BACTERIOLOGA 1 Pag.

1 USAMEDIC 2017

LOS SERES VIVOS

BACTERIOLOGIA
DOMINIOS
Dr. Juan Vega Bazalar BACTERIA
ARCHAEA
Medicina Interna
EUKARYA
HNGAI

USAMEDIC

LOS SERES VIVOS DOMINIOS

DEFINICION
Conjunto de tomos y molculas que forman
una estructura material muy organizada y
compleja que se relaciona con el medio
ambiente y que tienen la capacidad de
desarrollar las funciones bsicas de la vida.
La propiedades bsicas de un ser vivo son:
organizacin, homeostasis, irritabilidad,
metabolismo, desarrollo y reproduccin.

LOS SERES VIVOS

LOS SERES VIVOS
DEFINICION
La materia que compone los seres vivos esta REINOS
formada en un 95% por 4 bioelementos REINO ARCHAEABACTERIA
(tomos) que son el carbono, hidrgeno, REINO EUBACTERIA
oxgeno y nitrgeno a partir de los cuales se REINO PROTISTA
forman las biomolculas. REINO FUNGI
Existen 2 tipos de biomolculas: REINO PLANTAE
Orgnicas: glcidos, lpidos, protenas y cidos REINO ANIMALIA
nucleicos.
Inorgnicos: agua, sales minerales y gases.

REINOS
LOS SERES VIVOS
CATEGORIAS TAXONOMICAS

DOMINIO
REINO
FILO
CLASE
ORDEN
FAMILIA
GENERO
ESPECIE
SUBESPECIE
BACTERIOLOGA 1 Pag. 2 USAMEDIC 2017

ROBERT HOOKE
LOS SERES VIVOS

DOMINIO BACTERIA
REINO
EUBACTERIA
DOMINIO ARCHAEA
REINO
ARCHAEABACTERIA
DOMINIO EUKARIA
REINOS
PROTISTA
FUNGI
PLANTAE
ANIMALIA

LOS SERES VIVOS

LOS SERES VIVOS
PROCARIOTICOS
TIPOS DE CELULAS BACTERIAS
CIANOBACTERIAS
CELULAS PROCARIOTICAS
ARQUEOBACTERIAS
DOMINIO BACTERIA
DOMINIO ARCHAEA EUCARIOTICOS
PROTOZOOS
CELULAS EUCARIOTICAS
HONGOS
DOMINIO EUKARIA
PLANTAS
ANIMALES

LOS SERES VIVOS

CARACTERISTICA CEL. BACTERIANA CELULA HUMANA
PROCARIOTICA EUCARIOTICA
DNA/MEMB. NO SI
NUCLEAR
DIVISION MITOTICA NO SI

DNA ASOCIADO A NO SI
HISTONAS
N CROMOSOMAS UNO MAS DE UNO

ORGANELAS CON NO SI
MEMBRANAS
TAMAO RIBOSOMA 70 S 80 S

PARED CELULAR SI NO
PEPTIDOGLICANO

EL MUNDO MICROBIANO CELULA PROCARIOTICA

Clasificacin Woese et. al. 1977
REINO CELULA
EUBACTERIA PROCARIOTICA BACTERIAS
ACTINOMICETOS
ARCHAEBACTERIA PROCARIOTICA BACTERIAS

PROTISTA EUCARIOTICA PROTOZOOS

FUNGI EUCARIOTICA HONGOS

PLANTAE EUCARIOTICA PLANTAS

ANIMALIA EUCARIOTICA ARTROPODOS

MAMIFEROS
HOMBRE
BACTERIOLOGA 1 Pag. 3 USAMEDIC 2017

CELULA BACTERIANA LOS SERES VIVOS

TAXONOMIA

BACTERIA (D)
EUBACTERIA (R)
PROTEOBACTERIA (P)
GAMMAPROTEOBACTERIA (C)
ENTEROBACTERIALES (O)
ENTEROBACTERIACEAE (F)
ESCHERICHIA (G)
E. COLI (E)

CELULA EUCARIOTICA
LOS SERES VIVOS

RESUMEN: LOS PARASITOS SON:

ORGANISMOS UNI O PLURICELULARES
CELULAS EUCARIOTICAS
PERTENECEN AL DOMINIO EUKARIA
REINO PROTISTA O ANIMALIA

CELULA EUCARIOTICA
LOS SERES VIVOS
TAXONOMIA

EUKARIA (D)
PROTISTA (R)
SARCOMASTIGOPHORA (P)
ZOOMASTIGOPHOREA (C)
DIPLOMONADIDA (O)
HEXAMITIDAE (F)
GIARDIA (G)
INTESTINALIS (E)

LOS SERES VIVOS LOS SERES VIVOS

RESUMEN: LAS BACTERIAS SON: RESUMEN: LOS HONGOS SON:

ORGANISMOS UNICELULARES ORGANISMOS UNI O PLURICELULARES
CELULAS PROCARIOTICAS CELULAS EUCARIOTICAS
PERTENECEN AL DOMINIO BACTERIA PERTENECEN AL DOMINIO EUKARIA
REINO EUBACTERIA REINO FUNGI
BACTERIOLOGA 1 Pag. 4 USAMEDIC 2017

ANTONIE VAN LEEUWENKOEK

LOS SERES VIVOS
TAXONOMIA

EUKARIA (D)
FUNGI (R)
ASCOMYCOTA (P)
HEMIASCOMYCETES (C)
SACCHAROMYCETALES (O)
SACCHAROMYCETACEAE (F)
CANDIDA (G)
ALBICANS (E)

