timp de 1, 2, 3 ... 10, ...12, ...24, ...48 ore, perioada care sa fie
acoperitoare cu un exces de cel putin 30% fata de timpul maxim
stabilit pentru secventa completa.
b) se verifica liniaritatea nregistrarilor pentru 8(opt) concentratii
diferite (dintre care 3(trei) aproape de limita minima) att pentru
solutiile standard ct si pentru cele dopate cu substante active,
derivati, alte substante etalon.
C. ntocmirea protocolului de validare Pre-Study
n protocol se trec concluziile referitoare la caracteristicile si
parametri
specifici ce trebuie urmariti si au fost stabiliti prin studiile
efectuate:
a) scopul validarii pentru unul sau mai multi compusi;
b) alegerea cantitatilor si calitatii corespunzatoare pentru proba
de validare
(pentru substantele etalon respectiv metaboliti si substante de
degradare),
standardul de lucru;
c) elaborarea metodei de validare (parametri de lucru)
- alegerea parametrilor care se urmaresc n cadrul validarii
(lungimea de unda la nregistrarea spectrului UV frecventa
radiatiei de fluorescenta)
- alegerea metodelor de cuantificare a parametrilor alesi;
- stabilirea limitelor de acceptare a parametrilor care se
determina numeric, pe baza limitelor de acceptare a substantei
active din produsul farmaceutic (specificitatea trebuie sa fie
maxima fara interferente la timpul de retentie RT, randamentul
de extractie maxim)
d) stabilirea timpului de validare.
Validarea preliminara Pre-Study a metodei
A. Specificitatea (specificity) se determina pe baza studiilor
efectuate pe
6 blanc-uri de matrici diferite, astfel nct la timpul de retentie
stabilit (RT) sa nu existe interferente.
B. Carcateristici specifice metodei propuse
1. Curba de calibrare (Linearity) se determina pentru probele
de plasma
dopate cu substante active, derivati sau alte substante etalon
(STD) la 8 nivele de concentratie diferite (dintre care trei la valori
mici) c1 c8. Pentru solutiile de concentratii c1, c3, c4 si c7 se
repeta determinarile de cte 4 ori pentru a avea date multiple la
concentratia minima-c1 , medie-c4 si mare-c7, respectiv ale
controlului de calitate QCA-c3, QCB-c4 si QCC-c7, si nu n ultimul
rnd se prepara o solutie QCD prin dilutia de 4 ori a celei mai
concentrate valori c8 pentru care se efectueaza doua determinari.
Probele QC trebuie efectuate zilnic n solutii standard.
2. Exactitatea (acuratetea Accuracy) E%, se determina prin
calcule si
trebuie sa respecte conditia urmatoare:
- E% < 20% pentru valorile celei mai mici concentratii;
- E% < 15% pentru toate celelalte concentratii.
3. Coeficientul de variatie (precizia-repetabilitatea Precision-
Repetability) CV% se determina prin calcule si trebuie sa respecte
urmatoarele conditii:
- CV% < 20% pentru valorile celei mai mici concentratii;
- CV% < 15% pentru toate celelalte concentratii.
4. Randamentul de extractie (Recovery, RE) _% se determina la
solutiile
cu concentratiile c1, c3, c4, si c7 din solutiile standard.
C. Reproductibilitatea (Intermediate Precision) se
determina n
urmatoarele 4 zile consecutive, repetnd probele de la liniaritate
cu cele 8
concentratii c1 c8 alese mai sus pentru care se calculeaza
exactitatea (acuratetea)E% si coeficientul de variatie (precizia)
CV%, respectnd criteriile precizate la paragrafele
corespunzatoare.
D. Stabilitatea (Stability) care se determina tinnd seama de
urmatoarele:
1. stabilitatea on-line (intermediara) n autosamplerul
sistemului HPLC pentru o durata care excede cu cel putin 30%
timpul maxim pentru derularea unei secvente complete.
2. stabilitatea la nghet-dezghet freeze-thaw pentru care se
efectueaza 3 cicluri de temperatura.
3. stabilitatea de lunga durata pentru care se prepara solutii care
se vor stoca si analiza dupa 1, 2, 3, 4 ... saptamni.
