Commission

ocanographique
Manuels et guides II
intergouvernementale

LA DETERMINATION DES
HYDROCARBURES PTROLIERS
DANS LES SDIMENTS

Unesco 1982
 PREFACE

Le prsent rapport a t tabli par la Commission ocanographique inter-

gouvernementale (COI) de l'Unesco avec la collaboration d'un consultant,
M. Karsten H. Palmork, de l'Institut de recherches marines de Bergen (Norvge),
la demande du Programme des Nations Unies pour l'environnement (PNUE), par
l'intermdiaire du programme du Centre d'activits du Programme pour les mers
rgionales, le Programme coordonn pour la surveillance et l'tude de la pollution
en Mditerrane (MED POL). Le PNUE est vivement remerci pour sa contribution.

Les mthodes d'analyse prsentes ont t ainsi que leurs limites examines
et approuves par le Groupe d'experts de la COI sur les mthodes, les normes et
l'intertalonnage, sous rserve qu'elles soient modifies mesure qu'on dispose-
ra de nouvelles informations concernant le choix des solvants, l'efficacit de
l'extraction, le choix des normes, etc.

Les mthodes dcrites dans le prsent rapport ont t mises au point afin
de servir de mthodes de rfrence pour l'analyse du ptrole contenu dans les
sdiments dans le cadre de MED POL. Toutefois, tant donn que leur applicabilit
dpasse de beaucoup les limites d'une seule rgion, elles sont publies a l'inten-
tion des ocanographes intresss du monde entier.
 - 1 -

TABLE DES MATIEFES

Pages

1. INTRODUCTION ........................................................ 1

2. PORTEE ET CHAMP D'APPLICATION ....................................... 2

3. REFERENCES ET BIBLIOGRAPHIE ......................................... 3

4. PRINCIPE ............................................................ 3

5. FEACTIFS ............................................................ 4

5.1 Substances chimiques............................................ 4

5.2 Normes internes ................................................ 4

6. APPAREILS ET MATERIEL ............................................... 5

7. PROCEDURE D'ECHANTILLONNAGE ......................................... 6

7.1 Planification .................................................. 6

7.2 Slection des sites d'chantillonnage ........................... 7

7.3 Prlvement et stockage des chantillons ....................... 8

7.4 Types d'chantillons ........................................... 9

8. PROCEDURE D'ANALYSE ................................................. 10

8.1 PrpaKation des chantillons ................................... 10

8.2 Dtermination du poids sec ..................................... 10

8.3 Minralisation de la matrice sdimentaire ...................... 11

8.4 Extraction des hydrocarbures ptroliers ........................ 11

8.5 Sparation des alcanes et des aromatiques l'aide de colonnes

remplies d'alumine ( utiliser avant l'analyse par fluorescence-
W et par chromatographie en phase gazeuse avec colonnes
capillaires) ................................................... 12

8.6 Purification des extraits l'aide de colonnes remplies de

silice ......................................................... 13

8.7 Mthode de dpistage par fluorescence-UV ....................... 15

8.7.1 Etalonnage .............................................. 17

8.7.2 Essais blanc .......................................... 19

 Pages

8.7.3 Calcul de la concentration de l'chantillon initial ..... 19

8.7.4 Essais d'inhibition de la fluorescence .................. 19

8.8 Chromatographie en phase gazeuse utilisant des colonnes garnies. 20

8.9 Chromatographie en phase gazeuse utilisant des colonnes de

silice fondue .................................................. 20

8.10 Chromatographie en phase gazeuse/spectromtrie de masse

&.!.&
..
.
dlildtis es ................................................... 21

9. PRINCIPES PERMETTANT D'ASSURER LA QUALITE DES DONNEES ............... 27

9.1 Planification .................................................. 27

9.2 Assurance de qualit ........................................... 27

9.3 Dfinitions de quelques termes statistiques .................... 28

9.3.1 La spcificit .......................................... 28

9.3.2 La sensibilit .......................................... 28

9.3.3 La prcision ............................................ 28

9.3.4 L'exactitude ............................................. 28

10 CONCLUSIONS ......................................................... 29

APPENDICE I ......................................................... 31
 DETERMINATION DES HYDROCARBURES PETROLIERS
DANS LES SEDIMENTS

1. INTRODUCTION

La ncessit de rechercher les hydrocarbures d'origine ptrolire dans les

sdiments peut avoir de multiples raisons, par exemple, pour n'en citer que quelques-
unes, (i) le dsir d'tablir des niveaux de base avant le lancement d'oprations de
forage et de production ptrolire en mer, (ii) le fait que la zone en question, un
terrain de pche, a t le site d'un dversement de ptrole et (iii) le fait que la
zone en question est soumise une pollution permanente due un trafic maritime
intense ou la proximit d'une raffinerie. Toutes ces situations peuvent avoir des
incidences sur la vie marine et la pche. 11 est donc d'une importance primordiale
de connatre l'tendue de la pollution par le ptrole, son influence sur la vie
marine et la dure de ses effets.

L'analyse d'chantillons d'eau de mer rvlera si cette eau est encore pollue.
L'analyse d'chantillons de poissons gras ou de foie de poissons maigres indiquera
dans quelle mesure les poissons ont souffert de la pollution. L'analyse d'chan-
tillons de sdiments peut fournir des renseignements sur les retombes atmosphri-
ques au cours du temps, sur les niveaux de base avant l'entreprise d'activits
entranant le dversement de polluants, sur les effets d'un rejet d'hydrocarbures,
sur des filtrations chroniques, sur une pollution permanente due une raffinerie
et tout simplement sur le rsultat de l'association d'hydrocarbures avec des parti-
cules en chute vers le fond, telles que coprolithes, organismes morts ou vivants,
minraux argileux et silicates. Ces particules sont gnralement l'origine de
l'limination des hydrocarbures de la colonne d'eau. En outre, les hydrocarbures
ptroliers dissous peuvent tre absorbs directement par les s,dimentsselon leur
teneur en matire indigne, comme, par exemple, les acides humiquesi

Quelles mthodes faut-il utiliser pour valuer les hydrocarbures ptroliers ?

De nombreuses mthodes d'analyse ont dj t dcrites : l'analyse gravimtrique
(substances extractibles non volatiles), mthode par absorption de l'UV (polyol-
fines conjugues, aromatiques), par fluorescence-UV (composs non saturs, aroma-
tiques, etc. , dpendant d'une excitation-h , d'une mission-A , d'une extraction et
de la volatilit), par infrarouge (IR) (frquence d'allongement C-H2 , 2.930 cm-') ,
par chromatographie en phase gazeuse utilisant des colonnes garnies (total des
hydrocarbures, divers n-alcanes, rapports n-paraffine/isoprnodes), chromatographie
en phase gazeuse utilisant des colonnes capillaires de silice fondue (divers n-
alcanes et hydrocarbures aromatiques polynuclaires aprs une prsparation sur
silice ou sur silice couverte d'alumjme ou sur alumine seulement), et par chromato-
graphie en phase gazeuse/spectromtrie de masse associes un systme de donnes
(divers composants, composants prslectionns) en utilisant le mode de surveillance
d ions slectionns (SIM).

Le prsent document de rfrence portera sur les mthodes qui ont dj t

utilises ce jour (fluorescence-UV, chromatographie en phase gazeuse utilisant
des colonnes capillaires garnies ou de silice fondue et la chromatographie en phase
gazeuse/spectromtrie de masse), qui ont toutes t approuves par plusieurs groupes,
le plus rcent tant le Groupe d'experts de la GIPME sur les mthodes, les normes
et l'intertalonnage, relevant de la COI, sa quatrime session Curaao (Antilles
nerlandaises), 25-31 mars 1982.
 - 2 -

Pour ces trois mthodes, il faut appliquer avec soin la mme procdure d'chan-
tillonnage, d'extraction et de traitement (voir sections 7.3, 7.4 et 8.1, 8.2, 8.3,
8.4 et 8.5). Les diffrences se manifestent au niveau de l'analyse, de l'utilisation
des appareils et de l'expression du rsultat. Dans la mthode par fluorescence-UV
(dcrite la section 8-71,le rsultat est prsent sous la forme d'un nombre
d'units de chrysne,une expression du "ptrole" prsent dans 1 'chantillon. Dans
la mthode de la chromatographie en phase gazeuse utilisant une colonne garnie, le
rsultat est exprim en quantit totale d'hydrocarbures. Dans la chromatographie en
phase gazeuse et dans la chromatographie en phase gazeuse/spectromtrie de masse
utilisant des colonnes capillaires, les rsultats peuvent tre exprims en quantits
de tel ou tel composant : n-alcanes, hydrocarbures aromatiques polynuclaires et/ou
autres composants prslectionns en utilisant la chromatographie en phase gazeuse/
spectromtrie de masse selon le mode de surveillance d'ions slectionns.