BACTERIOLOGIA
Estafilococo aureus
LOS SERES VIVOS

SER HUMANO
ORGANISMOS PLURICELULARES
SON CELULAS EUCARIOTICAS
PERTENECEN AL DOMINIO EUKARYIA
REINO ANIMALIA

BACTERIOLOGIA
Eschericha coli
LOS SERES VIVOS
TAXONOMIA

EUKARIA (D)
ANIMALIA (R)
CHORDATA (P)
MAMMALIA (C)
PRIMATES (O)
HOMINIDAE (F)
HOMO (G)
SAPIENS (E)
AAU (SE)

BACTERIOLOGIA
Vibrio cholerae
EL MUNDO MICROBIANO

MICROBIO
MICRO : PEQUEO
BIOS : VIDA
MICROBIOLOGIA
MICRO : PEQUEO
BIOS : VIDA
LOGOS : CIENCIA
BACTERIOLOGA 1 Pag. 5 USAMEDIC 2017

BACTERIOLOGIA
Mycobacterium tuberculosis BACTERIOLOGIA
1.- Glicocalix: est compuesta de polmeros
2.- Pared celular: separa a la bacteria del medio
que la rodea.
3.- Periplasma: espacio entre la pared celular y
membrana citoplasmtica.
4.- Membrana citoplasmtica: separa el
citoplasma de la pared celular.
5.- Citoplasma: es una solucin coloidal que
contiene elementos nucleares, inclusiones
citoplasmticas (vacuolas, vesculas, etc.) y
ribosomas.
6.- Flagelos: nacen en el citoplasma y son
estructuras de locomocin.
7.- Fimbrias o pili: formaciones piliformes que
nacen en el citoplasma.

BACTERIOLOGIA
Treponema pallidum BACTERIOLOGIA
BACTERIAS : Glicocalix
Compuesto por polisacridos y en
menor proporcin por polipptidos
Si est organizado en una estructura
definida y est firmemente adherido a la
pared celular se llama cpsula de lo
contrario se llama capa mucilaginosa
Funciones: Proteccin, adherencia,
material de reserva, factor de virulencia
(opsonizacin y fagocitosis)

BACTERIOLOGIA CAPSULA GLICOCALIX - BIOPELICULA

BACTERIAS: Caractersticas
No poseen Membrana Nuclear
Poseen un solo cromosoma circular
No poseen organelas rodeadas por membranas
Presentan Pared Celular de Peptidoglicano
Membrana citoplasmtica formada por bicapa
de fosfolpidos y protenas
Sus membranas no contienen esteroles
Reproduccin por divisin binaria
Los ribosomas son 70S formados por
subunidades 30S y 50S
Tamao de 0.5 5 micras
La mayora son de vida libre

CELULA BACTERIANA BACTERIOLOGIA

BACTERIOLOGA 1 Pag. 6 USAMEDIC 2017

BACTERIOLOGIA BACTERIOLOGIA
BACTERIAS: Pared celular Bacterias Gram (-)
No se encuentra en la clula humana Presencia de membrana externa
Componente principal: peptidoglicano Lipopolisacrido
N-acetil murmico y N-acetil glucosamina Porcin lipdica A
Pentapptidos Porcin polisacrido (Antgeno O)
Sntesis en el citoplasma Canales formado por porinas
Pared rgida que da forma a la bacteria Protenas receptoras de nutrientes
Falla en su estructura causa la lisis Capa delgada de peptidoglicano
Presencia del espacio periplsmico
Membrana citoplasmtica

BACTERIOLOGIA BACTERIAS GRAM (-)

Bacterias Gram (+)

Pared celular
Capa gruesa de peptidoglicano
Presencia del polisacrido cido teicoico
Presencia de protenas de superficie
Membrana citoplasmtica

BACTERIAS GRAM (+) ESTRUCTURA DEL LIPOPOLISACARIDO

BACTERIOLOGIA BACTERIOLOGIA
BACTERIOLOGA 1 Pag. 7 USAMEDIC 2017

BACTERIOLOGIA
BACTERIOLOGIA Membrana citoplasmtica
Treponema palidum
Mycobacterias
Clamidias
Ricketsias
Mycoplasma pneumoniae

BACTERIOLOGIA
BACTERIOLOGIA Membrana citoplasmtica
Mycoplasma

BACTERIOLOGIA BACTERIOLOGIA
BACTERIAS: Citoplasma
BACTERIAS: Membrana citoplasmtica Fluido que contiene sustancias disueltas y
Es una bicapa fosfolpidos 20-30% partculas en suspensin como los ribosomas
El 80% del citoplasma es agua y el resto esta
Contiene diversas protenas 50-70% dado por cidos nucleicos, carbohidratos,
Funciones: protenas, lpidos, iones orgnicos,
compuestos de bajo peso molecular y
Barrera osmtica
partculas.
Transporte Los ribosomas se encuentran libres en el
Transduccin de energa citoplasma o adheridos a la membrana
Biosntesis citoplasmtica
Centro de replicacin del DNA Grnulos: sirven como material de reserva.
Ejm volutina que es reserva de alta energa en
Punto de anclaje para los flagelos la forma de metafosfato polimerizado

BACTERIOLOGIA
BACTERIOLOGIA
BACTERIAS: Citoplasma
Nucleoide: Es el rea del citoplasma en la cual
se encuentra localizado el DNA. El DNA de las
clulas procariticas en una molcula simple
circular y contiene alrededor de 2000 genes
Plsmidos: Son extracromosomales. Son
molculas DNA circulares de doble cadena
que son capaces de replicar independiente del
cromosoma bacteriano.
Transposomas: Son piezas de DNA. Tienen
genes que pueden codificar enzimas que
inducen resistencia a ATB, toxinas o enzimas
metablicas que pueden causar mutaciones.
BACTERIOLOGA 1 Pag. 8 USAMEDIC 2017

