Sunteți pe pagina 1din 117

REZUMAT IMUNOLOGIE

1
CURS 1 - INTRODUCERE

- Imunologia = tiina care se ocup cu sistemul imun


- Tucidide - Cei care fuseser bolnavi i supravieuiesc, i ngrijeau pei ceilali fr s se
mbolnveasc
- Cei care au supravieuit unui atac de variol deveneau rezisteni n faa celui de-al
doilea atac
- Variolare inocularea deliberat a unei persoane cu material obinut dintr-o pustul
provenit de la un caz puin grav
- Primul trial clinic inocularea a fost testat pe un grup de deinui i apoi pe un grup
de orfani
- 1796 Edward Jenner introduce vaccinarea
o Injecteaz puroi provenit de la o persoan suferind de variol (cowpox) unui
biat sntos
- Lui Pasteur i se datoreaz termenul de vaccinare
o Vaccinare antirabic a folosit esut derivat al irei spinrii
o Dezvoltarea ideii c rspunsul imun poate fi declanat i de componente ale
microorganismului respectv care nu sunt vii
- 1888 Roux i Yersin izolarea primului antigen
o Nuttal demonstreaz existena primului anticorp seric mpotriva acestei
toxine
- Paul Ehrlich prima teorie acceptabil asupra imunitii
o Cu ajutorul coloranilor descoper bariera hematoencefalic doar unii
colorani ajung la creier
o Elaboreaz conceptul de afinitate ntre substanele chimice i organe vii
- Behring i Kitasato au pus bazele seroterapiei trateaz difteria cu antitoxin
- Ehrlich este cel care pune la punct metoda de dozare exact n uniti a antitoxinei

TEORIA CATENELOR LATERALE

- Au fost puse la punct teste serologice: aglutinarea, reacia de precipitare, fixarea


complementului
- Metchinikov a descoperit fagocitele i fagocitoza
- Teoria elaborat de Ehrlich a fost numit a catenelor laterale
o Postuleaz c specificitatea imunologic se datoreaz unei relaii stereochimice
unice dintre situsurile active ale antigenului i anticorpului
o Introduce conceptele de afinitate i situs funcional ale molecului anticorp
o Introduce noiunea de receptor
- Teoria catenelor laterale:
o Receptorii erau constituieni naturali, formai odat cu celula, pe suprafaa
acesteia

2
o Posedau configuraie structural care le determin specificitatea pentru un
anumit antigen
o Celulele prezentau catene laterale necesare pentru toate antigenele
o Antigenul selecta doar catena lateral cu care este capabil s interacioneze
specific
o Celula renun la restul catenelor laterale neselecionate i produce n exces
doar catena aleas
o Lanurile laterale erau rezultatul fragemntrii unei imense molecule
protoplasmatice
o Baza specificitii imunologice rezid n configuraia tridimensioanal unic a
moleculei de anticorp
o Formarea anticorpilor reprezint rspunsul celular la interaciunea cu antigenul
prin intermediul receptorilor de suprafa
- Anticorpii sunt nite substane complet noi

TEORII INSTRUCTIVE

- Landsteiner, Kabat, Heidelberger personaje principale ale perioadei serologiei


- 1930 se nelege c anticorpii sunt proteine globulare
- Apare un val de teorii instructive
- Forma definitiv teoria tiparului Haurowitz i Breinl
o Antigenul era purtat n organism ctre situsul de formare al proteinelor, unde
servete drept model pentru moleculele de anticorp nascente
- Teoria instructiv a lui Pauling simplificat i uor de justificat:
o Antigenul va servi drept template doar pentru faza final a procesului de
sintez a proteinei n care are loc rsucerea n spaiu a lanului polipeptidic
- MacFarlane Burnet atac teoria lui Pauling prin 3 aspecte:
o Teoriile instructive nu in cont de importana enzimelor n mecanismul de
sintez i metabolismul intracelular
o Teoriliile instructive implic persistena ndelungat a antigenului de-a lungul
procesului de formare a anticorpului
o Producia de anticorpi este o funcia att a celulelor stimulate iniial ct i a
descendenilor acestora

TEORIA SELECIEI NATURALE

- Existena n snge i n ser a substanelor antibacteriene specifice anticorpi naturali


- Niels Jerne afirm c anticorpi cu foarte multe specificiti posibile sunt sintetizai n
mod normal de ctre vertebrate i sunt eliberai n cantiti mici n snge
- Antigenele care intr n circulaie reacioneaz cu aceti anticorpi
- Dup ce interaciunea antigen-anticorp este complet, rolul antigenului este de a
transporta anticorpul ctre celulele specializate capabile s reproduc anticorpul

TEORIA SELECIEI CLONALE

- Publicat n 1959 de Burnet, Talmage i Lederberg teoria pe care imunologia se


bazeaz i astzi
- Burnet sugereaz c anticorpii se gsesc pe suprafaa celulelor limfoide au dispoziie
restrns fenotipic la nivelul unei clone, dedicat aceleiai funcii

3
o Interaciunea cu antigenul declaneaz semnalul pentru proliferarea celular
o Antigenul va servi pentru selecia i activarea specific a precursorului celular
potrivit
- Imunitatea nnscut toate elementele pe care organismul le posed de la natere -
reprezint prima linie de aprare mpotriva antigenelor
o Sistem de aprare format din componente umorale i celulare extrem de
diverse
Piele (i secreiile acide ale glandelor sudoripare i sebacee)
Mucoase i mucusul care le acoper
Reflexul de tuse i strnut
Secreia lacrimal
Micarea cililor
Creterea temperaturii corporale
Oxigenarea plmnilor
o 3 componente majore
Celule care fagociteaz ingestie urmat de degradare intracelular
Proteine plasmatice solubile i glicoproteine leag microorganismele
i le transform n inte pentru fagocite (opsonizare) sau pentru sistemul
complement moartea prin citoliz
Celule natural ucigase NK
Subset de limfotice T primitve
- Imunitatea adaptativ (specific, dobndit) specific vertebratelor
o Se bazeaz pe existena limfocitelor
o Raspuns lent, dobndit prin contactul cu antigenul
o Raspuns caracteristic specific unui antigen datorit receptorilor pentru
antigene
o Conceptul de pattern de recunoastere
o PAMP poate cuprinde
Lipopolizaharide bacterii gram negative
Peptidoglicani
Acid lipoteichoic bacterii gram pozitive
Manani ai bacteriilor sau fungilor
o Structurile destinate recunoaterii PAMP receptori PRR
Lectina care leag mananul MBL protein seric multimeric
Legarea MBL activeaz cascada sistemului complement
opsonizare
Receptorii toll-like alt clas de receptori PRR
Se gsesc pe suprafaa fagocitelor mamiferelor i a celulelor
dendritice
Leag produi polipeptidici rezultai din cascade enzimatice
proteolitice
o TLR4 poate fi activat de LPS-ul bacterian dupe ce acesta
s-a legat la molecula CD14
o Activarea TLR4 declaneaz activarea i translocarea
factorului nuclear kB sinteza de citokine inflamatorii
(factorul de necroz tumoral TNF sau interleukina-1)
- Funciile sistemului imun:
o Supraveghere distincia self/non-self
o Aprare declanarea rspunsului

4
o Reglare controlul rspunsului n scopul meninerii homeostaziei
o Memoria imunologic rspuns optimizat la un nou contact cu acelai antigen
o Toleran stare de neresponsivitate fa de anumite antigene
- Odat declanat un rspuns vor fi implicate att imunitatea specific ct i cea
nespecific
- Limfocitele
o Deriv din celulele stem limfoide
o n funcie de locul de maturizare:
Limfocite T n timus
Sufer o diferenie suplimentar n:
o Limfocite T helper
o Limfocite T citotoxice
Activarea lor duce la un rspuns imun celular
Limfocite B n mduva osoas
Activarea duce la transformarea loc n plasmocite
o Acestea secret anticorpi molecule capabile s
recunoasc antigenele
Asigur rspunsul de tip umoral
o Dup maturizare, limfocitele se deplaseaz ctre organele limfoide secundare
micromediu ideal pentru apariia sistemului imun
- Receptor = specificitate
o Legarea dintre receptor i ligant nu poate fi dect una specific
o Specificitatea fiecare receptor i leag ligandul su
Un receptor nu poate fi utilizat dect de un singur ligand
SI nespecific SI specific
- Raspuns rapid - nalt specificitate
- Fr specificitate - Memorie imunologic
- Fr memorie - Producie de molecule efector
- Acioneaz oriunde n organism - Recunoaterea unor epitopi

CURS 2 ANTIGENE

- Raspunsul imun apare ca rezultat al expunerii la stimuli strini (structuri non-self)


- Antigen structur strin recunoscut de organism, capabil s declaneze rspunsuri
- Dinstincia dintre imunogen i antigen este una funcional
o Imunogenul este capabil s declaneze reacii imune specifice i s reacioneze
cu anticorpii antibody generating
Limfocit B + imunogen limfocit B efector (limfocit B cu memorie i
plasmocite)
Limfocit T + imunogen limfocit T efector (T helper/T citotoxice i
lmifocite T cu memorie)
o Antigenul agent capabil s se lege specific la componentele sistemului imun
- Antigenicitatea proprietatea structurilor de a se combina specific cu receptori i
produii finali ai RI
- Imunogenicitatea att capacitatea de inducere a RI ct i aceea de a reaciona cu
produii finali ai RI
o Un imunogen este i Ag
o Nu orice Ag este imunogen

5
- Efecte declanate de antigen
o Poate activa limfocitele imunogen
o Poate conduce la sitenza anticorpilor specifici
o Poate duce la reacii exagerate
o Poate duce la toleran imunologic absena RI
- Obinerae RI depinde att de Ag ct i de SI (trebuie s fie capabil s rspund acestui
stimul)
- Factori care condiioneaz apariia RI:
o Factori care depind de Ag
o Factori care depind de organism
o Factori care depind de calea de ptrundere a Ag-ului n organism

FACTORI CARE DEPIND DE ANTIGEN

1. Caracterul de strain (non-self)

- n mod normal SI nu rspunde la self


- Unele macromolecule (colagen, citocrom c) au imunogenicitate foarte redus n
cadrul a diverse specii
- Antigenele pot fi:
o De natur patologic virusuri, bacterii, parazii, fungi
o De natur nepatologic alergeni
o De origine vetegal, animal sau anorganicp
- Capacitatea de a rspunde fa de non-self trebuie s fie dublat de tolerana fa de
self
- Boli autoimune structurile apar ca un non-self n faa SI = self denaturat, alteral
- Exist structuri separate efectiv de SI
o Traumatism ocular RI care conduce la afeciune autoimun
Anticorpii de la acest RI pot ajunge la ochiul controlateral uveita
simpatetica
- Tolerana lipsa de RI fa de anumite Ag, nu trebuie confundat cu imunosupresia
sau imunodepresia incapacitatea global a SI
- Definirea provenienei Ag
o Ag autologe de la acelai indivit
o Ag singeneice de la indivizi identici genetici
o Ag alogeneice de la membri diferii ai aceleiai specii
o Ag xenogeneice membri diferii de la specii diferite

2. Greutatea molecular

- Receptorii pentru antigen se leag la poriuni numite determinani antigenici sau


epitopi
- Compui mai mici de 1 kDa nu sunt imunogenici
- Compui peste 40 kDa bun imunogenicitate
o Insulina i ACTH-ul bune imunogene (intre 1000 i 6000 kDa)
o Dextranul i gelatina (peste 40 kDa) nu sunt bune imunogene
- Haptenele antigene neimunogene
- Medicamentele au GM sub 1 kDa pentru a nu fi percepute ca imunogene

6
- n unele situaii haptenele se cupleaz cu proteine self i devin ina RI
- Dimensiunea molecului influeneazp imunogenicitatea prin creterea numrului i
diversitii epitopilor
o La glucide, odat cu creterea mrimii crete numrul de epitopi monoton-
repetitivi
- Creterea excesiv a dimensiunilor moleculelor nu va conduce la creterea
imunogenicitii
- Ag ajung n interiorul unor celule specializate unde sunt prelucrate i prezentate
limfocitelor T

3. Structura chimic

- Imunogenicitatea necesit un anumit nivel de complexitate chimic


- Majoritatea imunogenelor sunt proteine prezint un nr mare de epitopi diferii
- Anticorpii pot recunoate diferite aspecte structurale ale proteine
o Structura primar lanul de aa
o Structura secundar alfa helix sau beta pliat
o Structura teriar legturile care se realizeaz
o Structura cuaternar juxtapoziia unor pri ale moleculei
- RI fa de o protein = suma anticorpilor ndreptai mpotriva tuturor epitopilor pe care
antigenul i pune la dispoziie
- Nu toate proteine sunt imunogene
o Polimerii de lizin cu GM de 30 kDa sunt rar imunogene
- Absena imunogenicitii se datoreaz insuficienei complexitii chimice
o Dac se adaug o grupare DNP (di nitro phenol) ntreaga molecul devine
imunologic
- Cretere a complexitii chimice cretere a imunogenicitii
o Co-polimerii mai mulot aa: poli-glutamic, alanin i lizin nalt imunogenici
dac depesc o anumit GM
o Adugarea de AA aromatici amplific imunogenicitatea
o Combinaiile chimice n care sunt prezente proteinele tind s fie nalt
imunogenice
- Lipidele pure sau glucidele pure sunt rar bune imunogene
o Glucidele nu sunt suficient de complexe
o Polizaharidele sunt rapid degradate i nu iau contact cu SI timp suficient
o LPS (lipopolizaharid prezent n membrana bacteriilor gram negative) sau
polizaharidul pneumococic
Sunt antigene imunogene care stimuleaz limfocitele B n mod direct,
trec peste limfocitele T mare importan n patologie
- Antigene glucidice - cele din grupul sanguin AB0
- Antigenele lipidice au un sistem de prezentare (CD1) n unele situaii pot deveni
imunogene
- Acizii nucleici sunt neimunogenici
o Exceptii acizii nucleici se combin cu proteine RI care conduc la
autoimuniti (LED lupus eritematos diseminat)

4. Stabilitatea structural

7
- Pentru a fi bun imunogen, o structur trebuie s aib un anumit grad de rigiditate
- Este necesar meninerea unei anumite conformaii tridimensionale care s fie
recunoscut de limfocitele B
- Nu numai epitopii sunt capabili s se mite ci i paratopii

5. Degradabilitatea

- Pentru a se declansa un RI este necesar interaciunea ntre limfocitele T i o categorie


de celule denumite celule prezentatoare de antigen (APC)
o APC degradeaz antigenul prin procesare (degradare enzimatic controlat a
antegienului) i apoi exprim pe suprafa determinai antigenici care pot fi
recunoscui de limfocitele T
- Substana trebuie s fie suficient de stabil pentru a ajunge la situsul de interaciune i
n acelai timp s poat fi degradat enzimatic parial n timpul procesrii
- Moleculele care nu sunt biodegradabile nu sunt imunogenice reacii cronice
- Peptidele cu D-AA nu sunt imunogenice
- Izomerii L sunt imunogenice
- Carbohidraii nu pot activa Ly T
o Pot activa Ly B
- Macromoleculele mari, insolubile mai imunogenice dect moleculele mici, solubile
- Cross-linking chimic intermolecular, inducerea agregrii prin nclzire sau ataarea la
matrici insolubile metode pentru creterea insolubilitii macomoleculelor
facilitarea fagocitozei i creterea imunogenicitii

FACTORI CARE DEPIND DE ORGANISM

1. Vrsta i maturitatea funcional a SI

- Vrstele extreme influeneaz desfurarea RI


o Vrste avansate supresie a SI
o Perioada neonatal SI incomplet dezvoltat

2. Condiii fiziologice sau patologice ale organismului

- Sarcina meninera ftului se face cu ajutorul unui proces iniial la nivelul interfeei
materno-fetale
o Se instaleaz o toleran sistemic durata sa limiteaz stric perioada de
sarcin
- Imunodeficiene congenitale afecteaz imunitatea specific dar i pe cea nespecific
o Poate afecta capacitatea de procesare i prezentare a Ag-ului
- Imunodeficiene dobndite consecine a altor afeciuni afectare global a
sistemului imun
- Genotipul individual
o Influeneaz tipul de RI, intensitatea RI i apariia sau nu a RI
o Controlul genetic este n mare parte sub influena unor gene care se gsesc n
cadrul unui grup genic numit MHC complex major de histocompatibilitate
o Rspunsul imun este influenat de genele care codeaz specificitatea
receptorilor LyB i LyT

8
CONDIII CARE DEPIND DE CALEA DE ADMINISTRARE A AG-ULUI I
DOZA ADMINISTRAT

1. Calea de administrare

- Orice cale de administrare care tinde s unteze celulele prezentatoare de antigen nu


este recomandat pentru imunizare
- n cele mai multe cazuri sunt administrate parenteral
o Orice alt cale dect cea oral (per os)
o S.c sau i.m pentru substanele solubile
o i.p. pentru imunogene celulare de tipul eritrocitelor sau a vaccinurilor
bacteriene
o i.v de cele mai multe ori evitat
- antigenul administrat intravenos va fi transportat nti la splin
- antigenul administrat subcutanat ajunge nti la ganglionii limfatici proximali

2. Cantitatea administrat

- Fiecare imunogen prezint o relaie doz-rspuns caracteristic


o Se msoar prin evaluarea RI la doze variate de Ag
- Toleran lipsa RI, dar caracterizat prin specificitate i memorie atribuite RI
- Sunt necesare administrri repetate la intervale de sptmni pentru stimularea unui RI
puternic boosters sau repelles

3. Asocierea cu adjuvani

- Imunogenicitatea unei anumite substane poate fi amplificat cu ajutorul unor


adjuvani
- Adjuvantul nu poate conferi imunogenicitate unei substane ne-imunogene doar
amplific RI mpotriva unor imunogene
- Adjuvanii sunt folosii pentru intensificarea RI atunci cnd Ag-ul are o
imunogenicitate sczut sau cnd sunt disponibile doar cantiti sczute de Ag
- Mecanisme de aciune ale adjuvanilor
o Prelungirea persistenei antigenului
o Amplificarea semnalelor co-stimulatoare
o Formarea de granuloame
o Stimularea ne-sepcific a proliferrii limfocitare
- Pentru uz uman este aprobat doar sulfatul potasic de aluminiu (alum)
o Crete imunogenicitatea antigenelor fcndu-le s precipite
o Timpul de expunere crete de la cteva zile la cteva sptmni
o Crete dimensiunea antigenului
- B7 i IL-1 sunt importante pentru funcia de co-stimulare a limfocitelor T
- Alumul i adjuvantul Freund stimuleaz o reacie inflamatorie cronic local
o Se formeaz o mas dens de celule granulom amplific activarea
limfocitelor Th
- Adjunvantul Freund complet se folosete doar la prima administrare
- Alte microorganisme utilizate ca adjuvani:
o Baciul Calmete-Guerin
o Cornybacterium parvum

9
o Vordetella pertusis
- Aceti adjuvani stimuleaz macrofagele s preia, s proceseze i s prezinte
antigenele limfocitelor T i stimuleaz expresia de molecule co-stimulatorii
- Ali adjuvani:
o Lipopolizaharide (LPS)
Amplific rspunsurile la anticopri prin stimularea limfocitelor B
o Cei care conin muramyl dipeptid sintetic
Stimuleaz macrofagele i limfocitele T

Epitopi recunoscui de Ly B versus epitopi recunoscui de Ly T

Epitopi recunoscui de Ly B

- Legturi ne-covalente reacie reversibil


o Cele dou componente trebuie s fie foarte apropiate
- Epitopii pentru Ly B sunt compui din AA hidrofilici de pe suprafaa proteinei
- Pot fi compui din AA secveniali sau non-secveniali
- Sunt localizai n regiunile flexibile ale imunogenului; au o anumit mobilitate
- Proteinele complexe au epitopi multipli

Epitopi recunoscui de Ly T

- Peptidele antigenice recunoscute de Ly T formeazp complexe tri-moleculare cu


moleculele MHC i TCR
- Cupa de legare a MHC interacioneaz cu diferite peptide oligomerice care
funcioneaz ca epitopi T
- Procesarea antigenului pentru generarea peptidelor care interacioneaz specific cu
moleculele MHC
- Epitopii pentru Ly T sunt de cele mai multe ori interni
- Epitopii T-dominani sunt determinai de un set de molecule MHC exprimate de un
individ

CURS 3 Imunitatea ne-specific (nnscut)

- Imunitatea innscut, d.p.d.v filogenetic este mai veche dect imunitatea adaptativ
o Se refer la toate elementele pe care organismul le posed nc de la natere
o Const dintr-o serie de factori care sunt operaionali aproape mpotriva oricrei
substane care amenin organismul
o Nu este afectat de un contact anterior cu antigenul
o Reprezint prima linie de aprare mpotriva antigenelor
o Influeneaz tipul de rspuns imun adaptativ n funcie de tipul de antigen cu
care ia contact

Barierele anatomice i fiziologice mpotriva infeciilor

10
- Pentru mpiedicarea penetrrii patogenului intervin o serie de bariere anatomice i
fiziologice, internalizarea antigenului i procesele inflamatorii
o Bariere anatomice elemente structurale care mpiedic n mod fizic
ptrunderea antigenelor
o Bariere fiziologice aciunea diferitelor structuri ale organismului n scopul de
a susine barierele anatomice
- Prima barier anatomic mpotriva infeciilor este pielea la om atinge greutatea de 5
kg
o Este compus din 3 straturi: epiderm, derm i hipoderm
o Celulele de la suprafaa epidermului sunt moarte pline de keratin,
impermeabile la ap
Epidermul nu are vase de snge
o Dermul conine toate vasele de snge pentru a susine epidermul
La acest nivel se gsesc glandele sebacee
Produc sebum secreie uleioas cu pH ntre 3 i 6
Producia de sebum confer aciditate pielii mediu
defavorabil dezvoltrii majoritii microbilor
o Hipodermul barier suplimentar de grsime
- Suprafeele exterioare ale tractului gastro-intestinal, respirator i urogenital sunt
acoperite de un epiteliu mucos
- Ochiul acoperit de conjunctiv
- Mijloace de aprare suplimentare mucusul, saliva sau lacrimile
- Micarea oscilatorie a cililor de la nivelul suprafeei celulelor epiteliale aprare
mecanic
- Tusea i strnutul expulzeaz bacteriile nglobate n mucus
- Dup ptrunderea patogenului n organism, urmtoarea linie de aprare const ntr-o
serie de celule i de molecule (CMH, interferonii sau proteinele de faz acut)
- Mediu fiziologic ostil
o Temperatur prea nalt
o pH prea acid al stomacului
o presiune crescut a oxigenului la nivelul alveolelor
- Lichidele organismului pot conine i substane cu aciune antibacterian sau antiviral
o Lizozimul din lacrimi, saliv i alte secreii mucoase enzim care
hidrolizeaz un component uzual al pereilor bacterieni
- Neutrofilele elibereaz defensine peptide antimicrobiene
- Keratinocitele i epiteliul intestinal iniiaz producia de peptide antimicrobiene, ca
rspuns la infecia bacterian
- Infecia cu virusuri duce la producia de interferoni (IFN) molecule solubile
sintetizate de celule
o Interferoni III se leag de un receptor format de IL-10R2 i IFNLR1
o Interferoni I
IFN
o Familie de aproximativ 20 polipeptide sintetizate n
special de leucocite
IFN
o Sintetizat de fibroblati
IFN
Multe celule sintetizeaz interferon I ca rspuns la o serie de stimuli
ex: infecia viral

11
Reacioneaz cu celulele vecine fcndu-le non-infectabile
Celulele vecine produc PKR (protein kinaza R) fosforileaz
proteina eIF-2 (factor de iniiere a translaiei la eucariote)
eIF-2 fosforilat se cupleaz cu eIF2B i formeaz un complex
inactiv scderea sintezei proteice
activarea PKR induce RNAse L, care distruge ARN-ul
reducerea sintezei de proteine
crete activitatea p53 apopotoza celulei
Interferonii I
stimuleaz potenialul litic al celulelor NK
stimuleaz capacitatea de prezentare a antigenului de ctre APC
efect antiproliferativ
o Interferoni II sau tipul imun
IFN- sintetizat de Ly T i celulele NK
Funcii:
Activator al fagocitelor
Amplific expresia moleculeor MHC
Diferenierea Ly T efector
Produce comutarea de clas a Ly B
Stimuleaz activitatea celulelor NK
- Proteinele de faz acut
o Proteine a cror concentraie este capabil s creasc sau s descreasc ca
rspuns la procesul inflamator
Proteine de faz acut pozitive concentraia crete
Proteine de faz acut negativ concentraia scade contribuie la
apariia sepsis-ului
Albumina
Transferina
Antitrombina
Transcortina
o Neutrofilele i macrofagele secret citokine (IL-1, IL-6, IL-8 i TNF)
o Citokinele stimuleaz hepatocitele ficatul secret proteine de faz acut
Pozitive
Proteina C reactiv opsonin i declanatoare a sistemului
complement
Serum amiloid
o A factor chenotactic
o P opsonin
Factori de coagulare
2 macroglobulina inhibitor al coagulrii i fibrinolizei
ceruloplasmina
haptoglobina
- Antagonismul bacterian
o Reprezint o barier fiziologic mpotriva infeciilor cu patogeni
o Este format din miliarde de bacterii comensale i fungi
o Localizat la nivelul cavitii bucale, a sistemului digestiv sau la suprafaa
pielii
o Aceti microbi alctuiesc flora normal

12
Rol protectiv mpotriva patogenilor
Competiie pentru nutrieni
Activarea celulelor sistemului imun
Secreia de molecule toxice n mod selectiv
- Imunitatea nespecific nu ine cont de tipul antigenului i intr n aciune rapid ntr-un
timp foarte scurt

Internalizarea antigenelor

- 3 procese responsabile pentru internalizarea macromoleculelor i celulelor


- Macropinocitoza
o Procesul prin care o celul poate internaliza lichid extracelular
o Se formeaz vezicule macropinosomi
o Procesul asigur o manier eficient dar nespecific de testare a mediului
extracelular
- Endocitoza
o Procesul prin care macromoleculele din lichidul extracelular sunt internalizate
ca urmare a interaciunii acestora cu receptori de pe suprafaa celulelor
endocitate
o Legarea macromoleculelor de astfel de receptori declaneaz polimerizarea
clathrinei
o Invaginarea membranei tapetate de clathrina conduce la internalizarea
complexului receptor-ligand
o Veziculele tapetate de clathrina sunt mai uniforme dect cele formate prin
macropinocitoz
o Preluarea materialului strind prin macropinocitoz i endocitoz declaneaz
procesarea antigenelor activarea Ly T
- Fagocitoza
o Procesul de ingestie a unor particule cu diametre mai mari de 0,5 m
o Iniiat atunci cnd multipli receptori de suprafa se leag secvenial la liganzi
de pe suprafaa particulei mecanism de fermoar
o Interaciunea dintre receptori i liganzi duce la polimerizarea actinei
o Membrana se invagineaz printr-un mecanism bazat pe actin formarea
unui fagozom
Semnale ctre sistemul de actin fagocitoz
Semnale ctre sistemul de microtubuli endocitoz
o Molecule de adeziune - integrinele molecule indispensabile pentru
interaciunea celul-celul sau celul-matrice
o Multe microorganisme elibereaz substane care atrag fagocite chemotactism
- Calea endocitic
o n aceast cale intr macropinocitele i veziculele tapetate cu clathrin
o Aceste vezicule particip la un proce de scdere progresiv a pH-ului
o Vezicule cu proteine hidrolitice fuzioneaz cu compartimentele endocitice
o Vezicula cu clathrin fuzioneaz cu primul compartimen al sistemului
endocitic endozomul precoce
Receptorii sunt disociai i reciclai
Macromoleculele rmn n aa numitul endozom tardiv fuzioneaz cu
ali endozomi i cu alte vezicule din aparatul Golgi

13
Degradarea complet apare cnd endozomii fuzioneaz cu lizozomii i
formeaz endolizozomii
La sfritul procesului produii de digestie sunt colectai n vezicule
exocitice care se desprind din endolizozomi
- Calea fagocitic
o Dup internalizarea particulei, actina este depolimerizat i fagozomii
utilizeaz sistemul microtubulilor pentru a evolua ctre stadul de endozom
precoce, tardiv i apoi fagolizozom
Sunt implicate o serie de evenimente de fuziune i desprindere aceste
evenimente sunt facilitate de annexin se leag de fosfolipidele
membranare
o Mecanisme de distrucie intracelular
Enzimele lizozomale mecanisme oxigen-independente
Importante n esuturile unde presiunea oxigenului este sczut
Consumarea de ioni de hidrogen n reaciile oxigen-dependente
conduce la uoara cretere a pH-ului intrarea n aciune a
proteinelor cationice defensine bogate n arginin i cistein
Oxidarea letal a lipidelor i a proteinelor bacteriene mecanisme
oxigen-dependente
Declanate n momentul fagocitozei
Se produce o intensificare a activitii untului hexoz-
monofosfailor genereaz NADPH
o Reacie catalizat de NADPH-oxidaz prezent n
fagocite
Electronii trec de la NADPH la o flavoprotein membranar a
citocromului b558 reduce oxigenul molecular la anion
superoxid
NADP+ produs accelereaz untul pentoz monofosfailor cale
metabolic c econvertete sucroza la pentoz i CO2 i
elibereaz energie
2 molecule de anion superoxid, sub aciunea superoxid
dismutazei, genereaz o molecul de ap oxigenat i oxigen
singlet
Anionul superoxid reacioneaz cu apa oxigenat i genereaz
radicali hidroxil i oxigen singlet
Anionul superoxid, apa oxigenat, oxigenul singlet i radicalii
hidroxil = ageni microbicizi foarte puternici
Eliberarea de oxid nitric
Cnd macrofagele sunt activate de LPS sau MDP ncep s
exprime nivele crescute de NOS (nitric oxid sintetaz) enzim
care oxideaz L-arginina pentru a produce citrulina i oxid nitric
(NO)
Oxidul nitric are activitate antimicrobian foarte puternic
NO derivat din macrofage poate inhiba sinteza ADN a
limfocitelor i a celulelor tumorale
- PMN-urile
o Fac parte din grupul de celule albe sau leucocite
o Celule circulante, non-divizibile
o Pot s migreze n esuturi strbtnd membrana bazal a vaselor diapedez

14
o Exprim pe suprafa
Receptori pentru componente ale sitemului complement
Molecule de adeziune intercelular
Receptori pentru componentele matricii extracelulare
o Citoplasma conine granule bogate n enzime
- Macrofagele
o mpreunp cu monocitele formeaz sistemul fagocitelor mononucleare
o Deriv din promonocii intr n curentul sanguin i devin monocite
o Dup un anumit timp migreaz n esuturi i se difereniaz n macrofage n
funcie de localizare se numesc:
Histiocite n esutul conjuncitv
Macrofage alveolare la nivel pulmonar
Celule Kupffer n ficat
Celule mesangiale n glomerulii renali
Microglii n SN
Osteoclaste n esutul osos
o Citoplasm bogat n lizozomi
o Sunt capabile s proceseze antigenul i s-l prezinte limfocitului T
contribuie la activarea acestuia
o Fac parte dintre celulele prezentatoare de antigen APC
Limfocitele B
Celulele dendritice
Celulele Langerhans
- Inflamaia ca rspuns la infecie sau leziuni
o Inflamaia = complex de evenimente celulare i moleculare care apar ca
rspuns la atacul patogenilor ct i fa de leziunile tisulare
Poate fi declanat de citokinele secretate de ctre celulele aprrii
nespecifice
o Evenimente care caracterizeaz inflamaia:
Vasodilataia
Creterea permeabilitii peretelui vascular
Creterea influxului de leucocite
o Etape:
Celulele self alterate elibereaz molecule care atrag leucocitele
chemotactism
Principalii efectori = macrofagele i neutrofilele
n stadiile tardive se secret factori chemotactici pentru limfocitele
efector amplificarea rspunsului inflamator
o Inflamaia poate fi iniiat n diferite moduri
Factori locali kininele familie de peptide mici care circul inactive
n snge
Sunt activate de enzime eliberate de ctre celulele lezate sau de
enzime ale sistemului de coagulare
Sunt transformate n mediatori poteni
Determin: vasodilataie, creterea permeabilitii vaculare,
contracia musculaturii netede i durere
Macrofagele activate secret TNF i IL-6 stimuleaz hepatocitele care
secret proteina de faz acut

15
Proteinele de faz acut se nmulesc semnificativ n cazul unui
proces inflamator acut
o Proteina C reactiv
o Fibrinogenul
o Ceruloplasmina
o Serum-amiloid A
o Alfa1-antitripsina
Sinteza lor este stimulat de produi bacterieni (endotoxine) sau
citokine pro-inflamatoare (IL-1 i IL-6), care acioneaz asupra
ficatului
PCR
o funcioneaz ca opsonin stimuleaz fagocitoza
bacteriilor
o activeaz sistemul complement
Ali mediatori prostaglandinele i leucotrienele
Obinute prin metabolizarea fosfolipidelor membranare
Se obin din acidul arahidonic pe calea ciclo- i
lipooxigenazelor
o Inflamaia implic:
Modificri ale pattern-ului de migrare al leucocitelor
Amplific extravazarea
Stimularea expresiei moleculelor de adeziune responsabile
pentru procesul de diapedez
Creterea permeabilitii vasculare
n esut trec i enzime de coagulare i fibrinoliz ncep
procesele de reparare tisular
o Celule auxiliare care intervin n inflamaie trombocitele i mastocitele
o Trombocitele necesare pentru definitivarea procesului de vindecare tisular
o Mastocitul
Precursorii mastocitelor se formeaz n mduva osoas prin
hepatopoiez
Eliberate n torentul circulator ca celule nedifereniate
Se difereniaz cnd intr n esuturi
n funcie de distribuia tisular se mpart n:
MMC n mucoase
CTMC n esuturile conjunctive
Pe suprafa au receptori pentru IgE se leag d emoleculele IgE care
nu aparin unui complex antigen-anticorp
Cnd IgE leag antigenul mastocitele se activeaz
Alte modaliti de activare a mastocitului
Anafilatoxinele fragmente ale sistemului complement
Kininele
Este indus o scdere dramatic a cAMP creterea permeabilitii
membranare
Bazofil = echivalentul circulant al mastocitului
Bazofile i mastocite rol major n alergii
o Euzinofilul
Au capacitate limitat de a fagocita