Les types de ptrole qui peuvent aboutir dans le milieu marin varient sensible-
ment ; ils vont du ptrole brut diffrents distillats tels que le fuel lourd,
l'essence ou les retombes atmosphriques. Tous ces "types" de ptrole ont quelque
chose en commun, ilscontiennentdes composants qui sont dissous dans l'eau de mer
et des composants qui sont dgrads par des bactries et par le rayonnement uitra-
violet. 11 est donc inutile d'essayer de recnercher le "ptrole" en tant que tel,
parce qu'il n'existe plus sous sa forme initiale quand il a atteint la mer. C'est
pourquoi la mthode de la fluorescence-UV peut tre utilise dans ce cas comme moyen
de dtecter les "points chauds".

L'analyse des hydrocarbures ptroliers devrait avoir pour but de rpondre aux
questions suivantes : Quels sont les composants les plus dangereux ? Quels composants
drivant du ptrole aboutissent dans les sdiments ? Quand on aura rpondu ces
questions, on pourra passer l'analyse des diffrents composants.

2. PORTEE ET CHAMP D'APPLICATION

Les mthodes de rfrence dcrites sont une mthode de filtrage par fluores-
cence-UV, une mthode de chromatographie en phase gazeuse (dtecteur ionisation
de flamme) et une mthode de chromatographie en phase gazeuse/spectromtrie de masse
pour la dtermination de la quantit totale et des diffrents composants des hydro-
carbures ptroliers contenus dans les chantillons de sdiments. Pour l'analyse
chimique des chantillons, les hydrocarbures sont extraits avec du pentane aprs
saponification du sdiment en reflux pendant une heure et demie avec de la potasse
alcoolique. L'extrait est spar en une fraction d'alcane et une fraction aromatique
sur une colonne remplie d'alumine (section 8.5 pour les analyses par fluorescence-UV
et par chromatographie en phase gazeuse avec colonnes capillaires) et purifi sur
une colonne remplie d'un gel de silice (section 8.6 pour les analyses par chromato-
graphie en phase gazeuse en colonne garnie et par chromatographie en phase gazeuse/
spectromtrie de masse). La limite de dtection pour le "total" des hydrocarbures
ptroliers est approximativement de 1 mg/kg de sdiment et pour les diffrents hydro-
carbures, de 100 ng/kg.
 - 3 -

3. REFERENCES ET BIBLIOGRAPHIE

Anon, 1980. Guidelines for Data Aquisition and Data Quality Evaluation in Environ-
mental Chemistry. Analyt. Chem. 52 (1980) 2242-2249.

Farrington, J. W., 1980. An Overview of the Biogeochemistry of Fossile Fuel Hydro-

carbons in the Marine Environment, in Petroleum in the Marine Environment,
Advances in Chemistry Series 185, Leonid Petrakis et Fred T. Weiss (dir. publ.),
American Chemical Society, Washington D.C. 1980.

Friedrich, H., 1973. Marine Biology. An introduction to its problems and results.
Sidgwick & Jackson, London.

Futoma, D. J. ; Ruven Smith, S. ; Smith, T. E. ; J. Tanaka, 1981. Polycyclic

Aromatic Hydrocarbons in Water Systems. CRS Press, Inc., Boca Raton, Florida,
1981.

Hites, R. A. ; R. E. Laflamme ; J. G. Windsor jr., 1980. Polycyclic Aromatic Hydro-

carbons in Marine/Aquatic Sediments: Their Ubiquity, in Petroleum in the Marine
Environment, Advances in Chemistry Series 185, Leonid Petrakis et Fred T. Weiss
(dir. publ.) , American Chemical Society, Washington D.C. 1980.

McAuliffe, C. D., 1980. The Multiple Gas-Phase Equilibration Method and its Appli-
cation to Environmental Studies, in Petroleum in the Marine Environment,
Advances in Chemistry Series 185, Leonid Petrakis et Fred T. Weiss (dir. publ.),
American Chemical Society, Washington D.C., 1980.

Moore, H. B. ; Neil, R. G., 1930. An Instrument for Sampling marine muds.

-J. mar. biol. Ass. U.K. XVI: 589-594.
Overton, E. B. ; J. L. Laseter, 1980. Distribution of Aromatic Hydrocarbons in
Sediments from Selected Atlantic, Gulf of Mexico, and Pacific Outer Conti-
nental Shelf Areas, in Petroleum in the Marine Environment, Advances in
Chemistry Series 185, Leonid Petrakis et Fred T. Weiss (dir. publ.), American
Chemical Society, Washington D.C. 1980.

4. PRINCIPE

Aprs le prlvement du sdiment l'aide d'une benne van Veen ou d'un carot-
tier gravit, les hydrocarbures ptroliers sont isols des chantillons de sdi-
ment par saponification avec de la potasse alcoolique pendant une heure et demie
suivie d'une extraction l'aide de pentane. Un sous-chantillon est utilis pour
la dtermination du poids sec. Dans les chantillons fortement pollus, la quantit
"totale" d'hydrocarbures ptroliers peut tre value par la mthode du filtrage
par fluorescence-UV (section 8.7) ainsi que par la chromatographie en phase gazeuse
avec colonnes garnies et un dtecteur ionisation de flamme, intgrant la fois
le mlange complexe rsolu et le mlange non rsolu (section 8.8). Un ptrole aussi
semblable que possible au polluant du sdiment est utilis comme norme externe.
Certains hydrocarbures aromatiques non biogenes (par exemple, les naphtalnes, les
phnanthrnes et les dibenzothiophnes), qui sont les aromatiques dominant dans les
chantillons pollus par des hydrocarbures ptroliers, sont analyss quantitative-
ment l'aide d'une colonne capillaire remplie de silice fondue, de trois normes
internes (le diphnyle-d l'anthracne-d et le pyrne d ) et d'un spectromtre
1 o' 1 o' 10
de masse comme dtecteur.
 - 4 -

Dans le cas d'un chantillon de sdiment anoxique, le soufre lmentaire

pourrait perturber la chromatographie en phase gazeuse. On peut remdier ce pro-
blme en ajoutant une goutte ou deux de mercure mtallique pendant la priode de
reflux ou en utilisant une colonne contenant du cuivre. Toutefois, si l'chantillon
est saponifi avec de la potasse alcoolique, le soufre est compltement limin.

5. REACTIFS

Tous les ractifs utiliss doivent tre de la meilleure qualit possible : p.a.
ou qualit ncessaire pour la chromatographie. Si les rsultats des essais blanc
sont trop levs, il faut redistiller les solvants utiliss pour amliorer leur
qualit au maximum.

5.1 Substances chimiques

5.1.1 Eau distille

5.1.2 Mthanol p.a. Merck 6009.

5.1.3 Potasse caustique (KOH) p.a. Merck 5033.

5.1.4 Pierres rfractaires, alundum (RI maille approx. 8 14 Cat. N o 1590-D 18,
Arthur H. Thomas Company, Philadelphie, Pa. 19105 (Etats-Unis d'Amrique).

5.1.5 Pentane, Uvasol Merck 7179

5.1.6 Hexane, Uvasol Merck 4369

5.1.7 Azote, qualit 3.

5.1.8 Acide chromique contenant 4 g de bichromate de potassium (K Cr O ) dans un

2 2 7
litre d'acide sulfurique concentr.

5.1.9 Gel de silice (Kieselgel 60) dimension granulomtrique 0,063-0,125 mm

(maille ASTM 120-230) Merck 9386.