BACTERIOLOGIA
BACTERIAS: Flagelos
Flagelos: Filamentos helicoidales que se
extienden desde el citoplasma a travs de la
pared celular. Son los responsables de los
movimientos de las bacterias en los lquidos.
Tienen tres partes cuerpo basal, gancho y
filamento. El filamento est compuesto de una
protena llamada flagelina. Los flagelos funcionan
como un sacacorcho
BACTERIOLOGIA
BACTERIAS: Fimbrias
Formaciones piliformes no helicoidales, no
tiene relacin con el movimiento
Suelen ser mas cortos, mas delgados y mas
numerosos que los flagelos
Nacen de la citoplasma sin embargo no se
conocen que posean estructuras de anclaje a
la clula
Estn formados por subunidades de una
protena llamada pilina
Tienen por funcin la adherencia y tiene que
ver en la reproduccin sexual de las bacterias

BACTERIOLOGIA BACTERIOLOGIA
Flagelos REPRODUCCION DE LAS BACTERIAS

ASEXUAL :
DIVISION BINARIA
PARASEXUAL:
CONJUGACION
TRANSDUCCION
TRANSFORMAION

BACTERIOLOGIA BACTERIOLOGIA
Flagelos REPRODUCCION DE LAS BACTERIAS

ASEXUAL : BIPARTICION

BACTERIOLOGIA
REPRODUCCION DE LAS BACTERIAS
BACTERIOLOGIA
Flagelos
BACTERIOLOGA 1 Pag. 9 USAMEDIC 2017

BACTERIOLOGIA BACTERIOLOGIA
Divisin N. gonorrhoeae TRANSFERENCIA DNA - BACTERIAS

BACTERIOLOGIA
TRANSFERENCIA DNA - BACTERIAS

BACTERIOLOGIA
REPRODUCCION PARASEXUAL
CONJUGACION TRANSFORMACION
TRANSDUCCION
TRANSFORMACION

BACTERIOLOGIA
TRANSFERENCIA DNA ENTRE LAS BACTERIAS
BACTERIOLOGIA

CONJUGACION Crecimiento y muerte de las bacterias

Las bacterias reproducen por divisin binaria
Las bacterias tienen un crecimiento exponencial
N de clulas 1 2 4 8 16
Exponencial 20 21 22 23 24
El tiempo de duplicacin de una bacteria vara de
especie a especie y depende adems de la
cantidad de nutrientes, la temperatura, el pH y
otros factores ambientales

BACTERIOLOGIA
TRANSFERENCIA DNA - BACTERIAS BACTERIOLOGIA
TRANSDUCCION Ciclo de crecimiento de las bacterias
Fase de Retardo: El microbio se adapta al
nuevo medio. Hay gran actividad metablica
pero no hay divisin celular
Fase logartmica: Crecimiento exponencial.
Los ATB B-lactmicos actan durante esta
fase
Fase estacionaria: Los nutrientes esenciales
empiezan a desaparecer y productos txicos
causan un crecimiento lento hasta que el N de
clulas nuevas = N de clulas muertas
Fase de muerte: Fase marcada por una
declinacin en el N de bacterias viables
BACTERIOLOGA 1 Pag. 10 USAMEDIC 2017

BACTERIOLOGIA
BACTERIOLOGIA
DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO
Mtodos directos
Observacin directa (Microscopia)
Identificacin por pruebas bioqumicas
Aislamiento en medios especiales (Cultivos)
Determinacin de antgenos (Tcnicas inmunolgicas)
Determinacin de cidos nucleicos (Tcnicas
moleculares)
Mtodos indirectos
Deteccin de anticuerpos (Tcnicas inmunolgicas)

BACTERIOLOGIA
BACTERIOLOGIA
Tipo de metabolismo bacteriano
Respiracin: Combustin de un sustrato con la
liberacin de electrones e hidrgeno que son
transferidos a un aceptor final mediante una
DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO
reaccin redox. Si el aceptor final es el oxgeno Mtodos directos
hablamos de respiracin aerobia y si es otro
compuesto (inorgnico como nitratos, sulfatos Observacin directa (Microscopia)
CO2) distinto hablamos de respiracin anaerobia
Fermentacin: Oxidacin incompleta de un
compuesto orgnico (azcar) en ausencia de
oxgeno dando lugar a formacin de cido
pirvico y luego usualmente a cido lctico.

BACTERIOLOGIA COLORACION DE GRAM

Relaciones de las bacterias con el
oxgeno: Pasos Mtodo Gram(+) Gram(-)
Aerobios (estrictos): Dependen del O2 para
sobrevivir. Poseen un sistema transportador de Colorante Violeta de Se tie de Se tie de
electrones cuyo aceptor final es el oxgeno. bsico genciana violeta violeta
Ejm: Micobacterias, pseudomonas
Anaerobios (estrictos): Solo crecen en ausencia Mordiente Lugol Permanece Permanece
de oxgeno. Utilizan una atmsfera de CO2, H2 y violeta violeta
N2.Ejm: clostridium, propionibacterium Decoloracin Alcohol 95% Permanece Se decolora
Anaerobios facultativos: No precisan de O2 alcohol violeta
para crecer pero lo hacen mejor en su
presencia. Pasan de metabolismo respiratorio a acetona
fermentativo o viceversa. Ejm. Enterobacterias Contraste Fucsina o Permanece Se tie de
safranina violeta rosa

COLORACION DE GRAM
BACTERIOLOGIA Cristal violeta
Lugol
Alcohol acetona
Safranina
Relaciones de las bacterias con el
oxgeno:
Anaerobios aerotolerantes: Pueden crecer en
presencia o ausencia de O2 pero su metabolismo
siempre es fermentativo
Microaerfilos: Crecen mejor en presencia de baja
presin de O2 (Menor del 12%) . Ejm
Campilobacter
BACTERIOLOGA 1 Pag. 11 USAMEDIC 2017

MORFOLOGIA
COLORACION DE ZIEHL NEELSEN
Pasos Mtodo A. A. R. No A. A. R.