E. ntocmirea raportului validarii care trebuie sa contina
valorile nregistrate, modul de calcul al diferitelor caracteristici si
parametri, reprezentarile grafice si evaluarile si interpretarile
rezultatelor. Pentru justificarea concluziilor finale ale raportului
trebuiesc anexate cromatogramele nregistrate cu numele
analistului care a efectuat validarea si a celor care au verificat si
aprobat metoda.
Introducere
Ochratoxina A (Figura nr. 1) este un metabolit toxic produs de specii din
genul Aspergillus n zonele tropicale i subtropicale i de specii din genul
Penicillium n zonele temperate (1). Ochratoxina A a fost izolat pentru
prima dat din culturi de Aspergillus ochraceus de Van der Merwe i colab.
n anul 1965 (2) n timp ce testau capacitatea toxigen a unor tulpini de
micromicei izolate din diferite boabe de cereale i legume.
Procedeu de lucru
Extractia ochratoxinei A si purificarea extractului
Probele de analizat (cafea boabe prajite vrac) au fost supuse extractiei in
vederea separarii ochratoxinei A.
Astfel, o cantitate de 20 grame proba maruntita se agita 20 minute cu un
volum de 20 ml amestec CH3OH :NaHCO3 3%(80 :20) dupa care se filtreaza
prin hartie de filtru cantitativa (4, 5). Filtratul se trece prin coloana SPE
preconditionata prin spalare succesiva cu 4ml metanol, respectiv cu 4 ml apa
purificata. Ochratoxina A este eluata de pe coloana cu un volum de 3 ml
cloroform, cu o viteza de 2 ml/min. Faza organica se evapora la sec ; reziduu
obtinut se reia cu un volum de 0,6 ml faza mobila si se supune analizei
HPLC prin injectarea unui volum de 20 l in conditiile mentionate.
In paralel, s-au lucrat probe imbogatite cu cantitati cunoscute de
ochratoxina A pentru stabilirea randamentului de extractie.
Analiza HPLC s-a realizat astfel ; un volum de 20 l proba (obtinuta prin
dizolvarea reziduului obtinut in urma prelucrarii probei intr-un volum de 0,6
ml faza mobila) a fost supus analizei pe un cromatograf de lichide tip HP
1090 Series II, echipat cu o coloana cromatografica tip Stable Bond SB-
C18(150x4,6mm ;5m ), folosind o faza mobila un amestec de
acetonitril :apa :acid acetic(in raport de 99 :99 :2). Detectia ochratoxinei A s-
a realizat in fluorescenta (ex=228nm si em=423nm)
Rezultate si discutii
Specificitate
Pentru determinarea specificitatii metodei au fost analizate probe
continand ochratoxina A si o proba continand faza mobile utilizata ca solvent
al probelor injectate. La timpul de retentie al ochratoxinei A nu s-a obtinut
nici un semnal in cromatograma corespunzatoare fazei mobile, rezulta deci
faptul ca nu exista interferenti(8,9,10)
Identificarea picurilor
Identificarea picului corespunzator ochratoxinei A se realizeaza in functie
de timpul de retentie. In conditiile mentionate, timpul de retentie pentru
ochratoxina A este de 9,5 min.
Fig. nr.2-Cromatograma pentru solutia standard de ochratoxina A
Stabilitatea solutiei
Pentru a determina stabilitatea solutiei de ochratoxina A a fost analizata o
proba cu o concentratie de 19,5ng/ml ochratoxina A dupa ce a fost mentinuta
la temperatura camerei 2,3 si 10 zile. Rezultatele experimentale sunt
precizate in tabelul 1.
STABILITATEA SOLUTIEI
Nr. Ziua Arie pic Date statistice
1 0 33,8 Arie medie=32,45
2 2 30,9 SD= 1,3379
3 3 33,3 RSD (%)= 4,1230
4 10 31,8
TABEL 1
Precizie si exactitatea
Prima etapa in determinarea preciziei o reprezinta studiul sistemului.
Astfel, o solutie de concentratie de 20ng/ml a fost analizata de cinci ori.
Ariile picurile corespunzatoare ochratoxinei A pentru cele cinci determinari
sunt prezentate in tabelul nr 3.