5.1.10 Oxyde d'aluminium, activit (anionotropique) de l'acide Woelm, qualit I

pour la chromatographie. M. Woelm Eschwege (Allemagne).

5.2 Normes internes :

5.2.1 Diphnyle-d MD-208 (99 % atome DI Lot no B-1011. Merck et Co., Inc.
Rahway, N. i?
ou Merck Sharp et Dohme Canada Limited, Montral (Canada) (MSD-ISOTOPES)

5.2.2 anthracene-d MD-46 (98 % atome D) Lot no C-570. Merck et Co., Inc.
10
Rahway, N. J.

ou Merck Sharp et Dohme Canada Limited, Montral (Canada) (MSD-ISOTOPES)

5.2.3 pyrne-d MD-363 (98 % atome D) Lot nu C-569. Merck et Co., Inc. Rahway,
10
N. J.

ou Merck Sharps et Dohme Canada Limited, Montral (Canada) (MSD-ISOTOPES)

 - 5 -

5.2.4 Un mlange contenant approximativement 0 , 5 k g de 5.2.1, 5.2.2 et 5.2.3 par

ml dissous dansl'nexane. Le mlange peut tre prpar comme suit : trans-
vaser 100 mg de 5.2.1, 5.2.2 et 5.2.3 dans une fiole jauge et diluer jus-
qu' 100 ml avec de l'hexane; solution A.

Prendre 1 ml de la solution A et diluer jusqu' 100 ml avec de l'hexane. La

solution obtenue (solution B) contient approximativement 10 A g de chacune
des normes par ml.

Prendre 5 ml de la solution B et diluer jusqii' 100 ml avec de l'hexane. La

solution obtenue (solution C) contient approximativement O ,5 Ag/ml de chacune
des normes deutriques. La pese doit se faire au 0,0001 g prs et tre note
pour que le titre de la solution puisse tre calcul exactement.

6. APPAREILS ET MATERIEL

6.1 Boites isolantes en plastique, pour les priodes chaudes rfrigrateur (+1
+4OC) ou glace pour le refroidissement.

6.2 Conglateur (-18 -2OoC), si les chantillons voyagent plus de 48 heures.

6.3 Feuille d'aluminium propre pour envelopper les chantillons de sdiments.

6.4 Bocaux en verre propres pour les chantillons de sdiments.

6.5 Etiquettes ou marques pour l'identification des chantillons de sdiments

(voir fig. 5).

6.6 Six flacons de verre de 250 ml; Quickfit ou Jena.

+
6.7 Une balance, E Mettler type B5, no 14788 (- O,OOl+g) et une autre charge-
ment par le haut, type K71 no 88298 (100-200 g) (- O, 1 9).

6.8 Isomantel, type FSE,&/lL/6, 220/240 volts 6x280 watts, phase S/PH, circuits 1,
numro de srie WB 4649, Isopad Ldt., Bosehamwood, Herts.

6.9 Isopad, F.E.R. Control, type no 7422 Bx.

6.10 Six entonnoirs de sparation de verre de 250 ml avec des Douchons de tflon;
verre de borosilicate BS 2021.

6.11 Un Rotavapor ; Rotavapor Buchi, EL, Glasapparatefabrik, Flawil (Suisse) avec

bain thermostatique et thermostat.

6.12 Ballons de verre 5 fond rond de 100 ml pour le Rotavapor.

6.13 Paquets de fioles (2 mi) 5080-8712, fiole-4330-0525 P l Hewlett Packard.

6.14 Paquets de capsules, 5080-8713, capsule-1540-0132 P, Hewlett Packard.

6.15 Une pince pour le capsulage des fioles ; Wheaton 224301, Millville, N.J.

6.16 Seringue (100,;~l)pour le transvasement des solvants (Hamilton).

 - 6 -

6.17 Seringues (10 et 1,ill) pour l'injection de l'chantillon dans la chromato-

graphie en phase gazeuse et dans la chromatographie en phase gazeuse/spec-
tromtrie de masse, seringue Hamilton 7001, Supelco, 1 mc. Bellefonte,
Pennsylvanie 16823.

6.18 Chromatographe en phase gazeuse pour colonne garnie et colonne capillaire

de silice fondue.

6.19 Chromatographe en phase gazeuseLspectromtre de masse/systme de donnes

adapts aux colonnes capillaires de verre ou aux colonnes de silice fondue.

6.20 Colonnes capillaires de verre ou de silice fondue, approximativement 25 m x

0,21 mm de diamtre intrieur, aux parois enduites de SE-52, SE 54 ou
SP-LlOU.

6.21 Schoir ou four (100' a 3OOOC).

6.22 Spectrophotomtre par fluorescence-W.

NOTE :,Lesustensiles de verre qui sont utiliss pour la premiere fois (section 8)
doivent tre parfaitement nettoys de la manire suivante :

- laver avec de l'eau et du savon

- rincer l'eau propre, de prfrence sous le robinet et rincer enfin avec

de l'eau distille et laisser goutter

- laisser 1'ust.ensile dans l'acide chromique (5.1.8) , de prfrence toute

la nuit

- rincer l'eau et enfin plusieurs fois avec de l'eau distille et laisser

goutter.

7. PROCEDURE D'ECHANTILLONNAGE

L'chantillonnage est la base des tudes sur la pollution par les hydro-
carbures ptroliers, c'est donc une procdure trs importante. Le prlvement
d'chantillons de sdiments des fins d'analyse chimique peut tre divis en
quatre phases : ( 1 ) planification, (2) slection des sites d'chantillonnage et
dtermination du nombre d'chantillons ncessaires pour tudier la zone en question,
(3) les techniques de collecte (benne van Veen ou carottier gravit) et de stoc-
kage d'chantillons, et (4) type d'chantillon.

7.1 P 1anification

Un plan d'chantillonnage doit tre conqu en fonction de la nature de la

situation tudier.

I1 est peu probable que les sdiments contiennent une quantit importante
d'hydrocarbures dissous ; en effet il faut que le ptrole traverse la colonne d'eau
pour parvenir aux sdiments. Beaucoup plus vraisemblablement les hydrocarbures
solubles ont t limins avant que les gouttelettes atteignent les sdiments
(McAuliffe, 1980).
 - 7 -

Avant d'entreprendre une tude ou une surveillance il est indispensable d'ex-

cuter une enqute initiale : le taux de sdimentation est normalement faible et un
chantillonnage annuel ou biennal devrait tre suffisant pour une surveillance des
tendances.

7.2 Slection des sites d'chantillonnage

Les sites d'chantillonnage sont normalement choisis sur une vaste grille qui
couvre la zone gographique touche par un dversement de ptrole, laquelle est
choisie comme zone de rfrence, ou susceptible d'tre le thtre d'oprations de
forage 2 l'avenir (Fig. 1).

Etant donn que l'analyse des chantillons d'hydrocarbures ptroliers est

couteuse, il faut dterminer avec soin le nombre des chantillons recueillis et les
sites d'chantillonnage. Les chantillons doivent tre choisis de manire per-
mettre d'atteindre les objectifs ; cela signifie gnralement qu'on procdera un
surchantillonnage sachant cependant qu'un certain nombre d'chantillons seulement
seront choisis pour tre analyss un stade ultrieur.

Les chantillons doivent tre recueillis en plusieurs exemplaires toutes les

fois que cela sera possible chaque point de la grille. L'analyse des doubles per-
mettra de dterminer la variance des paramtres mesurs. Cette variance servira
ensuite indiquer le nombre de doubles ncessaires pour dceler un changement sta-
tistique dans les valeurs mesures dans certaines limites de confiance. Le nombre
de doubles calcul des fins statistiques suppose que les valeurs sont "normalement
distribues" (c'est--dire courbe de Gauss, fig. 2).

Fig. 1 - Rseau pourl'chantillonnage de sdiments. O-stations d'chantillon-

nages, &forage e t ,la flche indique la direction du courant rsiduel.
 - 8 -

-1 X X
X

Fig. 2 - Distribution normale, courbe de Gauss.