16
Implicate n uciderea extracelular a unor parazii
Prezint granule care se coloreaz cu colorani acizi
n mijloc MBP major basic protein
n matrice ECP protein eozinofilic cationic i EPO
peroxidaz eozinofilic
Alte enzime: arilsulfataza B, fosfolipaza C, histaminaza, END
Prezint pe suprafa receptori pentru complement
n urma activrii i intensific arderile respiratorii
n granule conine proteine capabile s perforeze membrana
C9 complement
Perforinele produse de Ly T citotoxice sau NK
Majoritatea helminilor pot activa calea alternativ a complementului
Tapetarea cu C3b permite aderena euzinofilelor elibereaz
MBP distrug membrana parazitului
- Strategiile SI nespecific de recunoatere a non-self-ului
o 3 strategii de recunoatere imun:
Recunoaterea non-self-ului microbian recunoaterea structurilor
moleculare care sunt caracteristice doar microorganismelor
Recunoaterea de structuri eliberate de ctre celulele self alterate
Recunoaterea missing self-ului recunoaterea structurilor moleculare
exprimate doar de ctre celulele normale, neinfectate ale gazdei
aceste structuri sunt recunoscute de receptori inhibitori sau proteine
care inhib activarea mecanismelor efectorii ale imunitii nscute
(MHC I sau CD47 exprimat pe membrana eritrocitelor, dispare la
senescen)
o Produii cilor metabolice ale metabolismului microbian = PAMP pathogen
associated molecular patterns
Reprezint inte ale recunoaterii SI nespecific
o Receptorii care recunosc PAMP = PRR sau PRM pattern recognition
receptor/molecules
Sunt exprimai de macrofage, neutrofile, NK etc
o Cele mai cunoscute PAMP:
LPS-ul bacteriilor gram negative
Acidul lipoteichoic al bacteriilor gram pozitive
Peptidoglicanii
Lipoproteine generate prin palmitilarea cisteinelor N-terminale ale unor
proteine din peretele bacterian
Lipoarabinomanan microbacterian
ARN dublu catenar
Beta-glicani i manani (polizaharide ale manozei) gsii n fungi
o Caracteristici comune ale PAMP-urilor
Produse de microbi niciodat de organismul uman
Invariabile ntre patogenii dintr-o clas
ndeplinesc funcii fiziologice pentru patogen
Pierderea lor poate fi letal
Evitarea recunoaterii de ctre SI nespecific prin pierderea
PAMP nu este posibil
o PAMP-urile sunt produse att de patogeni ct i de comensali (bacterii care
triesc n simbioz)

17
Mecanismele prin care SI nespecific nu distruge microorganismele
comensale nu sunt pe deplin nelese sunt incriminate citokinele anti-
inflamatorii sau compartimentalizarea
o PRR-urile sistematizate n 3 clase funcionale
PRR care semnalizeaz prezena infeciei
Pot fi intracelulari sau la suprafaa celulelor
Legarea PAMP duce la activarea cilor de semnalizare pro-
inflamatorii
Urmtoarele categorii de produse sunt induse de PRR:
o Proteine cu efect antimicrobial direct
o Citokine inflamatorii i chemokine: TNF-alfa, IL-1, IL-
6, IL-8, IL-12 induc reacii fiziologice necesare pentru
combaterea infeciilor
o Produi care controleaz activarea raspunsurilor imune
adaptative: MHC II, CD80, CD86
o Nitric oxid sintetaza
o Celulele dendritice activate de aceti receptori se
maturizeaz i migreaz cu antigenul ctre ggl. limfatici
Cei mai cunoscui receptori din aceast clas sunt receptorii
Toll-like
PRR fagocitici sau endocitici - scavenger
Dup ce leag PAMP mediaz preluarea patogenului de ctre
celul
Se gsesc pe macrofage, celule dendritice i neutrofile
n aceast categorie intr receptorul pentru manoz al
macrofagului i MARCO receptorului macrofagului cu
structur de colagen
Funcie suplimentar la vertebrate facilitarea recunoaterii
leziunilor tisulare i fagocitarea resturilor celulare ale gazdei
3 clase de receptori scavenger: A, B i C
PRR secretate
Au 3 categorii de funcii
o Activeaz sistemul complement
o Opsonizarea microbilor
o Molecule accesorii pentru recunoasterea PAMP de ctre
receptorii TLR
Colectinele
o Se gsesc n snge i n lichidele interstiiale
o Alctuide dintr-un domeniu de colagen legat la o lectin
protein care leag carbohidrai
o Pot recunoate pattern-uri diferite de structuri glucidice
de pe suprafaa microbian
o Colectinele mediaz ndeprtarea patogenului prin
opsonizare, activarea sistemului complement sau prin
agregarea bacteriilor
o Exemplu MBL mannan binding lectin declaneaz
calea lectinelor de activare a sistemului complement
Proteinele de faz acut

18
o Produse n principal de hepatocitele stimulate de
citokine
o Activeaz sistemul complement sau funcioneaz ca
opsonin
Proteinele NOD
o Molecule intracitoplasmatice care detecteaz PAMP-
urile patogenilor intracelulari
o nrudite structural cu TLR-urile
o Se leag de structuri bacteriene derivate din
peptidoglicani pe care TLR-urile nu le recunosc
o Legarea NOD face ca celula s produc citokine IL-1,
IL-8, TNF i interferoni alfa i beta
o Receptorii Toll-like
Activarea Toll este necesar pentru aprarea eficient
Receptor similar Toll receptor pentru LPS (lipopolizaharid) la oareci
Receptorii Toll-like sunt o famile de receptori transmembranari
Prezint leucinp n poriunea extracelular i un domeniu
intracelular care are homologie cu cel al familiei IL-1R
Sunt cunoscui 11 TLR la mamifere
TLR sunt exprimai de un numr mare de leucocite dar i de alte tipuri
celulare
Monocitele, macrofagele i neutrofilele cea mai nalt
expresie
Celulele dendritice imature, celulele NK, subseturi de Ly B i T
nivele mai reduse
Unii TLR pot recunoate mai muli liganzi
Unii TLR utilizeaz molecule accesorii pentru recunoaterae ligandului
Unii TLR se asociaz pentru recunoaterea liganzilor
TLR4 exprimat de macrofage, celule dendritice, neutrofile, mastocite,
Ly B, celule endoteliale, celule musculare
Recunoate LPS-ul de pe suprafaa bacteriilor Gram negative
LPS se leag de LBP LPS binding protein
LBP transfer monomerii de LPS la CD14
CD14 protein de pe suprafaa macrofagelor i a celulelor
dendritice
TLR2 + TLR6 i TLR2 + TLR1 leag
Peptidoglicani
Lipoproteine
Lipoarabinomanan
Zymozan
TLR3 recunoate ARN viral dublu catenar
TLR5 flagelina
TLR7 i TLR8 ARN viral monocatenar
TLR9 dinucleotide CpG nemetilate ale ADN
TLR 10 funcie nrudit TLR9
TLR 11 receptor orfan

SISTEMUL COMPLEMENT

19
- Bordet a concluzionat c activitatea bacteriolitic necesit:
o Anticorpi specifici i cu rezisten la nclzire
o Un al doilea compus sensibil la cldur alexin
Ehrlich propune termenul de complement pentru a defini o activitate
care vine s completeze aciunea anticorpilor
- Sistemul complement 30 de molecule solubile i membranare
o Unele particip la activare n cascad
o Alte proteine particip la reglare
- Activarea complementului:
o n mod spontan, fr intervenia complexelor imune
o Poate fi declanat de ctre plasmin
Este inhibat de C1Inh
- Compusul C3
o Format din 2 lanuri polipeptidice i
o Compusul principal al complementului
o Prezint legtur tioester
ntre COOH glutamin i SH cistein
Aceast legtur este metastabil
Grupul electrofilic carbonil al glutaminei este susceptibil la atacul unei
grupri nucleofilice
Aceast reacie permite glutaminei s se lege covalent la alte
molecule mecanismul prin care C3 se leag de ali compui
o Legtura tioester poate fi hidrolizat de ap form activat a C3
Acest proces asigur generarea continu a C3
o Alt mecanism de activare al C3 clivarea proteolitic sub aciunea C3
convertazei
Convertazele C3 au localizare preponderent pe suprafaa non-self sau
la nivelul complexelor imune
- Compusul C4
o Prezint legtur tioester
o Exist 2 isotipuri de C4: C4a i C4b
C4a prefer s se lege la grupri amino ale unor proteine grupri
amidice
C4b se leag n special la grupri hidroxil grupri esterice
- Hidrolizarea C3 de ctre ap duce la formarea C3i
o n prezenta Mg, C3i leag factorul B expunere situs pentru factorul D
(singurul compus cu activitate enzimatic care nu necesit modificri)
Factorul D cliveaz factorul B n Ba i Bb
Bb se leag de C3i C3iBb = convertaza C3 scindeaz C3 n
C3a i C3b
o C3b fie rmn n soluie fie se ataeaz sa suprafaa unor
celule self
La acest nivel C3b are afinitate mai mare pentru
factorul H (cofactor al factorului I) dect pentru
factorul B clivarea C3
Se formez C3f i iC3b
o iC3b este un compus inactiv care
formeaz n continuare C3c,
C3dg, C3d i C3g

20
o C3b, iC3b, C3dg i C3d pstreaz
legturile tioester i reprezint
opsonine ale sistemului
complement

Calea alternativ

- Nu necesit prezena anticorpilor component exclusiv al aprrii nespecifice


- Compusul C3b se poate lega la suprafeele antigenelor dar i la suprafeele celulelor
self
o Membranele self au coninut crescut de acid sialic i alte mecanisme care le
permit inactivarea rapid a C3b
o Pe suprafeele strine C3b rmne o perioad mai lung i cu ajutorul Mg
poate lega compusul B
Aceast legare expune un situs al factorului B pe care acioneaz
factorul D
Clivarea B de ctre D duce la formarea Ba i Bb
Bb se ataeaz de C3b i formeaz convertaza cii alternative
C3bBb
o Aceast convertaz este stabilizat cu ajutorul
properdinei timp de njumtire de la 5 min la 30 min
o Enzima acioneaz asupra unor noi molecule de C3
O parte din moleculele C3b se ataeaz la
convertaza C3 C3bBbC3b
C3b non-enzimatic se ataeaz la C5
Bb hidrolizeaz C5 C5a
(anafilatoxin) i C5b
o C5b se leag la membrana
antigenului, ataeaz compusul
C6 i formeaz MAC

Calea clasic

- ncepe prin formarea complexelor antigen-anticorp


o IgM, anumite clase IgG i unii activatori neimunologici
- Legarea anticorpului la antigen duce la modificri ale poriunii Fc a moleculelor IgM
expun un situs de legare pentru C1
- Complexul C1
o Este format dintr-o molecul C1q i cte 2 molecule de C1r i C1s stabilizate
de Ca
o C1q este format din 18 lanuri polipeptidice care formeaz 6 brae n form de
triplu helix structur colagen-like
Vrfurile braelor constituie domenii de legare pentru
Domeniile Ch2 anticorpi clas G
Ch3 anticorpi clas M
o Moleculele C1r i C1s conin domenii catalitice i domenii de interaciune
o Fiecare molecul C1 trebuie s lege cel puin 2 situsuri Fc
IgM circulant singur nu poate activa cascada complementului
incompatibilitate de form

21
Moleculele IgG conin doar un situt se de legare al C1q
Se pot lega doar dac 2 molecule se gsesc la o distan mai
mic de 30-40 nm sau dac formeaz un complex
Este suficient o singur molecul IgM pentru liza eritrocitelor prin
sistemul complement (n cazul moleculelor IgG sunt necesare
aproximativ 1000)
o Complexul C1qrs este meninut inactiv de ctre C1-Inh
o Legarea C1q la Fc duce la eliberarea C1-Inh
Apar modificri ale C1r care cliveaz C1s
C1s cliveaz C4 n C4a i C4b
o C4b se leag la suprafaa membranar n vecintatea C1
o C4a este anafilatoxin nu particip la cascada
complementului
o C1 cliveaz i C2 n C2b (mic) i C2a
C2a i C4b formeaz convertaza C3 a cii clasice
Unele fragmente C3b se leag la C4bC2a (convertaza)
C4bC2aC3b convertaza C5
o Componentul C3b se leag la C5
o C4bC2a poate cliva C5 n C5b i C5a
C5a anafilatoxin
C5b se ataeaz la C6 i formeaz MAC

Calea lectinelor

- Lectinele sunt proteine care se leag la carbohidrai


- Nu necesit prezena anticorpilor
- Dup iniiere acioneaz prin intermediul componentelor C4 i C2
- Este activat de MBL mannose binding lectine se leag la rezidurile de manoz ale
glicoproteinelor sau carbohidrailor
o MBL este considerat protein de faz acut
o Funcie simialr cu C1q
o Dup ce se leag de suprafaa patogenului intervine MASP (serin proteaz
asociat MBL) complex care duce la clivarea i activarea C4
MASP are structur asemntoare cu C1r i C1s

Formarea complexului de atac membranar

- Convertaza C5 cliveaz C5 la C5a i C5b


o C5b se leag la suprafaa celulei int formeaz situs de legare pentru noi
compui
Este foarte labil i este inactivat dac n 2 minute nu se leag C6
- C5bC6 leag C7 transformare hidrofilic amfifilic
o Dac recia apare pe membrana celulei int complexul se prinde de
membran
o Dac reacia apare pe un complex imun solubil sau pe alte suprafee
complexul va fi eliberat
Complexul eliberat se poate lega pe membrana celulelor vecine
fenomenul numit innocent bystander

22
- Legarea C8 la complexul C5bC6C7 duce la modificarea structural a C8 de la
hidrofilic la amfilitic
o Complexul C5b5,7,8 formeaz un por de 10 angstromi poate duce la liza
eritrocitelor
- Etapa final legarea i polimerizarea C9 formarea unui por de 70-100 angstromi
- Celula este ucis prin influxul de ap i pierderea de electrolii

Reglarea sistemului complement

- Distrugerea celulelor self de ctre sistemul complement este prevenit de o serie de


mecanisme de protecie:
o C3b este hidrolizat
o Exist o serie de proteine reglatorii acioneaz asupra convertazelor
- Reglarea cii clasice
o C1 inhibitor
Inhibitor de serin proteaz serpin
Formeaz un complex cu C1rs disocierea C1q
o Meninerea C4b n stare solubil
Prin intermediul proteinei solubile C4-BP sau a unor proteine
membranare: CR1 sau MCP cofactori pentru factorul inhibitor I
Aceste proteine previn asocierea C4b cu C2
C4b legat va fi scindat n C4d i C4c
o DAF (decay acceleration factor) previne asocierea C4b i C2
DAF = glicoprotein ancorat covalent la un glicofosfolipid membranar
o C3 convertaza cii clasice poate fi disociat de DAF, CR1 i C4-BP
- Reglarea cii alternative
o Factorul H
Asocierea cu C3b previne asocierea cu factorul B nu se formeaz
convertaza
Poate disocia compusul B din complexele C3iBb sau C3bBb
Acioneaz ca un cofactor pentru factorul I
o Factorul I necesit intervenia unor cofactori: H, CR1 i MCP
Efect de clivare a C3 n fragmente tot mai mici
o Unele proteine reglatorii disociaz convertaza deja format
Intervine CR1 i DAF
- Reglarea cii post C3
o Capacitatea de transformare a complexului C5b,6,7 din starea hidrofil n cea
hidrofob este critic pentru aciunea sa
Proteina S (vitronectina) se poate lega la complexul liber i blocheaz
transformarea acestuia
o HRF i CD59 (MIRL membrane inhibitor of reactive lysis)
Protejeaz celulele self de atacul nespecific al sistemului complement
Se leag la C8 i previne legarea C9
Aceast aciune este posibil dac CD59 i HRF i celulele
aparin aceleiai specii
o Complexul MAC
Poate fi endocitat

23
Conecine ale activrii sistemului complement

- Liza unor celule, bacterii sau virusuri


o Unele virusuri pot activa toate cele 3 ci ale complementului
o Neutralizarea viral prin:
Realizarea de agregate
Crearea unui strat proteic care reduce capacitatea viral de a infecta
celulele
Preluarea virusurilor opsonizate de ctre CR1
- Opsonizarea
o Promoveaz fagocitoza
o Principalele opsonine C3b, C4b i iC3b
Amplific fagocitoza i liza intracelular
o Activarea fagocitelor, inclusiv de ctre C5a, duce la creterea numrului de
receptori CR1
- Legarea de receptori ai complementului
o Degranularea mastocitelor i bazofilelor i eozinofilelor
o Extravazarea i chemotaxia leucocitelor
o Agregarea plachetelor
o Inhibiia migrrii macrofagelor i stimularea emiterii de prelungiri
o Eliberarea de neutrofile elimin enzime hidrolitice
o Creterea expresiei de receptori pentru complement CR1 i CR3 pe neutrofile
- Clearance imun
o ndeprtarea complexelor imune din circulaie i transportul la nivelul splinei
sau ficatului vor fi distruse
o Eritrocitele posed CR1
- Rol n reproducere
o Spermatozoizii sunt protejai de aciunea sistemului complement prin MCP,
DAF i CD59
o C3 secretat n uter ca rspuns la estrogen
Secreia este blocat de progesteron

Inflamaia mediat de complement

- Legtura dintre sistemul complement i inflamaie este fcute de anafilatoxine: C3a,


C4a i C5a
- Anafilatoxinele au receptori pe suprafaa a diferite celule
- Un rol cheie este jucat de mastocit
- Activarea mastocitului i a bazofilului (echivalentul circulant) duce la degranularea
acestuia i la eliberarea de factori pre-formai
- Prin metabolizarea acidului arahidonic:
o pe calea lipo-oxigenazelor - sinteza de leucotriene B4, C4, D4 (SRS-A)
o pe calea ciclo-oxigenazelor - sinteza de prostaglandine i tromboxani
- Efecte ale inflamaiei
o Roea i cldur dilatare capilar
o Edem exudarea lichidelor i chemotactism celular
- Diapedez trecerea celulelor din vas n esut cu ajutorul unor molecule de adeziune
- Diapedeza neutrofilelor
o Rostogolirea

24
Pe suprafaa celulelor apar selectinele E i P se leag reversibil cu
molecule mucin-like sau sialil Lewis de pe suprafaa neutrofilelor
ncetinirea neutrofilelor
o Activarea pe msur ce neutrofilul se rostogolete este activat de diveri
chemoatractani
Crete afinitatea integrinelor pentru moleculele de adeziune aparinnd
superfamiliei Ig-nelor
o Fixarea legarea integrinelor de mare afinitate la moleculele aparinnd
superfamiliei imunoglobulinelor adeziune ferm i stabil
o Traversarea peretelui endotelial
- Neutrofilele ajunse n esut fagociteaz i elibereaz mediatori care vor contribui la
meninerea procesului inflamator
o MIP-1 i MIP-1 atrag macrofagele elemente majore n inflamaie
o Macrofagele activate secret IL-1, IL-6 i TNF-
Efecte locale
Coagulare
Creterea permeabilitii vasculare
Stimularea expresiei de molecule de adeziune
Stimularea produciei de chemokine
Efecte sistemice
Influx crescut de limfocite, neutrofile, monocite, euzinofile, bazofile i
mastocite
- TGF- rol n limitarea inflamaiei, acmularea i proliferarea fibroblastelor i
depunerea de matrice extracelular
- C5a cea mai puternic anafilatoxin
o Poate aciona ca factor chemotactic pentru neutrofile
o Poate aciona asupra endoteliului capilar
Produce vasodilataie i creterea permeabilitii vasculare
o Determin eliberarea de citokine
o mpreun cu IL-6 induce rspunsul de faz acut
o Carboxipeptidaza seric N cliveaz arginina C-terminal din anafilatoxine i
blocheaz legarea acestora de receptorii lor
- Complementul interacioneaz si cu alte cascade enzimatice: coagularea, generarea
kininelor i fibrinoliza
o Conexiunea este fcut de aciunea proteinei reglatoare C1-inh
Aceasta inhib pe lng C1r i C1s i Factorul XII-a al sistemului de
coagulare, kallikreina sistemului kininelor i plasmina cascadei
fibrinolitice

Deficienele sistemului complement

- Deficiene ale componentelor iniiale ale cii clasice persistena C1 n ser i apariia
de boli ca LED (lupus eritematos diseminat), glomerulonefrit sau imunodeficiene
- Deficiena n properdin i factor D imunodeficiene i infecii recurente cu
Neisseria
- Deficiena C3 infecii recurente i persistena C1 n ser
- Deficiene MAC infecii recurente cu Neisseria
- Deficiene C1-Inh angioedem ereditar edeme localizate
- Deficiene componente reglatoare DAF i HRF afectarea ancorrii la membran

25
o Anemie hemolitic cronic
o Hemoglobinurie

IMUNOGLOBULINE: STRUCUTR I FUNCIE

- Electroforez proteine ser:


o Albumine
o 1-, 2-, - i -globuline
- Proteinele migreaz n funcie de:
o Sarcin electric distinct
o Mrime
o Greutate molecular
o Caracteristici mediu
o Condiii fizice
- Moleculele specifice pentru antigen se regsesc n fracia
o Au fost denumite imunoglobuline

STRUCTURA

- Cel mai des studiate IgG1 molecula prototip


- Format din 2 lanuri uoare L i dou lanuri grele H
- Fiecare lan uor este legat de un lan greu prin intermediul unei legturi disulfidice
inter-lan la care se adaug legturi ne-covalente: hidrofobe, de hidrogen
o ntre cele 2 lanuri grele se regsesc legturi similare
Studii enzimatice

- Dup clivarea cu papain o perioad scurt de timp a rezultat:


o 2 fragmente Fab fragment antigen binding
o 1 fragment Fc fragment cristalizabil
- Dup clivarea cu pepsin:
o Un fragment compus din 2 fragmente Fab F(ab)2 capabil s precipite
antigenele
o Nu s-a putut separa un fragment Fc
- Dup reducerea cu mercaptoetanol i alchilare tratament care reduce legturile
disulfidice
o 2 lanuri grele H
o 2 lanuri uoare L
- Anticorpii anti-Fab pot reaciona att cu lanurile H ct i L
- Anticorpii Fc nu recunoteau dect lanurile H
- Concluzii:
o Fab conine o poriune de lan greu i una de lan uor
o Fc conine doar componente ale lanului greu

Studii de secveniere

- Mieloame = malignitate a plasmocitelor


- Secvenierea lanurilor uoare

26
o S-au constatat diferente importante ntre proteine la nivelul jumtii siuate
ctre captul N-terminal regiune variabil
o Poriunea situat ctre captul C-terminal regiunea constant
A dus la identificarea a 2 tipuri de lanuri uoare: k i
La om 60% sunt de tip k
Exist 4 subtipuri de lanuri
- Secvenierea lanurilor H
o Pentru studiu proteinele mielomatoase au fost reduse cu mercaptoetanol i
alchilate
o Partea N-terminal prezenta variaii importante regiune variabil
o Restul lanului prezenta 5 tipuri de secven de baz 5 tipuri de regiuni
constante , , , , fiecare definete un isotip
330 aa pentru , i
440 pentru i
o Lanurile grele ale unei molecule de anticorp determin clasa acelui anticorp
o Exist 2 subclase de lanuri i 4 subclase de lanuri

- Structura Ig este determinat de organizarea primar, secundar, teriar i cuaternar


o Structura primar permite mprirea lanurilor n regiuni variabile i
constante
o Structura secundar format prin plierea lanului polipeptidic n straturi
pliate
o Structura teriar formarea de domenii globulare
o Structura cuaternar domeniile globulare ale domeniilor grele i uoare
adiacente interacioneaz domenii funcionale care permit Ig-nei s lege
specific un anumit Ag

Domenii

- Att lanurile L ct i lanurile H conin o serie de uniti homoloage de cca. 70-110 aa


- O astfel de unitate conine o legtur disulfidic intralan
- Lanurile L conin un domeniu V i unul C
- Lanurile H conin un domeniu V i 3 sau 4 domenii C
- Domeniile Ig-nelor sunt formate din 2 straturi opuse, alctuite din foi -pliate unite
ntre ele prin bucle de conexiune
o Foile -pliate din cadrul unui strat sunt stabilizate prin legturi de H care leag
gruprile NH dintr-o foaie cu gruprile carbonil din foaia adiacent
o Foile -pliate sunt caracterizate prin aa hidrofobi i hidrofili alternativi, ale
cror catene sunt dispuse perpendicular pe planul stratului
AA hidrofobi spre interior
AA hidrofili spre exterior
o Aceast alctuire faciliteaz interaciunile necovalente dintre domenii, prin
intermediul feelor alctuite din foi -pliate
o Se realizeaz bucle de conexiune cu lungimi i secvene variabile aceste
segmente particip la realizarea paratopului
- Domeniile regiunii variabile
o Realizarea diagramelor Wu-Kabat
o Diferenele dintre lanuri se regsesc la nivelul unor secvene reduse ca
ntindere CDR (complementarity determining region) sau regiuni hiperV

27
Au fost identificate 3 regiuni hiperV att n lanul H ct i n lanul L
o Restul domeniului V prezint o variaie mult mai redus regiuni cadru
o Regiunile CDR contribuie la realizarea situsului de interaciune cu Ag-nul se
regsesc la nivelul buclelor de conexiune
Dispunerea spaial a foilor este aceiai
Orientarea spaial a buclelor difer
- Regiunea balama
o Lanurile , i prezint o secven peptidic extins ntre domeniile C H1 i
CH2, care nu prezint homologie de structur cu celelalte domenii i care a fost
denumit regiune balama
o Este bogat n prolin este foarte flexibil
o Fab poate avea diferite unghiuri ale braelor atunci cnd trebuie s se ataeze la
un Ag
o Datorit regiunii balama Fab i Fc se pot mica independent
o AA importani din aceast zon cistein i prolin
Prolina face ca regiunea balama s fie foarte vulnerabil la atacul
enzimatic loc de aciune al papainei i pepsinei
Cisteina responsabil pentru legturile disulfidice dintre lanurile H
o Lanurile i nu au regiune balama
- Domenii constante
o Demonstreaz o variabilitate redus ntre molecule
o Variabilitatea este necesar pentru generarea repertoriului receptorilor i este
cantonat la captul N-terminal al moleculei
o Partea constant este situat ctre captul C-terminal al molecului
o Diferenele care apar la nivelul prii constante vor genera diferite isotipuri sau
clase
o Aceste diferene afecteaz mrimea, sarcina, solubilitatea i aspectele
structurale ale unei Ig
o Lanurile uoare au 2 isotipuri: k i
6 subgrupe de lanuri
Obligatoriu un Ly B produce acelai isotip de lan uor
o Lanurile grele au 5 isotipuri: , , , , sau IgM, IgD, IgG, IgE, i IgA
4 subgrupe de lanuri : IgG1, IgG2, IgG3, IgG4
2 subgrupe de lanuri : IgA1, IgA2
Lanurile i au cte 4 domenii constante; restul au doar cte 3
IgM i IgE nu au regiune balama pentru flexibilitate se bazeaz pe
interaciunea dintre domeniile CH2
IgD i IgG3 au regiune balama particular de lung
o CH1 i CL aceste domenii au rolul de a permite extinderea braelor Fab
faciliteaz interaciunea dintre Ac i Ag rol n mobilitate
Ajut la meninerea mpreun a domeniilor V prin intermediul elgturii
disulfidice dintre cele 2 lanuri L i H
Contribuie la realizarea diversitii permit mai multe asociere
ntmpltoare ntre domeniile VH i VL
Cresc numrul de interaciuni stabile posibile ntre VH i VL
o Cele dou domenii CH2 ale IgA, IgD i IgG precum i domeniile C H3 ale IgE i
IgM sunt separate prin lanuri oligozaharidice sunt mai accesibile

Carbohidrai

28
- Toate Ig-nele conin carbohidrai sub forma unor lanuri laterale de oligozaharide
ataate n geneeral domeniilor CH
o 12-14% IgD, IgE i IgM
o 2-3% IgG i IgA
- Funcia precis nu este cunoscut

Isoforme

- Ig-nele pot fi exprimate fie ca molecule de membran sau pot fi secretate


- Domeniul C-terminal difer n cele 2 cazuri
o Anticorpii prezint o secven hidrofilic cu lungime variabil
o Forma membranar conine 3 regiuni:
Un spacer hidrofilic extracelular
Un domeniu transmembranar
O coad citoplasmatic
- Forma membranar funcioneaz ca parte a receptorului pentru antigen al limfocitului
B BCR
o Ig membranar prezint o poriune C terminal mai extins, dar i lipsete
poriunea denumit coad
o Captul N-terminal este extracelular destinat legrii antigenului
o Ultimul domeniu CH este situat deasupra membranei celular
o Captul C-terminal este situat intracelular
o Domeniul TM conine cca. 18-22 aa, urmat de o regiune de 26 aa cu catene
laterale hidrofobe interacioneaz cu stratul bilipidic al membranei
o Domeniul intracitoplasmatic conine de obicei aa bazici interacioneaz cu
fosfolipide de pe partea intracitoplasmatic a membranei
IgG i IgE cca. 28 aa
IgM i IgD 3 aa
o Ig nu este singurul component al receptorului pentru Ag al limfocitului B
o Exist 2 perechi de lanuri Ig2-Ig responsabile pentru transducerea
semnalului
Ig poriune intracitoplasmatic de 61 aa
Ig 48 aa
- Forma secretat
o Plasmocitele produc o isoform mai scurt
o Domeniile TM i intracitoplasmatic lipsesc
o La ultimul domeniu CH este ataat o coad faciliteaz secreia
o Poriunea N-terminal este conservat capacitate de recunoatere i legare a
antigenului
o IgG, IgE i IgD secretate sub form de monomeri
IgM sub form de pentameri
IgA sub form de dimeri
o Lan J leag coada lanurilor i prin legturi disulfidice

Componenta secretorie

- Anticorpii de clas A sigur protecia suprafeelor mucoase i apar n secreiile externe


o IgA este prezent sub form de dimer la care se adaug o component secretorie

29
- Ac-ii de clas A secretai sub form de dimeri vor fi elgate de ctre un receptor situat
la polul latero-bazal al celulelor epiteliale receptor poli-Ig (receptor imunoglobulinic
polimeric, pIg)
o Acest receptor recunoate lanul J i poriuni C-terminale ale lanurilor
o Consecina legrii este endocitarea complexului receptor ligand
Se produce transcitoza de la polul bazal la polul apical
La polul apical IgA este eliberat
pIg este tiat i doar o poiune rmne ataat de Ac acest
fragment este denumit component secretorie

Clase de Ig i activitate biologic

- Legarea Ac de Ag nu duce la distrugerea Ag


- Ac trebuie s antreneze alte rspunsuri care vor ucide patogenii
- Partea variabil este cea care se leag la antigen
- Partea constant este responsabil de interaciunile cu alte proteine, celule i esuturi
- Opsonizarea procesul care promoveaz fagocitarea Ag-nelor de ctre macrofage sau
neutrofile
o Se realizeaz prin intermediul receptorilor Fc
- Activarea sistemului complement
o IgM i 3 IgG pot activa sistemul complement
o Din activitatea SC rezult C3b
- ADCC citotoxicitatea mediat celular dependent de Ac
o Dac receptorul Fc care leag un fragment Fc al unui Ac ataat la un Ag se
gsete la suprafaa unei celule care ucide extracelular (celula NK), nu se
produce fagocitoz ci la distrugerea Ag n afara celulei
- Transcitoza
o Procesul prin care IgA este transportat ctre suprafaa mucoasei

Receptorii Fc

- Legarea Ac la Ag primul pas n eliminarea Ag


- Sunt necesare mecanisme suplimentare care depind de recunoterea regiunii Fc de
ctre receptorii Fc
- IgD nu are receptori Fc
- Majoritatea FcR transmit celulei un semnal activator sau inhibitor
o Efecte: endocitoza, fagocitoz sau ADCC

Imunoglobulina G

- Imunoglobulina majoritar n ser


- Structur
o Sub form de monomer
o Prezint 4 subclase
- Proprieti biologice i chimice
o Majoritar este IgG1
o Singura Ig care poate traversa placenta IgG matern asigur protecia noului-
nscut n primele luni de via

30
o Pot activa complementul pe cale clasic (cu excepia IgG4)
o Situsul de legere al complementului C1q plasat n domeniul CH2
o IgG anticorpul produs majoritar n rspunsul imun secundar
o Imunitatea antitoxic realizat exclusiv de IgG
o Timp de njumtire 21 zile
o Principala Ig opsonizant

Imunoglobulina M

- 8-10% din totalul anticorpilor


- Structura
o Sub form de pentamer 5 monomeri unii prin lanul J
- Proprieti biologice i chimice
o IgM precede apariia IgG n filogenia rspunsului imun
o IgM primul anticorp produs de Ly B
o Exist i sub form de monomer, ca receptor pe suprafaa Ly B tipul major de
receptor pentru Ag al celulelor B
Este exprimat pe membrana Ly B nainte de contactul cu Ag omolog
La scurt timp apare si IgD
o IgM liber n soluie form de stea
o IgM legat la Ag configuraie de crab
o Valena combinatorie a IgM este 10
o IgM anticorpul predominant n rspunsul imun primar
o IgM este anticorpul predominant produs de ft
Nivel ridicat infectarea ftului
o Este eficient n aglutinare i citoliz
o Mare parte din anticorpii naturali fa de microorganisme sunt de tip IgM
sistemul AB0
o Cea mai eficient imunoglobulin n activarea lizei mediate de complement
o Nu este opsonin intrinsec fagocitele nu au receptor pentru fragmentul Fc
o IgM amplific fagocitoza prin activarea cii clasice a complementului i
generarea opsoninei C3b

Imunoglobulina A

- Prezent sub dou forme: seric i secretorie


- IgA seric
o 20% din anticorpii serici
o Structura
80% sub form de monomer
Restul sub form de dimer
Monomerii sunt unii prin lanul J
o Proprieti
Nu leag complementul pe cale clasic
O poate face pe cale alternativ n stare nativ IgA nu poate
interaciona cu C1q
Poate fi inactivat de o proteaz IgA
- IgA secretorie

