Recoltarea sngelui

Sngele reprezint parte circulant a mediului intern, format din elemente celulare i
necelulare suspendate sau dizolvate ntr-o soluie complex numit plasm. Propritile sale
pot fi studiate prin teste care implic recoltarea acestuia i , n funcie de tipul acestora i
condiiile existente, putem considera recoltarea sngelui venos respectiv capilar.
Recoltarea sngelui venos se poate efectua:
- pe anticoagulant cnd testele necesit snge integral sau plasm sau
- fr anticoagulant cnd determinrile se efectueaz din ser.
Recoltarea sngelui venos aduce o serie de avantaje:
- dintr-o singur prob se pot efectua toate determinrile necesare precizrii
diagnosticului, chiar i n dublu pentru creterea preciziei,
-se pot repeta sau completa examenele necesare n lipsa pacientului,
-testele, cu excepia numrrii trombocitelor, pot fi efectuate mai trziu dup recoltare
dac se respect procedurile de pstrare a probelor,(la +4C sau -20C n flacoane nchise),
-constituie modalitatea preferat de recolt n vederea executrilor numrtorilor
electronice ale elementelor figurate sanguine, mai ales n ceea ce privete numrarea
trombocitelor.

Puncia venoas se realizeaz de obicei ntr-o ven din regiunea plicii cotului (vena
cubital). Se aplic un garou cam la o palm deasupra locului de puncionat astfel nct s se
realizeze staza venoas fr a mpiedica circulaia arterial i n acelai timp i se cere
pacientului s strng pumnul. Se palpeaz vena de puncionat, se dezinfecteaz tegumentul
cu alcool sau alcool-eter i se puncioneaz vena dup ce nainte s-a fixat pielea cu ajutorul
degetelor. Dup ce s-a ptruns n ven sub un unghi ascuit se apleac acul ct mai paralel cu
pielea, se mpinge n lumenul venei si se aspir cantitatea necesar de snge. Garoul se
desface cnd sngele apare n sering sau vacumtainer i pacientul desface pumnul pentru c
o staz venoas prelungit modific rezultatele. Dup recolterea cantitii necesare, acul se
scoate uor i rapid din ven, locul puncionat fiind presat cu tampon steril sau cu alcool pn
la oprirea sngerrii.
 Recoltarea sngelui capilar se efectueaz n cazul unor determinri de urgen,
respectiv ori de cte ori testele de efectuat necesit cantiti mici de snge sau cnd patul
venos nu poate fi abordat.

FFFFig
 Tehnic: Se alege locul de puncionat. Sngele capilar se recolteaz la adult din pulpa
degetului inelar sau mediu iar la nou nscut de la nivelul feei plantare a clciului sau a
halucelui, n regiunea lateral. Pentru probe speciale (determinarea timpului de sngerare)
puncionarea se realizeaz la nivelul lobului urechii.
Tegumentul ce urmeaz a fi puncionat nu trebuie s prezinte modificri de aspect sau
temperatur.
Dup dezinfectarea regiunii respective se puncioneaz tegumentul rapid i suficient
de adnc astfel nct picturi de snge s apar spontan sau dup o slab presiune. Prima
pictur se ndeprteaz cu tamponul steril colectndu-se urmtoarele aprute spontan. Este
interzis stoarcerea regiunii de puncionat sngele dilundu-se cu lichidul interstiial ceea ce
modific rezultatele testelor de efectuat. La sfritul recoltrii se aplic un tampon cu alcool
pe regiunea puncionat, pn la oprirea sngerrii.
Din sngele capilar se efectueaz un numr limitat de teste: hemoleucograme,
numrtori de trombocite (mai ales pentru verificarea unor trombocitopenii sau cnd
trombocitele din sngele recoltat pe anticoagulant sunt aglutinate), frotiuri din snge patologic
unde morfologia leucocitelor trebuie perfect conservat (sngele capilar permite obinerea
celor mai frumoase frotiuri de snge fr s existe diferene cantitative ntre examenele
morfologice efectuate din sngele venos comparativ cu cele realizate din sngele capilar).
Frotiurile executate din snge venos recoltat pe anticoagulant sunt calitativ inferioare celor
realizate din s-a efectuat puncia venoas, acesta nevenind n contact cu substana
anticoagulant.snge capilar din cauza modificrilor induse de anticoagulant asupra
morfologiei leucocitelor i trombocitelor Acest dezavantaj poate fi evitat prin efectuarea de
frotiuri din sngele de pe acul cu ajutorul cruiase fce recoltarea.

Recoltarea de snge capilar se poate nsoi de anumite inconveniente: puncie

insuficient de profund, oprirea sngerrii naintea recoltrii cantitii necesare, cianoz sau
edem la locul punciei, numrul limitat de teste posibil de efectuat prin cantitatea mic
obinut, etc.