On observe gnralement cette distribution si les hydrocarbures ptroliers
prsents dans le sdiment reprsentent les retombes atmosphriques au cours du
temps. si les composants prsents proviennent d'un deversement de ptrole rcent
avec une distribution inegale de ptrole dans les sdiments, les concentrations
d'hydrocarbures dans un groupe de doubles risquent de ne pas tre distribues nor-
malement et, par consquent, les tests-t de Student ne sont pas applicables. Dans
de tels cas, ces chantillons doivent tre classs en fonction de la source de la
pollution.

7.3 Prlvement et stockage des chantillons

Les chantillons de sdiments peuvent tre recueillis l'aide d'une benne

van Veen.

Fig. 3 - Benne van Veen pour le prlevernent d'chantillons de

sdiments (d'aprs H. Friedrich).
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Aprs rcupration de l'appareil, il faut laisser l'eau s'goutter en vitant de

perturber la couche de surface des chantillons. Les doubles des chantillons, d'en-
viron 500 ml, doivent tre prlevs soigneusement sur les cinq premiers centimtres
de la couche par l'ouverture situe en haut de l'appareil (fig. 3). Ds que les
doubles sont prlevs, ils doivent tre envelopps dans une feuille d'aluminium OU
placs dans des bocaux de verre et immdiatement congels -
2OoC afin d'tre ana-
lyss ultrieurement.

Les chantillons de sdiments peuvent galement tre recueillis l'aide d'un

carottier doubl de verre (MOORE et NEIL, 1930, fig. 4).

Le manchon de verre contenant l'chantillon de sdiment peut tre congel. On

peut extraire le sdiment du manchon aprs l'avoir dcongel a.vec une serviette
chaude et le couper la longueur dsire avec un couteau.

eau

a. b.
sdiment

Fig. 4 - a. Manchon de verre d'un carottier gravit. Le sdiment de la partie

suprieure peut servir des analyses de tendances. b. Ensemble d'un
prleveur d'chantillons du fond.

Lorsque l'chantillon de sdiment est rcupr, il est trs important de le

stocker dans un endroit sr avec une tiquette indiquant son identit et tous les
renseignements ncessaires (fig. 5).

L'chantillon doit &tre constamment protg de la lumire et gard au frais

soit dans un rfrigrateur (+ 1 2 + 4OC), soit dans une bote isolante refroidie
avec de la glace jusqu' ce qu'il puisse tre congel, de prfrence -18 ou -2OOC.

7.4 Types d'chantillons

Dans certains cas, lors du prlvement d'chantillons (par exemple pendant les
dversements de ptrole), il est recommand de recueillir galement d'autres types
d'chantillons aux fins d'analyse chimique. Pour tablir la source et l'identit du
ptrole qui cause la pollution, il faut recueillir un chantillon de ce ptrole
( 1 5 9). Dans certains cas, il faut prlever des chantillons d'eau (3 5 1)
pour dterminer si la pollution des masses,d'eau par le ptrole est toujours nota-
ble et il.faudrait aussi recuejllir des organismes marins pour y rechercher les
hydrocarbures ptroliers et tab1i.r ainsi le degr de pollution.
 - 10 -

CHAIN OF CUSTODY RECORD

EHVIRONMEHTAL PROTECTION AGENCY
S A M P L E NO.

SOURCE OC S A M C L I

Fig. 5 - Etiquette permettant d'identifier les chantillons recueillis

(utilise par la U.S. Environmental Protection Agency).

8. PROCEDURE D'ANALYSE

8.1 Prparation des chantillons

Peser un ballon fond rond, propre et sec, sans le bouchon l'meri et noter
le poids. Peser dans ce ballon approximativement 150 g au O l l g prs de sdiments
en partie dgels, noter le poids exact et calculer le poids humide.

8.2 Dtermination du poids sec

Une bouteille propre, sans son bouchon l'meri, est place dans le schoir
ou dans le four (lOOC, 2 heures), l'aide d'une pince propre. I1 est important
d 'utiliser des pinces chaque fois qu'on touche le verre pour viter de laisser des
traces de doigts et des particules de poussire sur la bouteille. Le bouchon et la
bouteille sont placs refroidir dans un dessiccateur.
-
La bouteille vide et l&.bouchon sont ensuite soigneusement pess sur une balance
de prcision. Le poids obtenu est le poids de la bouteille vide et du bouchon schs
Noter le poids. Enlever le bouchon et placer 25 50 g de sdiments dans la bouteille
et reboucher.

Dterminer soigneusement le poids de la bouteille, du bouchon et du sdiment.

Le poids obtenu est le poids humide du sdiment plus le poids de la bouteille et du
bouchon.

Placer la bouteille dans le schoir ou dans le four (lOOC), enlever le bouchon

et le placer galement dans le four.

Aprs 24 heures, remettre le bouchon sur la bouteille, retirer la bouteille

avec le bouchon du four et les placer tous les deux refroidir dans un dessiccateur,
Peser la bouteille bouche et noter le poids. Rpter le cycle de schage jusqu' ce
que la diffrence entre les peses suivantes atteigne moins de 5 % du poids total ;
noter le poids humide et le poids sec et calculer leur rapport.
 - 11 -

Note : Lors de l'analyse des hydrocarbures ptroliers dans les sdiments, l'alt-
ration est moindre si l'on recherche le poids humide de l'chantillon au lieu de
faire scher celui-ci 100OC. Nanmoins, si l'on calcule la fois le poids humide
et le poids sec, ces valeurs peuvent tre compares celles qui ont t releves
prcdemment.

8.3 Minralisation de la matrice sdimentaire

Le matriel ncessaire cette phase est prsent sur la figure 6. Placer 80

100 g de l'chantillon de sdiments humides dans un ballon fond rond, ajouter
100 ml de mthanol redistill, 3 g de KOH et de pierres rfractaires. Ajouter 1 ml
d'un mlange d'une solution titre interne contenant, raison de 0,5 W / m i de cha-
que substance, du biphnyle, de l'anthracne et du pyrne deutriques dissous dans
l'hexane. Chauffer le mlange au reflux pendant une heure et demie (Fig. 7).

8.4 Extraction des hydrocarbures ptroliers

Refroidir l'extrait contenant du mthanol la temprature de la pice, le

transvaser dans un entonnoir de sparation (Fig. 8) et extraire deux fois avec
25 ml de pentane (Uvasol). Sparer la phase mthanol de la phase pentane et trans-
frer celle-ci dans une fiole d'vaporation et rduire le volume 0,5 ml en uti-
lisant un Rotavapor (Fig. 9). Transvaser le volume rduit dans une fiole de verre
en utilisant du pentane (Fig. 10). Concentrer cet extrait soigneusement approxi-
mativement 0,2 ml en utilisant du gaz N sec avant purification sur une colonne
2
remplie d'alumine (5.1.10) .

Fig. 6 - Vue d'ensemble du matriel ncessaire au traitement des chantillons

de sdiments : A = N (5.1.7), B = Fiole (6.13), C = KOH (5-1.31,
D = mthanol (5.1 -2): E = pierres rfractaires (5.1.4) , F = norme
interne (5.2), G = pentane (5.1.5), H = chantillon de sdiment,
I = entonnoir de sparation (6.10) et J = dispositif pour le reflux
des chantillons (6.8).
 - 12 -

8.5 Sparation des alcanes et des aromatiques l'aide de colonnes remplies

d'alumine ( utiliser avant l'analyse par fluorescence-UV et par chromato-
graphie en phase gazeuse avec colonnes capillaires)

Une pipette Pasteur quipe d'un bouchon de laine de verre est remplie d'en-
viron 5 cm (1,15 g) d'oxyde d'aluminium (5.1.10). La colonne est rince trois fois
avec 2 ml de pentane (5.1.5) et l'extrait d'chantillon est ajout en haut de la
colonne. L'lution est excute comme le montre le tableau 1. Les diffrents luats
sont desschs sous l'action d'un flux de gaz N Pour la mthode de la fluorescence-
2'
W,dissoudre les rsidus contenant les aromatiques (c'est--dire les fractions 3
et 4) dans de l'hexane sans aromatiques et transvaser dans une fiole jauge de 1 ou
5 ml et ajouter de l'hexane jusqu'au trait de repre. Pour l'analyse par chromato-
graphie en phase gazeuse, dissoudre les rsidus dans une quantit connue d'hexane
(entre 40 pl et 1 ml selon la concentration des hydrocarbures).