31
o Imunoglobulina predominant n variate secreii
o Structura
2 monomeri unii prin lanul J mpreun cu componenta secretorie
Este sitetizat local de plasmocite se dimerizeaz intracelular
o Proprieti
Componenta secretorie protejeaz IgA de proteaze
Protejeaz suprafeele mucoase de interaciunea cu moleculele de
adeziune de pe suprafaa potenialilor patogeni
sIgA poate opsoniza particule strine
Neutrofilele au Fc pe membran
IgA agregat poate s se lege de neutrofile i poate activa calea
alternativ a complementului

Imunoglobulina D

- Mai puin de 1% din totalul anticorpilor


- Structur
o Este un monomer
o Prezint o singur legtur disulfidic ntre lanurile grele
- Proprieti:
o Este labil la cldur i mediu acid
o Prezent n cantiti mari pe membrana Ly B poate activa celulele B
Este asociat IgM
o Poate aciona ca anticorp pentru penicilin, insulin i toxoidul difteric

Imunoglobulina E

- Prezent n cantiti foarte mici


- O proporie foarte mic de plasmocite produce IgE
- Structura
o Sub form de monomer

- Proprieti
o Produs de Ly B i plasmocitele din splin, esutul limfatic amigdalian i
adenoidian i cel din mucoasa tractului respirator i gastrointestinal
o Nu traverseaz placenta
o Asociat cu reacii de hipersensibilitate imediat
o IgE are afinitate pentru celulele speciei gazd n care a fost produs este
homocitotropic
o Contactul cu Ag declaneaz degranularea mastocitelor simptomatologia
alergiei
o Declaneaz reacia inflamatorie acut
o Poate fi important n imunitatea fa de unii parazii
o IgE nu poate activa complementul pe cale clasic

TCR T Cell Receptor

- Acest receptor se gsete exclusiv n forma membranar

32
- TCR este specific pentru moleculele de antigen combinate cu moleculele self codate
de genele din complexul MHC restricie MHC
- Identificarea i caracterizarea TCR s-a fcut cu ajutorul anticorpilor monoclonali
- TCR este un heterodimer lanuri i
o Au secvene constante i secvente variabile
o A fost identificat i un alt heterodimer
Puine limfocite folosesc TCR-ul
- Lanurile care formeaz TCR fac parte din superfamilia imunoglobulinelor
- Fiecare lan prezint 2 domenii care conin o legtur disulfidic intralan
o Poriunea N-terminal prezint variaii
o Poriunea C-terminal este conservat
o Molecula TCR seamn cu un fragment Fab
- Domeniile variabile - prezint 3 regiuni hipervariabile echivalentul regiunilor CDR
- Domeniile transmembranare ale TCR conin reziduuri ncrcate pozitiv permite
interaciunea cu lanurile complexului CD3 responsabil pentru transmiterea
semnalului
- Poriunea intracitoplasmatic este scurt nu poate transduce semnalul
- TCR se asociaz cu molecula CD3 complexul TCR-CD3
o Moleculele asociate particip doar la transducerea semnalului
o CD3 este necesar pentru exprimarea heterodimerilor i pe suprafaa
membranar
Pierderea genelor pentru codarea CD3 duce la imposibilitatea
exprimrii ntregului complex
o CD3 este format din 5 tipuri de lanuri formeaz 3 dimeri
Heterodimer
Heterodimer
Heterodimer (zeta) sau
Lanurile i sunt codate de aceiai gen dar difer partea C-
terminal
Lanurile , i fac parte din familia Ig-nelor
Conin un domeniu Ig-like, un domeniu transmembranar i o
lung coad intracitoplasmatic
o n cazul lanurilor i coada este particular de lung
Regiunea transmembranar conine reziduuri de acid aspartic incrcate
negativ permite interaciunea cu aa ncrcai pozitiv din lanurile TCR
Cozile intracitoplasmatice ale lanurilor CD3 conin ITAM
imunoreceptor activat pe baz de tirozin
ITAM se gsete i la nivelul heterodimerului Ig-/Ig- i la
nivelul receptorilor Fc pentru IgE i IgG
ITAM reacioneaz cu tirozin-kinaze rol important n
transmiterea semnalului
Lanurile , i un singur motiv ITAM
Lanurile i 3 motive ITAM

Molecule co-receptor

- Recunoaterea complexului antigen-MHC este mediat doar de complexul TCR/CD3


- La activarea TCR particip i alte molecule
- Ly T sunt mprite n 2 subpopulaii

33
o Ly T helper exprim CD4+ - recunosc MHC II
Poriunea N-terminal se leag la domeniul 2 al MHC II
o Ly T citotoxice exprim CD8+ - recunosc MHC I
Se leag la domeniile 2 i 3 ale MHC I
- CD4
o Glicoprotein monomeric
o Structur
Are 4 domenii extracelulare Ig-like
Regiune transmemranar hidrofob
Coad intracitoplasmatic lung conine 3 reziduuri de serin
- CD8
o Este un heterodimer unite printr-o legtur disulfidic
Poate exista i ca homodimer
o Structur
Un domeniu extracelular Ig-like
Regiune transmembranar hidrofob
Coad citoplasmatic
- CD8 i CD4 se ncadreaz n categoria moleculelor co-receptor se leag la
complexul MHC-peptid i particip la transducerea semnalului
- CD8 leag o singur unitate MHC I
- CD4 leag un dimer de molecule MHC II
o Apar modificri conformaionale i se formeaz o structur tetrameric

COMPLEXUL MAJOR DE HISTOCOMPATIBILITATE (MHC)

- Funcia moleculelor MHC este de a lega fragmente peptidice derivate din patogeni i
de a le prezenta pe suprafaa celular pentru a fi recunoscute de ctre Ly T
- Consecinte:
o Celulele infectate viral sunt ucise
o Macrofagele sunt activate
o Ly B sunt activate pentru a produce Ac
- Proprieti MHC
o MHC este poligenic mai multe gene MHC care codeaz pentru produi cu
diverse capaciti de legare a diferite proteine
o Este nalt polimorfic exist multe alele pentru aceste gene
- MHC const din 3 grupuri majore
o MHC I
o MHC II
o MHC III

Structura MHC

- MHC I
o Glicoprotein
o Heterodimer
Lanul format de o gen situat n complexul genic MHC
Format din:
o 3 domenii extracelulare

34
o Un domeniu transmembranar
o Regiune intracitoplasmatic
Domeniul 1 nu are legturi S-S intralan
Domeniile 2 i 3 stabilizate prin legturi S-S
Domeniile 3 i 2G sunt Ig-like
Domeniile 1 i 2 au structur unic
o 4 foi -pliate antiparalele unite n partea C-terminal cu
un helix arcuit
o Sunt aranjate simetric formeaz o platform alctuit
din 8 foi -pliate i 2 -helixuri pe margini
Formeaz cupa destinat legrii peptidului
Se leag att pe laturi ct i la baz
Lanul 2 microglobulina (2G)
Lan scurt, invariabil
Este codat pe CRS 15q21 nafara complexului genic MHC
Poate fi asociat i altor molecule
Structur globular cu legturi S-S intralan
o MHC I face parte din superfamilia Ig-nelor
o Domeniul 3 interacioneaz cu molecula CD8
o 2G interacioneaz cu domeniul 3 i cu aa ai domeniilor 1 i 2
Aceste interaciuni sunt eseniale pentru plierea corect a intregii
molecule
n absena 2G majoritatea lanurilor al MHC I nu sunt exprimate pe
membran
Celulele Daudi nu sintetizeaz 2G
- MHC II
o Glicoprotein
o Heterodimer
Lan 1 leg S-S intralan
Lan 2 leg S-S intralan
Lanurile sunt asociate necovalent
Sunt codate de gene din regiunea MHC II
Sunt formate din:
o 2 domenii extracelulare
o Domeniu transmembranar
o Regiune intracitoplasmatic
o Structurile N-terminale 1 i 1 ale MHC II s fie analoage cu 1 i 2 ale
MHC I
o Cupa este similar cu cea de la MHC I
o HLA-DR1 MHC II care care apare ca un dimer de heterodimeri
- Distribuie tisular
o MHC I distribuie larg dar nu ubicuitar
Pe celulele nucleate i pe plachete
Nu se gsete pe cornee, n regiunea exocrin a pancreasului
Pe celulele acinare ale parotidei
Pe neuronii din SNC
Pe celulele trofoblastului vilos

35
o MHC II pe celuele prezentatoare de antigen profesionale cel. Dendritice,
Ly B macrofage
Unele celule pot exprima MHC II n condiii fiziologice sau patologice
Celulele epiteliului timic, celulele Langerhans i Ly T activate cu Ag
exprim MHC II n mod normal
Pe alte celule expresia MHC II poate fi indus

Harta genic

- Complexul MHC se gsete pe CRS 6 conine peste 300 de gene


- Regiunea MHC cea mai dens populat din ntregul genom uman
- Genele MHC I i MHC II sunt flancate de promotori
- Factorul C II TA transactivator de clas II i factorul de transcripie RFX se leag la
promotor-ul MHC II
o Defecte ale acestor factori sindromul limfocitelor goale pacienii nu au
MHC II
- Expresia MHC este reglat de citokine
o Interferonii i TNF cresc expresia MHC I
o IFN induce formarea unor factori specifici de transcripie care se leag la
promoter-ul MHC I
Mai induce i expresia C II TA
o IL-4 crete expresia de HLA II pe Ly B n rapaus
o IFN scade expresia HLA II pe Ly B
o Corticoizii i prostaglandinele scad de asemenea expresia HLA II
- Expresia MHC este sczut consecutiv anumitor infecii virale
- n infecia cu CMV (citomegalovirus uman) o protein viral se leag la 2G i
previne asamblarea MHC I i transportul ctre membran
- Ad12 (adenovirusul) produce o scdere a transcripiei genelor TAP-1 i 2 molecula
nu se poate asambla
- Aciunea celulelor NK nu depinde de prezentarea peptidului viral n MHC I
- Genele MHC I
o Genele HLA I sunt notate cu sufixul HLA-A, B, C codeaz molecule MHC
clasice
o Gene care codeaz pentru molecule MHC I non-clasice
HLA E, F, G, H, J, X i MIC
o MHC E, F G sunt denumii molecule Ib
Sunt alctuite dintr-un lan i 2G
Au identitate de structur de pn la 70% cu moleculele clasice
Sunt mai puin polimorfice
o Familia MIC 15-30% identitate structural cu MHC clasic este nalt
polimorfic
Produii acestor gene sunt exprimai pe celulele epiteliale i sunt indui
de cldur i de ali stimuli care influeneaz proteinele de soc termic
- Genele MHC II
o Regiunea MHC II conine gene care codeaz pentru lanurile i ale MHC
clasice HLA-DP, DQ i DR
o Exist mai multe gene pentru lanul ct i pentru lanul
o Exist gene MHC II care codeaz molecule non-clasice HLA-DN, DO, DM

36
o Genele LMP2 i LMP7 codeaz pentru subuniti ale proteasomului i 2 gene
TAP i TAP2
- Genele MHC III
o Codeaz pentru compui ai complementului, steroid 21-hidroxilaze, proteine
de oc termic, citokine (TNF i TNF)
- Polimorfismul moleculelor MHC I i II
o Moleculele MHC exprimate de un individ nu se schimb pe parcursul vieii
o Moleculele MHC ale unui individ difer de cele exprimate de un alt individ al
speciei respective
o Diversitatea deriv din polimorfism multiple alele candidate pentru un
anumit locus
o Toate genele MHC sunt dominante
o Exprimarea este codominant ambele gene alele de pe cromosomii omologi
se exprim pe suprafaa celulelor

IMUNOGLOBULINE: STRUCUTR I FUNCIE

- Electroforez proteine ser:


o Albumine
o 1-, 2-, - i -globuline
- Proteinele migreaz n funcie de:
o Sarcin electric distinct
o Mrime
o Greutate molecular
o Caracteristici mediu
o Condiii fizice

37
- Moleculele specifice pentru antigen se regsesc n fracia
o Au fost denumite imunoglobuline

STRUCTURA

- Cel mai des studiate IgG1 molecula prototip


- Format din 2 lanuri uoare L i dou lanuri grele H
- Fiecare lan uor este legat de un lan greu prin intermediul unei legturi disulfidice
inter-lan la care se adaug legturi ne-covalente: hidrofobe, de hidrogen
o ntre cele 2 lanuri grele se regsesc legturi similare
Studii enzimatice

- Dup clivarea cu papain o perioad scurt de timp a rezultat:


o 2 fragmente Fab fragment antigen binding
o 1 fragment Fc fragment cristalizabil
- Dup clivarea cu pepsin:
o Un fragment compus din 2 fragmente Fab F(ab)2 capabil s precipite
antigenele
o Nu s-a putut separa un fragment Fc
- Dup reducerea cu mercaptoetanol i alchilare tratament care reduce legturile
disulfidice
o 2 lanuri grele H
o 2 lanuri uoare L
- Anticorpii anti-Fab pot reaciona att cu lanurile H ct i L
- Anticorpii Fc nu recunoteau dect lanurile H
- Concluzii:
o Fab conine o poriune de lan greu i una de lan uor
o Fc conine doar componente ale lanului greu

Studii de secveniere

- Mieloame = malignitate a plasmocitelor


- Secvenierea lanurilor uoare
o S-au constatat diferente importante ntre proteine la nivelul jumtii siuate
ctre captul N-terminal regiune variabil
o Poriunea situat ctre captul C-terminal regiunea constant
A dus la identificarea a 2 tipuri de lanuri uoare: k i
La om 60% sunt de tip k
Exist 4 subtipuri de lanuri
- Secvenierea lanurilor H
o Pentru studiu proteinele mielomatoase au fost reduse cu mercaptoetanol i
alchilate
o Partea N-terminal prezenta variaii importante regiune variabil
o Restul lanului prezenta 5 tipuri de secven de baz 5 tipuri de regiuni
constante , , , , fiecare definete un isotip
330 aa pentru , i
440 pentru i
o Lanurile grele ale unei molecule de anticorp determin clasa acelui anticorp
o Exist 2 subclase de lanuri i 4 subclase de lanuri

38
- Structura Ig este determinat de organizarea primar, secundar, teriar i cuaternar
o Structura primar permite mprirea lanurilor n regiuni variabile i
constante
o Structura secundar format prin plierea lanului polipeptidic n straturi
pliate
o Structura teriar formarea de domenii globulare
o Structura cuaternar domeniile globulare ale domeniilor grele i uoare
adiacente interacioneaz domenii funcionale care permit Ig-nei s lege
specific un anumit Ag

Domenii

- Att lanurile L ct i lanurile H conin o serie de uniti homoloage de cca. 70-110 aa


- O astfel de unitate conine o legtur disulfidic intralan
- Lanurile L conin un domeniu V i unul C
- Lanurile H conin un domeniu V i 3 sau 4 domenii C
- Domeniile Ig-nelor sunt formate din 2 straturi opuse, alctuite din foi -pliate unite
ntre ele prin bucle de conexiune
o Foile -pliate din cadrul unui strat sunt stabilizate prin legturi de H care leag
gruprile NH dintr-o foaie cu gruprile carbonil din foaia adiacent
o Foile -pliate sunt caracterizate prin aa hidrofobi i hidrofili alternativi, ale
cror catene sunt dispuse perpendicular pe planul stratului
AA hidrofobi spre interior
AA hidrofili spre exterior
o Aceast alctuire faciliteaz interaciunile necovalente dintre domenii, prin
intermediul feelor alctuite din foi -pliate
o Se realizeaz bucle de conexiune cu lungimi i secvene variabile aceste
segmente particip la realizarea paratopului
- Domeniile regiunii variabile
o Realizarea diagramelor Wu-Kabat
o Diferenele dintre lanuri se regsesc la nivelul unor secvene reduse ca
ntindere CDR (complementarity determining region) sau regiuni hiperV
Au fost identificate 3 regiuni hiperV att n lanul H ct i n lanul L
o Restul domeniului V prezint o variaie mult mai redus regiuni cadru
o Regiunile CDR contribuie la realizarea situsului de interaciune cu Ag-nul se
regsesc la nivelul buclelor de conexiune
Dispunerea spaial a foilor este aceiai
Orientarea spaial a buclelor difer

- Regiunea balama
o Lanurile , i prezint o secven peptidic extins ntre domeniile C H1 i
CH2, care nu prezint homologie de structur cu celelalte domenii i care a fost
denumit regiune balama
o Este bogat n prolin este foarte flexibil
o Fab poate avea diferite unghiuri ale braelor atunci cnd trebuie s se ataeze la
un Ag
o Datorit regiunii balama Fab i Fc se pot mica independent
o AA importani din aceast zon cistein i prolin

39
Prolina face ca regiunea balama s fie foarte vulnerabil la atacul
enzimatic loc de aciune al papainei i pepsinei
Cisteina responsabil pentru legturile disulfidice dintre lanurile H
o Lanurile i nu au regiune balama
- Domenii constante
o Demonstreaz o variabilitate redus ntre molecule
o Variabilitatea este necesar pentru generarea repertoriului receptorilor i este
cantonat la captul N-terminal al moleculei
o Partea constant este situat ctre captul C-terminal al molecului
o Diferenele care apar la nivelul prii constante vor genera diferite isotipuri sau
clase
o Aceste diferene afecteaz mrimea, sarcina, solubilitatea i aspectele
structurale ale unei Ig
o Lanurile uoare au 2 isotipuri: k i
6 subgrupe de lanuri
Obligatoriu un Ly B produce acelai isotip de lan uor
o Lanurile grele au 5 isotipuri: , , , , sau IgM, IgD, IgG, IgE, i IgA
4 subgrupe de lanuri : IgG1, IgG2, IgG3, IgG4
2 subgrupe de lanuri : IgA1, IgA2
Lanurile i au cte 4 domenii constante; restul au doar cte 3
IgM i IgE nu au regiune balama pentru flexibilitate se bazeaz pe
interaciunea dintre domeniile CH2
IgD i IgG3 au regiune balama particular de lung
o CH1 i CL aceste domenii au rolul de a permite extinderea braelor Fab
faciliteaz interaciunea dintre Ac i Ag rol n mobilitate
Ajut la meninerea mpreun a domeniilor V prin intermediul elgturii
disulfidice dintre cele 2 lanuri L i H
Contribuie la realizarea diversitii permit mai multe asociere
ntmpltoare ntre domeniile VH i VL
Cresc numrul de interaciuni stabile posibile ntre VH i VL
o Cele dou domenii CH2 ale IgA, IgD i IgG precum i domeniile C H3 ale IgE i
IgM sunt separate prin lanuri oligozaharidice sunt mai accesibile

Carbohidrai

- Toate Ig-nele conin carbohidrai sub forma unor lanuri laterale de oligozaharide
ataate n geneeral domeniilor CH
o 12-14% IgD, IgE i IgM
o 2-3% IgG i IgA
- Funcia precis nu este cunoscut

Isoforme

- Ig-nele pot fi exprimate fie ca molecule de membran sau pot fi secretate


- Domeniul C-terminal difer n cele 2 cazuri
o Anticorpii prezint o secven hidrofilic cu lungime variabil
o Forma membranar conine 3 regiuni:
Un spacer hidrofilic extracelular

40
Un domeniu transmembranar
O coad citoplasmatic
- Forma membranar funcioneaz ca parte a receptorului pentru antigen al limfocitului
B BCR
o Ig membranar prezint o poriune C terminal mai extins, dar i lipsete
poriunea denumit coad
o Captul N-terminal este extracelular destinat legrii antigenului
o Ultimul domeniu CH este situat deasupra membranei celular
o Captul C-terminal este situat intracelular
o Domeniul TM conine cca. 18-22 aa, urmat de o regiune de 26 aa cu catene
laterale hidrofobe interacioneaz cu stratul bilipidic al membranei
o Domeniul intracitoplasmatic conine de obicei aa bazici interacioneaz cu
fosfolipide de pe partea intracitoplasmatic a membranei
IgG i IgE cca. 28 aa
IgM i IgD 3 aa
o Ig nu este singurul component al receptorului pentru Ag al limfocitului B
o Exist 2 perechi de lanuri Ig2-Ig responsabile pentru transducerea
semnalului
Ig poriune intracitoplasmatic de 61 aa
Ig 48 aa
- Forma secretat
o Plasmocitele produc o isoform mai scurt
o Domeniile TM i intracitoplasmatic lipsesc
o La ultimul domeniu CH este ataat o coad faciliteaz secreia
o Poriunea N-terminal este conservat capacitate de recunoatere i legare a
antigenului
o IgG, IgE i IgD secretate sub form de monomeri
IgM sub form de pentameri
IgA sub form de dimeri
o Lan J leag coada lanurilor i prin legturi disulfidice

Componenta secretorie

- Anticorpii de clas A sigur protecia suprafeelor mucoase i apar n secreiile externe


o IgA este prezent sub form de dimer la care se adaug o component secretorie
- Ac-ii de clas A secretai sub form de dimeri vor fi elgate de ctre un receptor situat
la polul latero-bazal al celulelor epiteliale receptor poli-Ig (receptor imunoglobulinic
polimeric, pIg)
o Acest receptor recunoate lanul J i poriuni C-terminale ale lanurilor
o Consecina legrii este endocitarea complexului receptor ligand
Se produce transcitoza de la polul bazal la polul apical
La polul apical IgA este eliberat
pIg este tiat i doar o poiune rmne ataat de Ac acest
fragment este denumit component secretorie

Clase de Ig i activitate biologic

- Legarea Ac de Ag nu duce la distrugerea Ag


- Ac trebuie s antreneze alte rspunsuri care vor ucide patogenii

41
- Partea variabil este cea care se leag la antigen
- Partea constant este responsabil de interaciunile cu alte proteine, celule i esuturi
- Opsonizarea procesul care promoveaz fagocitarea Ag-nelor de ctre macrofage sau
neutrofile
o Se realizeaz prin intermediul receptorilor Fc
- Activarea sistemului complement
o IgM i 3 IgG pot activa sistemul complement
o Din activitatea SC rezult C3b
- ADCC citotoxicitatea mediat celular dependent de Ac
o Dac receptorul Fc care leag un fragment Fc al unui Ac ataat la un Ag se
gsete la suprafaa unei celule care ucide extracelular (celula NK), nu se
produce fagocitoz ci la distrugerea Ag n afara celulei
- Transcitoza
o Procesul prin care IgA este transportat ctre suprafaa mucoasei

Receptorii Fc

- Legarea Ac la Ag primul pas n eliminarea Ag


- Sunt necesare mecanisme suplimentare care depind de recunoterea regiunii Fc de
ctre receptorii Fc
- IgD nu are receptori Fc
- Majoritatea FcR transmit celulei un semnal activator sau inhibitor
o Efecte: endocitoza, fagocitoz sau ADCC

Imunoglobulina G

- Imunoglobulina majoritar n ser


- Structur
o Sub form de monomer
o Prezint 4 subclase
- Proprieti biologice i chimice
o Majoritar este IgG1
o Singura Ig care poate traversa placenta IgG matern asigur protecia noului-
nscut n primele luni de via
o Pot activa complementul pe cale clasic (cu excepia IgG4)
o Situsul de legere al complementului C1q plasat n domeniul CH2
o IgG anticorpul produs majoritar n rspunsul imun secundar
o Imunitatea antitoxic realizat exclusiv de IgG
o Timp de njumtire 21 zile
o Principala Ig opsonizant

Imunoglobulina M

- 8-10% din totalul anticorpilor


- Structura
o Sub form de pentamer 5 monomeri unii prin lanul J
- Proprieti biologice i chimice
o IgM precede apariia IgG n filogenia rspunsului imun

42
o IgM primul anticorp produs de Ly B
o Exist i sub form de monomer, ca receptor pe suprafaa Ly B tipul major de
receptor pentru Ag al celulelor B
Este exprimat pe membrana Ly B nainte de contactul cu Ag omolog
La scurt timp apare si IgD
o IgM liber n soluie form de stea
o IgM legat la Ag configuraie de crab
o Valena combinatorie a IgM este 10
o IgM anticorpul predominant n rspunsul imun primar
o IgM este anticorpul predominant produs de ft
Nivel ridicat infectarea ftului
o Este eficient n aglutinare i citoliz
o Mare parte din anticorpii naturali fa de microorganisme sunt de tip IgM
sistemul AB0
o Cea mai eficient imunoglobulin n activarea lizei mediate de complement
o Nu este opsonin intrinsec fagocitele nu au receptor pentru fragmentul Fc
o IgM amplific fagocitoza prin activarea cii clasice a complementului i
generarea opsoninei C3b

Imunoglobulina A

- Prezent sub dou forme: seric i secretorie


- IgA seric
o 20% din anticorpii serici
o Structura
80% sub form de monomer
Restul sub form de dimer
Monomerii sunt unii prin lanul J
o Proprieti
Nu leag complementul pe cale clasic
O poate face pe cale alternativ n stare nativ IgA nu poate
interaciona cu C1q
Poate fi inactivat de o proteaz IgA
- IgA secretorie
o Imunoglobulina predominant n variate secreii
o Structura
2 monomeri unii prin lanul J mpreun cu componenta secretorie
Este sitetizat local de plasmocite se dimerizeaz intracelular
o Proprieti
Componenta secretorie protejeaz IgA de proteaze
Protejeaz suprafeele mucoase de interaciunea cu moleculele de
adeziune de pe suprafaa potenialilor patogeni
sIgA poate opsoniza particule strine
Neutrofilele au Fc pe membran
IgA agregat poate s se lege de neutrofile i poate activa calea
alternativ a complementului

Imunoglobulina D

43
- Mai puin de 1% din totalul anticorpilor
- Structur
o Este un monomer
o Prezint o singur legtur disulfidic ntre lanurile grele
- Proprieti:
o Este labil la cldur i mediu acid
o Prezent n cantiti mari pe membrana Ly B poate activa celulele B
Este asociat IgM
o Poate aciona ca anticorp pentru penicilin, insulin i toxoidul difteric

Imunoglobulina E

- Prezent n cantiti foarte mici


- O proporie foarte mic de plasmocite produce IgE
- Structura
o Sub form de monomer

- Proprieti
o Produs de Ly B i plasmocitele din splin, esutul limfatic amigdalian i
adenoidian i cel din mucoasa tractului respirator i gastrointestinal
o Nu traverseaz placenta
o Asociat cu reacii de hipersensibilitate imediat
o IgE are afinitate pentru celulele speciei gazd n care a fost produs este
homocitotropic
o Contactul cu Ag declaneaz degranularea mastocitelor simptomatologia
alergiei
o Declaneaz reacia inflamatorie acut
o Poate fi important n imunitatea fa de unii parazii
o IgE nu poate activa complementul pe cale clasic

TCR T Cell Receptor

- Acest receptor se gsete exclusiv n forma membranar


- TCR este specific pentru moleculele de antigen combinate cu moleculele self codate
de genele din complexul MHC restricie MHC
- Identificarea i caracterizarea TCR s-a fcut cu ajutorul anticorpilor monoclonali
- TCR este un heterodimer lanuri i
o Au secvene constante i secvente variabile
o A fost identificat i un alt heterodimer
Puine limfocite folosesc TCR-ul
- Lanurile care formeaz TCR fac parte din superfamilia imunoglobulinelor
- Fiecare lan prezint 2 domenii care conin o legtur disulfidic intralan
o Poriunea N-terminal prezint variaii
o Poriunea C-terminal este conservat
o Molecula TCR seamn cu un fragment Fab
- Domeniile variabile - prezint 3 regiuni hipervariabile echivalentul regiunilor CDR
- Domeniile transmembranare ale TCR conin reziduuri ncrcate pozitiv permite
interaciunea cu lanurile complexului CD3 responsabil pentru transmiterea
semnalului

44
- Poriunea intracitoplasmatic este scurt nu poate transduce semnalul
- TCR se asociaz cu molecula CD3 complexul TCR-CD3
o Moleculele asociate particip doar la transducerea semnalului
o CD3 este necesar pentru exprimarea heterodimerilor i pe suprafaa
membranar
Pierderea genelor pentru codarea CD3 duce la imposibilitatea
exprimrii ntregului complex
o CD3 este format din 5 tipuri de lanuri formeaz 3 dimeri
Heterodimer
Heterodimer
Heterodimer (zeta) sau
Lanurile i sunt codate de aceiai gen dar difer partea C-
terminal
Lanurile , i fac parte din familia Ig-nelor
Conin un domeniu Ig-like, un domeniu transmembranar i o
lung coad intracitoplasmatic
o n cazul lanurilor i coada este particular de lung
Regiunea transmembranar conine reziduuri de acid aspartic incrcate
negativ permite interaciunea cu aa ncrcai pozitiv din lanurile TCR
Cozile intracitoplasmatice ale lanurilor CD3 conin ITAM
imunoreceptor activat pe baz de tirozin
ITAM se gsete i la nivelul heterodimerului Ig-/Ig- i la
nivelul receptorilor Fc pentru IgE i IgG
ITAM reacioneaz cu tirozin-kinaze rol important n
transmiterea semnalului
Lanurile , i un singur motiv ITAM
Lanurile i 3 motive ITAM

Molecule co-receptor

- Recunoaterea complexului antigen-MHC este mediat doar de complexul TCR/CD3


- La activarea TCR particip i alte molecule
- Ly T sunt mprite n 2 subpopulaii
o Ly T helper exprim CD4+ - recunosc MHC II
Poriunea N-terminal se leag la domeniul 2 al MHC II
o Ly T citotoxice exprim CD8+ - recunosc MHC I
Se leag la domeniile 2 i 3 ale MHC I
- CD4
o Glicoprotein monomeric
o Structur
Are 4 domenii extracelulare Ig-like
Regiune transmemranar hidrofob
Coad intracitoplasmatic lung conine 3 reziduuri de serin
- CD8
o Este un heterodimer unite printr-o legtur disulfidic
Poate exista i ca homodimer
o Structur
Un domeniu extracelular Ig-like
Regiune transmembranar hidrofob

45
Coad citoplasmatic
- CD8 i CD4 se ncadreaz n categoria moleculelor co-receptor se leag la
complexul MHC-peptid i particip la transducerea semnalului
- CD8 leag o singur unitate MHC I
- CD4 leag un dimer de molecule MHC II
o Apar modificri conformaionale i se formeaz o structur tetrameric

COMPLEXUL MAJOR DE HISTOCOMPATIBILITATE (MHC)

- Funcia moleculelor MHC este de a lega fragmente peptidice derivate din patogeni i
de a le prezenta pe suprafaa celular pentru a fi recunoscute de ctre Ly T
- Consecinte:
o Celulele infectate viral sunt ucise
o Macrofagele sunt activate
o Ly B sunt activate pentru a produce Ac
- Proprieti MHC
o MHC este poligenic mai multe gene MHC care codeaz pentru produi cu
diverse capaciti de legare a diferite proteine
o Este nalt polimorfic exist multe alele pentru aceste gene
- MHC const din 3 grupuri majore
o MHC I
o MHC II
o MHC III

Structura MHC

- MHC I
o Glicoprotein
o Heterodimer
Lanul format de o gen situat n complexul genic MHC
Format din:
o 3 domenii extracelulare
o Un domeniu transmembranar
o Regiune intracitoplasmatic
Domeniul 1 nu are legturi S-S intralan
Domeniile 2 i 3 stabilizate prin legturi S-S
Domeniile 3 i 2G sunt Ig-like
Domeniile 1 i 2 au structur unic
o 4 foi -pliate antiparalele unite n partea C-terminal cu
un helix arcuit
o Sunt aranjate simetric formeaz o platform alctuit
din 8 foi -pliate i 2 -helixuri pe margini
Formeaz cupa destinat legrii peptidului
Se leag att pe laturi ct i la baz
Lanul 2 microglobulina (2G)
Lan scurt, invariabil
Este codat pe CRS 15q21 nafara complexului genic MHC

46
Poate fi asociat i altor molecule
Structur globular cu legturi S-S intralan
o MHC I face parte din superfamilia Ig-nelor
o Domeniul 3 interacioneaz cu molecula CD8
o 2G interacioneaz cu domeniul 3 i cu aa ai domeniilor 1 i 2
Aceste interaciuni sunt eseniale pentru plierea corect a intregii
molecule
n absena 2G majoritatea lanurilor al MHC I nu sunt exprimate pe
membran
Celulele Daudi nu sintetizeaz 2G
- MHC II
o Glicoprotein
o Heterodimer
Lan 1 leg S-S intralan
Lan 2 leg S-S intralan
Lanurile sunt asociate necovalent
Sunt codate de gene din regiunea MHC II
Sunt formate din:
o 2 domenii extracelulare
o Domeniu transmembranar
o Regiune intracitoplasmatic
o Structurile N-terminale 1 i 1 ale MHC II s fie analoage cu 1 i 2 ale
MHC I
o Cupa este similar cu cea de la MHC I
o HLA-DR1 MHC II care care apare ca un dimer de heterodimeri
- Distribuie tisular
o MHC I distribuie larg dar nu ubicuitar
Pe celulele nucleate i pe plachete
Nu se gsete pe cornee, n regiunea exocrin a pancreasului
Pe celulele acinare ale parotidei
Pe neuronii din SNC
Pe celulele trofoblastului vilos
o MHC II pe celuele prezentatoare de antigen profesionale cel. Dendritice,
Ly B macrofage
Unele celule pot exprima MHC II n condiii fiziologice sau patologice
Celulele epiteliului timic, celulele Langerhans i Ly T activate cu Ag
exprim MHC II n mod normal
Pe alte celule expresia MHC II poate fi indus

Harta genic

- Complexul MHC se gsete pe CRS 6 conine peste 300 de gene


- Regiunea MHC cea mai dens populat din ntregul genom uman
- Genele MHC I i MHC II sunt flancate de promotori
- Factorul C II TA transactivator de clas II i factorul de transcripie RFX se leag la
promotor-ul MHC II
o Defecte ale acestor factori sindromul limfocitelor goale pacienii nu au
MHC II
- Expresia MHC este reglat de citokine