Anticoagulante. Pentru a impiedica coagularea sangelui scos in afara organismului, acesta

este amestecat, imediat dupa recoltare, cu substante anticoagulante. Se obine astfel sange
integral care pastreaza toate elementele componente, inclusiv substantele care se consum
in timpul coagularii. Centrifugarea sangelui integral, determin separarea acestuia intr- o
componenta lichida numita plasma si o componenta solida reprezentat prin elementele
figurate sanguine.

Este de reinut faptul c exist un raport strict ntre cantitatea de snge si cea de
anticoagulant utilizat precum i faptul c exist o serie de teste care necesita utilizarea unui
anumit tip de anticoagulant. Substanele anticoagulante utilizate la recoltareasngelui
n vederea efecturii examenelor hematologice sunt astfel alese incat s nu modifice, prin
actiunea lor, morfologia si structura elementelor figurate sanguine. Un astfel de anticoagulant
este sarea de sodiu a acidului etilendiaminotetraacetic( Na2-EDTA) sau sarea sa de potasiu
( K2-EDTA) . Moleculele de EDTA sodic (sau potasic) au proprietatea de a extrage calciul din
plasma si de a-l fixa pe molecule. In lipsa calciului procesul de coagulare nu mai poate avea
loc. Se utilizeaza 1-2mg EDTA (cristale) pentru 1ml sange. Din sngele recoltat pe EDTA se
pot efectua: numrtorile elementelor figurate sanguine (a eritrocitelor, leucocitelor,
eozinofilelor, trombocitelor, reticulocitelor), msurarea concentraiei hemoglobinei,
determinarea hematocritului, precum i frotiul de snge. Determinarea vitezei de sedimentare
a hematiilor (VSH) necesita un alt anticoagulant, citratul trisodic (solutie apoasa 3,8%).
Citratul de sodiu fixeaza calciul din sange, impiedicnd astfel coagularea sangelui. Se
utilizeaza 0,4 ml soluie citrat de concentraie3,8% pentru 1,6ml sange. Testele de explorare a
hemostazei se lucreaza pe sange integral i plasm. Anticoagulantul de utilizat este amestecul
de oxalat de sodiu si oxalatul de amoniu (amestec WINTROBE). Oxalatul fixeaza calciul din
sange, impiedicand astfel coagularea sangelui. Se utilizeaza 1ml amestec oxalat pentru 9 ml
sange.

Amestec Wintrobe:

Oxalat de potasiu ..0,8

Oxalat de amoniu..1,2 g
Apa distilata.ad. la 100 ml
Se mai pot folosi ca anticoagulani pentru testele de hemostaz soluia de citrat de sodiu 3,8%
sau cea de oxalat de sodiu 1,34%.

Recoltarea pentru examene biochimice care sunt realizate cu sange integral sau plasma se
face folosind ca a substan anticoagulant heparina. Se utilizeaz heparina-sare de sodiu sau
heparina-sare de litiu aceasta impiedicnd sngele s coaguleze prin inactivarea protombinei.
Se utilizeaza 0,1-0,2 mg de heparina la 1ml sange. Determinarea concentratiei de glucoza in
sange integral se face din sngele venos recoltat pe fluorura de sodiu, utiliznd 2mg
fluorura de sodiu (pulbere) pentru 1ml sange
 Examenul sngelui proaspt

Examinarea sngelui proaspt se poate efectua prin examinarea unui preparat ntre
lam i lamel la microscopul optic a sau folosind metode mai complicate ce implic folosirea
microscopiei n contrast de faz, microscopia pe fond ntunecat, ultramicroscopia etc.
Preparatul ntre lam i lamel se realizeaz punnd o pictur de snge pe o lamel,
care se aplic, cu pictura n jos, pe o lam. Examinarea se face imediat, la microscop, cu
obiectiv uscat.
Se pot observa eritrocitele, discoidale, biconcave din profil i cu dublu contur cnd
sunt surprinse din fa, n general de culoare galben, partea central a celulei fiind mai
palid; pot fi sesizate eventuale modificri ale formei (poichilocitoz), respectiv ale mrimii
eritrocitare (anizocitoz).
Dispunerea eritrocitelor n condiii normale se face n fiicuri, aceasta lipsind n unele
stri patologice (anemii hemolitice cu autoanticorpi, sferocitoz etc.).
Aezarea n fiicuri trebuie difereniat de aglutinarea eritrocitelor produs prin
intervenia izoanticorpilor sau autoanticorpilor. Pentru a le diferenia sngele se recolteaz pe
ser fiziologic cnd aezarea in fiicuri nu se mai produce n timp ce aglutinarea indus de
anticorpi se menine, nefiind influenat de prezena serului fiziologic. Eritrocitele aglutinate
sunt unite ntre ele printr-o substan filamentoas ( fenomenul firului).
Examinarea preparatului dup cteva ore arat schimbarea formei eritrocitelor care
devin sferice, cu suprafaa neted sau neregulat.
Preparatul proaspt, ntre lam i lamel, permite i observarea leucocitelor ce pot fi
recunoscute dup mrimea lor, prin prezena granulaiilor care apar ca puncte refringente
incolore precum i datorit prezenei nucleului a crui form permite diferenierea ntre
polimorfonucleare i mononucleare.