Fig. 7 - La fiole contenant le sdiment, le mthanol, le KOH et les fragments

de pierres rfractaires est prte tre chauffe au reflux.
 - 13 -

8.6 Purification des extraits l'aide de colonnes remplies de silice

Une pipette Pasteur quipe d'un bouchon de laine de verre est remplie de
0,5 g de silice (5.1.9). Rincer la colonne tro,isfois avec du pentane (5.1.5), puis
placer l'chantillon en haut de la colonne et rincer la fiole trois fois avec 1,0 ml
de pentane. Eluer les hydrocarbures ptroliers totalement avec 12 ml de pentane en
tout. Desscher l'extrait au pentane sous l'action d'un flux de gaz N
2'
Tableau 1. L'lution des diffrentes fractions dans la sparation des alcanes
et des aromatiques (provenant d'un extrait de sdiment).

Volume
Rapport Fractions
N o d'luat d'luat Solvant d'lution
du solvant rsultantes
en ml

1 4 Pentane Alcanes

2 4 Pentane Solvants
seulement

3 4 Pentane : dichloromthane 7:3 Aromatiques (a)

4 4 Dichloromthane Aromatiques
suprieurs(b)

(Voir fig. 13 p. 17 pour l'illustration des sparations).

(a) Voir fig. 14 (a) pour l'quivalent de l'luat 3.

(b) Voir fig. 14 (b) pour l'quivalent de l'luat 4.

Pour les analyses par chromatographie en phase gazeuse avec une colonne garnie
ainsi que par chromatographie en phase gazeuse/spectromtrie de masse selon le mode
de surveillance d'ions slectionns, dissoudre le rsidu dans une quantit connue
d'hexane (entre 40 Hl et 1 ml selon la concentration d'hydrocarbures).
 - 14 -

Fig. 8 - Transfert de l'extrait contenant du mthanol dans un entonnoir

de sparation (6.10).

Fig. 9 - Rduction de l'extrait contenant du pentane dans des conditions

de pression rduite avec le Rotavapor (6.11).
 - 15 -

8.7 La mthode de dpistage par fluorescence-UV

L'analyse des hydrocarbures ptroliers par la mthode de la fluorescence-UV

est prsente ci-aprs. Lorsqu'on procde ces analyses, il faut tenir compte des
points mentionns dans l'Appendice I.

Un chantillon de l'extrait dissous dans du ri-hexane doit tre plac dans un

rcipient en verre de silice de 1 cm muni d'un couvercle. Mesurer l'intensit de
la fluorescence 360 nm (excitation 310 nm). 11 faudrait, si possible, explorer
les spectres d'excitation et de fluorescence pour chaque chantillon. Pour le me-
lange des substances fluorescentes (c'est--dire essentiellement benznes de substi-
tution, naphtalnes et composs aromatiques polynuclaires) prsentes dans le p-
trole brut et dans le fuel-oil rsiduel l'excitation est la plus forte 3:O nm et
la fluorescence la plus intense vers 360 nm.

Fig. 10. Transfert du volume rduit de l'extrait dissous dans du pentane

dans une fiole (6.13) avec une pipette Pasteur.
 - 16 -

Fig. 11. Capsulage l'aide d'une pince (6.15) de la fiole contenant

l'extrait injecter dans le chromatographe en phase gazeuse.

Fig. 12. Injection de l'chantillon dans le chromatographe en phase gazeuse,

HP 5880, (6.18) quip d'une colonne capillaire de silice fondue
(6.20).
 - 17 -

8.7.1 Etalonnage

L'intensit de la fluorescence de la solution d'hexane est compare la

fluorescence d'une solution tmoin. Le chrysne doit servir de substance de rf-
rence jusqu' ce qu'on puisse utiliser une substance plus satisfaisante. La solu-
tion de chrysne devrait avoir presque la mme intensit d'mission que l'extrait
inconnu. 11 faut effectuer les comparaisons au moins une fois par jour l'aide
d'instruments identiques.

h
tane

'23

d I p h 6n a n t h r ;.ne

q-phnanthrnes

C -phnanthrnes
1 2

Fig. 13. Sparation d'un extrait d'chantillon de sdiment provenant du Spitsberg

(Dversement d'hydrocarbures aux houillres de Svea 1979)
(a) Avant sparation sur alumine acide
(b) luat 1, 4 ml de pentane; fraction d'alcane
(c) iluat 2, 4 ml de pentane
(d) luat 3, 4 ml de pentane; CH C1 (7:3): fraction aromatique
2 2
(voir p. 12, Tableau 1 , section 8.5).
 - 18 -

c
id
Li
da, O
5
c d
a
d
U4

h
c
a, 4J
4J C al
U #a, E!
id Li e.4

Ici c a
a, ci I
u E: io
Li ru
ru E: m
N al
s
1: a

1
2
1

Fig. 14a. Chromatographie sur alumine acide (8.5) d u n mlange dhydrocarbures

aromatiques polynuclaires (PAH), luat 3 (4 ml de pentane :
CH2C12; 7 : 3).

a,
E: a,
Aal C
LI .a,
.-ln rl
h a $i
u - LI

._
ea,
a -
i d N
C E :
4 a,
-a,
a
4
c
Q Q P
I Y

al N
al + E:
C c a,
.al m

_i
U Iu Ll
id a,
LI u
c Li
c, id
al
Q
,
!

4 i

Fig. 14b. Chromatographie sur alumine acide (8.5) dun mlange dhydrocarbures
aromatiques polynuclaires (PAH); luat 4. (4ml CH C1 ).
2 2
 - 19 -

8.7.2 Essais blanc

Pendant l'opration, on prendra bien soin de ne pas contaminer les chan-

tillons ; par exemple, on vitera de laisser inutilement l'chantillon de sdiment,
le n-hexane ou l'extrait final en contact avec l'atmosphre ou d'autres sources
possibles de contamination. 11 faut vrifier frquemment que les solvants et l'appa-
reillage ne sont pas contamins en pratiquant des essais blanc. Le mieux cette
fin consiste procder l'ensemble de l'opration sans l'chantillon de sdiment.
Lorsque aucours des essais blanc la fluorescence est suffisamment intense pour
indiquer une contamination (c'est--dire que la fluorescence est suprieure celle
correspondant 1 microgramme par litre de chrysne), il convient d'liminer les
sources de contamination au lieu de corriger les donnes effectivement obtenues
d'aprs les rsultats des essais blanc.

8.7.3 Calcul de la concentration de l'chantillon initial

La concentration des hydrocarbures dans l'extrait d'chantillon, en qui-

valents chrysne, s'obtient par la courbe d'talonnage du chrysne et est corrige
en cas de fluorescence au cours des essais en blanc. La concentration de l'chan-
tillon initial en quivalents chrysne est alors calcule selon la formule
suivante :

A=--B
- x C
D

A = Concentration des hydrocarbures dans les chantillons initiaux en/,L4/g

B = Concentration dans l'extrait d'chantillon eny*g/ml

C = Volume de l'extrait en ml

D = Poids de l'chantillon initial en grammes

Le rsultat est la concentration en quivalents chrysne en/l.g/grammes.

8.7.4 Essai d'inhibition de la fluorescence

11 arrive des cas OU de fortes concentrations de composs autres que des

hydrocarbures peuvent tre prsentes dans l'chantillon et inhiber la fluorescence
des hydrocarbures dans celui-ci. On peut raliser l'exprience suivante pour vri-
fier si tel est le cas :

(i) on mesure la fluorescence de l'extrait d'chantillon ;

(ii) on mesure la fluorescence de la solution tmoin de chrysne ;

(iii) on combine des volumes gaux de l'extrait d'chantillon et de la solution

tmoin de chrysne et l'on mesure la fluorescence du mlange.

La fluorescence du mlange doit tre gale :

fluorescence de la solution fluorescence de

+
tSmoin de chrysne l'extrait d'chantillon
2 2
 - 20 -

Si la fluorescence est infrieure de 20 % ou plus l'intensit prvue, l'inhi-

bition est importante et il faut s'efforcer de purifier l'chantillon (8.6).