47
o Interferonii i TNF cresc expresia MHC I
o IFN induce formarea unor factori specifici de transcripie care se leag la
promoter-ul MHC I
Mai induce i expresia C II TA
o IL-4 crete expresia de HLA II pe Ly B n rapaus
o IFN scade expresia HLA II pe Ly B
o Corticoizii i prostaglandinele scad de asemenea expresia HLA II
- Expresia MHC este sczut consecutiv anumitor infecii virale
- n infecia cu CMV (citomegalovirus uman) o protein viral se leag la 2G i
previne asamblarea MHC I i transportul ctre membran
- Ad12 (adenovirusul) produce o scdere a transcripiei genelor TAP-1 i 2 molecula
nu se poate asambla
- Aciunea celulelor NK nu depinde de prezentarea peptidului viral n MHC I
- Genele MHC I
o Genele HLA I sunt notate cu sufixul HLA-A, B, C codeaz molecule MHC
clasice
o Gene care codeaz pentru molecule MHC I non-clasice
HLA E, F, G, H, J, X i MIC
o MHC E, F G sunt denumii molecule Ib
Sunt alctuite dintr-un lan i 2G
Au identitate de structur de pn la 70% cu moleculele clasice
Sunt mai puin polimorfice
o Familia MIC 15-30% identitate structural cu MHC clasic este nalt
polimorfic
Produii acestor gene sunt exprimai pe celulele epiteliale i sunt indui
de cldur i de ali stimuli care influeneaz proteinele de soc termic
- Genele MHC II
o Regiunea MHC II conine gene care codeaz pentru lanurile i ale MHC
clasice HLA-DP, DQ i DR
o Exist mai multe gene pentru lanul ct i pentru lanul
o Exist gene MHC II care codeaz molecule non-clasice HLA-DN, DO, DM
o Genele LMP2 i LMP7 codeaz pentru subuniti ale proteasomului i 2 gene
TAP i TAP2
- Genele MHC III
o Codeaz pentru compui ai complementului, steroid 21-hidroxilaze, proteine
de oc termic, citokine (TNF i TNF)
- Polimorfismul moleculelor MHC I i II
o Moleculele MHC exprimate de un individ nu se schimb pe parcursul vieii
o Moleculele MHC ale unui individ difer de cele exprimate de un alt individ al
speciei respective
o Diversitatea deriv din polimorfism multiple alele candidate pentru un
anumit locus
o Toate genele MHC sunt dominante
o Exprimarea este codominant ambele gene alele de pe cromosomii omologi
se exprim pe suprafaa celulelor

48
DIVERSITATEA IMUNOGLOBULINELOR

- Receptorul Ly B este molecula de imunoglobulin


- Captul amino-terminal recunoate antigenul poriune variabil
- Captul carboxi-terminal implicat n funciile biologice poriune constant
- O imunoglobulin prezint 2 situsuri identice de legare a antigenului paratop
o Format din partea variabil a lanului uor i din partea variabil a lanului greu
o Localizat n regiunile de hipervariabilitate
- Antigenul particip la legare prin epitop
- Imunoglobulina este organizat n domenii globulare 2 straturi opuse, unite prin
intermediul unei legturi disulfidice intra-lan i a unei legturi hidrofobe
o Fiecare strat este format din foi -pliate antiparelele, unite prin bucle de
conexiune
- Fiecare Ly B este capabil s rspund unui epitop unic teoria seleciei clonale
o Antigenele selecteaz limfocitele care au specificitate potrivit, le activeaz i
determin proliferarea acestora
o O parte dintre acestea se difereniaz n plasmocite
Plasmocitele nu exprim imunoglobuline pe suprafa
Plasmocitele secret imunoglobuline variant solubil a receptorilor
anticorp
Anticorpii recunosc antigenele n mod specific se formeaz
complexe antigen-anticorp complex imun
- Receptorul BCR mai este alctuit pe lng imunoglobulin i din moleculele Ig i Ig
au rol n transmiterea intracelular a semnalului
- Sistemul imun al mamiferelor poate s sintetizeze mai mult de 10 10 imunoglobuline
diferite
o Totalitatea specialitilor diferite pe care le produce sistemul imun repertoriu
imunologic
- Teorii care explic numrul mare de imunoglobuline
o Teoria liniei germinale doar 15% dintre genele genomului haploid sunt
alocate codrii imunoglobulinelor
o Teoria variaiei somatice un numr limitat de gene este dedicat
imunoglobulinelor, dar prin recombinri i mutaii se produce o mare
diversitate
o Ideea conform creia exist gene separate pentru regiunea variabil i pentru
regiunea constant
o Rearanjarea genelor n cursul diferenierii Ly B

Formarea lanurilor uoare

- Imunoglobulinele utilizeaz 2 tipuri de lanuri uoare: k i


- Gena pentru lanul k cromosomul 2
- Gena pentru lanul cromosomul 22
- Prima opiune a Ly B este lanul k
- Lanul k este codat de:
o Segmentul genic V (variabil) primii 95 AA
Exist aproximativ 75 de segmente genice Vk diferite

49
Sunt aranjate n mod liniar, separate prin introni i precedate de un
promotor (intron) i o secven exonic Leader n aval de promotor
Secvena Leader codeaz un scurt peptid care are rolul de a
introduce n RE lanul sintetizat
o Este clivat nainte de ansamblarea lanurilor L i H
o Segmentul genic J (joining) 96-108
Format din 5 segmente
Se gsesc spre captul telomeric al ADN-ului
Este separat printr-un intron foarte lung de singura gen pentru
regiunea constant - Ck
- Formarea ncepe prin lipirea unui segment genic V cu un segment genic J rearanjare
genic
o Genele sunt rearanjate i unite datorit unor secvene intronice RSS
secvene semnal de recombinare
o Procesul este mediat de RAG-1 i RAG-2 genele de activare a recombinrii
Aceste enzime acioneaz exclusiv la nivelul limfocitelor
o Cele 2 segmente unite sunt alese n mod complet aleatoriu
o Se formeaz o secven genic continu
o Materialul genetic dintre cele 2 segmente este ndeprtat
o ADN-ul Ly B a suferit o rearanjare a genelor lanului K
o Secvena rearanjat este transcris de o ARN-polimeraz, ncepnd de la
segmentul L pn la semnalul stop de dup gena pentru regiunea constant se
formeaz un transcript ARN primar
o Urmeaz un proces de tiere (matisare) a ARNm precursor (splicing) se
ndeprteaz secvenele necodante
o Are loc i un proces de poliadenilare a genei constante
o Are loc translaia i proteina este dirijat n lumenul RER
o n RER secvena Leader este ndeprtat i se face asocierea dintre lanul greu
i cel uor
- Lanul uor este codat de:
o 75 segmente genice V
o 4 segmente genice J
Fiecare segment J este asociat cu un segment genic C distinct
- Sinteza lanului este similar cu cea a lanului k
o Printr-o rearanjare aleatorie mediat de RAG1 i RAG2, un segment genic V
este unit cu un segment genic J
o ADN-ul rearanjat va utiliza gena C asociat segmentului J ales

Formarea lanului greu

- Genele lanului greu sunt situate pe cromosomul 14


- Lanul greu este codat de:
o Segmentul genic VH 130 segmente genice
o Segmentul genic DH (diversitate) 27 segmente genice
o Segmnetul genic JH 6 segmente genice
- Sunt prezente gene multiple pentru regiunea constant
o Grupul genelor C este separat de genele J printr-un intron lung
o Fiecare gen C este format din mai muli exoni i introni
- Rearanjarea genic
50
o Un segment genic D este lipit de un segment genic J
o Lng segmentul DJ rezultat se aduce un segment V
o Dup rearanjri, o ARN polimeraz se leag la pormotor i transcie ntreaga
secven
n acest proces sunt antrenate i primele 2 gene constante - C i C
Rezult un transcript ARN primar care va urma un proces de matisare
i poliadenilare difereniat
Matisarea duce la eliminarea intronilor i la separarea genelor
C i C
o Primul Ly B va avea lan greu VDJ C Ig M
o n etapa urmtoare segmentul VDJ se asociaz cvasialterbativ att cu gena C
ct i cu gena C
Acest proces duce la exprimarea simultan pe Ly B a Ig M i Ig D, cu
aceiai specificiate, determinat de aceeai combinaie VDJ

- Secvenele semnal de recombinare


o Reprezint secvene conservate la nivelul ADN-ului
o Sunt formate dintr-un heptamer i un nonamer, separate de o secven
neconservat format din 12 sau 23 de baze azotate
Lungimea distanierilor corespunde fie unei spire, fie a dou spire
complete a helix-ului ADN
o Aceste secvene sunt secvene intronice
o Localizare
Dup fiecare segment genic V
naintea fiecrui segment J
La ambele capetele ale segmentelor D
o Funcioneaz ca inte pentru enzimele RAG secvene semnal
- Rearanjarea genelor are loc sub aciunea mai multor enzime recombinaze
o Genele RAG1 i RAG2 codeaz proteine care sunt capabile s induc
rearanjarea VDJ sau VJ
o Recombinazele RAG1 i RAG2 i enzima TdT (terminal deoxinucleotid
transferaza) singurele enzime care se gsesc doar n limfocite
- Rearanjrile V(D)J pot fi productive sau non-productive
o Rearanjare productiv duce la o secven VJ sau VDJ care poate fi transcris
i translat n ntregime
o Rearanjare non-productiv genereaz codoni stop care vor bloca translaia
celulele sunt eliminate prin apoptoz
- Taierea ADN-ului nu este precis
o Duce la variabilitate mare a limfocitelor
o Poate conduce la rearanjri neproductive
- Genele implicate n codarea lanurilor pentru imunoglobuline sunt gene dominante
o Limfocitele pot s utilizeze alelele doar de pe un singur cromozom excluzie
alelic
o Singura rearanjare simultan de pe cei doi cromosomi este ntre genele D i J
Restul rearanjrilor au loc pe un singur cromosom
o Fiecare limfocit va reine doar o rearanjare productiv VDJ sau VJ sunt
produse lanuri uoare i grele cu o parte variabil identic receptori cu
specificitate unic

51
Factori care contribuie la generarea diversitii imunoglobulinelor

- Codarea lanurilor imunoglobulinelor este asigurat de mai multe gene


- Fiecare dintre aceste gene este aleas dintr-un rezervor genic alctuit din gene perfect
individualizate
o Cel mai bine reprezentat este grupul segmentelor genice V
- Rearanjrile aleatorii guvernate de recombinaze
o Pentru obinerea numrului de variante posibile se nmulete numrul
segmentelor genice
- Paratopul este format din combinaia prii variabile a unui lan greu i a prii
variabile a unui lan uor
o Asocierea dintre aceste 2 lanuri este aleatorie
- Diversitatea joncional sau flexibilitatea joncional imprecizia unirii genelor
o Tierea dintre RSS i secvena codant pare s fie precis
o Unirea secvenelor codante este adesea imprecis
- Regiunea P de adiie dup tierea ADN-ului
o Ac de pr bucl care unete capetele catenelor care urmeaz s fie asociate
o Tierea acelor de pr este fcut de endonucleaze de cele mai multe ori
tierea este asimetric una din catene devine mai lung
o Este necesar intervaia unor enzime de reparare
o Se creaz o secven palindromic aceast regiune a fost denumit regiunea P
de adiie
- Cele dou catene ADN sunt tiate i de ctre exonucleaze
o Acestea pot s taie chiar din secvenele codante
o Intervin ligazele care repar ADN-ul rearanjare a genelor
- Regiunea N de adiie
o Creat cu ajutorul TdT transferaz deoxinucleotidil terminal
Are rolul de a aduga nucleotide la capetele genei D n cursul unirii
acesteia cu gena J sau V
Numrul maxim de nucleotide adugate = 15
- Adiia n regiunea P i n regiunea N i deleiile conduc la apariia unor secvene
genice complet noi
- Mutaiile somatice
o Se produc ntmpltor la nivelul genelor rearanjate
o Au o frecven crescut

Asocierea genei constante i comutarea de clas

- Ultima gen J este separat de prima gen C printr-un intron foarte lung
- Fiecare gen C este precedat de promotor, de un amplificator al transcripiei i de o
secven intronic switch caracteristic fiecrei gene n parte
o Gena C nu are secven switch
o Rolul regiunii switch este de a permite asocierea la acest nivel a unor
recombinaze specifice pentru fiecare clas
- Genele C i C sunt primele transcrise
o Sunt transcrise simultan

52
- Transcriptul primar conine genele VDJCC
o Primele 2 situsuri de poliadenilare sunt asociate genei C, iar celelalte 2 genei
C
o Dac poliadenilarea are loc la nivelul situsului 2 ARNm conine toat
secvena genei C - rezult forma membranar a lanului
o Dac poliadenilarea se face la nivelul situsului 4 prin tierea ARN se pierde
secvena C - ARNm codeaz pentru forma membranar a lanului C
o Secvena VDJ poate s se uneasc i cu gena C i cu gena C
- Ly B mature dar naive exprim simultan i IgM i IgD au aceiai specificitate
determinat de aceeai combinaie VDJ
- Dup stimulare antigenic IgD se pierde iar IgM tinde s fie nlocuit cu un alt isotip
comutare de clas
o Acest proces are loc n timpul vieii adulte a Ly B nu mai sunt posibile noi
rearanjri genice
- Comutarea de clas nu influeneaz specificitatea imunoglobulinei
- Procesul de comutare de clas are loc n contextul unui rspuns imun fa de un
antigen T-dependent rspuns imun n care sunt implicate i Ly TH
o Rspunsul fa de antigenele T independente, n absena interveniei Ly T H nu
conduc nici la memeorie imunologic i nici la comutare de clas

Secreia anticorpilor

- Cnd Ly B se transform n plasmocit, sinteza de Ig de suprafa este nlocuit cu cea


de anticorpi
- Posibilitatea sintezei unei forme sau a alteia se datoreaz existenei unor exoni
suplimentari M1 i M2 localizai la nivelul ultimului domeniu extracelular
- M1 codific poriunea transmembranar
- M2 codific poriunea intracitoplasmatic
- Poliadenilare la nivelul situsului 1 de la nivelul transcriptului primar M1 i M2 sunt
pierdui forma secretat

Mecanisme genetice care stau la baza generrii diversitii TCR

- ntreaga poriune extracelular a TCR seamn cu fragmentul Fab al anticorpilor


- Componenta implicat n transmiterea semnalului de activare este molecula CD3
analog heterodimerilor Ig i Ig
- Mecanismul de formare a TCR implic rearanjri genice V(D)J i diversitate
joncional
- Deosebiri de formare a celor dou categorii de receptori
o Existena a dou tipuri de TCR
TCR 1
TCR 2
o Genele care codeaz lanurile i cromosomul 14
Genele sunt localizate ntre genele V i J nu poate exista o
expresie simultan a TCR i TCR
o Genele care codeaz lanurile i cromosomul 7
o TCR nu sufer hipermutaii somatice msur de siguran mpotriva apariiei
limfocitelor autoreactive
Formarea TCR ncepe n corticala timusului

53
Timocitele exprim molecula CD3
Nici una dintre moleculele co-receptor nu este prezent celule
dublu negative
Primele gene care se rearanjeaz cun cele pentru lanurile i
o Dac genele sufer o rearanjare productiv ncepe i
rearanjarea genelor
Dac genele i genele sunt rearanjate productiv are loc
transcripia i incepe sinteza lanurilor dezvoltarea n
celule dublu negative CD3+
Majoritatea timocitelor DN aleg alt cale de dezvoltare
o Dac rearanjrile i/sau nu sunt funcionale, se
continu rearanjrile
o Dac se ajunge la o rearanjare TCR productiv se
opresc rearanjrile
o Se declaneaz rearanjrile pentru lanul
o Timocitele care ajung la rearanjri productive sunt
capabile s exprime pe suprafa un TCR complet
format
Urmeaz selecia pozitiv i negativ
Selecia pozitiv la nivelul corticalei profunde, sub influena
celulelor epiteliale corticale
o Timocitele care sunt capabile s recunoasc prin
intermediul TCR-ului moleculele MHC sunt selectate
pozitiv supravieuiesc i primesc semnale de
proliferare consecina acestui fenomen reprezint
restricie MHC = capacitatea Ly T de a recunoate
antigenul doar n contextul moleculelor MHC proprii
organismului
o Excluzia alelic funcioneaz mai puin n cazul
lanurilor ale TCR
o O serie de celule care nu au fost selectate pozitiv au
posibilitatea s i reia rearanjrile pentrul lanul
Dac rearanjarea este productiv se poate
genera o nou specificitate
Acest fenomen se numete editare
Timocitul trebuie s treac din nou prin procesul
de selecie pozitiv
Selecia negativ la nivelul jonciunii cortico-medulare i n
corticala medular, sub influena celulelor epiteliale
o Se elimin timocitele care poart receptori de mare
afinitate pentru moleculele MHC self singure sau pentru
alte antigene selp prezentate de MHC toleran fa de
self
o Acest proces se numete toleran central
o Se elimin limfocitele autoreactive
Timocitele care recunosc MHC I se difereniaz n Ly T citotoxice
CD8+
Timocitele care recunosc MHC II se difereniaz n Ly T helper CD4+

54
DEZVOLTAREA LIMFOCITELOR T I B

- Celulele stem hematopiietice multipotente se divereniaz n celule stem mieloide i


apoi n celule stem limfoide
- Celulelele stem limfoide rmn la nivelul mduvei osoase i se difereniaz n Ly B
sau migreaz la nivelul timusului i se difereniaz n Ly T
- Mduva osoasa i timusul sunt organele limfoide primare
o La acest nivel este desvrit formarea limfocitelor exprim i un receptor
pentru antigen complet i corect format

Dezvoltarea limfocitelor T

- Timusul deriv din a 3-a i a 4-a pung faringial


- n sptmna a 6-a de sarcin, timusul este invadat de celule dendritice, macrofage i
precursori T i este transformat ntr-un organ limfoid primar
o Adevrata migraie a progenitorilor celulelor T ctre timus are loc ncepnd cu
a 8-9-a sptmn
o Precursorii T sufer o maturaie rapid la nivelul timusului
Timusul reprezint locul celei mai intense activiti mitotice din
organism
- Dup 20 de sptmni limfocitele T mature ncep s migreze ctre organele limfoide
secundare
- n SCID imunodeficien sever combinat timusul nu poate s devin organ
limfoid primar
- Timectomia la oareci a dus la infecii generalizate i la moartea animalelor
- Sindromul DiGeorge timusul este hipoplazic sau chiar aplazic
- Diferenierea limfocitelor n timus se produce de-a lungul ntregii viei a unui individ
o Dimensiunile timusului scad odat cu pubertatea probabil datorit sintezei de
hormoni steroizi
- Timusul organ limfo-epitelial, retrosternal, bilobat
o Fiecare lob este organizat n lobului
o Stroma timic este format din fibroblaste i celule epiteliale dendritice
formeaz o reea tridimensional
o n aceast reea se gsesc Ly T n dezvoltare timocite
o Fiecare lobul este constituit dintr-o regiune cortical i una medular
jonciune cortico-medular
o Celulele epiteliale dendritice din regiunea cortical i cele din regiunea
medular sunt diferite din punct de vedere morfologic i molecular
o Celulele epiteliale ale medularei, celulele din regiunea subcapsular i cele
perivasculare prezint molecule comune distincte de moleculele exprimate de
celulele epiteliale corticale
o Jonciunea cortico-medular este populat de celulele derivate din mduva
hematogen macrofagele santinel i celulele dendritice interdigitate (APC)
Celulele interdigitate sunt prezente i n medular

55
o n regiunea extern a cortexului celule doic celule de origine epitelial
care pot prelua ntre prelungirile lor un numr de pn la 50 de timocite
complexe multicelulare
o n regiunea medular corpusculii Hassal formai din aglomerarea celulelor
epiteliale degenerate
o Natura distinct a compartimentelor timusului este subliniat i de atrofia
selectiv indus de anumii factori:
Organotina acioneaz asupra celulelor T imature corticale
Dioxina acioneaz asupra unui receptor prezent pe suprafaa
celulelor epiteliale corticale
Ciclosporina A determin atrofia elementelor medulare blocheaz
diferenierea celulelor T corticale n celule T medulare
Prin producerea de hidroxil steroid dehidrogenaz Ly T medulare sunt
relativ rezistente la aciunea steroizilor
o Interaciunea dintre celulele stromale timice i celulele T n formare este
esenial pentru dezvoltarea celulelor T
Aceast interaciune este necesar i pentru dezvoltarea celulelor
epiteliale
o Fibroblastele sintetizeaz fibronectina, colagen i laminin - formeaz
structuri la nivelul crora se concentreaz factori solubili se remarc IL-7
o Exist interaciuni i ntre proteinele matricii extracelulare i o varietate de
molecule de adeziune (integrine) prezente pe suprafaa unor subpopulaii de
limfocite
Celulele stromale reprezint liganzi pentru receptorii Notch 1 de pe
suprafaa timocitelor
Notch 1 stimuleaz dezvoltarea Ly T i inhib dezvoltarea Ly B
o Dezvoltarea timic implic i interaciuni cu mediatori non-timici citokine
interleukine, CSF-uri (factori de stimulare a coloniilor), IFN
o Rearanjrile genice intracelulare i interaciunile intercelulare din timpul
proceselor de selecie sunt reglate de hormoni timici i de interleukine
o Lamina bazal separ spaiile epiteliale i perivasculare bariera hemato-
timic
mpiedic ptrunderea macromoleculelor din exterior la nivelul stromei
timice
Previne contactul dintre antigenele circulante i Ly T imature
o Timusul are i rol de gland
Secret hormoni cu rol n diferenierea celulelor T stimuleaz apariia
unor molecule pe suprafaa acestora
Exemple: timulina, 1 timozina, 4 timozina i timopoietina (i
pentapeptidul su activ TP-5)
Doar timopoietina i timulina au origine exclusiv timic
Timulina nonapeptid zinc-dependent
Acioneaz ca imunoreglator fiziologic ce contribuie la
meninerea homeostaziei Ly T
o Timusul prezint legturi cu SN
Este bogat inervat de fibre colinergice i adrenergice
Celulele epiteliale medulare, celulele subcapsulare, perivasculare i
celulele doic sunt capabile s sintetizeze oxitocina, vasopresina i
neurofizina

56
o Stresul acut duce la o scdere dramatic a numrului de celule T din cortex i o
cretere a numrului de celule epiteliale care exprim markeri corticali i
medulari
o Distrugerea celulelor T corticale se datoreaz aciunii citolitice a steroizilor
o Ly T medulare sunt relativ rezistente la aciunea steroizilor ca urmare a 20-
hidroxi steroid dehidrogenazei
Evoluia timsului

- Involuia timic ncepe dup primele 12 luni de via dup unii autori
- Dup ali autori
o Timusul este complt dezvoltat la natere
o Urmeaz o perioad de cretere pn la vrsta de 2 ani
o ncepe din nou s creasc ntre 7 i 12 ani
o ncepnd cu pubertatea ncepe un proces de nlocuire progresiv a majoritii
spaiilor perivasculare cu esut adipos i fibros
o n jurul vrstei de 50 de ani, 80% din volumul timic este reprezentat de
grsime
- Pierderea esutului glandular este descris ca involuie i conduce la pstrarea unui
minimum de esut cortical i medular
- Diminuarea celularitii se produce n special datorit faptului c timocitele dublu
negative sunt mpiedicate s mai prolifereze i apoi s se diferenieze scade
diversitatea repertoriului TCR pe msur ce organismul nainteaz n vrst
- Involuia timic nu se datoreaz unui influx mai mic de progenitori ai Ly T i nici unui
defect intrinsec al acestora
- Procesul de involui este controlat prin intermediul a numeroi hormoni gonadali i
timic, corticosteroizi i a unui set de citokine
- Involuia timic nu este un proces intrinsec i nici ireversibil, ci este rezultatul unor
dereglri progresive ale intaraciunilor neuroendocrine-timice
- Dezvoltarea timusului i mbtrnirea sa sunt probabil influenate de hormonul de
cretere din glanda pituitar, controlat la rndul ei de hipotalamus
- Procesul ar putea fi reversat cu GH, TSH, T3, T4 i LH-RH
- Micromediul timic este afectat de scderea cu vrsta a nivelelor de IL-2, IL-3 i IL-7
o IL-7 este propabil implicat n stimularea expresiei bcl-2, necesar timocitelor
care ncearc s produc primul lan al TCR-ului
- Expresia LIF (factorul de inhibare a leucemiei), IL-4, IL-5 sau IL-6 pare s creasc
odat cu naintarea n vrst
- Timusul adult deine n continuare capacitatea de a contribui la producerea Ly T
- Timusul adult reine capacitatea de a stimula recuperarea Ly T dup tranplantul
medular i este responsabil pentru recuperarea acestora dup chimioterapia oncologic
sau anti-retroviral
- Timectomia la adult, fa de cea survenit la vrste mici, nu are urmri dramatice
pentru sistemul imun
o O ipotez este c alte organe limfoide preiau rolul timusului
o Alt explicaie mecanismul homeostatic prin care numrul de limfocite este
meninut n limite normale

Formarea limfocitelor T

57
- Celulele stem limfoide migreaz din mduva osoas n timus n a 8-a sau a 9-a
sptmn a sarcinii
- Precursorii T sufer o maturaie rapid
- Dup 20 de sptmni Ly T mature ncep s migreze ctre organele limfoide secundare
- Ly T n dezvoltare = timocite
o Au contact permanent cu celulele epiteliale care formeaz stroma timic
- Celulele stem ajung n sinusul subcapsular iar apoi strbat mai nti corticala apoi
jonciunea cortico-medular i medulara
- La nceputul formrii, timocitele sunt dublu negative nu exprim nici un co-receptor
o DN1 c-kit+, CD44+, CD25- progenitori timic
o DN2 c-kit+, CD44+, CD25+ - pro T
o DN3 c-kit-, CD44-, CD25+ - pre T precoce
o DN4 c-kit-, CD44-, CD25- - pre T tardiv
- La intrare n cortexul extern celulele stem limfoide prolifereaz rapid
- Iniial pe suprafaa celulelor sunt exprimate moleculele CD34 (marker de celul stem),
c-kit (receptor pentru SCGF factorul de cretere a celulelor stem)
- Apoi celula exprim molecula de adeziune CD44 i CD25 (lanul al IL-2R)
- Celulele prolifereaz, genele TCR rmn ne-rearanjate celule pro-T
o Este prezent enzima TdT
- Urmeaz expresia moleculelor CD2 i CD7, apoi a moleculelor CD1, CD5 i CD3
- n stadiul urmtor se pierde expresia c-kit, expresia CD44 scade i ncep rearanjrile
genelor TCR
- Genele i ncep s se rearanjeze mai mult sau mai puin simultan
- Dac genele sufer o rearanjare productiv, ncepe i rearanjarea genelor
o Dac ambele gene au realizat o rearanjare productiv poate ncepe trascripiia
i sinteza lanurilor
o Nu au loc alte rearanjri iar acele timocite rmn i se dezvolt n celule
DN, CD3+ TCR
o Puine celule reuesc rearanjri productive ale genelor i
Exist un silencer TCR rol esenial n dezvoltarea Ly T
o Majoritatea Ly T prsesc timusul n stadiul DN
Cele care ajung n stadiu simplu pozitiv sunt CD8+
- Dac rearanjrile i/sau nu sunt funcionale, vor continua rearanjrile
o Celulele se opresc din proliferare i ncep rearanjrile DJ simultan pe ambii
cromosomi
o Procesulde rearanjare V-DJ continu doar pe unui din cei doi cromosomi
excluzie alelic
o Celulele care nu ajung la rearanjri productive vor muri
o Dac rearanjrile sunt productive ncepe producerea acestui lan
o Se formeaz timocite DN pre-T
o Lanul este asociat pe membran cu o glicoprotein lan pre-T mpreun
cu lanul i molecula CD3 formeaz receptorul celulei pre-T
o Semnalul necesar diferenierii provine din interaciunea pre-TCR cu liganzi
necunoscui
Se transmite un semnal prin complexul CD3 activeaz lck o protein
tirozin-kinaz
o Efectele trasduciei semnalului prin pre-TCR
Odat ce s-a ajuns la o rearanjare TCR productiv, sunt suprimate alte
rearanjri pentru lanul

58
Sunt selectate timocitele care exprim lanul - expandare i maturare
ulterioar
Din acest moment sunt declanate rearanjrile pentru lanul
ncepe diferenierea ctre stadiul dublu pozitiv
Moleculele CD4 i CD8 sunt exprimate simultan celule dublu
pozitive
o Timocitele ncep s prolifereze din nou
Nu pot s apar rearanjri TCR
Genele RAG-1 i RAG-2 sunt active din punct de vedere
transcripional
Proteina RAG-2 este degradat rapid n celulele care
prolifereaz
Aceast faz de proliferare contribuie la diversitatea Ly T prin
generarea de clone cu un singur lan rearanjat
Aceste lanuri sunt asociate cu diferite lanuri
o Proliferarea se oprete i nivelul RAG-2 crete
ncep rearanjrile
Timocitele care realizeaz o rearanjare productiv sunt capabile s
exprime pe suprafa un TCR complet format
o Timocitele sunt DP i se gsesc la nivelul corticalei profunde
o Expresia CD44 i CD25 s-a pierdut complet

Procesele de selecie

- Rolul proceselor de selecie:


o Eliminarea limfocitele care prezint un TCR nefuncional nu sunt capabile
s recunoasc molecule MHC self
o Eliminarea limfocitelor care recunosc complexele MHC/peptid self expuse pe
membranele APC-urilor
- Aviditate moderat disociere n timp a timocitelor de APC-uri mpiedic
asambralrea unui complex de semnalizare complet
- Selecia pozitiv
o Timocitele DP care recunosc i leag cu o for moderat moleculele MHC I
sau II vor fi selectate pozitiv
o Selecia pozitiv asigur restricia MHC capacitatea TCR de a interaciona
doar cu moleculele MHC self
o Dac receptorii timocitelor se leag cu aviditate crescut la complexele
MHC/peptid i rata de disociere este sczut aceste celule sunt eliminate
o Acest proces are loc la nivelul corticalei profunde
o Implic interaciuni ale timocitelor DP, TCR cu celulele epiteliale corticale
o Restricia MHC va permite Ly T s recunoasc Ag-nele prezentate doar n
contextul MHC-urilor self
o Un Ly T va rspunde la un Ag doar dac acesta este legat de tipul de molecul
MHC pe care l-a ntlnit n acest stadiu de dezvoltare
o O serie de celule care nu au fost selectate pozitiv au posibilitatea s i reia
rearanjrile
Dac rearanjarea este pozitiv poate s apar o nou specificitate
Acest proces se numete editare
Timocitele care sufer acest proces trec din nou prin selecia pozitiv

59
Dac rearanjarea nu este productiv se produce apoptoza
o Selecia pozitiv este urmat de proliferare i de stoparea genelor RAG1 i
RAG2 rearanjrile sunt oprite
o n cadrul seleciei pozitive, timocitele se difereniaz n celule simplu pozitive
Dac TCR leag un peptid prezentat de o molecul MHC I este
angajat i CD8 care transmite un semnal pentru inhibarea CD4 i invers
o Pentru a mpiedica ptrunderea LyT cu potenial autoreactiv n periferie
timocitele sufer un nou proces de selecie
- Selecia negativ
o Are loc prin interaciunea timocitelor cu celulele de origine hematopoietic de
la nivelul jonciunii cortico-medulare: macrofage santinel, celule dendritice
interdigitate i continu n medular, sub influena celulelor epiteliale
o Un timocit care exprim TCR capabil s recunoasc cu prea mare afinitate
combinaia MHC/peptid este eliminat prin apoptoz
o Din acest proces de selecie supravieuiesc doar Ly T cu afinitate potrivit
pentru MHC self i nu recunosc Ag self
o Aceast selecie conduce la tolerana fa de self toleran central
o La nivelul medularei a fost identificat un grup de celule epiteliale care pot
exprima molecule specifice unor diverse esuturi
ARN care codeaz pentru o serie de molecule membranare i secretate
Factori de transcripie
n exprimarea acestora este implicat un factor transcripional AIRE
regulator autoimun
- Timocitele SP sunt reinute cteva zile n medular, unde primesc un semnal ce induce
o nou proliferare
- Celulele ajung la maturitate i pot fi exportate n periferie ca limfocite mature, naive,
n stadiul G0 al ciclului celular
o Acestea se ndreapt spre organele limfoide secundare populeaz ariilte T-
dependente

Limfocitele T

- Aproximativ 5% din Ly T folosesc receptorul


- Reprezintp populaia majoritar de Ly T din piele i epiteliile intestinal i pulmonar
- n piele sunt numite limfocite intaepidermale
o Sunt dublu negative
- Celulele din epiteliul intestinal i pulmonar sunt numite limfocite intaepiteliale
o Sunt CD8+
- Celulele nu sunt recirculate i rmn fixate n esuturi
- Diversitatea joncional i regiunea N sunt absente
- Celulele sunt capabile s se lege direct la antigen
- Nu sunt restrictate de MHC
- Se pot lega la antigene ne-peptidice de pe suprafaa micobacteriilor i la PPD derivat
peptit purificat
- Pot liza o serie de celule tumorale ntr-o maniera independent de MHC
- Ar putea avea rolul de a elimina celulele self deteriorate dar i microbi
- Sunt destinate s rspund unor antigene epidermice sau intestinale

60
Ontogenia limfocitelor B

- nainte de natere, sacul vitelin, ficatul fetal i mduva osoas fetal sunt situsuri
majore de maturare
- Dup nastere Ly B mature sunt generate doar n mduva osoas
- Dezvoltarea Ly B ncepe de la stadiul de celul stem limfoid
- Primul stadiu care marcheaz orientarea ctre lineajul B este numit pro-B