Colorante Fucsina Se tie de Se tie de

bsico rojo rojo
Mordiente Calor Permanece Permanece
rojo rojo
Decolaracin Alcohol Permanece Se decolora
clorhdrico rojo
Contraste Azul de Permanece Se tie de
metileno rojo azul

BACTERIOLOGIA
COLORACION ZIEHL NEELSEN DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO
Mtodos directos
Identificacin por pruebas bioqumicas

Tcnicas bioqumicas:
Reaccin de oxidasa: Demuestra presencia de enzima
citocromo-oxidasa. Distingue enterobacterias (-) de
Pseudomonas (+)
Reaccin de catalasa: Es capaz de descomponer el H2O2.
Distingue Estreptococos (-) de estafilococo y listeria (+)
Reaccin de la coagulasa: Diferencia E. aureus del resto de
estafilococos
Prueba del Indol: metaboliza el triptofano produciendo Indol.
Diferencia los distintos tipos de Enterobacterias
Prueba de ureasa: Hidroliza la urea y produce amonio. Son
ureolticas: K. pneumoniae, Proteus spp. y Mycobacterias

BACTERIOLOGIA
DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO
BACTERIOLOGIA Mtodos directos
Aislamiento en medios especiales (Cultivos)
BACTERIAS: Morfologa
Cultivos:
Cocos
Medios de cultivo
Bacilos
Selectivos: Selecciona a determinados grmenes
Helicoidales mediante factores fsicos o qumicos. Ejm.
Vibrio Loeffler (c. diptheriae), Thayer Martin (N.
Espirilo gonorrae), Mc Conckey (bacterias gram -)
Espiroqueta Diferencial: permite crecer distintos grmenes y
diferenciarlos. Ejm. Agar manitol (Estafilococos),
Pleomrficas Mc Conckey (enterobacterias). Agar SS
(salmonela, shiguela)

MORFOLOGIA
BACTERIOLOGIA
Cultivos:
Medios de cultivo
De enriquecimiento: Favorecen crecimiento
bacteriano. Usualmente son medios
lquidos. Ejm:BHI (infusin de cerebro-
corazn), Caldo selenito (enterobacterias),
Castaeda (brucela)
No selectivos: Agar comn, agar sangre y
agar chocolate. Crecimiento de bacterias en
general. Agar Saboraud (hongos)
BACTERIOLOGA 1 Pag. 12 USAMEDIC 2017

Sistemas automatizados
BACTERIOLOGIA de cultivos
Saben alguna respuesta?
Sistema automatizados de Hemocultivos
Cual es el mejor momento para tomar un hemocultivo?
Cuantos hemocultivos se recomienda tomar en 24 horas?
Cuanto tiempo puede permanecer una muestra de orina al medio
ambiente antes de ser analizada? Se puede refrigerar la orina?
Para tomar una muestra de esputo deberan lavarse los dientes y Sistema de
hacerse un enjuague bucal antes de tomar la muestra? deteccin de
Cuanto tiempo puede permanecer una muestra de heces al medio desarrollo
ambiente antes de ser analizada? Se pueden refrigerar las heces? bacteriano
Cuando se dice que una muestra de esputo es adecuada?
Cual es el mejor mtodo para diagnstico de infeccin por catter
venoso central?
Cada cuanto tiempo se debe cambiar una sonda vesical?
Cada cuanto tiempo se debe cambiar una sonda nasogstrica?
Cada cuanto tiempo se debe cambiar una va perifrica? Sistema automatizados de cultivo de
Cada cuanto tiempo se debe cambiar un catter venoso central? Micobacterias

Sistemas de identificacin
BACTERIOLOGIA y sensibilidad

Cultivos:
Cultivos de sangre
Cultivo de catteres venosos centrales
Cultivos de orina
Cultivos de secreciones respiratorias Alta exactitud y precisin
Cultivos de abscesos y heridas Control de calidad certificado
Cultivos del LCR
Sistemas computacionales en lnea
Cultivo de heces
Cultivos de secrecin farngea Disminucin de la laboriosidad
Cultivo de secreciones genitales Disminucin tiempos de respuesta
Alto costo

BACTERIOLOGIA BACTERIOLOGIA
Cultivos de sangre: Hemocultivo
Definicin: Cultivo microbiolgico de la sangre.
Tipos:
Manuales: Contiene 0.025-0.05% poliatenol sulfato sodio.
Semiautomatizados: Lisis-centrifugacin para hongos,
micobacterias, bartonelas y brucelas, CVC.
Automatizados: Detectan CO2 del metabolismo
bacterias. Bactec 9240, BacT/Alert Microbial detection
system, ESP Culture System, BacT/Alert 3d
Toma de muestra:
Cantidad: 2-3 muestras de sangre/24 horas.
Volumen: Variable. Relacin 1:5 a 1:10.
Momento toma: 2.5-0.5 h antes pico febril, pico febril.
Organismos aislados con mayor frecuencia:
E. aureus, P.aeruginosa, E. coli, K. pneumoniae y E.
pneumoniae