8.8 Chromatographie en phase gazeuse utilisant des colonnes garnies

Pour valuer la "teneur totale en ptrole" des sdiments, on peut utiliser

la chromatographie en phase gazeuse avec des colonnes garnies, quoique l'on perde
beaucoup d'informations. On injecte deux microlitres de l'extrait d'chantillon,
qui a t soumis une procdure de purification (8.6), dans le chromatographe en
phase gazeuse (voir Tableau 2 pour les conditions chromatographiques).

La solution ci-apres pourra servir d'chantillon tmoin : 2 ,ql d'une solution

contenant 150 mg de ptrole brut ou du petrole en question dans 25 mL d'hexane :
12 ag sont injects. Les chromatogrammes peuvent tre intgrs l'aide d'un int-
grateur ou d'un planimtre. I1 s'est rvl utile de n'intgrer qu'une "fentre" du
chromatogramme, par exempln, entre n-C
15
et n-C
26 '
- il faut alors intgrer et dter-
miner cette aire par )~4de ptrole de reference pour calculer la "quantit totale
de ptrole" eii utilisant la zone entre n-C et n-C
15 26'
I1 convient d'analyser le ptrole de rfrence en appliquant des conditions
identiques celles qui sont appliques pour les chantillons.

Tableau 2. Conditions de la chromatographie en phase gazeuse avec colonne garnie.

Un chromatographe en phase gazeuse quip d'un dtecteur ionisation de flamme

Gaz porteur : Azote -17 mi/min

Co1onne : 200 cm x 4 mm de diamtre intrieur 3 % SP 2100

sur Chromosorb W HMDSO maille 80-100

Temprature d'injection : 3OOOC

Temprature du collecteur : 350C

Programmation de la temprature : Valeur initiale 80C

Temps initial 3 min
Vitesse de programmation 8OC/min
Temps finai 15 min

Volume inject : 2 M1

8.9 Chromatographie en phase gazeuse utilisant des colonnes capillaires

de silice fondue

Un volume de 1 2 A l d'extrait d'chantillon soumis la procdure de spa-

ration ci-dessus (section 8.5) est inject par la technique de l'injection non
fractionne. Les conditions chromatographiques sont indiques dans le tableau 3.
 - 21 -

Tableau 3. Conditions de la chromatographie en phase gazeuse avec colonnes

capillaires

Chromatographe en phase gazeuse HP 5880A quip d'un dtecteur ionisation de

flamme.

Gaz porteur : Azote 8 psi (pression en livres par pouce

carr)I 1,5 mY/min

Gaz d'appoint : Azote 40 fi/min

Colonne : 25 m x 0 1 3 3 de diamtre intrieur.

Silice fondue SE-54

Temprature d'injection : 280C

Temprature du collecteur : 280C

Programmation de la temprature : Valeur initiale 4OoC

Temps initial 4 min
Vitesse de programmation 10"C/min
Temps final 15 min

Volume inject : 1,5 ,ul non fractionn

On mesure les aires des pics en utilisant un systme d'intgration lectronique

et on les identifie en comparant les temps de rtention de la chromatographie en
phase gazeuse avec ceux des solutions tmoins connues et avec les prcdentes ana-
lyses par chromatographie en phase gazeuse/spectromtrie de masse d'chantillons
analogues dans 'des conditions identiques et avec la mme colonne.

La quantification des pics identifis et intgrs s'effectue par comparaison

avec la norme interne la plus proche.

8.10 Chromatographie en phase gazeuse/spectromtrie de masse automatises

Un volume de 0,3 ml de l'extrait d'chantillon-soumis la procdure de puri-

fication ci-dessus (8.6) est inject par la technique de l'injection non fraction-
ne. Les conditions chromatographiques sont dcrites dans le tableau 4.
 - 22 -

Tableau 4. Conditions applicables au chromatographe en phase gazeuse/

spectromtre de masse automatiss (GC/MS/Comp.)

GC/MS/Comp. Finnigan, Modle 9000/3200~'/6100

Gaz porteur : Hlium 1,5 d/min

Colonne : 25 m x 0,2 mm diamtre intrieur.

Silice fondue Sp 2100

Temprature d'injection : 280C

Programmation de la temprature : Valeur initiale 2OoC, puis 20-100C

en 1 min
Temps initial 1 min
: Vitesse de programmation 6"C/min
partir de 100-230C
: Temps final 5 min isotherme

Volume inject : 0,3 fiL non fractionn

La colonne est prolonge jusqu' la source des ions sur le spectromtre de masse
3200 Finnigan. Les hydrocarbures aromatiques ci-aprs se sont rvls utilisables
pour les analyses en utilisant le mode de surveillance d'ions slectionns,
tableau 5.

Les figures 15a et 15b des pages 25 et 26 sont des exemples de chromatogrammes
de certains hydrocarbures aromatiques obtenus selon le mode de surveillance d'ions
slectionns.

Tableau 5. Hydrocarbures aromatiques slectionns pour les analyses

~~ ~~ ~~

Composants Ions molculaires

Naphta1ne m/z 128

Mthylnaphtalnes (C1) m/z 142
C -naphtalnes m/z 156
2
~

3
-
C naphtalnes m/z 170
Phnanthrne m/z 178
Mthylphnanthrnes (C m/z 192
1
C -phnanthr@nes m/z 206
2
Mthyldibenzothiophnes (C m/z 198
1
C -dibenzothiophnes m/z 212
2
C -dibenzothiophnes m/z 226
3
 - 23 -

La quantification des naphtalnes est fonde sur la norme interne, le biph-

nyle deutrique (ion-164). L'anthracne deutrique (ion-188) est utilis pour la
quantification du phnanthrne, du mthylphnantrne, du mthyldibenzothiophne ;
et le pyrne deutrique (ion-212) est utilis pour la quantification du dimthyl-
phnanthrne, du dimthyldibenzothiophne et du trimthyldibenzothiophne.

Les aires des diffrents pics sont calcules l'aide d'un ordinateur 6100
Finnigan.

Les facteurs de rponse des diffrents hydrocarbures aromatiques corres-

pondant aux solutions tmoins deutriques - le biphnyle, l'anthracne et le
pyrne - sont dtermins en injectant des quantits connues des composants aroma-
tiques choisis dans un mlange de ptrole brut Ekofisk (riche en naphtalnes et en
phnanthrnes) et de brut lger d'Arabie (riche en dibenzothiophnes).

La chromatographie du brut Ekofisk (20 mg) se fait sur une courte colonne
contenant de la silice (2,5 cm de silice dans une pipette Pasteur). Legel de silice
(maille 120-230) est activ pendant la nuit 5 105OC availt d'tre utilis. Les al-
canes (et quelques naphtalnes infrieurs) sont lus avec 7 ml de pentane. La
fraction aromatique est ensuite lue avec 5 ml de pentane. L'luat est dessch
et ensuite dissous dans 100 microlitres d'hexane.

Le ptrole brut lger d'Arabie est trait de la mme manire pour obtenir
un mlange aromatique riche en dibenzothiophnes.

Ces deux mlanges sont analyss par la chromatographie en phase gazeuse avec
un dtecteur ionisation de flamme, une colonne capillaire et dans les mmes con-
ditions que celles qui concernent les analyses par chromatographie en phase gazeuse/
spectromtrie de masse. On part du principe que les composants qui se ressemblent
donnent la mme rponse par poids unitaire. La composition des mlanges aromatiques
(en pourcentage) est calcule d'aprs les aires des chromatogrammes (phase gazeuse).
Lorsque cette composition est connue, des quantits exactes de naphtalne, 2,6-di-
mthylnaphtalne et 2,3,6-trimthylnaphtalne sont ajoutes pour permettre la
dtermination des naphtalnes. Du phnanthrne est ajout pour dterminer le mthyl-
phnanthrne et le mthyldibenzothiophne, et du fluoranthne est ajout pour la
dtermination du dimthylphnanthrne, du dimthyldibenzothiophne et du trimthyl-
dibenzothiophne. Les nouveaux mlanges sont alors analyss par chromatographie en
phase gazeuse et les aires des pics intgres. L'information est alors suffisante
pour dterminer les naphtalnes, les phnanthrnes et les dibenzothiophnes dans
le mlange aromatique.