- Celula pro-B
o Prolifereaz n mduva osoas umple spaiile extravasculare dintre
sinusoidele mari ale osului
o Exprim molecula CD45R tirozin fosfataz i CD44 molecul de adeziune
ce interacioneaz cu acidul hialuronic de pe suprafaa celuleli stromale
Aceast interaciune promoveaz interaciunea dintre c-kit i SCF
o Stadiul pro-B precoce
ncep rearanjrile DJ simultan pe ambii cromosomi
Genele i enzimele RAG1 i RAG2 sunt active, ca i enzima TdT
o Stadiul pro B tardiv
Rearanjarea V-DJ are loc pe un singur cromosom excluzie alelic
Dac rearanjarea este neproductiv, procesul continu pe cromosomul
pereche
Ca urmare a interaciunii dintre c-kit i SCF celulele pro-B exprim IL-
7R
IL-7 secretat de celulele stromale induce maturarea celulelor
pro-B n celule pre-B
- Celula pre-B
o Marcheaz asocierea primei gene constante - C la segmentul VDJ
o ncepe procesul de translaie
o Lanurile pot fi identificate n citoplasm
o O cantitate redus de lanuri este exprimat pe suprafaa celulei
Se asociaz cu un lan L surogat format din 2 segmente peptidice: V
pre-B i 5
o Asamblarea a dou lanuri i a dou lanuri V pre-B/5 duce la formarea
receptorului celulei pre-B
Acest receptor este asociat cu heterodimerii Ig(CD79a)/Ig(CD79b)
receptor pre BCR
Ig i Ig au rol n transmiterea semnalului n interiorul celulei dup
legarea Ag-nului
o Celulele care nu reuesc s exprime pre-BCR mor prin apoptoz
o Celulele care exprim pre-BCR sufer noi transformri mediate de semnalele
transmise prin acest receptor
o n acest stadiu rearanjrile VDJ sunt stopate i ncep rearanjrile pentru lanuri
uoare
o Prima opiune este lanul L de tip k
Dac rearanjrile pentru lanul k sunt neproductive pe ambii cromosomi
2, celula ncearc rearanjri V-J pentru lanul se respect principiule
excluziei alelice
o TdT i nceteaz activitatea

61
- Celulele B imature
o Lanurile uoare sunt asambralte cu lanurile grele
o IgM monomeric poate fi format i exprimat pe membrana celular
o Ly B imature pot recunoate i lega Ag, dar aceast legare duce la o inactivare
de lung durat i nu la expansiune i difereniere
o Ly B imature interacioneaz cu moleculele self din mduva osoas duce la
inactivare
o Aceste interaciuni duc la dezvoltarea toleranei la self
o Dac un Ly B imatur este expus la o molecul self exprimat pe suprafaa
celulelor din stroma medular limfocitele mor prin apoptoz - deleie
o Dac Ly B imature leag Ag solubile, celulele sunt inactivare, dar nu deletate
sunt anergizate
o Inactivarea Ly B imature autoreactive se numete selecie negativ
o Se poate apela la noi rearanjri proces numit editare poate duce la o nou
specificitate care salveaz Ly B de la inactivare
- Celulele B mature
o Ultimul stadiu de dezvoltare a Ly B
o Co-expresia IgM i IgD
Acest lucru este posibil ca urmare a unei modificri n procesarea
ARN-ului care apare la nivelul transcriptului primar
Se produc dou molecule mARN
- Factori transcripionali care acioneaz n timpul dezvoltrii hematopoietice
o E2A
o EBF early B cell factor
o BSAP proteina activatoare a celulei B
o Sox-4
- oarecii care nu au E2A nu pot exprima RAG1 nu pot produce rearanjri DJ i nu
pot exprima 5
- Dac gena Pax-5 este defect (gena care produce BSAP) se blocheaz dezvoltarea Ly
B
o Situsurile de legare ale BSAP se gsesc la nivelul promoter-ilor unor gene
caracteristice ale Ly B, inclusiv V pre-B i 5 i la nivelul enhacer-ilor genelor
constante
o BSAP are rol i dincolo de stadiile precoce de dezvoltare
o Acest factor este prezent la nivelul SNC absena lui duce la defecte severe de
dezvoltare a creierului
- Aciunea Sox-4 afecteaz stadiile precoce

Celulele B-1 i B-2

- Ly B-1 apar n ontogenie nainte celulelor B-2


- B-2 este grupul major de limfocite la om i la oarece
- Ly B-1 apar n cursul dezvoltrii fetale
o Exprim IgM
o Expresia IgD este sczut
o Prezint pe suprafa molecula CD5 marker al Ly Th
o Se gsete n cantiti mici n majoritatea organelor limfoide
o Localizate cu predilecie n cavitatea peritoneal i pleural

62
o n viaa postnatal aceste celule se rennoiete prin proliferarea extramedular
a unora dintre ele
o Rspund destul de prost la Ag proteice, dar mult mai bine la carbohidrai
o Nu sufer hipermutaii somatice i nici comutri de clas
o Ac-ii produi de aceste celule sunt de mic afinitate
o Fac fa unui numr restrns de patogeni
o Ly B CD5+ nu necesit ajutorul Ly Th
Sunt responsabile pentru nivelul IgM din serul normal
Produc asa numiii Ac naturali
Se pot lega la structuri self fr s antreneze distrucia acestora
o Multe din leucemiile limfocitice cronice apar din acest subset

PROCESAREA I PREZENTAREA ANTIGENULUI

- Ly T sunt capabile s ucid celulele infectate provenind de la acelai oarece, dar nu i


de la un oarece diferit restricie MHC
- RI secundar mediat de Ly B poate fi indus doar de Ag self
- RI secundar mediat de Ly T poate fi indus att de Ag self ct i de Ag denaturat
- Ag-nele extracelulare sunt eliminate de ctre anticorpi
- Ag-nele intracelulare sunt eliminate de ctre Ly T
- Ag-nele endogene sunt procesate n citosol i prezentate n MHC I
- Ag-nele exogene sunt procesate pe calea endocitic i prezentate n MHC II

Antigene endogene calea citosolic

- Proteinele intracelulare sunt degradate rapid n peptide scurte cu ajutorul unui


proteasom
o Proteinelor destinate proteolizei li se adaug la captul NH 2 polimeri de
ubiquitin
o Proteasomul este format din subuniti cu activitate catalitic
Proteasom house-keeping sau standard prezent n toate celulele
Format din proteasomul 20S + 2 copii ale complexului reglator
19S
o Conine 20 proteine + 6 ATPaze recunosc ubiquitina
o Enzime implicate n desfacere i translocare
n urma aciunii proteasomului rezult peptide cu lungime de 3-
22 aa
o 20% au o lungime medie de 8-10 aa potrivite pentru
cupa MHC I
Imunoproteasom
Apare n urma expunerii celulei la citokine pro-inflamatorii
IFN i TNF
Subunitile catalitice sunt nlocuite cu subunitile LMP-2
LMP-7 (codate n complexul MHC) i MECL-1
Unitatea reglatorie 19S este nlocuit cu alt complex reglator
11S sau PA28 este esenial pentru ncorporarea LMP-2, LMP-
7 i MECL-1

63
n timpul unui rspuns imun este favorizat asamblarea
imunoproteasomului
Hidrolizeaz proteine independent de ubiquitinare
Peptidele care se leag la MHC I se termin aproape exclusiv cu
reziduuri hidrofobe sau bazice
Poate cliva proteine nou sintetizate, chiar nainte ca translaia s
fie ncheiat
o Structura unui proteasom
Miez comun numit 20S
Format din 4 uniti inelare care delimiteaz un canal
Primul i ultimul inel 7 subuniti
Menin forma miezului
Inelele din mijloc 7 subuniti
1, 2, 5 componente catalitice active
Au situsurile active enzimatic pe faa intern a cilindrului
o Sistemul imun utilizeaz aceast cale de degradare a proteinelor antigenice
pentru a produce peptide mici destinate prezentrii n MHC I
- Procesul de clivare al proteinelor este ATP-dependent
- Proteinele rezultate n urma activitii proteasomului trebuie transportate n RE, acolo
unde sunt asamblate moleculele MHC
- Transportul peptidelor n RER este asigurat de TAP heterodimer format din TAP-1 i
TAP-2
o Prezint domenii transmembranare
o Domeniu hidrofobic strbate membrana i ajunge n lumenul RER
o Domeniu citosolic leag ATP-ul
- TAP 1 i 2 fac parte din familia ATP-binding cassette proteins
o Mediaz transportul ATP-dependent de aa
- Peptidele generate n citosol de ctre proteasom sunt translocate de ctre TAP n RER
o Acest proces necesit hidroliza ATP
o TAP are afinitate crescut pentru peptide formate din 8-13 aa lungime optim
pentru MHC I
o TAP favorizeaz peptidele cu aa carboxi-terminali bazici sau hidrofobi
- Proteinele rezultate din procesare sunt chaperonate de ctre proteinele de oc termic
hsp70, 90, 110
o Hsp fac parte din familia proteinelor de stress
o Expresia lor crete dramatic ca urmare a stress-ului
o Hsp transport peptidele ctre partea citosolic a TAP, n timp ce moleculele
chaperon rezidente n RE preiau peptidele i le leag la partea din interiorul RE
o Transportul pn la TAP nu necesit energie
o Trecerea peptidelor n RE necesit energie
- Genele TAP 1 i TAP 2 sunt adiacente celor care codeaz pentru LMP 2 i 7 n cadrul
complexului genic MHC
o Genele TAP i LMP sunt polimorfice
- Lanurile i 2 microglobulina ale MHC I sunt sintetizate la nivel ribosomal i apoi
translocate n reticul
- Etape ale asamblrii MHC I particip chaperoni moleculari care faciliteaz plierea
o Calnexina
Protein rezident al RE

64
Promoveaz plierea lanurilor libere i formarea de legturi
disulfidice
Coordoneaz asocierea lanului 2G
Cnd lanul 2G se leag la lanul , calnexina este eliberat
o Calreticulina
Omolog solubil al calnexinei
o MHC I este asociat i cu o oxidoreductaz thiol-dependent Erp57
Catalizeaz formarea i desfacerea legturilor disulfidice
o Tapasina
Membr a superfamiliei imunoglobulinelor
Bogat n prolin
Domeniul transmembranar conine un reziduu de lizin care
interacioneaz cu transportorul TAP
Expresia sa poate fi indus de IFN
Gena pentru tapasin este localizat n afara complexului MHC
Tapasina ajut la stabilizarea moleculei MHC I
Faciliteaz captarea peptidului nainte ca acesta s fie expus n
mediul din interiorul RER
Un heterodimer TAP este legat de 4 molecule de tapasin
Are rolul de a reine n reticul moleculele MHC care au fost ncrcate
incorect sau suboptimal
- Dup legarea peptidului MHC devine stabil, se disociaz de chaperoni i poate iei din
RER
o Prin intermediul complexului Golgi ajunge pe suprafaa celular

Antigene exogene Calea endocitic

- APC celule prezentatoare de antigen profesioniste


o Prezint MHC II pe suprafa
o Sunt capabile s proceseze Ag-nul pe calea endocitic i s-l prezinte Ly Th
o Trebuie s furnizeze i un semnal denumit co-stimulator
- APC profesioniste sunt:
o Celulele dendritice
o Ly B
o Monocitele/macrofagele
- Unele celule pot exprima MHC II n urma stimulrii:
o Fibroblaste dermice
o Celule gliale
o Celule pancreatice beta
o Celule epiteliale tiroidiene
o Celule endoteliale
- Celulele dendritice
o Principalele APC-uri
o Induc activarea limfocitar i toleran
o O prim clasificare
Convenionale
Pot fi rezidente sau migratorii
DC rezidente sunt ntalnite n ganglionii limfatici, splin i
timus

65
Cnd nu sunt activate, celulele dendritice sunt numite
convenionale sau interdigitate sunt imature; pot fi mprite n
3 subgrupuri
o Derivate din snge
CD8+
Produc cantiti crescute de IL-12
Induc diferenierea de Ly Th1
Determin proliferarea limfocitelor Tc
CD4+ - n zona marginal a splinei
CD4-CD8- - se gsesc n ganglioni
o Derivate din esut
Celulele Langerhans conin granule Birbeck
conin lectine cu rol n procesul de endocitoz
DC interstiiale
o DC timice rol important n procesele de selecie
Plasmacitoide
Exprim B220
Coninut crescut de RE
Exprim CD4 sau CD8 i IL-3R
Localizate n snge i ganglioni limfatici
Recunosc ARN viral prin TLR 7 i TLR 9
Dup activare prezint Ag i produc IFN I
DC conveionale celule DC1
DC plasmacitoide DC2
o Celulele dendritice pot fi mature sau imature
DC imature
Sintetizeaz MHC II
Unii receptori nu sunt reciclai dup procesul de endocitoz
FCR II
DC mature
Au capacitatea de a migra
Sunt influenate de citokine i molecule de adeziune
Pot rspunde la chemokine i migreaz la situsul infeciei
Produii virali, bacterieni i citokinele vor determina DC
imature s nceap procesul de maturare
o DC imature localizate sub stratul epitelial intestinal captureaz Ag iar DC
mature l transport ctre plcile Peyer sau ganglionii mezenterici
o DC stabilite n localizrile lor limfoide pier capacitatea de a endocita
Pot stimula Ly Th
Scade internalizarea MHC II
o DC mature sunt cele mai eficiente n activarea Ly T naive deoarece:
Expresie crescut MHC II
Exprim CD-SIGN promovez adeziunea cu Ly Th
Nivele sczute de acid sialic
Expresie crescut de molecule de adeziune
Expresie de molecule co-stimulatorii
o DC au rol i n diferenierea Ly T
Interaciunea cu DC1 Th 1 productoare de IFN i IL-2

66
Interaciunea cu DC2 Th2 productoare de IL-4 i IL-10
o DC imature induc toleran
o Doar DC mature sunt capabile s activele Ly T naive
o Celule DC telerogenice amture prezint Ag i migreaz n organele limfoide
Includ celule imature, celule rezistente la maturare sau celule activate
o DC prezint Ag n 3 modaliti:
Direct DC ale donatorului prezint peptide ale donatorului asociate cu
molecule MHC ale donatorului reject acut
Indirect Ag ale donatorului n molecule MHC ale primitorului rejet
cronic
Semi-direct DC ale primitorului cu MHC ale donatorului
- Monocitele/macrofagele
o Trebuie activate prin fagocitoza microorganismelor nainte s poat exprima
MHC II sau molecule co-stimulatorii
o Sunt APC-uri pentru celulele T efector sau cu memorie
o Ly Th activate secret IFN activeaz macrofagele i determin creterea
expresiei de MHC II

- Ly B
o Exprim MHC II n mod constitutiv
o Trebuie activate pentru a putea exprima molecule co-stimulatorii
o Recunoate i internalizeaz Ag cu ajutorul BCR chiar i n concentraii foarte
mici ale Ag
o Ly B cu memorie exprim o catitate mare de molecule co-stimulatorii
o Ly B nu servesc ca APC-uri n rspunsurile imune umorale primare
- Dup ce un Ag a fost internalizat, va fi degradat n peptide la nivelul compartimentelor
ce aparin cii endocitice de procesare
- Calea endocitic prezint 3 compartimente cu pH progresiv tot mai acidic
o Endozomii precoce pH 6-6,5
o Endozomii tardivi sau endolizozomii pH 5-6
o Lizosomii pH 4,5-5
- La nivelul cii endocitice, Ag-nul este degradat n oligopeptide de 13-18 aa lungime
potrivit pentru MHC II
- Procesarea Ag-nului poate fi mpiedicat de ageni chimici care cresc pH-ul
cloroquina sau de inhibitori de proteaze leupeptina
o Aceste enzime desfac legturile disulfidice ale moleculellor cu Ag cu ajutorul
GILT
- Lanurile i ale MHC II sunt sintetizate la nivel ribozomal i introduse apoi n
reticul
o Iniial au nevoie de calnexin pentru a le proteja
o Cupa MHC II este ocupat iniial cu lanul Li CD 74 (invariant)
Previne ncrcarea cupei cu peptide transportate de TAP
o Li se asociaz cu trei perechi de molecule i
o Li acioneaz i ca chaperon este implicat n plierea corect a lanurilor,
ieirea moleculei din RER i orientarea MHC II din reeaua trans-Golgi n
calea endocitic de procesare compartimentul MIIC
o Lanul Li este degradat iar n cup rmne un peptid scurt numit CLIP lan
peptidic invariant asociat clasei II

67
CLIP previne o legare prematur a unui peptid Ag-nic dar i degradarea
MHC II
o HLA-DM are rol important n nlturarea CLIP
Catalizeaz schimbul dintre CLIP i un peptid antigenic
o HLA-DO poate inhiba reacia dintre HLA-DM i CLIP
o Prezena unui peptid n cupa MHC II este necesar pentru stabilitatea
moleculei
o Dup legarea peptidului complexul este transportat la suprafaa celulei
Peptidul este legat foarte puternic n condiii fiziologice, nu mai poate
fi nlocuit

Interaciunea MHC I-peptid

- MHC I prezint peptide endogene, derivate din calea endogen


- Peptidele sunt prezentate Ly Tc
- Fiecare tip de MHC I leag un set unic de peptide
- Celula normal prezint peptide self derivate din proteine intracelulare
- Celulele infectate prezint peptide virale
- Un Ly Tc poate fi activat de 100 de complexe MHC I/peptid
- Peptidele prezentate n MHC I au lungimea de 8-10 aa
o Prezint reziduuri ancor necesare pentru legarea n cup
o Ancorele sunt formate din reziduuri hidrofobe
Sunt situate la captul C-terminal, dar pot fi la captul N-terminal
- Peptidul se curbeaz la mijloc i ia contact cu TCR

Interaciunea MHC II-peptid

- MHC II prezint peptide exogene, derivate din calea endocitic de procesare


- Peptidele sunt prezentate Ly Th
- Proteinele membranare sunt internalizate prin fagocitoz sau endocitoz
- Alte peptide deriv din digestia Li
- Peptidele prezentate de MHC II au lungimi de 13-18 aa
- Cupa de legare a MHC II este deschis la ambele capete
- Peptidele prezentate n MHC II nu prezint aa ancor
o Se formeaz legturi de hidrogen ntre aa centrali ai peptidului i cup
o Punctele majore de contact prezint aa aromatici sau hidrofobi la captul N-
terminal i 3 aa hidrofobi suplimentari n mijloc i la captul C-terminal
- 30% din peptidele din cupa MHC II prezint prolin n poziia 2 i alte proline la
captul C-terminal

Incapacitatea de a rspunde la un AG

- Pe suprafaa unei celule sunt expuse 6 tipuri de MHC I i 10-20 de MHC II


- Un peptid care nu se leag la o molecul MHC nu poate activa Ly T
- Patogenii conin epitopi multiplii

Prezentarea unor Ag bacteriene non-peptidice

- Moleculele MHC prezint exclusiv peptide Ly T


- SI recunoate i Ag neproteice
68
- Familia CD1 molecule care nu sunt codate la nivelul MHC
o Formeaz un sistem de prezentare a Ag complt distinct fa de MHC
o Sunt descrise 5 gene CD1
Grupul I CD1 a, b, c
Este exprimat la nivelul APC profesioniste celule Langerhans,
celule dendritice din ganglionii limfatice, celule B din zona
manta i monocitele activate
Grupul II CD1 d uman i CD1d1 i Cd1d2 murine
Exprimat la nivelul epiteliului intestinal
o Moleculele din familia CD1 sunt formate dintr-un lan 2G asociat cu un lan
greu
Identitatea de structur cu moleculele MHC I este sczut
Domeniul 3 al CD1 seamn cu 2G al MHC
La nivelul domeniului 1 nu exist homologie de structur
o CD1b acioneaz ca element de restricie n prezentarea de lipide
o CD1 prezint glicolipide derivate din M. leprae
o CD1 prezint independent de TAP i nu este sensibil la cloroquin
Prezint independent i de HLA-DM

ACTIVAREA LIMFOCITELOR

Activarea limfocitelor T

- Pentru activarea Ly T este nevoie de 3 semnale


- Primul semnal de activare
o Este reprezentat de Ag fragment peptidic prezentat n cup MHC II de pe
suprafaa unui APC
o Singurul APC profesional care activeaz n mod eficient Ly Th naive DC
matur
o Este nevoie de un contact de durat ntre complexl MHC II/Ag i un numr
mai mare de molecule TCR
ntr-o prim faz contactul este mediat de molecule de adeziune
Activarea complet dureaz aprozimativ 30 h
Stimularea trazitorie a TCR induce anergia Ly T
Interfaa de contact dintre Ly T i APC = sinaps imunologic sau
SMAC
Modificrile scheletului de actin iniiate de moleculele de adeziune,
vor fi amplificate cu ajutorul moleculelor co-stimulatoare
LFA-1 integrin, molecul de adeziune
o Favorizeaz contactul ntre celule sau ntre celule i
matricea extracelular
o Se leag la ICAM-1, ICAM-2 i ICAM-3 fac parte din
familia Ig-lor
o Nivelul de expresie al ICAM-1 este amplificat de
citokine pro-inflamatorii ncetinesc Ly T care exprim
LFA-1 n zona n care este nevoie de o scanare a Ag
o Legarea LFA-1/ICAM-1 este amplificat dup
semnalizarea prin TCR stabilizare suplimentar

69
LFA-2 CD2
o Membru al familiei Ig-lor
o Exprimat precoce pe suprafaa timocitelor
o Molecul de adeziune intercelular
o Leag LFA-3 (aparine familiei Ig-lor)
Este exprimat pe APC-uri
o Legarea CD2 i LFA-3 stabilizeaz celulele partener
conjugat (Th-APC sau Tc-celul int) timp
suplimentar pentru scanarea peptidelor prezentate de
MHC
o n cazul Ly B, legarea LFA-3 de ctre CD2 determin
creterea expresiei moleculei CD40
o Pentru activarea unui Ly T naiv este necesar formarea unei structuri
TCR/CD3/MHC-peptid model de oligomerizare
Procesul ncepe pe suprafaa ACP-urilor prin dimerizarea MHC II
Acesta leag 2 molecule TCR
o 100 complexe MHC-Ag activeaz 18-20000 molecule TCR
TCR stimulat de antigen formeaz agregate fosfolipidice bistratificate
imunosom, formate din:
CD3
Molecule de adeziune
Molecule co-stimulatorii
Alte molecule de semnalizare
o MHC-Ag trebuie s se desprind rapid de TCR dup ce semnalul iniial de
fosforilare a fost furnizat
Dac legarea peptidului este prea slab, disocierea se face rapid i
activarea nu se mai produce
Un peptid care se disociaz foarte ncet face ca complexul MHC-Ag s
nu poat fi folosit n continuare de un numr adecvat de molecule TCR
o Moleculele TCR se deplaseaz ctre polul de interaciune cu celula partener
o Moleculele MHC II se concentreaz n zona de membran care particip la
formarea SMAC
o n procesul de legare intervin i molecule co-receptor
Th CD4 se leag la domeniul 2 al MHC II crete aviditatea de
legare descrete viteza de desprindere a TCR-ului de MHC-Ag
Fiecare co-receptor este asociat la partea intracelular cu protein tirozin
kinaze (PTK) din familia src
- Semnalul co-stimulator
o Activarea complet a Ly T necesit semnale co-stimulatorii
o CD28 de pe suprafaa Ly T i B-7 de pe suprafaa APC-urilor cea mai
important pereche
o Legarea CD28 este critic pentru activarea Ly naive
n absena co-stimulrii angajarea TCR conduce la apoptoz sau
anergie
o CD28
Homodimer, membru al superfamiliei Ig-lor
Exprimat constitutiv pe limfocitele activate sau n repaus, pe
majoritatea Ly Th i pe o parte din Ly Tc
Se leag la B7-1 i B7-2

70
Expresia amndurora este amplificat ca urmare a interaciunii
cu Ly T
o B7-2 crete rapid, expresia poate fi susinut 96 ore
o B7-1 apare dup 48 de ore, rezist aproximativ 72 de ore
n urma interaciunii CD40-CD40L, pe suprafaa Ly B este amplificat
expresia ambelor molecule
Pe suprafaa DC, aceste interaciuni duc la creterea B7-1
Stabilizeaz mARN-ul pentru IL-2
o B7-1 i 2
Co-stimulare a Ly T n procesul de proliferare
Secreia de IL-2 i IFN
Angajarea B7-2 duce la secreia de IL-4 diferenierea Ly Th n
limfocite efector Th2
B7-2 determin creterea secreiei de limfotoxin
B7-1 favorizeaz secreia GM-CSF
o Dup angajarea TCR, expresia CD28 este amplificat rapid celulele ies din
faza G0 i intr n ciclul celular
o Efectele legrii CD28
Secreia de citokine
Expresia receptorilor pentru citokinele secretate
Induce expresia moleculelor co-stimulatorii sau reglatoare
ICOS
o Structur i funcii similare cu CD28
o Ligandul ICOS leag doar ICOS
o Este exprimat doar dup co-stimularea prin CD28
o Determin creterea sintezei de IL-10 citokin
important pentru diferenierea Ly B
o Stabilizeaz mARN-ul pentru CD40L
o Necesar pentru promovarea secreiei de IL-4
4-1BB
CTLA-4
o Homodimer cu omologie de structur de 75% cu CD28
o Are afinitate de legare pentru B7 de 10-20 de ori mai
mare
o Nu este exprimat constitutiv
Apare pe suprafaa Ly T dup legarea TCR
o Poate dislocui CD28 i blocheaz semnalul activator
declanat de acesta
Blocheaz diviziunea n faza tranziiei de la G 1 la
S
o Poate recruta tirozin-fosfataza SHP-2 aceast enzim
se leag la un motiv ITIM al cozii intracitoplasmatice a
CTLA-4 reversia activrii Ly T
o Aceste molecule sunt reinute n compartimentul Golgi
al Ly
Ieerea din vezicule se face doar la 48-72 h de la
evenimentul activator
CD40-L important pentru interaciunea Ly T i B
o Membru al superfamiliei TNFR receptor pentru TNF
71
o Legarea la CD40 etap important n pregtirea Ly
naive pentru activare
o Din familia TNFR fac parte i 4-1BB i OX40 rol n
co-stimularea Ly T
o CD27
Homodimer exprimat n Ly Th i Tc resting din sngele periferic
n urma activrii antigenice, crete expresia CD27
Ligandul CD27 este CD70 exprimat de Ly T i B ca rspuns la
stimularea antigenic
Interaciunea CD27-CD70 favorizeaz procesul proliferativ
Influen sczut asupra secreiei de IL-2
Rol important n generarea de Ly T cu memorie
- Semnalul 3 citokine
o Dup primirea primelor 2 semnale, Ly T poate progresa ctre transcripia unor
gene necesare pentru a susine procesele de proliferare i difereniere
o Produii genelor imediate
Pot fi detectai n mai puin de 30 de min
Codeaz pentru factori de transcripie nuclear, necesari pentru
stimularea transcripiei unor gene precoce sau tardive implicate n
proliferare
o Produii genelor precoce
Detectai dup 30 min 24 h de la stimularea TCR
Exemple: IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IFN, chemokine, factori de cretere
o Produii genelor tardive
Exprimai dup 48 de H
Codeaz pentru noi molecule de adeziune sau factori citotoxici i alte
molecule necesare funcionrii Ly T
- Ly T activate trebuie s prolifereze pentru a se putea diferenia n celule cu memorie i
celule efector
o Inducerea secreiei de citokine care susin diviziunea celular i supravieuirea
dar i expresia receptorilor pentru aceste citokine este critic pentru rspunsul
imun
o IL-2 citokin important
o IL-15 R prezint 2 lanuri n comun cu IL-2 R
- IL-2 R de mare afinitate este un heterotrimer format din lanurile , ,
o Majoritatea Ly T mature exprim heterodimerul
o Dup recepionarea primelor 2 semnale activatorii se exprim i IL-2R
(CD25) asamblarea receptorului de mare afinitate
- n cazul Ly Th, aciunea IL-2 este autocrin
o Absena citokinelor duce la apotoz
- Transcripia IL-2 este bine controlat

Calea de semnalizare intracelular declanat de legarea TCR

- n urma angajrii unui numr suficient de molecule TCR i a formrii SMAC sunt
recrutate proteine cu rol de transducere a semnalului i sunt activate domenii cu rol de
semnalizare
- Lanurile CD3 nu prezint proprieti catalitice intrinseci

72
o Conin motive ITAM servesc ca substrat pentru fosforilarea aa de tirozin de
ctre protein tirozin kinaze de tip src lck i fyn
o n repaus aceste kinaze sunt inactivate deoarece sunt fosforilate
- La complexul TCR/CD3 se asociaz i molecula co-receptor
o i aceasta este asociat cu kinaza lck inactiv
- Fyn fosforilat este recrutat la nivelul lanurilor ale CD3
- Activarea kinazelor este realizat de CD45 fosfataz exprimat pe suprafaa tuturor
leucocitelor
o CD45 prezint mai multe isoforme
o CD45RO nivel sczut de glicozilare
Observat n stadiile tardive de activare
Utilizat pentru distingerea Ly T cu memorie
Se asociaz mai puternic cu CD4 i CD8 afecteaz eficiena
fosforilrii lck i fyn
Inactivarea CD45 duce la blocarea activrii limfocitelor T mature i la
blocarea dezvoltrii timice
- Dup defosforilare, lck i fyn se activeaz i fosforileaz tirozinele de la nivelul ITAM
activarea motivelor ITAM
o Aceast activare permite recrutarea tirozin kinazei ZAP-70
ZAP-70 este exprimat de Ly T i este nrudit cu kinaza syk exprimat
pe Ly B
ZAP-70 este meninut inactiv de o tirozin fosfataz SHP-1
o Dup legarea ZAP-70, aceasta este fosforilat de kinazele src activarea
acesteia autofosforilare
o ZAP-70 determin fosforilarea unor molecule din complexul adaptor
reorganizarea citoscheletului de actin
o Molecule care interacioneaz cu ZAP-70
Vav1 prezint un domeniu care se leag la citoscheletul de actin
Activeaz C-1 (PLC-1)
Hidrolizeaz fosfatidil inositol bifosfat (PIP2) n inositol
trifosfat (IP3) i diacilglicerol (DAG)
o IP3 se leag la un canal de calciu i determin eliberarea
Ca din depozitele intracelulare
Ca activeaz calmodulina
Complexul Ca-calmodulin activeaz o
serin/threonin fosfataz calcineurina
Calcineurina va defosforila forma citoplasmatic,
inactiv a unor membri ai familiei NFAT
NFATc defosforilat traverseaz membrana
nuclear i se leag la factorul transcripional
nuclear AP-1 NF-ATn nuclear
Poate refosforila o kinaz din nucleu,
GSK3 disocierea NF-ATc de AP-1 i
exportul NF-ATc napoi n citoplasm
Ciclosporina A inhib defosforilarea NF-
ATc i blocheaz activarea Ly T
o DAG activeaz o serin/threonin kinaz numit protein
kinaza C (PKC)

73
O isoform va fi recrutat la nivelul raft-urilor i
va declana o cascad de fosforilri activarea
factorului transcripional NF-kB necesar pentru
activarea induciei maximale a transcripiei de
IL-2
La ZAP-70 se leag SLP76, apoi GADS i LAT
La LAT se leag PLC, iar kinaza itk se leag la SLP76
Itk activeaz PLC prin fosforilarea tirozinei
o Vav1 i zap-70 activate, precum i CD3 fosforilate se asociaz cu
citoscheletul coaleascena raft-urilor i asamblarea SMAC
o Fosforilarea LAT de ctre ZAP-70 determin recrutarea unei kinaze fosfatidil
inositol-3 kinaza (PI3K) la nivelul membranei celulei T
PI3K fosforileaz PIP2 i l convertete n fosfatidil inozitol trifosfat
(PIP3) scderea produciei de mesageri secunzi (DAG i IP3)
PI3K inhib activarea PLC
PI3K acioneaz i asupra:
Cii de semnalizare prin p38
Cii SAPK/JNK
PI3K duce la cativarea factorului de transcripie c-jun rol n activarea
transcripiei unui set de gene pro-inflamatorii TNF i selectina E
Este posibil ca recrutarea i activarea PI3K s fie determinate de
legarea CD28
- Ras protein monomeric asociat feei citoplasmatice a membranei celulare i care
leag guanina
o Activitatea sa este controlat de statusul de fosforilare a nucleotidelor
o De fosforilarea nucleotidelor sunt responsabile o serie de proteine GEF
o Ras-GDP este inactiv i este necesar intervenia GEF pentru conversia ras-
GDP n ras-GTP
- Fosforilarea LAT de ctre ZAP-70 duce la activarea unei GEF i mai departe la
activarea ras activarea unei cascade de serin/threonin MAPK kinaze ce includ raf,
MEK i ERK
o Aceast cascad duce la fosforilarea i activarea mai multor factori
transcripionali c-myc i c-fos
- Angajarea CD28 pare s scad pragul semnalului neceasar pentru activarea Ly T prin
scderea numrului de molecule TCR care trebuie agregate n SMAC
- Legarea CD28 la B7 declaneaz fosforilarea reziduurilor de tirozin de la nivelul
cozii intracitoplasmatice a CD28 de ctre lck i/sau fyn recrutarea P13K PIP3
o CD8 determin i hiperfosforilarea Vav1
- Se produce o reorganizare a citoscheletului de actin mediat de molecula rac i
agregarea raft-urilor membranare n jurul complexului TCR/CD3
o Raft-urile conin elemente ale cilor ras/MAPK i SAPK/JNK activarea
factorilor nucleari de transcripie c-fos i c-jun
Aceti factori se combin pentru a forma AP-1
AP-1 se leag la promotorul genei IL-2 i determin stabilizarea
mARN-ului IL-2 i creterea expresiei genei anti-apoptotice
bcl-xL
- Angajarea CD28 contribuie la reducerea expresiei IkB i la nlturarea unui reglator
negativ cheie al NF-kB

74
o Semnalizarea prin NF-kB contribuie la expresia a numeroase citokine (IL-2,
IL-4, IL-6, IFN, MIP-) sau a receptorilor pentru IL-2, IL-12, a CXCR5
- CD28 contribuie la expresia altor molecule co-stimulatorii

