CHOLESTEROL -LQ

Cholesterol-LQ
CHOD-POD. Liquid

Quantitative determination of cholesterol CALCULATIONS

IVD ( A ) Sample
x 200 (Standard conc.) = mg/dL cholesterol in the sample
( A ) S tan dard
Store at 2-8C
Conversion factor: mg/dL x 0.0258= mmol/L.
PRINCIPLE OF THE METHOD
The cholesterol present in the sample originates a coloured QUALITY CONTROL
complex, according to the following reactions: Control sera are recommended to monitor the performance of assay
CHE procedures: SPINTROL H Normal and Pathologic (Ref. 1002120 and
Cholesterol esters + H2O
Cholesterol + fatty acids
1002210).
CHOD
Cholesterol + O2 4-Cholestenona + H2O2 If control values are found outside the defined range, check the
POD instrument, reagent and calibration for problems.
2 H2O2+ Phenol + 4-Aminophenazone Quinonimine + 4H2O Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and
The intensity of the color formed is proportional to the cholesterol corrective actions if controls do not meet the acceptable tolerances.
concentration in the sample1,2.
REFERENCE VALUES
CLINICAL SIGNIFICANCE Risk evaluation5,6:
Cholesterol is a fat-like substance called a lipid that is found in all Less than 200 mg/dL Normal
body cells. The liver makes all of the cholesterol the body needs 200-239 mg/dL Borderline
to form cell membranes and to make certain hormones. 240 mg/dL and above High
The determination of serum cholesterol is one of the important These values are for orientation purpose; each laboratory should
tools in the diagnosis an classification of lipemia. establish its own reference range.
High blood cholesterol is one of the major risk factors for heart
disease5,6. PERFORMANCE CHARACTERISTICS
Clinical diagnosis should not be made on a single test result; it Measuring range: From detection limit 0.00 mg/dL to linearity limit
should integrate clinical and other laboratory data. 1000 mg/dL.
If the concentration is greater than linearity limit dilute 1/2 the sample
REAGENTS with ClNa 9 g/L and multiply the result by 2.
PIPES pH 6.9 90 mmol/L Precision:
Phenol 26 mmol/L Intra-assay (n=20) Inter-assay (n=20)
Cholesterol esterase (CHE) 1000 U/L Mean (mg/dL) 99 201 96 197
R
Cholesterol oxidase (CHOD) 300 U/L SD 0,83 1,41 1,75 6,41
Peroxidase (POD) 650 U/L
CV (%) 0,84 0,70 1,82 3,26
4 Aminophenazone (4-AP) 0.4 mmol/L
Cholesterol aqueous primary standard Sensitivity: 1 mg/dL = 0.0019 (A).
CHOLESTEROL CAL Accuracy: Results obtained using SPINREACT reagents did not show
200 mg/dL
systematic differences when compared with other commercial reagent.
PREPARATION The results obtained using 50 samples were the following:
All the reagents are ready to use. Correlation coefficient (r): 0. 99549.
Regression equation: y=0,911x + 2,624.
STORAGE AND STABILITY The results of the performance characteristics depend on the analyzer
All the components of the kit are stable until the expiration date on used.
the label when stored tightly closed at 2-8C, protected from light
and contaminations prevented during their use. INTERFERENCES
Do not use reagents over the expiration date. No interferences were observed to hemoglobin up to 5 g/L and bilirubin
Signs of reagent deterioration: up to 10 mg/dL1,2.
- Presence of particles and turbidity. A list of drugs and other interfering substances with cholesterol
- Blank absorbance (A) at 505 nm 0.26. determination has been reported3,4.