Pour pouvoir calculer les facteurs de rponse des diffrents hydrocarbures

aromatiques Dar la mthode de la chromatographie en phase gazeuse/spectromtrie de
masse, des quantits connues des trois normes deutriques sont ajoutes aux mlanges
aromatiques et les chantillons sontensuite analyss par chromatographie en phase
gazeuse/spectromtrie de masse selon le mode de la surveillance d'ions slectionns.
Puisqu'on connalt alors la fois la quantit d'hydrocarbures aromatiques et les
normes deutriques, on peut calculer les facteurs de rponse.

Exemple :

Le facteur de rponse (fr) du naphtalne par rapport au biphnyle-d est le

nombre qui est multipli par l'aire du fragment 128 (le naphtalne est dkgct par
l'ion-128) pour obtenir la quantit exacte.
 - 24 -

Le facteur de rponse pour le naphtalne est calcul comme suit :

quantit connue de napht/aire du napht

fr =
quantit connue de la norme interne (biphnyle-d )/
10
aire de la norme interne

fr = 18,5/733351* = o,66
37,3/980978

On calcule le facteur de rponse pour le phnanthrne en utilisant comme

norme interne 1 'anthracene-d
10'
Le mlange aromatique normalis est compos de mlanges de brut Ekofisk et
de brut lger d'Arabie dans lesquels sont ajouts des volumes connus de solutions
tmoins deutriques. On dtermine les quantits d'hydrocarbures aromatiques dans
les mlanges de ptroles bruts par la mthode de la chromatographie en phase
gazeuse/spectromtrie de masse/surveillance d'ions slectionns et les facteurs de
rponse sont ensuite calculs (voir ci-dessus). Le mlange qui en rsulte est alors
utilis comme solution tmoin pour le calcul des facteurs de rponse utiliss pour
l'valuation des naphtalnes, des phnanthrnes et des dibenzothiophnes.

Tableau 6. Quantit en microgramme/millilitre des diffrents hydrocarbures

aromatiques dans le ptrole de rfrence dtermine par la
chromatographie en phase gazeuse (dtecteur ionisation de flamme)

Compos microgramme/ Compos microgramme/ Compos microgramme/

millilitre miIlilitre mi Ililitre

Naphtalne 18,5 Phnanthrne 6,2 C -phnanthrne 20,5

2
mth. napht. 81,6 ANTHRACENE-~10 33,O C -dibenzo-
thiophene 47,3

C2- napht. 115,6 mth. -phrian- 20,7 C -dibenzo- 29,8

thrne thiophene

C3- napht. 75,7 mth. -dibenzo- 29,3 PYRENE-D1O 33,2

thiophne

BIPHENYLE-~10 37,3

* La quantit de naphtalne, de phnanthrne, etc., provient du mlange

normalis.
 - 25 -

RROllFITSTRNDRRD.20-2-81

170

I TMN

L
164

! 156
1 DMN

99

o 1Q 200 300 400

Fig. 15a. Chromatogramme (phase gazeuse) de la solution aromatique tmoin

obtenu l'aide d'une colonne capillaire avec spectromtrie de
masse et dtection par surveillance d'ions slectionns reprsentant
les pics suivants :

Fichier AA1
* : 99-alcanes Fichier AA2 : 99-alcanes
128-naphtalne 156-dymthylnaphtalnes
1 42-mthyInaphtalnes 1 64-diphnyle-d 10
170-trimthylnaphtalnes (norme interne)
179-trimthylnaphtalnes

f Le fichier AA1 est l'espace de stockage dans le systme de donnes.

 - 26 -

- 1 198 226
MD
3
TMD
I

- 192 212

-
- r
188
IS DMP

-
178
IP
- -

Fig. 15b. Chromatogramme (phase gazeuse) de la solution aromatique tmoin

obtenu l'aide d'une colonne capillaire avec spectromtrie de
masse et dtection par surveillance d'ions slectionns repr-
sentant les pics suivants :

Fichier AA4 : 178-phnanthrne Fichier AA5 : 202-fluoranthne, pyrne

188-anthracne-d 206-dimthylphnanthrnes
10 212-dimthyldibenzothio-
(norme interne)
192-mthylphPnanthrnes phne, pyrne-d10
198-mthyldibenzothiophne (norme interne)
226-trimthyldibenzothio-
phne
 - 27 -

9. PRINCIPES PERMETTANT D'ASSURER LA QUALITE DES DONNEES

Afin d'assurer la meilleure qualit possible aux analyses d'chantillons de

l'environnement, le Comit sur l'amlioration de l'environnement de 1'American
Chemical Society (ACS) a demand son Sous-Comit sur la chimie analytique de
l'environnement d'laborer une srie de "Directives pour l'acquisition des donnes
et l'valuation de leur qualit dans le domaine de la chimie de l'environnement''.
Ces directives visent assurer les conditions d'une analyse chimique fiable
d'chantillons de l'environnement et devraient donc permettre aux laboratoires
d'changer et d'utiliser avec plus de confiance les donnes obtenues. Le prsent
chapitre est fond essentiellement sur les ides qui inspirent ces directives.

On effectue des analyses de l'environnement des fins multiples (voir intro-

duction). Cette large gamme d'applications des donnes d'analyse et les nombreuses
manires d'utiliser l'information pourront ncessiter diffrents niveaux de certi-
tude. I1 est donc important d'tablir le degr d'exactitude ncessaire dans chaque
situation. Les analyses de l'environnement se heurtent de nombreuses difficults :
un grand nombre de composs organiques, une grande diversit de paramtres, l'ab-
sence ou l'insuffisance de connaissances techniques, la dformation inhrente
l'chantillonnage, les erreurs systmatiques et humaines figurent parmi celles qui
sont mentionnes dans les "Directives".

9.1 Planification. En raison de tous ces problmes, il est trs difficile de par-
venir l'exactitude. Il. est donc particulirement important de bien planifier
chaque tape de l'entreprise. Un tel plan ou modle intervient implicitement ou
explicitement dans tout processus de mesure. Les donnes sont produites pour servir
rpondre des questions qui permettront de tirer des conclusions. Si le modle,
c'est--dire l'ensemble de relations entre les donnes et le problme, est dfec-
tueux, les conclusions tires seront galement dfectueuses, mme si les mesures
sont de bonne qualit.

Le plan devrait s'appuyer sur les efforts conjugus de l'analyste, qui connat
les techniques de mesure, du scientifique qui utilisera les donnes et du statis-
ticien qui les'valuera en dfinitive. En outre, aucun programme de mesure ne
devrait tre entrepris avant l'tablissement d'un tel plan. Celui-ci doit contenir
les aspects gnraux du problme et le systme d'analyse appliquer afin de les
rsoudre, de prfrence en se rfrant des dtnils crits des plans et procdures
(protocoles).

9.2 Assurance de qualit. Afin de dfinir les problmes et de les rsoudre, il

faudrait concevoir un programme facteur de qualit qui comprendrait les aspects
suivants :

1. S'assurer un personnel qualifi, appliquer des mthodes prvues par crit

et valides et disposer de laboratoires bien construits, bien quips et
bien entretenus.

2. Fournir des chantillons reprsentatifs et des chantillons tmoins.

3. Utiliser des objets en verre, des solvants et tout matriel d'essai de

haute qualit.

4. Etalonner, ajuster et entretenir le matriel.

5. Utiliser des chantillons tmoins et des chantillons normaliss avec

les observations utiles correspondantes.
 - 28 -

6. Observer directement l'excution de certains essais critiques.

7. Examiner et critiquer les rsultats.

8. Evaluer l'efficacit interne et externe.

9. Utiliser des doubles des chantillons.

10. Comparer les rsultats avec ceux d'autres laboratoires (intertalonnage)

11. Rpondre aux plaintes des utilisateurs.

12. Surveiller les rsultats.

13. Corriger les carts par rapport aux normes de qualit.

Ces lments de base facteurs de qualit dfinissent les conditions que les
protocoles crits et, notamment, toutes les procdures d'analyse doivent prvoir
pour obtenir des rsultats fiables.