Activarea limfocitelor B

- Un Ly B matur naiv ajuns n periferie, supravieuiete cteva zile apoi moare prin
apoptoz
- Pentru a nu muri trebuie activat
- Dac Ag este T-dependent i Ly B este activat cu succes de ctre Ly Th proliferarea
i diferenierea Ly B astfel nct s fie capabil s efectueze hipermutaii somatice i
comutare de clas
o Se produc att plasmocite ct i celule cu memorie RI umoral
- Dac Ag este T-independent se generez plasmocite
o Nu se produce comutarea de clas
o Se secret Ac de clas M
o Nu se produc celule cu memorie
- Dac receptorul celulei B se leag la un auto-Ag, acel Ly B va fi deletat prin apoptoz
sau i se va induce o stare de anergie
- Activarea Ly B de ctre Ag T-dependent necesit 3 semnale
o Legarea Ag
o Recepionarea semnalelor co-stimulatorii
o Recepionarea citokinelor secretate de Ly Th
- Semnalul activator
o BCR complet de pe suprafaa unui Ly B matur naiv din periferie este format
din IgM/IgD membranare asociate cu proteine accesorii de semnalizare Ig
i Ig faza cognitiv a Ly B
Este capabil s recunoasc i s reacioneze fa de un Ag specific legat
de receptor
o Cu ajutorul kinazelor src (fyn, lyn, blk) se transmite un semnal ctre Ig i Ig
o Activarea src kinazelor se face prin defosforilarea de ctre CD45
o Dup activare, PTK vor fosforila aa de tirozin situai la nivelul motivelor
ITAM aparinnd moleculelor Ig i Ig
Aceast fosforilare duce la recrutarea de noi PTK la acest complex
kinaza syk sau kinaza btk
Aceste kinaze vor fi fosforilate de lyn fyn i blk activare
o Syk activat determin fosforilarea unor proteine adaptor BLNK
Mai departe vor fi activate PLC i ras
Ras activat duce la activarea unei serin-threonin kinaze numite raf
Raf activeaz kinaza MAPK
Calea ras-raf-MAPK culmineaz cu activarea unor factori
transcripionali nucleari
o PLC cliveaz PIP2 n IP3 i DAG
IP3 determin creterea concentraiei intracelulare de Ca
DAG activeaz protein kinaza C
o Se sintetizeaz c-myc i c-fos activarea i reglarea transcripiei de noi gene
ce controleaz proliferarea i diferenierea Ly B

75
o Rezultatul acestei cascade este c Ly B poate recepiona stimulul co-stimulator
i citokinele produse de Th
o Modificrile morfologice ale Ly B apar dup 12 h
o Este amplificat expresia moleculelor MHC II i a moleculelor co-stimulatorii
necesare pentru recepionarea stimulului 2
o Se exprim receptori pentru citokine
o CD19 coreceptor a Ly B mpreunp cu CD21 i CD81
CD19 posed aa de tirozin la nivelul cozii citoplasmatice ce vor fi
fosforilai asocierea lyn i fyn la CD19
CD19 poate fi stimulat i atunci cnd CR2 se leag la un antigen
opsonizat cu fragmente ale complementului
Dac aceste procese se produc simultan amplificare a semnalului de
activare
CD19 poate fi util i pentru recepionarea ajutorului de la Ly Th
O consecin a colegrii este exprimarea FcRIIB pe suprafaa Ly B
Se transmite un semnal inhibitor celulei nu este necesar
producerea suplimentar de anticorpi
Mecanismul de supresie se bazeaz pe interaciunea dintre
motivele structurale ITIM ale FcRIIB i tirozina SHP-1
- Semnalul co-activator
o Dac acest semnal nu este recepionat, limfocitele devin anergice sau intr n
apoptoz
o Doar o celul pe deplin activat progreseaz ctre proliferare i difereniere
o nainte de recepionarea semnalului co-stimulator, Ly B trebuie s adere stabil
la suprafaa Ly Th activat de ctre Ag
Interaciunea CD40 cu CD40L
o CD40 este exprimat la nivel nalt pe suprafaa celulelor B mature naive dar nu
i pe plasmocite
o CD40L este exprimat doar pe Ly Th activate
o Interaciunea CD40-CD40L este esenial i pentru comutarea de clas i
formarea centrilor germinali
o Deficiena CD40L imunodeficien cu hiperproducie de IgM
- Semnalul 3
o Legarea Ag la suficient de molecule BCR, nsoit de co-stimularea mediat de
CD40 declaneaz inducia expresie de receptori pentru citokine n special
IL-4R
Fr legarea citokinelor, Ly B sufer o proliferare limitat
o Majoritatea citokinelor sunt produse de Ly Th stimulate de ctre Ag
Aparatul Golgi ajunge n proximitatea polului de interaciune cu Ly B
o Legarea IL-4 este evenimentul principal care duce la trecerea celulei din
stadiul G0 n stadiul G1
Expunerea n continuare la IL-4 mpinge celula B n faza S
o IL-2, IL-4, IL-5, IL-10 i TGF pot aciona pentru inducerea proliferrii Ly B
o IL-2 i IL-6 induc diferenierea ctre plasmocit
o Ly B au i capacitate redus de secreie
IL-6 i TNF pot crete eficiena activitii Ly Th

76
RSPUNSURI IMUNE MEDIATE CELULAR

- Protecia prin anticorpi se adreseaz patogenilor extracelulari


- Imunitatea celular detecteaz i elimin patogenii intracelulari
o Poate elimina i celulele tumorale, celulele care au suferit modificri genetice
sau care exprim antigene care nu sunt caracteristice celulelor normale
- Imunitatea celular este asigurat de celule specifice i ne-specifice
o Celulele specifice:
Limfocitele T citotoxice CD8+
Limfocitele T helper CD4+
Secret citokine mediaz reacia de hipersensibilitate de tip
ntarziat
o Celulele nespecifice
Celule Nk
Celule ne-limfoide: macrofagele, neutrofile i eusinofile
Aceste celule acioneaz prin intermediul receptorilor Fc
- Limfocitele T, celulele NK i macrofagele cele mai importante surse de citokine

Rspunsurile efectorii

77
- Sindrom di Gorge afeciune n care timusul nu se dezvolt nu se formeaz Ly T
- Efectorii RI mediate celular sunt mprii n 2 categorii:
o Celule efector care au efect citotoxic direct elimin celulele strine sau self
alterate prin producerea unei reacii citotoxice
Limfocite T citotoxice antigen-specifice
Celule nespecifice celulele NK i macrofagele
Atac celulele allogenice, celule maligne, celule infectate viral i celule
conjugate chimic
o Celule efector CD4+

Proprieti generale ale celulelor T efector

- Celulele efector i celulele cu memorie au nevoie doar de un semnal de activare


- Isoforma CD45 RO (de pe celulele cu memorie) se asociaz mai bine cu complexul
TCR i co-receptorii si dect isoforma CD45 RA
o Limfocitele T sunt mai sensibile la activarea prin TCR
- Deoarece nu mai depind de semnalul co-stimulator, pot fi activate de ctre complexele
MHC/peptid de pe suprafaa unor APC-uri care nu prezint moleculele B7
- Ly T prezint molecule de adeziune CD2 i LFA-1 care leag LFA-3 i ICAM
- Nivel de expresie mai mare pe celulele efector
- Ly Th1 rmn strns legate de suprafaa macrofagelor
- Ly Th2 se leag de suprafaa Ly B
- Ly T citotoxice se leag la suprafaa celulelor int
- Ly T efector exprim o serie de molecule membranare sau solubile
o Cele membranare aparin familiei TNF
FasL pe suprafaa CTL
TNF- pe suprafaa Th1
CD40L pe suprafaa Th2

o Molecule solubile
CTL secret citotoxine (perforine i granzime) i citokinele IFN- i
TNF-
Ly Th1 i Th2 secret seturi distincte de citokine
- Sistemul imun genereaz i subpopulaii cu rol reglator
o Treg naturale apar n timus i prezint CD4+, CD25+, Foxp3+
o Limfocite reglatorii inductibile se dezvolt n condiii de expunere
subliminal la antigen i/sau co-stimulare
Se difereniaz n Th3 sau Tr1 dup activare
Limfocitele reglatorii inductibile pot fi CD4+ sau CD8+

Limfocitele T helper

- Th1 secret IL-2, INF i limfotoxin


o Responsabile pentru rspunsurile imune mediate celular i pentru rspunsurile
direcionate mpotriva patogenilor intracelulari
- Th2 secret IL-4 i IL-5
o Responsabile pentru susinerea RI umorale necesare pentru eliminarea
patogenilor extracelulari
- Procesul de specificare reprezint un proces de maturare reversibil
78
- Celulele T CD4+ pot urma ci de difereniere alternative n funcie de semnalele
recepionate din mediu
o Citokinele care predomin n mediu
o Profilul receptorilor pentru citokine
o Expresia factorilor transcripionali
o Remodelarea difereniat a locilor care regelaz producia de citokine
- Citokinele permit ca limfocitele s converseze cu alte populaii limfocitare T, naive,
efector, cu memorie sau reglatorii
- Dup 4-6 cicluri de diviziune, celulele T CD4+ dezvolt patternuri stabile ale expresiei
de citokine
- Semnalele primite din micromediu sunt furnizate predominant de APC-uri
o n stadiul precoce al unei infecii macrofagele sunt APC-ul dominant
Prezint mai eficient Ly Th1 promoveaz diferenierea lor
o Spre sfritul RI primar crete numrul de Ly B induc diferenierea Ly Th2
- Sub influena IL-2 apare proliferarea Ly Th celule denumite Th0 pot secreta IL-2,
IFN i IL-4
o Dup 48-72h, majoritatea Th0 se difereniaz n celule efectorii funcionale sub
aciunea a 3 elemente:
Antigenul trebuie s fie prezentat
Citokine
IL-12, IL-27 i IFN diferenierea Th1
IL-4 diferenierea Th2
Receptori pentru citokine
o Tipul de costimulare va influena de asemenea diferenierea
Angajarea CD28 de ctre B7-1 Th1
Legarea B7-2 cretere secreeie de IL-4 i inducerea de Th2
- Angajarea unor anumitor TLR-uri de pe suprafaa DC face ca acestea s secrete IL-12
Th1
o DC1 induc diferenierea Th1
o DC2 (plasmacitoide) induc Th2
- Diferenierea ctre Th2 poate fi calea automat de difereniere din care limfocitele sunt
deturnate de IL-12
- Th1 susin RI mediate celular prin secreia de IFN, IL-2, limfotoxin i GM-CSF
o INF i LT activeaz macrofagele i le determin:
S secrete citokine adiionale
S devin fagovite mai potente
Crete producia de NO
o Crete expresia de FcR de mare afinitate participarea la efecte de tip
ADCC
o Prin producia de IL-2 este promovat proliferarea Ly T i a Ly B
o IFN influeneaz comutarea de clas ctre isotipuri potrivite pentru
opsonizare, fagocitoz i activarea complementului
o Citokinele Th1 determin amplificarea expresiei MHC II i a moleculelor TAP
o Activarea Ly Tc este susinut de IL-2 i IFN i prin intermediul contactului
CD40-CD40L
- Th2 secret IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13 i GM-CSF
o Au rol n stabilirea contactului cu Ly B prin intermediul CD40L-CD40
o IL-4 i IL-5 influeneaz comutarea de clas ctre IgA, IgE i IgG4 aceste
isotipuri nu determin activarea complementului i ADCC

79
Combaterea Ag la nivelul situsurilor mucoase este preferat
neutralizarea n absena inflamaiei
o IL-5 este o citokin important pentru creterea, diferenierea i activarea
eosinofilelor
o IL-3, IL-4 i IL-10 - acioneaz conjugat pentru activarea mastocitelor
o Stimularea simultan a mastocitelor i eosinofielor mpreun cu secreia de IgE
element important n instalarea reaciilor alergice
o IL-10 inhib funciile efectorii ale macrofagelor, abrog producia de IL-12,
inhib expresia MHC II i B7 pe suprafaa DC
Amplific expresia MHC II pe Ly B
o IL-4 i IL-13 inhib producia de citokine pro-inflamatorii, inhib producia de
NO i scad expresia FcR de pe suprafaa macrofagelor, DC i Ly B
Stimuleaz proliferarea Ly B
- Hiperactivarea macrofagelor de ctre Th1 poate duce la reacii de hipersensibilitate
ntrziat
o Acest termen desemneaz o reacie inflamatorie observat la individul deja
sensibilizat dup cca. 2-3 zile de la contactul cu antigenul
- Th17
o Reprezint un alt subset de celule CD4+ activate de Ag
o Secret IL-17A i IL-17F precum i IL-22
o IL-17 i IL-22 sunt citokine pro-inflamatorii
o Th17 i citokinele secretate de acestea au fost identificate n anumite afeciuni
autoimune artrit reumatoid, scleroz multipl, psoriazis i IBD
o IL-17 stimuleaz celule ale aprrii nespecifice
Neutrofile rectutate la sediul inflamaiei i activate
Celule endoteliale i epiteliale le determin s secrete IL-1, IL-6 i
TNF factori pro-inflamatori
o IL-22 induce sinteza de produi antibacterieni de ctre celulele epiteliale
o Subsetul Th17 este implicat n rspunsul fa de bacterii extracelulare i fungi
- Aciunile subseturilor Th1, Th2 i Th17 nu se suprapun

Limfocitele T reglatoare/supresoare

- Ly T CD4+ reglatoare exprim CD25+ - lanul al receptorului pentru IL-2


- CD25 este exprimat i celulele CD4+ activate
- FoxP3 marker intracelular specific Treg
o Este un marker de transcripie care este necesar pentru dezvoltarea Treg n
timus
o Face ca Ly T non-reglatorii s dobndeasc activitate supresoare n periferie
- Treg exprim pe membran GITR
- Celulele Treg naturale (CD4+, CD25+, FoxP3+) reprezint aproximativ 10% din
totalul Ly CD4+ periferice
- Roluri:
o Meninerea toleranei fa de self
o Pot suprima:
Reacia gref contra gazd
Rspunsurile imune fa de celulele tumorale, alergeni i patogeni
Rspunsurile imune fa de organele transplantate

80
- Treg necesit IL-2 pentru meninerea ca populaie celular i activare
- Prezint repertoriu vast de receptori pentru Ag
- Prezint afinitate crescut fa de complexele MHC II/peptid self
- Activarea necesit lecarea TCR
o Dup activare, funcia supresoare este independent de antigen
- Treg pot suprima aciunea unor limfocite efector CD4+ sau CD8+ autoreactive
o Pot suprima i Ly B, DC i celule NK
- O explicaie pentru aciunea supresoare a Treg este prezena CTLA-4
o Interaciunea CD80 i CD86 de pe APC-uri cu CTLA-4 de pe Treg furnieaz
un semnal co-stimulator care induce activitatea supresoare a acestora din urm
- LAG-3 (gena activat de limfocit) molecul de adeziune asociat CD4, care leag
MHC II exprimat pe suprafaa Treg
o Prin legarea MHC II poate avea rol n inducerea activitii supresoare a Treg
- Treg poate determina scderea expresiei CD80 i CD86 pe suprafaa DC DC devin
activatori mai slabi ai Ly T efector
- IL-10 i TGF sunt necesare pentru aciunea supresoare a Treg
- Secreia IL-10 de ctre Treg suprim Ly T autoreactive rezidente
- Amplificarea populaiei Treg poate fi util n tratamentul bolilor autoimune i pentru
anihilarea rejetului alogrefelor
- Depleia Treg poate amplifica rspunsurile imune fa de vaccinuri tumorale sau fa
de ageni precum HIV
- n cadrul subsetului T CD4+ au mai fost identificate alte 2 tipuri de celule:
Celule T reglatoare de tip 1 (Tr1)
Sunt activate in vitro prin stimulae cu IL-10
Produc cantiti mari de TGF
Nu produc IL-4
Sunt implicate n medierea proteciei mpotriva IBD
Celule T helper 3 (Th3)
Sunt cantonate n mucoase implicate n suprimarea
rspunsurilor imune
Produc n principal TGF dar i cantiti variabile de IL-10 i
IL-4
o Aceste celule sunt numite celule T reglatoare adaptative
Formarea lor este indus din celulele T naive de ctre antigene
specifice
o Ly Treg induse pot fi CD25- sau CD25 low
- Celulele Treg naturale i adaptative sunt implicate n meninerea homeostaziei dintre
responsivitatea imun i self-tolerana

Cross-reglarea subseturilor T CD4+

- Citokinele produse de un anumit subset CD4+ inhib funcia altor subseturi


o IFN, sintetizat de Th1 inhib Th2
o IL-4, sintetizat de Th2 inhib Th1
o INF i IL-4 inhib Th17
- Treg inhib dezvoltarea i funcionarea tuturor subseturilor de Ly Th
- RI fa de un anumit antigen este direcionat ctre producia unui anumit subset de Ly
Th, a unui anumit set de citokine i deci a unui anumit tip de rspuns efector

81
- n cazul unei infecii cu un virus sau o bacterie, n faza precoce a RI, NK i DC
sintetizeaz IL-12 este stimulat diferenierea Th1
- n cazul infeciei cu un parazit, citokina secretat precoce n RI este IL-4
diferenierea Th2 i comutarea de clas ctre IgE
- Expunerea la TGF i IL-21 duce la formarea de Th17
o IL-21 este sintetizat precoce ntr-un RI fa de un patogen sau ntr-un rspuns
imun inflamator
o Este prevenit dezvoltarea Ly Treg inhibitorii

Limfocitele T citotoxice

- Aceste celule au capaciti litice i pot recunoate si elimina celulele self alterate
- Au rol i n respingerea grefelor
- CTL sunt CD8+ - sunt MHC I restrictate
o Pot exista i CTL CD4+ - sunt MHC II restrictate
- CTL pot recunoate i distruge aproape orice celul alterat
- Rspunsul CTL este mprit n 2 etape
o Prima faz Ly Tc naive sunt activate i se difereniaz n CTL efectorii
funcionale
o A doua faz CTL legate la complexele MHC I/Ag distrug celula int
- Ly Tc naive nu pot ucide celule int sunt numite precursori CTL
o Sunt imature dpdv funcional
- Generarea de CTL funcionale necesit 3 semnale de activare
o Semnal specific transmis prin TCR, ca urmare a recunoaterii complexului
MHC I/Ag
o Semnal co-stimulator transmis prin molecula CD28 care se leag la molecula
B7 de pe APC
o Semnal indus de aciunea IL-2 asupra receptorului de mare afinitate pentru IL-
2 proliferarea i diferenierea precursorilor n CTL efector
- Ly Tc ne-activate nu secret IL-2 i nu exprim IL-2R, nu prolifereaz i nu au
activitate citotoxic
- n urma activrii este indus expresia IL-2R i sinteza IL-2
- Majoritatea CTL necesit IL-2 suplimentar, produs de ctre Ly Th1
- Proliferarea i diferenierea Ly Th1 activate i a precursorilor CTL depind de IL-2
o Dup ndeprtarea Ag-nului nivelul IL-2 scade i aceste celule intr n
apoptoz
- Th1 poate induce stimularea expresiei de molecule co-stimulatoare pe suprafaa APC
- Etapele uciderii sunt urmtoarele:
o Formarea unui conjugat efector-int
o Atacarea membranei
o Disocierea CTL de int
o Distrugerea celulei int
- Cnd un CTL antigen-specific este incubat cu o int potrivit, cele dou celule
interacioneaz i formeaz un conjugat
o Este declanat o etap energofag, Ca-dependent CTL programeaz celula
int penru moarte
o CTL se disociaz i se leag la o alt int
- Complexul TCR/CD3 recunoate complexul MHC I/Ag de pe suprafaa celulei int

82
o La recunoatere particip i LFA-1 de pe suprafaa CTL care se leag la
molecula ICAM formarea conjugatului
o Activarea mediat de Ag a CTL crete aviditatea moleculei LFA-1
Aceast aviditate crescut este meninut timp de 5-10 minute
faciliteaz disocierea CTL de celula int
- CTL prezint granulaii de stocare intracelular
o Prezint perforine i serin proteaze numite granzime (fragmentine)
- Precursorii CTL nu au astfel de granule i perforine
- Dup formarea conjugatului CTL-celul int, aparatul Golgi i granulele de depozit se
concentreaz spre jonciunea cu celula int
o Monomerii de perforin i granzimele sunt eliberate prin exocitoz
o Monomerii de perforin polimerizeaz n prezena Ca i formeaz pori
cilindrici
Porii formai sunt similari cu cei formai de sistemul complement
o Prin porii formai ptrund granzimele
o Celulele int prezint pe suprafa receptorul pentru manoz 6 fosfat se
leag la granzima B
o Complexul granzima B-receptor pentru manoz 6 fosfat este internalizat i
ajunge n interiorul veziculelor
Perforinele sunt necesare pentu eliberarea de granzime B din vezicule
o Granzima B iniiaz o cascad de reacii care conduce la fragmentarea ADN-
ului celulei int
o Granzimele nu pot fragmenta n mod direct ADN-ul ele activeaz o cale
apoptotic n interiorul celulei
Acest proces apoptotic nu necesit mARN i sintez de proteine nici n
CTL nici n celula int
o Prin acest proces este fragmentat i ADN-ul viral din celulele infectate cu
virusuri
- Unele CTL nu prezint nici perforine i nici granzime
o Citotoxicitatea lor este mediat de ctre Fas
o Fas este o proteint transmembranar care face parte din familia TNF receptor
o Fas transmite un semnal care duce la moartea celular atunci cnd este legat de
ligandul FasL
o FasL este membru al familiei TNF i se gsete pe membrana CTL
o Interaciunea Fas-FasL declaneaz moartea celular prin apoptoz
- O trstur a morii celulare prin apoptoz este implicarea unei familii de caspaze
(cistein-aspartat-proteaze) cliveaz dup un reziduu de acid aspartic
o Caspazele sunt prezente n celule ca proenzime inactive procaspaze
Acestea necesit clivaj proteolitic pentru activare
o Rezultatul aciunii caspazelor este dezasamblarea ordonat i sistematic a
celulei
- CTL utilizeaz granzimele i FasL pentru a iniia cascada caspazelor la nivelul intelor
lor
o Fas este asociat cu o protein numit FADD se asociaz cu o procaspaz a
caspazei 8

Celulele T cu memorie

83
- Puine celule T antigen specifice generate n cursul RI primar supravieuiesc AICD
(activation induced cell death), mediat prin intermediul interaciunii Fas-FasL
- Celulele T activate exprim att Fas ct i FasL
o Limfocitele folosesc aceast interaciune pentru a se ucide reciproc
- Celulele care supravieuiesc dau natere celulelor cu memorie se stabilesc n esuturi
- Ly T care supravieuiesc sunt de 100-1000 de ori mai multe dect cea a celulelor naive
de origine
- Datorit celulelor cu memorie, RI secundar va fi mai rapid i mai puternic dect RI
primar
- Celulele T cu memorie au proprieti intermediare ntre celulele naive i celulele
efectorii
o Majoritatea Ly T cu memorie se gsesc n repaus
o Ly T naive pot circula doar prin ganglionii limfatici
o Celulele T cu memorie i cele efector pot circula mai amplu n organism i pot
intra n esuturi
o Activarea celulelor cu memorie necesit co-stimulare minimal
o Celulele cu memorie efector exprim molecule de adeziune similare cu cele
exprimate de celulele efector
o Durata de viat a celulelor cu memorie este mult mai lung
o Ly T cu memorie sunt mai rapide i mai eficiente dect Ly care particip la RI
primar
o Ly T umane cu memorie sunt CD45RA-, dar exprim CD45RO

Generarea celulelor T cu memorie

- Apariia celulelor cu memorie este favorizat de:


o Prezena Ag-nului n cantiti sczute
o Angajarea CD28
o Prezena IL-2
- Alt ipotez este reprezentat de faptul c celulele cu memorie se difereniaz din
ultimele valuri proliferative ale clonei originale
o Aceste clone ajung la situsul RI cnd antigenul a fost deja aproape nlturat
- Au fost identificate 2 molecule cheie pentru generarea Ly T cu memorie: IL-7 i CD27
- Expresia IL-7R este inhibat n timpul activrii Ly T naive
- CD27 este membru al superfamiliei TNFR i leag CD70
- Ly Th naive exprim o cantitate crescut de selectin L i isoformele RA i RB ale
moleculei CD45
o CD44, ICAM-1, LFA1 i VLA au expresie joas
- Celulele cu memorie centrale exprim pattern de molecule de adeziune i de receptori
pentru chemokine similar cu cel al Ly naive
o Celulele cu memorie centrale sunt recirculate prin ganglionii limfatici i rezid,
n repaus, n organele limfoide secundare
- Celulele cu memorie efector nu exprim pe suprafa molecule de adeziune i
receptori pentru chemokine (CCR7)
o Este amplificat expresia unor molecule care permit migrarea n esuturile
periferice i situsuri inflamatorii
Un set de molecule permite migrarea ctre piele
Alt set de molecule direcioneaz Ly ctre mucoase
o Aceste celule nu trebuie s se diferenieze n efectori

84
- Ly T cu memorie btrne se acumuleaz n snge i splin

Activarea celulelor T cu memorie

- Activarea Ly cu memorie depinde de interaciunea cu diverse tipuri de APC-uri


- Ly Th naive sunt activate doar de ctre DC n ganglioni
- Ly T cu memorie pot fi activate de DC, Ly B i macrofage aproape peste tot n
organism
- Ly Tc cu memorie pot rspunde fa de o celul infectat localizat oriunde n
organism
- Pentru activare este necesar o concentraie a Ag-nului de 10-50 ori mai mic dect n
cazul celor naive, o perioad scurt de semnalizare i o co-stimulare redus
- Celulele cu memorie au un numr mare de agregate membranare deja formate
- Numrul mare de molecule de adeziune i isoforma CD45RO contribuie la pragul
sczut necesar pentru activare
- Celulele cu memorie nu au nevoie de ajutorul Ly Th pentru a se activa
- Dup activare, celulele T cu memorie prolifereaz mai rapid i pentru o perioad mai
lung de timp
o Mor mai repede prin AICD atunci cnd sunt stimulate prelungit

Diferenierea Ly T cu memorie i funcia efectorie

- Generarea celulelor efector din Ly naive necesit 4-5 zile


- Generarea CTL dureaz 12 ore
- Ly CD4+ cu memorie se difereniaz fie n Th1 fie n Th2

Durata de via a celulelor T cu memorie

- Durata de via depinde de clona respectiv i de natura Ag-nului care a declarat RI


primar
- Majoritatea au o durat de via de la cteva luni pn la civa ani
- IL-15 este esenial pentru supravieuirea pe termen lung att a Ly CD4+ ct i CD8+
o Sub influena IL-15 celulele cu memorie sufer un proces de diviziune lent

Celulele Natural Killer

- Prezint activitate citotoxic nespecific


- Sunt celule limfoide mari, non-fagocitice
- Conin granulaii cu perforine i granzime ucid extracelular
- Citoliza este indus fie prin citotoxicitate natural, fie prin fenomenul ADCC, fie prin
aciunea unor citokine
- Sunt implicat n aprarea imun mpotriva virusurilor i tumorilor
- Joac rol n reglarea imun i influeneaz att imunitatea nnscut ct i cea
adaptativ
- Produc IFN care activeaz capacitatea fagocitic i microbicid a macrofagelor
o IFN poate influena diferenierea Ly Th1 n detrimentul Ly Th2
Stimuleaz secreia de IL-12 de ctre macrofage i DC
- Intervin n reglarea diferenierii i funciei Ly B
- Celulele NK sunt implicat n rspunsurile precoce din infeciile cu anumite virusuri i
bacterii intracelulare

85
- Activitatea lor este stimulat de IFN-, IFN- i IL-12
- Celulele NK reprezint prima linie de aprare mpotriva infeciilor virale
- Celulele NK sunt celule limfoide derivate din mduva osoas
o Au progenitor comun cu Ly T
- Precursorii NK/T din mduv sunt stimulai de IL-15, prin intermediul moleculei Flt3-
ligand (stimul esenial pentru dezvoltarea NK) i prin intermedul contactului cu
celulele stromale
- Stimularea continu cu IL-15 determin apariia celulelor pro-NK
o Acestea se difereniaz n NK imature exprim o serie de receptori inhibitori
o NK mature exprim un set complet de receptori activatori i inhibitori
- Alt surs de celule NK este reprezentat de precursorii migrai n timus
- Celulele NK migreaz n special ctre splina, ficat, uter i mucoasele epiteliale
reprezint o component important a MALT
o Un numr redus de celule NK resting sunt ntlnite n mduva osoas,
ganglionii limfatici i perineu
- n absena activrii, durata medie de via a unei celule NK este de 7-10 zile
- Celulele NK exprim CD2, lanul al IL-2R i CD16 (FcR III) receptor pentru
regiunea Fc a IgG
- n funcie de prezena CD16 i CD56 (N-CAM), celulele NK pot fi clasificate n:
o CD16+, CD56 dim
Reprezint 10-15% din totalul Ly
Principala populaie NK din periferie
o CD16-, CD56 bright
n proporie de 0,5% n periferie
Populaia principal n endometru:
Pn la 40% din NK-urile uterine exprim markerul Ki67
- Celulele imature NK2 produc IL-5 i IL-13
o Se difereniaz n NK0 care produc citokine de tip 1 i de tip 2
o La sfrit se difereniaz n celule NK1 care produc IFN
- Exist i celule NK3 i NKr1 celule cu funcie reglatoare
- Celulele NK nu fac rearanjri genice
- Exist o subpopulaie de celule denumit NKT care exprim TCR
o TCR-ul interacioneaz cu molecula CD1
o Prezint nivele variabile de CD16 i ali receptori caracteristici celulelor NK
o Dup activare secret cantiti mari de citokine necesare pentru susinerea
produciei de Ac, a procesului inflamator i proliferarea Ly T citotoxice
- Celulele NK ucid celulele tumorale i celulele infectate viral
- Pe suprafaa NK exist FasL induce moartea celulelor Fas+
- Citoplasma conine granulaii cu perforine i granzime
- Celulele NK sunt citotoxice constitutiv
- Dup aderarea la o celul int apare degranularea cu eliberarea de perforine i
granzime
o Se produce uciderea prin apoptoz
- NK nu exprim receptor pentru Ag i nici CD3
- Recunoaterea celulelor int de ctre NK nu este restrictat MHC
- Rspunsul celulelor NK nu genereaz memorie imunologic
- NK prezint 2 tipuri de receptori
o Unii furnizeaz semnale activatoare
o Alii semnale inhibitoare

86
- Balana dintre semnalele activatoare i cele inhibitoare este mecanismul prin care
celulele NK disting ntre self i non-self
- Semnale activatoare adiionale pot fi furnizate de IFN-, IFN-, TNF-, IL-12 i IL-
15
- Clasa NCR natural cytotoxicity receptor conine doar receptori activatori
- Clasa NKG2 natural killer group 2 i clasa KIR (killer Ig-like receptor) conin att
receptori activatori ct i inhibitori
o Receptorul heterodimer NKG2C/CD94 la care este ataat molecula DAP12
leag HLA-E
o Homodimerul NKG2D este asociat cu DAP10 i DAP12 se leag la
molecule MHC non-lcasice din familia MIC
Aceti receptori sunt exprimai ca rspuns la stress celular, pe
moleculele stimulate de infecia viral sau de transformarea malign
o NKG2A/CD94 i NKG2B/CD94 sunt receptori inhibitori
NKG2A/CD94 se leag la HLA-E i inhib aciunea NKG2C/CD94
Acest receptor are rol important la nivel uterin
- KIR sunt denumii i clasificai n funcie de numrul de domenii globulare i de
lungimea cozii intracitoplasmatice
o KIR2DS1 este asociat cu DAP12 i se leag la HLA-C
o KIR2DS KIR cu 2 domenii Ig-like i coad intracitoplasmatic scurt
o KIR3DL KIR cu 3 domenii Ig-like i coad intracitoplasmatic lung
o KIR2DL2, KIR3DL1 i KIR2DL1 receptori inhibitori care leag HLA-A, B
i C
o KIR2DL4 se leag la HLA-G
o Celulele NK pot exprima mai multe tipuri de KIR
- Funciile activatoare versus inhibitoare sunt determinate de domeniile
intracitoplasmatice
o Receptorii activatori reziduuri transmembranare pozitive i cozi
intracitoplasmatice scurte
Se asociaz ca un homodimer format din lanuri precum CD3, sau
una din moleculele adaptor DAP10 sau DAP12
Aceste molecule prezind domenii transmembranare negative i
cu excepia DAP10, conin domenii ITAM
o Receptorii inhibitori prezint domenii intracitoplasmatice lungi care conin
motive structurale ITIM
Motivele ITIM sunt fosforilate i blocheaz transducerea semnalului
- Receptorii activatori din familia NCP NKp46, NKp44, Nkp30 exclusiv pe
suprafaa celulelor NK
o Responsabili pentru uciderea celulelor infectate viral i a celulelor tumorale
- Proprieti activatoare pot avea CD2 i CD16
o CD16 este responsabil pentru recunoaterea mediat de Ac i uciderea intei
de ctre NK
- Celulele NK ucid celule care au o expresie aberant de MHC I
- Semnalele inhibitorii au putere de veto asupra semnalelor activatoare
o Un semnal negativ de la un receptor inhibitor poate bloca liza celulei int de
ctre celulele NK
- Celulele care exprim nivele normale de MHC I nealterate vor evita liza de ctre
celulele NK

87
Citotoxicitatea celular dependent de Ac (ADCC)

- Un numr de celule care au activitate citotoxic exprim pe membran receptori Fc


o Aceste celule produc liza celulelor int care leag anticorpi
- Acest tip de citotoxicitate se numete ADCC
- Celulele care mediaz ADCC sunt celulele NK, macrofagele, monocitele, neutrofilele
i eosinofilele
- Uciderea intei prin ADCC nu implic liza mediat de complement
- Monocitele, macrofagele i celulele NK activate secret TNF care are aciune
citotoxic asupra celulei int

Celulele NKT

- Aceste celule exprim markeri ai celulei NK simultan cu TCR


- NKT recunosc i rspund fa de lipide i antigene glicolipidice derivate din patogeni
- NKT pot rspunde att fa de micro-organisme ct i fa de structuri self
- Aceste celule utilizeaz un TCR semi-invariabil - lan i un set restrns V
- Acest TCR rspunde fa de antigene prezentate de ctre APC-uri CD1 pozitive DC
- Dup activare, NKT sintetizez rapid cantiti crescute de citokine de tip Th1 i Th2,
n principal IFN i IL-4
- NKT joac rol important n clearance-ul precoce al bacteriilor
- Prin secreia IL-4, NKT reuete diferenierea preferenial a subsetului Th2
- Defectele NKT sunt asociate cu autoimunitile i neoplaziile

SUPERANTIGENE

- Superantigenele sunt proteine care se leag simultan:


o La nivelul unor situsuri constante situate n afara cupei MHC II, fr s fie
nevoie de procesare
o La nivelul unor CDR2 ale unor lanuri TCR
- Superantigenele realizeaz o legtur dintre TCR-ul de pe un anumit Ly T i molecula
MHC II de pe APC
o Aceast legtur poate declana semnalizarea intracelular