Precizia sistemului la determinarea ochratoxinei A
Nr. Arie pic Date statistice
1 26,7 Arie medie = 26,16
2 30,4 SD = 2, 5344
3 30,7 RSD (%) = 8,6912
4 26,2
5 31,8
TABEL 3
Continutul in ochratoxina A
Nr. crt. Nr. proba Denumire Ochratoxina A
proba (g/kg proba cafea
boabe)
1 3 Cafea Indonezia 0,77
2 4 Cafea Indonezia 0,87
3 5 Cafea Indonezia 1,06
4 6 Cafea Indonezia 0,55
5 10 Cafea Columbia 9,47
6 40 Cafea India 3,35
TABEL 5
INTRODUCERE
Contaminarea cerealelor, cafelei, condimentelor, arahidelor i a produselor
derivate din acestea cu fusariotoxine a fost descris pe larg n literatura de
specialitate, datorit implicaiilor acestora asupra sntii animale i umane.
Omul este expus acestor riscuri att prin consumul de produse vegetale
contaminate, ct i prin consumul unor produse provenite de la animale care
au consumat hran contaminat. Deoarece acest risc alimentar este
considerat o problema de sntate public, se acord o importan din ce n
ce mai mareproblematicii cu privire la cile de metabolizare a micotoxinelor
n organismul animal i cel uman. Deoxinivalenolul este fusariotoxina cu cea
mai mare rspndire n cereale i n produsele derivate din acestea. Prin
mecanisme ca inducerea apoptozei la celulele hematopoetice i imunitare,
alterarea imunoglobulinelor i prin impactulasupra sintezei proteice,
deoxinivalenolul are efect hematotoxic, imunomodulator sau de inducere a
unei toxiciti cutanate. La rumegatoare, dei efectele
sunt mai puin toxice, studiile au asociat deoxinivalenolul cu reducerea
consumului de hran (T r e h o l m, 1985) sau cu pierderea produciei de
lapte (W h i t l o w, 1991). Rezultate tiinifice recente au demonstrat c
administrarea deoxinivalenolului, la oaie, produce modificri ale
parametrilor sangvini i ale activitii enzimelor hepatice (B u s u r i c u i Z
a m f i e s c u, 2007). Mecanismele de transfer al fusariotoxinelor n
organismul animal i uman rmn ns nc neclare. H e d m a n (1997)
consider c ratele de absorbie i metabolizare diferite sunt datorate
sensibilitii diferite a animalelor. Ali specialiti (M e k y, 2003; C a v r e t,
2006) au considerat c fusariotoxinele sunt rapid absorbite n intestinul
subire i se elimin n primele 24 de ore de la ingestie, urmat de o excreie
n cantiti mici. Totui, n produsele animaliere se gsesc urme ale
fusariotoxinelor i a derivatelor lor. De aici apare nevoia unor studii avansate
privind mecanismele implicate n metabolismul micotoxinelor i a
neutralizrii activitii lor nainte de a evalua riscul asupra sntii omului.
Deoarece cantitatea de deoxinivalenol prezent n sngele i esuturile de
origine animal n urma intoxicaiei cu fusariotoxine este foarte mic, de
ordinal ppm, se impune folosirea unor metode de analiz adecvat, cu limite
de detecie n acest interval. Dei pentru analiza deoxinivalenolului se
folosesc n general metode gaz cromatografice, i metoda cromatografiei de
lichide de nalt performan (HPLC) ofer performane analitice similare,
cu condiia unei purificri riguroase a probei. Obiectivul acestui studiu a fost
acela de a determina incidena contaminrii cu deoxinivalenol a furajelor
administrate animalelor din loturile experimentale ale laboratorului i
determinarea gradului de transmitere a acestuia n snge la ovine n
condiiile unei intoxicaii acute sau cronice.
REZULTATE I DISCUII
1. Intoxicaia cronic
Rezultatele determinrilor concentraiei de DON din probele de furaje.
Analiza serului sangvin poate da informaii preioase privind expunerea la
diferite concentraii de micotoxine. Probele biologice, de genul serului, sunt
matrici complexe, n care un numr mare de produi pot interfera n analiza
micotoxinelor i prezint avantajul c pot fi colectate fr mari eforturi.