BACTERIOLOGIA BACTERIOLOGIA
BACTERIOLOGA 1 Pag. 13 USAMEDIC 2017

BACTERIOLOGIA
BACTERIOLOGIA
Cultivos de catter central:
Mtodos diagnsticos:
Conservadores (no requieren retiro del
catter)
Hemocultivo cuantitativo: Se debe extraer una
muestra de sangre perifrica inicialmente y otra a
travs del catter (retrocultivo) con jeringas
heparinizadas. Es positivo cuando el recuento
del retrocultivo es > 100 UFC/ml o 5-10 veces
mayor que el hemocultivo de sangre perifrica.
Cultivo superficial
Cultivo semicuantitativo de la conexin
Citocentrifugacion con tincion posterior con
anaranjado de acridina
Tiempo diferencial de los hemocultivos

BACTERIOLOGIA BACTERIOLOGIA

BACTERIOLOGIA
Cultivos de catter central: BACTERIOLOGIA
Definicin: Cultivo microbiolgico de la sangre.
Mtodos diagnsticos: Cambio de catter venoso central:
No conservadores (requieren retiro del catter)
Cultivos cualitativos:
1.- Evaluar el sito de puncin diariamente ( en cada turno) a travs
Cultivo de 5 cm distales de la punta catter. de la palpacin (inflamacin), observacin del sistema de fijacin,
S:100% y E: <50% en el diagnstico de bacteriemia debe permanecer limpio y seco. No cambiar el sistema de fijacin si
relacionada al CVC
no hay signos evidentes de infeccin. Si hay sospecha de
Cultivos semicuantitativos:
Mtodo descrito por Maki. inflamacin y/o infeccin cambiar el sistema de fijacin y observar
Es el mtodo de referencia para diagnstico de infeccin directamente el sitio de puncin.
relacionada a catter venoso central
Tcnica: Se roda 5 cm del extremo distal del catter en una 2.- Retirar o cambiar el catter si existen signos de flebitis (calor
placa de agar sangre 4 veces hacia adelante y hacia atrs y ,dolor, rubor o eritema y si se palpa la vena) infeccin o mal
se incuba durante 24 horas a 370C.
Se considera como criterio de colonizacin significativa 15
funcionamiento del catter,
UFC por placa. 3.- Si hay signos de sepsis o shock sptico en ausencia de otra
S: 100% y E: 76% en el diagnostico de bacteriemia
relacionada al CVC fuente de infeccin (se retira y se realiza el cultivo
Solo recupera los microorganismos de la superficie externa semicuantitativo)
del catter por lo que su mxima utilidad es en los catteres
de corta duracin (con menos de 10 das de permanencia)

BACTERIOLOGIA
BACTERIOLOGIA
Cultivos de catter central:
Mtodos diagnsticos:
No conservadores (requieren retiro del catter)
Cultivos cuantitativos:
Mtodo de flash, barrido o irrigacin descrito por Cleri et al:
Se realiza un lavado de la superficie interna del catter con
un volumen establecido de caldo nutritivo. Se considera
positivo si existe un desarrollo microbiano > 103 UFC/ml.
S:100% y E:92% para diagnostico de bacteriemia por CVC.
Mtodo cuantitativo simplificado descrito por Brun-Buisson
et al: Se considera positivo si existe un desarrollo
microbiano > 1000 UFC/ml. S:97.5% y E:88% para diagnostico
de bacteriemia por CVC.
Sonicacin descrito por Scheretz et al: Se considera positivo
si existe un desarrollo microbiano > 1000 UFC/segmento del
catter. S:93% y E:94% para diagnostico de bacteriemia por
CVC.
Resumen: Un meta-anlisis realizado por Siegman-Igra et al
demostr que los mtodos cuantitativos son mejores que los
semicuantitativos en el diagnostico de bacteriemia relacionado al
CVC ya que presentan una S: 94% y E: 92% contra S: 85% y E:
85%
BACTERIOLOGA 1 Pag. 14 USAMEDIC 2017

BACTERIOLOGIA
BACTERIOLOGIA Cultivos de secreciones respiratorias:
Informe Coloracin Ziehl-Neelsen:
No se encuentran BAAR en Negativo
Cultivos de orina: Urocultivo 100 campos observados
Definicin: Cultivo microbiolgico de la orina.
Se observan 1-9 BAAR en N0 exacto de
Toma de muestra: 100 campos observados bacilos en 100 campos
Preferencia orina de la maana.
Se observan 10-99 BAAR en Positivo (+)
Paciente debe abstenerse orinar 3 horas antes examen.
Paciente no debe tomar mucho lquido antes examen. 100 campos observados
Tomar la parte media de la orina. Se observan 1-10 BAAR x c Positivo (++)
Volumen: 25-50 ml. en 50 campos observados
Bolsas colectoras nios: cambiar c/30 minutos bolsa Se observan > 10 BAAR x c Positivo (+++)
colectora.
Portadores sonda vesical: muestra se toma en la unin en 20 campos observados
sonda con el catter de la bolsa colectora.