88
- ntre 5-20% Ly T folosesc segmente genice V particulare care pot lega superantigene
o RI rezultat are amplitudine mare
- Superantigenele sunt mitogeni dependeni de MHC II
- Activarea Ly Th duce la eliberarea unei cantiti mari de citokine pro-inflamatorii
IL-1 i TNF pot duce la apariia ocului toxico-septic
- O cantitate mare de superantigene duc la apoptoza Ly T
- Superantigenele pot fi:
o Exogene produi ai unor bacterii care se replic
Aici sunt incluse toxinele produse de bacterii gram pozitive
Enterotoxina produse de stafilococi
Exotoxina - produse de streptococi
Exotoxinele sindromului ocului toxic
Boala Crohn asociat cu superantigenul SAG I2
SAG I2 activeaz un subset de Ly T care utilizeaz V5
o Endogene produi au unor virusuri integrate
Sunt proteine codate de gene prezente n genomul uman genele
retrovirale

Antigene T independente

- Antigenele T independente nu necesit contactul dintre Ly Th i Ly B pentru a induce


activarea acestora din urm
o RI este rapid
o Nu apare RI secundar
Apar doar rspunsuri imune de tip primar, cu secreie de IgM
o Nu apare comutarea de clas
o Nu apar centri germinali i nici celule cu memorie
- O serie de antigene T independete pot stimula direct celulele NK, macrofagele i
mastocitele secreie de citokine
- Antigenele T independete se mpart n 2 categorii:
o Tip 1 rspunsul fa de aceste antigene apare n absena complet a
contactului cu Th i a citokinelor
n concentraii crescute se comport ca activatori policlonali ai Ly B
stimulare indiferent de specificitate
Ag Ti-1 sunt considerate mitogeni ai Ly B
Unele Ag Ti-1 se leag la un receptor diferit
LPS se ataeaz la complexul TLR4/CD14
n concentraii mici ale antigenului se activeaz doar Ly care l pot
recunoate n mod specific
Antigenele nu mai au efect mitogen
i n cantiti mici de antigen, activarea este independent de Ly Th
Ag Ti-1 pot activa i Ly B imature
o Tip 2 necesit ajutor din partea unui set de citokine, produse de celulele din
micromediul nconjurtor
Aceste antigene sunt molecule liniare cu greutate molecular mare, cu
epitopi repetitivi
Sunt dificil de procesat persist pe suprafaa macrofagelor pentru
mult timp

89
Ti-2 acioneaz ca antigene multivalente realizeaz fenomenul de
legare ncruciat
Regiune Fab ale dou Ig sunt aduse mpreun prin legarea la
acelai antigen
Prin aceast legare se ajunge la o stimulare prelungit a Ly B
Ti-2 activeaz Ly B ntr-o manier specific
Citokinele intervin n reglarea rspunsului fa de antigenele Ti-2
Citokinele nu sunt produse de Ly Th
Au rolul de a crete magnitudinea rspunsului imun
Pot determina anumite comutri de clas sau generarea de
celule cu memorie
Ly B care rspund fa de Ag polizaharidice primesc ajutor i din partea
sistemului complement
Glucidele pot activa direct calea alternativ fragmente C3d,
care pot fi legate de receptorii CR2 (CD21)
o Alte antigene T-independente-like
Unele virusuri conin epitopi care nu se ncadreaz n nici o categorie
menionat mai sus
O glicoprotein de suprafa a VSV poate genera RI n absena
complet a oricrui contact celular, precum i a citokinelor
Acest antigen nu este activator policlonal, chiar i la
concentraii crescute

CITOKINE

Proprieti generale, familii

- Citokinele = factori solubili produi de celule


o Limfokine factori solubili produi de limfocite
o Monokine factori solubili produi de macrofage
o Interleukine factori solubili profui de leucocite, capabili s acioneze asupra
altor leucocite
o Chemokine factori solubili care afecteaz chemotaxia i/sau comportamentul
celular
- Citokinele sunt molecule solubile, secretate n cantiti extrem de sczute, capabile s
acioneze i s-i exercite efectele doar cnd se leag la receptori specifici
o Pot media efectele biologice la concentraii extrem de sczute
- Citokinele difer de hormoni i factorii de cretere prin situsul de producie,
modalitatea de operare i spectrul de influen
o Hormonii:
Indui de stimuli specifici
Sintetizai de ctre glande specializate
Acioneaz ntr-o manier endocrin
Influeneaz un num limitat de celule
o Factorii de cretere
Produi n mod constitutiv de ctre celule individuale
Sunt detectai la nivele semnificative n circulaie
Pot influena o gam larg de celule
o Citokinele

90
Secretate sub control reglator stric
Efectele sunt exercitate de o manier autocrin sau paracrin
Pot regla intensitatea i durata RI prin stimularea/inhibarea:
Activrii
Proliferrii i/sau diferenierii
Secreiei de anticorpi/comutrii de clas
Reglrii secreiei de alte citokine
- Legarea unei citokine la o celul stimuleaz sau amplific expresia receptorilor pentru
citokina respectiv i secreia altor citokine
- Citokinele produse de Ly Th pot influena activitatea Ly B, Ly Tc, NK, macrofagelor,
granulocitelor i celulelor stem hematopoietice
- Citokinele sunt peptide sau glicoproteine cu greuti moleculare foarte mici
o Rolul principal este de comunicare intercelular
- Clasificare:
o Hematopoietine: GM-CSF, G-CSF, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-11,
IL-12, IL-13, IL-15
o Interferoni: IFN, IFN, IFN
o Chemokine: IL-8
o TNF
- Cea mai mare familie structural prezint o structur proteic care include 4 -helix-
uri scurte, conectate prin peptide liniare simple
o Foile pliate sunt n general absente din structura lor
- IL-1 i IL-18 formeaz o structur teriar format n ntregime din 12 foi pliate
trefoil
- Membrii familiei TNF au structur de homotrimeri jelly roll
- Membrii familiei TGF homodimeri legai prin legturi disulfidice nod de cisteine
- Chemokinele sunt mprite n funcie de aranjarea reziduurilor N terminale de cisteine
- Perioada de njumtire a citokinelor i a ARN-ului mesager sunt foarte scurte
- La recepionarea unui semnal inductor trebuie declanate noi semnale de transcripie i
translaie
- Citokinele pot fi modificate post-translaional nainte s fie secretate
- Proprieti ale citokinelor
o Pleiotropism o citokin poate aciona pe mai multe celule diferite,
determinnd efecte diferite
IL-4
Ly B activare, proliferare, difereniere
Timocite proliferare
Mastocite proliferare
Ly Th1 inhibare
o Redundan mai multe citokine diferite acioneaz asupra aceleiai celule,
determinnd acelai efect
IL-2, IL-4, IL-5 Ly B proliferare
o Sinergie citokine diferite acioneaz asupra aceleiai celule, i sumeaz
forele i determin un efect comun
IL-4 + IL-5 Ly B comutare de clas spre IgE
o Antagonism citokine diferite au efecte opuse
IL-4 i IFN Ly B blocheaz comutarea de clas la IgE
o Aciune n cascad

91
Ly Th1 activat IFN Macrofag activat IL-12 Ly Th1
activate IFN, TNF, IL-2

Funcii biologice ale citokinelor

- Principalii secretori de citokine sunt Ly Th i macrofagele


o Dup ce au fost secretate citokinele activeaz o reea de celule care
interacioneaz
- Rspunsuri fiziologice care necesit implicarea citokinelor:
o Rspunsurile imune umorale i celulare
o Inducia rspunsului inflamator
o Reglarea hematopoiezei
o Controlul proliferrii i diferenierii celulare
o Procesul de cicatrizare
- Aciunea citokinelor nu este antigen-specific
- In vivo citokinele nu acioneaz singure
- Citokinele induc adesea sinteza altor citokine efect n cascad
- Citokinele acioneaz asupra receptorilor pentru citokine
o Aceti receptori sunt exprimai doar dup contactul cu Ag-nul aciunea
citokinelor este limitat la limfocitele activate de antigen
- Declanarea secreiei de citokine necesit contactul direct celul-celul eliberarea
citokinelor n imediata proximitate a intei
- Perioada de njumtire a citokinelor este foarte scurt

Receptori pentru citokine

- Clasificare:
o Receptori pentru superfamilia Ig-nelor
Conin cel puin un domeniu globular
Liganzi: IL-1, M-CSF, c-kit
o Receptori pentru citokine din clasa I (pentru hematopoietine)
Formeaz majoritatea receptorilor
Compui din 2 lanuri polipeptidice
Lan rol n legarea citokinei
Lan sau rol de transmitere a semnalului
IL-2 R i IL-15 R sunt trimeri
Liganzi: IL-2, 3,4,5,6,7,9,11,13,16, GM-CSF, G-CSF, OSM, LIF,
CNTF, prolactin, hormon de cretere
o Receptori pentru citokine din clasa II (pentru interferoni)
Au secvene CCCC dar nu i WSXWS
(triptofan/serin/x/triptofan/serin)
Includ o subunitate speficic citokinei i o subunitate cu funcie de
transmitere
Liganzi: IFN-, , , IL-10
o Receptori pentru TNF
Liganzii pentru aceast familie de receptori pot fi molecule libere sau
membranare
Liganzi: TNF, TNF, Fas, CD40, NGF
o Receptori pentru chemokine

92
Receptori cuplai cu proteine G
7 domenii transmembranare
8 receptori CC i 5 CXC

Subfamilii de receptori pentru citokine de clasa I

- GM-CSF Rc: GM-CSF, IL-3, IL-5


- IL-6 Rc: IL-6, IL-11, CNTF, LIF/OSM (leukemia inhibitory factor/oncostatin)
- IL-2 Rc: IL-2, 4, 7, 9, 15
o Prezint o subunitate comun
o Afectarea genetic conduce la SCID
- Receptorul IL-2
o Lanurile i aparin clasei I de receptori conin motive CCCC i WSXWS
o Lanul (CD25) este exprimat doar de Ly activate
Are structur diferit
o Exist 3 forme de IL-2R
IL-2R monomeric afinitate sczut
IL-2R dimeric afinitate intermediar
IL-2R trimeric afinitate nalt
o Transmiterea semnalului poate fi realizat att de lanurile i
o Doar receptorul trimeric leag cu mare afinitate
o Lanul pare s fie exprimat constitutiv
Expresia lanurilor i este mai restrns i este stimulat de ctre
antigen
Fenomenul asigur c doar Ly T CD4+ i CD8+ activate
exprim receptorul de mare afinitate i prolifereaz ca rspuns
la nivele fiziologice de IL-2
o Celulele NK exprim constitutiv subunitile i pot lega IL-2 cu afinitate
intermediar

Transmiterea semnalului mediat de receptorii pentru citokine

- Receptorilor din clasele I i II le lipsesc motivele structurale de semnalizare


- Dup interaciunea unei citokine cu un receptor, au lor fosforilri ale tirozinelor
- IFN- poate bloca replicarea unei mari diversiti de virusuri
o Are rol n multe procese imunoreglatoare
Reglarea fagocitozei de ctre mononucleare
Comutarea de clas ctre IgG
Stimularea sau inhibarea dezvoltrii unor subseturi de Ly T
- Etapele transmiterii semnalului:
o Dimerizarea receptorului sub influena citokinei
o La subunitile receptorului se asociaz PTK inactive
Jak-1 la lanul
Jak-2 la lanul
Asocierea Jak nu necesit legarea citokinei
o Legarea citokinei induce asocierea a 2 receptori i activarea Jak
o Jak 1 i 2 se fosforileaz reciproc i se activeaz
o Jak activate fosforileaz tirozine de la nivelul lanurilor receptorului

93
o La tirozinele fosforilate se leag STAT (Signal Transducers and Activation of
Transcription)
n cazul IFN, STAT-1 se leag la tyr fosforilate ale lanului
o STAT sunt fosforilate de ctre Jak, se desfac de la nivelul receptorilor i se
ndreapt spre nucleu
Se dimerizeaz i sufer o fosforilare suplimentar activarea
complet a dimerului ca factor transcripional
o STAT translocat n nucleu induce expresia unor gene care conin secvene
reglatorii potrivite la nivelul promotorilor
- Sunt descrise ISG-IFN stimulated genes
o Aceste gene sunt induse rapid i conin 2 tipuri de secvene conservate la
nivelul promotorilor
ISRE: IFN stimulated response element
GAS: gamma-IFN activation site
- i alte citokine din clasa I i II determin dimerizarea receptorilor lor
- Fiecare citokin induce transcripia unui subset specific de gene ntr-un anumit tip de
celul
o Produii acestor gene mediaz efecte tipice pentru acea citokin
- Specificitatea efectelor citokinelor poate fi urmrit prin intermediul a trei factori:
o Anumii receptori pentru citokine declaneaz anumite ci JAK-STAT
o Activitatea transcripional a STAT activate este specific
o n orice tip celular, numai unui subset de gene int ale unui particular STAT li
se permite expresia

Antagonitii citokinelor

- Antagonitii citokinelor sunt proteine care blocheaz activitatea citokinelor


- Acioneaz n 2 moduri:
o Se leag la un receptor pentru citokin i blocheaz accesul citokinei nu
transmit nici un semnal
o Se leag la citokin i o inhib
- IL-1 Ra = antagonistul receptorului pentru IL-1
o Se leag la receptor dar nu determin transmiterea unui semnal
o Blocheaz legarea adevratului ligand
o Joac rol n reglarea intensitii rspunsului inflamator
- Muli antagoniti rezult prin clivarea enzimatic a domeniului extracelular al
receptorului pentru citokine: IL-2, IL-4, IL-6, IL-7, IFN, TNF-, TNF-
- sIL-2 R = receptor pentru IL-2 solubil
o Reprezin un fragment N terminal din lanul
o Este marker al activitii cronice a Ly T
o Poate lega IL-2 i mpiedic interaciunea ciokinei cu receptorul membranar
- Unele virusuri produc:
o Proteine care se leag la citokine
o Proteine care seamn cu citokinele i se leag la receptorii pentru citokine
- Poxvirusurile produc:
o Proteina solubil de legare a TNF
o Proteina solubil de legare a IL-1
o Aceti factori solubili acioneaz reducnd sau stopnd procesul inflamator
- EBV produce o protein IL-10-like suprim rspunsul mediat de Ly Th1

94
Reglarea prin intermediul citokinelor

- Citokinele produse de Ly Th1 i Th2 determin:


o Activarea populaiei care le-a produs
o Inhibarea activrii i dezvoltrii celeilalte populaii
- Acest efect se numete cross-reglare
- IFN, produs de Th1, inhib preferenial proliferarea Th2
- IL-4, produs de Th2, acioneaz asupra macrofagelor i DC scderea produciei de
IL-12 (citokin important pentru diferenierea Ly Th1)
- IL-4 acioneaz asupra Ly B
o Fac comutare de clas la IgG1, IgE
o Inhib comutarea de clas la IgG2a
- IFN promoveaz comutarea la IgG2a
o Inhib comutarea la IgG1 i IgE
- Cross-reglarea explic de ce atunci cnd producia de Ac este crescut, rspunsul de
tip Hipersensibilitatea IV este sczut i invers
- IL-4 inhib sinteza subunitii a IL-12 Rc
o Ly devin ne-responsive la IL-12 i nu se pot diferenia n Th1
- IFN determin creterea sintezei subunitii a IL-12 Rc i anuleaz efectele IL-4
- Exist 2 factori trascripionali implicai n dezvoltarea unui anumit subset de Ly Th
o T-Bet conduce la diferenierea n Ly Th1 i la supresia Th2
o Expresia GATA-3 are efecte opuse
- n prezena IFN este amplificat expresia T-Bet i inhibat expresia GATA-3
o Acest proces este dependent de IFN/STAT-1 i determin comutarea profillui
de citokine ctre secreia de IFN-
- Un proces care implic IL-4R i STAT6 determin celula s produc IL-4 i alte
citokine Th2
- Amplificarea expresiei T-Bet duce la reprimarea expresiei GATA-3
- Expresia GATA-3 determin inhibarea expresiei T-Bet
- IL-10 nu este un inhibitor direct al Ly Th1, dar acioneaz asupra monocitelor i
macrofagelor i determin:
o Scderea expresiei MHC II nu pot activa Ly Th1
o Scaderea producia de NO
o Scderea produciei de IL-1, IL-6, IL-8, GM-CSF, G-CSF, TNF

Boli n relaie cu citokinele

- Infeciile cu bacterii gram


o Endotoxinele din peretele bacterian stimuleaz macrofagele i determin o
secreie crescut de IL-1 i TNF
o La cteva ore apare ocul septic caracterizat prin:
Scderea tensiunii arteriale
Febr
Diaree
Coagulare vascular diseminat
o Aceste citokine sunt int a terapiei
o Se administreaz anticorpi monoclonali blocani sau IL-1 Ra (antagonist al
receptorului pentru IL-1)

95
- Unele microorganisme secret toxine care sunt super-Ag
o Acestea se leag la MHC II n afara cupei i sunt recunoscute doar de V al
TCR
- Anormaliti ale produciei de citokine au fost observate i n neoplazii
o O secreie crescut de IL-6 este observat n mixomul cardiac, n neoplasmele
de col uterin i de vezic urinar i n plasmacitoame i mieloame
o n cazul mieloamelor IL-6 exercit i efect de stimulare autocrin
- Boala Chagas este produs de Trypanosoma cruzii i este caracterizat de o sever
supresie a imunitii
o Se cultiv Ly T cu T cruzii, se stimuleaz cu mitogeni nu apare proliferarea
limfocitelor
o T. Cruzii determin o scdere dramatic a sintezei subunitii IL-2R
- Progresia anumitor afeciuni depinde de balana citokinelor Th1/Th2
- Lepra agent etiologic: Mycobacterium Leprae bacterie intracelular care poate
supravieui n fagosomii macrofagelor
o Lepr tuberculoid
Rspuns predominant de tip celular
Formarea de granulaome i distrugerea majoritii patogenilor
Progreseaz lent i pacienii supravieuiesc
Predomin rspunsul de tip Th1 hipersensibilitate de tip ntrziat
Secreie crescut de IL-2, IFN, i TNF-
o Lepr lepromatoas
Rspunsul imun celular este deprimat i favorizat cel umoral
Se produce hipergammaglobulinemie
Bacteriile sunt diseminate n macrofage
Progreseaz ctre o infecie diseminat a oaselor i cartilajelor, cu
leziuni ntinse ale nervilor
Predomin rspunsul de tip Th2
Secreie crescut de IL-4, IL-5
Imunitate celular sczut i producie crescut de anticorpi
- Virusul Epstein-Barr produce vIL-10 suprim activitatea Th1 prin cross-reglare

Terapii bazate pe citokine

- Artrita reumatoid, hepatit B, hepatit C, scleroz multipl

96
MIGRAREA LEUCOCITELOR I PROCESUL INFLAMATOR

- Descrierea clinic a inflamaie:


o Rubor
o Tumor
o Dolor
o Calor
o Functio laesa
- Un element important care face posibil procesul inflamator este reprezentat de
posibilitatea leucocitelor de a prsi curentul circulator i de a penetra esuturile
o n cazul Ly, acest tip de migraie este continuu trafic limfocitar
o Recircularea permanent a Ly crete semnificativ ansele ca un numr foarte
mic de celule cu o anumit specificitate s ntlneasc Ag corespunztor
Aceast probabilitate este amplificat de o serie de factori care
direcioneaz traficul limfocitelor, l regleaz i l organizeaz
- Ly tranziteaz n torentul circulator pentru aproximativ 30 de minute
o Dup acest interval, cca. 45% din Ly sunt direcionate ctre splin aici
staioneaz 5 ore
o Cca. 42% din Ly vor trece din snge direct n ganglionii limfatici periferici
staioneaz 12 ore
o Aproximativ 10% din Ly intr n organele extralimfoide teriare esuturi care
n mod normal nu conin deloc Ly dar care n timpul unui rspuns inflamator
pot importa Ly
Cele mai active esuturi de acest tip sunt cele care formeaz interfaa cu
mediul extern piele, epitelii mucoase
- Un Ly realizeaz un circuit complet ntre snge, esut i lichid limfatic de 1-2 ori pe zi
- Pentru ca leucocitele s poat ptrunde ntr-un anumit esut sau organ limfoid, celulele
trebuie s adere la celulele endoteliale i apoi s treac printre acestea proces numit
extravazare sau diapedez
o Diapedeza este posibil ca urmare a interveniei unei serii de molecule de
adeziune specifice pentru leucocite CAMs (cell-adhesion molecules)
Unele sunt exprimate constitutiv, altele apar ca urmare a stimulrii
celulare de ctre citokinele produse n timpul procesului inflamator
- Majoritatea CAMs aparin urmtoarelor 4 familii:
o Familia selectinelor glicoproteine cu domeniu lectin-like
Pot lega anumite grupuri carbohidrat
Ex: selectina L (leucocite circulante), selectina E, selectina P (celule
endoteliale)
o Familia moleculelor mucin-like proteine asociate cu carbohidrai sialilai
Sunt liganzi pentru selectine
Exemple:
CD34
GlyCam-1 (celule endoteliale din ggl. limfatici) se leag la
selectina L
PSGL-1 (neutrofile) se leag la selectina E i P de pe
endoteliul inflamat
o Familia integrinelor heterodimeri
Pot fi grupate n subfamilii n funcie de tipul lanului
LFA-1 integrina 2 (CD18) ligand pentru ICAM-1

97
o Superfamilia imunoglobulinelor
Exemple: ICAM-1, ICAM-2, ICAM-3, V-CAM se leag la integrine
- MadCAM-1 conine att domenii globulare ct i domenii mucin-like
o Este exprimat pe endoteliu mucos i are rol n direcionearea limfocitelor n
mucoas
o Se leag la inegrine prin domeniul Ig-like i la selectine prin domeniul
mucin-like

INFLAMAIA ACUT

- Procesul inflamator acut se declaneaz la cteva minute de la apariia stimulului


- Un proces inflamator local poate avea loc i fr implicarea general a sistemului
imun
- Creterea diametrului vascular permite creterea influxului de snge n zona afectat i
reducerea vitezei circulaiei explic roeaa i cldura
- Are loc o cretere a permeabilitii vasculare permite extravazarea lichidelor i a
leucocitelor se formeaz edem
- Exudarea fluidelor din snge va antrena activarea sistemelor de coagulare, fibrinolitic
i al kininelor
o Bradikinina i fibrinopeptine contribuie la creterea permeabilitii vasculare
- Unele modificri vasculare se datoreaz efectelor indirecte ale anafilatoxinelor (C3a,
C5a) acioneaz asupra mastocitelor i le degranuleaz; contribuie i la secreia de
mediatori nou-formai
- n cteva ore, neutrofilele for fi antrenate n procesul de diapedez prin endoteliul de
la nivelul situsului inflamator; procesul este mprit n 4 etape:
o Rostogolirea sub influena unor factori eliberai la nivel tisular (histamin,
citokine IL-1, TNF), pe suprafaa celulelor endoteliale apar selectine E i P
Acestea se vor lega reversibil la moleculele mucin-like sau sialil Lewis
de pe suprafaa neutrofilelor
Neutrofilele vor fi ncetinite se vor rostogoli pe suprafaa endoteliului
o Activarea
Pe msur ce se rostogolete, neutrofilul este activat de diveri
chemoatractani (ex: PAF platele activating factor, C3a, C5a, C5b67,
chemokine: IL-8, MIP-1 macrophage inflammatory protein)
Legarea chemotractanilor la receptorii neutrofilelor duce la
transmiterea unui semnal activator mediat de proteine G
Acest semnal determin modificarea conformaional a
integrinelor i creterea afinitii lor pentru moleculele de
adeziune aparinnd superfamiliei Ig-nelor
o Fixarea i adeziunea
Legarea integrinelor de mare afinitate (LFA-1) la moleculele aparinnd
superfamiliei Ig-nelor (ICAM-1) face ca adeziunea neutrofilelor la
endoteliu s fie ferm i stabil
o Traversarea peretelui endotelial
Este mediat de chemoatractani, interaciuni ntre integrine i
moleculele din superfamilia Ig-nelor i ali stimuli de migrare
- Dup ce neutrofilele ajung n esut, fagociteaz i elibereaz mediatori care vor
contribuie la amplificarea procesului inflamator
- MIP-1 i MIP-1 atrag n focar macrofagele ajung n 5-6 ore
98
o Acestea sunt activate i secret diveri factori
o Macrofagele activate secret IL-1, IL-6 i TNF- responsabile att pentru
efectele locale (coagulare, creterea permeabilitii vasculare, stimularea
expresiei de molecule de adeziune, stimularea produciei de chemokine) ct i
pentru cele sistemice
TNF- stimuleaz expresia selectinei E
IL-1 stimuleaz expresia ICAM-1 i VCAM-1
IL-1 i TNF- stimuleaz macrofagele i celulele endoteliale inducnd
secreia de chemokine
IFN i TNF- activeaz macrofagele i neutrofilele, stimulnd
fagocitoza i eliberarea de enzime
o Eliberarea acestor factori duce la un influx cresct de celule: limfocite,
neutrofile, monocite, eozinofile, bazofile, mastocite
- Pe lng mastocite, macrofagele reprezint elemente majore n desfurarea
inflamaiei
- Durata i intensitatea procesului inflamator trebuie reglat pentru a controla
distrugerile tisulare i pentru a da posibilitatea interveniei mecanismelor de reparare
o TFG- are rol n limitarea inflamaiei, acumularea i proliferarea fibroblastelor
i depunerea de matrice extracelular

INFLAMAIA ACUT SISTEMIC

- Rspunsul inflamator acut poate fi nsoit de un rspuns sistemic


- IL-1, IL-6 i TNF- acioneaz la nivelul hipotalamusului i determin eliberarea de
prostaglandine (responsabile pentru apariia febrei), iar prin intermediul axei pituitare
stimuleaz secreia de ACTH i corticosteroizi
- Sub aciunea IL-1, IL-6 i TNF- i a corticosteroizilor, la care se adaug LIF
(leukemia inhibitory factor) i OSM (oncostatin M) ficatul produce o cantitate
crescut de proteine de faz acut (fibrinogen, proteina C reactiv, serum amiloid A,
MBP, factori ai complementului)
- TNF- acioneaz asupra macrofagelor i celulelor endoteliale stimulnd secreia de
factori de stimulare a coloniilor CSFs (M-CSF, G-CSF, GM-CSF)
o Aceti factori acioneaz la nivelul mduvei hematogene i determin creterea
produciei de celule necesare procesului inflamator (leucocitoz)

INFLAMAIA CRONIC

- Inflamaia cronic este expresia incapacitii sistemului imun de a elimina antigenul


- Situaiile n care Ag poate s persiste:
o Microorganisme care au dezvoltat mecanisme de evaziune
o Autoimuniti n care Ag self stimuleaz permanent limfocitele
o Celule neoplazice care prolifereaz
- Semnul distinctiv al acestui tip de inflamaie este reprezentat de activarea i
acumularea macrofagelor
o Acestea stimuleaz proliferarea fibroblastelor i producia de colagen se
ajunge la un proces de cicatrizare invalidant fibroz
- Inflamaia cronic conduce la formarea granulomului mas central de macrofage
activate, unele fuzionate, nconjurate de macrofage cu aspect de celul epitelial
o La periferie se gsesc limfocite activate

99
- n zonele extralimfoide teriare unde se desfoar un proces inflamator se observ
apariia de celule endoteliale cu un aspect asemntor celui din HEV
o Regiunile HEV-like prezint molecule de adeziune mucin-like i reprezint
locul unde se va putea produce extravazarea limfocitelor n esutul inflamat
o Astfel de regiuni-HEV-like au fost observate n: artrit reumatoid, boala
Crohn, colita ulcerativ, boala Graves, tiroidita Hashimoto, diabetul zaharat
Aceste afeciuni pot fi tratate prin tintirea acestor regiuni

MEDIATORII INFLAMAIEI

Chemokine

- Chemokinele controleaz n mod selectiv adeziunea, chemotaxia i activarea multor


leucocite, dar intervin i n traficul normal al limfocitelor
- Conin 4 reziduuri de cistein; n funcie de poziia acestora sunt mprite n:
o Grupul C-C cisteinele nu sunt separate prin ali aa
o Grupul C-X-C cisteinele sunt separate de un alt aa
- Legarea chemokinei la receptorul specific conduce la activarea unor proteine mari care
leag GTP-ul
o Se genereaz mesageri secunzi ca cAMP, IP3, Ca i proteine G mici
- Dup legarea chemokinei, leucocitele sufer modificri ale formei, sunt activate
integrinele leucocitare, iar n cazul fagocitelor sunt activate mecanismele oxigen-
dependente de ucidere intracelular i eliberarea coninutului granular
- Sunt descrise 2 grupe de receptori pentru chemokine
o CCR recunosc chemokine CC
o CXCR recunosc chemokine CXC
- Majoritatea receptorilor pentru chemokine leag mai mult dect o singur chemokin
- O chemokin se poate lega la mai muli receptori
- Subseturile Th1 i Th2 pot fi distinse prin seturile de citokine secretate, dar prezint i
profiluri diferite de receptori pentru chemokine
o Th2 prezint CCR3, CCR4
o Th1 prezint CCR5 i CXCR 3

Mediatori enzimatici plasmatici

- Sistemul kininelor sistem ce funcioneaz n cascad, declanat de activarea


factorului Hageman al coagulrii
o Factorul Hageman activeaz pre-kallikreina kallikreina
Aceasta cliveaz kininogenul i rezult bradikinin
o Bradikinina este un peptid vasoactiv
Crete permeabilitatea vascular
Determin vasodilataie
Determin contracia musculaturii netede
Cliveaz C5 n C5a i C5b
- Sistemul de coagulare este un sistem n cascad declanat de leziunea peretelui
vascular i de producerea cantiti mari de trombin
o Trombina acioneaz asupra fibrinogenului solubil i conduce la formarea de
fibrin i fibrinopeptide insolubile cheagul

100
o Fibrinopeptidele acioneaz ca mediatori ai inflamaiei determin creterea
permeabilitii vasculare i chemotaxia neutrofilelor
- Sistemul fibrinolitic sistem n cascad care conduce la nlturarea cheagului
o Produsul final al acestei ci este plasmina format prin conversia
plasminogenului
o Plasmina este o enzim proteolitic care acioneaz asupra cheagului i l
transform n produi de degradare care au aciune chemotactic pentru
neutrofile
o Plasmina activeaz calea clasic a complementului
- Sistemul complement
o Activarea sistemului complement duce la o serie de produi de clivare care
sunt mediatori ai inflamaiei:
Anafilatoxinele determin degranularea mastocitelor i a bazofilelor
C3a, C5a i C5b67 amplific aderena neutrofilelor, a monocitelor la
endoteliu i le faciliteaz diapedeza

Mediatori lipidici ai inflamaiei

- n urma semnalelor primite de mastocite, macrofage, monocite i neutrofile,


fosfolipidele membranare sunt degradate n acid arahidonic i Lyso PAF
- Lyso-PAF este convertit n PAF care determin activarea trombocitelor, chemotaxia
eozinofilelor, activarea i degranularea eozinofilelor i a neutrofilelor
- Acidul arahidonic poate fi mobilizat:
o Pe calea ciclo-oxigenazei prostaglandine i tromboxani
Prostaglandinele determin creterea permeabilitii vasculare,
vasodilataie i chemotaxia neutrofilelor
Tromboxanii determin agregarea plachetar i vasocontricie
o Pe calea lipo-oxigenazei leukotriene
Leukotrienele C4, D4 i E4 determin contracia musculaturii netede
Leukotriena B4 este un chemoatracant puternic pentru neutrofile

Mediatori citokinici ai inflamaiei

- IL-1, IL-6, IL-12, TNF- joac un rol important n declanarea rspunsului inflamator
acut
- IFN contribuie la procesele inflamatorii, n principal prin atragerea i activarea
macrofagelor
- IL-12 induce diferenierea Ly Th1 proinflamatorii
- IFN i TNF joac un rol central n dezvoltarea reaciei inflamatorii cronice
- Ly Th1 activate, celulele NK i Ly Tc secret IFN
- Macrofagele activate secret TNF-
- Toi cei trei membri ai familiei interferonilor pot fi secretai de ctre celulele infectate
viral
o IFN este produs de toate leucocitele
o IFN denumit i interferon fibroblastic poate fi produs de majoritatea
celulelor
o IFN este produs exclusiv de Ly T i celulele NK
IFN are activiti pleiotropice
IFN activeaz macrofagele acestea vor exprima MHC II i vor
amplifica secreia de citokine
101
IFN determin amplificarea transcripiei genei TNF i crete
stabilitatea mARN-ului rezultat
o TNF acioneaz sinergic cu IFN i este responsabil pentru multe dintre
distrugerile tisulare din inflamaia cronic
- n inflamaia cronic apar distrugeri tisulare prin acumularea unui numr mare de
macrofage activate care elibereaz enzime hidrolitice i produi activi ai oxigenului i
azotului

TRAFICUL LIMFOCITAR

- Limfocitele pot traversa nu numai din snge n esuturi, ci i din snge direct n
esuturi limfoide secundare
- Venulele postcapilare ale organelor limfoide (cu excepia splinei) prezint n unele
regiuni celule nalte, cuboidale sunt denumite HEV high endothelium venules
o Aceast zon este utilizat de Ly pentru a trece din torentul circulator n
organul limfoid
o Dezvoltarea i meninerea HEV este influenat de citokine produse ca rspuns
la Ag
o La nivelul HEV se gsete o gam larg de molecule de adeziune:
Selectina E i P (selectine)
GlyCAM-1 i CD34 (mucin-like)
ICAM-1, ICAM-2, ICAM-3, VCAM-1 i MadCAM-1
(imunoglobuline)
o Aceste molecule sunt distribuite selectiv ntre anumite esuturi adresine
vasculare (VA)
- Diferite populaii de limfocite prezint pattern-uri diferite de trafic, impuse de legarea
adresinelor vasculare la anumite molecule de pe suprafaa limfocitar homing
o Moleculele recunoscute de adresine sunt denumite homing receptors
- Ly naive nu prezint vreo preferin pentru vreun anumit organ limfoid secundar i
circul de o manier nediscriminatorie i continu n organism
o Ataarea iniial la HEV este mediat de legarea unor receptori homing de tipul
selectinei-L la molecule GlyCAM-a sau CD34
o Dup ce un astfel de Ly se ntlnete cu un Ag specific se activeaz i se
transform n limfoblast
n timpul acestui proces (48 ore) este reinut n paracortical nu poate
fi detectat n circulaie faza de shut-down
La sfritul acestei faze, Ly efector i cele cu memorie, prsesc
organul limfoid secundar
- Ly efector se direcioneaz ctre endoteliul din zonele inflamatorii
o Prezint o cantitate mare de LFA-1 faciliteaz diapedeza la nivelul esuturilor
extralimfoide teriare
- Ly care sunt destinate pielii vor prezenta nivele sczute de selectin-L, dar nivele
crescute de LFA-1 i CLA care se leag la moleculele ICAM i la selectina-E