ADDITIONAL EQUIPMENT NOTES

1. CHOLESTEROL CAL: Proceed carefully with this product because due
- Spectrophotometer or colorimeter measuring at 505 nm.
its nature it can get contamined easily.
- Matched cuvettes 1.0 cm light path. 2. LCF (Lipid Clearing Factor) is integrated in the reagent.
- General laboratory equipment. 3. Calibration with the aqueous standard may cause a systematic error in
SAMPLES automatic procedures. In these cases, it is recommended to use a
serum Calibrator.
Serum or plasma1,2: Stability of the sample 7 days at 2-8C or
4. Use clean disposable pipette tips for its dispensation.
freezing at 20C will keep samples stable for 3 months. 5. SPINREACT has instruction sheets for several automatic
PROCEDURE analyzers. Instructions for many of them are available on request.
1. Assay conditions: BIBLIOGRAPHY
Wavelength: . . . . . . . . . . . . . .. . . 505 nm (500-550) 1. Naito H.K. Cholesterol. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis.
Cuvette: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. 1 cm light path Toronto. Princeton 1984; 1194-11206 and 437.
2. Meiattini F. et al. The 4-hydroxybenzoate/4-aminophenazone Chromogenic System.
Temperature . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . .37C /15-25C Clin Chem 1978; 24 (12): 2161-2165.
2. Adjust the instrument to zero with distilled water. 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
3. Pipette into a cuvette: 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Blank Standard Sample 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
R (mL) 1.0 1.0 1.0 PACKAGING
(Note 1-2)
Standard (L) -- 10 -- Ref: 41020 R:2 x 50 mL, CAL: 1 x 2 mL
Cont.
Sample (L) -- -- 10 Ref: 41022 . R: 2 x 100 mL, CAL: 1 x 2 mL
4. Mix and incubate for 5 min at 37C or 10 min at 15-25C. Ref. 41021 R: 2 x 250 mL, CAL: 1 x 5 mL
5. Read the absorbance (A) of the samples and calibrator, against Ref. 41019 R:1 x 1000 mL, CAL: 1 x 5 mL
the Blank. The colour is stable for at least 60 minutes.

BSIS48-I 13/06/13 SPINREACT,S.A./S.A.U Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: spinreact@spinreact.com
 CHOLESTEROL -LQ

Colesterol-LQ
CHOD-POD. Lquido

Determinacin cuantitativa de colesterol Factor de conversin: mg/dL x 0,0258= mmol/L.