BACTERIOLOGIA
BACTERIOLOGIA
Cultivos de heridas y abscesos:
Cultivos de orina: Urocultivo Una gran variedad de grmenes se encuentran
Medios de cultivo: en las heridas y abscesos
Agar nutritivo, Agar Cled (Agar con cistena y lactosa
deficientes en electrolitos), Agar sangre (cocos) y Los grmenes ms frecuentes en abscesos de
Agar Mac Conckey (enterobacterias) cerebro, pulmn y abdomen son los
Procesamiento muestra: anaerobios (B. fragilis) y cocos gram + (E.
Incubacin 35-37 C por 24-48 horas. aureus y E. pyogenes)
Debera ser procesada mximo 2h post-obtencin.
Puede ser guardada refrigerados 4C no > 18 horas Infecciones de herida operatoria son
Organismos aislados con mayor frecuencia: usualmente por E. aureus
E. coli, Klebsiela, Proteus, Enterobacter, Enterococo Infecciones por heridas abiertas-traumticas
y P. aeruginosa, C. albicans son por C. perfringes
Organismos contaminantes mas frecuentes: Infecciones por mordedura de perro o gato
E. coagulasas negativos, Difteromorfos, Coliformes, son por P. multcida y mordedura humana son
Bacillus, Estreptococos alfa hemolticos
por anaerobios de la boca

BACTERIOLOGIA BACTERIOLOGIA
Cultivos de LCR
Se realiza cuando se sospecha de meningitis
Los grmenes que se aislan con mayor
frecuencia son E. pneumoniae, H. influenza y
N. meningitidis, criptococo
Se realiza coloracin gram y Ziehl Neelsen y
tinta china
La muestra se vierte a un plato de agar sangre
o agar chocolate. Hematina y NAD se agregan
para favorecer crecimiento de H. influenza
Tests inmunolgicos se pueden realizar para
detectar la presencia de antgenos capsulares
(test aglutinacin ltex)

BACTERIOLOGIA
Cultivos de secreciones respiratorias:
Definicin: Cultivo de secrecin proveniente de los
bronquios y alveolos.
Esputo:
Moco: plasma, agua, electrolitos y mucina.
Otros componentes: detritus celulares, secreciones
nasales, secreciones salivales y flora cavidad oral.
Toma de muestra:
Induccin de la tos, lavado bronquial, cepillado bronquial,
aspirado transtraqueal, toracocentesis , biopsia pulmn y
aspirado gstrico.
Preferencia muestra de la maana con paciente ayunas.
Buena muestra: > 25 L y < 10 CE x campo (aumento X 100).
Se puede guardar nevera por 24 horas. (> tiempo agregar
20cc de alcohol 50% y conservar a medio ambiente)
Medios de cultivo:
La muestra se vierte en agar sangre, Lowestein-Jansen,
Agar Saboraud medios para anaerobios
BACTERIOLOGIA
Cultivos de heces:
Son realizados principalmente en casos de
enterocolitis
Examen directo de heces: coloracin de azul
de metileno y coloracin gram (estafilococo,
clostridium o campilobacter)
Medios especiales como Mack Conkey agar
azul de metileno-eosina para crecimiento de
salmonella, shiguella
El Campilobacter es cultivado en medios que
contienen antibiticos como el agar Skirrow en
una atmsfera que contiene 5% de O2 y 10%
de CO2
BACTERIOLOGA 1 Pag. 15 USAMEDIC 2017

BACTERIOLOGIA
BACTERIOLOGIA
Cultivos de faringe:
Son usados primariamente para detectar la
presencia de E. beta hemoltico del grupo A (E.
pyogenes)
Tcnicas inmunolgicas:
Tambin cuando se sospecha de difteria, Tcnicas que usan anticuerpos para
faringitis gonoccica y cndida identificar el microorganismo (Mtodo
El raspado debera incluir no slo la faringe directo)
posterior sino tambin las amgdalas
El material es inoculado en plato de agar
Tcnicas que usan antgenos
sangre conocidos para detectar anticuerpos
Si colonias de E. beta hemoltico son halladas en el suero del paciente (Mtodo
despus de las 24 horas se usa un disco de indirecto)
Bacitracina para determinar si es del grupo A

BACTERIOLOGIA
Cultivos de secreciones genitales:
BACTERIOLOGIA
Se realiza principalmente en pacientes con
descarga genital o contactos asintomticos de Tcnicas inmunolgicas:
un paciente con ETS Tcnicas que usan Ac conocidos
El ms importante patgeno es la N. gonorrae.
Medio Thayer Martin Reaccin de hinchazn de la cpsula
Examen directo con microscopio de campo (Reaccin Quellung): E.pneumoniae, H.
oscuro son tiles para diagnstico de T. influenza grupo B, N. meningitidis grupo A y C
pallidum Test de aglutinacin ltex: Para determinar el
Clamidia trachomatis no crece en medios antgeno capsular de H. influenza, N.
artificiales sino en clulas viva. Cultivo de meningitidis, estreptococos grupo B,
clulas humanas o saco vitelino de huevos EIA: Para determinar antgeno del E. grupo A,
embrionados. El hallazgo de inclusiones L. pneumophila serotipo 1, E. pneumoniae, C.
intracitoplasmticas en la coloracin de
Giemsa o la presencia de anticuerpos trachomatis, toxinas bacterianas (C. difficile,
fluorescentes es diagnstica. E. coli.

BACTERIOLOGIA
Cambio de sonda vesical:
BACTERIOLOGIA
Plstico c/7 das
Ltex c/21 das Tcnicas inmunolgicas:
Ltex con capa silicona c/30 das
Silicona c/2-4 meses Tcnicas que usan Ac conocidos
Cambio de sonda nasogstrica: Inmunocromatografa: Para demostrar
Polietileno c/7-14 das antgeno en orina para Legionela serotipo 1 y
Poliuretano c/2-3 meses E. pneumoniae
Silicona c/3-6 meses ELISA: detectar una amplia variedad de
Cambio de va perifrica: bacterias, virus y hongos
Cambiar cada 72-96 horas (3-4 das) Test de Ac fluorescentes: detectar una amplia
En pacientes peditricos, no cambiar el catter venoso perifrico variedad de bacterias, virus y hongos
hasta completar el tratamiento EV a menos que ocurra una
complicacin( flebitis, filtracin).