Metoda HPLC pentru determinarea micotoxinei DON din diferite matrice
este o metod cantitativ, de referin, care confer o acuratee sporit
analizelor, ns necesit o purificare riguroas a probelor. Purificarea se
poate face
prin mai multe metode, ns metoda cea mai folosit n prezent este
purificarea prin coloane de imunoafinitate (IAC) (K r s k a i W e l z i g,
2001). Prin purificarea probelor cu ajutorul coloanelor de imunoafinitate se
mbuntesc att selectivitatea, ct i sensibilitatea metodei. Acest lucru
permite o mai bun detecie a micotoxinei, chiar i atunci cnd aceasta se
afl n cantiti foarte mici, de genul probelor de ser, i elimin interferenele
legate de produii acetilai ai deoxinivalenolului (3-AcDON i 15-Ac-DON).
Coloanele de imunoafinitate conin un anticorp monoclonal specific pentru
DON care poate purifica DON-ul din probe. DON-ul prezent n prob se
leag de anticorpul din coloan, care este apoi spalat pentru ndepartarea
interferenelor; toxina este eliberat ulterior prin eluare cu metanol. Dei
extracia din cereale sau alte produse derivate este mai eficient n cazul
folosirii unui amestec de ap i acetonitril (B e n n e t t i K l i c h, 2003; K r
s k a i W e l z i g, 2001), n cazul nostru extracia deoxinivalenolului din
probele de amestec de furaj s-a fcut numai n ap datorit purificrii
ulterioare a extractelor prin coloane de imunoafinitate. n cazul purificrii
prin coloane de imunoafinitate se pot folosi numai extracte obinute n ap,
solvenii organici denaturnd anticorpii. Micotoxina DON a fost detectat la
lungimea de und de 218 nm, avnd timpul de retenie n condiiile date de
7,5 min. Cuantificarea DON-ul s-a fcut prin compararea ariei picurilor
probei cu cele ale standardelor, cu ajutorul softului de achiziie i prelucrarea
datelor Chromeleon (Dionex). Curba de calibrare pentru detecia
deoxinivalenolului din furaje (figura 1) este dreapt i pornete din origine;
coeficientul de linearitate obinut a fost de 0,996.
Tabelul 2
Limitele maxime stabilite de Uniunea European privind concentraia DON
din diferite matrice
(Maxim limits fixed by the European Union regarding DON concentrations in different
matrices
Produs Nivel maxim
(g/kg)
Cereale neprocesate, altele decat graul, ovaz si porumb 1250
Grau, ovaz, porumb neprocesate 1750
Porumb neprocesat 1750
Faina de cereale incluzand si malai 750
Paine, biscuiti, cereale pentru mic dejun 500
Paste fainoase 750
Cereale procesate pentru hrana sugarilor si copiilor mici 200
Tabelul 3
Concentraia de DON din ser (tehnica ELISA)
[DON concentration from serum (method ELISA)]
Nr. Concentratie DON
Crt. g/l
1 11
2 35
3 74
4 34
5 25
6 46
7 15
8 63
9 55
10 13
Medie 37,10
CONCLUZII
Gradul de contaminare cu deoxinivalenol a amestecului de furaj nu a fost
foarte mare (41,54 g/kg ) n condiiile primului amestec testat.
Administrarea de durat (4 luni) a unei raii de 0,5 kg din acest amestec
(cantitatea medie de DON ingerat a fost de 500 ng/kg greutate corporal) la
ovine nu conduce la detectarea n ser a acestei micotoxine.
Absena deoxinivalenolului din probele de ser semnific faptul c la
aceast concentraie, acesta este fie eliminat rapid, fie transformat n ali
produi de metabolism.
Administrarea unui furaj cu o cantitate de DON crescut (3,45 mg/kg) a
condus la trecerea acestuia n snge n proporie de 50%, prezena
micotoxinei n ser avnd valoarea medie de 37,1 g/l.
La rumegtoare s-au realizat mai puine studii cu privire la efectul
tricotecenelor, iar rezultatele sunt destul de contradictorii. Ca urmare,
studiile ulterioare trebuie s determine dac la alte concentraii de DON are
loc transmiterea acestuia n ser.