MEDICAMENTE ANTI-INFLAMATOARE

Medicamente care inhib/reduc extravazarea leucocitelor

102
- La animale au fost utilizai Ac anti-LFA-1 pentru a preveni acumularea de neutrofile n
esutul inflamat
- Ac anti-ICAM-1 au fost utilizai pentru prevenirea necrozei tisulare dina rsuri
- Combinaie de Ac anti-LFA-1/ICAM-1 a fost utilizat pentru prevenia rejetului
rinichilor alotransplantai

Corticosteroizi

- Sunt derivai din colesterol


- Determin scderea numrului de Ly circulante prin creterea lizei limfocitelor sau
prin alterarea pattern-ului traficului limfocitar
- Sunt lipofilici i pot traversa membrana pentru a se lega la receptorii citosolici
o Complexul receptor-ligand este transportat la nucleu unde se leag la secvene
reglatoare ale ADN-ului determin creterea sau inhibarea transcripiei
Este amplificat transcripia factorului I-kB inhibitorul NF-kB
- Roluri:
o Reduc capacitatea de fagocitoz i ucidere a fagocitelor
o Reduc expresia MHC II
o Scad producia de IL-1
o Stabilizeaz membrana lizozomal
o Reduc chemotaxia

Anti-inflamatoare ne-steroidice (NSAID)

- Inhib calea ciclo-oxigenazelor prin care sunt produse prostaglandinele i tromboxanii

ORGANELE LIMFOIDE SECUNDARE

- Cei mai muli patogeni ptrund n organism la nivelul pielii sau a epiteliului tractului
intestinal sau respirator
- La nivelul organelor limfoide secundare se produce transportul i concentrarea Ag
faciliteaz contactul dintre Ag i Ly specifice
- Organele limfoide secundare sunt:
o Ganglionii limfatici
o Splina
o esutul limfoid asociat mucoaselor (MALT)
o Sistemul imun cutanat
- n toate organele, cu excepia SNC exist agregate de limfocite
- Ganglionii limfatici
o Sunt structuri limfoide amplasate pe traseul vaselor limfatice, care colecteaz
fluidul extracelular din esuturi i l returneaz n snge
Acest lichid se numete limf i circul prin vase limfatice
o Vasele limfatice aferente transport i Ag
o Sistemul limfatic reprezint un mecanism eficient de colectare a Ag
Ganglionii limfatici situai pe traseul vaselor limfatice, scaneaz limfa
pentru identificarea Ag
o Structur
Ganglionul este nconjurat de o capsul fibroas
Este organizat ntr-o arie cortical i o arie medular

103
Cortexul prezint o regiune superficial i una profund paracortex
Cortexul superficial mai este numit zona B-dependent
Conine majoritatea Ly B, organizate n foliculi limfatici, dar i
alte celule foliculare dendritice rol n activarea i selecia Ly B
o Unii foliculi prezint o zon central centru germinal
n aceast zon au loc proliferri intense ale Ly B
Aceti foliculi se numesc secundari
o Foliculii fr centru germinal se numesc primari
Acetia conin n special Ly B mature naive (Ly B mature care nu au
venit n contact cu Ag pentru care exprim receptor)
o Centrii germinali se formeaz n urma stimulrii antigenice a Ly B
Reprezint zone de proliferare intens, de selcie a plasmocitelor ce
secret Ac de mare afinitate i de generare a Ly B de memorie
o Aria paracortical numit i zona T-dependent
Populat de Ly T i celule specializate celule dendritice interdigitate
Majoritatea Ly T sunt CD4+
Ly T naive ptrund n ganglion prin limfaticele aferente sau prin
venulele cu endoteliu nalt (HEV)
Celulele dendritice funcioneaz APC-uri preiau Ag din limfa ce
traverseaz ganglionii i le prezint Ly T CD4+
o Medulara
Conine plasmocite, macrofage i celule dendritice, organizate sub
form de cordoare
Limfocitele nu formeaz jonciuni intercelulare cu celulele vecine i
menin capacitatea de a migra i recircula ntre limf, snge i esuturi
- Splina
o Organ situat n hipocondru stng
o Specializat n colectarea Ag din circulaia sanguin
o Vascularizaia este asigurat de artera splenic
Arteriolele sunt nconjurate de manoane de esut limfoid teci
limfatice periarteriolare conin Ly T
Majoritatea sunt Ly T CD4+
n jurul tecilor sunt dispuse Ly B organizate n foliculi limfatici primari
sau secundari
o Tecile perearteriale i foliculii sunt nconjurate de o coroan de Ly B, Ly T
CD4+ i macrofage formeaz zona marginal
o esutul limfatic splenic formeaz pulpa alb, rspndit n pulpa roie
formeaz majoritatea esutului splenic, este sediul de colectare i distrugere a
eritrocitelor senescente
o Limfocitele i Ag ptund n splin prin sinusoide vasculare
Splina nu conine venule cu endoteliu nalt
o Activarea Ly B se produce n zona marginal, apoi migreaz la nivelul
foliculilor formeaz centrul germinal
- esutul limfoid asociat mucoaselor (MALT)
o Este situat la nivelul mucoaselor tracturilor respiratorii BALT i gastro
intestinal GALT
o Este format din agregate de limfocite i celule accesorii
o GALT include amigdalele (inelul lui Waldayer), apendicele i plcile Payer

104
La nivelul plcilor Peyer, Ly B formeaz foliculi, iar Ly T ocup ariile
dintre acestea
o La nivelul epiteliului intestinal, colectarea Ag este realizat de celulele M
- Sistemul imun cutanat
o Cuprinde limfocitele i celulele accesorii de la nivelul dermului i al
epidermului

INDUCIA I DEZVOLTAREA RSPUNSURILOR IMUNE UMORALE

- Dac Ag ptrund n organism prin snge, acestea ajung ctre splin


- Dac Ag penetreaz prin piele sau mucoase, acestea ajung prin intermediul
limfaticelor ctre ganglionii limfatici regionali
- Dup ce Ag intr n organism, unele sunt preluate de ctre celulele dendritice i sunt
transportate ctre mai mai apropiai ganglioni limfatici
o Un ganglion este capabil s rein peste 90% dintre Ag ptrunse prin
limfaticele aferente
- n ganglion, Ag poate ntlni unul din cele 3 tipuri de APC:
o Celule dendritice interdigitate n paracortex
o Macrofage n tot ganglionul
o Celule foliculare dendritice la nivelul foliculilor limfatici
- Un Ag poate ptrunde n ganglion prin limfaticele aferente sau prin peretele vascular
al venulelor postcapilare
o Ajung n ariile T-dependente (paracortical) unde se gsesc din abunden Ly
T, macrofage i celule dendritice
Celulele dendritice prezint un nivel crescut de MHC II i au prelungiri
foarte lungi care pot lua contact cu circa 200 de Ly Th
- n 1-2 zile, Ag va fi prezentat de ctre macrofage i celulele dendritice Ly Th i se
produce activarea i proliferarea acestora
- Ly B naive din cortical migreaz ctre zona paracortical
o Ly B care au legat Ag cu ajutorul Ig-nelor l vor internaliza i prezenta n MHC
II
o La intrarea n zona T, Ly B prezentatoare de Ag pot interaciona cu Ly Th
formeaz un conjugat B-T
- Ly Th activate furnizeaz semnale necesare pentru activarea Ly B apar focare de
proliferare la marginea zonei T
o Maximum se atinge n 3-4 zile de la contactul cu Ag
o Celulele din aceste focare se difereniaz n plasmocite
- Majoritatea Ac produi n cadrul RI primar sunt secretai de plasmocite care provin din
aceste focare
o Unele Ly B pleac n medular unde se difereniaz n plasmocite cu via
scurt aceste celule sunt responsabile de secreia de IgM i timpul RI primar
- La nivelul splinei, activarea Ly B are loc n zonele periarteriale bogate n Ly T PALS
(periarterial lymphatic sheath)
- La cteva zile dup formarea focarelor de proliferare, unele Ly B activate migreaz
spre cortexul extern ariile B-dependente, n foliculii limfoizi primari, mpreun cu
Th responsabile pentru activarea lor
o Unele Ag ajung la acest nivel i sunt capturate pe suprafaa celulelor foliculare
dendritice (FDC)
Ag pot fi n forma naiv sau complexate cu Ac

105
o Foliculii organelor limfoide secundare sunt singurele localizri unde pot fi
ntlnite FDC
FDC sunt APC speciale
Au prelungiri foarte lungi
Nu proceseaz Ag
Nu au MHC II pe suprafa
Au FcR i receptori pentru complement
Pot reine Ag/complexele Ag-Ac chiar luni de zile
FDC contribuie la organizarea structural a foliculilor primari dar i la
supravieuirea i activarea Ly B n periferie
FDC elibereaz mici particule derivate din membran
Aceste particule sunt acoperite cu complexe imune i sunt
numite icosomi (immune complex coating)
Icosomii pot fi legai i endocitai de Ly B
Ag endocitat este procesat i prezentat Ly Th activate
o Ly B care recunosc Ag prezentat de FDC vor fi induse s exprime molecule de
adeziune LFA-1 i VLA-4
Acest lucru face ca doar Ly B stimulate s fie reinute pe suprafaa FDC
prin interaciunea cu ICAM-1 i VCAM-1
- Dup ce Ly B a primit primul semnal, urmtoarele evenimente depind de subtipul de
Ly Th pe care l ntlnete
o Pe suprafaa Ly Th2 este stimulat expresia CD40L
o Pe suprafaa Ly Th1 este indus expresia FasL
o Dac Ly B ntlnete un Ly Th1 se produce legarea FasL-Fas este indus
apoptoza Ly B i rspunsul imun umoral este inhibat
o Fac Ly B ntlnete un Ly Th2 se produce legarea CD40-CD40L - Ly B este
activat
Chiar dac Ly B ajunge s exprime Fas (n urma activrii), Ly Th2 nu
exprim FasL i nu pot ucide Ly B
- Formarea conjugatelor T-B determin proliferarea ambelor tipuri de Ly Th
o Dup primirea semnalului co-activator prin molecula CD40, Ly B exprim noi
receptori pentru citokine devin receptive la IL-4 (secretat de Th2) astfel
Ly B primesc al treilea semnal activator
- Dup 4 zile de la contactul cu Ag, Ly B i Ly Th activate ncep s exprime CXCR5
receptor pentru chemokina BLC
o Ly B i T migreaz ctre foliculii primari din cortexul extern
La acest nivel Ly B se activeaz sau intr n apoptoz
- Ly B activate ncep proliferarea n interiorul foliculilor limfoizi primari
o Procesarea este foarte rapid i necesit prezena continu a Ag, contactul
CD40-CD40L i a citokinelor Th2
- Ly B care prolifereaz formeaz n 7-10 zile de la contactul cu Ag-nul aa numitul
centru germial foliculul primar se transform n folicul secundar
o Formarea centrului germinal depinde de interaciunea Ly B cu Ly Th i
necesit interaciunea CD40-CD40L
- Ly B care iau parte la RI se vor numi centroblati celule cu talie mare, citoplasm
abundent, cromatin difuz i care nu au Ig pe suprafa
o Centroblatii disloc celulele B care nu particip la RI i le mping spre
periferia foliculului formeaz mantaua folicular

106
- Dup 9-12 zile de la contactul cu Ag, centroblatii se deplaseaz ctre marginea
foliculului i formeaz zona ntunecat la acest nivel are loc maturaia de afinitate
prin hipermutaie somatic
- Centroblatii din zona ntunecat se divid i dau natere unor celule care nu se mai pot
divide i se maturizeaz
o Aceste celule vor fi mai mici dect blatii, prezint Ig pe suprafa i se dispun
la periferia foliculului formeaz zona clar
Ly B din zona clar se numesc centrocite vin n contact cu FDC i cu
Ag
La nivelul zonei clare a centrului germinal celulele care au suferit
hipermutaii sunt selectate pozitiv sau negatic i are loc comutarea de
clas
- Centrocitele care leag Ag-nul prezentat de FDC n zona clar, se difereniaz n
celule B cu memorie (celule mici) i plasmablati (celule mari)
o Plasmablatii prsesc centrul germinal i migreaz ctre zona medular se
transform n plasmocite i secret Ac
o Unele celule cu memorie rmn n apropierea centrului germinal, altele pleac
din ganglion prin vasele limfatice eferente
- Majoritatea centrocitelor nu pot lega Ag sau au Ig cu o afinitate mic pentru Ag
acestea mor prin apoptoz n zona bazal a zonei clare
o Aceste celule vor fi fagocitate de ctre macrofage numite copri-tingibili
- Celulele care au suferit maturaie de afinitate vor fi selectate i vor prsi centrul
germinal i vor migra ctre zonele extrafoliculare, ndreptndu-se spre medular
o Unele se difereniaz n plasmocite i secret Ac cu un alt isotip dect IgM
- Activitatea proliferativ de la nivelul centrului germinal persist aproximativ 21 de
zile de la contactul cu Ag
- n RI secundar formarea centrului germinal este mult mai accelerat
o Sunt implicate Ly B cu memorie care au posibilitatea unui homing mult mai
rapid
o Plasmocitele deriv din Ly B cu memorie care deja au suferit comutri de clas
i vor secreta IgG

107
IMUNITATEA ANTIPATOGEN

- Patogenicitatea = capacitatea microorganismului de a produce leziuni la nivelul gazdei


- Virulena = capacitatea relativ de a determina leziuni ale gazdei
- Eliminarea patogenului = acesta nu se poate stabili n organism
- Infecia = patogenul se instaleaz n organism
o Consecinele infeciei pot fi:
Eliminarea
Ca urmare a aciunii mecanismelor de aprare sau ca urmare a
interveniei terapeutice
Comensalizarea sau colonizarea
Conduc rareori la o afeciune simptomatic
Colonizarea instalarea patogenilor la nivelul gazdei fr s
determine simptome
Urmrile colonizrii pot fi elminarea, persistena sau boala
Persistena
Patogenii se instaleaz n organism dar nu pot fi eradicai
Boala
- Patogenicitatea i virulena sunt caracteristici care in i de statusul sistemului imun
o n cazul sistemelor imunocompetente infecia este posibil doar dac patogenul
este suficient de virulent
o La organismele imunocompromise, infecia poate apare i ca urmare a aciunii
unor patogeni cu virulen sczut oportuniti
- Microorganismele comensale nu sunt, n condiii de normalitate, patogene
o Unele au funcii importante pentru organism producerea de K la nivelul
tubului digestiv
- 6 tipuri de patogeni
o Bacterii extracelulare
o Bacterii intracelulare
o Virusuri
o Parazii
o Fungi
o Prioni

IMUNITATEA FA DE BACTERII EXTRACELULARE

- Implic imunitatae nnscut dar i mecanismele imunitii umorale i celulare ale


imunitii dobndite
- Bacteriile ncearc s se acumuleze n esutul conjunctiv, n lumentul tractului
respirator, urogenital i gastrointestinal, precum i n snge
o Capacitatea de a secreta produi cu capacitate de penetrare sau clivare le
permite s intre n esuturile subiacente
- Patogenicitatea bacteriilor este determinat de toxine, exotoxine sau endotoxine
- Majoritatatea afeciunilor sunt produse de:

108
o Cocci Gram-pozitivi stafilococi, streptococi
o Cocci Gram-negativi meningogoci
o Bacili Gram-pozitivi cianobacterii, clostridii
o Bacili Gram-negativi escherichia
o Spirochete Gram-negative

Mecanisme de aprare

Imunitatea specific

a. RI umoral

- Bacteriile extracelulare prezint att Ag T dependente ct i T independente


- Pilii bacterieni se leag la glicoproteinele membranare ntr-o manier lectin-like
modalitate prin care patogenii evit ndeprtarea
o Pilii difer de la o specie bacterian la alt specificiti diferite
- Ac se pot lega la pili i pot bloca fizic aceste componente mpiedic ataarea
microbilor la celulele organismului
- Ac pot lega, bloca i ndeprta exotoxinele - antitoxine
o Exotoxinele difer de la specie la specie
- Ac au rol i de opsonin ajut la fagocitare

b. Rspunsul imun celular Ly Th

- Dup activare Ly Th se difereniaz n Th1 sau Th2


- Ly Th1 sunt considerate pro-inflamatorii favorizeaz activarea macrofagelor i Ly Tc
- Majoritatea bacteriilor extracelulare induc rspunsuri de tip Th2 favorizeaz activare
Ly B
- Spirochetele induc un rspuns combinat Th1/Th2

Aprarea nespecific

a. Sistemul complement

- Activarea complementului pn la formarea MAC duce la distrugerea bacteriilor


o Calea alternativ este activat de ctre peptidoglicani (Gram-pozitivi) sau LPS
(Gram-negativi)
- Bacteriile G- sunt mai sensibile la aciunea complementului
- Pacienii deficieni n componente ale cii post-C3 nu pot supravieui infeciei cu
Neisseria

b. Mastocite

- Rol preponderent mpotriva bacteriilor care exprim molecule de adeziune FimH


- Mastocitele din MALT pot s fagociteze dar secret i mediatori ai inflamaiei
(histamin, IL-6, TNF, LT4)
o IL-8 i LT4 sunt factori chemotactici puternici pentru neutrofile
o TNF amplific potenialul microbicid al neutrofilelor

Mecanisme de evaziune
109
Mecanism imun intit Mecanism utilizat
Anticorpi - Alterarea expresiei de molecule de
suprafa
- Secreia de proteaz anti-Ig
Fagocitoza - Blocarea legrii PRR i a
receptorilor pentru complement la
capsula bacterian
- Injectarea de proteine bacteriene
care altereaz fuziunea fagocitelor
i funcia acestora
Complement - Absena proteinelor la care se
poate lega C3b
- Degradarea C3b
- Blocarea formrii convertazei C3 a
cii alterbative
- Blocarea cii post-C3
- Eliminarea de pe suprafa a
complexelor imune sau a MAC
parial format
- Alterarea expresiei de proteine
reglatorii ale complementului i de
receptori pentru complement
- Inactivarea anafilatoxinelor
- Producerea de Ac care blocheaz
legarea C3b
APC - Blocheaz maturarea i migrarea
DC

IMUNITATEA FA DE BACTERII INTRACELULARE

- Bacteriile intracelulare scap atacului Ac-ilor, sistemului complement i al fagocitelor


- Ptrund n celulele organismului gazd
o Pot intra i n macrofage
- Unele nu pot supravieui n afara celulei gazd

Mecanisme de aprare

Fagocitele

- Neutrofilele
o Celulele infectate secret factori chemotactici care atrag neutrofilele
o Acestea fagociteaz bacteriile eliberate din celulele infectate
o Celulele carora bacteriile le-au indus apoptoza sunt fragmentate n corpi
apoptotici care vor fi fagocitai
- Macrofagele
o Intr n aciune cnd neutrofilele nu au reuit s fac fa invaziei bacteriene
o Internalizarea patogenilor se face prin fagocitoz sau endocitoz

110

Stimularae receptorilor TLR duce la activarea NF-kB determin
mecanisme oxigen dependente de ucidere intracelular sinteza de
produi activi ai oxigenului i oxid nitric
o Macrofagele activate produc IL-12 contribuie la diferenierea Ly Th1
Acestea secret IFN stimul pentru macrofage care duce la
hiperactivarea lor

- Limfocitele Tc
o Dac bacteriile se replic n citosol, vor urma calea de procesare care conduc la
prezentarea de peptide asociate cu moleculele MHC I vor fi recunoscute de
Ly Tc
o Uneori, produse rezultate din degradarea endosomal sau produi secretai de
ctre bacterie ajung n citosol i sunt prezentai n MHC I cross-prezentare
o Uciderea intelor nu depinde de perforine sau sistemul Fas-FasL
o Uciderea are loc prin secreia de granulolizin i citokine pro-inflamatorii
IFN i TNF atrag celule efectorii, dar au i efect anti-bacterian direct
- Ly Tc neconvenionale
o Unele bacterii intracelulare sunt procesate n peptide care conin N-formi-
metionin sunt prezentate n MHC I non-clasice
- Ly T
o Recunosc un numr mic de molecule pirofosfat-like specificitate pentru
unele bacterii
- Celulele NK
o Macrofagele activate secret IL-12 activeaz Th i celulele NK
o NK secret IFN determin hiperactivarea macrofagelor i diferenierea Th1
- Ly Th
o Limfocite eseniale pentru activarea celorlali efectori celulari
o Prin intermediul IL-2 susin diferenierea Ly Tc i duc la hiperactivarea
macrofagelor
o Macrofagele activate secret IL-12 i IL-18 care acioneaz sinergic pentru a
susine rspunsul eficient al Th1
o IL-27 necesar pentru iniierea rspunsurilor Th1

Formarea de granuloame

- Dac patogenii nu pot fi ucii i ndeprtai se ncearc izolarea lor


- Macrofagele hiperactivatea fuzioneaz i formeaz celule gigant
o La interior se gsesc Ly T CD4+
o La exterior se gsesc Ly T CD8+
- Stratul extern al granulomului poate deveni fibrotic sau se poate calcifica
o Celulele din interior mor prin necroz
o Patogenii pot supravieui n stare dormant
- Citokinele Th1 sunt eseniale pentru formarea granulomului
- IFN menine starea de hiperactivare a macrofagelor
- Citokinele de tip Th2 (IL-4, IL-10) joac rol n rezoluia granulomului
- Persistena granulomului atest cronicizarea infeciei
o Dac pereii sunt distrui, este posibil eliberarea patogenilor dormani

Rspunsul imun umoral

111
- n unele situaii, Ac pot bloca accesul bacteriilor intracelulare la receptorii de pe
suprafaa celulelor int, sau pot fi opsonizate devin inta atacului SC
- Ac pot aciunea inclusiv n interiorul celulei

Mecanisme de evaziune

- Evitarea distrugerii intracelulare


- Evitarea distrugerii n interiorul fagolizozomului
- Evitarea Ly T
- Evitarea Ac-ilor

Imunitatea antiviral

- Virusurile sunt patogeni intracelulari se pot reproduce doar n celulele pe care le


infecteaz
- Virusurile pot fi:
o Citopatice produc leziuni celulei infectate
o Ne-citopatice
- Virusurile mai puin virulente sunt mai greu de ndeprtat de organism
- Unele genomuri virale conin gene care se suprapun
- Multe dintre genele virale sunt dedicate unor proteine necesare pentru replicarea
viral, dar majoritatea sunt dedicate unor produi care au ca rol subminarea
rspunsului imun al gazdei sau reglarea procesului apoptotic
- Cu ct virusul este mai mare i replicarea este mai lent, cu att mecanismele de
blocare a rspunsului imun sunt mai complexe
- Virusurile pot persista o perioad ndelungat n organism n stare latent
o n condiiile alterrii imunocompetenei gazdei se reactiveaz i genereaz
infecie
- Categorie special de virusuri latente oncovirusurile
o Virusuri ADN
HPV human papillomavirus
EBV Epstein-Barr virus
HepB hepatita B
o Virusuri ARN
HTLV human T leukemia virus
HIV conduce la maligniti n mod indirect prin afectarea Ly Th
- Rolul proeminent n infecia viral revine Ly Tc i celulelor NK
- Apararea gazdei vizeaz ncetinirea replicrii virale i apoi eradicarea infeciei
- Interferonii reprezint un element precoce al mecanismelor de aprare
IFN produs de leucocite
IFN produs de o gam larg de celule
IFN produs de Ly T i NK
o Au efect antiviral indirect interfer cu celulele nvecinate celulei infectate la
nivelul procesului de transcripie i translaie
o IFN i IFN induc sinteza enzimei PKR
Aceasta este activat de dsARN se autofosforileaz

112
Fosforileaz eIF2 factor necesar pentru transcripia i translaia
proteinelor virale
o IFN amplific expresia moleculelor MHC I i a celor care compun
proteazomul imun crete capacitatea de prezentare i procesare a peptidelor
virale ctre Ly Tc
o IFN i IFN stimuleaz celulele NK
Celulele NK pot s ucid celule infectate viral i celule tumorale fr o
sensibilizare prealabil
o Cnd patogenul este opsonizat cu Ac, eliminarea se face prin ADCC
citotoxicitate dependent de Ac
o Celulele NK pot secreta IFN stimuleaz macrofagele i Ly T
- Un alt element al aprrii nespecifice este sistemul complement
o Proteinele SC pot produce leziuni ale anvelopei anumitor virusuri
- Sistemul imun nespecific este capabil doar s ncetineasc progresia infeciei virale
sau s o limiteze
- n aprarea anti-viral intervin celule care exprim receptori ai aprrii nespecifice
n special TLR
o TLR3 leag ARN dublu catenar viral
o TLR7 i TLR8 leag ARN viral monocatenar bogat n GU
o TLR9 leag ADN viral
- Macrofagele i DC stimulate prin receptorii TLR secret IFN, IL-6, IL-12 i TNF
o Aceste citokine stimuleaz capacitatea de a lupta mpotriva microorganismelor
- Imunitatea umoral are rol redus
o Unii Ac se leag la virusuri i le mpiedic s intre n celula int sau pot bloca
i lega enzime virale Ac neutralizani
o Prin legarea Ac-ilor se poate ajunge la aglutinarae particulelor virale i la
activarea complementului
o Opsonizarea virusurilor le face susceptibile aciunii celulelor NK i fagocitelor
Ac se leag i la celulele infectate viral celule sefl alterat
- Diferitele tipuri de virusuri induc formarea unor isotipuri diferite de Ac
o n cazul virusului gripal se produc Ac de clas A i doar secundar Ac G sau M
o n cazul virusurilor care se rspndesc n organism pe cale hematogen sunt
necesari Ac de clas A dar i Ac circulani
- Rspunsurile imune umorale nu pot eradica infecia viral
- Rspunsurile imune specifice antivirale sunt cele celulare implic Ly Th i Tc
- Uciderea celulelor infectate viral este realizat de Ly T CD8+, difereniate n stadiul de
efectori (CTL)
o Aceste Ly apar precoce, naintea Ac neutralizani
o CTL recunosc complexe MHC I/peptid antigenic aceti efectori sunt capabili
s elimine majoritatea celulelor infectate viral
- Activarea i diferenierea Ly Tc depinde de Ly Th
o Ly CD4+ reprezint o surs major de citokine cu aciune antiviral sau
necesare pentru rspunsul de tip pro-inflamator
o Ly CD4+ eficieniaz i rspunsurile imune umorale inducerea de comutri
de clas adecvate i a maturaiei de afinitate

Mecanisme de evaziune

- Latena

113
o Aceast stare i permite virusului s supravieuieasc i s scape de atacul imun
Se activeaz n cazul unei imunodeficiene
o Latena se realizeaz prin inactivarea transcripiei genelor virale i expresia de
LAT (latency-associated transcripts)
- Variaia antigenic
o Modificri rapide, aleatorii i de mic amploare drift antigenic
n cazul virusului gripal se modific hemaglutinina i neuroaminidaza
molecule proteice de suprafa, tina Ac-ilor neutralizani
Virusurile mutante se replic preferenial
o Modificri de mare anvergur shift antigenic
Frecvene mai mici
Cnd o celul este infectat cu 2 specii diferite de virus gripal, acestea
pot suferi un fenomen de reasortare
Shift-ul antigenic este favorizat n cazul virusurilor care infecteaz o
gazd intermediar nainte s infecteze organismul uman
- Interferena cu prezentarea n cupa MHC I
o Unele virusuri infecteaz celule care exprim cantiti foarte sczute de MHC I
sunt prezentate puine antigene virale
o Alte virusuri sintetizeaz proteine care nu pot fi procesate
o Blocarea sintezei moleculei MHC I
o Proteina multifuncional Nef produs de HIV interacioneaz cu moleculele
MHC I clasice i cu clathrina i foreaz internalizarea i degradarea MHC I
- Evaziunea atacului celulelor NK
o CMV, poxvirusurile i herpesvirusurile sintetizeaz structuri MHC-I like care
se leag la receptorii inhibitori ai celulei NK
- Interferena cu prezentarea n cupa MHC II
o Unele virusuri sunt greu prelucrate de APC-uri
o Sinteza unor proteine care deturneaz MHC II ctre proteazom
o Competiia cu lanul Li
- Interferena cu celulele dendritice
o Infectarea precursorilor DC i mpiedicarea diferenierii acestora n DC mature
o Uciderea DC
o Blocarea expresiei de molecule co-stimulatorii anergie
o Celulele infectate exprim FasL determin apoptoza celulelor T care exprim
Fas
- Evitarea Ac-ilor
o Expresia de receptori Fc pe suprafaa celulelor infectate
Aceti receptori intercepteaz complexele virus-Ac i fragmentul Fc al
Ac-ilor nu este disponibil pentru ADCC sau activarea complementului
- Evitarea sistemului complement
o Unele virusuri exprim proteine similare celor implicate n reglarea sistemului
complement sau pot altera expresia acestor molecule
- Contracararea statusului antiviral
o Inhibarea secreiei de IFN
o Producerea de proteine care blocheaz activarea ARN-azelor
- Inactivarea celulelor CD4+
o Degradarea moleculelor CD4 nou sintetizate la nivelul proteasomului
- Influenarea apoptozei celulelor gazd

114
o Pentru virus e important ca celula gazd s nu moar prin apoptoz nainte s
se produc replicarea
o Adenovirusul produce proteine E3 care se combin i formeaz RID (receptor
internalization and degradation)
RID nltur de pe suprafaa celulei gazd moleculele Fas i TNFR
o Poxvirusurile exprim omologi ai TNFR
o EBV produce un omolog al bcl-2 care blocheaz apoptoza
- Manipularea ciclului celular
o Proteina p53 duce la stoparea progresiei n ciclul celular i apoptoz
o Proteina Rb blocheaz diviziunea celulelor cu anormaliti genetice
o Virusurile atac aceste proteine
Proteina E1A se leag la p53 i la Rb i determin apoptoza
- Interferena cu citokinele
o Sunt intite citokinele responsabile pentru recrutarea i activarea celulelor cu
rol n rspunsul imun anti-viral interferonii, IL-1, IL-12
o EBV altereaz diferenierea n Th1 inhib producia de IL-12

IMUNITATEA ANTI-PARAZII

- Paraziii pot fi:


o Monocelulari protozoarele comportament asemntor celui bacterian sau
viral
o Multicelulari helmini
- Este implicat imunitatea nnscut dar i cea adaptativ
- Protozoarele
o Pot exista n forma metabolic activ trofozoit sau n forma dormant chist
o Activarea SC i fagocitoza sunt principalele arme ale aprrii nespecifice
o mpotriva amoeba, Plasmodium, Trypanosoma sunt formai Ac
o Rspunsul imun celular este mai important n cazul Leishmania i Toxoplasma
- Helminii
o Necesit un rspuns complex
o Genereaz infecii cronice
o Celulele implicate sunt eozinofilele i mastocitele
o IgE pot declana rspunsuri de tip ADCC ale eozinofilelor

Mecanisme de evaziune

- Specificitatea limfocitelor
o Dezvoltare multi-stadial
o Ciclu de via care implic mai multe gazde
o Liza limfocitelor
- Anticorpi
o Prezentarea de molecule de suprafa care blocheaz Ac anti-parazii
o Penetrarea n macrofage
o Variaie antigenic
- Distrugerea fagolizozomului
o Blocheaz fuziunea fagozomului cu lizozomul
o Evadarea din fagozom n citoplasm

115
o Rezistena fa de enzime lizozomale
o Liza granulocitelor i macrofagelor aflate n repaus
- Complement
o Blocarea activrii cii alternative
o Expresia de molecule reglatoare
o Degradarea componentelor complementului ataate i eliberarea MAC
o Activarea complementului pn la epuizare
- Ly T
o Inducerea apoptozei accelerate a Ly T cu memorie
o Secreia de peptide imunosupresoare
- APC
o Interferena cu maturarea DC i activarea macrofagelor
o Activarea secreiei de IL-10 de ctre Ly T i inhibarea expresiei MHC II
o Scderea produciei IL-12 i a diferenierii Th1

IMUNITATEA ANTI-FUNGI

- Fungii sunt microorganisme:


o Unicelulare candida
o Multicelulare i filamentoase aspergillus
- Pereii nu conin peptidoglicani, acid teichoic i lipopolizaharide
- Conin ergosterol, nu i colesterol
- Determin leziuni tisulare prin eliberarea de enzime proteolitice induc rspunsuri
inflamatorii
- Cel mai ntlnit fung Candida
o n condiiile unei imuniti normale se comport ca un comensal
- Histoplasma capsulatum supravieuieste n interiorul macrofagelor patogen
intracelular
o Rol important Ly Th17
- Infeciile cauzate de fungi = micoze

Mecanisme de evaziune

- Recunoaterea PRR
o Nu prezint LPS sau peptidoglicani la nivelul peretelui
- Specificitatea Ly T i B
o Ciclu de via multistadial
- Complement
o Blocarea accesului prin intermediul peretelui celular
- Fagocitoza
o Blocarea prin intermediul capsulei
- Funcia Ly B i T
o Devierea ctre Th2
o Blocheaz activarea NF-kB
o Cresc producia de NO scade proliferarea limfocitar
o Inhib migrarea neutrofilelor
o Scad sinteza de IL-12 i expresia B7 de ctre monocite
o Activeaz Ly T reglatorii

116
o Inhib rspunsurile Th1 i Th2 prin producerea de melanin
o Blocheaz producia TNF

117