BACTERIOLOGIA
DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO
DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO Mtodos directos
Mtodos directos Determinacin de cidos nucleicos (Tcnicas moleculares)
Determinacin de antgenos (IF, EIA, Test
aglutinacin, inmunocromatografa)
Tcnicas moleculares:
Sondas genticas
Son fragmentos de ADN o ARN que tienen estructura
Tcnicas inmunolgicas: complementaria entre s para formar secuencia de
Cuando el organismo no puede ser cultivado doble cadena.
Ejm. Sfilis, virus hepatitis Se uso inicialmente para identificacion gonococo, C.
trachomatiss y luego fue usado para la identificacin
Cuando el organismo es peligroso de cultivar. de hongos y mycobacterias
Ejm ricketsias Reaccin en cadena de la polimerasa (Tcnica de PCR)
Cuando las tcnicas de cultivo no estn Consiste en amplificar in vitro una secuencia
disponibles. Ejm. VIH, EBV previamente conocida de ADN o ARN de un organismo
hasta hacerlo fcilmente detectable. Muy sensible. Se
Cuando el crecimiento del organismo toma usa para diagnstico de la casi mayora de
mucho tiempo. Ejm. Mycoplasma microorgansimos.
BACTERIOLOGA 1 Pag. 16 USAMEDIC 2017

BACTERIOLOGIA
DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO
Mtodos indirectos
BACTERIOLOGIA
Deteccin de anticuerpos (IF, EIA, WB, etc)

Tcnicas inmunolgicas: Eflujo activo del ATB

Tcnicas que usan Ag conocidos: Bomba presente en el citoplasma de la clula
bacteriana que elimina ATB del intracelular
Tests de aglutinacin en tubo o en lmina:
Se encuentra presente tanto en bacterias
Suspensiones de bacterias standard. La mas alta dilucin capaz Gram (+) como Gram (-)
de aglutinar a la bacteria es el ttulo
Ejm. Resistencia a tetraciclinas, macrlidos,
Tests serolgicos para sfilis quinolonas y estreptograminas
Test no treponmicos: cardiolipina-lecitina colesterol
Test treponmicos: T. pallidum
Test de aglutininas frias:
Glbulos rojos se aglutinan en el fro. Infecciones Mycoplasma

BACTERIOLOGIA
BACTERIOLOGIA Modificacin o proteccin del sitio blanco del
ATB
Mecanismos de resistencia bacteriana Modificacin de las PBPs
Evitar el ingreso del ATB Ejm. Resistencia a penicilinas
Inactivacin enzimtica del ATB Modificacin de D-Ala-D-Ala por D-Ala-D lactato
Ejm. Resistencia a glicopptidos
Eflujo activo del ATB Proteccin de ribosomas
Modificacin o proteccin del sitio Ejm. Resistencia a tetraciclinas
blanco del ATB Metilacin del rRNA
Ejm. Resistencia a macrlidos, estreptograminas y
Falla en la activacin del ATB lincosaminas
Mutacin que alteran la afinidad de la subunidad
B de la DNA girasa por el ATB
Ejm. Resistencia a quinolonas

BACTERIOLOGIA
BACTERIOLOGIA
Evitar el ingreso del ATB
Porinas de la membrana externa Falla en la activacin del ATB
Constituyen una barrera al ingreso de ATB Mutacin en el gen que da lugar a la
No son selectivas por lo cual puede inducir elaboracin de flavodoxina
resistencia a ms de un tipo de ATB Ejm. Resistencia a metronidazol
Ejm. Resistencia a glicopptidos
Disminucin de la captacin ATB en la
membrana citoplasmtica
Algunos ATB requieren un transportador
presente en la membrana citoplasmtica
Ejm. Resistencia a aminoglucsidos

BACTERIOLOGIA BACTERIOLOGIA
Bacterias: Dominio: Bacteria, Reino:
Inactivacin enzimtica del ATB Eubacteria,Phylum = 27
Acidobacteria Actinobacteria Aquificae
Enzimas que rompen la estructura del ATB Bacteroidetes Chlamydiae Chlorobi
Produccin de B-lactamasas, esterasas Chloroflexi Chrysiogenetes
Cyanobacteria Deferribacteres
Ejm. Resistencia a ATB B-lactmicos, Deinococcus-Thermus Dictyioglomi
macrlidos Fibrobacteres Firmicutes Fusobacteria
Enzimas que permiten agregar grupos Gemmatimonadetes Lentisphaerae
Nitrospira Planctomycetes
qumicos al ATB y lo inactivan Proteobacteria Spirochaetes
Enzimas que permiten agregar grupos fosforil, Synergistetes Tenericutes
adenil y acetil. Ejm. Resistencia a Thermodesulfobacterias Thermomicrobia
aminoglucsidos, cloranfenicol Thermotogae Verrrucomicrobia Bacterias
no clasificadas
BACTERIOLOGA 1 Pag. 17 USAMEDIC 2017

ESTAFILOCOCOS
BACTERIOLOGIA Propiedades importantes:
Son cocos gram (+), producen catalasa.
Clasificacin Bacterias E. aureus forma colonias amarillas y produce B-
hemlisis en agar sangre. > 90% de E. aureus
Coloracin gram: contienen plsmidos que codifican B-lactamasas
Cocos gram (+) Se encuentran primariamente en la flora humana
Cocos gram (-) normal. Coloniza vestbulo nasal, piel daada,
axilas, regin inguinal, recto y perineo.
Bacilos gram (+) E. aureus coloniza la vagina. Nias post-
Bacilos gram (-) menarquia 5-15%. Alcanza 30% durante la
menstruacin.
E. aureus coloniza un 60% de los adultos en
forma intermitente y 20-30% tienen colonizacin
persistente (diabticos, UDE, HIV, pacientes
dilisis) y 30% no son portadores.