IVD
Conservar a 2-8C CONTROL DE CALIDAD
Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control
PRINCIPIO DEL MTODO valorados:SPINTROL H Normal y Patolgico (Ref. 1002120 y
El colesterol presente en la muestra origina un compuesto coloreado 1002210).
segn la reaccin siguiente: Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, se
steres colesterol + H2O
CHE
Colesterol + cidos grasos debe revisar los instrumentos, los reactivos y la calibracin.
Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y
CHOD
Colesterol + O2 4-Colestenona + H2O2 establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan
POD con las tolerancias.
2 H2O2 +Fenol + 4-Aminofenazona Quinonimina + 4H2O
La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de VALORES DE REFERENCIA
colesterol presente en la muestra ensayada1,2. Evaluacin del riesgo5,6:
Menos de 200 mg/dL Normal
SIGNIFICADO CLNICO 200-239 mg/dL Moderado
El colesterol es una sustancia grasa presente en todas las clulas del 240 mg/dL o ms Alto
organismo. El hgado produce naturalmente todo el colesterol que Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
necesita para formar las membranas celulares y producir ciertas
establezca sus propios valores de referencia.
hormonas. La determinacin del colesterol es una de las
herramientas ms importantes para el diagnstico y clasificacin de CARCTERSTICAS DEL MTODO
las lipemias. El aumento del nivel de colesterol es uno de los Rango de medida: Desde el lmite de deteccin 0,00 mg/dL hasta el
principales factores de riesgo cardiovascular5,6. lmite de linealidad 1000 mg/dL.
El diagnstico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los
Si la concentracin de la muestra es superior al lmite de linealidad,
datos clnicos y de laboratorio.
diluir 1/2 con ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
REACTIVOS Precisin:
PIPES pH 6.9 90 mmol/L Intraserie (n=20) nterserie (n=20)
Fenol 26 mmol/L Media (mg/dL) 99 201 96 197
Colesterol esterasa (CHE) 1000 U/L SD (mg/dL) 0,83 1,41 1,75 6,41
R
Colesterol oxidasa (CHOD) 300 U/L CV (%) 0,84 0,70 1,82 3,26
Peroxidasa (POD) 650 U/L
4 - Aminofenazona (4-AF) 0,4 mmol/L Sensibilidad analtica: 1 mg/dL = 0,0019 (A).
Patrn primario acuoso de Colesterol Exactitud: Los reactivos SPINREACT no muestran diferencias
COLESTEROL CAL 200 mg/dL sistemticas significativas cuando se comparan con otros reactivos
comerciales.
PREPARACIN Los resultados obtenidos con 50 muestras fueron los siguientes:
Todos los reactivos estn listos para su uso. Coeficiente de correlacin (r): 0,99549.
Ecuacin de la recta de regresin: y=0,911x + 2,624.
CONSERVACIN Y ESTABILIDAD Las caractersticas del mtodo pueden variar segn el analizador
Todos los componentes del kit son estables hasta la fecha de utilizado.
caducidad indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen
los viales bien cerrados a 2-8C, protegidos de la luz y se evita su INTERFERENCIAS
contaminacin. No usar reactivos fuera de la fecha indicada. No se han observado interferencias de hemoglobina hasta 5 g/L y
Indicadores de deterioro de los reactivos: bilirrubina hasta 10 mg/dL1,2. Se han descrito varias drogas y otras
- Presencia de partculas y turbidez. substancias que interfieren en la determinacin del colesterol3,4.
- Absorbancias (A) del Blanco a 505 nm 0,26.
NOTAS
1. CHOLESTEROL CAL: Debido a la naturaleza del producto, es
MATERIAL ADICIONAL aconsejable tratarlo con sumo cuidado ya que se puede contaminar con
- Espectrofotmetro o analizador para lecturas a 505 nm. facilidad.
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. 2. LCF(Lipid Clearing Factor) est integrado en el reactivo.
- Equipamiento habitual de laboratorio. 3. La calibracin con el Patrn acuoso puede dar lugar a errores
sistemticos en mtodos automticos. En este caso, se recomienda
MUESTRAS utilizar calibradores sricos.
Suero o plasma1,2. Estabilidad de la muestra 7 das a 2-8C y 3 4. Usar puntas de pipeta desechables limpias para su dispensacin.
meses si se mantiene la muestra congelada (-20C). 5. SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicacin
de este reactivo en distintos analizadores.
PROCEDIMIENTO
1. Condiciones del ensayo: BIBLIOGRAFA
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . 505 nm (500-550). 1. Naito H.K. Cholesterol. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .1 cm paso de luz Louis. Toronto. Princeton 1984; 1194-11206 and 437.
Temperatura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37C /15-25C 2. Meiattini F. et al. The 4-hydroxybenzoate/4-aminophenazone Chromogenic
System. Clin Chem 1978; 24 (12): 2161-2165.
2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada. 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press,
3. Pipetear en una cubeta: 1995.
Blanco Patrn Muestra 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
R (mL) 1,0 1,0 1,0 5. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
Patrn (Nota1-2) (L) -- 10 -- 6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
Muestra (L) -- -- 10 PRESENTACIN
4. Mezclar e incubar 5 min a 37C 10 min a 15-25C. Ref: 41020 R:2 x 50 mL, CAL: 1 x 2 mL
5. Leer la absorbancia (A) del patrn y la muestra, frente al Cont.
Ref: 41022 . R: 2 x 100 mL, CAL: 1 x 2 mL
Blanco de reactivo. El color es estable como mnimo 60
minutos. Ref. 41021 R: 2 x 250 mL, CAL: 1 x 5 mL
Ref. 41019 R:1 x 1000 mL, CAL: 1 x 5 mL
CLCULOS
( A ) Muestra
x 200 (Conc. Patrn) = mg/dL de colesterol en la muestra
( A ) Patrn
BSIS48-E 13/06/13 SPINREACT, S.A/S.A.U Ctra.Santa Coloma, 7 E-171716 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN
Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: spinreact@spinreact.com