On a beaucoup plus de chances d'obtenir des donnes exactes lorsqu'on se r-

fre efficacement des solutions de rfrence internes et externes et lorsque le
laboratoire a prouv qu'il se conformait troitement aux normes d'exactitude accep-
tables en participant une opration d'intertalonnage.

9.3 Dfinitions de quelques termes statistiques

9.3.1 d'une mthode d'analyse chimique dfinit jusqu' quel degr

la valeur moyenne des mesures est due la substance dterminer et non
d'autres substances qui pourraient tre prsentes dans l'chantillon analys.

9.3.2 La sensibilit d'une mthode d'analyse chimique est fonction de la plus

petite modification de la quantit mesurer qui produise un changement
dcelable dans les rsultats. Dans ce cas, ce terme est synonyme de dcelabilit
minimale.

9.3.3 La prcision d'une mthode d'analyse chimique dfinit jusqu' quel degr une
dtermination reprsentative d'une substance dans un chantillon donnera une
mesure qui approche la mesure moyenne d'un nombre infini de dtermination du mme
chantillon. (En d'autres termes, la prcision implique la reproductibilit des
rsultats de l'analyse).

9.3.4 L'exactitude d'une mthode d'analyse chimique dfinit jusqu' quel degr la
valeur moyenne des mesures obtenues par la mthode approche de la valeur
vritable de la substance mesure (les effets perturbateurs d'autres substances
tant limins matriellement ou mathmatiquement).
 - 29 -

10. CONCLUSIONS

Les mthodes d'analyse des hydrocarbures ptroliers ne sont pas nombreuses et

le choix est dict par la situation et l'objet de l'analyse. Toutefois elles sont
sensibles et slectives de sorte que les diffrents hydrocarbures aromatiques
pourrcnt tre dtermins dans les sidiments des degrs de prcision atteignant
10-9 g/g de poids sec de sdiment. La figure 16 prsente un schma de la mthode
d'analyse des chantillons de sdiment la plus courante aujourd'hui.

I1 est possible actuellement de sparer des centaines de diffrents composants

aromatiques mais il existe trs peu de solutions tmoins sur le march. Toutefois,
si les composants qui peuvent tre identifis sont analyss soit en utilisant des
solutions tmoins et les temps de rtention soit par la chromatographie en phase
gazeuse/spectromtrie de masse, ces composants peuvent alors tre surveills de
sorte qu'on pourra discerner une augmentation ou une diminution dans le temps des
concentrations dans les sdiments et, par consquent, tablir des tendances.

Extraction par Saponification directe

hydrolyse alcaline

TOTAL DES SUBSTANCES

siparation d a n s
IC r,c:ntane
I
CiFaratiGn d a n s
l e pentane
I I
pcs<;t DcsGe

LIPIDES !ION
XAPONIFIARLFS
I
Elimination Elinination d u soiilre

I cnrimatoqraphie e n colonne
I
pe*i.e

AROIlATICUEs
TR.ALCENES (2-3 cyclesi (3 cyclesi
TR.!:TTiIYL CLTOirifs

fl "i~rc5lFn'c -uv

Fig. 16 - Schma d'une mthode d'analyse des hydrocarbures contenus dans les
chantillons de sdiments (d'apres Farrington, 1980).
 - 30 -

Au cours des annes venir, l'accroissement de l'activit en mer demandera

un surcrot d'efforts de la part des chimistes la fois pour analyser les chan-
tillons recueillis in situ et pour effectuer des recherches en laboratoire afin de
rsoudre des questions telles que la solubilit des hydrocarbures aromatiques, en
gnral, et les variations dans le temps de la solubilit des diffrents composants
aromatiques des sdiments.
 - 31 -

APPENDICE I

GrouDe de travail ad hoc du GEMS1 sur l'analvse des

hydrocarbures ptroliers dissous/disperss dans l'eau de mer

Woods Hole, Massachusetts, Etats-Unis d'Amrique

16-18 mars 1981, pages 4-5 de l'original

Utilisation de la fluorescence-UV dans un programme de surveillance

de la pollution par le ptrole

Les techniques de mesure ne constituent qu'une partie de l'ensemble du systme

de surveillance, qui prvoit des oprations de planification, d'chantillonnage,
d'extraction, de mesure, de relev et d'interprtation des donnes. La plupart de
ces phases sont identiques quelle que soit la technique de mesure utilise dans le
programme de surveillance. Une valuation complte de la simplicit, de la sensibi-
lit et du cot doit tenir compte de toutes ces phases.

Le Groupe ad hoc a estim qu'il fallait prendre en considration les rserves

ci-aprs lorsqu'on dcide d'utiliser la fluorescence-UV pour la surveillance des
hydrocarbures ptroliers dissous ou disperss :

i) La technique de la fluorescence-UV donne une mesure relativement gros-

sire des hydrocarbures ptroliers dissous/disperss et il faut dis-
poser d'un nombre suffisant de donnes (par exemple, des centaines
d'chantillons pour le golfe du Mexique) pour pouvoir dterminer avec
une certitude satisfaisante les "points chauds de la pollution" et un
certain nombre de tendances dans la concentration des hydrocarbures
ptroliers dissous/disperss.

(ii) C'est une technique qui est facilement introduite dans les pays dont le
potentiel scientifique est en cours de constitution ; c'est pourquoi son
application a t recommande pour le MAFQOLMON pour les hydrocarbures
ptroliers dissous/disperss dans l'eau de mer. Toutefois, les pays
dvelopps matrisant bien d'autres mthodes que la fluorescence-UV,
telles que la chromatographie en phase gazeuse/spectromtrie de masse,
qui permettent des analyses plus dtailles, doivent tre encourags
appliquer ces mthodes aux problmes de la pollution en vue de mieux
comprendre non seulement ce que mesure la fluorescence-W mais aussi
l'ensemble de la rpartition des diffrents types de composs des hydro-
carbures ptroliers dissous/disperss. En' outre, le Groupe ad hoc a
estim que les pays dvelopps devaient aider les pays en dveloppement
acqurir ces appareils plus perfectionns et se former aux techniques
d'analyse dans le cadre des activits TEMA de la COI.

(iii). La collecte des donnes n'est que la premire tape d'un tel programme
de surveillance et il convient de prvoir une valuation priodique des
donnes et l'laboration de recommandations s'inspirant de celles-ci.
Cela est vrai quelle que soit la mthode emFloye.
 - 32 -

Des limitations importantes sont inhrentes la technique de la fluo-

rescence-UV. C'est pourquoi cette technique doit tre considre comme
un point de dpart pour ce type de programme de surveillance dont la
complexit et la porte s'accrotront mesure que les connaissances
techniques et le matriel disponible atteindront des niveaux permettant
d'appliquer des techniques plus perfectionnes.

Le programme doit prvoir un effort soutenu d'exprimentation en ce qui

concerne les effets de facteurs tels que l'altration de divers ptroles
bruts sur les caractristiques de leur fluorescence.

Le programme devrait prvoir que des chantillons reprsentatifs pro-

venant de diffrentes rgions seront soumis en laboratoire une analyse
plus dtaille par chromatographie en phase gazeuse avec colonne capil-
laire de verre (GCGC) et par GCGC/spectromtrie de masse, afin de mieux
valuer les types et, si possible, les sources des composs qui provo-
quent la fluorescence mesure.

I1 a t signal que les autres mthodes telles que la chromatographie en

phase gazeuse avec colonne capillaire de verre et la chromatographie en phase
gazeuse/spectromtrie de masse ne comportent pas les problmes de normalisation
inhrents la mthode par fluorescence-UV. Le principal point considrer dans
l'application de ces mthodes une activit mondiale telle que le MAWOLMON est
le caractre limit des appareils disponibles et des comptences techniques. Toute-
fois, tant donn que ces appareils et que ces comptences sont disponibles dans
quelques pays dvelopps et le seront peut-etre dans un proche avenir dans un grand
nombre de pays en dveloppement, le MARPOLMON devrait encourager toutes les fois
que cela sera possible l'application de ces techniques en liaison avec la fluores-
cence-UV, ce qui permettra de mieux comprendre la rpartition et l'volution des
hydrocarbures ptroliers dans le milieu marin.