ESTAFILOCOCOS
Propiedades importantes:
COCOS GRAM POSITIVOS E. aureus tiene algunos componentes importantes pared
celular:
Protena A: Es un factor de virulencia. Se une a la
ESTAFILOCOCOS porcin Fc de la inmunoglobulina. Previene la activacin
del complemento. Propiedades antifagocitarias
ESTREPTOCOCOS Acido teicoico (polimeros fosfato poliribitol): Media la
adherencia a la clula
Muchos E. aureus tienen una microcpsula que tiene
funcin antifagoctica.
El peptidoglicano tiene propiedades parecida a
endotoxina que puede estimular la secrecin de
citoquinas por macrfagos, activacin del complemento
y la cascada de coagulacin.
Resistencia meticilina por la presencia gen mecA
codifica unin penicilina a protena 2a.

ESTAFILOCOCOS
ESTAFILOCOCOS
Estafilococos coagulasa positivos
E. aureus
Estafilococos coagulasa negativos
E. epidermidis - E. saccharolyticus
E. saprophyticus - E. xylosus
E. hominis - E. auricularis
E. haemolyticus - E. simulans
E. warneri - E. schleiferi
E. lugdunensis - E. caprae
E. capitis - E. pasteuri
E. cohnii

ESTAFILOCOCOS
ESTAFILOCOCOS E. aureus produce:
Enzimas:
Catalasa, coagulasa, fibrinolisina, hialuronidasa,
ESPECIE COAGULASA HEMOLISIS CARACTERISTICAS termonucleasas, estafiloquinasas, bacteriocinas,
penicilinasas y ADNasas.
E. Aureus + Beta Flora nasal Toxinas:
Flora cutnea Citotoxinas: Hemolisinas alfa, beta, gamma, delta
Colonias amarillas Enterotoxina: Hay 6 tipos inmunolgicas A-F
E. epidermidis - Ninguna Flora cutnea TSST-1: es un superantgeno que ocasiona la
Colonias blanca liberacin de IL-1, IL-2 y FNT
Exfoliatina: toxina epidermoltica que acta como
E. saprofticus - Ninguna Resistente una proteasa que desdobla los desmosomas y
Novobiocina separa la epidermis de la capa de clulas
granulares
PVL (Panton Valentine Leucocidin): Toxina que
produce necrosis de piel, partes blandas y pulmn
(neumona hemorrgica severa).
BACTERIOLOGA 1 Pag. 18 USAMEDIC 2017

ESTAFILOCOCOS
Estafilococo aureus FORUNCULO
Invasin tisular
Piel y mucosas
Foliculitis, abscesos, forunculosis, tromboflebitis, infeccin
de herida operatoria, antrax carbunco, botriomicosis.
Partes blandas
Celulitis, mastitis y absceso mamario, hidradenitis
supurativa, bursitis sptica, artritis sptica, piomiositis
tropical.
Huesos
Osteomielitis.
Neumona (CAMRSA, HAP, VAP, HCPA) y empiema
Endocarditis
Meningitis post-operatoria, meningitis o cerebritis
asociado a bacteremia/endocarditis
Absceso epidural o paraespinal
Infecciones asociadas a catteres y prtesis

IMPETIGO BULOSO
ESTAFILOCOCOS

Estafilococo aureus
Produccin toxinas
Intoxicacin alimentaria (enterotoxinas)
Sndrome de piel escaldada (Enfermedad de Ritter)
(Toxina Exfoliatina A o B dirigida estrato granuloso)
Forma localizada (Imptigo Buloso)
Forma generalizada
Sndrome de shock txico (Toxina 1 o exotoxinas B
y C)

ESTAFILOCOCOS CARBUNCO
INFECCIONES
FOLICULITIS

Absceso
BOTRIOMICOSIS
BACTERIOLOGA 1 Pag. 19 USAMEDIC 2017

ABSCESO MAMARIO
EMPIEMA

TAC ABSCESO PULMONAR

PIOMIOSITIS TROPICAL

OSTEOMIELITIS ENDOCARDITIS

NEUMONIA

ESTAFILOCOCOS
INTOXICACIONES
BACTERIOLOGA 1 Pag. 20 USAMEDIC 2017

SINDROME DE PIEL
ESCALDADA
ESTAFILOCOCOS
Estafilococo epidermidis
Infecciones de catteres endovenosos
Infecciones de implantes protsicos
Peritonitis en pacientes con peritoneo-dilisis
Infecciones asociadas a vlvulas de derivacin
ventrculo-peritoneales
Osteomielitis post-esternotoma
Causa de sepsis en neonatos
Endoftalmitis post-ciruga ocular
Estafilococo saprofticus
Infeccin urinaria en mujeres jvenes
sexualmente activas

SINDROME DE PIEL
E. epidermidis
ESCALDADA

SINDROME SHOCK TOXICO

ESTAFILOCOCOS
Diagnstico:
Coloracin gram
Cultivos
Reaccin Novobiocina: E. epidermidis es sensible
y E. saprofticus resistente
No son tiles tests serolgicos ni test de piel
Tratamiento:
Mupirocina, Penicilinas, Cefalosporinas,
Macrlidos, Quinolonas, Rifampicina,
Aminoglucsidos, Glicopptidos, Oxazilidinonas,
Estreptograminas, Daptomicina
BACTERIOLOGA 1 Pag. 21 USAMEDIC 2017
BACTERIOLOGA 1 Pag. 22 USAMEDIC 2017